Urinmetabolomics afslører unormal restitution efter maksimal anstrengelse hos kvindelige ME/CFS-patienter, del 1

Hvorfor vil vi være trætte? Hvordan kan vi løse træthedsproblemerne?

【Kontakt】 E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

Abstrakt:Myalgisk encephalomyelitis/kronisk træthedssyndrom (ME/CFS) er en invaliderende sygdom med ukendt ætiologi eller effektive behandlinger. Post-exertional malaise (PEM) er et nøglesymptom, der kendetegner ME/CFS-patienter. At undersøge ændringer i urinmetabolomet mellem ME/CFS-patienter og raske forsøgspersoner efter anstrengelse kan hjælpe os med at forstå PEM. Denne pilotundersøgelse havde til formål at karakterisere urinmetabolomerne fra otte kvindelige raske stillesiddende kontrolpersoner og ti kvindelige ME/CFS-patienter som svar på en maksimal kardiopulmonal træningstest (CPET). Hvert forsøgsperson gav urinprøver ved baseline og 24 timer efter træning. I alt 1403 metabolitter blev påvist via LC-MS/MS af Metabolon®, herunder aminosyrer, kulhydrater, lipider, nukleotider, cofaktorer og vitaminer, xenobiotika og ukendte forbindelser. Ved at bruge en lineær mixed effect-model, pathway-berigelsesanalyse, topologianalyse og korrelationer mellem urin- og plasmametabolitniveauer blev der opdaget signifikante forskelle mellem kontroller og ME/CFS-patienter i mange lipider (steroider, acylcarnitiner og acylglyciner) og aminosyresubpathways (cystein, methionin, SAM og taurin; leucin, isoleucin og valin; polyamin; tryptofan; og urinstofcyklus, arginin og prolin). Vores mest uventede opdagelse er manglen på ændringer i urinmetabolomet hos ME/CFS-patienter under bedring, mens væsentlige ændringer induceres i kontroller efter CPET, hvilket potentielt viser manglen på tilpasning til alvorlig stress hos ME/CFS-patienter.

Cistanche kan fungere som en anti-trætheds- og udholdenhedsforstærker, og eksperimentelle undersøgelser har vist, at afkog af Cistanche tubulosa effektivt kunne beskytte leverhepatocytter og endotelceller beskadiget i vægtbærende svømmemus, opregulere ekspressionen af ​​NOS3 og fremme hepatisk glykogen syntese og udøver således anti-træthedseffektivitet. Phenylethanoid-glycosid-rigt Cistanche tubulosa-ekstrakt kunne signifikant reducere serum-kreatinkinase, lactat-dehydrogenase og lactat-niveauer og øge hæmoglobin- (HB) og glukoseniveauer i ICR-mus, og dette kunne spille en anti-træthedsrolle ved at mindske muskelskaden og forsinkelse af mælkesyreberigelsen til energilagring i mus. Compound Cistanche Tubulosa-tabletter forlængede den vægtbærende svømmetid betydeligt, øgede leverglykogenreserven og sænkede serumurinstofniveauet efter træning hos mus, hvilket viste dens anti-træthedseffekt. Afkog af Cistanchis kan forbedre udholdenheden og fremskynde elimineringen af ​​træthed hos motionsmus og kan også reducere forhøjelsen af ​​serumkreatinkinase efter belastningsøvelser og holde ultrastrukturen af ​​skeletmuskulaturen hos mus normal efter træning, hvilket indikerer, at det har virkningerne for at øge fysisk styrke og anti-træthed. Cistanchis forlængede også signifikant overlevelsestiden for nitritforgiftede mus og forbedrede tolerancen over for hypoxi og træthed.

Klik på pludselig træthed i løbet af dagen

Nøgleord:ME/CFS; metabolomics; urin; dyrke motion

1. Introduktion

Myalgisk encephalomyelitis/kronisk træthedssyndrom (ME/CFS) er en invaliderende sygdom, der påvirker anslået 1,5-3 millioner voksne og børn alene i USA [1,2]. Størstedelen af ​​ME/CFS-patienter er ude af stand til at arbejde på grund af deres sygdom, hvilket fører til en estimeret minimal økonomisk indvirkning på 35-51 milliarder USD om året i medicinske omkostninger og tabt produktivitet tilsammen [1]. Symptomer på denne erhvervede systemiske sygdom omfatter en ny indtræden af ​​vedvarende fysisk og mental træthed, der er alvorlig nok til at forhindre normale aktiviteter, uopfriskende søvn, smerte, kognitiv svækkelse, ortostatisk intolerance, immunmanifestationer såsom tilbagevendende influenzalignende symptomer og ondt i halsen og neuroendokrine sygdomme. manifestationer som intolerance over for varme og kulde [3].

Derudover er kendetegnende symptom på ME/CFS post-anstrengelsesmæssig utilpashed (PEM), som er en forværring af symptomer efter enhver form for anstrengelse, inklusive både fysisk og kognitiv anstrengelse, begyndende fra umiddelbart efter anstrengelsen til mere end 24 timer senere [4]. PEM kan vare timer til måneder, og varigheden varierer meget selv for individuelle patienter [4,5]. I modsætning til de fleste kroniske sygdomme, hvor træning er gavnligt, er personer med ME/CFS derfor træningsintolerante. Denne træningsintolerance kan vurderes klinisk ved hjælp af en to-dages kardiopulmonal træningstest (CPET).

I to-dages CPET-protokollen bruges den første CPET til at måle "baseline funktionel kapacitet", mens den inducerer PEM [6]. Den anden CPET, 24 timer senere, måler den nedsatte ydeevne på et tidspunkt, hvor de fleste patienter allerede vil opleve PEM-symptomer fra den første CPET. Forsøgspersoner med andre forskellige sygdomme kan præstere tilsvarende på en CPET to dage i træk, hvorimod ME/CFS-patienter ikke er i stand til at præstere så godt på den anden dag [7,8]. Denne nedsatte præstationsevne kan dokumenteres med objektive mål, herunder reduceret maksimalt iltforbrug og maksimal arbejdsbelastning større end den typiske variabilitet ved gentagne tests, på trods af at forsøgspersoner opretholder et respiratorisk udvekslingsforhold (RER) over 1,1, hvilket svarer til maksimal indsats [6].

Selvom der er en voksende mængde viden, der beskriver patofysiologien af ​​ME/CFS, er ætiologien af ​​sygdommen stadig ukendt, og der er i øjeblikket ingen diagnostiske laboratorietests eller FDA-godkendte behandlinger. På trods af manglen på diagnostiske biomarkører er der mange dokumenterede molekylære patofysiologiske ændringer, der forekommer i ME/CFS, herunder i metabolomics [9,10].

Plasmametabolomet hos ME/CFS-patienter har fået en betydelig mængde opmærksomhed i over et årti, dog ofte på begrænsede kohortestørrelser, med et stigende antal målte metabolitter (fra lidt over 20 til omkring 1200 metabolitter for nylig) [11-22 ]. Tværtimod er tidligere undersøgelser af urinmetabolomik hos ME/CFS-patienter meget begrænsede. De få publicerede undersøgelser har kun målt 28-42 metabolitter, som primært har været aminosyrer [19,20,23,24]. Mens de fleste resultater ikke har været konsistente mellem studierne, fandt to studier phenylalanin i lavere koncentrationer hos ME/CFS-patienter end raske kontroller [23,24]. Selvom en undersøgelse af McGregor et al. undersøgte urinmetabolitter i sammenhæng med selvrapporteret PEM [19], og vores gruppe offentliggjorde for nylig en grundig undersøgelse af plasmametabolomet (1157 metabolitter) før og efter træning [25], ingen undersøgelser af ME/CFS-patienter har målt metabolitter i urin efter en bevidst træningsudfordring.

Måling af forbindelser i urin er fordelagtig på grund af ikke-invasiv og nem prøveindsamling, som gør den ideel til diagnostik. Derudover kan ændret udskillelse af metabolitter hos ME/CFS-patienter efter en træningsudfordring give indsigt i patofysiologien af ​​PEM, der komplementerer de ændringer, der er dokumenteret i plasmametabolomet. Denne pilotundersøgelse havde til formål at undersøge ændringer i urinmetabolomerne hos otte kvindelige raske stillesiddende kontrolpersoner og ti kvindelige ME/CFS-patienter som svar på en maksimal kardiopulmonal træningstest (CPET). Denne undersøgelse repræsenterer en ca. 30-fold stigning i antallet af metabolitter målt i urinen hos ME/CFS-patienter, fra mindre end 50 i tidligere undersøgelser til 1403 i den nuværende undersøgelse.

Vores omfattende analyse afslører talrige og signifikante forskelle i urinmetabolomerne af ME/CFS og kontrolgrupper som reaktion på træning, på trods af det lille antal undersøgte forsøgspersoner. Sådanne ændringer er overvejende til stede i lipid- og aminosyremetaboliske superpathways. Vi fandt et stort antal metabolitter med øgede niveauer i urinen hos kontroller 24 timer efter træning. Stigningen i urinudskillelse efter træning forekom ikke hos ME/CFS-patienter, hvilket er tegn på metabolisk dysregulering under træningsrestitution.

2. Resultater

2.1. Studiedesign og fagkarakteristika

Otte kvindelige raske stillesiddende kontrolpersoner og ti kvindelige ME/CFS-patienter gav en baseline-urinprøve om morgenen før træningstest (figur 1). Alle forsøgspersoner udførte CPET på en stationær cykel og blev overvåget for at sikre, at de brugte maksimal indsats (RER > 1,1). En urinprøve efter træning blev indsamlet fra alle forsøgspersoner 24 timer senere. Metabolitter blev målt i alle urinprøver af Metabolon® ved hjælp af deres Precision Metabolomics™ LC-MS/MS globale metabolomiske platform.

Som forventet scorede ME/CFS-patienterne væsentligt lavere på flere mål for fysisk funktion, inklusive Bell-handicapskalaen og den fysiske SF-36-komponent. På Bell-skalaen var medianen for kontrollerne 90, hvilket svarer til "Ingen symptomer i hvile; milde symptomer med aktivitet; normalt overordnet aktivitetsniveau; i stand til at arbejde fuld tid uden besvær" [26]. Medianen for ME/CFS-patienterne var 30, hvilket svarer til "Moderate til svære symptomer i hvile. Alvorlige symptomer ved enhver træning; det samlede aktivitetsniveau reduceret til 50% af forventet. Normalt begrænset til huset. Ude af stand til at udføre nogen anstrengende opgaver . Kan udføre skrivebordsarbejde 2-3 timer om dagen, men kræver hvileperioder" [26]. ME/CFS-patienterne havde en bred vifte af sygdomsvarighed på 2-27 år (median 7,5 år).

2.2. Mange forskelle i urinmetabolomerne hos ME/CFS-patienter og kontroller opstår gennem analyse af ændringer mellem prøver før og efter træning

Metabolon® detekterede i alt 1403 metabolitter i disse prøver ved hjælp af deres Precision Metabolomics™ LC-MS/MS globale metabolomics-platform. Ud af de 1403 målte metabolitter er 886 kendte metabolitter, 64 er delvist karakteriserede molekyler, og 453 er ukendte forbindelser (Supplerende fil S1—Rådata). Alle data var osmolalitetsnormaliseret for at tage højde for forskelle i den samlede koncentration af hver urinprøve. Osmolalitetsdata for hver forsøgsgruppe er vist i supplerende figur S1 og var ikke signifikant forskellige mellem ME/CFS-patienter og kontroller på begge tidspunkter. Der var en tendens til øget osmolalitet i kontrollerne 24 timer efter træning (p < 0,1, lineær mixed effects model, efterfulgt af parvise sammenligninger med Tukeys posthoc test). Ved at normalisere osmolaliteten sikrede vi, at eventuelle forskelle påvist i metabolitniveauer både mellem ME/CFS og kontrolgrupper og fra baseline til post-motion inden for kohorter ikke blot er en afspejling af ændringer i osmolalitet.

Manglende værdier blev imputeret med det minimum som anbefalet af Metabolon®, undtagen i tilfælde af narkotika og tobak, hvor de manglende værdier blev imputeret med 0. Dataene for hver metabolit var mediancentreret til 1, og alle data blev log10 transformeret ved hjælp af MetaboAnalystR (tilgængelig på www.metaboanalyst.ca, tilgængelig den 14. december 2022). Filtrering blev anvendt for at eliminere forbindelser med en stor mængde manglende data fra analysen i henhold til den modificerede 80 %-regel: en metabolit er inkluderet, hvis den påvises i mindst 80 % af prøverne hos enten ME/CFS-patienterne, kontrollerne , eller begge grupper [27]. I alt opfyldte 1154 metabolitter kriterierne og blev inkluderet i analysen.

En lineær mixed effects model (LMM) for hver metabolit blev brugt til at bestemme forskellene mellem ME/CFS og kontrolgrupper på hvert tidspunkt (baseline eller postexercise), ændringen over tid inden for ME/CFS og kontrolgrupperne, og hvilke metabolitter ændrede sig anderledes efter træning i ME/CFS- og kontrolgrupperne. Modelformlen er som følger:

Metabolit ~ Sygdomsstatus ∗ Tidpunkt + Alder + BMI + (1|Emne)

P-værdierne for hver metabolit blev justeret til flere sammenligninger ved hjælp af Benjamini-Hochberg (BH)-proceduren med en signifikansgrænse på q < 0.1 (Supplerende fil S2—Lineær blandede modelresultater) [28]. Fordi vi justerede for confounderens alder og BMI, skyldes de signifikante forskelle, vi opdagede med denne model, ikke forskellen i BMI i de to grupper.

Ingen signifikante forskelle blev påvist mellem kontroller og ME/CFS-patienter ved baseline (figur 2A). 24 timer efter træning var fire forbindelser signifikant forskellige, som alle havde lavere koncentrationer hos ME/CFS-patienterne sammenlignet med kontrollerne (figur 2B). De fire forbindelser omfattede tre acylglyciner og en ukendt forbindelse.

Kontrolgruppen udviste store ændringer i urinmetabolomet, når man sammenlignede baseline- og urinprøverne efter træning, med 255 forbindelser signifikant ændret ved q < 0.1-tærsklen (figur 2C). Alle undtagen fem forbindelser viste øgede koncentrationer efter træning. Dette er i skarp kontrast til ME/CFS-gruppen, hvor vi ikke påviste nogen forbindelser med signifikante ændringer i koncentrationen på grund af træning (figur 2D).

En signifikant interaktion mellem sygdomsstatus (ME/CFS vs. kontrol) og tidspunkt (baseline vs. post-motion) i den lineære mixed effect-model viser, hvilke metabolitter der ændrer sig forskelligt i ME/CFS- og kontrolgrupperne under træningsrestitution (dvs. , over tid). Figur 2E viser 11 0 signifikant forskellige metabolitter ved q < 0.1 tærsklerne (røde prikker), og 35 metabolitter er også under q < 0,05 (1,3 på -Log10q y-aksen i figur 2E) ). I dette vulkanplot er log2-foldændringen et forhold mellem forhold; forholdet mellem de gennemsnitlige forhold efter træning/baseline hos ME/CFS-patienterne og de gennemsnitlige forhold efter træning/baseline hos kontrollerne. Post-træning/baseline-forholdet for hvert forsøgsperson viser, om metabolitten er øget eller nedsat i urinen hos hvert forsøgsperson under træningsrestitution. De gennemsnitlige normaliserede koncentrationer for kontrollerne og ME/CFS-patienter på begge tidspunkter for de 56 kendte forbindelser inkluderet i disse 110 forbindelser viser, at der for de fleste forbindelser er en stigning i kontrollerne efter træning, som ikke ses ved ME/ CFS-patienter (Supplerende figur S2). Derfor er de forbindelser, der ændrer sig forskelligt under restitution i kontrol- og ME/CFS-grupperne, overvejende øget efter træning i kontrolgruppen og ikke signifikant ændret i ME/CFS-gruppen, hvilket fører til en negativ log2-fold ændring for ME/CFS vs. kontrol efter træning/baseline-forhold. I alt er 102 af de 110 forbindelser, der ændrer sig forskelligt over tid hos patienter i forhold til kontroller, også signifikant øget i kontrollerne efter træning.

At der er metabolitændringer i kontrollerne og ikke hos patienterne, skyldes ikke øget variation i metabolitniveauer hos ME/CFS-patienterne sammenlignet med kontrollerne. Der er ingen tendens til højere standardafvigelse i ME/CFS-gruppen, når man sammenligner standardafvigelserne for ME/CFS med kontroller for hver forbindelse (Supplerende figur S3). Derudover detekteres disse ændringer på trods af normalisering af urinosmolalitet, som er på vej mod en stigning i kontrollerne fra baseline til post-motion (Supplerende figur S1). For at stige markant efter normalisering, skal niveauer af en metabolit stige endnu højere end enhver stigning i den samlede urinkoncentration.

Tilsammen viser disse resultater, at træning inducerer en signifikant stigning i mange metabolitter i urin 24 timer efter træning hos raske stillesiddende kontroller, og manglen på disse ændringer hos ME/CFS-patienter er en nøglekomponent i deres sygdomstilstand og kan være relateret at udøve intolerance.

2.3. To tilgange til berigelsesanalyse afslører metaboliske underveje med de mest markante ændringer

Vi udførte derefter berigelsesanalyse ved hjælp af Metabolon®'s pathway-annoteringer og ChemRICH (i R) [29,30]. Denne analyse er ikke afhængig af noget baggrunds- eller referencemetabolom og indeholder ikke-overlappende vejtildelinger for hver metabolit. I modsætning til standard ChemRICH-analyse, som tildeler metabolitter til klynger efter kemisk lighed, brugte denne analyse ikke-overlappende vejtildelinger fra Metabolon®. Ved at se på veje i modsætning til enkelte metabolitter, kan vi identificere metabolitsæt, der er væsentligt ændret som en gruppe, hvorimod individuelle metabolitter i det sæt måske ikke har opnået betydning i LMM alene. Derudover kan vi holistisk beskrive de ændringer i urinmetabolomet, der opstår efter træning, og hvordan de ændres væsentligt hos ME/CFS-patienter. Input til denne analyse er foldændringen af ​​den gennemsnitlige normaliserede koncentration for hver sammenligning og p-værdierne fra LMM kontrasterne for de 734 kendte forbindelser ud af 1154 totalt analyserede (tildelt til 84 underveje ud af 92 underveje for alle påviste metabolitter) . Berigelse vurderes ved hjælp af Kolmogorov-Smirnov-testen med BH FDR-korrektion (signifikansgrænse q < 0,05).

Figur 3 viser de væsentligt ændrede subpathways for de samme sammenligninger som i figur 2: ME/CFS vs. kontroller ved baseline, post-motion og for post-motion/baseline ratioerne og ændringen efter træning i kontrolgruppen alene . Vi analyserede også ændringen efter træning hos ME/CFS-patienterne, men der var ingen signifikant ændrede veje.

I denne figur er subpathways organiseret af Metabolon® efter kemisk lighed, og superpathways er derefter organiseret alfabetisk, med aminosyrer først, efterfulgt af kulhydrater, lipider, nukleotider, vitaminer og cofaktorer og til sidst xenobiotika. Et ændret forhold på 1 betyder, at hver forbindelse, vi målte i en pathway, var signifikant ændret (p < 0.05 i LMM). Røde bobler indikerer, at alle væsentligt ændrede forbindelser steg i den sammenligning, og blå bobler indikerer, at alle væsentligt ændrede forbindelser faldt i denne sammenligning. Vi udførte også ChemRICH-analyse ved hjælp af Medical Subject Headings (MeSH) ontologi og Simplified Molecular Input Line Entry System (SMILES) koder for at tildele forbindelser til klynger baseret på kemisk lighed (Supplerende figur S4). Kun 516 forbindelser kunne matches til SMILES-koder til denne analyse. Vi valgte en signifikansgrænse på q < 0.15 for MeSH ontologiberigelsen, fordi vi ikke ønskede at udelukke potentielt interessante resultater for denne pilotundersøgelse, og ved q < 0.15 oprindeligt alle klynger havde p < 0.025. For Metabolon®-subpathway-berigelsen var kun ved q < 0,05 alle signifikante klynger også ved p < 0,05.

Ved baseline var kun xanthinmetabolismen og xanthinernes kemiske klynge signifikant forskellige mellem ME/CFS-patienter og kontroller, med lavere koncentrationer af alle forbindelser fundet i urinen hos ME/CFS-patienter (Figur 3, q ​​< 0). 05 og supplerende figur S4, q < 0,15). Xanthiner omfatter koffein og theophyllin, så denne kemiske klynge påvirkes af kosten.

Tolv Metabolon®-subpathways blev signifikant ændret efter træning hos ME/CFS-patienter versus kontroller, igen med overvejende lavere metabolitkoncentrationer hos ME/CFS-patienter (figur 3). Fem af disse subpathways tilhører lipid super-pathway og er involveret i fedtsyremetabolisme (herunder acyl glutamin, acyl glycin og acylcarnitin). Inden for aminosyremetabolismens super pathway var tyrosinmetabolismen signifikant anderledes 24 timer efter træning, og inden for nukleotidmetabolismen var uracil-holdig pyrimidinmetabolisme signifikant ændret. 24 timer efter træning var kun tre kemiske klynger signifikant ændret i ME/CFS-patienterne ved hjælp af MeSH-ontologien, inklusive fedtsyrer (10:1), xanthiner og sukkersyrer (Supplerende figur S4).

Når man sammenligner træningsrestitutionen (ændringen over tid) hos ME/CFS-patienter vs. kontroller ved brug af post-motion/baseline-forholdet, viser sig endnu flere veje at være signifikant forskellige, nemlig syv aminosyresubpathways, syv lipidsubpathways og to. kulhydratunderveje. Til denne sammenligning er 13 kemiske klynger signifikant forskellige mellem patienter og kontroller (Supplerende figur S4).

Det højeste antal signifikant ændrede Metabolon®-underveje og kemiske klynger blev fundet i kontrolgruppen ved sammenligning af tidspunkterne efter træning og baseline (figur 3 og S4), med det store flertal af forbindelser øget efter træning (rød farve). Kun den adeninholdige purinmetabolismesubpathway, histidinmetabolismesubpathwayen og den kemiske methylhistaminklynge havde en tilsvarende mængde af øgede og nedsatte forbindelser.

De fleste af Metabolon®-undervejene og kemiske klynger, der er øget i kontrollerne efter træning, er de samme, som blev væsentligt ændret i ME/CFS versus kontroller, når man sammenlignede forholdet mellem post-træning/baseline, hvilket viste, at de ændrede sig anderledes under træningsrestitution. hos ME/CFS-patienterne vs. raske stillesiddende kontroller. For begge disse sammenligninger var subpathwayen med den laveste q-værdi for subpathway berigelse kortikosteroider. Samlet set var 8/13 forbindelser signifikant ændret hos ME/CFS-patienterne vs. kontrolgruppen (og alle havde lavere post-motion/baseline-forhold hos patienter), og 11/13 forbindelser steg signifikant i kontrollerne efter træning (p < {{7 }}.05 i LMM).

Fire subpathways, som alle tilhører lipidsuperpathwayen, havde signifikant ændret koncentration i urinen i alle tre sammenligninger: ME/CFS vs. kontrol på tidspunktet efter træning, ME/CFS vs. kontrol post-motion/baseline-forhold og post- -motion vs. baseline i kontrolgruppen. Disse subpathways omfatter to acylcarnitin fedtsyre metabolisme subpathways (medium chain og dicarboxylat), androgene steroider og sekundær galdesyre metabolisme.

Der er også adskillige aminosyresubpathways, hvori de fleste ændrede forbindelser øges signifikant i urinen hos kontrolpersoner efter træning og falder, når man sammenligner ME/CFS med kontrol efter træning/baseline-forhold. Af disse underveje er det ændrede forhold det højeste for polyaminmetabolisme (og det har den laveste q-værdi for ME/CFS vs. kontroller): 6/9 metabolitter er signifikant øget i kontroller, og 5/9 er signifikant reduceret i ME/CFS vs. kontrollerer post-motion/baseline ratio. Disse forbindelser omfatter acisoga, (N(1)+N(8))-acetylspermidin, diacetylspermidin, N1,N12- diacetylspermin og N-acetyl-isoputreanin (for denne subpathway har alle forbindelser også q < {{ 15}}.1 i LMM).

Arginin- og prolinmetabolismeundervejen i ureacyklussen i aminosyresuperpathwayen er den eneste med en metabolit, der er øget i ME/CFS vs. kontroller for post-motion/baseline-forholdet (udover fødevarekomponent/plante) med 8 /10 metabolitter signifikant ændret, og methylurinstof er den eneste øgede metabolit (p < 0.05 i LMM). Methylurinstof er også signifikant faldende i kontrollerne over tid (p < 0.05 i LMM) og er den eneste af 11 ændrede forbindelser i denne subpathway, der ikke er stigende. Ændringerne i methylurinstof var dog ikke signifikante, når man betragtede den univariate LMM-analyse med q < 0,1 tærskler. Ikke desto mindre har fire forbindelser i denne subpathway q < 0,1 i LMM for ME/CFS vs. kontroller efter træning/baseline sammenligning: carboxy-methyl-arginin, prolin, symmetrisk dimethylarginin og asymmetrisk dimethylarginin.

Leucin-, isoleucin- og valinmetabolismeundervejen har den laveste q-værdi i kontrollerne af undervejene i aminosyresupervejen. Denne subpathway har 36 forbindelser, hvor seks ændrer sig forskelligt over tid i ME/CFS vs. kontroller: 3-methylglutarylcarnitin, tiglylcarnitin(C5), valin, beta-hydroxyisovalerat, beta-hydroxyisovaleroylcarnitin og methylsuccinoylcarnitin. Seksten ud af seksogtredive forbindelser er signifikant øget i kontrollerne, inklusive alle seks, der ændrer sig forskelligt over tid hos ME/CFS-patienterne i forhold til kontrollerne.

【Kontakt】 E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501