Totalt antal glykosider fra stængler af Cistanche Tubulosa lindrer depressionslignende adfærd: Tovejs interaktion mellem fytokemikalier og tarmmikrobiota

for flere oplysninger:ali.ma@wecistanche.com

Li Fan, et al

ABSTRAKT

Baggrund: Som den hyppigst anvendte nyre-yang tonificerende urt i traditionel kinesisk medicin, tørrede saftige stængler afCistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) har vist sig at være effektiv til behandling af depression. Imidlertid forbliver de antidepressive komponenter og deres underliggende mekanisme uklare.

Formål: At udforske de aktive komponenter i CT(Cistanchetubulosa)mod depression, samt de potentielle mekanismer. Undersøgelsesdesign og metoder: Adfærdsmæssige fortvivlelsestest blev brugt til at vurdere de antidepressive aktiviteter af polysaccharider, oligosaccharider og forskellige glycosidberigede fraktioner adskilt fra CT, såvel som de typiske tarmmikrobiota-metabolitter, herunder 3-hydroxyphenylpropionsyre ({{2) }}HPP) og hydroxytyrosol (HT). Desuden blev virkningerne af bioaktive fraktioner og metabolitter på kronisk uforudsigelig mild stress (CUMS) modeller undersøgt med flere farmakodynamiske og biokemiske analyser. Ændringer i colonhistologi og tarmbarrieren blev observeret ved farvning og immunhistokemisk analyse. Tarmmikrobielle træk og tryptofan-kynurenin-metabolisme blev undersøgt ved hjælp af henholdsvis 16S rRNA-sekventering og western-blotting.

Resultater: i altglykosider(TG) lindrede dramatisk depressionslignende adfærd sammenlignet med forskellige adskilte fraktioner, hvilket afspejlede sig i de synergistiske virkninger af phenylethanoid og iridoid glycosider på hyperaktivering af hypothalamus-hypofyse-binyre (HPA) aksen, alvorlig neuro- og perifer inflammation og mangler i 5-hydroxytryptamin (5-HT) og hjerneafledt neurotrofisk faktor i hippocampus. Desuden har TG(totale glykosider)mildnet lavgradig inflammation i tyktarmen og tarmbarriereforstyrrelser, og overflod af flere bakterieslægter var stærkt korreleret med HPA-aksen og inflammation hos CUMS-rotter. Konsekvent var ekspressionen af ​​indolamin 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1) i tyktarmen signifikant reduceret efter TG(totale glykosider)administration, ledsaget af suppression af tryptophan-kynurenin metabolisme. På den anden side udøvede HT også en markant antidepressiv effekt ved at forbedre HPA-aksefunktionen, pro-inflammatorisk cytokinfrigivelse og tryptophan-kynurenin-metabolisme, mens den stort set ikke var i stand til at justere den forstyrrede tarmmikrobiota på samme måde som TG. Overraskende nok, overlegne i forhold til fluoxetin, kunne TG og HT yderligere forbedre dysfunktion af hypothalamus-hypofyse-gonadeaksen og unormal cyklisk nukleotidmetabolisme.

Nøgleord: Cistanchetubulosa, totale glykosider, hydroxytyrosol, depression, tarmmikrobiota

Klik for at cistanche deserticola ma produkt

Introduktion

Depression er en kronisk, tilbagevendende og potentielt livstruende psykisk lidelse, som rammer op til 20 procent af befolkningen på verdensplan (Nabavi et al., 2017). På nuværende tidspunkt, selvom adskillige antidepressiva er blevet godkendt, er bivirkningerne bekymrende. Især langtidsbehandling med selektive serotoningenoptagelseshæmmere (SSRI'er) såsom fluoxetin, det vigtigste farmakologiske middel mod depression, forværrede problemer såsom kronisk seksuel dysfunktion (Bijlsma et al., 2014); dette har trukket stigende opmærksomhed til opdagelsen af ​​nye antidepressiva fra naturlige urter (Wang et al., 2019). I traditionel kinesisk medicin (TCM)-teori resulterer nyre-yang-mangel i præstationsegenskaber, der ligner de kliniske symptomer på depression, såsom at føle sig nede, tab af interesse og sentimentalitet (Yang et al., 2020), hvilket fremmer tankerne at lindre depressionslignende adfærd ved at tonificere nyre-yang. Tilfældigvis har mange nyre-yang tonificerende urter fordelen ved at forbedre den seksuelle funktion (Wu et al., 2015). Sådanne undersøgelser får os til at være opmærksomme på den potentielle anvendelse afCistancherHerba, som er den hyppigst anvendte nyre-yang tonificerende urt i TCM og er effektiv til behandling af mandlig seksuel dysfunktion (Wang et al., 2020), hvad angår antidepressiv udvikling.CistancherHerba, officielt registreret som de tørrede saftige stængler afCistanchetubulosa(Schrenk) Wight (CT) ogCistanchedeserticola(YC Ma) i den kinesiske farmakopé (Wang et al., 2017), er blevet brugt i Kina og andre østasiatiske lande siden det 15. århundrede til at behandle tilstande som nyre-yang-mangel, impotens og kvindelig infertilitet. Moderne farmakologiske undersøgelser tyder på detCistancherHerba har flere bioaktiviteter, såsom immunitetsforbedring, neurobeskyttelse, antioxidant-, antialdrings- og antitræthedseffekter (Wang et al., 2017). De neurobeskyttende egenskaber vedCistancherHerba foreslår dets terapeutiske potentiale ved kognitiv-relaterede sygdomme som slagtilfælde, depression og Alzheimers sygdom (Wang et al., 2020). I vores tidligere undersøgelse fandt vi, at CT(Cistanchetubulosa)ekstrakt lindrede den depressionslignende adfærd hos rotter med kronisk uforudsigelig mild stress (CUMS) (Li et al., 2018). Til dato, kemisk analyse af CT(Cistanchetubulosa)viste, at dets hovedbestanddele omfatter phenylethanoidglycosider, iridoidglycosider, polysaccharider og oligosaccharider (Jiang og Tu, 2009), men den type forbindelse, der spiller en dominerende rolle i dens antidepressive virkning, er stadig uklar.

Talrige undersøgelser har bekræftet, at den fysiologiske virkning af tarmen (især kommensal mikrobiota) spiller en vigtig rolle i udviklingen af ​​depression og kan regulere det neuroendokrine, autonome nervesystem og immunsystemer (Yang et al., 2020). Desuden har forholdet, der forbinder tryptofanmetabolisme, tarmmikrobiota og depression, gradvist tiltrukket sig stor opmærksomhed. Ændret tarmmikrobiota kan aktivere tryptofan-kynurenin-vejen og efterfølgende reducere perifer og cerebral tryptofantilgængelighed, hvilket resulterer i 5-HT-mangel (Agus et al., 2018). Vores tidligere undersøgelse viste, at phenylethanoid glycosider i CT(Cistanchetubulosa)udøver generelt lav biotilgængelighed og kan hurtigt metaboliseres til 3-hydroxyphenylpropionsyre (3-HPP) og hydroxytyrosol (HT) af tarmmikrobiotaen (Li et al., 2016). Derudover CT(Cistanchetubulosa)ekstrakt blev rapporteret at genoprette tarmmikrobiota-homeostase i CUMS-rotter (Li et al., 2018). Baseret på sådan forskning konkluderede vi, at den tovejs interaktion mellem fytokemikalierne og tarmmikrobiotaen kunne styre de antidepressive virkninger af specifikke bioaktive komponenter i CT(Cistanchetubulosa). Specifikt kan forbindelserne omdannes til absorberbare metabolitter (såsom 3-HPP og HT) i mave-tarmkanalen ved hjælp af tarmmikrobiota og efterfølgende udøve antidepressive virkninger. Til gengæld kan bioaktive komponent-inducerede tarmmikrobiota strukturelle ændringer samtidig spille en afgørende rolle i den antidepressive aktivitet.

Heri i vores undersøgelse brugte vi adfærdsmæssige fortvivlelsestest til at vurdere de antidepressive aktiviteter af polysaccharider, oligosaccharider og forskellige glycosiderberigede fraktioner adskilt fra CT(Cistanchetubulosa)vandigt ekstrakt (CTE) og de typiske metabolitter af tarmmikrobiota (herunder 3-HPP og HT), hvilket vi yderligere bekræftede i en kronisk uforudsigelig mild stress-model (CUMS) med flere farmakodynamiske og biokemiske analyser. Efterfølgende undersøgte vi, om dens mekanisme mod depression var relevant for den tovejs interaktion mellem fytokemikalier og tarmmikrobiota.

Materialer og metoder

Materialer

Alle standarder anvendt til kemisk analyse blev købt fra Durst (Sichuan, Kina). 3-HPP, HT, fluoxetin og imipramin blev købt fra Aladdin (Shanghai, Kina). Det kvantitative BCA-proteinsæt blev købt fra Boster (Wuhan, Kina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, Kina) leverede 5-HT, BDNF, tumornekrosefaktor-alfa (TNF-), interleukin-1beta (IL-1) og interferon-gamma (IFN- ) enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. Corticosteron (CORT), adrenokortikotropt hormon (ACTH) og corticotrophin-releasing hormon (CRH) ELISA-sæt blev købt fra MultiSciences (Hangzhou, Kina). Cyclisk adenosinmonophosphat (cAMP), cyklisk guanosinmonofosfat (cGMP), testosteron (T) og gonadotropin-frigivende hormon (GnRH) ELISA-sæt blev købt fra Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, Kina). Tryptophan og kynurenin ELISA-sæt blev opnået fra Small Molecule Antibodies (Bordeaux, Frankrig). Primære/sekundære antistoffer inklusive zonula occludens 1 (ZO-1), indolamin 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -actin og HRP gede-anti-kanin IgG (H plus L) blev købt fra Proteintech (Wuhan, Kina). Alle andre reagenser af analytisk kvalitet eller højere renhed blev opnået fra kommercielle leverandører.

Fremstilling af forskellige fraktioner adskilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)

CT(Cistanchetubulosa)blev indsamlet i november 2015 i Hetian, Xinjiang, Kina, og godkendt af prof. Xiaobo Li. Kuponprøven (20151108) blev deponeret på School of Pharmacy ved Shanghai Jiao Tong University.

Knuste prøver blev ekstraheret tre gange med destilleret vand (1:10, w/v) i 2 timer ved 80~90 ◦C for at opnå CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)(udbyttet var 57,1 procent). CTE blev opløst i destilleret vand og derefter langsomt omrørt med ethanol (1:4, v/v) og anbragt ved 4 ◦C i 24 timer. Derefter blev præcipitatet og supernatanten opsamlet ved centrifugering ved 4000 rpm i 20 min. Totale polysaccharider (TP; udbyttet var 5,7 procent) blev opnået ved vask med 80 procent ethanol og afproteinisering med Savage-reagens tre gange fra det opsamlede bundfald. Den resterende supernatant blev derefter kromatograferet over en D101 mikroporøs harpikssøjle og elueret med destilleret vand og 40% ethanol. De eluerede vand- og 40 procent ethanolfraktioner indeholdt totale oligosaccharider (TO; udbyttet var 35,1 procent) ogi altglykosider(TG; udbyttet var henholdsvis 12,1 procent). TG(totale glykosider)blev yderligere elueret med destilleret vand og 5 procent, 10 procent og 40 procent ethanol gennem D101 mikroporøs harpiks igen, og de eluerede fraktioner på 5 procent og 40 procent ethanol var totale iridoidglycosider (TG-IrG; udbyttet var 2,7 procent) og totale phenylethanoidglycosider (TG-PhG; udbyttet var henholdsvis 8,7 procent).

Kemisk analyse

For det første er de vigtigste kemiske bestanddele af forskellige fraktioner adskilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)blev karakteriseret ved UPLC-QTOF-MS. For det andet blev det relative indhold af totale kulhydrater og glycosider bestemt ved UV-Vis-metoden. For det tredje blev hovedkomponenterne (echinacosid, verbascosid, er verbascosid, 8-epilogansyre og teniposidsyre) kvantificeret ved en valideret HPLC-metode. De detaljerede parametre og metodevalidering er vist i det supplerende materiale.

Dyreforsøg

De specifikke dyreforsøgsplaner er vist i fig. 1. Alle forsøgsdyr blev anbragt og akklimatiseret i 1 uge forud for forsøgene i Laboratory Animal Center ved Shanghai Jiao Tong University (Shanghai, Kina) under kontrollerede rumtemperaturer (25 ± 2) ◦C; 55 ± 10 procent relativ luftfugtighed) med en lys-mørke-cyklus på 12:12 timer. Denne forskning blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne for pleje og brug af forsøgsdyr fra SJTU. Dyrefaciliteterne og protokollerne blev godkendt af SJTU's Dyreetiske Komité (nr. A2019008).

Et hundrede og halvtreds ICR-hanmus (med en vægt på 18-20 g, 6 uger gamle) blev købt fra Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, Kina) og tilfældigt opdelt i 10 grupper (n=15/gruppe). Forsøgspersonerne og doserne for adfærdsmæssige fortvivlelsesmus i hver gruppe er vist i tabel 1. Doserne af CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt) og dets adskilte fraktioner blev beregnet ved følgende formel: dosis=4,55 g/kg.d.bw × udbytte, som blev bestemt i henhold til tre humane ækvivalente dosisberegninger baseret på kropsoverfladeareal. Doserne af det positive lægemiddel imipramin og tarmmikrobiota-metabolitter (3-HPP og HT) blev sat op i henhold til de tidligere undersøgelser (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Efter intragastrisk administration én gang dagligt i 7 dage, blev åben felttest (OFT), haleophængstest (TST) og tvungen svømmetest (FST) udført på henholdsvis 8., 9. og 10. dag. De specifikke metoder til adfærdstestene er beskrevet i det supplerende materiale.

Tooghalvfjerds Sprague-Dawley hanrotter (med en vægt på 160-180 g, 6 uger gamle) blev købt fra Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, Kina). Forud for de formelle eksperimenter blev alle rotter udsat for saccharosepræferencetesten (SPT) efter den tilsvarende træning. Rotterne blev opdelt i 8 grupper (n=9/gruppe) i henhold til deres saccharosepræference (Supplerende Fig. S1). Forsøgspersonerne og doserne for rotterne i hver gruppe er vist i tabel 1. Doserne blev sat op i overensstemmelse med omdannelseskoefficienten mellem mus og rotte baseret på deres effektive doser i de adfærdsmæssige fortvivlelsesmus. Og dosis af det positive kontrollægemiddel fluoxetin var i overensstemmelse med det tidligere studie (Hou et al., 2017). Alle grupper modtog en række kronisk uforudsigelig mild stress (CUMS) undtagen kontrolgruppen. Stressfaktorer blev påført kontinuerligt og tilfældigt i 4 uger (se supplerende tabel S1 for detaljer). Mad og vand var frit tilgængeligt for kontrolrotterne, som forblev uforstyrrede i et andet rum, bortset fra adfærdstestene. Forsøgspersonerne blev administreret intragastrisk 1 time før CUMS-proceduren i løbet af 4 uger. Efter 28 dages kontinuerlige stressfaktorer og lægemiddeladministration blev OFT, SPT og FST udført på henholdsvis den 29., 31. og 33. dag. De specifikke metoder til adfærdseksperimenterne er vist i Supplerende materialer.

Prøveindsamling og biokemisk analyse

Efter adfærdstestene blev de fastende rotter bedøvet med pentobarbitalnatrium, og fuldblod blev opsamlet for at opnå serumprøver. Efter hjerteperfusion med saltvand blev indholdet af hippocampus, colon og cecal opsamlet og opbevaret i -80 ◦C. Distale colonsegmenter blev fjernet og fikseret i 4% paraformaldehyd. Niveauerne af CORT, CRH, ACTH, TNF-, IL-1, IFN-, cAMP, cGMP, T, GnRH, tryptophan og kynurenin i serumet, 5-HT, BDNF og TNF- i hippocampus, og TNF- og IFN- i tyktarmen blev målt i overensstemmelse med instruktionerne, der fulgte med de tilsvarende ELISA-kits.

Histologi, immunhistokemi og western-blotting assay

Hæmatoxylin og eosin (H&E) og Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) farvning blev brugt til at observere de patologiske ændringer i colonvæv. Derudover blev immunhistokemiske vurderinger af disse sektioner udført for at observere ZO-1-proteinekspression i colonepitelceller (Ding et al., 2020). Detaljer vedrørende prøveforberedelse og western-blotting-assay til bestemmelse af IDO1-proteinekspression i tyktarmen og hippocampus er også beskrevet i de supplerende materialer.

Sammensætningsprofilanalyse af tarmmikrobiota

16S rRNA high-throughput sekventering blev udført af MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, Kina), og den detaljerede metode og databehandling er vist i de supplerende materialer.

Statistisk analyse

Dataene er udtrykt som middelværdi ± standardfejl af middelværdien (SEM). Envejsvariansanalyse (ANOVA) blev brugt til at sammenligne flere grupper ved at bruge SPSS 20.0-software. En forskel blev betragtet som signifikant ved p < 0,05.="" korrelationerne="" mellem="" tarmmikrober="" og="" visse="" depressionsrelaterede="" fysiologiske="" faktorer="" blev="" analyseret="" ved="" hjælp="" af="" spearman-korrelationskoefficienten="" baseret="" på="">

Resultater

Kemisk analyse af forskellige fraktioner adskilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)

Hovedkomponenterne blev karakteriseret ved hjælp af UPLC-QTOF-MS (Supplerende Tabel S2 og Fig. S2), og i alt 21 bestanddele blev identificeret, herunder 16 bestanddele af phenylethanoid glycosider, 2 bestanddele af phenoliske glycosider i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG og TG-PhG; og 3 bestanddele af iridoidglycosider i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG og TG-IrG. Samlet set var det relative indhold af totale kulhydrater i TP og TO henholdsvis 60,3 procent og 80,8 procent. Det relative indhold afi altglykosideri TG var 87,7 procent. Tilsvarende udgjorde phenylethanoid- og iridoidglykosider 86,7 procent og 53,4 procent af henholdsvis TG-PhG og TG-IrG. Indholdet af echinacosid, verbascoside, er verbascosid, 8-epilogansyre og teniposidsyre i hver fraktion er vist i tabel 2, og HPLC-kromatogrammet og metodevalideringsdata er angivet i Supplerende Tabel S3 og Fig. S3.

Effekter af forskellige fraktioner adskilt fra CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)og de typiske metabolitter af tarmmikrobiota på adfærdsmæssige fortvivlelsestests hos mus

Som vist i fig. 2, sammenlignet med kontrolgruppen, udviste mus udsat for 7 dages imipramin (positiv kontrol) administration signifikante reduktioner i immobilitetstiderne i både FST og TST og viste ingen signifikant effekt på den samlede tilbagelagte afstand i OFT. . Lignende ændringer blev også observeret i CTE(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG- og HT-grupper, hvilket indikerer, at CTE, TG(totale glykosider)og HT udøvede den antidepressive aktivitet, og virkningerne var ikke relateret til excitabilitet. Derfor TG(totale glykosider)og HT var den dominerende bioaktive fraktion adskilt fra henholdsvis CTE og typiske metabolitter af tarmmikrobiota. Interessant nok blev der ikke vist nogen signifikante ændringer i immobilitetstiderne i FST efter TG-PhG og TG-IrG administration sammenlignet med kontrollerne eller i TST efter TG-PhG administration, hvilket indikerer, at tilstedeværelsen af ​​phenylethanoid og iridoid glycosider kan være afgørende for den antidepressive aktivitet af CTE.

Farmakodynamiske virkninger og biokemiske ændringer af forskellige glycosidberigede fraktioner og HT på CUMS-rotter

Som vist i tabel 3 viste rotter, der blev udsat for 28 dage af CUMS-paradigmet, signifikante reduktioner (p < 0.001)="" i="" saccharosepræference="" i="" spt,="" samlet="" tilbagelagt="" distance,="" og="" opvæksttal="" i="" oft,="" såvel="" som="" en="" signifikant="" stigning="" (p="">< 0,01)="" i="" total="" immobilitetstid="" i="" fst="" sammenlignet="" med="" kontrollerne,="" hvilket="" tyder="" på="" induktionen="" af="" ​​depressionslignende="" fænotyper="" hos="" cums-rotter.="" de="" depressive="" præstationer="" blev="" vendt="" i="" flx="" (positiv="" kontrol)="" gruppe.="" tilsvarende="" resulterede="" cte-,="" tg-,="" tg-phg-,="" tg-irg-="" og="" ht-behandling="" i="" genoprettelse="" af="" saccharosepræference="" til="" normale="" niveauer="" hos="" cums-rotter,="" som="" var="" 102,7="" procent,="" 94,1="" procent,="" 89,8="" procent,="" 91,9="" procent="" og="" 94,3="" procent="" af="" kontroller,="" hhv.="" konsekvent="" i="" fst-,="" cte-="" og="" tg-grupperne="" udviste="" de="" mest="" tydelige="" effekter,="" og="" immobilitetstiderne="" nåede="" henholdsvis="" 103,3="" procent="" og="" 93,4="" procent="" af="" kontrolgruppens,="" mens="" immobilitetstiderne="" for="" tg-phg-,="" tg-irg-="" og="" ht-grupperne="" netop="" nået="" 62,1="" procent,="" 73,2="" procent="" og="" 69,9="" procent="" af="" kontrolgruppen.="" lignende="" signifikante="" stigninger="" (p="">< 0,05)="" blev="" observeret="" i="" den="" samlede="" tilbagelagte="" distance="" og="" antallet="" af="" opvækst="" i="" oft="" efter="">(Cistanchetubulosa ekstrakt)TG- og HT-administration og TG-PhG- og TG-IrG-behandling havde en tendens til at revidere opdrætstallet i CUMS-rotter. Resultaterne indikerede, at TG var den dominerende bioaktive antidepressive fraktion adskilt fra CTE, og phenylethanoid og iridoid glycosider var uundværlige for at udøve dens antidepressive virkning. Desuden blev HT vist at være en af ​​de aktive metabolitter af TG in vivo.

Lidt af CUMS øgede konsekvent niveauerne af CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 og IFN- i serumet og TNF- i hippocampus hos rotter signifikant sammenlignet med kontrolgruppens (p.< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG og HT, hvilket indikerer, at CTE, TG(totale glykosider), og HT viste forbedrende virkninger på hyperaktiveringen af ​​HPA-aksen, alvorlig perifer og neural inflammation og mangler i {{0}}HT og BDNF. Ligeledes reducerede TG-IrG og TG PhG-behandling signifikant niveauerne af serum CORT, TNF-, IFN- og hippocampus TNF- og øgede niveauet af hippocampus 5-HT hos CUMS-rotter (p < {{8}="" }.05).="" signifikante="" fald="" (p="">< 0.05)="" i="" niveauerne="" af="" serum-crf="" og="" acth="" blev="" også="" observeret="" i="" tg-irg-gruppen="" sammenlignet="" med="" cums-gruppen.="" interessant="" nok="" var="" niveauerne="" af="" serum="" cort,="" tnf-,="" acth="" og="" crf="" i="" tg-phg-="" og="" tg-irg-grupper="" signifikant="" højere="" end="" niveauerne="" i="" tg-gruppen="" (p="">< 0,05),="" og="" niveauerne="" af="" hippocampus="" 5-ht="" og="" bdnf="" udviste="" det="" modsatte="" ekspressionsmønster="" (p="">< 0,05).="" disse="" resultater="" viste,="" at="" virkningerne="" af="" tg-phg="" og="" tg-irg="" på="" hyperaktiviteten="" af="" ​​hpa-aksen,="" perifer="" og="" neural="" inflammation="" og="" mangel="" på="" 5-ht="" var="" klart="" ringere="" end="" tg,="" hvilket="" indikerer,="" at="" phenylethanoid="" og="" iridoid="" glycosider="" kan="" udøve="" synergistiske="" effekter="" på="" de="" ovennævnte="" flere="">

TG og HT regulerer HPG-aksen og cyklisk nukleotidmetabolisme hos CUMS-rotter

Niveauerne af T, GnRH, cAMP og cGMP og forholdet mellem cAMP og cGMP (cAMP/cGMP) i serumet udsat for CUMS blev målt, og resultaterne er vist i tabel 4. Koncentrationerne af T, GnRH, cAMP, og cAMP/cGMP i serum var signifikant reduceret, og niveauet af cGMP var signifikant øget (p < 0.05)="" i="" cums-gruppen="" sammenlignet="" med="" kontrollerne,="" hvilket="" indikerer,="" at="" udsat="" for="" cums="" resulterede="" i="" undertrykkelse="" af="" hpg-aksen="" og="" cyklisk="" nukleotidmetabolisme="" dysfunktion.="" sammenlignet="" med="" cums-gruppen="" var="" der="" ingen="" signifikante="" ændringer="" i="" flx-gruppen.="" overraskende="" nok="" efter="">(totale glykosider)og HT-behandling blev signifikante stigninger (p < {0}}}.05)="" udvist="" i="" niveauerne="" af="" serum="" t,="" gnrh,="" camp="" og="" camp/cgmp,="" mens="" niveauet="" af="" serum="" cgmp="" var="" signifikant="" reduceret="" (p="">< 0,05).="" disse="" resultater="" indikerede,="" at="">(totale glykosider)og HT regulerede HPG-aksen og den cykliske nukleotidmetabolisme, som var klart overlegen i forhold til den positive kontrol af fluoxetin.

TG og HT lindrer lavgradig inflammation i tyktarmen og forstyrrelse af tarmbarrieren hos CUMS-rotter

H&E-farvning blev brugt til at vurdere tyktarmsmorfologiske skader, og ingen signifikante forskelle i tyktarmen blev observeret blandt forsøgsgrupperne (fig. 4a). Endvidere blev virkningerne af TG og HT på inflammation i tyktarmen og forstyrrelse af tarmbarrieren også analyseret (fig. 4b-d). Sammenlignet med kontrolgruppens, blev antallet af bægerceller og tykkelsen af ​​slimlaget reduceret i CUMS-gruppen. Konsekvent var proteinekspressionen af ​​ZO-1 og niveauerne af IFN- og TNF- i tyktarmen signifikant reduceret (p < 0.05)="" og="" øget="" (p="">< 0,05="" ),="" hvilket="" tyder="" på,="" at="" selvom="" der="" ikke="" blev="" induceret="" nogen="" åbenlys="" histologisk="" skade,="" resulterede="" udsat="" for="" cums="" i="" lavgradig="" inflammation="" i="" tyktarmen="" og="" forstyrrelse="" af="" tarmbarrieren.="" efter="" fluoxetin,="">(totale glykosider)og HT-behandling blev antallet af bægerceller og tykkelsen af ​​slimlaget øget, og niveauerne af colon IFN- og TNF- blev signifikant reduceret (p < 0.05).="" derudover="" øgede="" tg="" og="" ht="" signifikant="" (p="">< 0,05)="" proteinekspressionen="" af="" ​​zo-1="" til="" et="" niveau="" svarende="" til="" kontrolgruppens.="" disse="" resultater="" viste,="" at="">(totale glykosider)og HT kunne lindre lavgradig inflammation i tyktarmen og forstyrrelse af tarmbarrieren hos CUMS-rotter.

Effekter af TG og HT på tarmmikrobiotasammensætning

Efter fjernelse af ukvalificerede sekvenser blev der opnået i alt 1.874.721 effektive aflæsninger. Resultaterne af alfa-diversitet (fig. 5a) og beta-diversitet (fig. 5b) viste, at selvom rigdommen (Chao) og diversiteten (Shannon) af tarmmikrobiotaen i cecalindholdet ikke var forskellig, så var den overordnede struktur af tarmmikrobiotaen i Plottet med principalkoordinatanalyse (PCoA) viste en slående forskel mellem kontrol- og CUMS-grupper. Desuden har TG(totale glykosider)og HT-behandling øgede signifikant den bakterielle rigdom af CUMS-rotter og inducerede markante forskelle i PCoA-plottet sammenlignet med dem for CUMS-rotter, hvilket viste klare ligheder med kontrollerne, især når TG(totale glykosider)blev analyseret.

De taksonomiske ændringer i mikrobiota bekræftede yderligere, at TG(totale glykosider)udøvede en dramatisk regulerende effekt på tarmmikrobiotasammensætningen. Efter TG(totale glykosider)administration blev overfloden af ​​størstedelen af ​​ændrede taxa i CUMS-rotter vendt til et niveau svarende til kontrolgruppens. En signifikant reduktion (14,2 procent , p < 0.05)="" og="" berigelse="" (53,6="" procent="" ,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(totale glykosider)gruppe sammenlignet med henholdsvis CUMS-gruppe (fig. 5c). På familieniveau (supplerende tabel S4) reducerede TG konsekvent mængden af ​​Ruminococcaceae (phylum Firmicutes) og Peptococcaceae (phylum Firmicutes) med henholdsvis 33,9 procent og 82,9 procent sammenlignet med CUMS-gruppen (p < 0).="" {{10}}5).="" omvendt="" fandtes="" signifikante="" berigelser="" i="" mængden="" af="" ​​familie="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78,4="" procent,="" p="">< 0,05)="" og="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77,3="" procent,="" p="">< 0,05)="" i="" tg-gruppen.="" konsekvent="" på="" slægtsniveau="" (fig.="" 5d),="" overflod="" af="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" uklassificeret_f_ruminococcaceae="" (medlemmer="" af="" familien="" rumino-coccaceae)="" og="" peptococcus="" (et="" medlem="" af="" familien="" peptococcaceae)="" var="" signifikant="" reduceret,="" mens="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (medlemmer="" af="" familien="" erysipelotrichaceae)="" og="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (et="" medlem="" af="" familien="" muribaculaceae)="" udviste="" højere="" forekomster="" i="" tg-gruppen="" end="" i="" cums-gruppen="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Korrelationsanalyse af ændrede mikrobielle slægter påvirket af TG(totale glykosider)og HT, HPA-akse-relaterede hormoner, pro-inflammatoriske cytokiner, 5-HT og BDNF

For at belyse sammenhænge mellem ændringer i tarmmikrobiotasammensætningen påvirket af TG(totale glykosider)og HT, og tilsvarende depressionsrelaterede træk, blev Spearmans korrelationsanalyse udført. Som vist i fig. 6 var niveauerne af 5-HT og BDNF i hippocampus kun signifikant positivt korreleret med norank_f_Muribaculaceae. Ellers kunne klare korrelationer identificeres mellem de ændrede mikrobielle slægter og HPA-akse-relaterede hormoner. Især Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea og Peptococcus var stærkt relateret til HPA-aksefunktionen. Serum CORT, CRF og ACTH havde negative korrelationer med Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae og norank_f_Erysipelotrichacea og positive associationer med Peptococcus. Ydermere udviste Dubosiella og norank_f_ Erysipelotrichacea negative associationer med colon IFN- og hippocampus TNF-, mens lignende relationer eksisterede i Allobaculum, Harryfinita og serum og hippocampus TNF- såvel som i norank _f_Lachnospiracea og serum IFN- og TNF-. I modsætning hertil var Peptococcus positivt forbundet med colon TNF- og serum TNF-. Ligeledes var norank_f_Muribaculaceae positivt relateret til serum IFN- og TNF-. Disse resultater indikerede, at de ændrede mikrobielle slægter, især visse slægter tilhørende familien Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae og Muribaculaceae, som var specifikt påvirket af TG, viste stærke associationer med HPA-akse-relaterede hormoner og pro-inflammatoriske cytokiner samtidigt, hvilket demonstrerede den kritiske rolle. af tarmmikrobiota til regulering af HPA-aksefunktion og inflammation.

TG(totale glykosider)og HT hæmmer tryptophan-kynurenin-metabolismen hos CUMS-rotter

Virkningerne af TG(totale glykosider)og HT på niveauerne af tryptofan og kynurenin i serum fra rotter, såvel som ekspressionen af ​​IDO1 i colon og hippocampus, blev bestemt. Som vist i fig. 7 og fig. 8, sammenlignet med kontrolgruppens niveau, var niveauet af tryptofan i serum signifikant reduceret i CUMS-gruppen, i modsætning til det øgede niveau af kynurenin og kynurenin-til-tryptophan-forhold (Kyn /Trp) og IDO1-proteinekspression i tyktarmen og hippocampus. Sammenlignet med CUMS-gruppen var serum Kyn/Trp i FLX-gruppen signifikant reduceret (p< 0.05).="" tg="">(totale glykosider)og HT-behandling resulterede i en signifikant stigning i serum-tryptofanniveauet i CUMS-rotter (p < {{0}}.05)="" og="" et="" fald="" i="" niveauerne="" af="" serum="" kynurenin="" og="" kyn/trp="" (p="">< 0,05).="" derudover="" hæmmede="" tg="" signifikant="" ekspressionen="" af="" ​​ido1-protein="" i="" tyktarmen="" hos="" cums-rotter="" (p="">< 0,05),="" mens="" en="" ikke-signifikant="" forskel="" i="" ekspressionen="" af="" ​​ido1-protein="" i="" hippocampus="" blev="" observeret="" mellem="" cums-="" og="" tg-grupper.="" effekten="" af="" ​​ht="" på="" ekspressionen="" af="" ​​ido1-protein="" i="" tyktarmen="" og="" hippocampus="" var="" imidlertid="" i="" modstrid="" med="" den="" af="" ​​tg,="" hvilket="" indikerer,="" at="" tg="" og="" ht="" hæmmede="" tryptophan-kynurenin-metabolismen="" ved="" at="" reducere="" ekspressionen="" af="" ​​ido1="" i="" henholdsvis="" colon="" og="" hippocampus="" hos="" cums-rotter.="">

Diskussion

I denne undersøgelse blev to forskellige dyremodeller brugt til at screene for bioaktive forbindelser i CT(Cistanchetubulosa)som lindrer depressionslignende adfærd for første gang. TP og TO var højst sandsynligt ineffektive ingredienser i CTE, mens TG(totale glykosider)udviste det største potentiale i behandlingen af ​​depression. Tidligere undersøgelser om CT(Cistanchetubulosa), såvel somCistancheplanter, har for det meste fokuseret på bioaktiviteterne af phenylethanoidglykosider med det højeste indhold og forsømt vigtigheden af ​​iridoidglykosider og andre mindre rigelige ingredienser. Interessant nok viste vores undersøgelse, at phenylethanoid og iridoid glycosider viste synergistiske virkninger på hyperaktiviteten af ​​HPA-aksen, alvorlig perifer og neural inflammation og mangler i hippocampus 5-HT og BDNF, hvilket kan være den kritiske årsag til det fordelagtige antidepressivum. effekt af TG(totale glykosider). Disse resultater antyder yderligere urtemedicinens multikomponent- og multitarget-karakteristika og minder os om, at bestanddelene med lavere niveauer, endda sporingredienser, også kan spille en nøglerolle i farmakologiske virkninger.

Kronisk stress inducerer hyperaktiviteten af ​​HPA-aksen, hvilket fremmer begyndelsen af ​​depression, såvel som undertrykkelsen af ​​HPG-aksen via nedsat GnRH-frigivelse og/eller hypofysefølsomhed af GnRH (Kirby et al., 2009). I mellemtiden er cAMP og cGMP vigtige mellemliggende hubs, der var afhængige af mange neurotransmittere og hormoner for at udøve deres fysiologiske virkninger (Siawrys et al., 2002). Nylige undersøgelser har konsekvent vist, at forekomsten af ​​nyre-yang-mangel er tæt forbundet med dysfunktion af hypothalamus-hypofyse-målkirtelaksen (Zhang et al., 2019). Ved nyre-yang-mangelsyndrom er der også observeret markante reduktioner i niveauerne af serum-cAMP og cAMP/cGMP. I denne undersøgelse fandt vi, at TG(totale glykosider)kunne hæmme niveauerne af serum CORT, CRF og ACTH og øge serum T- og GnRH-indholdet i CUMS-rotter, hvilket indikerer genopretning af HPA- og HPG-aksedysfunktion efter TG-administration. Derudover har TG(totale glykosider)vendte et signifikant fald i niveauet af serum cAMP/cGMP hos rotter, der blev udsat for CUMS. Således den potentielle underliggende mekanisme for CT(Cistanchetubulosa) i behandlingen af ​​depression og nyre-yang-mangel kan være delvist ens og fortjener at blive udforsket nærmere. Desuden er produktionen af ​​seksuel lyst og adfærd en kompleks neural refleksproces. Kønshormoner er vigtige kilder til central seksuel spænding, og mangel på kønshormoner kan forårsage mindre seksuel lyst eller seksuel dysfunktion (Holloway og Wylie, 2015). Især hæmmer overdreven 5-HT frigivelsen af ​​GnRH, hvilket er en dominerende årsag til forekomsten af ​​kronisk seksuel dysfunktion efter langvarig behandling med SSRI'er (Prasad et al., 2015). I vores undersøgelse var fluoxetin (repræsentativt for SSRI'er) ineffektivt i HPG-aksens dysfunktion. Men selvom TG(totale glykosider)signifikant forbedret niveauet af 5-HT i hippocampus, lignende ændringer i serum T- og GnRH-niveauer blev også observeret, hvilket forbedrede undertrykkelsen af ​​HPG-aksen. Disse resultater viser den klare fordel ved CT(Cistanchetubulosa) i behandlingen af ​​depression, og den iboende mekanisme, der er ansvarlig for disse virkninger, skal undersøges yderligere.

Stigende evidens har vist, at tarmen er et potentielt mål for behandling af kroniske sygdomme ved hjælp af naturlige forbindelser med lav biotilgængelighed (Zhou et al., 2020). Nyere forskning (Wei et al., 2019) har indikeret, at CUMS-behandling inducerer fækale mikrobiomændringer og tarmbarrieredefekter, som letter bakteriel invasion i tyktarmens slimhinde og forværrer inflammatoriske reaktioner i tyktarmen. I overensstemmelse med denne rapport viste vores resultater, at 4 ugers CUMS-eksponering inducerede en omfattende udtømning af bægercelleantal og slimlagstykkelse i rottetyktarmen, såvel som begyndelsen af ​​forstyrrelse af tarmbarrieren repræsenteret ved øget tarmpermeabilitet, som blev bestemt af måling af ZO-1-proteinet. Derudover blev øget udtryk for pro-inflammatoriske faktorer (såsom TNF- og IFN-) observeret i tyktarmen. Følgelig indikerede disse resultater, at selvom der ikke blev induceret nogen åbenlys histologisk skade, initierede CUMS-behandling colonbetændelse og forstyrrelse af tarmbarrieren. Tidligere undersøgelser har rapporteret, at CT udøvede forbedret effektivitet til at forhindre DSS-induceret colitis hos mus (Jia et al., 2014). Inkonsekvent, TG(totale glykosider)viste sig også at lindre lavgradig inflammation i tyktarms- og tarmbarriereforstyrrelser hos CUMS-rotter, hvilket understreger dets potentiale til klinisk behandling af colonbetændelsesrelaterede sygdomme.

Omfattende undersøgelser har også vist, at forholdet mellem kommensal tarmmikrobiota, HPA-aksen og inflammation er komplekst og spiller en afgørende rolle i udviklingen af ​​depression (Misiak, et al., 2020). Ændringer i tarmmikrobiotasammensætningen kan bidrage til den øgede frigivelse af cytokiner og syntesen af ​​små bioaktive molekyler (Du et al., 2020). Visse cytokiner (såsom TNF-) kan passere gennem blod-hjerne-barrieren og er potente aktivatorer af HPA-aksen (Misiak et al., 2020). Til gengæld kan hyperaktiveringen af ​​HPA-aksen bidrage til tarmmikrobiota dysbiose, kronisk betændelse i tyktarmen og ændret tarmpermeabilitet (Misiak et al., 2020). I overensstemmelse med tidligere undersøgelser er TG-medicineret modifikation af tarmmikrobiotaen sandsynligvis ansvarlig for dens forbedrende virkning på depression. Vi observerede, at TG(totale glykosider)vendte forekomsten af ​​mikrobielle taxaer på forskellige niveauer i rotter udsat for CUMS til et niveau svarende til kontrollernes. Især blev de vigtigste ændrede slægter tilhørende familien Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae og Muribaculaceae fundet at være stærkt korrelerede med HPA-aksen og inflammation. I overensstemmelse med vores resultater er det rapporteret, at familien Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae og Muribaculaceae spiller en vigtig rolle i at opretholde slimhindebarriereintegritet og forekomsten af ​​inflammation (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Derfor formodede vi, at TG kunne moderere overflod af nogle slægter tildelt familien Erysipelotrichacea, Peptococcaceae og Muribaculaceae, og efterfølgende lindre lavgradig inflammation i tyktarmen, hyperaktivitet af HPA-aksen og forstyrrelse af slimhindebarrierens integritet. Interessant nok var det i vores undersøgelse, at kun én slægt ved navn nor ank_f_Muribaculaceae var korreleret med 5-HT og BDNF i hippocampus. Den specifikke mekanisme i forholdet er stadig uklar og skal undersøges nærmere. Ellers tyder resultaterne også på, at det er ekstremt svært for størstedelen af ​​de ændrede slægter forårsaget af TG direkte at påvirke niveauerne af 5-HT i hippocampus. For at forklare, hvordan ændringer i tarmmikrobiotaens sammensætning påvirker niveauet af hippocampus 5-HT efter TG-behandling, fangede det indviklede forhold, der forbinder tryptofanmetabolisme, HPA-aksen, inflammatoriske cytokiner og 5-HT vores opmærksomhed. Tryptophan er en essentiel aminosyre for mennesker og mindre end 1 procent bruges i proteinsyntese, hvor størstedelen (over 90 procent) omdannes af IDO1 og tryptophan 2,3-dioxygenase 2 (TDO2) til kynureniner, og ca. 5 procent bliver drevet af tryptophanhydroxylase ned ad serotoninbanen (Duan, et al. 2018). Niveauet af 5-HT i hjernen afhænger i høj grad af tilgængelighed af perifer tryptofan, givet at tryptofan transporteres ind i hjernen via neutrale aminosyretransportører (Duan et al., 2018). IDO1, det hastighedsbegrænsende enzym i det første trin af kynurenin-vejen, induceres primært af IFN- og andre pro-inflammatoriske cytokiner, såsom IL-1 og TNF- (Kennedy et al., 2017), som viste sig at være forbundet med tarmmikrobiota i vores undersøgelse. Som rapporteret metaboliseres mere tryptofan gennem kynurenin-vejen, hvorved omdannelsen af ​​tryptophan til 5-HT reduceres konkurrencedygtigt og forbindes med den nedsatte 5-HT, der almindeligvis findes ved depression (O'Mahony et al., 2015). Lavere tryptofanniveauer og højere Kyn/Trp er således almindelige og falder sammen med en øget risiko for depressiv stemning. Efter TG-administration blev overekspressionen af ​​IDO1 i tyktarmen hæmmet, hvilket resulterede i øgede serumtryptophanniveauer og en reduktion i serum Kyn/Trp, hvilket afslørede den potentielle kobling mellem tarmmikrobiota og hippocampus 5-HT-niveau påvirket af TG. I mellemtiden er BDNF, et neurotrophin-familiemedlem, afgørende for celledifferentiering, neuronal overlevelse, synapsedannelse og neuroplasticitetsprocesser i depression (Greenberg et al., 2009). Nylige undersøgelser har vist, at BDNF har vist sig at være tæt forbundet med tarmslimhindebarrierefunktion og tarmmikrobiota (Maqsood og Stone, 2016). Ligeledes er ændringerne i tarmmikrobiota blevet rapporteret at have potentialet til at øge niveauerne af BDNF-ekspression og dermed påvirke udviklingen af ​​depressiv-lignende adfærd (Du et al., 2020). Men i lighed med 5-HT-variation var det ekstremt umuligt for de fleste ændrede slægter forårsaget af TG i vores undersøgelse direkte at påvirke niveauerne af BDNF i hippocampus, og den iboende molekylære forbindelse og mekanisme skal undersøges nærmere.

I modsætning hertil HT, en tarmmikrobiota-metabolit af TG(totale glykosider), udviste også en antidepressiv effekt i denne undersøgelse, som er i overensstemmelse med dens fordelagtige neurobeskyttende aktivitet (Hu et al., 2014). Af bekymring kan HT også moderere pro-inflammatoriske cytokiner, HPA- og HPG-akse-relaterede hormoner og hippocampus 5-HT-koncentrationer til et niveau, der svarer til niveauet for kontrollerne i CUMS-rotter, mens de fleste af de ændrede mikrobielle slægter påvirkede af HT havde svage korrelationer med de ovennævnte fysiologiske indekser, hvilket tyder på, at tarmmikrobiotaen muligvis ikke er målet for den antidepressive aktivitet af HT. Ydermere undertrykte HT overekspressionen af ​​IDO1 i hippocampus, men ikke tyktarmen, ledsaget af de øgede serumtryptofanniveauer. Forekomsten af ​​de tilsyneladende forskelle mellem TG(totale glykosider)og HT kan skyldes den fremragende optagelse af HT i blodbanen og evnen for HT til at krydse blod-hjerne-barrieren (Robles-Almazan et al., 2018), hvilket også indikerer, at tarmmikrobiotaens stærke metaboliske kapacitet er især vigtigt i den antidepressive aktivitet af TG, ud over dets fysiologiske funktioner. Derfor har vi foreløbigt bevist, at den tovejsinteraktion mellem fytokemikalierne og tarmmikrobiotaen spiller en kritisk rolle i behandlingen af ​​depression med TG-administration (som vist i fig. 9).

Konklusion

Sammenfattende, TG(totale glykosider)var hovedsageligt ansvarlig for den antidepressive aktivitet af CT(Cistanchetubulosa), hvilket afspejler sig i de synergistiske virkninger af phenylethanoid og iridoid glycosider på hyperaktivering af HPA-aksen, alvorlig perifer og neural inflammation og mangler i 5-HT og BDNF i hippocampus. Desuden den potentielle molekylære mekanisme for den antidepressive virkning af TG(totale glykosider)blev opnået gennem den tovejs interaktion mellem fytokemikalier og tarmmikrobiota. Derudover forbedring af den undertrykte HPG-akse og cyklisk nukleotidabnormitet af TG(totale glykosider)og HT, som ikke var reguleret af behandling med SSRI'er repræsenteret ved fluoxetin, indikerede den klare fordel ved CT i behandlingen af ​​depression. Sådanne moduleringer repræsenterer en lovende strategi til behandling af depression ved hjælp af CT(Cistanchetubulosa) og lignende traditionelle naturlægemidler.

Forfatterbidrag

XL, YP og LF designede eksperimenterne og analyserede data. LF og JW udførte eksperimentet og analyserede data. LF og XL udarbejdede manuskriptet. PM bidrog til dyreforsøget og prøvetestningen, og LZ bidrog til analysen af ​​tarmmikrobiotasammensætning. Alle data blev genereret internt, og der blev ikke brugt nogen papirfabrik. Alle forfattere er enige om at være ansvarlige for alle aspekter af arbejdet for at sikre integritet og nøjagtighed.

Erklæring om konkurrerende interesse

Forfatterne erklærer, at der ikke er nogen interessekonflikter.

Anerkendelser

Dette arbejde blev støttet af tilskud fra National Key Research and Development Project (2017YFC1702400).

Supplerende materialer

Supplerende materiale forbundet med denne artikel kan findes i onlineversionen på doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.

Fra: 'totale glykosider fra stængler afCistanchetubulosalindre depressionslignende adfærd: tovejs interaktion mellem fytokemikalier og tarmmikrobiota' vedLi Fan, et al

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471