Udforskning af virkningerne af Cistanche Phenylethanoid Glycosider på ikke-alkoholisk fedtleversygdom baseret på netværksfarmakologi og cellulære eksperimenter

Abstrakt

Objektiv: For at undersøge de forbedrende virkninger af Cistanche phenylethanoid glycosider på ikke-alkoholisk fedtleversygdom (NAFLD).

MetoderNetværksfarmakologi blev brugt til at forudsige de potentielle mekanismer af Cistanche phenylethanoid glycosider mod NAFLD. En in vitro NAFLD-model blev etableret ved at inducere HepG2-celler med frie fedtsyrer (FFA). Cellelevedygtighed blev vurderet ved hjælp af CCK-8-assayet; Olierød O-farvning blev brugt til at observere lipidakkumulering; triglycerid (TG) og total cholesterol (TC) niveauer blev målt under anvendelse af assay kits; JC-1-farvning blev brugt til at vurdere mitokondriel membranpotentiale; intracellulære ROS-niveauer blev evalueret med DCFH-DA fluorescerende probe; apoptose blev påvist under anvendelse af Hoechst 33342-farvning; og ekspressionen af TNF-, PI3K-, Akt- og Bax-proteiner blev målt ved Western blot.

Resultater: Ti aktive forbindelser og 77 potentielle mål relateret til anti-NAFLD-effekter blev identificeret, med kernemål inklusive TNF, NFKB1 og TLR4. Forbindelserne udviste god bindingsaffinitet med målene, især TNF. Sammenlignet med modelgruppen reducerede Cistanche phenylethanoid-glycosider signifikant FFA-induceret lipidakkumulering i HepG2-celler (P < 0,01), nedsatte intracellulære TG-, TC- og ROS-niveauer (P < 0,01), genoprettet mitokondrielt membranpotentiale, lindret mitokondrielt membranpotentiale, mindsket mitokondriel proteinekspression (P

Konklusion: Cistanche-phenylethanoid-glycosider udøver anti-NAFLD-effekter ved at forbedre FFA-induceret lipidakkumulering, mitokondriel dysfunktion, oxidativt stress og apoptose i HepG2-celler. Disse effekter kan være forbundet med TNF/PI3K/Akt-signalvejen.

Nøgleord: Cistanche phenylethanoid glycosider; ikke-alkoholisk fedtleversygdom (NAFLD); lipidmetabolisme; oxidativ stress;apoptose; TNF/PI3K/Akt signalvej; netværk farmakologi; celle eksperiment

Cistanche Benefits in depression

Cistanche phenylethanoid glycosider

catalog cistanche

Højt indhold Cistanche ekstrakt til salg

Kontakt os køb nu

1. Introduktion

Ikke-alkoholisk fedtleversygdom (NAFLD) er en kronisk leversygdom karakteriseret ved hepatisk steatose uden overdrevent alkoholforbrug. Udbredelsen i Kina er nået op på 32,9 %. Dets patogenese involverer flere mekanismer, herunder insulinresistens, oxidativt stress og tarmmikrobiota-ubalance. Kliniske symptomer omfatter træthed, ubehag i leverområdet og mavesmerter, og i alvorlige tilfælde kan det udvikle sig til ikke-alkoholisk steatohepatitis (NASH).

I øjeblikket er livsstilsinterventioner den primære behandling for NAFLD. Selvom FDA godkendte det første lægemiddel til NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), i 2024, har det potentielle negative virkninger såsom leverskade og kardiovaskulære risici. Derfor er der et presserende behov for at finde sikre og effektive behandlinger for NAFLD.

Echinacoside in cistanche 7

Traditionel kinesisk medicin (TCM), med dens karakteristika af flere komponenter, flere mål og flere veje, stemmer godt overens med den komplekse patogenese af NAFLD og tilbyder unikke fordele i behandlingen.

Cistanche deserticolaogCistanche tubulosaer lægeplanter fra familien Orobanchaceae, opført iShennong Bencao Jing. Deres kødfulde stængler, rige på skæl, bruges traditionelt til at tonificere leveren og nyrerne, genopfylde essens og blod og fugte tarmene. De primære aktive komponenter - phenylethanoid glycosider - har antiinflammatoriske, lipidsænkende og leverbeskyttende egenskaber. Der mangler dog stadig systematiske undersøgelser af deres virkninger mod NAFLD.

Denne undersøgelse har til formål at analysere det farmakologiske grundlag og potentielle mekanismer af Cistanche phenylethanoid glycosider til behandling af NAFLD ved hjælp af netværksfarmakologi og at udforske deres mekanismer yderligere gennem cellulære eksperimenter, hvilket giver et teoretisk grundlag for udviklingen af nye lægemidler.

Echinacoside in cistanche 11

2. Materialer

2.1 Netværksfarmakologiværktøjer

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatik: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB PDB: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 Cellelinje

HepG2 humane leverkræftceller, købt fra Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reagenser og lægemidler

Cistanche-phenylethanoidglycosider (batchnr.. 201610, renhed større end eller lig med 80 %, indeholdende 44,5 % echinacosid og 16,1 % verbascosid), købt hos Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Stamopløsning tilberedt ved 6,40 mg/ml, filtreret ved –20 mg/ml.

Yderligere reagenser inkluderer:

Føtalt bovint serum (FBS), DMEM-medium, penicillin-streptomycin, Oil Red O-farvningskit, BCA-kit, ROS-detektionskit, Hoechst 33342, BSA-V, natriumoleat, natriumpalmitat, TG- og TC-analysesæt, CCK-8-assay, JC-1potentielle mitochondriale-antistoffer, JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -actin og sekundære HRP-konjugerede antistoffer.