Tongluo Digui Decoction behandler nyreskade hos diabetiske rotter ved at fremme autofagi af podocytter

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Abstrakt

OBJEKTIV:

At undersøge virkningerne af Tongluo Digui decoction på nyreskade og streptozotocin-induceret podocyt autofagi hos diabetiske rotter.

METODER:

Mandlige Sprague-Dawley rotter blev tilfældigt opdelt i seks grupper: normal, model, Tongluo Digui decoction (høj, medium og lav dosis) og valsartan. Streptozotocin blev injiceret intraperitonealt for at replikere den diabetiske dyremodel. Efter 8 uger blev proteinuri evalueret for at etablere den diabetiske nefropatimodel. Behandlingerne blev administreret dagligt via den intragastriske vej. 16 uger efter gavage bestemte vi 24 timers urinproteinkoncentration, blodsukker, serumkreatinin og urinstofkvælstofkoncentrationer. Derefter blev rotter ofret, og nyrer blev høstet og farvet med periodisk syre-Schiff for at evaluere de patologiske ændringer i glomeruli, herunder glomerulære podocytter ved transmissionselektronmikroskopi. Western blot-analyse blev anvendt til at bestemme ekspressionen af nefrin, podocin, p62, beclin-1, LC3II./I. og p-mTOR/mTOR-protein i nyrevæv.

RESULTATER:

Sammenlignet med modelgruppen var Tongluo Digui decoction forbundet med fald i 24 timers urinproteinkoncentration, blodsukker, hæmoglobin A1c, serumkreatinin, urinstofnitrogenkoncentrationer, total serumprotein og albumin. Samtidig blev mesangial mesenterisk udvidelse og fusion af fodprocesser reduceret, den glomerulære kældermembran blev ikke signifikant fortykket, og antallet af podocytter og antallet af autofagosomer i podocytterne blev øget. Endvidere blev ekspressionen af nefrin, podocin, LC3II. og beclin-1-protein i nyrevæv opreguleret, mens ekspressionen af p62-protein blev nedreguleret, og mTOR-fosforylering blev hæmmet.

KONKLUSION:

Tongluo Digui decoction kan hæmme udviklingen af diabetisk nefropati ved at hæmme mTOR phosphorylering og derved øge autofagi for at beskytte podocytter og reducere proteinuri.

Søgeord:Diabetiske nefropatier; autofagi; podocyt; Tongluo Digui decoction

cistanche stamme fordelefornyrefunktion

INDFØRELSEN

Diabetisk nefropati (DN) er en af de alvorlige mikrovaskulære komplikationer af diabetes, hvor 30% -40% af diabetespatienterne lider af nyresygdom. Med den stigende forekomst af diabetes er DN blevet hovedårsagen til nyresygdom i slutstadiet på verdensplan.1 Dette er en tung økonomisk byrde for både familier og samfund.

Podocytskader er en vigtig årsag til DN-progression. Som en terminalt differentieret celle spiller autofagi en vigtig rolle i opretholdelsen af podocytternes fysiologiske funktion.2,3 I en normal fysiologisk tilstand er der en høj grad af autofagi i podocytter, der fjerner beskadigede proteiner og organeller.4 I diabetikermiljøet hæmmes podocytautaufagi imidlertid, hvilket tyder på, at podocytautfagi spiller en vigtig rolle i patogenesen af DN.5 DN tilhører kategorierne "Xiao Ke", "Guan Ge" og "ødem" i traditionel kinesisk medicin. Teorien om traditionel kinesisk medicin er, at blodstasis ogYin mangeler de vigtigste årsager til DN.6 Derfor bør behandling af DN fremme blodcirkulationen og nære yin, og Tongluo Digui decoction blev etableret for dette. Vi har tidligere fundet ud af, at Tongluo Digui decoction havde en gavnlig behandlingseffekt i DN. I denne undersøgelse havde vi til formål at bruge den streptozotocin (STZ)-inducerede type 1 DN-rottemodel til at evaluere effekten af Tongluo Digui-afkogning på nyreskade, autofagi og mTOR-signalvej. Vi undersøgte også den underliggende molekylære mekanisme for Tongluo Digui decoction i forsinkelse af udviklingen af DN og fremlagde dokumentation for klinisk forebyggelse og behandling af DN.

MATERIALER OG METODER

Dyr

Specifikke patogenfrie (SPF) Sprague-Dawley rotter [n = 60, han, (150 ± 10) g; kvalifikationscertifikatnummer: SCXK (Yu) 2017-0001] blev købt fra Henan Experimental Animal Center (Zhengzhou, Kina). Standard lyscyklus (14 timers lys, 10 timer nat), dørtemperatur (23 ± 2) ° C, fugtighed (40% -50%), hus (tre dyr pr. Bur) og fodring (steriliseret foder og drikkevand) blev brugt. Eksperimentet blev afsluttet i Cell Imaging Center Laboratory på Henan Hospital of Traditional Chinese Medicine (Zhengzhou, Kina). Alle forsøg blev udført i henhold til vejledningen for pleje og brug af forsøgsdyr udgivet af National Institutes of Health.

Stoffer

Valsartan (Val) kapsler blev købt hos Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Beijing, Kina). Tongluo Digui decoction består af Shuichi (Hirudo) 12g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Angelicae Sinensis) 30 g, Zexie (Rhizoma Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Kinesiske urter blev købt fra Henan Hospital of Traditional Chinese Medicine (Zhengzhou, Kina).

Eksperimentelt design

Rotterne blev tilfældigt inddelt i seks grupper, der hver bestod af 10 rotter: kontrolgruppe (Ctrl), DN-modelgruppe (STZ), DN-model med Val-behandlingsgruppe (Val), DN-model med Tongluo Digui decoction high dose treatment group (HTL), DN-model med Tongluo Digui decoction medium-dose treatment group (MTL) og DN-model med Tongluo Digui decoction low dose treatment group (LTL). De seks rottegrupper blev ofret 16 uger efter, at gavage og nyrer blev indsamlet.

Val (10 mg·kg-1·d-1) og Tongluo Digui decoction i tre forskellige doser blev givet ved gavage en gang dagligt i 16 uger. De administrerede doser var baseret på konverteringsligningen for lægemiddeldoser mellem dyr og mennesker. Rottedosis (mg/kg) = voksen human dosis (mg/kg) × omregningsfaktor (6,25). Højdosis-, mellemdosis- og lavdosisgrupperne af Tongluo Digui-afkogning fik gastrisk gavage på henholdsvis 5,4, 2,7 og 1,35 g·kg - 1·d-1. Rotter blev vejet ugentligt. Den 24-timers urin blev opsamlet ved hjælp af metaboliske bure i slutningen af 0, 12 og 24 uger. Efter behandlingens afslutning (efter 24 uger) blev rotter bedømt ved subkutan injektion af klorhydrat, og nyre- og blodvævsprøver blev høstet og opbevaret ved -80 °C. Rotter havde fri adgang til en normal forsøgsdyrekost og rent vand (undtagen som beskrevet nedenfor).

cistanche plante

Etablering af DN-modellen

STZ (Sigma, St. Louis, MO, USA) blev brugt til at fremkalde diabetes som beskrevet tidligere.7 Alle 60 rotter havde begrænset adgang til vand i 12 timer før forsøgene. Af disse blev 50 rotter administreret en enkelt intraperitoneal injektion af STZ 60 mg/kg opløst i citratbuffer (0,1 mol/l, pH 4,5). Diabetes blev bekræftet ved at måle blodglukosekoncentrationer 72 timer efter STZ-injektionen. Dyr med en glukosekoncentration ≥ 16,7 mmol/l i tre på hinanden følgende dage blev betragtet som diabetikere. Efter 8 uger blev rotter anbragt i separate metaboliske bure, og urin blev opsamlet i 24 timer til måling af urinmikroalbumin (UAE). DN-modellen blev bekræftet ved opnåelse af UAE-≥ 30 mg / 24 timer.

Biokemiske indikatorer

Serum- og urinvurderingerne blev brugt til at evaluere dyrenes nyrefunktion. Rotteurin blev vurderet ved hjælp af det metaboliske bur. Rotteblodprøver blev udtaget ved hjælp af haleskæringsmetoden.8 Serum- og urinprøver blev frosset ved -80 °C indtil brug. Serumkreatinin-, blodurinstofnitrogen-, albumin- og urinproteinkoncentrationer blev målt ved radioimmunoassay. Hæmoglobin A1c (HbA1c), C-peptid og insulinniveauer blev målt ved hjælp af HbA1c ELISA Kit (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, USA), C-peptid Elisa kit (Kainuo Bio Ltd., Beijing, Kina) og insulin Elisa kit (Merck Millipore Co., Ltd., Bedford, MA, USA) efter producentens anvisninger henholdsvis. Urinsyre, total serumprotein (TP), albumin (ALB), alaninaminotransferase (ALT) og aspartataminotransferase (AST) hos rotter blev bestemt af en automatisk biokemisk analysator.

Histopatologisk undersøgelse

Formalinfast nyrevæv blev indlejret i paraffin, skåret i 3-4 μm tykke sektioner og farvet med periodisk syre-Schiff (PAS). Morfologiske ændringer i nyrevæv, herunder mesangial celleproliferation, cellulær infiltration og mesangial matrixændringer, blev undersøgt for hver farvet sektion ved lysmikroskopi (NIKON D3100) (× 400).

Transmission elektron mikroskop

TEM blev brugt til at observere morfologien af podocytter og mesangialceller i nyrevæv. Frisk nyrevæv blev opdelt i blokke (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Western blot analyse

Total protein blev ekstraheret fra nyrevæv ved proteinlysebuffer (Solarbio Biotech, Beijing, Kina). Proteinkoncentrationer i supernatanten blev testet af et BCA-analysesæt (Solarbio Biotech, Beijing, Kina, PC0020). Prøver indeholdende 40 μg protein blev adskilt på 12% SDS-polyacrylamidgelelektroforese (SDSPAGE) (Applygen, Beijing, Kina, B1004) og derefter overført til en nitrocellulosefiltermembran (Solarbio Biotech, Beijing, Kina). Efter blokering med 5% skummetmælk ved stuetemperatur i 2 timer, β-actin (Proteintech, varenummer: 60008-1-lg), LC3II/I (Abcam, varenummer: ab48394), P62 (Proteintech, varenummer: 18420-1-AP), beclin-1 (proteinteknologi, varenummer: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, varenummer: #5536), mTOR (CST, varenummer: #2983), nephrin (Abcam, varenummer: ab58968) og podocin (protein hver, varenummer: 20384 -1-AP) blev tilføjet og inkuberet ved 4 °C natten over. Denne blanding blev derefter vasket fem gange med TBS +0,05% Tween-20 (Solarbio Biotech, Beijing, Kina) (TBS-T) i 5 minutter, før det sekundære antistof blev tilsætning (1∶2000) inden inkubation ved stuetemperatur i 1 time, vask fem gange med TBST i 5 minutter, underkastet farveudvikling med forbedret kemiluminescens (ECL, Millipore, Billerica, MA, USA) og eksponering ved hjælp af ImageJ-softwaren til stripgråtoneanalyse.

Statistisk analyse

Data blev analyseret ved hjælp af SPSS-software (IBM SPSS Statistics for Windows, version 23.0. 2014, Armonk, NY, USA). Forskelle mellem grupper blev testet ved hjælp af en envejsanalyse af varians efterfulgt af Tukeys test. Data blev udtrykt som middelværdien ± standardafvigelsen. P< 0.05="" was="" considered="">

luteolin

RESULTATER

Beskyttende virkning af Tongluo Digui afkogning på DN rotte nyrer

Biokemiske indikatorer såsom blodsukker, glyceret hæmoglobin, serumkreatinin, blodurinstofnitrogenkoncentration og 24-timers urinproteinkoncentration blev målt 16 uger efter gavage. (Tabel 1). Resultaterne viste, at sammenlignet med den normale gruppe var blodsukker, glyceret hæmoglobin, serumkreatinin, blodurinstofnitrogenkoncentration, 24-timers urinproteinkoncentration, TP og ALB signifikant højere i modelgruppen (P< 0.01),="" thereby="" indicating="" that="" the="" model="" group="" had="" impaired="" renal="" function.="" in="" the="" val="" group,="" both="" serum="" creatinine="" concentration="" and="" 24="" h="" urine="" protein="" concentration="" were="" decreased="" (p="">< 0.05).="" moreover,="" in="" the="" tongluo="" digui="" decoction="" high-dose="" group="" a="" significant="" reduction="" in="" blood="" glucose,="" hba1c,="" serum="" creatinine,="" and="" urea="" nitrogen="" concentrations="" was="" observed,="" as="" well="" as="" 24="" h="" urine="" excretion="" (p="">< 0.01).="" these="" effects="" were="" dose-dependent.="" there="" were="" no="" significant="" differences="" in="" uric="" acid,="" insulin,="" alt,="" and="" ast="" levels="" in="" each="" group="" of="" rats.="" taken="" together,="" our="" findings="" showed="" that="" tongluo="" digui="" decoction="" alleviated="" kidney="" damage="" and="" improved="" renal="" function="" in="" dn="" rats="" in="" a="" dose-dependent="">

Ændringer i DN rotte nyrepatologi blev vurderet ved PAS farvning efter Tongluo Digui decoction behandling (figur 1). Sammenlignet med den normale gruppe blev der observeret en signifikant stigning i glomerulære mesangialceller og mesangial stroma sammen med en udvidelse af det mesangiale område i modelgruppen. Det glomerulære mesangiale område steg i hvert af de tre Tongluo Digui-afkogningsdosisniveauer og i Val-gruppen. Desuden havde disse fire behandlingsgrupper reduceret bredden af den mesangiale matrix sammenlignet med modelgruppen, og det glomerulære mesangiale område i højdosis Tongluo Digui-afkogningsgruppen var mindre end i Val-gruppen. Disse resultater viste, at Tongluo Digui decoction forsinkede progressionen af DN glomerulære læsioner.

Virkning af Tongluo Digui-afkogning på glomerulær podocytskade hos DN-rotter

Western blot-analyse blev anvendt til at bestemme ekspressionen af podocytmarkørproteinerne nephrin og podocin (figur 2). Sammenlignet med normalgruppen var ekspressionen af begge proteiner i modelgruppen signifikant reduceret (P< 0.01),="" indicating="" podocyte="" injury.="" in="" addition,="" the="" expression="" of="" nephrin="" and="" podocin="" was="" up-regulated="" in="" the="" tongluo="" digui="" decoction="" groups="" compared="" with="" the="" model="" group="" (p=""><>

Virkning af Tongluo Digui-afkogning på glomerulær podocytautfagi hos DN-rotter

Ændringer i autofagosomer i glomerulære podocytter blev observeret under TEM (figur 3). Resultaterne viste autofagosomer i de glomerulære podocytter i den normale gruppe. Podocytautgosomer var fraværende i modelgruppen, og podocytfodprocesserne forsvandt også. I de tre Tongluo Digui decoction dosis grupper og valsartan gruppen observerede vi glomerulære podocyt autofagosomer, hvilket foreslog, at Tongluo Digui decoction forbedret podocyt autofagi i DN rotter. Western blot blev brugt til at detektere ekspressionen af autofagi-relaterede proteiner P62, beclin-1 og LC3 II. (figur 4). Sammenlignet med normalgruppen var beclin-1 og LC3II. ekspression i modelgruppen signifikant reduceret (P< 0.01),="" while="" the="" expression="" of="" p62="" was="" significantly="" increased="" (p="">< 0.01).="" these="" findings="" indicated="" that="" autophagy="" was="" weakened="" in="" dn="" rats.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" tongluo="" digui="" decoction="" high="" dose="" group="" had="" up-regulated="" beclin-1="" and="" lc3ⅱ="" expression="" (p="">< 0.05),="" along="" with="" down-regulated="" expression="" of="" p62.="" together,="" these="" results="" showed="" that="" the="" renal="" protective="" effect="" of="" tongluo="" digui="" decoction="" in="" rats="" with="" dn="" may="" be="" related="" to="" enhanced="" autophagy="" in="" the="" kidney="">

Tongluo Digui decoction forbedrer glomerulær podocytautfagi hos DN-rotter ved at hæmme mTOR-fosforylering

Inhibering af mTOR-fosforylering forbedrer autofagi (figur 5). Sammenlignet med normalgruppen blev mTOR-fosforylering i modelgruppen forbedret (P< 0.01),="" whereas="" in="" the="" tongluo="" digui="" decoction="" groups="" it="" was="" inhibited="" (p="">< 0.05).="" this="" suggested="" that="" tongluo="" digui="" decoction="" enhanced="" podocyte="" autophagy="" by="" inhibiting="" activation="" of="" the="" mtor="" signaling="" pathway.="" previous="" studies="" have="" shown="" that="" autophagy="" protects="" podocytes="" and="" improves="" kidney="">

DISKUSSION

DN er hovedsageligt karakteriseret ved tegn og symptomer såsom tilstedeværelsen af urinprotein, højt blodsukker, polydipsi, polyfagi og polyuri. Symptomerne ligner dem i traditionel kinesisk medicin, såsom "Xiao Ke", "Guan Ge" og "ødem". Forekomsten og udviklingen af DN er uadskillelig fra det patologiske grundlag for yinmangel og blodstasis.6 Med udviklingen af Yin-mangel og blodstasis beskadiges nyren gradvist og viser derved tab af urinprotein, hvilket yderligere fører til dannelse af mikrothrombus og fibrose i nyrerne. DN-patienter lider uundgåeligt af nyresygdom i slutstadiet.11

Tongluo Digui decoction blev etableret af Zhang Binghou, en berømt kinesisk traditionel medicinlæge, og baseret på hans mange års erfaring med behandling af DN.12, 13 Tougluo Digui decoction består af Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Blandt dem er Shuizhi (Hirudo) og Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) monarklægemidler, som vi mener spiller en rolle i næring af Yin og fremme af blodcirkulationen i DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) forbedrer kroppens immunitet og sekretoriske tilstand og forsinker aldring.14 Shuizhi (Hirudo) har antikoagulant, antitumor, antiinflammatoriske og antifibrotiske virkninger, og kan forbedre nyrepatologiske ændringer i DN for signifikant at reducere serumkreatinin- og blodurinstofkvælstofkoncentrationerne og reducere udskillelsen af urinprotein.15,16 I DN spiller podocytskade en vigtig rolle i den glomerulære kældermembranfiltreringsbarriere og i dannelsen af proteinuri.17 Nefrin og podocin er begge poremembranproteiner på overfladen af podocytter. De to proteiner interagerer for at danne et kompleks, der spiller en central rolle i funktionen af den glomerulære filtreringsbarriere.18 Unormal fordeling af proteinekspression fører til forskellige grader af proteinuri.19 I denne undersøgelse viste STZ-inducerede type 1 DN-rotter en stigning i udskillelsen af urinprotein og nedsat nyrefunktion over 24 timer. Desuden viste PAS-farvning, at antallet af mesangiale celler og den mesangiale matrix steg i modelgruppen, hvilket indikerede, at modellen var vellykket etableret. Forskellige doser af Tongluo Digui decoction reducerede 24 timers urinprotein- og serumkreatininkoncentrationerne og forbedrede nyrepatologien hos DN-rotter med reducerede mesangialceller og matrix. Western blot-analyse viste, at ekspressionen af nefrin og podocin i Tongluo Digui-afkogningsgruppen var højere sammenlignet med den i modelgruppen, hvilket indikerer, at denne formel forsinker DN-progression hos rotter ved at beskytte podocytter.

Autofagi er en vej til nedbrydning af lysosomale proteiner i celler og spiller en afgørende rolle i clearance af beskadigede eller overudtrykte proteiner, der opretholder cellehomeostase og integritet.20 Autofagi er integreret i podocyt lysosomal homeostase i diabetes, og forbedret autofagi kan reducere podocytskade.5 Efter specifikt at have slået det autofagirelaterede gen Atg5 ud i podocytter, mus viste gradvist allestedsnærværende proteinaggregering, mitokondrieskader og autofagiaktivitet i podocytter; podocytterne blev beskadiget, og fodprocesserne forsvandt og fusionerede, hvilket indikerede, at autofagi blev opretholdt. Det er vigtigt at opretholde normal podocytfunktion.21,22 I denne undersøgelse undersøgte vi effekten af Tongluo Digui-afkogning på autofagi i glomerulære podocytter ved hjælp af TEM- og Western blot-analyse. TEM viste, at antallet af podocytautfagosomer i hver Tongluo Digui-afkogningsdosisgruppe steg sammenlignet med modelgruppen. Desuden viste Western blot ekspression af de autofagi-relaterede proteiner LC3, beclin-1 og p62. Sammenlignet med modelgruppen blev LC3II. og beclin-1-ekspression signifikant øget i Tongluo Digui-afkogningsgruppen, mens p62-proteinekspression blev signifikant reduceret. Disse resultater viste, at Tongluo Digui decoction øgede niveauet af autofagi i glomerulære podocytter.

Rapamycin målprotein (mTOR) er en af de vigtigste regulatorer af autofagi.23 Det er bredt fordelt i nyrebarken og medulla og spiller en rolle i udviklingen af DN podocytskade.24,25 I situationer med høj glukose og stress aktiveres mTOR og fosforyleres, hvilket fører til fosforylering af dets nedstrømsmål og hæmning af autofagi. Liu et al 26 viste, at mTOR-hæmmeren, rapamycin, specifikt bundet til mTOR-kinase og hæmmede mTOR-aktivitet, forbedret podocytautfagi og beskyttet nyrefunktion. Vi fandt ud af, at mTOR-fosforylering blev forbedret i modelgruppen, og at Tongluo Digui-afkogning hæmmede denne proces, hvilket antydede, at Tongluo Digui-afkogning forbedrede autofagi i podocytter og kan hæmme aktivering af mTOR-signalvej.

Sammenfattende kan Tongluo Digui-afkogning hæmme autofagi i podocytter, beskytte glomerulære podocytter, opretholde glomerulær filtreringsmembranintegritet, reducere 24 timers udskillelse af urinprotein og forsinke DN-progression ved at hæmme mTOR-aktivering. Disse resultater giver indsigt i yderligere forståelse af den beskyttende virkning af Tongluo Digui-afkogning i DN, men den underliggende mekanisme, der er involveret, mangler stadig at blive belyst.

hvad er en cistanchetil nyresygdom

REFERENCER
1 Tesch GH. Diabetisk nefropati - er dette en immunforstyrrelse? Clin Sci 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS, et al. Podocytbiologi i diabetisk nefropati. Nyre Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Podocytautautfagi: et potentielt terapeutisk mål for at forhindre progression af diabetisk nefropati. J Diabetes Res 2017; 2017(4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Autofagi: renovering af celler og væv. Celle 2011; 147(4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Nedsat podocytautfagi forværrer proteinuri i diabetisk nefropati. Diabetes 2016; 65(3): 755-767.
6 Søn C, Xie QY, Meng QG. Undersøgelse af fordelingsloven for TCM syndrom af diabetisk nefropati. Beijing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38(4): 266-270.
7 Szkudelski T. Mekanismen for alloxan og streptozotocin virkning i B-celler i rottens bugspytkirtel. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Effektiviteten af Qingre Lishi Yishen afkogning på den glomerulære fibrose af immunoglobulin En nefropati i en rottes model. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR i podocytfunktion: er rapamycin godt for diabetisk nefropati? Cellecyklus 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. Autofagi påvirker glomerulær sygdomsmodtagelighed og opretholder podocythomeostase hos aldrende mus. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li C Y, Cui WP, et al. Gennemgang af urte Traditionel kinesisk medicin til behandling af diabetisk nefropati. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y, et al. Anvendelse af Zhang Binghous nærende nyre Yin metode til behandling af kronisk nyresygdom. Beijing Zhong Yi Yao 2016; 35(4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Introduktion af professor Zhang Binghous applikationserfaring. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. En undersøgelse af forskningen om farmakodynamikken i skildpadde "Ziyin Bushen". Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Forskningsfremskridt af igle og dets ekstrakter til behandling af diabetisk nefropati. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Forskningsfremskridt af iglen og dens aktive ingredienser til behandling af diabetisk nefropatiZhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Forskningsfremskridt om mekanismen for podocytudtømning hos diabetisk nefropati. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Nephrin signalering i podocytten: et opdateret billede af signalregulering ved spaltemembranen og videre. Front Endocrinol (Lausanne) 2018; 9: 302.
19 Jaakko P, Karl T. Molekylær opbygning af den glomerulære filtreringsbarriere. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. Autofagi bekæmper sygdom gennem cellulær selvfordøjelse. Natur 2008; 451(7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Endotelcelle
og podocytautofagi beskytter synergistisk mod diabetesinduceret glomerulosklerose. Autofagi 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Podocytskade hos diabetisk nefropati: konsekvenser af angiotensin II.-afhængig aktivering af TRPC-kanaler. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 som den vigtigste gateway til autofagi. Essays Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: et farmakologisk mål for autofagiregulering. J Clin Invest 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z, et al. Triptolid genopretter autofagi for at lindre diabetisk nyrefibrose gennem miR-141-3p / PTEN / Akt / mTOR-vejen. Mol Ther nukleinsyrer 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang Jørgensen, Guo Y, Yang X. De beskyttende virkninger af rapamycin på celleautofagi i nyrevæv hos rotter med diabetisk nefropati via mTORS6K1-LC3 II. signalvej. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.