Type 1 dendritiske celler (DC'er) i nyresygdomme

for flere oplysninger:ali.ma@wecistanche.com

Konventionelle type 1 dendritiske celler (cDC1) i humane nyresygdomme: Klinisk-patologiske korrelationer

Titi Chen, Qi Cao & et al.

ABSTRAKT

Baggrund: Type 1 dendritiske celler(cDC1) er en undergruppe af konventionelle DC'er, hvis mest anerkendte funktion er krydspræsentation til CD8 plus T-celler. Vi gennemførte denne undersøgelse for at undersøge antallet og placeringen afType 1 dendritiske celler(cDC1'er) i forskellige menneskernyresygdommesamt deres korrelation med klinikopatologiske træk og CD8 T-celler.

Metoder: Vi analyserede 135nyrebiopsiprøver.Nyresygdommeinkluderet: akut tubulær nekrose (ATN), akut interstitiel nefritis (AIN), proliferativ glomerulonefritis (GN) (IgA nefropati, lupus nefritis, pauci-immun GN, anti-GBM sygdom), ikke-proliferativ GN (minimal forandringssygdom, membranøs membran) ), og diabetisk nefropati. Indirekte immunfluorescensfarvning blev brugt til at kvantificere cDC1'er (Type 1 dendritiske celler), CD1ct DC'er og CD8 plus T-celler.

Resultater:Type 1 dendritiske celler(cDC1'er) var sjældent til stede i normalnyrer. Deres antal steg signifikant i ATN og proliferativ GN, forholdsmæssigt meget mere end CD1ct DC'er. cDC1s (Type 1 dendritiske celler)blev hovedsageligt fundet i interstitium, undtagen i lupus nefritis, pauci-immun GN og anti-GBM sygdom, hvor de var fremtrædende i glomeruli og peri-glomerulære regioner. Antallet af cDC1'er (Type 1 dendritiske celler)korreleret med sygdoms sværhedsgrad i ATN, antal halvmåner i pauci-immun GN, interstitiel fibrose ved lgA nefropati og lupus nefritis, samt prognose ved IgA nefropati. Antallet af CD8 plus T-celler steg også signifikant under disse forhold og cDC1 (Type 1 dendritiske celler)nummer korreleret med CD8 plus Tcell nummer i lupus nefritis og pauci-immun GN, med mange af dem tæt co-lokaliseret. Konklusioner: cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal korreleret med forskellige klinikopatologiske træk og prognose, hvilket afspejler en mulig rolle i disse tilstande. Deres tilknytning til CD8 plus T-celler antyder en kombineret mekanisme i overensstemmelse med resultaterne i dyremodeller.

INTRODUKTION

Dendritiske celler(DC'er) er de centrale orkestratorer af effektiv immunitet. Disse celler er heterogene og kan opdeles i forskellige undergrupper baseret på deres fænotype og funktion. Dendritiske celler kan bredt kategoriseres i plasmacytoide DC'er (Dendritiske celler)(pDC) og konventionelle DC'er (Dendritiske celler)(cDC).cDC består af to store undergrupper: cDC1 (Type 1 dendritiske celler)(CD141* DCs (Dendritiske celler) hos mennesker og CD103t eller CD8ot DCs hos gnavere) og cDC2(CD1c DCs hos mennesker og CD1 lbt DCs hos gnavere) (1).cDC1 (Type 1 dendritiske celler)blev først opdaget i mus og derefter hos mennesker og er karakteriseret ved deres overlegne evne til at fagocytere nekrotiske celler gennem skadesassocieret molekylært mønster (DAMP) receptor Clec9A og til at krydspræsentere til CD8 plus T-celler. I modsætning hertil er cDC2'er effektive CD4* T-celleaktivatorer, men dårligere ved CD8t T-celleaktivering (2).

DC'er (Dendritiske celler)er blevet undersøgt hos menneskernyre sygdomog deres antal viste sig at være øget ved glomerulonephritis(GN)(3, 4). Efter opdagelsen af ​​cDCl har akkumulerende dyreforsøg vist, at de spiller en central rolle inyresygdomme, såsom i adriamycin nefropati og halvmåne GN, gennem interaktion med T-celler (5-8). Imidlertid mangler sådanne undersøgelser hos menneskernyre sygdom, med kun én undersøgelse, der viser øget antal cDC'er (KonventionelDendritiske celler)i GN (9). Vi udførte denne undersøgelse for at give analyse af de centrale cDC-undersæt, cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og cDC2 i en bred vifte af menneskernyresygdommeherunder ikke-glomerulære sygdomme [akut tubulær nekrose (ATN), akut interstitiel nefritis(AIN)], proliferativ GN (IgA nefropati, lupus nefritis, pauci-immun GN, anti-GBM sygdom), ikke-proliferativ GN (minimal forandringssygdom ( MCD), membranøs nefropati) og diabetisk nefropati. Vi fandt, at cDC er signifikant korreleret med patologiske træk, herunder sværhedsgraden af ​​ATN, halvmånedannelse i pauci-immun GN og interstitiel fibrose i immunmedieret GN. Derudover er det i overensstemmelse med deres specialiserede evne til at aktivere CD8 plus T-celler i dyr modeller, viste vi også deres korrelation med CD8t T-celler i disse prøver. Disse resultater giver en impuls til at udforske nye terapeutiske mål, der manipulerer disse celler til behandling afnyresygdomme.

Klik til Cistanche-stamme for nyresygdom

MATERIALER OG METODER

Patienter og vævsprøver

Undersøgelsen blev udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen og blev godkendt af Human Research Ethics Committee i Western Sydney Local Health District. Der blev indhentet informeret patientsamtykke. Vi analyserede 176 frosne diagnostiskenyrebiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 år gammel) mellem 18. juni 2016 til 30. juni 2017 i Westmead Hospital, Sydney, Australien.Nyrevæv blev lynfrosset i OCTcompound (Tissue-Tek Sakura, USA) og opbevaret ved -80 grad. Enogfyrre(41) prøver havde dårlig vævskvalitet og blev udelukket fra undersøgelsen. Baseline patientdata inklusive alder, køn, estimeret glomerulær filtrationshastighed (eGFR) og graden af ​​proteinuri blev indsamlet på tidspunktet fornyrebiopsi.eGFR blev beregnet ved hjælp af CKD-EPI-formlen. Diagnosen blev stillet af en nyrepatolog baseret på lys, immunfluorescens(IF) og elektronmikroskopi samt klinisk historie.

En række sygdomme blev analyseret, herunder ikke-glomerulære sygdomme (ATN, AIN), proliferativ GN (IgA nefropati, lupus nefritis, pauci-immun GN, anti-GBM sygdom), ikke-proliferativ GN (MCD, membranøs nefropati) og diabetisk nefropati. For ATN inkluderede vi kun ikke-septiske tilfælde, da septisk ATN har forskellig patofysiologi. ATN blev yderligere kategoriseret i mild-moderat sygdom (defineret som<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 procent corticale tubuli viser skade). IgA nefropati blev klassificeret i henhold til Oxford MEST score (M mesangial hypercellularitet, E endocapillær hypercellularitet, S segmental glomerulosclerosis, T tubulær atrofi/interstitiel fibrose). Vi analyserede også korrelationen mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Lupus nefritis blev yderligere klassificeret i 2 grupper i henhold til niveauet af interstitiel fibrose (<25%,>=25 procent kortikal interstitiel involvering). Pauci-immun GN blev klassificeret i 2 grupper i henhold til procentdelen af ​​glomeruli med halvmåner (<40%,>=40 procent).

Som normaltnyrekontroller brugte vi 5 normale nyrebark fra nefrektomiprøver samt 2 donornyrerikke egnet til transplantation. Til tumornephrektomier blev prøver udtaget fra polen modsat tumoren og mindst 5 cm fra tumormarginen. Disse væv havde et normalt makroskopisk udseende. Mikroskopisk ingen af ​​dissenyreprøver havde tegn på signifikant glomerulær eller tubulointerstitiel inflammation eller skade. Vi brugte normalt voksent donor miltvæv som en positiv kontrol til test af antistoffer.

Immunfluorescensfarvning

Serielle kryostatsektioner blev skåret ved 5 μm og anbragt på Superfrost Ultra Plus-glas (Thermo Scientific, USA). Slides blev gemt ved -80 grad. Vævssektioner blev fikseret med 100 procent methanol ved -20 grad i 10 minutter og derefter lufttørret. Indirekte immunfluorescensfarvning blev udført under anvendelse af følgende metode: vævssnit blev vasket i DPBS (Lonza, USA) og blokeret med 2 procent bovint serumalbumin (Sigma-Aldrich, USA) i 15 minutter; derefter blev de farvet med primært antistof ved 4 grader natten over efterfulgt af sekundære antistoffer i 40 minutter ved stuetemperatur. Tabel 1 er en liste over anvendte primære og sekundære antistoffer og deres fortyndinger. Kerner blev farvet med DAPI(1:250,000, ThermoFisher, USA), før prøverne blev monteret på dækglas med fluorescensmonteringsmedium (Dako, USA). Ikke-specifik farvning og krydsreaktivitet mellem forskellige primære og sekundære antistoffer blev kontrolleret og udelukket.

TABEL 1|Primære og sekundære antistoffer anvendt i undersøgelsen

cDCl'er blev identificeret ved farvning for markør Clec9A. Hos mennesker er Clec9A-ekspression stærkt begrænset til cDCl'er i blod og væv (10, 11). For at bekræfte dette inyrer, udførte vi dobbeltfarvning af Clec9A og HLA-DRB1 samt Clec9A og CD1lc under udvalgte normale og syge tilstande. De fleste, hvis ikke alle, Clec9A overlappede med HLA-DRB1 (Supplerende Figur 1) og CD1lc (Supplerende Figur 2).

FIGUR 1|Normal nyre cDC1 (Type 1 dendritiske celler), cDC2 og CD8 plus T-celler.

DC'er (Dendritiske celler)var sjældent til stede i normalennyrerog cDC2-tal var ca. 7 gange antallet af cDC1 (Type 1 dendritiske celler). (Søjle=100 mm).

RESULTATER

Patientens baseline karakteristika.Baseline-karakteristika for patienter i kontrol- og sygdomskohorter er opsummeret i tabel 2. I alt 135 patienter blev inkluderet i undersøgelsen. En bred vifte afnyresygdommeblev analyseret, herunder ikke-glomerulære sygdomme [ATN (22), AIN (10)], proliferativ GN[gA nefropati (44), lupus nefritis (12), pauci-immun GN(12), anti-GBM sygdom (4)] , ikke-proliferativ GN[MCD(5), membranøs nefropati(5)] og diabetisk nefropati (21). Der var flere hunner i lupus nefritis-gruppen, og deres alder havde en tendens til at være yngre sammenlignet med andrenyresygdomme, hvilket er i overensstemmelse med litteraturen(12). Patienter med pauci-immun GN og anti-GBM sygdom havde den laveste eGFR. Proteinuri-niveauet var det højeste ved MCD og membranøs nefropati.

TABEL 2|Baseline egenskaber.

Antal og placering af DC'er (Dendritiske celler)i kontrol og sygdom.cDCl'er var sjældent til stede i normalnyrer(Figur 1) og cDC2-tal var ca. 7 gange antallet af cDC1 (Type 1 dendritiske celler).Antallet af cDC1 (Type 1 dendritiske celler)steg signifikant i ATN og proliferativ GN (figur 2A), mens deres antal forblev uændret sammenlignet med kontrol i AIN, membranøs nefropati, MCD og diabetisk nefropati (Supplerende figur 3). Antallet af cDC2 steg også signifikant i ATN og proliferativ GN (figur 2B). Der var en reduktion i cDC2 (Type 2 dendritiske celler)/cDC1 (Type 1 dendritiske celler)forhold, der indikerer cDCl (Type 1 dendritiske celler)steg proportionalt mere end cDC2 (figur 2C).

FIGUR 2|Antal cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og cDC2, cDC2/cDC1-forhold og CD8 plus T-celle i kontrol og udvalgte sygdomme.

P-værdi beregnes for hver sygdom versus kontrol. Begge cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og cDC2 steg signifikant i ATN, IgA, lupus nefritis, pauci-immun GN og anti-GBM sygdom (A, B)

med cDC1 (Type 1 dendritiske celler)steg proportionalt mere end cDC2 i ATN, lupus nefritis, pauci-immun GN og anti-GBM sygdom (C).

CD8 plus T-celler blev signifikant forøget i ATN, IgA, lupus nefritis, pauci-immun GN og anti-GBM sygdom (D).

De fleste cDCl'er var lokaliseret i interstitium, undtagen i lupus nefritis, pauci-immun GN og anti-GBM sygdom, hvor de også blev fundet i peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner (Figur 3A). Derudover fandt vi også en signifikant antal CD8t T-celler i peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner (figur 3A), og mange af dem co-lokaliseret med cDCls (figur 3B). På den anden side blev cDC2'er sjældent fundet i intra-glomerulære regioner, og der var minimal co-lokalisering med CD8 plus T-celler.

FIGUR 3|(A) cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og CD8 plus T-celler i intra-glomerulære områder. (B) cDC1 co-lokalisering med CD8 plus T-celler. (Søjle=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Sammenhæng mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler)Med klinisk-patologiske egenskaber og CD8 plus T-celler Vi analyserede korrelationen mellem cDCl (Type 1 dendritiske celler)og klinikopatologiske træk såvel som CD8 plus T-celler. Der var 22 tilfælde af ATN (mild-mod sygdom n=12, alvorlig sygdom n=10). Mere alvorlig sygdom var forbundet med et højere antal cDC1 (Type 1 dendritiske celler)(p=0.032), men ikke cDC2(figur 4A).cDC1 (Type 1 dendritiske celler)steg proportionalt mere end cDC2(cDC2/cDC1-forhold 2,5, p=0.019). Antallet af CD8 plus T-celler steg også signifikant i ATN(p=0.005) (tabel 3, figur 2D). Antallet af cDC1 (Type 1 dendritiske celler)korrelerede ikke med CD8* T-cellenummer i ATN.

TABEL 3|CD8 plus T-celleantal og korrelationskoefficient mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og CD8 plus T-celler tal i kontrol og syge nyrer.

44 tilfælde af IgA nefropati blev analyseret. Ved at bruge Oxford-klassifikationen MEST-score (M mesangial hypercellularitet, E endocapillær hypercellularitet, S segmental glomerulosclerosis, T tubulær atrofi/interstitiel fibrose), et højere antal cDC1 (Type 1 dendritiske celler)var forbundet med en højere T-score(p=0.008), men ikke MES-score (figur 4B). Der var 7 tilfælde med halvmåner, og antallet af cCD1 var ikke forbundet med antallet af halvmåner. Antallet afnyreCD8* T-celler var signifikant højere i IgA nefropati end i kontrol (s<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Type 1 dendritiske celler) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>20 procent reduktion i eGFR. Inddeling af patienter i 2 grupper efter cDCl (Type 1 dendritiske celler) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), jo højere cDC1 (Type 1 dendritiske celler)nummergruppe var forbundet med dårligere resultater (figur 4E).

FIGUR 4|Korrelation mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler), cDC2 og CD8 plus T-celleantal og sygdommens sværhedsgrad (A-D).

Kaplan Meier kurve for IgA nefropati overlevelse (E). T-score 0 refererer til procentdelen af ​​området, der viser tubulær atrofi/interstitiel fibrose <=25>

T-score 1 refererer til procentdelen af ​​området, der viser tubulær atrofi/interstitiel fibrose 26 - 50 procent, T-score 2 henviser til procentdelen af ​​området, der viser tubulær atrofi/interstitiel fibrose > 50 procent.

Overlevelse blev defineret som > 20 procent reduktion i eGFR på eller før 31. december 2019. NS, ikke signifikant.

Der var 12 tilfælde af lupus nefritis. Som ved IgA nefropati var et højere cDCl-tal forbundet med mere alvorlig fibrose (p=0.020)(Figur 4C). Derudover steg antallet af CD8 plus T-celler også signifikant (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Type 1 dendritiske celler)og CD8t T-celler blev fundet i peri-glomerulære såvel som intra-glomerulære, hvilket indikerer, at de kan spille en rolle i denne tilstand. For det andet, i interstitiel fibrose-associeret immun-medieret sygdom (IgA nefropati og lupus nefritis), fandt vi, at cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal korreleret med sværhedsgraden af ​​fibrose, samt prognose ved IgA nefropati, mens der ikke blev fundet en sådan sammenhæng ved ikke-immun medieret fibrotisk sygdom (diabetisk nefropati). For det tredje var der en stærk korrelation mellem cDCl-tal og halvmånedannelse i pauci-immun GN, og cDCl var til stede i stort antal i peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner, hvilket indikerer deres mulige rolle i en halvmåneformation. For det fjerde korrelerede antallet af cDC1 med CD8 plus T-celleantal i lupus nefritis og pauci-immun GN, med talrige cDCler co-lokaliseret med CD8 plus T-celler, hvilket tyder på deres mulige interaktion. Dette er i overensstemmelse med vores resultater i dyremodeller afnyresygdomder viser murine homologer af cDC1 (Type 1 dendritiske celler)celler aktiverer fortrinsvis CD8t T-celler. Tilsammen tyder disse resultater på, at cDCl spiller en vigtig rolle på tværs af en rækkenyresygdommeherunder ATN, interstitiel fibrose ved immunmedieret sygdom og halvmånedannelse, og at de potentielt kan virke gennem aktivering af CD8t T-celler.

cDC1 (Type 1 dendritiske celler)Antal korreleret med sygdoms sværhedsgrad i ATN. I ikke-septisk ATN viste vi for første gang et signifikant øget antal DC'er (Dendritiske celler), især cDCl'er sammenlignet med cDC2'er. Vigtigt, cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal korreleret med sygdommens sværhedsgrad. Derudover blev CD8 plus T-celletallet også øget. ATN er normalt forårsaget af iskæmi-reperfusionsskade (IRI), nefrotoksiner eller sepsis. Traditionelt forårsager IRI og toksiner steril inflammation, og medfødt immunitet, hvor DC'er og T-celler er mindre vigtige, blev anset for at spille en dominerende rolle. Imidlertid har stigende beviser fra dyreforsøg vist, at både cDCl og CD8 plus T-celler er vigtige spillere. Tidligere undersøgelser i dyrs IRI og cisplatin nefrotoksicitet viste, at det samlede antal DC og T-celler steg (13-17). Vores tidligere undersøgelser viste i Adriamycin nefropati, cDCl-tal steg signifikant (5). I IRI viser en undergruppe af aktiverede dendritiske celler øget kapacitet til at krydstilstede antigenet til CD8t T-celler(18). I Adriamycin nefropati fandt vi også, at cDCl'er fremkaldte et CD8 plus T-cellerespons, der førte til skade (5). Manglen på en korrelation mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og CD8* T-celler i human ATN i modsætning til resultaterne i dyremodeller kan afspejle forskellige ikke-immunologiske skadesveje i human ATN sammenlignet med IRI i musemodeller, hvor cDCl'er spiller en væsentlig rolle gennem CD8* T-celler. Derudover er det blevet påvist hos gnavere, at cDCl rekrutteres ind i vævet af kemoattraktant XCLl produceret af naturlige dræberceller(19). Derfor kan det være værd at studere dette nærmerenyresygdom.

cDC1 (Type 1 dendritiske celler)Antal korreleret med immunmedieret interstitiel fibrose. Det andet signifikante fund i denne undersøgelse er, at cDCl-tallet korrelerede med sværhedsgraden af ​​interstitiel fibrose forbundet med immunmedieret sygdom (IgA nefropati og lupus nefritis), men ikke i ikke-immun medieret fibrotisk sygdom (diabetisk nefropati), viste den tidligere undersøgelse. øget antal af cDCl'er og cDC2'er i interstitiel fibrose(9). Vi viste for første gang, at dette kun er tilfældet ved immunmedieret sygdom og cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antallet steg forholdsmæssigt mere end cDC2'er. Derudover demonstrerede vi også cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal korreleret med prognose og antallet af CD8* T-celler steg også signifikant ved IgA nefropati. Dette understøttes af dyreforsøg, der viser DC'er (Dendritiske celler)bidrager direkte til fibrose. For eksempel fremmede DC-afledt amphiregulin fibrose(20). Det er også muligt, at cDCl'er bidrog til fibrose gennem CD8 plus T-celler, som vides at bidrage til fibrose i andre organer(21-23). Da interstitiel fibrose er forbundet med udviklingen af ​​kronisknyresygdom, er det ikke overraskende, at vi fandt cDC1 (Type 1 dendritiske celler)tal for at være en god prognostisk markør i IgA nefropati. Andre undersøgelser har vist CD8t T-celler korreleret med prognosen for IgA nefropati (24), som kan være resultatet af krydspræsentation fra cDCl'er. Ved lupus nefritis påviste vi en sammenhæng mellem cDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal og interstitiel fibrose samt antallet af CD8t T-celler. Tidligere undersøgelser har også vist en stigningnyrecDC1 (Type 1 dendritiske celler)antal i lupus nefritis(25), især klasse III og VI lupus nefritis, med en tilsvarende reduktion i deres cirkulerende antal (26). Vi udvidede disse resultater ved at vise, at de også korrelerede med kroniske forandringer. Det er veletableret, at interstitiel inflammation, som består af T-celler, B-celler, dendritiske celler og makrofager, har en dominerende rolle i progressionen af ​​lupus nefritis (27). cDCls kan bidrage til progressionen af ​​lupus nefritis i en række forskellige af måder. For det første spiller aktivering af interferon en nøglerolle i patogenesen af ​​lupus nefritis (28-30), og cDCl'er er en fremtrædende producent af IFN-入. (31) For det andet, cDC1 (Type 1 dendritiske celler)kan bidrage til progression af lupus nefritis gennem CD8t T-celler(32-37), og vores fund af en korrelation mellem cDCl'er og CD8 plus T understøtter yderligere deres mulige interaktion. Rollen af ​​CD8 plus T-celler i lupus nefritis er tidligere blevet påvist. CD8 plus T-celler kontrollerer autoreaktiv immunitet ved frigivelse af cytotoksiske molekyler. CD8 plus T-celler i lupus nefritis viste sig at have dæmpet cytotoksisk funktion, som kan udløse autoimmunitet(38). Derudover kan disse celler også generere lupus autoantigener(39). Der har været rigelige beviser for, at CD8* T-celler i beggenyre(32,33)og urin(34-36) korrelerer med sygdomsaktivitet og histologisk skade ved lupus nefritis. Derudover blev CD8* T-celleudmattelse vist at forudsige en gunstig prognose(37).

cDC1 (Type 1 dendritiske celler)Antal korreleret med antallet af halvmåner i Pauci-Immune GN. I pauci-immun GN fandt vi cDCl'er aggregeret i de peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner, og deres antal korrelerede med antallet af halvmåner og CD8 plus T-celler. Tidligere undersøgelser viste, at DC'er (Dendritiske celler)er sjældent til stede inde i glomerulus(3,4,9) eller kun i meget små antal(40). På den anden side var T-celler fremtrædende i interstitium, peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner({{6} }). Vi fandt ud af, at både cDCl'er og CD8* T-celler er fremtrædende i de peri-glomerulære og intra-glomerulære regioner med mange af dem co-lokaliseret. Derudover cDC1 (Type 1 dendritiske celler)tal korreleret med halvmåne og CD8 plus T-celletal. Alle disse fund tyder på en rolle for cDCl i halvmånedannelse gennem interaktion med CD8* T-celler. Den patogene rolle af CD8t T-celler i pauci-immun GN og halvmånedannelse er allerede blevet demonstreret i dyremodeller (45,46). I overensstemmelse med vores fund hos mennesker, i dyrs halvmåne GN, cDC1 (Type 1 dendritiske celler)og CD8* T-celler blev fundet især i den periglomerulære region(47,48). Det er blevet vist, at Bowmans kapsel giver en beskyttet immunologisk niche ved at forhindre adgang af DC'er og cytotoksiske CD8 plus T-celler til Bowmans rum og derved podocytter(45,47). Men da Bowmans kapsel blev brudt, fik disse inflammatoriske celler adgang og ødelagde podocytter, hvilket resulterede i hurtigt fremadskridende GN(47).

En begrænsning af denne undersøgelse er, at IF-farvningsteknikken kun tillader brugen af ​​et begrænset antal markører. Det ville være fordelagtigt at udvide vores resultater ved hjælp af teknologi såsom flowcytometri, som kan kombinere flere markører for yderligere at analysere fænotypen af ​​disse DC'er (Dendritiske celler)og deres relevante cytokin- og kemokinprofiler. Placeringsoplysninger vil dog gå tabt. Andre teknikker såsom multipleks immunhistokemi og nanostring kan også overvejes i fremtidige undersøgelser for yderligere at undersøge disse celler inyresygdom. Når cDC2'er farves med CD1c, HLA-DRB1 og CD1lc, kan der desuden være en lille procentdel af B-celler, der også udtrykker disse markører, hvilket ikke er blevet udelukket.

KONKLUSIONER

Selvom cDC1 (Type 1 dendritiske celler)omfatter en mindre delmængde af DC'er (Dendritiske celler)under homøostatiske forhold viser denne undersøgelse en signifikant sammenhæng mellem denne cellepopulation og klinikopatologiske træk hos menneskernyresygdom. Dette afspejler deres sandsynlige betydning i sygdomsprocesser såsom ATN, halvmånedannelse i proliferativ GN og interstitiel fibrose i immunmedieret GN. Derudover kan deres co-lokalisering og korrelation med CD8t T-celler give en forklaring på deres virkningsmekanisme, hvilket bekræfter data fra dyremodeller. Disse resultater giver en impuls til at udforske nye terapeutiske mål, der manipulerer disse celler til behandling afnyresygdomme, som vi har gjort i dyreforsøg(6), og for at undersøge deres anvendelse som en prognostisk markør. Yderligere undersøgelser i både mennesker og dyr er nødvendige for at undersøge cDC1s rolle (Type 1 dendritiske celler), deres virkningsmekanisme, og hvordan man bedst målretter dem terapeutisk.

REFERENCER

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Vævsspecifik mangfoldighed og funktioner af konventionelle dendritiske celler. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Den dendritiske cellelinje: Ontogeni og funktion af dendritiske celler og deres undergrupper i den stabile tilstand og den betændte indstilling. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/årlig immunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. Rumspecifik ekspression af dendritiske cellemarkører i human glomerulonephritis.NyreInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. Kvantificering af undergrupper af dendritiske celler i humant nyrevæv under normale og patologiske forhold.NyreInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW, et al. Cd103 plus dendritiske celler fremkalder Cd8 plus T-celleresponser til at accelerereNyreSkadei Adriamycin nefropati. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q, et al.Flt3 Inhibition LindrerKroniskNyreSygdomved at undertrykke CD103 plus dendritisk celle-medieret T-celleaktivering. Nephrol Dial Transplant(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C, et al. Cd103 plusNyreDendritiske celler beskytter mod Crescentic GN ved at opretholde Il-10-Producer Regulatory T-celler. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Renale dendritiske celler: Den lange og snoede vej. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Øget tubulointerstitiel rekruttering af human CD141(hi)CLEC9A( plus ) og CD1c( plus ) Myeloid dendritiske celleundergrupper i nyrefibrose og BNyreB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, et al. Uovervåget højdimensionel analyse justerer dendritiske celler på tværs af væv og arter. Immunity (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, et al. Enkeltcellet RNA-seq afslører nye typer af humane bloddendritiske celler, monocytter og stamceller. Science(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Opdatering om Lupus Nephritis. Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Bemærk:ovenstående er ikke en fuldstændig referenceliste