Effekten af oxidativ stress og interleukin-1 krydstale om kronisk inflammation hos EAP-rotter og indgrebet af Anemone Tomentosa
Dec 09, 2025
Abstrakt
Formål: At undersøge rollen af oxidativt stress og interleukin-1 (IL-1) krydstale i kronisk prostatabetændelse hos eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) rotter, og at belyse den mekanisme, hvormed Anemone tomentosa behandler EAP-rotter. Metoder: Tredive Wistar-rotter blev tilfældigt tildelt fem grupper (n=6 hver): normal, model, lav-dosis Anemone tomentosa, medium-dosis Anemone tomentosa og høj-dosis Anemone tomentosa. Efter lægemiddelintervention blev Western blotting brugt til at detektere TLR-4-, IRAK1- og pNF-κB p65-proteiner i prostatavæv. Serumsuperoxiddismutase (SOD), glutathionperoxidase (GSH-Px) og malondialdehyd (MDA) blev målt ved hjælp af analysesæt. Inflammatoriske cytokiner, inklusive interleukin-1 og interleukin-10, blev målt ved ELISA. Resultater: Sammenlignet med den normale gruppe var ekspression af TLR-4-, IRAK1- og pNF-κB p65-proteiner i prostata i modelgruppen signifikant øget (P < 0,01). Serum SOD- og GSH-Px-niveauer blev reduceret (P < 0,01), mens MDA- og interleukin-1-niveauer blev øget (P < 0,01). Sammenlignet med modelgruppen nedregulerede Anemone tomentosa-intervention signifikant TLR-4-, IRAK1- og pNF-κB p65-proteinekspression i prostata hos EAP-rotter (P < 0,01). Serum SOD, GSH‑Px og interleukin‑10 var signifikant opreguleret (P < 0,01 eller P < 0,05), hvorimod MDA og interleukin-1 var nedreguleret (P < 0,01 eller P < 0,05). Histologi indikerede, at prostatakirtelskade og inflammatorisk celleinfiltration var forbedret efter behandling med Anemone tomentosa. Konklusion: IRAK1 kan være en nøgleknude, der medierer krydstale mellem oxidativt stress og IL-1 under inflammation hos EAP-rotter. Den anti-inflammatoriske mekanisme af Anemone tomentosa i EAP-rotter kan involvere reduktion af oxidativ stress og IL-1 ved at regulere TLR-4/IRAK1/NF-κB p65-signalvejen.
Urte Cistanche kosttilskud
Nøgleord
Kronisk prostatitis; eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP); oxidativ stress; interleukin-1 (IL-1); IRAK1; TLR‑4/IRAK1/NF‑κB p65 signalvej; SOD; GSH-Px; MDA; ELISA; Western blot; Anemone tomentosa; Dahuocao (Zhuang medicin); Traditionel kinesisk medicin; TCM urt til prostatitis; kinesisk etnomedicin; anti-inflammatorisk; antioxidant terapi
Kronisk prostatitis (CP)er en af de mest almindelige sygdomme inden for urologi og andrologi. I Kina varierer den rapporterede prævalens af CP fra 6,0 % til 32,9 % [1]. Klinisk er det hovedsageligt karakteriseret ved kroniske bækkensmerter og kan være ledsaget af varierende grader af urinvejssymptomer og seksuel dysfunktion, hvilket i alvorlig grad påvirker patienternes livskvalitet. Ifølge forskningsrapporter [2] kan patogenesen af CP være relateret til patogeninfektion, oxidativt stress, urinrefluks, ændringer i kønshormonniveauer, neuroendokrin ubalance og immun-inflammatoriske reaktioner. Aktuelle undersøgelser indikerer, at der i den inflammatoriske tilstand af prostata produceres en stor mængde reaktive oxygenarter (ROS); et høj-ROS mikromiljø inducerer oxidativ stress og deltager i forekomsten og udviklingen af CP [3]. Cytokiner er regulatoriske proteinpolypeptider, der spiller vigtige roller i forekomsten og udviklingen af CP; Sygdommens sværhedsgrad korrelerer med niveauet af interleukin-1 (IL-1) i prostatiske sekreter [4], hvilket giver en potentiel terapeutisk tilgang. I betragtning af den komplekse patofysiologi har moderne medicinske behandlinger for CP visse begrænsninger [5]. I de senere år har traditionel kinesisk medicin (TCM) vist gunstig effekt til behandling af CP, lindring af smerter og urinvejssymptomer og demonstreret karakteristiske fordele.
Fra et TCM-perspektiv involverer ætiologien og patogenesen af denne sygdom nyremangel, fugtig varme og blodstase [6]. Zhuang etnomedicinsk urt Dahuocao (Anemone tomentosa; skarp, let bitter, neutral i egenskaben) har funktionerne at fjerne varme og fjerne fugt, fremme diurese for at lindre stranguri, tonificere qi og styrke nyren [7]. Kliniske observationer tyder på, at Dahuocao kan forbedre CP-symptomer [8] og regulere inflammatorisk cytokinsekretion hos CP-modelrotter [9]. Dens mekanisme kan være relateret til den mikroRNA-146a/Toll-lignende receptor-4 (TLR-4)/nuklear transkriptionsfaktor-κB (NF-κB) pathway, der stammer fra prostata corpora amylacea [10]. Baseret på dette observerede denne undersøgelse rollen af krydsinteraktion mellem oxidativ stress og IL-1 i kronisk prostatabetændelse i den eksperimentelle autoimmune prostatitis (EAP) rottemodel og undersøgte interventionseffekten af Dahuocao-afkog.
Materialer
1.1 Forsøgsdyr
Tredive Wistar hanrotter blev købt fra Changsha Tianqin Biotechnology Co., Ltd. (licensnr.: SCXK2019-0013), 8 uger gamle, kropsvægt 200 ± 17 g. Dyreetisk godkendelse nr.: DW20220926-202, Guangxi University of Chinese Medicine. Dyrene blev anbragt i Key Laboratory of Molecular Biology for Prevention and Treatment i TCM, Guangxi.
1.2 Hovedinstrumenter og reagenser
Elektroforeseapparat (Beijing Liuyi, DYCZ-24DN), nukleinsyre/protein kvantifier (Denovix DS-11), semi-tørt overføringssystem (ATTO WSE-4040, AE6675L). Komplet Freunds adjuvans (Sigma-Aldrich, F5881). TLR-4 antistof (Affinity, AF7017), interleukin-1 receptor-associeret kinase-1 (IRAK1) antistof (Affinity, AF4742), phospho-NF-κB p65 antistof (Affinity, AF2006). GSH-Px-sæt (Nanjing Jiancheng, A005-1), SOD-sæt (Nanjing Jiancheng, A001-1), MDA-sæt (Nanjing Jiancheng, A003-1). IL-1 ELISA (Lianke Bio, EK301BHS), IL-10 ELISA (Lianke Bio, EK310).
Metoder
2.1 Forberedelse af EAP-rottemodel
Fremstilling af oprensede rotteprostataproteiner fulgte tidligere metoder [10]. Immuniseringsmodellering [10-11] blev udført i henhold til etablerede protokoller. Succesfuld modellering blev indikeret ved forsvinden af slimhindefolder i prostatakanaler, ufuldstændig acini, stromalt ødem og inflammatorisk celleinfiltration [12].
2.2 Tilberedning af Dahuocao-afkog
Dahuocao (Anemone tomentosa) afkog blev fremstillet i overensstemmelse med tidligere eksperimentelle procedurer [10].
2.3 Gruppering og lægemiddeladministration
Tredive rotter blev tilfældigt tildelt ved hjælp af tilfældige tal til normal-, model- og lav-, medium- og højdosis Dahuocao-grupper (n=6 pr. gruppe). Efter vellykket modellering modtog lav-, mellem- og højdosisgrupper Dahuocao-afkog ved sondemad i koncentrationer på henholdsvis 1,46 g/mL, 2,92 g/mL og 5,84 g/mL (4 mL/kg·d). Normal- og modelgruppen modtog saltvand (4 ml/kg·d). Behandlinger blev administreret én gang dagligt i 4 uger.
2.4 Prostata histopatologi (H&E-farvning)
Prostatavæv blev fikseret, indlejret og sektioneret; sektioner blev farvet med hæmatoxylin-eosin og undersøgt ved lysmikroskopi for at vurdere acinære strukturelle ændringer og inflammatorisk celleinfiltration.
2.5 Markører for oxidativ stress i serum: SOD, MDA, GSH-Px
Serum SOD-, MDA- og GSH-Px-niveauer blev målt strengt i henhold til de respektive kit-instruktioner.
2.6 ELISA-detektion af serum IL-1 og IL-10
Serum IL-1 og IL-10 koncentrationer blev målt strengt i henhold til ELISA kit-protokoller.
2.7 Western blot-detektion af TLR-4, IRAK1 og pNF-κB p65 i prostata
Ca. 50 mg prostatavæv blev malet til et fint pulver i flydende nitrogen, fordelt i portioner og lyseret i RIPA-buffer. Proteiner blev adskilt ved elektroforese, overført, blokeret, inkuberet med primære antistoffer, vasket, inkuberet med sekundære antistoffer, vasket og afbildet. Proteinekspression blev kvantificeret som mål/husholdningsbånd grå værdier.
2.8 Statistisk analyse
Data blev analyseret ved hjælp af SPSS 22.0. Normalfordelte data med varianshomogenitet præsenteres som middel ± SD og analyseres ved envejs ANOVA med LSD-t post hoc test. Ikke-normale eller heteroskedastiske data præsenteres som M (QR) og analyseres ved ikke-parametriske tests. Et tosidet P < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.
Resultater (kortfattet omformulering for klarhedens skyld)
Versus normal: Prostata TLR-4, IRAK1 og pNF-κB p65↑ (P < 0,01); serum SOD og GSH‑Px↓ (P < 0,01); MDA og IL‑1 ↑ (P < 0,01).
Versus model: Anemone tomentosa (Dahuocao) reduced TLR‑4/IRAK1/pNF‑κB p65 (P < 0.01); increased SOD, GSH‑Px, and IL‑10 (P < 0.01 or P < 0.05); decreased MDA and IL‑1 (P < 0.01 or P < 0.05). Histology showed alleviated gland injury and inflammatory infiltration.
Konklusion
IRAK1 kan repræsentere en pivotal knude i krydstalen mellem oxidativt stress og IL-1 under kronisk prostatabetændelse hos EAP-rotter. Anemone tomentosa (Dahuocao), en TCM/Zhuang etnomedicinsk urt til prostatitis, kan hæmme kronisk inflammation ved at reducere oxidativt stress og IL-1 gennem regulering af TLR-4/IRAK1/NF-κB p65-signalvejen.
Autoritets- og indkøbsnotater
Epidemiologi og biomedicinsk kontekst er funderet i national urologi/andrologisk litteratur [1-6].
Identiteten, egenskaberne og TCM-indikationerne for Anemone tomentosa (Dahuocao) henviser til statsadministrationen af TCM's kinesiske Materia Medica-kompendium [7], en autoritativ kilde.
Kliniske observationer og mekanistiske dyreforsøg på Dahuocao for CP/CNP understøttes af peer-reviewed kinesiske tidsskrifter og standardiserede eksperimentelle retningslinjer [8-12], hvilket øger troværdigheden af TCM-urtebrug til prostatitis.
Referencer
[1] Mi H, Chen K, Mo ZN. Epidemiologiske karakteristika af kronisk prostatitis i Kina. Chin J Androl. 2012;18(7):579-582.
[2] Zheng XT, Chen SH, Yao WL, et al. Fremskridt i ætiologi og patogenese af kronisk prostatitis. Moderne diagnose og behandling. 2019;30(11):1810-1813.
[3] Paulis G. Inflammatoriske mekanismer og oxidativt stress i prostatitis: antioxidantterapiens mulige rolle. Res Rep Urol. 2018;10:75-87.
[4] Kang SW, Park JH, Seok H, et al. Virkningerne af koreansk rød ginseng på inflammatoriske cytokiner og apoptose i en rottemodel af kronisk ikke-bakteriel prostatitis. Biomed Res Int. 2019;2019:2462561.
[5] Xue Y, Duan Y, Gong X, et al. Traditionel kinesisk medicin til kronisk prostatitis/kronisk bækkensmertesyndrom: en systematisk gennemgang og metaanalyse. Medicin (Baltimore). 2019;98(26):e16136.
[6] Sun ZX, Li PC. TCM diagnostisk og terapeutisk tænkning for kronisk prostatitis. Liaoning J Tradit Chin Med. 2019;46(2):268-269.
[7] Redaktion for Chinese Materia Medica, statsadministration for TCM. Kinesisk Materia Medica. Shanghai: Shanghai Science and Technology Press; 1999:1768, 3166.
[8] Lu LX, Wu JY, Huang ZM, et al. Klinisk observation af retentionsklyster med Dahuocao (Zhuang-medicin) i 60 tilfælde af kronisk prostatitis. Hunan J Tradit Chin Med. 2019;35(6):55-56. doi:10.16808/j.cnki.issn1003-7705.2019.06.024.
[9] Wang WJ, Shi H, Zhang J, et al. Dahuocao hæmmer inflammatoriske reaktioner i en ikke-bakteriel prostatitis-rottemodel. Modern Immunology. 2021;41(6):504-508. doi:10.35541/cjd.20201030.
[10] Lu LX, Shi H, Huang ZM, et al. Rolle af prostatiske corpora amylacea miRNA-146a/TLR-4/NF-κB pathway i kronisk inflammation af EAP-rotter og intervention fra Dahuocao. Chin Gen Practice. 2023;26(20):2518-2524.
[11] Qian Y, Qian XQ, Gong DW, et al. Intervention af resveratrol på cytokiner i prostatavæv af prostatitis rottemodel. Chin J Androl. 2017;31(3):14-18.
[12] Professional Committee of Experimental Pharmacology of TCM, Chinese Association of Chinese Medicine. Udkast til specifikation for udarbejdelse af dyremodeller for kronisk prostatitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 2018;24(19):10-14.
Valgfri forfattersøgeord til indeksering (for synlighed)
Traditionel kinesisk medicin; Zhuang etnomedicin; Dahuocao; Anemone tomentosa Maxim.; prostatitis; kronisk bækkensmertesyndrom; TLR4; IRAK1; NF‑KB; oxidativ stress; antioxidant enzymer; cytokiner; ELISA; Western blot; rotte model; EAP; urte anti-inflammatorisk; TCM-urt mod prostatitis.
