Potentialet af persillepolyfenoler og deres antioxidantkapacitet til at hjælpe med behandling af depression og angst: en in vivo subakut undersøgelse

For mere info. kontakttina.xiang@wecistanche.com

Abstrakt: Depression og angst er store psykiske problemer i alle dele af verden. Disse sygdomme er forbundet med en række risikofaktorer, herunder oxidativt stress. Psykotropiske lægemidler af kemisk karakter har vist adskillige bivirkninger, der forhøjede virkningen af ​​disse sygdomme. Stillet over for denne situation ser naturlige produkter ud til at være et lovende alternativ. Formålet med denne undersøgelse var at evaluere de angstdæmpende og antidepressive virkninger af Petroselinum sativumpolyfenolerin vivo, såvel som dets korreleredeantioxidant egenskaber in vitro.Anxiolytiskaktiviteten af ​​ekstraktet (50 og 100 mg/kg) blev evalueret ved brug af det åbne felt og lys-mørke kammertestene, mens den antidepressive aktivitet blev evalueret ved brug af tvungen svømmetest. Ekstraktens antioxidantaktivitet blev evalueret ved 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) fri radikal-testen og FRAP-testen (jernreducerende kapacitet). Fenolekstraktet viste meget kraftige anxiolytiske og antidepressiv-lignende virkninger, især ved en dosis på 100 mg/kg, hvilket reducerede den depressive adfærd hos mus (nedsat immobilitetstid) og også den angstdæmpende adfærd (tendensen til opdagelse i centrum og oplyste områder )bedre endda end paroxetin og bromazepam (klassiske lægemidler) samtidig med disse resultater viste ekstraktet også en vigtig antioxidantkapacitet. Disse foreløbige resultater tyder på, at Petroselinum satioum udviser anxiolytisk og antidepressiv potentiale til brug som et komplement eller uafhængig phytomedicin til behandling af depression og angst.

Nøgleord: Petroselinum sativum; polyphenol; anxiolytisk; antidepressiv-lignende; antioxidant; farmakologi; urtemedicin; naturlige produkter

1. Introduktion

Depression og angstlidelser har længe været betragtet som psykiske problemer, og de udgør en tung byrde for ethvert samfund, hvor stress er allestedsnærværende. Verdenssundhedsorganisationen (WHO) forudsiger, at i 2030 vil depression, som en potentielt dødelig sygdom, være den anden førende årsag til handicap på verdensplan [1]. Ifølge de seneste WHO-estimater lider mere end 300 millioner mennesker på verdensplan af depression, hvoraf mere end 260 millioner også har angstlidelser [2].

Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-V) definerede svær depressiv lidelse som ikke blot en lejlighedsvis tristhed eller anfald af depression, men snarere et deprimeret humør eller tab af interesse eller glæde i mindst to på hinanden følgende uger, hvoraf episoder er ofte tilbagevendende [3]. WHO definerer også depression som "en række psykologiske og biologiske symptomer, såsom en generel følelse af tristhed, tab af glæde og interesse, skyldfølelse, forstyrret søvn (søvnløshed eller døsighed) og appetit, følelse af træthed (psykomotorisk retardering). ), og manglende koncentration".I de mest alvorlige tilfælde kan depression endda føre til selvmord [4].

Angst, som defineret af WHO, er "en følelse af ubestemt overhængende fare ledsaget af en tilstand af utilpashed, agitation, hjælpeløshed eller endda tilintetgørelse". Det kan også beskrives som en tilstand af forudgående frygt forårsaget af potentiel og usikker fare, selvom dens årsag ikke nødvendigvis er bevidst, i modsætning til frygt, der opstår i lyset af reel fare. Imidlertid er disse to følelser karakteriseret ved lignende fysiologiske (forhøjet blodtryk, svedtendens, takykardi osv.) og adfærdsmæssige (øget årvågenhed og undgåelse) reaktioner [5].

Depression og angst behandles generelt med psykotrop medicin, herunder antidepressiva oganxiolytika(beroligende midler), ofte af kemisk natur, såsom paroxetin og benzodiazepiner. Brugen af ​​disse medikamenter udviser dog visse grænser, og de kan forårsage uønskede bivirkninger. Bromazepam er ordineret til behandling af angst. Men dets forbrug kommer med en række negative bivirkninger, herunder døsighed, sedation og hukommelsestab [6]. Søvnbesvær, appetitløshed, døsighed og seksuel dysfunktion er også typiske bivirkninger af paroxetin, et antidepressivum fra serotoningenoptagshæmmer-familien (SSRI), der bruges til at håndtere alvorlige depressive lidelser [7]. Som et resultat af denne begrænsede effektivitet er udforskningen af ​​nye, mere effektive og ikke-toksiske terapeutiske midler meget værdsat.

Lægeplanter kan være en tilstrækkelig kilde til nye, sikre og effektive terapier, især da mange er kendt for at udvise færre bivirkninger [8]. Flere medicinske planter er blevet testet i ovennævnte lidelser, og de gav meget behagelige resultater, der tilskyndede til yderligere undersøgelser for at opdage antidepressiv-lignende og angstdæmpende egenskaber af yderligere planter [9].

Petroselinum satioum Hoffm., almindeligvis kendt som "persille" ("maadnous" på arabisk), er medlem af Apiaceae-familien. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm og Petroselinum crispum (Mill) Fuss. er også synonymer for Petroselinum sativum Hoffm.[10. Persille, som en kulinarisk urt, der stammer fra Middelhavsområdet, er blevet en globalt almindelig urt i moderne tid [11]. P. sativum har en række gavnlige egenskaber, bl.aantioxidant, analgetiske, spasmolytiske, antidiabetiske, immunmodulerende og gastrointestinale virkninger [12]. Disse forskellige fordele kan tilskrives plantens kernekomponenter, såsom polyphenoler (apigenin, quercetin, luteolin og kaempferol), vitaminer, carotenoider, coumarin og tanniner [13]. Apiaceae-familien omfatter flere planter kendt for deres antidepressive og anxiolytiske aktiviteter som Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] for en koncentration på mellem 50 og 200 mg/kg.

I denne undersøgelse, potentielle antidepressiv-lignende og anxiolytiske aktiviteter af persillepolyfenolerblev evalueret for første gang, sammen med densantioxidant aktivitet, for at afgøre, om der var en sammenhæng.

2. Resultater

2.1. Evaluering af antioxidantaktiviteten

2.1.1.DPPH-test

Figur 1 viser procentdelen af ​​antioxidantaktivitet som funktion af forskellige niveauer af PSPE og BHT'er. De opnåede resultater viser, at vores ekstrakt og BHT udviser koncentrationsafhængig antiradikal aktivitet. Det vil sige, at procentdelen af ​​inhibering af DPPH-radikalet stiger med koncentrationen af ​​phenolekstrakten af ​​P. sativum og BHT. BHIT viste den højeste aktivitet sammenlignet med vores ekstrakt. For 0,5 ug/mL nåede BHT en maksimal hæmningsprocent på 90 procent, som forblev konstant i en koncentration på 1 ug/mL. Ved samme koncentration producerede phenolekstrakten en maksimal hæmning på 58 procent

Den syntetiske antioxidant BHT udviste en meget kraftig antiradikal aktivitet med en IC50 på ca. 0.024 ug/mL, højere end den, der blev registreret for phenolekstrakten af ​​P sativum (ca. 0,184 ug/mL) .

2.1.2.FRAP-test

Figur 2 viser variationen i optisk tæthed (OD) som funktion af de forskellige koncentrationer af PSPE og BHT (positiv kontrol). Det kan ses, at reduktionsprocenterne er proportionale med koncentrationen af ​​både ekstrakten og BHT. Sidstnævnte viste en højere procentdel af reduktion sammenlignet med ekstraktet.

For at sammenligne effektiviteten af ​​den polyphenoliske fraktion af P.sativoum(PSPE) med den af ​​BHT, bestemte vi den koncentration, der reducerede 50 procent af FRAP (IC50).

BHT (Den syntetiske antioxidant BHT) viste meget potent antioxidantaktivitet med en IC50 på ca. 0.09ug/mL, højere end den, der blev registreret for phenolekstrakten af ​​P. sativum (ca. 0,38 ug/mL) ）.

2.2. Evaluering af antidepressiv aktivitet tvungen svømmetest

Variationen i nedetiden i tvungen svømmetest i løbet af forsøgets tre uger er vist i figur 3. Immobilitetstiden under testen var signifikant kortere i PSPE-behandlede mus (PSPE 50 mg/kg(34 s±3,286), PSPE 100 mg/kg (33,8 s ± 2,653)) sammenlignet med kontroller (Paroxetin (100,8 s ± 6,837), vehikel (176 s ± 6,550).

Disse resultater viser, at den antidepressive virkning af phenolekstrakten af ​​P. sativum er større end den af ​​paroxetin.

2.3. Evaluering af den anxiolytiske aktivitet

2.3.1. ængstelig adfærd i det åbne felt

Figur 4 viser variationen i den tid, der bruges i centrum af åben-felt-testen i løbet af de tre ugers ekstraktbehandlinger. Det kan ses, at mus behandlet med PSPE (50 og 100 mg/kg) tilbragte mere tid i det centrale område sammenlignet med kontrolgrupperne. Denne betydelige stigning er ikke kun proportional med behandlingens varighed, men også med koncentrationen af ​​ekstraktet. Den optimale værdi blev opnået med en koncentration på 100 mg/kg (37,4 s± 1,778, sammenlignet med 33,4 s±1,208 ved en dosis på 50 mg/kg). Dette indikerer enangstdæmpendevirkningen af ​​denne plante.

Variationen i antallet af krydsede fliser i løbet af det tre uger lange forsøg er vist i figur 5. Analyse viste en bemærkelsesværdig stigning i antallet af fliser, der krydses af PSPE-behandlede mus (50 mg/kg (161,2±5,490),100 mg/ kg (173±10,104)) sammenlignet med bromazepam 1 mg/kg (115,8± 1,393) og vehikel-(147,4±1,568)-behandlede grupper. Disse resultater indikerer en større anxiolytisk effekt af FPPS selv end bromazepams ved 1 mg/kg.

2.3.2. ængstelig adfærd i det lys-mørke rum

Figur 6 viser resultaterne af variationen i tid brugt i det oplyste kammer under undersøgelsesperioden. Resultaterne viser en progressiv stigning i tiden brugt i det oplyste kammer over tid for mus behandlet med PSPE. Denne stigning er især mærkbar på dag 21. I denne test tilbragte bromazepam-behandlede og PSPE-behandlede mus væsentligt mere tid i det oplyste rum (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50mg/kg (199,6s± 6.838), PSPE 100 mg/kg (213.6s±9.331) sammenlignet med kontrolmus (vehikel (75.8s±4.352)). Dette blev fortolket som bevis på en angstdæmpende virkning af P. sativum polyphenolekstrakt.

Figur 7 viser variationen i antallet af overgange mellem de lyse og mørke kamre under denne test. En bemærkelsesværdig forskel blev fundet i løbet af de 21 dage mellem PSPE-behandlede mus (50 mg/kg (16±{{10}}.548), 100 mg/ kg (12,4±0,510)) og kontrolmus (vehikel(10±0,837),bromazepam 1 mg/kg (12±0,949). Disse resultater stemmer overens med resultaterne af den tid, der blev brugt i det oplyste kammer, da disse to parametre er omvendt proportional med niveauet af angst musene udviste.

3. Diskussion

Vi påviste i denne undersøgelse, at phenolekstraktet af P. satioum udviser antioxidantaktivitet in vitro og anxiolytiske og antidepressive aktiviteter in vivo.

Ferulinsyre og kanelsyre har vist sig at have antidepressive virkninger i nogle undersøgelser [17,18], mens quercetin og hydroxytyrosol viste en godkendt anxiolytisk effekt [19,20]. Disse forbindelser kan stå bag den observerede effekt.

Effektiviteten af ​​en antioxidant kan udøves i forskellige former, såsom fjernelse af frie radikaler, nedbrydning af frie radikaler og også chelatdannelse af metalioner [17]. Denne aktivitet kan evalueres ved hjælp af FRAP- og DPPH-assays, hvoraf sidstnævnte, på grund af dens hurtighed, ofte bruges til at screene molekyler til stede i planteekstrakter [18]. Vores resultater viste antioxidantaktivitet i phenolekstraktet af persille. Tidligere arbejde af Hinneburg et al.[21] viste, at det vandige ekstrakt af persille udøvede en svag inhiberende aktivitet af DPPH-radikalet med en IC50 i størrelsesordenen 12.0±{{8} },10 mg/ml (sammenlignet med polyphenolekstraktet i vores undersøgelse, 0,184 ug/ml). Omvendt var den chelaterende virkning af dette ekstrakt mere effektiv sammenlignet med andre ekstrakter, der blev brugt i samme undersøgelse.

Nylige undersøgelser fandt også en sammenhæng mellem humørforstyrrelser og oxidativt stress [22,23] og psykologisk stress [24,25], hvilket åbnede nye veje til at forebygge og/eller håndtere angst og depression med hensyn til den potentielle anvendelse af antioxidanter. Desrumaux et al. [26] bemærkede, at underskud af E-vitamin i musens hjerner øgede niveauet af nøgletegn på oxidativ stress og angstfremkaldende adfærd. Ligeledes har mus givet C-vitamin for nylig afsløret, at denne forbindelse har en antidepressiv rolle baseret på halesuspensionstestresultaterne [27]. Polyfenoler, herunder flavonoider og phenolsyrer, er velkendte for deres potente antioxidantvirkninger [28,29]. Brugen af ​​disse sekundære fytokemiske metabolitter som en måde at undgå og håndtere angst og depression kan være en lovende strategi [9]. En undersøgelse udført af Akinci et al. [30] viste, at persille har succes med at minimere stress-induceret maveskader, når den indtages oralt ved at støtte antioxidantforsvarssystemet i celler, hvilket afspejles i en stigning i gennemsnitlige vævsglutathionniveauer (53,31 ± 9,50) og aktiviteterne af superoxiddismutase( 15,18±1,05) og katalase (16,68±2,29).

Det åbne felt-eksperiment bruges til at evaluere et dyrs følelsesmæssige tilstand. Dyr, der er blevet adskilt fra deres hjemmebur og sat i andre omgivelser, udviser ofte nød og angst ved at præsentere ændringer i alle eller nogle af parametrene, såsom et fald i ambulatorisk aktivitet, udforskning og immobilisering, men en stigning i pleje. adfærd [31]. P.sativum-ekstrakt i en dosis på 100 mg/kg frembragte en meget signifikant anxiolytisk effekt, som vist ved den betydelige stigning i tid brugt i midten af ​​feltet og total ambulatorisk aktivitet. Denne stigning var større end den, der blev set hos mus behandlet med bromazepam ved 1 mg/kg.

Eksperimentet med lys-mørke rum er også nyttigt til at forudsige den angstdæmpende effekt af medicin. For at måle graden af ​​angst hos mus under denne test noteres to parametre:(1)Den lavere procentdel af tid, som dyret tilbragte i det mørke kammer, er relateret til dets angstniveau. Med andre ord, når procentdelen af ​​tid brugt i det oplyste rum er minimal, anses angsten for høj, og(2) antallet af overgange, dvs. antallet af passager mellem de to rum, er omvendt relateret til angstniveauet (lavere antal overgange betyder højt angstniveau)[32]. Resultaterne af denne undersøgelse viste, at P. sativum polyphenolekstrakt ved 100 mg/kg viste en optimal anxiolytisk effekt baseret på dyrets øgede tid brugt i det oplyste kammer og antallet af overgange sammenlignet med kontroller i undersøgelsesperioden.

Det tvungne svømmeeksperiment blev udviklet i 1970'erne. Det er også kendt under navnet på sin opfinder som Porsolt-testen [33]. Vores fund indikerer, at immobilitetstiden for de behandlede mus var kortere end kontrolmusens, hvilket indikerer en antidepressiv virkning af phenolekstraktet af P. sativum. Dette fald i immobilitetstiden kan dog have været til fordel for enten en forøgelse af svømmetiden eller klatretiden. Denne forskel er meget vigtig ud fra et neurofarmakologisk synspunkt, da antidepressiva, der frembringer en overvejende noradrenerg eller dopaminerg stigning teoretisk, under tvungen svømning reducerer immobilitet ved at øge eskaleringstiden [34], hvorimod dem, der aktiverer 5HT i stedet reducerer immobilitet ved at øge svømmetiden [35]. Med hensyn til CNS-funktion interagerer størstedelen af ​​polyphenoler direkte med neurotransmittersystemer [36]. Undersøgelser udført på persille viser en overvægt af flavonoider 37]. Den brede vifte af flavonoider, der findes i traditionelle traditionelle medicinske ekstrakter, rapporteres at have beroligende/anxiolytiske virkninger ved direkte binding til GABAA-receptorer [38].

En undersøgelse udført af Priprem et al. [39] indikerer, at polyphenol quercetin udviser anxiolytisk aktivitet efter en uges gentagen administration i en dosis på 300 mg/kg, hvilket ikke er så effektivt som diazepam, der udviser sin virkning en time efter administration ved lavere doser. Pereira et al. [40] viste, at rosmarinsyre udviser en anxiolytisk effekt ved meget lave doser (2 til 4 mg/kg). Et andet eksempel er apigenin, som demonstrerer en selektiv og lav affinitet for benzodiazepinreceptorer, der frembringer en anxiolytisk aktivitet uden næsten ingen bivirkninger[41. Flavonoider spiller også en rolle i depression gennem hæmning af monoaminoxidase og den resulterende stigning i 5-HT-, DA- og noradrenalin-niveauer i visse områder af hjernen [42].

Excitatoriske aminosyrer, såsom aspartat, glutamat, homocystein og cystein, stimulerer postsynaptiske celler, hvorimod hæmmende aminosyrer, såsom alanin, glycin, GABA og taurin, undertrykker postsynaptisk celleudvikling 43]. Et enzym kaldet aromatisk L-aminosyre decarboxylase, også kaldet DOPA decarboxylase, tryptophan decarboxylase, 5-hydroxytryptophan decarboxylase eller AAAD, som katalyserer den respektive decarboxylering af L-dopa og 5-hydroxytryptophan til dopamin og {{ 7}}hydroxytryptamin kan også spille en rolle. Persille kan forårsage overekspression af dette enzym, hvilket bidrager til dets antidepressive virkning. En undersøgelse udført på Centella Asiatica, en plante tilhørende den samme Apiaceae-familie, viste, at den antidepressive virkning af totale triterpener skyldtes forbedringen af ​​funktionen af ​​hypothalamus-hypofyse-binyrebarken og stigningen i indholdet af monoamin-neurotransmittere. [44]. Disse undersøgelser tyder på tilstedeværelsen af ​​anxiolytisk og antidepressiv aktivitet af phenolekstraktet af P. sativum.

4. Materialer og metoder

4.1. Plantemateriale

Petroselinum sativum Hoffm. luftdele blev indsamlet i præ-blomstringsfasen (forår 2018) fra Tanounate-regionen i det nordlige Marokko (34 grader 32'9"N 4 grader 38'24"W). Klassificering, identifikation og botanisk navn på denne plante blev verificeret af en kvalificeret botaniker Pr. Bari Amina. Plantens prøve er deponeret på Det Naturvidenskabelige Fakultet Dhar El Mahrez Fez herbarium (voucherprøve: 18TA5001).

4.2. Udvinding

Ekstraktion blev udført som beskrevet af Slighoua et al. [11]. Kort fortalt blev 10 g af de tørrede luftdele af P. sativum fint pulver blandet med methanol (100 ml) og macereret i 3 timer ved en temperatur på 50 grader. Derefter blev filtratet koncentreret under anvendelse af en rotationsfordamper indtil tørhed for at sikre fuldstændig opløsningsmiddelfordampning. Den resulterende ekstrakt blev genopløst i destilleret vand (200 ml) og vasket ud med tre hexan og chloroform (200 ml tre gange) for at fjerne pigmenterne og andre urenheder. Den endelige vandige fase blev ekstraheret med ethylacetat (200 ml tre gange). Den organiske fase (ethylacetat) blev koncentreret til opnåelse af polyphenolekstrakten. Udbyttet af ekstraktionen er 10,52 procent.

Vi har tidligere publiceret arbejde på det samme ekstrakt, der ved hjælp af HPLC-DAD-analyse demonstreret, at det er sammensat af følgende polyphenoler: (1) Ferulinsyre, (2) Kanelsyre, (3) Gallussyre, (4) Quercetin, (5) Myricetin, (6) Naringenin, (7) Hydrox-tyrosol [11].

4.3. Studer dyr

I denne undersøgelse blev mus (schweiziske albino) leveret af Animal House på det naturvidenskabelige fakultet Dhar el Mahraz Fez. Før de blev inkluderet i eksperimenterne, blev de sat i grupper på seks i konventionelle bure og fik en to-ugers tilpasningsperiode med fri adgang til mad og vand og en kontrolleret temperatur på 22±2 grader og under en lys/mørke cyklus på 12 timer/12 timer.

Eksperimenter blev udført i overensstemmelse med internationale standarder for behandling og brug af forsøgsdyr [16] og den interne dyreetiske komité (#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Evaluering af antioxidantaktiviteten

4.4.1.2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) test

DPPH er en af ​​de mest almindelige kemiske forbindelser, der bruges til at vurdere antioxidantaktiviteten af ​​phenolforbindelser |45. DPPH har en uparret elektron på et brodannende nitrogenatom. Princippet for denne test er opsummeret i ekstraktens kapacitet til at reducere det mørkelilla DPPH frie radikal til en gullig-farvet reduktion, der kan måles ved spektrofotometri [28]. En række ekstraktkoncentrationer blev fremstillet i methanol, 100 μL af hver blev tilsat til 750 μL af en methanolisk opløsning af DPPH (0,004 procent). Efter en inkubationsperiode på 30 minutter ved 25 grader blev absorbansen målt ved 517 nm. For den negative kontrol blev prøven erstattet med methanol. Procentdelen af ​​DPPH blev bestemt ved følgende ligning:

(1)I=[(Blank-Sample)/Blank]×100

I procenten af ​​antiradikal aktivitet er Prøve absorbansen af ​​prøven, og Blank er absorbansen af ​​den negative kontrol.

4.4.2. Ferro Reducing Power (FRAP) test

Den reducerende kraft af jern (Fe3 plus) i det undersøgte ekstrakt blev bestemt ifølge metoden beskrevet af Mechchate et al. 【28】. Kort fortalt blev 100 μL af ekstraktet i forskellige koncentrationer blandet med 500μL af en fosfatpufret opløsning (PBS,0,2 M, pH6,6) ）og 500 μL af en 1 procent opløsning af kaliumferricyanid K, Fe（CN）. Disse blev inkuberet i et vandbad ved 50 grader i 20 min. Derefter blev 500 μL af en 10% vandig opløsning af trichloreddikesyre (TCA), 100 μL af en 0,1% opløsning af ferrichlorid FeCl3 og 0,5 mL destilleret vand tilsat til reaktionsblandingen. Absorbansaflæsningen af ​​denne blanding blev taget ved 700 nm mod en blindprøve indeholdende alle reagenserne i mediet undtagen planteekstrakten. Resultaterne er udtrykt som 50 procent effektiv koncentration (EC50), som repræsenterer den koncentration af antioxidanter, der er nødvendig for at opnå en absorbans på 0,5. En stigning i absorbans svarer til en stigning i den reduktionsevne af det testede ekstrakt.

4.5. Antidepressiv aktivitet tvungen svømmetest (FST)

Porsolt-modellen, eller tvungen svømmetest, er en prædiktiv test af antidepressiv-type aktivitet. Mus tvinges individuelt til at svømme i en cylindrisk beholder fyldt til en højde på 12 cm med vand. Testen varer 6 min, men kun de sidste 4 min af testen analyseres. Dyret anses for at være ubevægeligt, når det flyder i oprejst stilling og kun foretager få bevægelser for at opretholde balancen i vandet (immobilitetstid).

I alt fire batcher af fem mus hver blev brugt til denne test. Alle planteekstrakter blev administreret med sonde i 21 dage, og testen blev udført 1 time efter administrationen af ​​ekstrakterne på 21 dage. Gruppe A, den negative kontrol, modtog en fysiologisk opløsning som vehikel. Gruppe B, den positive kontrolgruppe, modtog paroxetin ved 11 mg/kg. Gruppe C og D modtog PSPE ved henholdsvis 50 og 100 mg/kg.

En time efter indgivelse af planteekstrakt blev immobilitetstiden talt i 6 min. De første to minutter tillod musen at tilpasse sig stressen, og derefter blev musen træt og immobiliseret med tiden. Immobilitetstiden blev talt i sekunder, og derefter blev den sammenlignet med immobilitetstiden for mus i den positive kontrolgruppe (paroxetin) til reference [33].

4.6. An.xiolytisk aktivitet

4.6.1.Åbent felt

Open-field (OF) testen bruges til at forudsige angstdæmpende aktivitet, da dyr viser en høj grad af undgåelse af et centralt område i forhold til periferien. Det bruges også som en udforsknings- og bevægelsestest. Området bestod af fire 40 cm høje trævægge arrangeret i et område på 50×50 cm, opdelt i 25 fliser af lige store størrelse markeret med sorte streger.

I alt fire batcher af fem mus hver blev brugt til denne test. Alle planteekstrakter blev administreret ved sondemad i 21 dage. Dernæst blev testen udført 1 time efter indgivelsen af ​​planteekstrakt på dag 1,7,14, og gruppe A, den negative kontrol, modtog en fysiologisk opløsning som et vehikel. Gruppe B, den positive kontrol, modtog bromazepam ved 1 mg/kg . Gruppe C og D modtog PSPE ved henholdsvis 50 og 100 mg/kg.

Efter 60 minutter blev testen udført ved at placere hver mus i den centrale firkant for at udforske arenaen for at måle musenes samlede ambulatoriske aktivitet (antallet af samlede fliser krydset af musene, dvs. antallet af perifere fliser og antallet af centrale fliser krydset af musene med alle fire ben) og tiden brugt i midten af ​​det åbne felt [3146].

4.6.2. Lys-mørke rumtest

Lys-mørke rumtesten bruges også til at forudsige anxiolytisk aktivitet, da den giver mulighed for nem evaluering af angstrelateret dyreadfærd ved at analysere dyrets bevægelser mellem to rum med forskellige farver og belysning. Mere ængstelige dyr har en tendens til at bruge mindre tid i det oplyste rum. Den lyse-mørke trækasse med dimensionerne 44 × 21 × 21 cm bestod af to sorte og hvide rum, forbundet med en passage (et hul på 7 × 7 cm i midten, der adskiller de to rum og giver adgang til det ene eller det andet af rummene). Det oplyste rum blev oplyst af en lampe.

I alt fire batcher af fem mus hver blev brugt til denne test. Alle planteekstrakter blev administreret ved sondemad i 21 dage. Testen blev udført 1 time efter indgivelsen af ​​planteekstrakt på dag 1, 7, 14 og 21. Gruppe A, den negative kontrol, modtog en fysiologisk opløsning som vehikel. Gruppe B, den positive kontrol, modtog bromazepam ved 1 mg/kg. Gruppe C og D modtog PSPE ved henholdsvis 50 og 100 mg/kg.

Efter 60 minutter blev den fem-minutters test udført ved at placere hver mus vendt mod åbningen, der forbinder det mørke rum [47]. Efter hver test blev kassen rengjort med alkohol. De målte parametre var tiden brugt i det oplyste kammer og antallet af kammerovergange [48].

5. Konklusioner

Persille, en dagligt brugt kulinarisk urt verden over, frembyder enorme sundhedsmæssige fordele, og gennem denne undersøgelse har den vist sig at have en bemærkelsesværdig antidepressiv-lignende og angstdæmpende aktivitet, endda bedre end klassiske lægemidler, især med en dosis på 100 mg/kg. I jagten på en effektiv medicin med færre eller næsten ingen bivirkninger, kunne denne plante være et velplaceret alternativ. Dette arbejde fremmer dets daglige forbrug såvel som dets udvikling til en veletableret phytomedicin.

Yderligere forskning er nødvendig for at fuldføre dette arbejde, herunder udførelsen af ​​andre adfærdsmæssige tests med det samme ekstrakt for at bekræfte dets effektivitet. Der er således planlagt en bio-guidet fraktionering af phenolekstraktet af P. satioum for at identificere den nøglekomponent, der er ansvarlig for de observerede anxiolytiske og antidepressiva-lignende aktiviteter og for at bestemme deres præcise virkningsmekanisme.

Referencer
1. Friedrich, MJ Depression er den førende årsag til handicap i hele verden. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Forekomst af depression i Fællesskabet fra 30 lande mellem 1994 og 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. American Psychiatric Association. Diagnostisk og statistisk manual for psykiske lidelser (DSM-5®); American Psychiatric Association: Washington, DC, USA, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Forudsigelse af det naturalistiske forløb af depression ud fra en bred vifte af kliniske, psykologiske og biologiske data: En maskinlæringstilgang. Overs. Psykiatrien 2018, 8, 1–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Neurobiologiske forbindelser mellem stress og angst. Neurobiol. Stress 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepiner: deres anvendelse enten som essentielle lægemidler eller som giftige stoffer. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Eksponering for hypobarisk hypoxi hos rotter ændrer differentielt den antidepressive effekt af de selektive serotoningenoptagelseshæmmere Fluoxetin, Paroxetin, Escitalopram og Sertralin. Pharmacol. Biochem. Opfør dig. 2018, 170, 25-35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Lægeplanter, der bruges til at behandle akutte problemer med fordøjelsessystem i regionen Fez-Meknes i Marokko: En etnofarmakologisk undersøgelse. Etnobotanik. Res. Appl. 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Subakut vurdering af toksiciteten og antidepressiv-lignende virkninger af Origanum Majorana L. Polyphenols i schweiziske albinomus. Molecules 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: En anmeldelse. Med. Krydderier Veg. Afr. 2017, 527-547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Vurdering af in vivo østrogene og anti-inflammatoriske aktiviteter af den hydro-etanoliske ekstrakt og polyphenolfraktionen af ​​persille (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Persille: En gennemgang af etnofarmakologi, fytokemi og biologiske aktiviteter. J. Tradit. Hage. Med. 2013, 33, 815-826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafifim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS Fenolisk kemisk sammensætning af Petroselinum Crispum-ekstrakt og dets virkning på hæmostase. Nat. Prod. Commun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Anti-Angst Activity of Coriandru m Sativum vurderet ved hjælp af forskellige eksperimentelle angstmodeller. Indian J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Shahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Evaluering af antidepressiv-lignende virkninger af vandige og ethanoliske ekstrakter af Pimpinella Anisum-frugt i mus. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322-328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Et indblik i de angstdæmpende og antidepressiva-lignende egenskaber af Carum carvi L. og deres forbindelse med dens antioxidantaktivitet. Life 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulic Acid Forbedrer depressiv-lignende adfærd hos prænatalt stressede afkomsrotter via antiinflammatorisk aktivitet og HPA-akse. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Antidepressivt potentiale for kanelsyrer: Virkningsmekanismer og perspektiver i lægemiddeludvikling. Molecules 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Shim, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Quercetins beskyttende virkning på angstlignende symptomer og neuroinflammation induceret af lipopolysaccharid hos rotter. Evid. Baseret komplement. Altern. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi´c Markovic, A.; Tori's, J.; Barbaric, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, Tyrosol og derivater og deres potentielle virkninger på menneskers sundhed. Molecules 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Antioxidantaktiviteter af ekstrakter fra udvalgte kulinariske urter og krydderier. Food Chem. 2006, 97, 122-129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Sænket livskvalitet ved humørsygdomme er forbundet med øget neurooxidativ stress og basale thyreoidea-stimulerende hormonniveauer og brug af antikonvulsive humørstabilisatorer. J. Eval. Clin. øv. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Øget nitrooxidativ stresstoksicitet som en væsentlig determinant for øget blodtryk ved humørsygdomme. J. Affekt. Uorden. 2021, 278, 226-238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Swan, SH; Ferguson, KK Sammenslutning mellem prænatal psykologisk stress og oxidativ stress under graviditet. Pædiatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318-326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Effekter af psykologisk stress under træning på markører for oxidativ stress hos unge sunde, trænede mænd. Physiol. Opfør dig. 2019, 198, 90-95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Phospholipid Transfer Protein (PLTP) mangel reducerer hjernens vitamin E-indhold og øger angst hos mus. FASEB J. 2005, 19, 1-16. [CrossRef]