Forbedring af ekstinktionshukommelse ved farmakologiske og adfærdsmæssige indgreb rettet mod dets reaktivering

For flere oplysninger:ali.ma@wecistanche.com

Forøgelse af udryddelsehukommelseved farmakologiske og adfærdsmæssige indgreb rettet mod dets reaktivering

Josué Haubrich, Adriano Machado, Flávia Zacouteguy Boos, Ana P. Crestani, Rodrigo O. Sierra, Lucas de Oliveira Alvares & Jorge A. Quillfeldt

Ekstinktion er en proces, der involverer ny læring, der hæmmer udtrykket af tidligere erhvervede erindringer. Selvom udryddelsen er midlertidig effektiv, sletter den ikke en oprindelig frygtassociation. Da udryddelsessporet har en tendens til at falme over tid, er originalenhukommelsekan genopstå. På den anden side er styrkende effekter blevet beskrevet i adskillige rekonsolideringsstudier ved brug af forskellige adfærdsmæssige og farmakologiske manipulationer. For at vide, om en ekstinktionshukommelse kan styrkes ved reaktiveringsbaserede interventioner i den kontekstuelle frygtkonditioneringsopgave, begyndte vi med at replikere det klassiske fænomen spontan recovery for at vise, at korte geneksponeringssessioner kan forhindre henfaldet af ekstinktionssporet over tid i en langvarig måde. Denne frygtdæmpning viste sig at afhænge både af L-type calciumkanaler og proteinsyntese, hvilket tyder på en rekonsolideringsproces bag den reaktiveringsinducerede styrkende effekt. Ekstinktionssporet var også modtageligt for forstærkning ved en post-reaktiveringsinfusion af enhukommelse-forstærkende lægemiddel (NaB), som også var i stand til at forhindre hurtig generhvervelse af frygt (besparelser). Disse resultater peger på nye reaktiveringsbaserede tilgange, der er i stand til at styrke en ekstinktionshukommelse for at fremme dens vedholdenhed. De konstruktive interaktioner mellem ekstinktion og rekonsolidering kan repræsentere en lovende ny tilgang inden for frygt-relaterede lidelsesbehandlinger.

Klik til Cistanche og Cistanches for hukommelse

Hukommelseretrieval er et dynamisk fænomen, der under de rette betingelser kan udløse to adskilte processer, rekonsolidering eller ekstinktion. Efter en kort apporteringssession i samme træningssammenhæng, en tidligere konsoliderethukommelsekan gå ind i en labil tilstand, der kræver de novo proteinsyntese for at genstabilisere og fortsætte, en proces kaldet rekonsolidering1. Men langvarige, ikke-forstærkede genfindingssessioner kan inducere udryddelse2. Selvom rekonsolidering af frygtminder er blevet grundigt undersøgt3, 4, har meget få undersøgelser hidtil undersøgt muligheden for, at et ekstinktionsspor ville gennemgå rekonsolidering efter genfinding5-7, og dets mulige resultater og kliniske anvendelser er i øjeblikket uudforskede8.

Ekstinktion reducerer betingede reaktioner gennem en proces, der indebærer konsolidering af en ny hæmmendehukommelse; det menes ikke at være aflæring eller sletning af det oprindelige spor9, 10. Ekstinktionsbaserede terapier anvendes almindeligvis til at forhindre aversive reaktioner hos patienter med frygtrelaterede lidelser såsom posttraumatisk stresslidelse11, 12. Til trods for at det er en effektiv intervention, er tilbagefaldet af frygtsymptomer rapporteres ofte13, hvilket viser, at sammenlignet med robuste frygtminder er udryddelse mindre varig og tilbøjelig til at forfalde. Frygtreaktioner kan let komme sig på grund af adskillige tilbagefaldsprocesser, såsom spontan genopretning, genindsættelse, fornyelse og hurtig genoptagelse14, 15. Derfor er det af stor betydning at finde bedre tilgange til at forbedre ekstinktionsstyrke og vedholdenhed.

På trods af at både rekonsolidering og ekstinktion udløses af genfinding, er de forskellige processer. Adfærdsmæssigt er rekonsolidering normalt involveret af korte eksponeringer for den betingede stimulus (CS), hvorimod udryddelse kræver længere. Derudover moduleres induktionen af ​​rekonsolidering af andre kontekstuelle og kognitive faktorer, der kollektivt er kendt som randbetingelser16. Ved at variere varigheden af ​​eksponeringen for CS vil det anamnestiske middel selektivt forringe enten rekonsolideringen af ​​det oprindelige spor eller konsolideringen.

Psykobiologi og Neurocomputation lab og Neurobiologi afHukommelselab. Neurosciences Graduate Program, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, PortoAlegre, Brasilien. Korrespondance og anmodninger om materialer skal adresseres til JH (e-mail: biohaubrich@gmail.com) eller JAQ (e-mail: quillfe@ufrgs.br) af ekstinktionssporet17–23. Det faktum, at begge processer ikke finder sted samtidigt, antyder en spordominanseffekt, idet det dominerende spor vil være det første, hvis ikke det eneste, der er påvirket af interferens. Spordominans opstår også, når tidligere konsoliderede frygt- og udryddelsesspor sameksisterer, hvilket påvirker deres genfinding. Under sådanne forhold vil genudsættelse for CS, som potentielt kan aktivere både frygt og ekstinktionsspor, resultere i udtryk for den dominerende hukommelse og hæmning af den anden2. Som diskuteret ovenfor er udryddelse i første omgang dominerende og undertrykker let frygt. Men med tiden overvinder det oprindelige frygtspor hæmningen ved udryddelse og bliver dominerende udtrykt igen14. Derudover er der en dobbelt dissociation mellem de to processer vedrørende molekylære markører såsom Zif26824, calcineurin19, 25 og BDNF26, hvilket indikerer, at begge processer ikke foregår parallelt.

Det foreslås ofte, at den funktionelle rolle af destabilisering-restabiliseringsprocessen bag rekonsolidering er at tilladehukommelseat opdatere for at bevare sin forudsigende og adaptive relevans3, 27-29. For eksempel,hukommelseindhold kan opdateres gennem inkorporering af ny information30–34. Derudover rapporterede flere undersøgelser, at rekonsolidering kan medierehukommelseforbedring og styrkelse30, 35-39 samt hukommelsesdæmpning (uden udryddelse) af afersive oplevelser34, 40. Interessant nok er der undersøgelser, der viser, at i nogle opgaver sker rekonsolidering kun, når hukommelsen endnu ikke er på et asymptotisk niveau41-43, hvilket yderligere fremhæver dens rolle i styrkelsen af ​​hukommelsessporet. Det er dog indtil videre uvist, om et konsolideret ekstinktionsspor kan modificeres ved rekonsolidering.

Rekonsolidering kan åbne et vindue for at tillade den farmakologiske modulering af de reaktiveredehukommelse. Dette ville være parallelt med klassiske eksperimenter, hvor post-reaktivering infusion af amnestiske midler svækker hukommelsen1 eller i det mindste effektivt mindsker frygtresponser ved fobier44. Også post-reaktiveringsinterventioner, der fremmer rekonsolidering, kan føre til forbedret ydeevne45-47. Derfor er specifikke forbindelser administreret under vinduet afhukommelselabilitet under rekonsolidering giver mulighed for positiv eller negativ modulering afhukommelsestyrke.

I betragtning af dens kliniske relevans er der betydelig interesse i udviklingen af ​​mere effektive ekstinktionsbaserede tilgange48. Ekstinktionshukommelser er effektive til forbigående at undertrykke frygtreaktioner, men frygten vender let tilbage2. Udspringer af det faktum, at den genfindingsdrevne proces med rekonsolidering kan føre tilhukommelsestyrkelse, enten adfærdsmæssigt30, 35–39 eller farmakologisk45–47, antager vi, at hvis en udryddelsehukommelseer reaktiveret, kan det gennemgå en rekonsolideringsproces og blive positivt moduleret af adfærdsmæssige og farmakologiske indgreb, hvilket resulterer i øget resistens over for tilbagefald.

For at verificere dette evaluerede vi effekten af ​​korte geneksponeringer til den betingede kontekst hos dyr, der tidligere var trænet i kontekstuel frygtkonditionering (CFC) og underkastet udryddelse. Vi fandt, at spontan bedring blev observeret 2 uger efter udryddelse, men periodiske reaktiveringssessioner var i stand til at forsinke frygtspor-genopblomstring i mindst 4 uger. Denne effekt blev vist at afhænge af L-type spændingsstyrede calciumkanaler (L-VGCC), og en reaktivering en dag efter ekstinktionssessionen viste sig at forårsage, at ekstinktionssporet forbigående blev labilt på en proteinsynteseafhængig måde. Alt sammen tyder dataene stærkt på en rekonsolideringsproces, der virker på ekstinktionssporet. I en protokol, der blev brugt til at undersøge hurtig generhvervelse af frygt - en anden post-ekstinktions-tilbagefaldsproces49 - var en enkelt post-reaktiveringsinfusion af natriumbutyrat (NaB), en HDAC-hæmmer, der positivt regulerer neuronal plasticitet50, i stand til at forbedre udryddelsehukommelsetil det punkt at modstå frygtgenopretning. Evidensen viser, at ekstinktionssporet effektivt kan styrkes ved reaktiveringsbaserede indgreb.

Forsøg 1: Udryddelsehukommelsehæmmer kun forbigående frygtudtryk. Ekstinktion er ny læring, der midlertidigt undertrykker en tidligere erhvervethukommelse. Således, efter udryddelse, eksisterer to modsatrettede minder sammen og konkurrerer om udtryk. I starten er ekstinktionshukommelsen dominerende over frygtsporet og dermed i stand til at hæmme dets udtryk. Denne undertrykkelse er dog ikke permanent. Efterhånden som tiden går, overvinder frygthukommelsen hæmning af udryddelse, og aversive adfærdsreaktioner vender tilbage. Denne proces kaldes spontan bedring15. Først vurderede vi den tidsmæssige profil af spontan bedring i vores CFC-protokol. Derfor var dyrene frygt-betingede og 24 timer senere gennemgik udryddelsestræning. Den næste dag blev der gennemført en testsession for at evaluere ekstinktionsretention. En anden test blev udført 7, 14, 21 eller 28 dage senere for at vurdere spontan bedring (fig. 1A).

Under ekstinktionssessionen faldt fryseniveauerne over tid i alle grupper, hvilket indikerer ekstinktionserhvervelse (Repeated-measures ANOVA, F(5.140)=13.625, P=0.001; Fig. 1B) . Ved test 1 udviste dyr lave fryseniveauer, hvilket indikerer ekstinktionsretention (fig. 1C). For at vurdere spontan restitution blev præstation ved test 1 og test 2 sammenlignet med en gentagne målinger ANOVA, som afslørede en signifikant gruppe x session interaktion (Repeated-measures ANOVA, F(3,27)=8.085, P { {18}}.0005). Tukeys post-hoc viste, at der kun var signifikant genopretning af frygtreaktioner i grupper, hvor test 2 blev udført enten 21 (P=0.013) eller 28 dage (P=0.0002) efter test 1, men ikke tidligere (7 dage: P=0.999; 14 dage: P=0.969; Fig. 1C).

Resultaterne illustrerer den velbeskrevne15 tidsafhængige spontane genopretning af frygthukommelseefter udryddelse. I vores protokol undertrykker ekstinktionshukommelse frygtreaktioner i mindst 14 dage. Efter 14 dage kan spontan genopretning af frygt finde sted. Derfor, selvom udryddelseshukommelsen i starten er dominerende, henfalder med tiden, hvilket giver mulighed for genopblussen af ​​frygtudtryk.

Eksperiment 2: Periodiske reaktiveringer af ekstinktionsspor forsinker dets tidsafhængige henfald (spontan genopretning). I eksperiment 1 fandt vi ud af, at udryddelseshukommelsen til at begynde med er dominerende over det aversivehukommelsespore, hvilket forhindrer dets udtryk. Denne effekt forsvinder på senere tidspunkter, hvor udryddelse ikke længere er i stand til at undertrykke frygtudtryk. Det er blevet rapporteret, at genaktiveringssessioner kan føre tilhukommelsestyrkelse30, 36, 39. Da udryddelsessporet henfalder over tid, forudsagde vi, at dets reaktivering muligvis ville resultere i dets styrkelse, og dermed forbedre dets vedholdenhed og evne til at undertrykke frygt på fjerne tidspunkter.

Figur 1. Ekstinktionhukommelseundlader at undertrykke frygt permanent. (A) Skematisk repræsentation af de eksperimentelle procedurer. Frygtkonditionerede rotter blev underkastet 30-min. udryddelsessession og blev testet 24 timer senere. En anden test blev udført 7, 14, 21 eller 28 dage efter test 1 (N=6 /9 pr. gruppe). (B) Fryseniveauer under ekstinktionssessioner. (C) Fryseniveauer under test. (*) En signifikant forskel mellem test 1 og 2 (P<0.05, repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

Følgelig gennemgik frygtkonditionerede rotter ekstinktionstræning, blev testet 1 dag senere og gentestet 28 dage senere for spontan restitution. I intervallet mellem test og gentest gennemgik en gruppe dyr 3-min. reaktiveringssessioner på dag 7, 14 og 21 dage efter test 1 (reaktiveringsgruppe) eller forblev i deres hjemmebure (kontrolgruppe; fig. 2A) . En yderligere gruppe blev underkastet reaktiveringssessioner, men ingen ekstinktionstræning (ingen ekstinktion plus reaktiveringsgruppe). 7-dagesintervallet mellem reaktiveringer blev valgt, fordi ekstinktion på dette tidspunkt stadig er robust udtrykt (eksperiment 1).

Under ekstinktionstræning udviste dyr effektivt et tidsafhængigt fald i frygtresponser (F(5,110)=30.516, P=0.001; Fig. 2B). På test 1 var der signifikant forskel mellem grupperne (F(2,28)=8.11, P=0.002; Fig. 2C). Tukeys post-hoc viste, at kontrol- og reaktiveringsgrupper viste lignende fryseniveauer (P=0.915), og begge viste lavere frysning end gruppen Ingen ekstinktion plus reaktivering (P=0.007 og P { {21}}.001). Under reaktiveringssessioner viste gentagne foranstaltninger ANOVA en signifikant forskel mellem reaktivering og ingen ekstinktion plus reaktiveringsgrupper (F(1,19)=46.63, P=0.0001) og ingen effekt af session (F) (2,38)=2.28, P=0.116) eller gruppe x sessionsinteraktion (F(2,38)=1.00, P=0.376 Fig. 2D). Sammenligning mellem test 1 og test 2 afslørede signifikant gruppe x sessionsinteraktion (Repeated-measures ANOVA, F(2,28)=3.89, P=0.03). Tukey's post-hoc viste, at frygten i reaktiveringsgruppen og i gruppen No extinction plus reaktivering ikke ændrede sig fra test 1 til test 2 (P=0.844), men der var signifikant frygtgenopretning i kontrolgruppen (P=0.02). Det er vigtigt, at frysning af reaktiveringsgruppe var lavere end alle andre i test 2 (Reaktivering x Kontrol: P=0.007; Reaktivering x Ingen ekstinktion plus reaktivering: P=0.0001; Fig. 2E). Dette viser, at reaktivering styrkede udryddelsenhukommelseog dermed forhindrede frygten genopretning på et fjernt tidspunkt. Navnlig i denne protokol havde reaktiveringssessioner i sig selv ingen effekt på frygtniveauer, når der ikke fandt nogen ekstinktionslæring sted.

Eksperiment 3 - Reaktiveringsinduceret styrkelse af ekstinktion afhænger af L-VGCC'er. For at fremkalde rekonsolidering,hukommelseskal genaktiveres og komme i en labil tilstand. Tidligere værker har vist, at aktivering af spændingsstyrede calciumkanaler (L-VGCC) under reaktivering er påkrævet for destabilisering, og deres blokade af nimodipin forhindrer rekonsolidering i at finde sted51. For at vurdere L-VGCC's rolle i den reaktiveringsinducerede styrkelse af ekstinktion gentog vi det eksperimentelle design af det sidste eksperiment og indgav nimodipin før reaktivering (fig. 3A).

Under ekstinktionstræning udviste dyr et tidsafhængigt fald i frygtreaktioner (F(5,125)=13.55, P=0.001; Fig. 3B). Ved test 1 udviste dyr fra Vehicle- og Nimodipin-grupperne lige lave fryseniveauer (Students t-test; t(25)=0.510, P=0.615; Fig. 3C). Under reaktiveringssessioner var der en signifikant gruppe x sessionsinteraktion (F(2,50)=7.863, P=0.001; Fig. 3D) med nimodipin-behandlede dyr, der udviste øget frygt på tværs af sessioner (P=0.004), hvorimod der ikke var nogen ændring i frygtudtryk hos vehikelbehandlede rotter (P=0.983).

Ved den anden test udviste nimodipin-behandlede rotter højere fryseniveauer end kontroller (t(25)=5.44, P=0.0001; Fig. 3E). Ved at sammenligne ydeevnen af ​​begge testsessioner fandt en ANOVA med gentagne foranstaltninger en signifikant gruppe versus sessionsinteraktion (F(1,20)=7.75, P=0.006). Tukey's post-har afsløret, at præstationen af ​​nimodipin-behandlede dyr ved test 2 var højere end præstationen for alle andre grupper og sessioner (P < 0,001).="" dette="" viser,="" at="" ekstinktionsforøgelse="" ved="" reaktiveringer="" kræver="">

Eksperiment 4: En enkelt ekstinktionssporreaktivering åbner et proteinsyntesefølsomt vindue. Efter genaktivering,hukommelsekan gennemgå en fase, der kræver, at de novo proteinsyntese rekonsolideres og fortsætter. I denne labile tilstand er den således modtagelig for forstyrrelse af proteinsyntesehæmmere1. I tidligere arbejde er det blevet påvist, at udryddelsenhukommelseer modtagelig for rekonsolidering

Figur 2. Periodiske reaktiveringer forhindrer spontan genopretning af ekstinktionhukommelse. (A) Skematisk repræsentation af de eksperimentelle procedurer. Frygtkonditionerede rotter blev underkastet 30-min. udryddelsessessioner eller forblev i deres hjemmebure (ingen udryddelse plus reaktiveringsgruppe: N=7). En test blev udført den næste dag og en gentest 28 dage senere. I intervallet mellem forsøgene blev dyrene reaktiveret med 3-min på dag 7, 14 og 21 efter test 1 eller forblev i deres hjemmebure (Ekstinktion plus ingen reaktiveringsgruppe: N=10; Ekstinktion plus reaktiveringsgruppe: N=14). (B) Fryseniveauer under ekstinktionssessioner. (C) Fryseniveauer under testen. (D) Fryseniveauer under genaktiveringer. (E) Fryseniveauer under gentest. (*) Betydelige forskelle mellem grupperne (P<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

forstyrrelse ved post-reaktiveringsinterferens i det inhiberende undgåelsesparadigme5, 6. Efter at have brugt geneksponeringssessioner i tidligere eksperimenter, evaluerede vi her, om disse geneksponeringer faktisk var reaktiveringssessioner, der involverede rekruttering af proteinsyntese. Derfor var dyrene frygt-betingede, og den næste dag gennemgik en gruppe udryddelsestræning (udryddelsesgruppe), mens andre forblev i deres hjemmebure (gruppe uden udryddelse). På dag 2 efter træning gennemgik alle dyr en kort 3 minutters reaktiveringssession og blev umiddelbart efter injiceret med proteinsyntesehæmmeren cycloheximid (CHX) eller dets vehikel. Den følgende dag blev dyr testet (fig. 4A).

Under ekstinktionssessionen afslørede en ANOVA med gentagne foranstaltninger ekstinktionserhvervelse (F(5,75)=24.08, P=0.001; Fig. 4B). Under reaktivering indikerede en to-vejs ANOVA, at dyr, der tidligere var udryddet, viste lavere fryseniveauer sammenlignet med gruppen uden udryddelse (F(1,43)=23.32, P=0. 001; fig. 4C). Ved testen afslørede en tovejs ANOVA en signifikant gruppe x lægemiddelinteraktion (F(1,43)=22.64, P=0.001). Tukey´s post-hoc afslørede, at cycloheximid-behandlede dyr i gruppen uden udryddelse udviste lavere fryseniveauer end vehikelbehandlede dyr (P=0.01), hvilket indikerer, at frygtenhukommelsevar svækket. I udryddelsesgruppen,

Figur 3. Reaktiveringsinduceret styrkelse af ekstinktion er afhængig af L-type spændingsstyrede calciumkanaler. (A) Skematisk repræsentation af de eksperimentelle procedurer. Frygtkonditionerede rotter blev underkastet 30-min. udryddelsessession. En test blev udført den næste dag og en gentest 28 dage senere. I intervallet mellem forsøgene blev dyrene reaktiveret med 3-min på dag 7, 14 og 21 efter test 1. Nimodipin (N=15) eller dets vehikel (N=12) blev sc. infunderes 30 minutter før hver reaktivering (B) Fryseniveauer under ekstinktionssession. (C) Fryseniveauer under testen. (D) Fryseniveauer under genaktiveringer. (E) Fryseniveauer under gentest. (*) Betydelige forskelle mellem grupperne (P<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="" test).="" chx-treated="" animals="" showed="" higher="" freezing="" levels="" than="" vehicle-treated="" ones="" (p="0.001)," indicating="" that="" extinction="">hukommelseblev forstyrret.

Følgelig, når der ikke blev udført ekstinktionstræning, destabiliseres frygtsporet ved reaktivering og forstyrres af CHX. Når udryddelses- og frygtminderne eksisterer sideløbende, sker der en spor dominanseffekt og udryddelsenhukommelseer den, der lider af destabilisering, hvilket kræver, at de novo proteinsyntese fortsætter. Dette fund viser, at ekstinktionssporet effektivt blev reaktiveret, hvilket tyder på, at rekonsolidering er den mekanisme, der medierer ekstinktionshukommelsens styrkelse.

Eksperiment 5 – En anden ekstinktionsspor-tilbagefaldsproces, Rapid Reacquisition, kan tilbageholdes farmakologisk med en post-reaktiveringsbehandling. Det er blevet rapporteret, at rekonsolidering kan forstærkes ved post-reaktivering administration af forbindelser såsom HDAC-hæmmere, hvilket resulterer i øget ydeevne i en post-reaktivering langsigtethukommelsetest45, 52–54. Her spurgte vi, om ekstinktion kunne moduleres positivt ved post-reaktiveringsbehandling med HDAC-hæmmeren natriumbutyrat (NaB). Vi anvendte således en rekonditioneringsprotokol, der tillader påvisning af relative ændringer i styrken af ​​frygt og ekstinktionshukommelse i henhold til forholdet mellem frygtgenerhvervelse. For eksempel, normalt efter standard ekstinktionsprocedurer, er reacquisition hurtig32, 34, men den kan være langsom under visse omstændigheder, såsom omfattende ekstinktionslæring eller svag indledende konditionering14.

Frygtkonditionerede rotter gennemgik udryddelsestræning og en reaktiveringssession 24 timer senere. Umiddelbart efter reaktivering blev NaB eller dets vehikel infunderet (ip). I de fire næste dage gennemgik dyrene en blandet testning og en svag rekonditioneringsprocedure for at vurdere frygtgenerhvervelse. Hver session bestod af en 4 minutters test efterfulgt af et svagt fodchok og en yderligere 30 s periode i boksen (fig. 5A). Under udryddelsestræning blev dyr vist

Figur 4. Ekstinktionhukommelsekræver de novo proteinsyntese efter dets reaktivering for at fortsætte. (A) Skematisk repræsentation af de eksperimentelle procedurer. Frygtkonditionerede rotter blev underkastet 30-min. udryddelsessessioner eller forblev i deres hjemmebure. En reaktiveringssession blev udført 7 dage senere efterfulgt af en test næste dag. Umiddelbart efter reaktivering modtog dyr ip-infusion af cycloheximid (Ekstinktionsgruppe: N=10; Ingen-udryddelsesgruppe: N=14) eller dets vehikel (Ekstinktionsgruppe: N=9; Ingen-udryddelse gruppe: N=11). (B) Fryseniveauer under ekstinktionssession. (C) Fryseniveauer under genaktiveringssession. (D) Fryseniveauer under testsessioner. (*) Betydelige forskelle mellem grupperne (P<0.05, repeated-measures="" or="" two-way="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

et tidsafhængigt fald i frygtresponser (F(5,110)=32.89, P=0.001; Fig. 5B). Ved reaktivering var der ingen forskel mellem grupper senere infunderet med NaB eller Veh (t(22)=0.59, P=0.56; Fig. 5C). Under de 4 testsessioner (der sluttede med en svag rekonditionering, hvis effekt blev analyseret i den følgende test; Fig. 5D), indikerede ANOVA med gentagne foranstaltninger en signifikant lægemiddel x sessionsinteraktion (F(3,66)=4.82 , P=0.004). Tukeys post-hoc afslørede, at under den første test var Veh- og NaB-grupper ens i fryseniveau (P=0.99). Efter en rekonditioneringssession viste Veh-behandlede prompte frygtgenerhvervelse (P=0.0002), hvorimod NaB-behandlet ikke gjorde det (P=0.99). Den NaB-behandlede gruppe viste kun signifikant genoptagelse efter tre rekonditioneringssessioner ved test 4 (P=0.002).

Disse resultater viser, at post-reaktivering NaB-behandling gjorde udryddelsenhukommelsemodstandsdygtig over for hurtig genanskaffelse. Dyr fra vehikelgruppen viste let besparelser efter en enkelt svag genoptræningssession.

Figur 5. Post-reaktivering infusion af, enhukommelse-forstærkende lægemiddel, styrker også ekstinktionsspor ved at forhindre hurtig generhvervelse af frygt. (A) Skematisk repræsentation af de eksperimentelle procedurer.

Frygtkonditionerede rotter blev underkastet 30-min. udryddelsessession. En reaktivering blev udført 24 timer senere efterfulgt af den øjeblikkelige administration af natriumbutyrat (NaB; N=12) eller dets vehikel (N=12). I de næste 3 dage gennemgik dyrene testsessioner, der sluttede med levering af et svagt fodchok plus yderligere 30 s kontekstuel udforskning (hurtig genanskaffelsesprotokol). En dag senere blev der udført en standardtest. (B) Fryseniveauer under ekstinktionssession. (C) Fryseniveauer under reaktivering. (D) Fryseniveauer under test. (*) Betydelige forskelle mellem grupperne (P<0.05, independent-samples="" t-test="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

NaB-behandlede dyr viste på sin side kun besparelser efter 3 rekonditioneringssessioner. Dette viser, at ekstinktionssporet kan styrkes ved farmakologiske indgreb efter reaktivering.

Diskussion

I denne undersøgelse demonstrerer vi, at en kontekstuel frygtudryddelsehukommelsekan forbedres med korte genaktiveringssessioner. For det første viste vi, at efter ekstinktionslæring kan spontan genopretning af frygt observeres 21 dage efter, men ikke 14 dage eller tidligere (eksperiment 1). Dernæst fandt vi, at når udryddelsehukommelseblev periodisk reaktiveret, dets tidsafhængige henfald blev forhindret, og ingen spontan genopretning af frygt blev verificeret i mindst 28 dage (eksperiment 2), en effekt, der også viste sig at være medieret af L-VGCC'er (eksperiment 3). For at verificere, om proteinsyntese blev rekrutteret af geneksponeringssessionerne, infunderede vi cycloheximid efter reaktivering og observerede forekomsten af ​​et nyt plasticitetsvindue, hvilket understøttede ideen om, at rekonsolidering er den proces, der finder sted (eksperiment 4). Endelig, ved at anvende en anden protokol rettet mod en anden tilbagefaldsmekanisme for ekstinktionshukommelse – hurtig generhvervelse (besparelser) – verificerede vi, at post-reaktivering HDAC farmakologisk hæmning også var i stand til at forbedre ekstinktionssporet, som bevist af den observerede modstand mod hurtig genoptagelse af frygt reaktion.

Det er kendt, at tabet af betingede reaktioner efter ekstinktion ikke er permanent55, da ekstinktion faktisk ikke er afhængig afhukommelsesletning. I stedet fremmer det ny læring, som forhindrer udtryk for den tidligere lagrede association14. Derfor eksisterer udryddelses- og frygtminder side om side og konkurrerer om udtryk. Dette fører til en spor-dominans effekt med ekstinktion, der hæmmer frygtudtryk. Udryddelsen forfalder dog let, og frygthukommelsen overvinder sin hæmning gennem adskillige tilbagefaldsmekanismer15, 20. Den mest tydelige af disse er frygtens tilbagevenden ved blot tidens gang, kaldet spontan bedring15. Derudover kan frygthukommelsen blive viklet ud af hæmning af udryddelse af adfærdsfænomener som hurtig generhvervelse, genindsættelse og fornyelse14. Udryddelsens forfaldhukommelseover tid er vist i eksperiment 1. I første omgang undertrykker ekstinktion betingede frygtreaktioner. Men på fjerne tidspunkter forsvinder denne effekt, hvilket resulterer i spontan bedring. Hurtig generhvervelse observeres i eksperiment 5. Kontrolrotter udviser hurtigt høj frygt efter en enkelt svag rekonditioneringssession. Nye metoder designet til at omgå udryddelsens dårlige vedholdenhed ved at øge dens styrke ville potentielt forbedre psykiatriske behandlinger af frygt-relaterede lidelser48.

Siden udryddelsehukommelsesvækkes over tid og mister sin evne til at undertrykke frygt15, hvilket ville være gavnligt at forhindre dette forfald. I eksperiment 2 fandt vi ud af, at persistensen af ​​en ekstinktionshukommelse kan moduleres positivt ved dens simple reaktivering. Følgelig var der ingen tegn på spontan bedring, når dyr gennemgik korte reaktiveringer, selv 4 uger efter ekstinktionstræning. Interessant nok øgede reaktivering ikke frygtreaktioner hos dyr, der ikke blev underkastet udryddelsestræning som tidligere rapporteret30, sandsynligvis på grund af en lofteffekt. Derfor var korte genaktiveringssessioner i stand til at forhindre udryddelsens tidsafhængige henfald på en langvarig måde.

Det foreslås ofte, at rekonsolidering finder sted for at tilladehukommelseindhold, der skal opdateres, og bibeholde dets adaptive relevans for bedre at vejlede fremtidig adfærd. Rapporter om rekonsolidering-drevet hukommelsesopdatering viser, at det kan ske gennem inkorporering af ny information32, 34 eller ved at styrke eksisterende associationer30, 35-39. Det er vigtigt at påpege, at selv når styrkelsen er resultatet af yderligere læring fra et identisk andet læringsforsøg, er destabilisering-restabiliseringsprocessen stadig påkrævet36. Derfor antog vi, at den reaktiveringsdrevne styrkende effekt observeret i eksperiment 2 kunne medieres af en rekonsolideringsproces, som omfatter en reaktiveringsafhængig destabiliseringsfase efterfulgt af en restabiliseringsfase, der kræver de novo proteinsyntese. Tidligere værker har vist, at L-VGCC-blokkeren nimodipin forhindrer hukommelsesdestabilisering og dermed forhindrer rekonsolidering51. I forsøg 3 fandt vi, at den styrkende effekt af reaktivering blev forhindret af L-VGCC-blokkeren nimodipin, som understøtter inddragelsen af ​​rekonsolidering i forbedringen af ​​ekstinktionsspor. Nimodipin har også været impliceret i svækkelsen af ​​ekstinktionserhvervelse såvel som konsolidering56, 57. I vores eksperimentelle protokol blev nimodipin imidlertid injiceret flere dage efter ekstinktionssessionen fandt sted, hvilket gjorde dets virkninger forskellige fra dem, der blev opnået omkring den indledende ekstinktionsindlæring. Således, uanset hvilken proces der faktisk blokeres – rekonsolidering eller ekstinktion – viser eksperiment 3, at reaktiveringsinduceret styrkelse af ekstinktion kræver aktivering af-VGCC for at finde sted.

Rekonsolidering er en proces, hvor en tidligere etablerethukommelsereaktiveres og bliver labil, hvilket kræver de novo proteinsyntese for at fortsætte. For yderligere at løse spørgsmålet om, hvorvidt en reaktiveringssession inducerer rekonsolidering af ekstinktionssporet, undersøgte vi effekten af ​​post-reaktiveringsproteinsyntesehæmning hos dyr, der tidligere har gennemgået ekstinktionstræning (eksperiment 4). Hos dyr, der ikke undergik udryddelse, forstyrrede post-reaktivering proteinsyntesehæmning rekonsolidering af den kontekstuelle frygthukommelse, hvilket resulterer i lave fryseniveauer. Det modsatte adfærdsmæssige resultat fandt sted i gruppen, der gennemgik udryddelse: i testen udviste CHX-behandlede dyr høje fryseniveauer, hvilket indikerer, at udryddelseshukommelsen var forstyrret. I dette eksperiment, da ekstinktion blev forstyrret af proteinsyntesehæmning efter en enkelt geneksponering (som bekræftet i en test den følgende dag), blev ingen ekstra geneksponeringssessioner undersøgt. Resultaterne af dette eksperiment tyder på, at udryddelsessporet blev forhindret til et punkt, at det ikke længere var i stand til at undertrykke frygt. Tidligere arbejde5, 7 indikerer, at reaktivering ikke blot fremmede "yderligere ekstinktionslæring", men fik ekstinktionssporet til at gå ind i en labil tilstand, der krævede rekonsolidering for at fortsætte. Man skal bemærke, at enten udryddelseshukommelsen eller frygthukommelsen blev udtrykt på tidspunktet for reaktivering. Følgelig var det spor, der er dominerende aktiveret af reaktiveringen, det spor, der var destabiliseret og dermed svækket af proteinsyntesehæmningen.

Til sidst vurderede vi, om ekstinktionssporet kunne moduleres positivt ved post-reaktiveringsbehandling med enhukommelse-forstærkende lægemiddel. Adskillige farmakologiske midler har vist sig at forstærkehukommelsekonsolidering og rekonsolidering, herunder HDAC-hæmmere såsom natriumbutyrat45, 52, 53. I eksperiment 5 fandt vi, at post-reaktivering NaB-behandling forbedrede ekstinktionssporet, hvilket tillod det at modstå tilbagefald ved en hurtig genanskaffelsesprotokol. Dyr behandlet med NaB udviste bemærkelsesværdig modstand mod besparelser efter en hurtig genanskaffelsesprocedure. Køretøjsbehandlede dyr viste besparelser efter en enkelt svag rekonditioneringssession, hvorimod NaB-behandlede rotter krævede 3 rekonditioneringssessioner for at vise den samme rekonditioneringseffekt. Dette viser, at selv en kort genaktiveringssession gør et ekstinktionsspor modtageligt for forbedring ved positiv interferens. Ekstinktionsforbedring ved post-reaktivering HDAC-hæmning, som rapporteret her, tyder på, at den samme gavnlige effekt kunne opnås med andre hukommelsesfremmende lægemidler for at hæmme frygtudtryk over tid.

Muligheden for, at den reaktiveringsafhængige styrkelse af ekstinktion kunne være blevet medieret af yderligere ekstinktion i stedet for rekonsolidering, skal overvejes. Det er blevet rapporteret, at selv korte geneksponeringer af en kontekst kan føre til udryddelse, når de udføres på fjerne tidspunkter35. Selvom den eksperimentelle protokol i det papir adskiller sig fra vores i et betydeligt antal aspekter, har vi inkluderet en yderligere forsøgsgruppe for at kontrollere denne specifikke bekymring: i eksperiment 2 gennemgik gruppen "No-extinction plus reactivation" de samme tre reaktiveringssessioner, men blev ikke underkastet en ekstinktionssession. Denne gruppe viste ingen frygtdæmpning, hverken under reaktiveringer eller testen, forskellig fra hvad man ville forvente ved udryddelse. Yderligere beviser kommer fra eksperiment 4. Hvis en kort eksponering inducerede yderligere ekstinktion, ville cycloheximidbehandlingen kun have forstyrret den gradvise indlæring af den session og efterladt det, der tidligere var lagret. Imidlertid har post-reaktivering cycloheximid forstyrret ekstinktionssporet og afskaffet hæmningen af ​​frygt i en test udført 24 timer senere. Afbrydelsen af ​​et tidligere lagret spor ved post-reaktivering af proteinsyntesehæmning er i overensstemmelse med rekonsolideringsfortolkningen. I betragtning af konvergensen af ​​alle adfærdsmæssige og farmakologiske beviser opnået med det nuværende eksperimentelle design indikerer vores resultater, at det, der fandt sted under reaktiveringssessionerne, var en rekonsolideringsproces, der medierede styrkelsen af ​​ekstinktionhukommelse.

Frygtopsving efter udryddelsesbaserede tilgange er afgørende at forstå for at forbedre adfærdsmæssige og farmakologiske behandlinger af angstlidelser. Faktisk kunne udryddelsesforbedring betragtes som et kendetegn for psykiatrisk forskning. Her fandt vi ud af, at korte reaktiveringssessioner var effektive til at forhindre spontan genopretning af uddød frygthukommelse. Denne effekt blev medieret af L-VGCC'er og involverer proteinsyntese, hvilket kraftigt antyder, at rekonsolidering er mekanismen bag denne styrkelse. Vi fandt også, at positiv farmakologisk modulation efter reaktivering var i stand til at forhindre hurtig generhvervelse af frygt. Tilsammen viser disse resultater, at udryddelse kan drage fordel af reaktiveringsbaserede indgreb, der sigter mod at øge dens styrke og vedholdenhed. Det føjer også til forestillingen om, at rekonsolidering og ekstinktion ikke er fuldstændig separate processer, som nuværende paradigmer ofte antyder58. På grund af ekstinktionsbaserede kognitive adfærdsterapiers fremtræden, bringer disse resultater relevant indsigt til både grundlæggende og klinisk forskning.

Metoder

Emner. Wistar-hanrotter fra vores ynglekoloni med en vægt på 300-350 g, i alderen 60-70 dage, blev brugt. Dyrene blev anbragt i plastikbure, fire til fem pr. bur, med vand og mad tilgængeligt ad libitum. Alle forsøg blev udført i henhold til national dyreplejelovgivning og retningslinjer (brasiliansk lov 11794/2008) og godkendt af universitetets etiske komité.

Kontekstuel frygtkonditionering. CFC-kammeret bestod af en oplyst plexiglaskasse (25.0 ×25.0-cm gitter af parallelle 0.1-cm kaliber rustfri stålstænger med en afstand på 1.{{ 7}} cm fra hinanden). I konditioneringssessionen blev rotter anbragt i kammeret i 3-min. og fik derefter to 2-sekunders 0,7 mA fodchok adskilt af et 30-sekundersinterval. Dyrene blev holdt i konditioneringsmiljøet i yderligere 30 sekunder, før de vendte tilbage til deres hjemmebure.

Hukommelseekstinktion, reaktivering og testsessioner. Korte eller lange kontekstgeneksponeringer blev brugt til at inducere henholdsvis hukommelsesreaktivering eller ekstinktionslæring. Ekstinktionstræning bestod af 30-min. gen-eksponering for den betingede kontekst og fandt altid sted 24 timer efter CFC. Hukommelsesgenaktiveringssessioner bestod af en 3-min. gen-eksponering for den betingede kontekst. I forsøg 2 og 3 blev reaktiveringer udført på dag 7, 14 og 21 efter test 1. I forsøg 4 og 5 blev de udført 24 timer efter ekstinktionstræning.

Testsessioner bestod af en 4-min. geneksponering af konteksten. På forsøg 1, 2 og 3 blev den første test udført 24 timer efter ekstinktionstræningen, og en anden test blev udført 7, 14, 21 eller 28 dage senere for at vurdere frygten for spontan bedring. I forsøg 4 og 5 blev testsessionen udført 24 timer efter reaktivering for at vurdere effekten af ​​farmakologiske manipulationer efter reaktivering.

For at løse hurtig genanskaffelse (eller "besparelser"; eksperiment 5) gennemgik dyrene en 4-min. test efterfulgt af et svagt fodchok (én 2-sek. 0,4 mA). Efter yderligere 30 sekunder vendte de tilbage til deres hjemmebure. Denne procedure blev gentaget dagligt tre gange, efterfulgt af en yderligere test en dag senere. I denne procedure blev frysning altid scoret før fodstødet (der bestod af en standard testsession). Dette gjorde det muligt for os både at måle ydeevne og underkaste dyrene en svag rekonditioneringssession.

Narkotika. Proteinsyntesehæmmer cycloheximid (CHX; Sigma) blev opløst i sterilt isotonisk saltvand med 1 procent dimethylsulfoxid til en koncentration på 2,2 mg/ml. Cycloheximid eller dets vehikel blev injiceret intraperitonealt (ip) umiddelbart efter reaktiveringen. Det totale injicerede volumen var 1 ml/kg.

L-type spændingsstyrede calciumkanaler (LVGCC'er) antagonist nimodipin (Sigma) blev opløst i sterilt isotonisk saltvand med 8 procent dimethylsulfoxid til en koncentration på 16 mg/ml. Nimodipin eller dets vehikel blev injiceret subkutant 30 minutter før reaktiveringssessionerne. Det totale injicerede volumen var 1 ml/kg.

Natriumbutyrat (NaB; Sigma), en histondeacetylase (HDAC)-hæmmer, blev opløst i sterilt isotonisk saltvand til en koncentration på 0.6g/ml. Det totale injicerede volumen var 1 ml/kg ip umiddelbart efter reaktivering.

Dataanalyse.Hukommelseblev målt ved at kvantificere fryseadfærd og udtrykt som en procentdel af den samlede sessionstid. Frysning blev bedømt af en observatør, der var blind for de eksperimentelle forhold. Homoskedasticitet og normalitet af datafordelingen blev bekræftet med henholdsvis Levenes test og Kolmogorov-Smirnov test. Ekstinktionssessioner blev analyseret under anvendelse af Repeated-Measures ANOVA. Reaktiveringssessioner blev analyseret ved hjælp af Students t-test, to-vejs ANOVA eller Repeated-Measures ANOVA, efterfulgt af Tukey post-hoc test. Testsessioner blev analyseret ved hjælp af Students t-test, Two-way ANOVA eller Repeated-Measures ANOVA, efterfulgt af Tukey post-hoc test.

Reference

1. Nader, K., Schafe, GE & Le Doux, JE Frygterindringer kræver proteinsyntese i amygdala for rekonsolidering efter genfinding. Nature 406, 722-6 (2000).(2010).

3. Finnie, PSB & Nader, K. Metaplasticitetsmekanismernes rolle i reguleringenhukommelsedestabilisering og rekonsolidering. Neurosci. Bioadfærd. Rev. 36, 1667-707 (2012).

5. Rossato, JI, Bevilaqua, LR, Izquierdo, I., Medina, JH & Cammarota, M. Retrieval inducerer rekonsolidering af frygtudryddelsehukommelse. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 107, 21801-21805 (2010).

7. Eisenberg, M. & Dudai, Y. Genkonsolidering af frisk, fjern og slukket frygthukommelse i Medaka: gammel frygt dør ikke. Eur J Neurosci 20, 3397-3403 (2004).

8. Rosas-Vidal, L., Rodriguez-Romaguera, J., Do-Monte, F. & Anderson, R. Targeting the reconsolidation of extinction memories: a novel potential strategy to treatment anxiety disorders. Mol. Psykiatri 20, 1264-1265 (2015).

9. Bouton, ME, Westbrook, RF, Corcoran, KA & Maren, S. Kontekstuel og tidsmæssig modulation af ekstinktion: adfærdsmæssige og biologiske mekanismer. Biol. Psychiatry 60, 352-60 (2006).

11. Furini, C., Myskiw, J. & Izquierdo, I. Læren om frygtudryddelse. Neurosci. Bioadfærd. Rev. 47, 670-683 (2014).

13. Vervliet, B., Craske, MG & Hermans, D. Frygt udryddelse og tilbagefald: state of the art. Annu. Rev. Clin. Psychol. 9, 215-48 (2013). (2002).

15. Rescorla, Ra Spontan bedring. Lære. Mem. 11, 501-9 (2004).

17. Pedreira, ME & Maldonado, H. Proteinsyntese forhindrer rekonsolidering eller ekstinktion afhængigt af påmindelsens varighed. Neuron 38, 863–869 (2003).

18. Bustos, SG, Maldonado, H. & Molina, VA Midazolams forstyrrende virkning på frygthukommelsesrekonsolidering: afgørende indflydelse af reaktiveringstidsrum og hukommelsesalder. Neuropsychopharmacology 34, 446-57 (2009).

19. Merlo, E., Milton, AL, Goozée, ZY, Theobald, DE & Everitt, BJ Rekonsolidering og ekstinktion er adskillelige og gensidigt eksklusive processer: adfærdsmæssige og molekylære beviser. J. Neurosci. 34, 2422-31 (2014).

20. Eisenberg, M., Kobilo, T., Berman, DE & Dudai, Y. Stabilitet af hentet hukommelse: omvendt korrelation med spordominans. Science 301, 1102-1104 (2003).

21. Suzuki, A. et al. Hukommelsesrekonsolidering og ekstinktion har distinkte tidsmæssige og biokemiske signaturer.J. Neurosci. 24, 4787-95

(2004).

22. Lee, JLC, Milton, AL & Everitt, BJ Rekonsolidering og udryddelse af betinget frygt: hæmning og potensering. J. Neurosci. 26, 10051-6 (2006).

23. Flavell, CR & Lee, JL Rekonsolidering og udryddelse af appetitiv pavlovsk hukommelse. Neurobiol Learn Mem 104, 25–31

(2013).

24. Tedesco, V., Roquet, RF, DeMis, J., Chiamulera, C. & Monfils, M.-H. Ekstinktion, anvendt efter genfinding af auditiv frygthukommelse, øger selektivt zink-fingerprotein 268 og phosphoryleret ribosomalt protein S6-ekspression i den præfrontale cortex og laterale amygdala. Neurobiol. Lære. Mem. 115, 78-85 (2014).

25. de la Fuente, V., Freudenthal, R. & Romano, A. Rekonsolidering eller ekstinktion: transkriptionsfaktorskifte ved bestemmelse af hukommelsesforløb efter genfinding. J. Neurosci. 31, 5562-73 (2011).

27. Lee, JLC Rekonsolidering: opretholdelse af hukommelsesrelevans. Tendenser Neurosci. 32, 413–20 (2009).

29. Nadel, L. & Hardt, O. Opdatering om hukommelsessystemer og processer. Neuropsychopharmacology 36, 251-73 (2011).

31. Forcato, C., Rodríguez, MLC, Pedreira, ME & Maldonado, H. Rekonsolidering hos mennesker åbner op for deklarativ hukommelse til indgangen til ny information. Neurobiol. Lære. Mem. 93, 77-84 (2010).

32. Monfils, M.-H., Cowansage, KK, Klann, E. & LeDoux, JE Udryddelse-rekonsolidering grænser: nøglen til vedvarende dæmpning af frygtminder. Videnskab (80-.). 324, 951-955 (2009).

33. Hupbach, A., Gomez, R., Hardt, O. & Nadel, L. Rekonsolidering af episodiske minder: en subtil påmindelse udløser integration af ny information. Lære. Mem. 14, 47-53 (2007).

34. Haubrich, J. et al. Rekonsolidering gør det muligt at opdatere frygthukommelsen til et mindre aversivt niveau gennem inkorporering af appetitlig information. Neuropsychopharmacology 40, 315-326 (2015).

35. Inda, MC, Muravieva, EV & Alberini, CM Hukommelseshentning og tidens gang: fra rekonsolidering og styrkelse til udryddelse. J. Neurosci. 31, 1635-1643 (2011).

(2008).

37. Fukushima, H. et al. Forbedring af frygthukommelse ved genfinding gennem rekonsolidering. Elife 2014, 1-19 (2014).

39. Forcato, C., Rodríguez, MLC & Pedreira, ME Gentagne labiliserings-rekonsolideringsprocesser styrker den deklarative hukommelse hos mennesker. PLoS One 6, e23305 (2011).

(2015).

41. Garcia-DeLaTorre, P., Rodriguez-Ortiz, CJ, Arreguin-Martinez, JL, Cruz-Castaneda, P. & Bermudez-Mattoni, F. Samtidige, men ikke uafhængige anisomycin-infusioner i insulær cortex og amygdala hindrer stabilisering af smagshukommelsen når den er opdateret. Lære. Mem. 16, 514-519 (2009).

42. Lee, JLC Hukommelsesrekonsolidering medierer opdateringen af ​​hippocampus hukommelsesindhold. Foran. Opfør dig. Neurosci. 4, 168 (2010).

44. Souter, M. & Kindt, M. En brat transformation af fobisk adfærd efter et amnesisk middel efter hentning. Biol Psychiatry, doi:10.1016/j.biopsych.2015.04.006 (2015).

45. Bredy, TW & Barad, M. Histon-deacetylase-hæmmeren valproinsyre øger erhvervelse, ekstinktion og rekonsolidering af betinget frygt. Lære. Mem. 15, 39-45 (2008).

47. Tronson, NC, Wiseman, SL, Olausson, P. & Taylor, JR Bidirektionel adfærdsplasticitet af hukommelsesrekonsolidering afhænger af amygdalar proteinkinase A. Nat. Neurosci. 9, 167-9 (2006).

48. Fitzgerald, PJ, Seemann, JR & Maren, S. Kan frygt udryddelse forstærkes? En gennemgang af farmakologiske og adfærdsmæssige fund. Brain Res. Tyr. 105, 46-60 (2014).

49. Bouton, ME, Winterbauer, NE & Todd, TP Tilbagefaldsprocesser efter udryddelsen af ​​instrumentel læring: Fornyelse, genoplivning og generhvervelse. Opfør dig. Processer 90, 130–41 (2012).

50. Gräff, J., Kim, D., Dobbin, MM & Tsai, L. Epigenetisk regulering af genekspression i fysiologiske og patologiske hjerneprocesser. 603–649, doi:10.1152/physrev.00012.2010 (2011).

51. Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, PW & Kida, S. Aktivering af LVGCC'er og CB1-receptorer, der kræves til destabilisering af reaktiverede kontekstuelle frygtminder. Lære. Mem. 15, 426-33 (2008).

52. Federman, N., Fustinana, MS & Romano, A. Rekonsolidering involverer histonacetylering afhængigt af hukommelsens styrke. Neuroscience 219, 145-156 (2012).

53. Villain, H., Florian, C. & Roullet, P. HDAC-hæmning fremmer både initial konsolidering og rekonsolidering af rumlig hukommelse hos mus. Sci. Rep. 6, 27015 (2016).

54. Stefanko, DP, Barrett, RM, Ly, AR, Reolon, GK & Wood, MA Modulering af langtidshukommelse til objektgenkendelse via HDAC-hæmning. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 9447-52 (2009).

56. Flavell, CR, Barber, DJ & Lee, JLC Behavioural memory rekonsolidering af mad- og frygtminder. Nat. Commun. 2, 504

(2011).

57. Cain, CK, Blouin, AM & Barad, M. L-type spændingsstyrede calciumkanaler er nødvendige for udryddelse, men ikke til erhvervelse eller udtryk, betinget frygt hos mus. J. Neurosci. 22, 9113-9121 (2002).

58. Almeida-Correa, S. & Amaral, OB Hukommelseslabilisering i rekonsolidering og ekstinktion – bevis for et fælles plasticitetssystem? J Physiol Paris 108, 292-306 (2014).

Anerkendelser

Vi takker fru Zelma Regina V. de Almeida for hendes venlige og professionelle tekniske assistance, og M.Sc. Jane Zhang for hendes generøse og kompetente sprogrevision. Dette arbejde blev støttet af stipendier og tilskud fra CAPES (MEC), CNPq (MCT) og PROPESQ (UFRGS). Alle forfatterne erklærer, at de ikke har nogen anden kompensationskilde end primær institution og føderal finansiering.

Forfatterbidrag

JH designede undersøgelsen, udførte eksperimenterne, analyserede dataene og skrev manuskriptet. AM, FZB, APC og ROS hjalp i eksperimenterne og bidrog med ideer. LOA og JAQ hjalp med at designe undersøgelsen og skrive manuskriptet. Alle forfattere har gennemgået manuskriptet.

Yderligere Information

Konkurrerende interesser: Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.

Udgiverens note: Springer Nature forbliver neutral med hensyn til jurisdiktionskrav i offentliggjorte kort og institutionelle tilknytninger.

Open Access Denne artikel er licenseret under en Creative Commons Attribution 4.0 International