Neuroprotektive egenskaber af 4-Aminopyridin

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP, og Philipp Albrecht, MD

Abstrakt

Som en antagonist af spændingsstyrede kaliumkanaler (Kv) bruges 4-aminopyridin (4-AP) som symptomatisk terapi ved flere neurologiske lidelser. Forbedringen af ​​synsfunktion og motoriske færdigheder og lindring af træthed hos patienter med MS er blevet tilskrevet 4-AP. Dets depotformulering (fampridin) er blevet godkendt til symptomatisk behandling af gangbesvær ved MS. De gavnlige virkninger blev forklaret ved blokaden af ​​aksonale Kv-kanaler, hvorved ledning langs demyelinerede axoner blev forbedret. Et stigende antal beviser tyder dog på, at 4-AP kan have yderligere egenskaber ud over den symptomatiske virkemåde. I denne gennemgang opsummerer vi prækliniske og kliniske data om mulige neurobeskyttende træk ved 4-AP.

4-Aminopyridin ved neurologisk sygdom

Aminopyridiner er en gruppe af monoamin- og diaminoderivater af pyridin, som hæmmer spændingsstyrede kaliumkanaler (Kv). Især de 2 bredspektrede kaliumkanalblokkere 4-aminopyridin (4-AP) og 3,4-aminopyridin (3,4- DAP) er blevet brugt som nye undersøgelsesstoffer ved forskellige neurologiske sygdomme. Selvom 3,4-DAP er en mere potent antagonist af kaliumkanaler, 4-passer AP lettere blod-hjerne-barrieren1 og var klinisk overlegen hos patienter med MS, især til forbedring af synsfunktionen,2 træthed ,3 kognition,4 og ganghastighed.1 Derudover er 4-AP blevet rapporteret at lette neural ledning ved andre neurologiske sygdomme end MS.5,6

Virkninger af cistanche: Beskyt neuroner

I sunde axoner er kanalerne Kv1.1 og Kv1.2 samlet i nærheden af ​​Ranviers noder.7 Disse kanaler bliver blotlagt efter demyelinisering og migrerer gennem det demyelinerede segment. Samtidig øges disse kanalers udtryk flere gange.8 Denne fejlrettede omfordeling af Kv-kanalerne forringer transmissionen af ​​aktionspotentialer, hvilket fører til permanent invaliditet. 4-AP blokerer disse udsatte kaliumkanaler og forbedrer derfor signaltransduktion.9,10Kv1.3-kanalen blev opdaget i humane T-celler,11 viste sig at være stærkt udtrykt på inflammatoriske infiltrater i MS-hjernen,12 og er udtrykt på makrofager, mikroglia og effektorhukommelses-T-celler.13 Selektive og ikke-selektive Kv1.3-kanalblokkere kan derved give immunmodulerende egenskaber ved at hæmme celleproliferation og proinflammatorisk cytokinsekretion.14 Undersøgelser før 2009 kunne ikke fastslå 4-AP som en symptomatisk behandling af MS, fordi lægemiddelniveauer i blodet hos patienter var uforudsigelige, hvor for høje doser var forbundet med risikoen for epileptiske anfald og nedsat bevidsthed.15-18 Derfor blev fampridin, depotformuleringen af ​​4-AP udviklet og er efterfølgende blevet godkendt til symptomatisk behandling af gangbesvær i MS.19-23 Interessant nok, for nylig tyder en stigende mængde af beviser på, at ud over disse wid Kun kendte symptomatiske virkninger, 4-AP kan have yderligere beskyttende egenskaber.

Evaluering af 4-AP ved hjælp af in vitro-modeller

In vitro er neurobeskyttende virkninger af 4-AP blevet observeret i adskillige modeller. Da motorneuroner (MN'er) differentierede fra inducerede pluripotente stamceller fra patienter med amyotrofisk lateral sklerose, der bærer mutationer af FUS- og SOD1-genet, blev udsat for 4-AP, blev ion-kanal-ubalancer rettet, neuronale aktivitetsniveauer hævet, endoplasmatisk retikulum stress formindsket, og caspase-aktivering svækket. De mutante MN'er viste lavere natriumstrømme og Na plus/K plus-forhold, hvilket i det mindste delvist kan være årsagen til deres hyperexcitabilitet. Dette blev vendt efter 4-AP-behandling, hvilket førte til nedsatte kaliumstrømme og genoprettede spontane aktivitetsmønstre og synaptisk input i MN'erne.24 4-AP-behandling reducerede frigivelsen af ​​proinflammatoriske mediatorer fra humane mikroglia udfordret med amyloid- beta og beskyttede dyrkede rotte hippocampale neuroner badet i supernatanter fra amyloid-beta-behandlede mikroglia.25 Et 4-AP-derivat, der angiveligt reducerede -synukleinakkumulering, oxidation, inflammation og Rho-kinaseaktivering i en in vitro-model for Parkinsons sygdom.26 Andre in vitro undersøgelser rapporterede, at 4-AP øgede cAMP-respons element-bindende proteinphosphorylering beskyttet mod cellulær stress af glutamat, NMDA og 3-nitropropionsyre, der udøves på rotte neonatale cerebellare granula neuroner. Glutamat fører til en nedsat levedygtighed også i celler prækonditioneret med 4-AP, men uden nogen signifikant aktivering af caspase-3. Disse observationer antydede, at 4-AP primært er effektiv mod nekrotisk excitotoksicitet.27 Det blev også vist at beskytte primære neuronale kulturer mod oxygen-glucosemangel eller ouabain/DL-tre- -benzyloxyasparaginsyretoksicitet.28

neurobeskyttende virkning af Cistanche

Prækliniske in vivo-undersøgelser på 4-AP

Adskillige undersøgelser har undersøgt de beskyttende virkninger af 4-AP i forskellige sygdomsmodeller (tabel 1). I nerveknusningsmodeller af perifer nerveskade førte profylaktisk og tidlig 4-AP-behandling til genopretning af nerveledningshastigheden, fremmede remyelinisering og forøgede det aksonale område. Sidstnævnte observationer blev forklaret ved virkninger svarende til dem, der opstår efter elektrisk stimulering, for eksempel stigninger i niveauer af neuronal hjerneafledt neurotrofisk faktor (BDNF).29 I en model for Alzheimers sygdom, injektion af amyloid-beta i hippocampus af Sprague Dawley rotter inducerede neuronal skade og øget mikroglial aktivering. Daglig administration af 1 mg/kg 4-AP viste sig at undertrykke mikroglial aktivering og gav neurobeskyttelse. Dette blev tilskrevet 4-AP's evne til at blokere den ikke-inaktiverende udadrettede K plus-strøm i aktiverede mikroglia og reducere cellulær produktion af proinflammatoriske cytokiner.25 Undersøgelser med en in vivo-model for kainatinduceret hippocampus neurotoksicitet afslørede robuste neurobeskyttende virkninger af { {11}}AP, der kunne ophæves af den ikke-kompetitive NMDA-receptorantagonist MK-801 og adenosin A1-antagonisten 8-cyclopentyltheophyllin. Disse observationer tyder på, at NMDA-receptorer er relevante for 4-AP-medieret beskyttelse i denne model.30I en dyremodel for autoimmun neuropati hos Lewis-rotter forbedrede 4-AP den kliniske sværhedsgrad og patologiske elektrofysiologiske fund. Forfatterne foreslog, at aksonal beskyttelse blev tilvejebragt ved at blokere natrium-medierede indadgående strømme i den tidlige fase, fordi høje membranpotentialer i den akutte fase af inflammation kan være neurotoksisk. I den kroniske fase blev nerveledning potentielt forbedret ved at blokere kalium-medieret udadgående strøm.1

I eksperimentel autoimmun encephalomyelitis (EAE), en model af immunmedieret CNS-inflammation, der replikerer kardinaltræk ved MS, er Kv-kanalblokade blevet rapporteret at hæmme T-celleaktivering, potentielt ved at blokere kanaler i Kv1.3-underfamilien og svækket aksonal demyelinisering og degeneration ved at virke på K.3.1-kanalen på astroglia, hvilket potentielt inducerer BDNF-signalet. ling. I proteolipidprotein-induceret EAE i SJL-mus forbedrede 4-AP-behandling signifikant de digitale scorer, som blev bekræftet patologisk. Glial fibrillært surt proteinekspression blev observeret at være nedreguleret i 4-AP-behandlede mus, og T-celleaktivering og Th1/17-polarisering blev mildnet. I den kroniske, myelin oligodendrocyt glycoprotein (MOG) peptid-inducerede EAE-model i C57BL/6-mus ændrede4-AP imidlertid ikke EAE-forløbet.5 En anden undersøgelse undersøgte også virkningerne af {{19} }AP i en MOG-EAE-model i C57BL/6-mus og rapporterede symptomatiske, men ingen sygdomsmodificerende virkninger. Hverken en profylaktisk eller en terapeutisk 4-AP-behandling svækkede sværhedsgraden af ​​det digitale EAE-forløb, hvorimod 4-AP-behandlede dyr viste forbedret mobilitet vurderet ved fodaftryk og rotarod-analyse. Demyelinisering af rygmarven, neuronal skade og MRI-billeddannelse af hjernevolumenændringer var uændrede. Proliferation, IL17 eller IFN-y produktion af CD4* T-celler var også upåvirket.3

For nylig har vi vist, at bortset fra dets symptomatiske virkninger på at forbedre neural ledning, kan 4-AP forhindre retinal neurodegeneration under MOG-peptid-induceret eksperimentel optisk neuritis (EAEON) i C5BL6-mus.'Ved brug af in vivo optisk kohærenstomografi( OCT) billeddannelse, synsfunktionstestning og histologisk vurdering observerede vi en reduktion i omfanget af degeneration af indre retinale lag i modeller af EAEON, både til profylaktisk og terapeutisk 4-AP-administration. I denne model forstærkede 4-AP virkningerne af immunmodulerende behandling med sphingosin-1-phosphatreceptormodulatoren fingolimod, hvilket tyder på uafhængige virkningsmåder. Det er rimeligt at antage, at denne effekt ikke er begrænset til fingolimod alene og gælder for 4-AP kombineret med andre MS immunmodulerende lægemidler. I vores undersøgelse afslørede synsnervens histologi, at 4-AP i modsætning til fingolimod ikke havde nogen signifikant indflydelse på mikroglial aktivering og/eller infiltration af lymfocytter eller makrofager, hvilket tyder på, at de beskyttende virkninger ikke var relateret til en anti-inflammatorisk tilstand af handling. I overensstemmelse hermed interfererede 4-AP-behandling ikke med EAE-induktion, valideret af et T-celle-restimuleringsassay. Desuden observerede vi betydelig beskyttelse mod retinal neurodegeneration under 4-AP-behandling også i den ikke-inflammatoriske optisk nerveknusningsmodel, hvorimod fingolimod her ikke havde nogen effekt. Interessant nok kunne in vitro 4-AP-behandling ikke direkte beskytte retinale ganglieceller. I stedet indikerede histologi og in vitro-eksperimenter 4-AP-medieret stabilisering af myelin- og oligodendrocyt-precursorceller. Denne effekt var forbundet med øget calciumtilstrømning og nuklear translokation af den nukleare faktor af aktiverede T-celler (NFAT). Det er tidligere blevet vist, at 4-AP regulerer calciumhomeostase ved at hæve niveauet af inositoltriphosphat og derved forårsage calciumfrigivelse fra intracellulære calciumlagre. Yderligere undersøgelser af 4-AP i demyeliniserende modeller, f.eks. cuprizon-behandling eller transgene musemodeller med inducerbar oligodendrocytablation, kan dog være nyttige til at bekræfte disse tilstande. Eksisterende undersøgelser i dyremodeller for demyelinisering fokuserer hovedsageligt på kapaciteten af ​​4-AP til at genoprette aktionspotentialet, men mangler yderligere undersøgelser af oligodendrogliale celler (figur).

Det er vigtigt at nævne, at de nødvendige doser for at opnå disse virkninger in vitro er ca. 100-1,000x højere end den koncentration, der opnås hos patienter. Derfor kan yderligere eller andre mekanismer være relevante for observationerne in vivo og in vitro. Disse omfatter, men er ikke begrænset til, en formindsket energiudledning af demyelinerede axoner på grund af blokering af kaliumlækage og stærkere beskyttende og reparerende kapaciteter i hjernen, indirekte som følge af øget mobilitet og større motion.

Desuden kan immunmodulerende mekanismer af 4-AP ikke udelukkes, især fordi reduceret T-celleaktivering og Th1/17-polarisering er blevet påvist i PLP-induceret EAE i SJL-mus.3Derudover fandt prækliniske undersøgelser af andre sygdomsmodeller en svækket aktivering og reduceret frigivelse af proinflammatoriske mediatorer af mikroglia. Disse kontroversielle resultater fremhæver de forskellige patologiske mekanismer i de forskellige dyremodeller, hvor immunceller er mere eller mindre modtagelige for behandlingsstrategier. Uoverensstemmelserne mellem vores resultater og tidligere rapporter om kun symptomatiske virkninger i MOG-peptid-induceret EAE i C57BL6-mus" kan i det mindste delvist forklares ved (1) forskelle i dosering, fordi andre brugte doser på 100 ug og 600 ug/mus/dag, hvorimod vi administrerede 250 ug/mus/d;(2)behandlingsvarighed (40, 60 og 90 dage af henholdsvis Göbel et al,* Moriguchi et al,3 og Dietrich et al.); og (3) mængden af ​​MOG anvendt til immunisering, fordi vi brugte 200 ug MOG pr. mus, hvorimod andre kun brugte 100 ug MOG pr. mus. Nyere forskning fokuserer på tarmmikrobiotas rolle i at påvirke induktionen og sværhedsgraden af ​​EAE ved at ændre balancen mellem effektor- og regulatoriske T- og B-celler. Gnavernes mikrobiom kan variere mellem dyrefaciliteterne, hvilket resulterer i forskelle i EAE-sværhedsgrad, forløb og muligvis endda respons på terapeutika. Tilsammen kunne disse faktorer tage højde for heterogeniteten i undersøgelsesresultaterne.

neurobeskyttende virkning af Cistanche

Klinisk tilgang til 4-AP hos patienter med MS

Adskillige kliniske forsøg siden 1980'erne har allerede antydet de gavnlige virkninger af 4-AP hos mennesker med MS. Blandt andre identificerede de forbedringer i motoriske40-2 og visuelle funktioner-44 og træthed.5-7 Undersøgelsesbegrænsninger, fravær af et homogent undersøgelsesdesign og et lille patientantal forbød dog godkendelse af {{ 5}}AP af de almindelige myndigheder og førte til en off-label anvendelse i mere end 3 årtier.4 På den anden side lettede nogle af disse undersøgelser udviklingen af ​​formuleringen med vedvarende frigivelse (SR-4-AP eller fampridin), fordi de fandt, at plasmaniveauerne af den oprindelige forbindelse med øjeblikkelig frigivelse var inkonsekvente og uforudsigelige. Det første kliniske studie med SR-4-AP blev udført i 1997 af Schwid et al.49, hvilket viste en signifikant forbedring af ganghastigheden og en tendens til forbedring af muskelstyrken.

Det udvidede teknologisystem er udviklet af Elan Pharmaceuticals. Det brugte et såkaldt matrix-lægemiddelabsorptionssystem, bestående af en proprietær polymermatrix, der kontrollerer frigivelse ved diffusion og erosion af gastrointestinale enzymer. Dette resulterede i lavere maksimale plasmalægemiddelniveauer og en længere virkningsvarighed.1 Indledningsvis blev SR-4-AP testet i 4 forsøg. I 2007 udførte Goodman et al.1 en dosisvarierende efterfølgende stigning på 5 mg fra 10 op til 40 mg to gange dagligt med 36 patienter med MS. I Timed 25 Foot Walk Test (T25FW) blev der ikke observeret nogen signifikant ændring, hvorimod en post hoc-analyse, der konverterede dataene til ganghastighed (ft/s) nåede signifikans. Derudover blev der observeret en forbedring i selvrapporteret træthed. I et dosissammenligningsforsøg i 2008 (randomiseret, dobbeltblindt, placebokontrolleret) rekrutterede Goodman et al.2 206 patienter, som fik placebo eller doser på 10, 15 eller 20 mg to gange dagligt. Igen fandt post hoc-analyse, der sammenlignede forbedringer i ganghastighed, signifikant bedre resultater for alle behandlingsgrupper individuelt og for alle SR-4-AP-behandlede patienter sammenholdt sammenlignet med placebo. Musestyrken blev forbedret for de 10-mg- og 15-mg-behandlede grupper, men ikke for de 20 mg-behandlede grupper sammenlignet med placebo-personerne. I de 2 efterfølgende fase Ⅲ kliniske forsøg (21-ugers dobbeltblindet placebokontrolleret randomiseret forsøg, 301 patienter og 14-ugers dobbeltblindet placebokontrolleret forsøg, 239 patienter) med 10 mg to gange dagligt, patienterne blev opdelt i en respondergruppe og en non-respondergruppe, defineret ved konsekvent forbedring af T25FW. I begge undersøgelser var stigningen i ganghastighed signifikant sammenlignet med non-responder- eller placebogruppen. Desuden var der en forbedring i 12-Item MS Walking Scale(MSWS-12)-score for respondenterne.2122

I et åbent forlængelsesstudie af disse undersøgelser blev det påvist, at den kliniske forbedring gik tabt efter lægemiddelseponering, men vendte tilbage 2 uger efter genstart af behandlingen med SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, tabletformuleringen af ​​SR{ {3}}AP modtog fuld godkendelse af Food and Drug Administration i januar 2010 til at forbedre gang hos patienter med MS, men kun en betinget markedsføringstilladelse i 2011 fra European Medicines Agency (EMA). På baggrund af de nævnte forsøg var godkendelsen underlagt bestemmelsen om at give mere langsigtede effekt- og sikkerhedsdata. Derfor blev et fase II eksplorativt (MOBILE) og et fase I bekræftende studie (ENHANCE) iværksat.

I det eksplorative MOBLE-studie med 132 deltagere blev der fundet en forbedring af Patient Global Impression of Change (PGIC), MSWS-12 og Timed Up and Go (TUG) hastighed23 For at evaluere den langsigtede effekt og sikkerhed af SR-4-AP, det bekræftende ENHANCE-studie (10 mg to gange dagligt i 646 MS-patienter) blev udført. Ud over de forbedringer, der blev rapporteret i MOBILE-forsøget, fandt forfatterne en signifikant forbedring af SR-4-AP-behandlede patienter på 29-Item MS Impact Scale.5 EMA gav efterfølgende ubetinget godkendelse af SR{ {11}}AP til behandling af patienter med MS med gangbesvær. ENABLE-fasens observationsstudie med 901 patienter viste, at behandling med SR-4-AP er gavnlig for patienter med MS ved hjælp af selvopfattet fysisk funktion og psykologisk sundhed i en virkelig verden2(tabel 2).

Baseret på de lovende prækliniske data om beskyttelse mod retinal neurodegeneration beskrevet ovenfor, udførte vores gruppe et retrospektivt, multicenter OCT-studie for at sammenligne retinal neurodegeneration mellem 52 patienter i kontinuerlig 4-AP-terapi og 51 kontroller, der blev matchet for alle relevante kovariater ved hjælp af en foruddefineret matchningsalgoritme. I overensstemmelse med de eksperimentelle data blev degeneration af det makulære retinale nervefiberlag reduceret under samtidig 4-AP-behandling over 2 år. Disse resultater skal dog bekræftes i uafhængige og ideelt prospektive kohortestudier, især fordi effektstørrelsen var lav, og frekvensen af ​​peripapillær retinal nervefiberlag og makulær ganglioncelle/indre plexiform lag udtynding ikke afveg signifikant mellem grupperne . Disse uoverensstemmelser af en beskyttende effekt af 4AP kun på mRNFL, men hverken i pRNFL eller i McGill, kan ikke let forklares. Det er vigtigt at nævne, at fordi 4AP kun er godkendt til at forbedre gangbesvær hos patienter med EDSS 3.5-5, blev de analyserede ændringsrater undersøgt i senere stadier af sygdommen og uden akut optisk neuritis. I en sådan setting forekommer kun meget subtile nethindeforandringer, og store kohorter ville være nødvendige for at opdage behandlingseffekter. Derfor var det retrospektive studie med patienter bestemt ikke tilstrækkeligt drevet til pålideligt at påvise beskyttende behandlingseffekter, og det kommer ikke som en overraskelse, at kun et af resultaterne viste sig positivt. MRNFL var muligvis det mest følsomme lag til påvisning af behandlingseffekter.5"

Sammenfattende tyder en voksende mængde af in vivo-beviser på, at 4-AP, ud over dets velkendte symptomatiske virkninger, ved at forhindre neurodegeneration kan ændre sygdomsforløbet for EAEON og muligvis endda patienter med MS. Foreløbige in vitro-evidens indebærer involvering af cellulære calciumniveauer og NFAT-vejen, men yderligere undersøgelser er berettigede for at belyse de nøjagtige molekylære mekanismer, der ligger til grund for 4-AP's neurobeskyttende effekt i immunmedieret inflammatorisk demyelinisering. Disse resultater kan have en markant indvirkning på MS-behandlingsstrategier, hvis de bekræftes i et prospektivt randomiseret kontrolleret klinisk forsøg.

virkning af Cistanche

Referencer

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Gendannelse af axonal funktion med 4-aminopyridin: klinisk effekt ved multipel sklerose og videre. CNS-lægemidler 2018;32:637-651.

2. Horton L, Conger A, Conger D, et al. Effekt af 4-aminopyridin på synet hos patienter med multipel sklerose med optisk neuropati. Neurology 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. Effekten af ​​Fampridine-SR på kognitiv træthed i et randomiseret dobbelt-blindt crossover forsøg hos patienter med MS. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Bror SD, Filli L, Geissler O, et al. Positive effekter af fampridin på kognition, træthed og depression hos patienter med multipel sklerose over 2 år. J Neurol 2018; 265:1016-1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ, et al. Præklinisk forsøg med 4-aminopyridin hos patienter med kronisk rygmarvsskade. Paraplegia 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z, et al. Dalfampridin forbedrer den sensorimotoriske funktion hos rotter med kroniske underskud efter okklusion af den midterste cerebrale arterie. Slagtilfælde 2013;44: 1942–1950.

7. Trimmer JS, Rhodes KJ. Lokalisering af spændingsstyrede ionkanaler i pattedyrs hjerne. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Struktur-aktivitet relationsstudier af fire nye 4-aminopyridin K( plus ) kanalblokkere. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. Virkningerne af 4-aminopyridin og tetraethylammoniumioner på normale og demyeliniserede pattedyrs nervefibre. J Physiol 1981;313:301-315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Effekt af fampridin på axonal excitabilitet ved multipel sklerose. Clin Neurophysiol 2016;127:2636-2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Spændingsstyrede K plus-kanaler i humane T-lymfocytter: en rolle i mitogenese? Nature 1984;307:465-468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. Den spændingsstyrede kaliumkanal Kv1.3 er stærkt udtrykt på inflammatoriske infiltrater i multipel sklerose-hjerne. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J, et al. Kv1.3-kanal som et centralt terapeutisk mål for neuroinflammatoriske sygdomme: state of the art og videre. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. Den spændingsstyrede Kv1.3 K(plus)-kanal i effektorhukommelses-T-celler som et nyt mål for MS. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopyridintoksicitet med utilsigtet overdosis hos fire patienter med multipel sklerose. Neurology 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Et usædvanligt tilfælde af 4-aminopyridintoksicitet. J Emerg Med 2006;30:175-177.

17. Schwam E. Alvorlig utilsigtet overdosis af 4-aminopyridin på grund af en sammensætningsfejl på apoteket. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A, et al. Effekten af ​​fampridin på risikoen for anfald hos patienter med multipel sklerose. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A, et al. Fampridine-SR i dissemineret sklerose: en randomiseret, dobbeltblind, placebokontrolleret, dosisvarierende undersøgelse. Mult Scler 2007; 13:357-368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA, et al. Dosissammenligningsforsøg med fampridin med langvarig frigivelse ved multipel sklerose. Neurology 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Oral fampridin med vedvarende frigivelse i dissemineret sklerose: et randomiseret, dobbeltblindt, kontrolleret forsøg. Lancet 2009;373: 732-738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR, et al. Et fase 3-forsøg med oral dalfamridin med forlænget frigivelse ved multipel sklerose. Ann Neurol 2010;68:494-502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Fampridin med forlænget frigivelse og gang og balance i MS: randomiseret kontrolleret MOBIL-forsøg. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S, et al. 4-Aminopyridin-induceret aktivitet redder hypoexcitable motoriske neuroner fra amyotrofisk lateral sklerose-patient-afledt inducerede pluripotente stamceller. Stamceller 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Bredspektrede virkninger af 4-aminopyridin til at modulere amyloid beta1-42-induceret cellesignalering og funktionelle responser i humane mikroglia. J Neurosci 2006;26:11652-11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z, et al. Design, syntese, immuncytokemi-evaluering og molekylær docking-undersøgelse af adskillige 4-aminopyridinderivater som potentielle neurobeskyttende midler til behandling af Parkinsons sygdom. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Forkonditionering med 4-aminopyridin beskytter cerebellare granula neuroner mod excitotoksicitet. Brain Res 2009;1294: 165-175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Fejl og redning af prækonditioneringsinduceret neurobeskyttelse ved alvorlige slagtilfælde-lignende fornærmelser. Neurophar mycology 2016;105:533-542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A, et al. 4-Aminopyridin fremmer funktionel restitution og remyelinisering ved akut perifer nerveskade. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. In vivo-behandling med K plus-kanalblokkeren 4-aminopyridin beskytter mod kainat-induceret neuronal celledød gennem aktivering af NMDA-receptorer i murine hippocampus. Neurofarmakologi 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Aminopyridin lindrer eksperimentel autoimmun neuritis hos Lewis-rotter. J Neuroimmunol 2017;305:72-74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB, et al. Identifikation af en ny klasse af inhibitorer af den spændingsstyrede kaliumkanal, Kv1.3, med immunsuppressive egenskaber. Biochemistry 2002;41:7781-7794.

33. Varga Z, Company T, Papp F, et al. Kaliumkanalekspression i human CD4 plus regulatoriske og na¨ ive T-celler fra raske forsøgspersoner og multipel sklerosepatienter. Immunol Let 2009;124:95-101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Undertrykkelse af inflammatorisk demyelinisering og axondegeneration gennem inhibering af Kv3-kanaler. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Aminopyridin forbedrer relapsing-remitting eksperimentel autoimmun encephalomyelitis i SJL/J mus. J Neuroimmunol 2018;323:131-135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-Aminopyridin forbedrer mobiliteten, men ikke sygdomsforløbet i en dyremodel for multipel sklerose. Exp Neurol 2013;248: 62-71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Beskyttende virkninger af 4-aminopyridin i eksperimentel optisk neuritis og multipel sklerose. Brain 2020;143:1127-1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Mobilisering af calcium fra intracellulære lagre, potensering af neurotransmitter-inducerede calciumtransienter og kapacitiv calciumindtrængning af 4-aminopyridin. J Neurosci 2001;21:3135-3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopyridin hos patienter med multipel sklerose: dosis og serumniveau relateret til effektivitet og sikkerhed. Clin Neuropharmacol 1993;16:195-204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. Oralt administreret 4-aminopyridin forbedrer kliniske tegn ved multipel sklerose. Ann Neurol 1990;27:186-192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Aminopyridin forbedrer de kliniske tegn ved multipel sklerose. Ann Neurol 1987;21:71-77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopyridin ved dissemineret sklerose: forlænget administration. Neurology 1991;41: 1344-1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Virkninger af 4-aminopyridin hos patienter med multipel sklerose. J Neurol Sci 1983;60:353-362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. Virkningerne af 4-aminopyridin på kliniske tegn ved multipel sklerose: en randomiseret, placebokontrolleret, dobbeltblind, cross-over undersøgelse. Ann Neurol 1992;32:123-130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopyridin til behandling af patienter med multipel sklerose. Langsigtet effektivitet og sikkerhed. Arch Neurol 1994;51:292-296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Træthed ved multipel sklerose: multidimensionel vurdering og respons på symptomatisk behandling. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Træthed ved progressiv dissemineret sklerose: resultater af et randomiseret, dobbeltblindt, placebokontrolleret, crossover-forsøg med oral 4-aminopyridin. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopyridin: nyt liv for et gammelt lægemiddel. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Kvantitativ vurdering af 4-aminopyridin med langvarig frigivelse til symptomatisk behandling af dissemineret sklerose. Neurology 1997;48:817-821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR, et al. Langsigtet sikkerhed og effekt af dalampridin til gangbesvær hos patienter med multipel sklerose: resultater af åbne udvidelser af to fase 3 kliniske forsøg. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P, et al. Vurdering af klinisk betydningsfulde forbedringer i selvrapporteret gangevne hos deltagere med multipel sklerose: resultater fra det randomiserede, dobbeltblindede fase III ENHANCE-studie af fampridin med forlænget frigivelse. CNS-lægemidler 2019;33:61-79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA, et al. Forbedret patientrapporteret sundhedspåvirkning af multipel sklerose: ENABLE-undersøgelsen af ​​PR-fampridin. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopyridin som et enkelt middel til diagnosticering og behandling af alvorlig nerveknusningsskade. Mil Med 2019;184(suppl 1):379–385.