Epigallocatechin-3-Gallate-forbedret jernakkumulation og apoptose og fremmet neuronal regenerering og hukommelse/kognitive funktioner i Hippocampus induceret af udsættelse for et kronisk højhøjdehypoksimiljø

Abstrakt

Vi havde til formål at udforske de beskyttende virkninger og potentielle behandlingsmekanismer af Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) i en dyremodel for kronisk eksponering i et naturligt højhøjdehypoksi-miljø (HAH). Adfærdsændringer blev vurderet med Morris-vandlabyrint-testen. Jernakkumulering i hippocampus blev detekteret ved at bruge henholdsvis DAB-forstærket Perl's farvning, MRI, qPCR og kolorimetri. Oxidativ stress (malondialdehyd, MDA), apoptose (Caspase-3) og neural regenerering (hjerneafledt neurotrofisk faktor, BDNF) blev detekteret ved brug af ELISA og western blotting. Neurale ultrastrukturelle ændringer blev evalueret ved transmissionselektronmikroskopi (TEM).

Forholdet mellem apoptose og hukommelse har altid været et af neuroforskernes varme emner. Apoptose refererer til processen med ordnet celledød gennem en række interne reguleringsmekanismer. Under normale omstændigheder forårsager celleapoptose ingen skade på den menneskelige krop, men hjælper med at opretholde et godt helbred. Men under visse patologiske forhold kan ukontrolleret apoptose føre til forekomsten af ​​forskellige sygdomme.

Samtidig har hukommelsen også vist sig at være tæt forbundet med celleapoptose. Nogle undersøgelser tyder på, at passende apoptose spiller en vigtig rolle i dannelsen og konsolideringen af ​​hukommelsen. Dette forhold følger en simpel regel: nogle unødvendige eller udløbne neuroner ryddes gennem apoptose, hvilket skaber mere plads og ressourcer til dannelsen af ​​nye neuroner og hukommelseslagring. Derudover kan passende apoptose også beskytte neuroner mod skade ved at eliminere toksiske proteiner i neuroner.

Men hvis der er overdreven eller utilstrækkelig apoptose, vil det påvirke den normale funktion af hukommelsen. Overdreven apoptose kan føre til overdreven tab af neuroner, hvilket fører til hukommelsestab. På den anden side, hvis der ikke er nok apoptose til at fjerne unødvendige neuroner og celler, vil disse celler forbruge for meget begrænset plads og ressourcer, hvilket også kan føre til hukommelsesnedgang. Derfor er det nødvendigt at undgå overdreven eller utilstrækkelig apoptose, mens den normale grad af apoptose opretholdes.

Apoptose er en kompleks biologisk proces med mange indflydelsesfaktorer. Selvom forholdet til hukommelsen ikke er fuldt ud forstået, giver dette fænomen os mulighed for at få en dybere forståelse af nervesystemet og åbner nye veje til at forbedre hukommelsen. Sammenfattende er det afgørende for hukommelsens sundhed at mestre passende apoptose. Det kan ses, at vi skal forbedre vores hukommelse. Cistanche deserticola kan forbedre hukommelsen markant, fordi Cistanche deserticola er et traditionelt kinesisk medicinsk materiale med mange unikke effekter, hvoraf den ene er at forbedre hukommelsen. Effektiviteten af ​​hakket kød kommer fra de forskellige aktive ingredienser, det indeholder, herunder syre, polysaccharider, flavonoider osv. Disse ingredienser kan fremme hjernens sundhed på forskellige måder.

Klik på kender måder at forbedre hjernens funktion

Resultaterne viste, at rotters indlærings- og hukommelsesevne faldt, når de blev udsat for HAH-miljøet. Det blev efterfulgt af jernophobning, dysfunktionel jernmetabolisme, reduceret BDNF og opregulering af MDA og Caspase-3. TEM bekræftede de ultrastrukturelle ændringer i neuroner og mitokondrier. EGCG reducerede HAH-induceret kognitiv svækkelse, jernaflejring, oxidativ stress og apoptose og fremmede neuronal regenerering mod kronisk HAH-medieret neural skade.

Nøgleord
Høj højde · Hypoxi · Kvantitativ følsomhedskortlægning · Jernophobning · Lægemiddelintervention.

Introduktion
Menneskelige aktiviteter i områder med stor højde (mere end 3000 m) er for nylig steget betydeligt [1]. Blandt de 140 millioner mennesker verden over, der bor permanent i store højder [2, 3] og andre for turisme eller forsvar af grænser, er 5-10 % i risiko for at udvikle kronisk bjergsyge, som er karakteriseret ved overdreven erytrocytose og svær hypoxæmi [4, 5] . Hjernen, som et af de mest iltforbrugende organer, er følsom over for hypoxi [6]. Derudover forstyrrer højhøjdehypoksi (HAH) alvorligt den strukturelle integritet af de vigtigste neuroner og mitokondriel morfologi i hippocampus [7]. Symptomerne induceret af kronisk eksponering for et HAH-miljø inkluderer hovedpine, svimmelhed, søvnforstyrrelser, træthed og mangel på mental koncentration [5, 8, 9]. Ydermere kan HAH også udløse neurokognitive dysfunktioner såsom rumlig indlæring, hukommelse og humør [10]. Behandlingen af ​​HAH-induceret neural skade er således blevet et fokus for opmærksomhed inden for højhøjdemedicin [11, 12].

Det er af stor betydning at finde egnede formuleringer til forebyggelse af HAH-induceret hjerneskade. Grønne teblade indeholder (−)-epigallocatechin-3-gallat (EGCG) (50-60%), (−)-epigallocatechin (EGC) (15-20%), (−)-epicatechin-3- gallat (EKG) (10-15%) og (-)-epicatechin (EC) (5-10%) [13, 14]. EGCG, som angiveligt er mere rigeligt i grønne teblade (7,1 g pr. 100 g) end i oolong-te (3,4 g pr. 100 g) og sorte teblade (1,1 g pr. 100 g) [15], har en potent antioxidantegenskab pga. til de otte hydroxylgrupper og to triphenolgrupper i dens grundstruktur [16, 17]. Derudover er det blevet påvist at være i stand til at krydse blod-hjerne-barrieren og nå hjerneparenkymet i dyreforsøg [18, 19]. Der har været nogle rapporter om de neurobeskyttende mekanismer af EGCG, såsom metalchelateringsegenskaber, undertrykkelse af oxidativt stress, inflammation, apoptose og acceleration af nerveregenerering [20-22]. Zhang et al. gennemgik effekten af ​​EGCG på mange sygdomme og påpegede, at EGCG beskyttede neuronale celler ved at inducere autofagi. De opsummerede også, at EGCG's anti-inflammatoriske og antioxidante egenskaber var afgørende for dets beskyttende rolle ved sygdomme i centralnervesystemet [23].

Imidlertid har få undersøgelser rapporteret den neurobeskyttende effekt af EGCG mod kronisk HAH-medieret neural skade. For at udfylde dette hul etablerede vi i denne undersøgelse en rottemodel for kronisk eksponering for et naturligt HAH-miljø i et forsøg på at verificere den potentielle behandlingsmekanisme for EGCG. Desuden brugte vi kvantitativ følsomhedskortlægning (QSM) ved gradient-ekko MRI ved 7 T, som kan overvinde den ikke-lokale effekt af magnetfeltet og give en kontrastmekanisme for væv in vivo for at kvantificere hjernens jernindhold [24].
Materialer og metoder

Dyr

I alt 120 Sprague-Dawley hanrotter med en vægt på 130-150 g blev hentet fra Chengdu Dashuo Laboratory Animal Co., Ltd. De blev holdt i et dyrehus ved 18-22 grader i en 12 timers lys/mørke cyklus med mad og vand givet ad libitum. Alle procedurer udført på dyr blev godkendt af Animal Care and Use Committee på West China Hospital.

Studere design

Rotter blev randomiseret og opdelt i fire grupper. Rotter i hypoxigruppen og h-EGCG-gruppen blev fodret og opstaldet i Yushu, Kina i en højde af 4500 m. Rotter i normalhøjdegruppen (n-gruppen) og n-EGCG-gruppen blev fodret i Chengdu, Kina i en højde af 500 m. Disse rotter fik normalt foder i en måned, efterfulgt af forskellige behandlinger. (1) Hypoxigruppe: rotter blev intraperitonealt injiceret hver dag med fysiologisk saltvand (0,9%) i en måned. (2) h-EGCG-gruppe: rotter blev intraperitonealt injiceret hver dag med 50 mg/kg EGCG (renhed, 98 %; Cas, 989-51-5; Sigma-Aldrich; opbevaret ved 4 grader) i en måned. (3) n gruppe: rotter blev intraperitonealt injiceret hver dag med fysiologisk saltvand (0,9%) i en måned. (4) n-EGCG-gruppe: rotter blev intraperitonealt injiceret hver dag med 50 mg/kg EGCG i en måned.

EGCG (5 mg/ml) blev opløst i vand i et forhold på 1:1. Det volumen, der blev injiceret i rotter, blev bestemt af vægten af ​​rotterne, som nåede en endelig injektionsmængde på 50 mg/kg. Efter denne behandling blev nogle rotter brugt til henholdsvis Morris-vandlabyrintassay (n=10 for hver gruppe) og hjerne-MRI-analyse (n=10 for hver gruppe). Nogle andre rotter blev aflivet, og hjernevæv blev opsamlet til DAB-forstærket Perls-farvning (n=3 for hver gruppe), til Western blotting, biokemiske vurderinger og qPCR-assays (n=6 for hver gruppe) og transmissionselektronmikroskopassay (n=1 for hver gruppe).

Adfærdseksperiment

Morris vandlabyrint (MWM) blev udført som tidligere beskrevet for at analysere læring og hukommelse hos rotter [25], det blev udført på samme sted, hvor rotterne blev anbragt. MWM bestod af en rund stålpool (160 cm i diameter, 60 cm i højden og 31 cm i dybden) fyldt med vand til et niveau på 1 cm over toppen af ​​en platform (10 cm i diameter og 30 cm i dybden) ). Vandtemperaturen blev holdt på 22±2 grader og uigennemsigtig med strålende sort blæk. Platformen blev fastgjort i en af ​​de fire kvadranter, der blev sat op under træningen i fire på hinanden følgende dage. Forsøget blev afsluttet, når rotterne nåede platformen. Udslipsforsinkelsen blev registreret. Hvis rotterne ikke nåede platformen inden for 60 sekunder, blev de derefter manuelt ført til platformen og fik lov til at blive på den i 15 sekunder. På den femte dag, efter at platformen var fjernet, gik rotterne ind i kvadranten modsat kvadranten på den originale platform. Dernæst blev antallet af perronovergange og bevægelsesstier registreret inden for 60 sekunder.

MRI protokol

QSM blev evalueret ved MR, hvilket er blevet rapporteret i en tidligere undersøgelse [26]. MR blev udført på en 7 Tesla scanner (BioSpec 70/30, Bruker, Tyskland). En tredimensionel (3D) multi-ekko gradient-genkaldt ekko (GRE) sekvens blev brugt til QSM. De eksperimentelle parametre blev indstillet som følger: gentagelsestid (TR)=60 ms, flip-vinkel=15 grad, skivetykkelse=23 mm, optagelsesmatrixstørrelse=256×256, felt af syn (FOV)=32 mm×32 mm, ekkotid for første ekko (TE1)=5 ms, ekkoafstand (ΔTE)=5.77 ms, antal ekkoer{{19 }} og båndbredde=50 kHz. Både størrelses- og fasebilleder blev gemt til QSM-rekonstruktion. Der var tre trin i QSM-kortlægningsalgoritmerne udført med MATLAB R2014a (The Math Works, Natick, MA), udpakning af den indpakkede fase, fjernelse af baggrundsfeltet og generering af modtagelighedskort fra vævsfeltet.

Vævsforberedelse

Rotterne i hver gruppe blev intraperitonealt indgivet 10 % chloralhydrat til dyb anæstesi (1,5 mg/kg) og derefter transcardialt perfunderet med iskoldt saltvand (ca. 30 min) med en peristaltisk pumpe (BT100-2 J, LongerPump, Shanghai, Kina). Til DAB-forstærket Perls' farvning blev hjernerne dissekeret og efterfikseret i 2,5% paraformaldehyd natten over ved 4 grader. Den næste dag blev koronale snit taget fra hippocampus til farvning. For andre bestemmelser bortset fra immunhistokemi blev hippocampus hurtigt strippet på is og opbevaret ved 80 grader.

DAB Enhanced Perls' Farvning

DAB-forstærket Perls-farvning blev brugt til at detektere cellulær jernakkumulering [27]. Sektioner af hjernevæv blev nedsænket i destilleret vand i 3 minutter og derefter inkuberet med frisklavet Perls opløsning (2 % kaliumferrocyanid/2 % saltsyre) i 3 0 minutter efterfulgt af fosfatpufret saltvand (PBS) vasker. Endogen peroxidaseaktivitet blev blokeret med 0,3% hydrogenperoxidopløsning i methanol i 15 minutter efterfulgt af 3 vaske i PBS. Signaler blev udviklet ved inkubation i 3 minutter i 3,3-diaminobenzidin (DAB) og hæmatoxylin (Sigma-Aldrich) blev brugt til modfarvning.

Biokemiske vurderinger

Hippocampus blev isoleret og omrørt jævnt for at opnå et 10 % homogenat, som derefter blev centrifugeret ved 30,000–40,000 RPM i 10 minutter for at opnå en supernatant til at estimere hippocampusjernet ved hjælp af et kolorimetrisk kit (E-BCK139S, Elabscience, Wuhan, Kina) og malondialdehyd (MDA) blev påvist i supernatanten ved at bruge et ELISA-kit (Elabscience, Wuhan, Kina).

Vestlig blotting

Proteinkoncentrationen blev bestemt under anvendelse af et bicinchoninsyreassay (BCA, Biosharp, Beijing, Kina) kit. Proteinerne blev adskilt med 12% SDS-PAGE og derefter overført til polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner. Sidstnævnte blev blokeret i 2 timer ved stuetemperatur i 5 % skummetmælkspulver fortyndet med buffer og derefter inkuberet med primære antistoffer natten over ved 4 grader, inklusive kanin-anti-spaltet caspase-3 (1:1000 , Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina), kanin anti-hjerne-afledt neurotrofisk faktor (BDNF) (1:1000, Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina) og kanin anti-Actin (1:5000, Affinity Biosciences, Jiangsu, Kina). Den næste dag blev membranerne vasket tre gange med TBST i 5 minutter hver gang og derefter inkuberet med en HRP-mærket gede-anti-kanin sekundær antistofopløsning (1:10.000, Servicebio, Wuhan, Kina) i 1 time og vasket tre gange i 5 min.

Kvantitativ realtids-PCR

Animal Total RNA Isolation Kit (Foregene), 5×All-In-One MasterMix (med AccuRT Genomic DNA Removal kit) (abm) og EvaGreen Express2×qPCR MasterMix-No Dye (abm) blev brugt efter instruktionerne fra producenterne. De specifikke par af primere var som følger: Fpn, forward primer, 5'-CACCACAGGATATGCTTACAC TCAGG-3'; omvendt primer, 5'-GAGAACAGACCAGTC CGAACAAGG-3'; b-actin, fremadgående primer, 5'-TGTCAC CAACTGGGACGATA-3'; omvendt primer: 5ʹ-GGGGTG TTGAAGGTCTCAAA-3ʹ. Fpn-mRNA-niveauet af hver prøve blev normaliseret til niveauet for b-actin-mRNA.

Transmissionselektronmikroskopi (TEM)

Hippocampierne blev postfikseret i 2,5% glutaraldehyd-elektronmikroskop stationær væske og derefter dehydreret i acetoneopløsninger ved stigende koncentrationer og indlejret med Epox 812. Derefter blev sektionerne farvet med uranylacetat og blycitrat. Ultrastrukturelle billeder i CA3-feltet i hippocampus blev derefter fanget med et transmissionselektronmikroskop (TEM) med en JEM-1400-FLASH (JEOL, Tokyo, Japan).

Statistiske metoder

Data præsenteres som den gennemsnitlige standardafvigelse (SD). Variabler, der opfyldte de parametriske testbetingelser, blev evalueret ved at bruge Welchs t-test, en-vejs eller to-vejs gentagne variansmålinger (ANOVA), efterfulgt af Tukeys multiple sammenligningstest. De variabler, der ikke opfyldte de parametriske testbetingelser, blev evalueret ved at bruge Mann-Whitney U-testen, Kruskal-Wallis-testen eller Welch og Brown-Forsythe ANOVA. En værdi af P<0.05 was considered statistically significant. Statistical analysis and figures were obtained by GraphPad Prism Version 9.0 (GraphPad Software, CA, USA).

Resultater

Effekt af EGCG på indlæring og hukommelse hos rotter udsat for kronisk HAH

For at verificere om EGCG har en effekt på den rumlige indlæring og hukommelsespræstation hos rotter udsat for kronisk HAH, blev MWM-testen udført. Som vist i fig. 1A faldt antallet af platformkrydsninger af hypoxigruppen signifikant (P< 0.001, vs. the n group). The treatment of EGCG did not affect the number of crossings of rats in either the normal altitude group (n group vs. n-EGCG group, P>{{0}}.05) eller HAH-gruppen (hypoxigruppe vs. h-EGCG-gruppe, P > 0,05). Dernæst blev flugtlatenstiden beregnet som den tid, det tog rotten at nå den skjulte platform (fig. 1B). Resultaterne viste, at på den anden til den fjerde dag af træningen var flugtlatensen for rotter i hypoxigruppen øget signifikant (alle P-værdier<0.01, vs. the n group). Moreover, the h-EGCG group showed reduced escape latency than that in the hypoxia group (all P values<0.05). Also, the swimming speed and distance in MWM were measured. No significant difference was found among these four groups at different time points (All P values>0.05, Fig. 1C). Derefter fandt vi, at svømmehastigheden for rotter i hypoxigruppen reduceredes sammenlignet med n-gruppen på den anden dag og tredje dag (alle P-værdier<0.01, Fig. 1D). Also, the swimming speed of rats in h-EGCG group was higher than that in hypoxia group (all P values<0.05, Fig. 1D).

DAB Enhanced Perls' Farvning

Efter 8 ugers kronisk HAH-eksponering steg jern signifikant i CA1- og CA3-områder i hippocampus i hjernen sammenlignet med n-gruppens (alle P-værdier)<0.01). After EGCG intervention, iron accumulation in CA3 and CA1 of the hippocampus was reduced compared to that of the hypoxia group (P<0.0001, P<0.001, respectively; Fig. 2).

Magnetiske følsomhedsændringer i hippocampale regioner

Følsomhedsværdierne i hippocampus steg signifikant efter HAH-eksponering sammenlignet med n-gruppen (P<0.0001, Fig. 3A). After EGCG intervention, the values decreased compared to those of the hypoxia group (P<0. 0001, Fig. 3A).

Effekter af EGCG på Hippocampus Oxidativ Stress, Jern og Fpn
Sammenlignet med n-gruppen var MDA- og jernindholdet i hypoxigruppen forhøjet (P<0.05, Fig. 3B, C). EGCG treatment reduced the levels of MDA and iron, indicating that alleviation of oxidative stress may facilitate EGCG to play a protective role in chronic HAH-induced brain injury in rats. To understand the mechanisms by which brain iron contents were changed by HAH, we further examined the mRNA expression of hippocampal Fpn and found that the Fpn decreased in the hypoxia group and increased in the h-EGCG group (P < 0.01, P < 0.05, respectively, Fig. 3D).

Western Blotting-resultater

Vi vurderede virkningerne af EGCG på Caspase-{{0}}- og BDNF-niveauerne. Western blotting (WB)-analyse viste højere ekspression af Caspase-3 og lavere ekspression af BDNF i hippocampus af hypoxigruppen end i n-gruppen (alle P-værdier < 0,0001, fig. 4). Desuden sænkede EGCG-behandling niveauerne af Caspase-3 og øgede niveauerne af BDNF (alle P-værdier<0.0001, Fig. 4).

Neurale ultrastrukturelle ændringer

Efter 2 måneders kronisk HAH-eksponering blev mitokondrier i hippocampus CA3 i hypoxigruppen hævede på grund af reduktion eller brud på højderyggen. Desuden udviste hypoxigruppens rotter kondenseret nuklear kromatin, nuklear krympning, en høj grad af endoplasmatisk retikulum-hævelse, øgede lysosomer og øget elektrontæthed. Efter behandling med EGCG var mitokondriel hævelse, mitokondriel krystalopløsning og elektrondensitet markant reduceret sammenlignet med dem i hypoxigruppen (fig. 5).

Diskussion

I denne undersøgelse fandt vi, at behandling med EGCG væsentligt forbedrede indlærings-, hukommelses- og rumlige udforskningsevner hos hypoxigrupperotterne og mindskede den hippocampale neurale skade induceret af kronisk eksponering for HAH-miljøet. Desuden fandt vi også, at på trods af betydelige forbedringer i alle indikatorerne efter EGCG-behandling, vendte disse indikatorer sjældent tilbage til normale hypoxiniveauer.

Tidligere undersøgelser har fundet ud af, at EGCG har nogle effekter på forskellige typer indlærings- og hukommelsessvækkelsesmodeller [28, 29]. Safar et al. fandt, at EGCG kan forbedre hukommelsen hos morfinbehandlede rotter [30]. I overensstemmelse med deres resultater blev forsøgspersonernes indlærings-, hukommelses- og rumlige udforskningsevner i vores undersøgelse, efter daglig intervention med 50 mg/kg EGCG hos rotter, der var kronisk udsat for HAH, forbedret, hvilket tyder på, at EGCG kunne forbedre indlærings- og hukommelsessvækkelse ved høje højder.

Mange undersøgelser har vist, at overproduktionen af ​​jern i hjernen har en neurotoksisk effekt, da det bidrager til oxidativ skade [31]. I denne undersøgelse blev jernophobning påvist ved MR, immunhistokemifarvning og biokemiske vurderinger. Derudover blev FPN, som det eneste kendte multitransmembrane jerneksportprotein i pattedyrsceller, vurderet med PCR. Følsomhedsværdierne, positive celler af DAB forbedrede Perls' farvning og hippocampus-jernindhold steg i hypoxigruppen og faldt i h-EGCG-gruppen, mens FPN-ekspression viste den modsatte tendens. Derfor konkluderede vi, at HAH-induceret jernakkumulering kan forekomme gennem hæmning af jernudstrømning via en reduktion i FPN-ekspression.

MDA er slutproduktet af lipidperoxidation [32, 33] og kan bruges som en indikator for peroxidation. Tidligere undersøgelser har vist, at oxidativ stress kan stige med stigende højde [34]. Vores undersøgelse afslørede også, at MDA-koncentrationer steg signifikant i store højder. Derudover analyserede vi ekspressionen af ​​Caspase-3 og BDNF. Caspase-3 er den vigtigste initiator og udfører af terminale spaltningsenzymer og apoptose [35], mens BDNF, som en neurotrofin, der kan regulere neuronoverlevelse og differentiering samt forbedre synaptisk transmission [36], fremmer regenerering. Lin et al. rapporterede, at hypoxi kan øge niveauerne af Caspase-3 og inducere apoptose i hippocampale neuroner [37]. Lee et al. rapporterede, at efter 3 minutters global iskæmi i ørkenrotten forhindrede EGCG iskæmi-induceret hippocampus celledød [38]. I vores undersøgelse fandt vi også ud af, at EGCG sænkede niveauerne af det proapoptotiske protein, Caspase-3 og øgede ekspressionen af ​​BDNF.

Mitokondriel strukturel skade og dysfunktion er vigtige patologiske træk i hjernen under hypoxi [39]. I vores undersøgelse påviste ultrastrukturel observation tilstedeværelsen af ​​dyb farvning, mitokondriel hævelse og crista-forsvinden i hippocampale neuroner under HAH, hvorimod hippocampale neuroner efter EGCG-behandling var signifikant beskyttet mod disse skader såsom karyopynosis. Iwona Zwolak opsummerede, at EGCG kan beskytte mod tungmetaltoksicitet ved at bevare mitokondrielt membranpotentiale og forbedre mitokondrielle antioxidanter og respiratoriske funktioner [40]. Vi formoder, at disse mekanismer også kan være til stede i den beskyttende rolle af EGCG på hjerneeksponering for HAH-miljøet. Som konklusion kan EGCG reducere jernakkumulering, sænke niveauer af oxidativt stress og apoptose og fremme neuronal regenerering og dermed forbedre rottehjernesvækkelse induceret af kronisk eksponering for hypoxi i høj højde. Derfor har det potentialet til at tjene som et nyt lægemiddel til behandling og forebyggelse af kronisk bjergsyge.

Anerkendelser

Vi vil gerne udtrykke vores oprigtige taknemmelighed over for kernefaciliteterne på West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Kina, for at have givet os faciliteterne og assistancen såsom open-field-testen og Morris-vandlabyrint-testen, der blev brugt i denne undersøgelse.

Forfatterbidrag

CC og HC udtænkte, designet også og udførte denne undersøgelse; CC behandlede dataene og udarbejdede manuskriptet; JC modificerede manuskriptet; BL, BH, YW, DZ og YQ hjalp med at udføre eksperimenterne og FG var ansvarlig for alle processerne.

Finansiering

Denne undersøgelse blev støttet af National Natural Science Foundation of China (nr. 81930046, 81771800 og 81829003).

Datatilgængelighed

De datasæt, der er genereret under og/eller analyseret under den aktuelle undersøgelse, er tilgængelige fra den tilsvarende forfatter efter rimelig anmodning.

Erklæringer

Interessekonflikt

Forfatterne har ingen relevante økonomiske eller ikke-finansielle interesser at oplyse.

Etisk godkendelse

Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen. Godkendelsen blev givet af den eksperimentelle dyreetiske komité på West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Kina.

Åben adgang

Denne artikel er licenseret under en Creative Commons Attribution 4.0 International License, som tillader brug, deling, tilpasning, distribution og reproduktion i ethvert medie eller format, så længe du giver passende kredit til den eller de originale forfattere ) og kilden, angiv et link til Creative Commons-licensen og angiv, om der er foretaget ændringer. Billederne eller andet tredjepartsmateriale i denne artikel er inkluderet i artiklens Creative Commons-licens, medmindre andet er angivet i en kreditgrænse til materialet. Hvis materiale ikke er inkluderet i artiklens Creative Commons-licens, og din påtænkte brug ikke er tilladt i henhold til lovbestemmelser eller overskrider den tilladte brug, skal du indhente tilladelse direkte fra indehaveren af ​​ophavsretten.

Referencer

1. Jain V (2016) Brain food i stor højde. Adv Neurobiol 12:307– 321. https://doi.org/10.1007/978-3-319-28383-8_16

2. Singh LC (2017) Højhøjde dermatologi. Indian J Dermatol 62:59–65. https://doi.org/10.4103/0019-5154.198050

3. Shi J, Wang J, Zhang J, Li X, Tian X, Wang W, Wang P, Li M (2020) Polysaccharid udvundet fra Potentilla anserina L afhjælper akut hypobarisk hypoxi-induceret hjernesvækkelse hos rotter. Phytother Res 34:2397-2407. https://doi.org/10.1002/ptr.6691

4. Leon-Velarde F, Maggiorini M, Reeves JT, Aldashev A, Asmus I, Bernardi L, Ge RL, Hackett P, Kobayashi T, Moore LG, Penaloza D, Richalet JP, Roach R, Wu T, Vargas E, Zubieta -Castillo G, Zubieta-Calleja G (2005) Konsensuserklæring om kroniske og subakutte højhøjdesygdomme. High Alt Med Biol 6:147–157.https://doi.org/10.1089/ham.2005.6.147

5. Villafuerte FC, Corante N (2016) Kronisk bjergsyge: kliniske aspekter, ætiologi, ledelse og behandling. High Alt Med Biol 17:61–69. https://doi.org/10.1089/ham.2016.0031

6. Germuska M, Chandler HL, Stickland RC, Foster C, Fasano F, Okell TW, Steventon J, Tomassini V, Murphy K, Wise RG (2019) Dobbeltkalibreret fMRI-måling af den absolutte cerebrale metaboliske hastighed af iltforbrug og effektiv oxygendiffusion. Neuroimage 184:717–728. https://doi.org/10.1016/j.neuroimage.2018. 09.035

7. Maiti P, Singh SB, Mallick B, Muthuraju S, Ilavazhagan G (2008) Forringelse af hukommelsen i høj højde skyldes neuronal apoptose i hippocampus, cortex og striatum. J Chem Neuroanat 36:227– 238. https://doi.org/10.1016/j.jchemneu.2008.07.003

8. Turner CE, Barker-Collo SL, Connell CJ, Gant N (2015) Akut hypoxisk gasånding svækker kognition og opgavelæring alvorligt hos mennesker. Physiol Behav 142:104-110. https://doi.org/10. 1016/j.physbeh.2015.02.006

9. McMorris T, Hale BJ, Barwood M, Costello J, Corbett J (2017) Effekt af akut hypoxi på kognition: en systematisk gennemgang og metaregressionsanalyse. Neurosci Biobehav Rev 74:225–232.https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2017.01.019

10. Wilson MH, Newman S, Imray CH (2009) De cerebrale virkninger af opstigning til store højder. Lancet Neurol 8:175-191. https://doi. org/10.1016/S1474-4422(09)70014-6

11. Hu S, Shi J, Xiong W, Li W, Fang L, Feng H (2017) Oxiracetam eller fastigial nucleus stimulation reducerer kognitiv skade i stor højde. Brain Behav 7:e00762. https://doi.org/10.1002/brb3.762

12. Zhang XY, Zhang XJ, Xv J, Jia W, Pu XY, Wang HY, Liang H, Zhuoma L, Lu DX (2018) Crocin dæmper akut hypobarisk hypoxi-induceret kognitiv underskud hos rotter. Eur J Pharmacol 818:300-305. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2017.10.042

13. Graham HN (1992) Sammensætning af grøn te, forbrug og polyphenolkemi. Forrige Med 21:334-350. https://doi.org/10. 1016/0091-7435(92)90041-f 14. Musial C, Kuban-Jankowska A, Gorska-Ponikowska M (2020) De gavnlige egenskaber ved grøn te-katechiner. Int J Mol Sci. https:// doi.org/10.3390/ijms21051744

15. Eng QY, Thanikachalam PV, Ramamurthy S (2018) Molekylær forståelse af Epigallocatechin gallat (EGCG) i kardiovaskulære og metaboliske sygdomme. J Ethnopharmacol 210:296-310.

For more information:1950477648nn@gmail.com