Analyse af kemiske bestanddele i Cistanche-arter

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Yong Jiang, Peng-Fei Tu, et al

Abstrakt

Arter af slægten afCistanche(Rou Cong Rong på kinesisk) er flerårige parasiturter og er hovedsageligt udbredt i tørre lande og varme ørkener. Som en overlegen tonic til behandling af nyremangel, impotens, kvindelig infertilitet, sygelig leukorrhea, voldsom metrorrhagia og senil obstipation,Cistancheurteropnået æren af ​​"ørkenens ginseng". For nylig har der været stigende videnskabelig opmærksomhed på Herba Cistanche for dens bemærkelsesværdige bioaktiviteter, herunder antioxidation, neurobeskyttelse og anti-aging. De kemiske bestanddele afCistancheplanteromfatter hovedsageligt flygtige olier og ikke-flygtigephenylethanoidglykosider(PhGs), iridoider, lignaner, alditoler, oligosaccharider og polysaccharider. Farmakologiske undersøgelser viser, at PhG'er er de vigtigste aktive komponenter til helbredelse af nyremangel, antioxidation og neurobeskyttelse; galactitol og oligosaccharider er repræsentanter for behandling af senil forstoppelse, mens polysaccharider er ansvarlige for at forbedre kroppens immunitet. I dette papir, fremskridt på de kemiske bestanddele afCistancheplanterog deres tilsvarende analyser gennemgås.

Nøgleord:Cistanche Herba, Cistanches Chemical, Analyse af bestanddele, Phenylethanoid glycosider

1. Introduktion

CistancheHoffmg. Et Link, en af ​​slægterne i Orobanchaceae-familien, med 22 arter i verden, er hovedsageligt udbredt i de tørre lande og ørkener på den nordlige halvkugle, såsom Xinjiang, Indre Mongoliet, Ningxia autonome regioner og Gansu, Qinghai-provinserne. Kina, samt Iran, Indien, Mongoliet osv. [1]. Deres vækstmiljøer er meget alvorlige: ekstremt tørt klima, alvorlige temperaturvariationer, intensivt solskin, mindre end 250 mm årlig nedbør og nedslidt jord [2,3]. DetCistanchearter tilhører de flerårige parasit-urter, som almindeligvis binder sig til rødderne af sandfikserende planter, såsom Haloxylox ammodendron, H. persicum, Kalidium foliated og Tamarix-planter osv. [3]. Der er seks Cistanche-arter i Kina, ifølge registreringen af ​​Taxonomical Index of Chinese Higher Plants [4]. En yderligere undersøgelse bekræftede dog, at kun fire arter og en variation afCistanchefindes i Kina, dvsCistanchedeserticolaYC Ma, C. tubulosa (Schenk) R. Wight, C. salsa (CA Mey.) G. Beck, C. salsa var. albiflflora PF Tu et ZC Lou og C. sinensis G. Beck [5].

Rou Cong Rong (HerbaCistanche), først optaget i Shen Nongs kinesiske Materia Medica, henviser til de tørrede saftige stængler afCistancheplanter.HerbaCistancheer blevet betragtet som en overlegen tonic og opnået æren af ​​"Ginseng of the deserts". De videnskabelige værdier af Herba Cistanche ligger i behandlingen af ​​nyremangel, impotens, kvindelig infertilitet, sygelig leukorrhea, profusemetrorrhagia og senil obstipation[6,7]. Det har været det hyppigst ordinerede lægemiddel mod nyremangel i Kina for successive dynastier. Blandt Cistanche-arter er det kun C. deserticola, der er blevet omarrangeret i den kinesiske farmakopé (2000-udgaven) [8], og C. tubulosa blev tilføjet til den kinesiske farmakopé fra 2005 som et alternativ på grund af dets lignende kemiske bestanddele, farmakologiske aktiviteter og dets relativt velhavende ressource sammenlignet med C. deserticola [9-11]. Men i de senere år er den vilde C. deserticola på randen af ​​udryddelse på grund af overhøst, og den er blevet indsamlet som en af ​​klasse II-planterne, der har brug for beskyttelse i Kina. På grund af mangel på embedsmandens naturressourcerHerbaCistanche, andre arter af denne slægt, såsom C. salsa og C. Sinensis, bruges også som erstatninger i mange områder [10].

Videnskabelig forskning vedrCistancheplanterstartede i 1980'erne [12], og den kemiske analyse viste, at forskellige forbindelser, herunder æteriske olier,phenylethanoidglykosider(PhGs), iridoider, lignaner, alditoler, oligosaccharider og polysaccharider er hovedbestanddelene afCistancheplanter[13,14]. Farmakologisk forskning viste, at ekstrakterne fraCistancheplanter besidder et bredt spektrum af aktiviteter, såsom helbredelse af nyremangel og senil forstoppelse, fremme af evnen til at lære og huske, behandling af Alzheimers sygdom, forbedring af immunitet, anti-aldring og anti-træthed [14-21]. Med forbedringen af ​​levestandarden og fremkomsten af ​​et aldrende samfund,Cistancheplanterhar fået mere opmærksomhed og er blevet brugt mere og mere udbredt på grund af deres fornemme farmakologiske aktiviteter.

Der har været flere anmeldelser om undersøgelsen af ​​kemiske bestanddele og farmakologiske aktiviteter afCistancheplanter[13-15]. Nærværende papir fokuserer på den kemiske analyse af denne slægt og fremskridtet med undersøgelser af kemiske bestanddele.

2. Flygtige forbindelser

De almindeligt anvendte ekstraktionsmetoder for de flygtige forbindelser af TCM'er omfatter dampdestillation og lipofil organisk opløsningsmiddelekstraktion. Ved hjælp af dampdestillation blev de æteriske olier fra C. salsa og C. tubulosa ekstraheret, og 38 og 21 komponenter blev identificeret ved henholdsvis GC-MS (tabel 1). Hovedbestanddelene i de æteriske olier i C. salsa består af alkaner, alkoholer, aldehyder og nogle heterocykliske forbindelser, mens palmitinsyre og linolsyre er de to hovedbestanddele af de samlede olier af C. tubulosa [22,23]. De flygtige forbindelser af C. deserticola blev ekstraheret med petroleumsether, og 25 bestanddele blev identificeret af GC-MS. De tre rigeste bestanddele er methyl 14-methylpentadecanoat (13,61 procent), ethylpalmitat (12,39 procent) og 2,5,6-trimethyloletan (7,60 procent) [24]. En anden rapport om de flygtige komponenter af C. deserticola viste, at eugenol var hovedkomponenten ved anvendelse af en simultan destillations-ekstraktionsmetode [25]. De forskellige analytiske resultater af disse to artikler [24,25] kan være forårsaget af forskellige ekstraktionsmetoder og forskellige analytiske betingelser for GC-MS.

Udover disse rapporterede Ma en superkritisk væskeudvindingsmetode (SFE) til at ekstrahere de ikke-polære bestanddele fra C. salsa. Analysen af ​​ekstraktet ved GC-MS viste, at nogle estere og lavmolekylære forbindelser, der indeholder oxygen eller nitrogen, eksisterede, udover alkanerne. Dette resultat viste, at flere polære forbindelser kunne ekstraheres af SFE ved tilsætning af en polær modifikator [26].

3. Ikke-flygtige forbindelser

De ikke-flygtige forbindelser afCistancheplanteromfatter hovedsageligt phenylethanoider, iridoider, lignaner, alditoler, oligosaccharider og polysaccharider. Indtil nu er mere end 100 ikke-flygtige forbindelser blevet isoleret fraCistanche anlæg. Fordelingen af ​​forskellige typer forbindelser iCistancheplanterer anført i tabel 2. I 1995 rapporterede Moriya [27,28] at plantematerialet fra C. salsa var blevet forkert identificeret før, da han undersøgte kilderne til Herba Cistanches fra de japanske medicinske markeder, så de kemiske bestanddele isoleret fra C . salsa i 80'erne er blevet omfordelt til C. deserticola i denne anmeldelse.

3.1. Phenylethanoid glycosider

3.1.1. PhG'ers kemiske strukturer

PhG'er er blevet betragtet som de vigtigste aktive komponenter iCistanchearter. Til dato har 34 PhG'er(phenylethanoidglykosider)er blevet isoleret fraCistanche planter, herunder 22 disaccharidglycosider, 10 trisaccharidglycosider og 2 monosaccharidglycosider (tabel 3). Ved at analysere strukturerne af phG'er iCistanche, er de følgende strukturelle karakteristika blevet opsummeret: sukkerdelen af ​​disaccharidglycosider består af glucose og rhamnose med en Glc (3→1) Rha-binding. Glucosen forbinder almindeligvis direkte med aglyconen og i sin position som C4 eller C6, hvor en coumaroyl eller caffeoyl sædvanligvis er placeret. Når PhG'en skal være et trisaccharidglycosid, optræder der sædvanligvis yderligere glukose eller rhamnose i C6-positionen af ​​den indvendige glukose. Blandt disse ph.d (phenylethanoidglykosider)fraCistancheart, er crenatoside (34) en enestående, for der eksisterer en etherring mellem positionen af ​​aglycone og C-2 positionen af ​​den indvendige glucose i dens struktur [34]. For nylig er røntgen-enkeltkrystalstrukturen af ​​salidroside (15), en PhG isoleret fra C. deserticola, blevet rapporteret for første gang [44].

De farmakologiske aktivitetsundersøgelser af PhG'er(phenylethanoidglykosider)har vist, at de har forskellige funktioner, såsom antioxidation, neurobeskyttelse, styrkelse af immun- og seksuel funktion, hepatobeskyttelse, anti-stråling osv. [15-17,40,48-50]. Blandt dem er neurobeskyttelse ved at blive et varmt emne. Nogle enkelte komponenter eller fraktioner af PhG'er(phenylethanoidglykosider)er blevet rapporteret at hæmme apoptose af neuronale celler induceret af forskellige kemikalier [51-57], og deres neurobeskyttelse in vitro er også blevet bevist af adskillige dyremodeller in vivo [58-64]. Disse resultater indikerer, at ph.d(phenylethanoidglykosider)kunne være en attraktiv kandidat til behandling af neurodegenerative lidelser, såsom demens eller Parkinsons sygdom.

3.1.2. Analyse af PhG'er

Som de vigtigste aktive komponenter iCistancheplanter, PhG'er(phenylethanoidglykosider)bruges sædvanligvis som markører for kvalitetsvurdering af rå lægemidler eller deres tilsvarende formuleringer.

3.1.2.1. Analyse af PhG'er ved tyndtlagskromatografi (TLC).

Zhang etablerede først en TLC-identifikationsmetode for acteosid (2), echinacosid (11) og cistanosid A (3) iHerbaCistanchermed silicagel ved at bruge ethylacetat-methanol-9 procent eddikesyre (20:3:2) som fremkalderopløsningsmiddel og FeCl3-opløsning som farvende reagenser [65]. Denne metode blev også brugt i Chinese Pharmacopoeia (2000) til identifikation af acteosid (2) [8]. Men i Chinese Pharmacopeia (2005) er adsorbenten ved tyndtlagskromatografi blevet ændret fra silicagel til polyamid for at opnå en meget bedre separationseffekt, og methanol-eddikesyre-vand (2:1:7) er blevet brugt. som et udviklende opløsningsmiddel. To store PhG'er iHerbaCistancher, Echinacosid (11) og acteosid (2) kunne identificeres samtidigt [9].

3.1.2.2. Analyse af PhG'er ved ultraviolet spektrofotometri (UV).

Som nævnt ovenfor eksisterer cinnamoylgruppen ofte i strukturerne af PhG'er, således at PhG'er kunne bestemmes direkte ved UV eller ved den kolorimetriske metode efter at have reageret med nogle farvende reagenser [66-72]. Men som vi ved, er den kolorimetriske metode ikke en rimelig tilgang til nøjagtig bestemmelse af kemiske bestanddele i TCM'er på grund af dens ustabilitet, dårlige reproducerbarhed og enorme testfejl. Desuden er det mere kedeligt at forbehandle prøverne påvist ved UV end ved de andre metoder. UV-metoden bruges således nu ikke længere til kvantificering af den rene forbindelse, men kun til bestemmelse af total PhG lejlighedsvis.

3.1.2.3. Analyse af PhG'er ved højtydende væskekromatografi (HPLC). Blandt alle analysemetoderne er HPLC den hyppigst anvendte til kvalitativ og kvantificering af phG'er, og tabel 4 opsummerer metoderne offentliggjort på analyser af phG'er ved HPLC i litteraturen, som vil blive detaljeret som følger.

3.1.2.3.1. Analyse af phG'er i rålægemidler, biologiske prøver og komplekse produkter ved HPLC.

I 1995 udførte Xu en sammenligning af de kemiske bestanddele af C. deserticola med dens erstatning for C. salsa. HPLC-analysen viste, at den kemiske sammensætning af PhG'er(phenylethanoidglykosider)mellem disse to arter var ens, men deres mængde var forskellig [73]. Samme år lavede Moriya en sammenligning mellem de kemiske komponenter i C. deserticola (Cd), C. tubulosa (Ct) og C. salsa (Cs), ved at bruge syv PhG'er som markører. Resultaterne viste, at cistanosider A (3), C (5) og en spormængde af tubulosid A (17) fandtes i Cd og Cs, hvorimod kun tubulosid A (17) eksisterede i Ct, uden cistanosider A (3) og C (5). De samlede mængder af phG'er i Ct- og Cs-planter havde også vist sig at være mere end i Cd-planter [28]. Det er værdifuldt, at dette papir har sammenlignet forskellen mellemCistancheslægt gennem multi-komponent analyse; det er dog beklageligt, at kvantificeringen af ​​disse syv PhG'er(phenylethanoidglykosider)blev kun udført med et punkt ekstern standardmetode uden en systematisk metodevalidering.

Tu lavede en kvalitativ analyse af seks PhG'er(phenylethanoidglykosider)og en kvantitativ analyse af to PhG'er i Cistanche-slægten ved Rp-HPLC. Resultaterne viste, at de kemiske bestanddele af C. deserticola, C. salsa, C. salsa var. albiflflora og C. tubulosa var ens, mens dem fra C. Sinensis var forskellige fra de andre [10]. Wang etablerede en metode til analyse af syv PhG'er i C. deserticola, C. tubulosa og C. salsa med HPLC/MS/MS, og resultaterne viste, at den kemiske ingrediensfordeling af de syv reference-phG'er er forskellig i hver art [ 74]. Fragmenteringsvejene for de glykosidiske bindinger, esterbindingen og nogle interessante neurale tab af PhG'er blev diskuteret i dette papir [74] og i et andet [75]. Imidlertid er fordelen ved HPLC-MS-teknikken ikke blevet demonstreret grundigt i disse analyser, fordi kun fragmenteringsmekanismen for PhG-standarder blev undersøgt. Vedtagelse af disse mekanismer for at belyse ukendte PhG-forbindelser for at give mere kemisk information, og fragmenteringsmekanismestudiet af andre skeletforbindelser er blevet forsømt.

Udover kvalitativ analyse er der også mange rapporter om kvantitative analyser afHerbaCistanches, især af to store PhG'er(phenylethanoidglykosider)echinacosid (11) og acteosid (2). I 2000 etablerede Zhang en kvalitetsstandard for C. deserticola, herunder indholdsbestemmelse af acteosid (2) ved HPLC, kombineret med kvalitativ identifikation af fem komponenter ved TLC [65]. I 2003 blev der etableret en Rp-HPLC-metode til påvisning af echinacosid (11) og acteosid (2) i Herba Cistanches dyrket på forskellige værtsplanter og habitater. Forfatteren brugte to forskellige mobile faser til bestemmelse af echinacosid (11) og acteosid (2), dvs. acetonitril-vand-iseddikesyre (13:86:1) for echinacosid og methanol-vand-iseddikesyre (32:67:1) for akteosid. Det foreløbige resultat viste, at indholdet af echinacosid og acteosid åbenlyst var påvirket af forskellige værter, og indholdet af disse to forbindelser i C. tubulosa hostet i dyrket Tamalrix L. var det højeste [76].

I betragtning af at det er lidt kedeligt at bestemme to bestanddele i samme anlæg ved hjælp af to forskellige opløsningsmidler, blev der etableret en enklere Rp-HPLC metode til samtidig påvisning af echinacosid (11) og acteosid (2) [77]. Chen anvendte derefter denne metode til at bestemme indholdet af echinacosid (11) og acteosid (2) i den vilde og dyrkede C. tubulosa [78]. Resultaterne viste, at indholdet af echinacosid (11) var markant højere end indholdet af acteosid (2) i alle prøverne, og indholdet af disse to aktive komponenter i naturen var højere end i dyrkede [78]. Det fortjener at nævne, at prøveforberedelsen i dette papir anvendte metoden til at blande multi-batches sammen, hvilket betyder, at forfatteren har overvejet de åbenlyse individuelle kvalitetsforskelle iHerbaCistancher.

Siden det vildeCistanchearter er på randen af ​​udryddelse, plantningen af ​​C. deserticola og C. tubulosa udføres i Xinjiang og Indre Mongoliet, Kina. For at give en teoretisk vejledning for dyrkningen er forskellige dyrkede prøver blevet analyseret. Cao bestemte indholdet af PhG'er(phenylethanoidglykosider)i forår og efterår med LC-MS, for at sammenligne prøver fra C. deserticola indsamlet i forskellige årstider. Fire PhG'er(phenylethanoidglykosider), dvs. echinacosid (11), acteosid (2), cistanosid A (3) og 2 -acetylacteosid (1) blev udvalgt som markører, og deres samlede indhold blev observeret at være højere om foråret end om efteråret [79] . Wang foretog en undersøgelse af de kemiske bestanddeles variation ved forskellige væksttider og forskellige dele af den dyrkede C. tubulosa ved at bruge fingeraftrykket og indholdet af echinacoside (11) som et indeks. Han fandt ud af, at den kemiske fordeling af PhG'er(phenylethanoidglykosider)var ens blandt forskellige prøver, men mængden af ​​hver PhG, især af echinacosid (11), var signifikant forskellig blandt forskellige prøver. Efter sammenligning konkluderede han, at dyrkningstiden for C. tubulosa skulle være over tre år, og dens høsttid skal kontrolleres strengt før blomstringen. I dette papir blev kvaliteten af ​​dyrkede planter fundet ikke at være bedre end vilde, så forfatteren foreslog, at dyrkningsteknologien skulle fremmes for at forbedre indholdet af aktive stoffer [80]. Yang undersøgte tørstofakkumuleringen og echinacosid (11) indholdet af C. tubulosa i Huabei-sletten. Resultatet viste, at tørstofophobningen af ​​C. tubulosa var i den "S"-formede variant, og indholdet af echinacosid (11) var højest, når C. tubulosa voksede op i 5 måneder [81].

Ud over disse er fingeraftryk, en ny teknik med fokus på de systemiske og omfattende karakteristika af de analyserede prøver også blevet brugt til kvalitetsevaluering afCistancheplanter. Som nævnt ovenfor analyserede Wang de kemiske bestanddele og deres variation i dyrket C. tubulosa ved at bruge fingeraftryk og andre indikatorer [80]. Xie etablerede et kromatografisk fingeraftryk af C. deserticola ved HPLC (fig. 1) og brugte det til at evaluere forskellen mellem iboende kvaliteter af prøver fra forskellige habitater. Endelig blev der fundet bemærkelsesværdige forskelle i kvaliteten af ​​prøverne fra forskellige habitater [82]. Det samme fænomen blev endda observeret under vores forskning i kvalitetsevaluering af C. deserticola, så senere bør der tages mere alvorlig bekymring på kvalitetskonsistensen af ​​Cistanche-arter.

Bortset fra plantning er dyrkning med celler eller callus et andet attraktivt alternativ til at løse ressourcemanglen på HerbaCistanche. Under dyrkningsprocessen er der etableret mange analysemetoder til at analysere det dyrkede resultat og til at optimere de dyrkede forhold [83-88]. De tilsvarende analytiske forhold er også blevet opsummeret i tabel 4.

Hvad angår analysen af ​​phG'er i komplekse produkter, rapporterede Zhang en kvantificeringsmetode for isoacteosid (12) i altCistancheglycosidekapsler ved HPLC [89]. Vi etablerede en metode til analyse af acteosid (2) i Shenqiyinao-kapsler ved HPLC [90], og Lei foretog en bestemmelse af echinacosid (11) i Congrong-ånd ved HPLC [91]. Nøglepunktet ved at analysere PhG'er(phenylethanoidglykosider)i de komplekse produkter er at undgå forstyrrelse af andre komponenter, så forbehandling af prøven og optimering af de kromatografiske forhold er normalt nødvendigt.

3.1.2.3.2. Metabolisk analyse af PhG'er ved HPLC.

I 2001 rapporterede Lei første gang om metabolismeprocessen af ​​phG'er(phenylethanoidglykosider)i mave-tarmen hos beaglehunde, og fire metabolitter, echinacosid (11), acteosid (2), isoacteosid (12) og 2 -acetylacteosid (1) blev isoleret fra fæces ved præparativ HPLC [96]. I 2006 blev metabolismen af ​​acteosid (2) og echinacosid (11), de vigtigste aktive bestanddele iHerbaCistancherblev henholdsvis undersøgt, og deres farmakokinetik og biotilgængelighed hos rotter blev analyseret [97,98,134]. Vi etablerede en følsom LC-MS/MS-metode med en simpel fastfase-ekstraktion til påvisning af acteosid (2) i rotteplasma og vævshomogenater til undersøgelse af biotilgængelighed og hjernefordeling i frit bevægende rotter [97,134]. Jia udviklede en hurtig og enkel HPLC-kobling med UV-metode til at bestemme indholdet af echinacosid (11) i rotteserum [98]. Biotilgængeligheden af ​​echinacosid og acteosid viste sig dog kun at være henholdsvis {{10}},83 procent og 0,12 procent, hvilket var i modstrid med de signifikante biologiske virkninger af PhG'er(phenylethanoidglykosider)hos dyr [58-64]. I fremtiden skal der foretages yderligere forskning for at belyse den metaboliske proces og absorptionsmekanisme af PhG'er(phenylethanoidglykosider).

3.1.2.4. Analyse af PhG'er(phenylethanoidglykosider)ved højhastigheds modstrømskromatografi (HSCCC).

HSCCC, en støtte-fri væske-væske partitionskromatografi, eliminerer irreversibel adsorption af prøven på den stationære fase og er blevet brugt i vid udstrækning til præparativ separation af naturlige produkter. Sammenlignet med den traditionelle faststof-væske-søjlekromatografi giver det højere genvinding og effektivitet. Lei anvendte HSCCC til adskillelse og oprensning af acteosid (2) og 2-acetylacteosid (1) fra C. salsa med et kvaternært tofaset opløsningsmiddelsystem sammensat af ethylacetat-n-butanol-ethanol-vand ( 4:0.6:0.6:5, v/v). HPLC-analyse af CCC-fraktionerne viste, at de to PhG'er(phenylethanoidglykosider)var over 98 procent renhed [99]. Senere etablerede Li en metode med to opløsningsmiddelsystemer, det ene bestående af ethylacetat-ethanol-vand (5:0.5:4.5, v/v/v), og det andet af ethylacetat-n-butanol –ethanol-vand ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v) for at isolere PhG'er(phenylethanoidglykosider)fra C. deserticola. Fem PhG'er(phenylethanoidglykosider), echinacosid (11), cistanosid A (3), acteosid (2), isoacteosid (12) og 2 -acetylacteosid (1) blev isoleret og oprenset, og renheden af ​​disse isolerede forbindelser var alle over 92,5 procent som bestemt ved HPLC [100]. Disse metoder gav gode referencer til fremtidig isolering og oprensning af phG'ers standarder.

3.2. Benzylglycosider

For nylig rapporterede Lei isolering og strukturbelysning af tre nye benzylglycosider, salsasider A–C (35–37, Fig. 2) fra C. salsa, som også var benzylglycosider isoleret fraCistancheplanterfor første gang [47]. De strukturelle træk ved disse benzylglycosider ligner dem for phenylethanoider isoleret fra denne slægt, bortset fra at benzylalkoholen substituerede phenethylol i aglyconen.

3.3. Iridoider

Indtil nu er tre iridoidaglyconer og fjorten iridoidglycosider blevet isoleret fraCistancheplanter(38–54, tabel 5) [102–109]. De strukturelle træk ved iridoidglycosider fraCistancheplanterer opsummeret som følger: glucose forekommer i Cl-positionen af ​​aglycon, med en konfiguration i H5 og H9; hydroxylering forekommer ofte i C8- og C10-stillinger; nogle gange kan dehydrering ske mellem hydroxylerne af C10 med C1 eller C3 for at give en epoxydel.

3.4. Lignaner

Én lignan-aglyconer og fem lignan-glycosider er blevet isoleret fra C. deserticola- og C. tubulosa-planter (55-60, tabel 6). De grundlæggende skeletter af disse forbindelser er tetrahydrofuran og benzofuran lignaner. Kilderne til den C. tubulosa, hvorfra flere lignaner er blevet isoleret, er hovedsageligt fra Pakistan, mens få lignaner er blevet isoleret fra C. tubulosa indsamlet i Kina. Dette beviste yderligere, at de kemiske forskelle eksisterede mellem C. tubulosa fra Kina og Pakistan [27,28].

3.5. Saccharider og deres derivater

3.5.1. Kemisk undersøgelse af saccharider og deres derivater

Kulhydrater udgør en høj andel af den tørre masse af planter af Cistanche-arter [110]. Blandt dem er en af ​​monosacchariderne, galactitol, blevet rapporteret som den vigtigste aktive komponent med afførende aktivitet i Herba Cistanches [18,19,103,104]. Mens polysacchariderne er blevet betragtet som de aktive bestanddele med fremme af kroppens immunitet, anti-aldring og anti-cancer aktiviteter iHerbaCistancher[20,21,111–113].

I 90'erne blev undersøgelserne af polysaccharider afCistanchearter havde været fokuseret på isolering/oprensning og analyse af sammensætningen af ​​monosaccharider [110,112,114-116]. De nøjagtige strukturer af polysaccharider fraCistanchearter er først blevet afklaret i 1997. I tabel 7 er de belyst strukturelle egenskaber af polysaccharider isoleret fra Cistanche-arter opført. Interessant nok er alle disse blevet isoleret fra C. deserticola, og polysacchariderne i andreCistancheplanterer ikke blevet undersøgt.

Bortset fra disse er nogle oligosaccharidderivater, såsom cistanosid F, cistanosid I, cistantubuloser A1/A2 og cistansinensose A1/A2 også blevet isoleret fraHerbaCistancher(Fig. 3), som faktisk er resterne af PhG'er(phenylethanoidglykosider)efter at have mistet phenethylolaglykonen. Da der findes konfigurationer i glukose i naturen, eksisterer disse oligosaccharidderivater nogle gange også som anomerer, og dette fænomen kunne observeres fra de parrede NMR-signaler [37,39,40,11,45].

3.5.2. Analyse af saccharider og deres derivater

For at kunne evaluere kvaliteten afHerba Cistancheroverordnet set er galactitol, den vigtigste aktive komponent med afførende aktivitet i Herba Cistanches [18,19,97,98] for nylig blevet udvalgt som en indikator til at evaluere kvaliteten afHerbaCistancher, kombineret med ph.d(phenylethanoidglykosider). For at kunne evaluere kvaliteten af ​​C. tubulosa fra forskellige områder, udviklede Cai en metode til kvantificering af galactitol koblet med echinacosid (11) og acteosid (2) ved HPLC. ELSD blev valgt som detektor for galactitol på grund af dets svage terminale absorption i UV-spektret, og en Prevail Carbohydrate ES-polymergelkolonne blev brugt til dets adskillelse. Partier af C. deserticola og C. tubulosa fra forskellige habitater blev målt, og forarbejdningsmetoden for friske C. tubulosa afkogsstykker blev også optimeret ved denne metode [92,93]. Deres resultater viste, at indholdet af galactitol, echinacosid (11) og acteosid (2) i C. tubulosa afkogsstykket ved den beskrevne metode var flere gange højere end indholdet af tørret ved insolation eller ved traditionel metode [93]. Derudover etablerede Zhang nogensinde en TLC-identifikationsmetode for mannitol i C. deserticola ved at bruge ethylacetat-pyridin-vand (7:2:1) som udviklende opløsningsmiddel og 1 procent KMnO4-opløsning som farvestof [65].

Hvad angår indholdsbestemmelsen af ​​polysaccharider iCistanchearter er phenol-svovlsyre den hyppigst anvendte metode, og indholdet af polysaccharider i C. salsa blev ved forskellige ekstraktionsmetoder bestemt til at være fra 11,61 procent til 13,22 procent [123-125]. Det er dog kun nogle foreløbige analytiske resultater på grund af begrænsningen af ​​den kolorimetriske metode.

3.6. Alkaloider og deres tilsvarende analyse

Indtil nu er der kun blevet isoleret to alkaloider fraCistanchearter, dvs. betain (65) og N,N-dimethylglycinmethylester (66) (fig. 3) [126]. Betain (65) er et alkaloid, der er almindeligt fordelt i planter, så der er flere rapporter om dets kvalitative og kvantitative analyser. Zhang sammenlignede indholdsvariationen af ​​betain i C. deserticola før og efter forarbejdning ved at bruge en TLC-identifikation kombineret med en kolorimetrisk metode [127]. Denne TLC-metode blev også samlet i Chinese Pharmacopoeia 2000 [8], mens denne kvantificeringsmetode ved kolorimetri senere blev vedtaget af andre for at optimere ekstraktionsteknologien afHerbaCistancher[128,129]. I 2007 rapporterede Gong en HPLC-metode til påvisning af betain i Cistanche-planter koblet med ELSD-detektor, og betain havde vist sig kun at eksistere i C. deserticola, men ikke i C. tubulosa. Forfatteren foreslog således, at betain skulle bruges som en markør til at skelne mellem disse to slags Cistanche-planter [101]. Men i betragtning af, at prøvepartierne kun er to for hver art, og et af levestederne for C. tubulosa (Yunnan) er usikkert, anbefalede vi, at denne konklusion skulle bevises yderligere. Derudover er TLC-identifikationen af ​​betain for Herba Cistanche blevet fjernet fra den kinesiske farmakopé siden 2005 på grund af dens uspecifikke egenskab. Det var således ikke rimeligt at tage det som en eneste indikator for at optimere ekstraktionsteknologien for Herba Cistache [129].

3.7. Andre forbindelser

Der findes små mængder af andre forbindelser, såsom phenolglycosider, monoterpenoider, steroler eller deres glycosider, fedtsyrer, aminosyrer og nogle sporstoffer osv., der findes i Cistanche-planter [13,41,42,103,105,130-133].

4 konklusioner

I denne gennemgang er de kemiske bestanddele afCistanchearter og deres analysemetoder er blevet beskrevet. Blandt de eksisterende analyser har størstedelen været koncentreret om PhG'er(phenylethanoidglykosider), og HPLC har været den mest anvendte metode på grund af dens høje effektivitet og nøjagtighed. Gennem analyse af de tidligere forskningsværker, kombineret med vores års studier af Cistanche-arter, er der nogle store problemer, der eksisterer i analysen afCistancheplanterer blevet opsummeret som følger: den første er den blandede brug af arternes kilde: C. deserticola og C. tubulosa er to officielle arter indsamlet i den kinesiske farmakopé. To andre Cistanche-arter, C. salsa og C. Sinensis, bruges dog også i nogle områder på grund af ressourcemangel. Selvom der har været flere publikationer, der refererer til sammenligningen mellem forskellige arter [6-8], er de ikke overbevisende nok på grund af de begrænsede prøvepartier og markører. Det er således nødvendigt at etablere en omfattende metode, såsom fingeraftryksteknologi til at analysere de rå lægemidler fra forskellige kilder sammenligneligt. Den anden er, at der ikke er blevet lagt særlig vægt på kvalitetsinkonsistensen af ​​Herba Cistanches. Cistanche-arter er parasit-urter. Der er mange faktorer, der påvirker deres kvalitet, såsom klima, levesteder, værter, høsttid, forarbejdningsmetode og forskellige dele af den samme plante. Vores undersøgelser viste, at kvaliteten af ​​Cistanche-arter ikke er stabil, især kvaliteten af ​​den vilde C. deserticola [80,82,92]. Dette problem var imidlertid blevet forsømt i nogle af de tidligere analyser, og kun en eller to prøver var blevet brugt [74,76], hvilket kunne føre til unøjagtige konklusioner. Så i fremtiden bør meget flere prøver indsamles og analyseres for at opnå en mere objektiv konklusion. Den tredje er, at nærværende analyser hovedsageligt koncentrerer sig om to store PhG'er(phenylethanoidglykosider), echinacosid (11) og acteosid (2), men som vi ved, er den farmakologiske virkning af TCM et samarbejde mellem multikomponenter eller forskellige typer af bestanddele. Således er samtidig bestemmelse af de aktive multikomponenter mere meningsfuld for kvalitetskontrollen af ​​TCM. Men indtil nu har der ikke været nogen kvantitativ analyse for mere end tre PhG'er iHerbaCistancher, selv der er ingen rapport om analyse af benzylglycosider, iridoider og lignaner. Så bør fremtidig forskning styrke deres analytiske og farmakologiske undersøgelse. Samlet set er den nuværende forskning i analysen af ​​Cistanche-arter stadig i et lavere niveau. Herba Cistanches er vigtige toniske lægemidler, men faktisk kunne deres kvalitet ikke kontrolleres effektivt kun af to repræsentanter for PhG'er(phenylethanoidglykosider)[9]. Kombinationen af ​​multikomponentbestemmelse med fingeraftryk er blevet betragtet som en kraftfuld tilgang til kvalitetskontrol af TCM'er. I fremtiden bør forskningsniveauet for Cistanche-arter på disse to felter forbedres yderligere. Etablering af en metode, som samtidigt kunne kvalitativ og kvantitativ analyse af PhG'er, iridoider og andre aktive bestanddele iHerbaCistanchervil være en meningsfuld forskningsretning.

Cistanchetubulosahar mange effekter, klik her for at vide mere

Anerkendelser

Dette arbejde blev økonomisk støttet af National Natural Science Foundation of China (nr. 30472070) og af New-Century Talent Program, Ministry of Education of China (nr. 985-2-102-113), og forfatterne er også taknemmelige for Xiaoming Liu, Zhihong Song, LiLei fra Peking University for deres eksperttekniske assistance.

Fra: ' Analyse af kemiske bestanddele iCistancheart' af Yong Jiang, Peng-Fei Tu

---Journal of Chromatography A, 1216 (2009) 1970-1979