Thai-planter med høje antioxidantniveauer, frie radikaler-fjernende aktivitet, anti-tyrosinase og anti-collagenase-aktivitet

Kontakt:

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Moragot Chatatikun1 og Anchalee Chiabchalard2

Abstrakt

Baggrund:Ultraviolet stråling fra sollys inducerer overproduktion af reaktive oxygenarter (ROS), hvilket resulterer i hudfotoaldring og hyperpigmenteringsforstyrrelser. Nye blegnings- og anti-rynkeforbindelser fra naturlige produkter er for nylig blevet af stigende interesse. Formålet med denne undersøgelse var at finde produkter, der reducerer ROS i 14 thailandske planteekstrakter.

Metoder:For at bestemme total phenol ogflavonoidindhold,antioxidantaktivitet,anti-tyrosinaseaktivitet og anti-kollagenase-aktivitet sammenlignede vi ekstrakter af 14 thailandske planter fremstillet ved hjælp af forskellige opløsningsmidler (petroleumsether, dichlormethan og ethanol).Antioxidantaktiviteter blev bestemt ved DPPH- og ABTS-assays.

Resultater:Det samlede phenolindhold i de 14 thailandske planteekstrakter blev fundet på de højeste niveauer i ethanol efterfulgt af henholdsvis dichlormethan og petroleumsetherekstrakter, mensflavonoidindhold blev normalt fundet i dichlormethanfraktionen. Opfangningsaktivitet varierede fra 7 til 99 procent opfangning som vurderet ved DPPH- og ABTS-assays. Ethanolbladekstraktet af Ardisia elliptica Thunb. havde det højeste phenolindhold, antioxidantaktivitet og kollagenaseinhibering, mens Cassia alata (L.) Roxb. ekstrakt havde den rigesteflavonoidindhold. Interessant nok tre planteekstrakter, som var de ethanoliske fraktioner af Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. og Senna alata (L.) Roxb. havde højantioxidantindhold og aktivitet og hæmmede begge væsentligttyrosinaseog kollagenase.

Konklusion:Vores resultater viser, at ethanolfraktionerne af Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. og Senna alata(L.) Roxb. viser lovende som potentielle ingredienser til kosmetiske produkter såsom anti-rynkemidler og hudblegningsprodukter.

Nøgleord:Ardisia elliptica Thunb.,Antioxidantindhold, rensningsaktivitet,Anti-tyrosinaseaktivitet, anti-kollagenaseaktivitet

Flavonoid er et af elementerne icistanche

Baggrund

Ultraviolet stråling (UVR) fra sollys er den mest signifikante risikofaktor for non-melanom og melanomaskin-kræft [1]. Overeksponering for sollys, især UVA og UVB, inducerer overekspression af reaktive iltarter (ROS), som beskadiger lipider, proteiner og deoxyribonukleinsyrer. Kollagen er hovedfundamentet for den ekstracellulære matrix i dermislaget af huden. Overdreven ROS øger ekspressionen af ​​kollagenase, en protease, der nedbryder kollagen, hvilket kan resultere i fotoældning og rynker af huden [2]. Derudover inducerer UV-eksponering melaninproduktion, hvilket resulterer i hyperpigmentering.Tyrosinaseer nøgleenzymet, der initierer hudpigmentering. For det første hydroxyleres L-tyrosin til 3,4-dihydroxyphenylalanin (L-DOPA) af tyrosinase. Efterfølgende oxideres L-DOPA til DOPA-quinon af tyrosinase. DOPA-quinon omdannes yderligere til DOPAchrome, der kan omdannes til 5,6-dihydroxyindol(DHI) eller 5,6-dihydroxyindol-2-carboxylsyre (DHICA)[3]. De nuværende behandlinger for aldring af huden involverer hydroxylacid til at skrælle det epidermale lag, retinoider for at reducere ru hud og hudfyldstof administreret ved at indsprøjte kollagen i huden. Imidlertid har disse behandlinger negative virkninger, såsom hyperpigmentering, inflammation, cytotoksicitet, irritation og bakteriel infektion [4]. Det mest populære hudblegemiddel er hydroquinon, som hæmmertyrosinase, men dets bivirkninger omfatter dermatitis, ødem, allergiske reaktioner og ochronose [5]. For nylig har forskere fokuseret på naturlige produkter, der hæmmer UV-induceret ROS, suppressenzymer og reducerer melanindannelse som alternativer til nuværende behandlinger. For eksempel aktive fytoforbindelser, såsom arbutin, aloesin, gentisinsyre,flavonoider, hesperidin, lakrids, niacinamid, gærderivater og polyphenoler, hæmmer melanogenese uden cytotoksicitet tomelanocytter [6]. Således kan planter reducere rynkedannelse og hyperpigmentering forårsaget af sollys.

Formålet med denne undersøgelse var at analysere 14 thailandske planter ekstraheret med tre forskellige opløsningsmidler for deres potentiale som anti-rynke og hudblegende ingredienser. Antallet afantioxidantphenoler ogflavonoiderblev evalueret for en korrelation med frie radikaler-fjernende aktiviteter og anti-collagenase oganti-tyrosinaseaktiviteter. Uddragene havdeantioxidantersom opfangede frie radikaler og hæmmede enzymer involveret i rynke- og pigmentdannelse. Vi identificerer Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. og Senna alata (L.) Roxb er en meget lovende kandidat til brug i kosmetiske produkter.

cistanche bodybuilding

Metoder

Kemikalier og reagenser

Folin Ciocalteus phenolreagens, natriumcarbonat(Na2CO3), gallussyre, quercetin, 10 procent aluminiumchlorid, ethanol, 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), ascorbinsyre, 2,2'-Azino- bis(3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonsyre)(ABTS), kaliumpersulfat, kojinsyre, champignontyrosinase (EC 1.14.18.1), 3,4-dihydroxy-L-phenylalanin(L- DOPA), N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), kollagenase fra Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), epigallocatechin gallat (EGCG) Natriumchlorid, calciumchlorid og dimethylsulfoxid (DMSO) blev købt fra Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Petroleumsether, dichlormethan, absolut ethanol, methanol, dinatriumhydrogenphosphat og natriumdihydrogenphosphat blev købt fra Merck (Darmstadt, Tyskland). Alle kemikalier og reagenser var analytiske kvaliteter.

Plantematerialer og udvinding

Tretten arter af thailandske blade blev indsamlet fra HRH Princess Sirindhorn Herb Garden, Rayong-provinsen, Thailand. Mangostaner blev opnået fra Chanthaburi-provinsen, Thailand. Disse planter blev autentificeret og deponeret på Herbarium, Department of Botany, Det Naturvidenskabelige Fakultet, Chulalongkorn University, Thailand. De videnskabelige navne, bilagsnumre og plantedele er vist i tabel 1. Planterne blev ekstraheret ved at bruge Soxhlet-apparatet. Kort fortalt blev 10 g af den tørrede plante ekstraheret separat med petroleumsether, dichlormethan og ethanol. Opløsningsmidler blev fjernet under anvendelse af en vakuum-rotationsfordamper under reduceret tryk under anvendelse af MiVac Quattro-koncentratoren. Koncentrerede prøver blev opløst i DMSO ved 100 mg/ml og opbevaret ved -20 grad indtil brug. Udbytter af tørre ekstrakter er vist i tabel 1 som vægtprocent tørre plantematerialer.

Bestemmelse af totalt phenolindhold

Det totale phenolindhold i planteekstrakter blev vurderet ved hjælp af Folin-Ciocalteu-metoden [7]. Kort fortalt blev 5 0 µl ekstrakter ved 1 mg/ml i destilleret vand blandet med 50 µl 10 procent Folin-Ciocalteu-reagens og 50 µl 0,1 M Na2CO3. Reaktionsblandingen blev inkuberet i 1 time ved stuetemperatur i mørke. Absorbans ved 750 nm blev målt med en mikropladelæser (Biotek, USA). Gallussyre fra 1,56 til 100 ug/ml blev anvendt som standard. Det samlede phenolindhold i ekstrakterne udtrykkes som mg gallussyreækvivalenter (GAE) pr. g tørplantemateriale. Alle prøver blev analyseret i tre eksemplarer.

Bestemmelse af flavonoidindhold

i altflavonoidindhold (TFC) blev bestemt ved hjælp af aluminiumchlorid (AlCl3) kolorimetrisk assay [7]. Kort fortalt blev 50 µl af ekstrakterne ved 1 mg/ml i 80 procent ethanol blandet med 50 µl 2 procent AlCl3-opløsning i brønden på en 96-vægplade. Pladen blev inkuberet i 15 minutter ved stuetemperatur. Absorbansen ved 435 nm blev målt ved hjælp af en mikropladelæser. Quercetin fra 1,56 til 100 ug/ml tjente som standard. Totalt indhold af flavonoider er udtrykt som mg quercetin-ækvivalenter (QE) pr. g tørplantemateriale. Prøver blev analyseret i tre eksemplarer.

DPPH-opfangningsaktivitet

DPPH-opfangende aktivitetsassay blev udført som beskrevet af Yamasaki et al. [8]. DPPH-opløsning blev frisk fremstillet til hvert assay. Kort fortalt blev 100 ug/ml ekstrakter eller 1,56 til 100 ug/ml ascorbinsyrestandard i absolut methanol blandet med 180 ul DPPH-reagens i en 96-brønds plade. Reaktionsblandingen blev inkuberet i 30 minutter ved stuetemperatur i mørke. Derefter blev absorbansen ved 517 nm målt med en mikropladelæser. Forsøgene blev udført i tre eksemplarer. Absorbansen ved 517 nm af DPPH var 0,70 ± 0,02 og reduceret absorbans målte opfangningsaktivitet. Opfangningsevnen blev beregnet som skylleaktivitet (procent)=100 procent × [(훥A517 af kontrol - 훥A517 af prøve)/훥A517 af kontrol]. Procentdelen af ​​DPPH-opfangende aktivitet af ekstrakterne blev sammenlignet med ascorbinsyrens og er udtrykt som mg C-vitaminækvivalentantioxidantkapacitet (VCEAC) pr. tørt plantemateriale. IC50 blev bestemt ud fra en graf over procentvis hæmning mod koncentration (fra 0,78-100 ug/ml af hver ekstrakt).

ABTS rensningsaktivitet

ABTS frie radikaler-fjernende aktivitet blev udført som tidligere beskrevet [9]. ABTS• plus arbejdsreagenset blev fremstillet ved at blande 7 mM ABTS• og 2,45 mM kaliumpersulfat ved et volumen/volumenforhold på 8:12. Arbejdsopløsningen blev holdt i 16 til 18 timer ved stuetemperatur i mørke. ABTS• plus-opløsningen blev fortyndet med absolut ethanol for at give en absorbans ved 734 nm på 0.70 ± 0,02. Derefter blev 100 µg/ml ekstrakter eller 1,56 til 100 µg/ml ascorbinsyrestandard i absolut ethanol tilsat til 180 µl ABTS• plus arbejdsreagens i brøndene på en 96-brønds plade. Pladen blev inkuberet i 45 minutter ved stuetemperatur, og absorbansen blev målt ved 734 nm. Eksperimenter blev udført i tre eksemplarer. Opfangningsevnen blev beregnet som opfangningsaktivitet (procent)=100 × [(훥A734 af kontrol - 훥A734 af prøve)/훥A734 af kontrol]. Procentdelene af ABTS-opfangende aktivitet af ekstrakterne blev sammenlignet med dem for ascorbinsyre og er vist som C-vitaminækvivalenterantioxidantkapacitet (VCEAC) pr. g tørt plantemateriale. IC50 blev bestemt ud fra en graf over procent inhibering mod koncentration (fra 15,62-1000 ug/ml af hver ekstrakt).

Bestemmelse af svampetyrosinasehæmning

Dopachrome-metoden blev udført med let modifikation [10]. Kort fortalt blev 20 µl planteekstrakter eller DMSO (som kontrol), 20 µl 203,3 enheder/ml svampetyrosinase og 140 µl 20 mM phosphatbuffer ved pH 6,8 præ-inkuberet i 10 minutter ved 25 grader. Efter præ-inkubation blev 20 ul 2,5 mM L-DOPA tilsat, og prøver blev derefter inkuberet i yderligere 20 minutter ved 25 grader. Mængden af ​​dopakrom blev målt ved 492 nm med en mikropladelæser. Kojinsyre (KA) tjente som en positiv kontrol for inhibering. Den procentvise inhibering af tyrosinaseaktivitet (procent) var udtrykt som procenttyrosinasehæmning {{0}} × [(훥A492 af kontrol –훥A492 af prøve)/훥A492 af kontrol]. Slutkoncentrationerne af ekstrakterne og kojinsyren var henholdsvis 1 og 0,1 mg/ml. IC50 blev bestemt ud fra en graf på procenttyrosinasehæmning mod koncentration (fra 15,62-1000 ug/ml af hver ekstrakt).

cistanche bodybuilding

Bestemmelse af kollagenasehæmning

Kollagenaseinhibering blev bestemt ved en tidligere beskrevet metode [11]. Kort fortalt blev 40 µl collagenase fra Clostridium histolyticum ved 0,25 enheder/ml i 50 mM tricinbuffer indeholdende 10 mM CaCl2 og 400 mM NaCl og 10 µl 50 mM tricinbuffer blandet med 10 µl. af ekstrakterne eller DMSO (som kontrol). Epigallocatechin gallat (EGCG) blev brugt som en positiv kontrol. Efter en 15-min. inkubation ved stuetemperatur blev 50 ul N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) tilsat. Absorbansen blev målt ved 340 nm øjeblikkeligt og kontinuerligt i 20 min. Enzymaktivitet blev evalueret ved nedsat absorbans i løbet af tidsintervallet. Den procentvise inhibering af kollagenaseaktivitet blev beregnet som 100 × [(Kontrolaktivitet – Prøvens aktivitet)/Kontrolaktivitet]. De endelige koncentrationer af ekstrakterne og epigallocatechingallat var henholdsvis 1 og 0,1 mg/ml. IC50 blev bestemt ud fra en graf over procent collagenase-hæmning mod koncentration (fra 15,62-1000 ug/ml af hver ekstrakt).

Statistiske analyser

Alle eksperimenter blev udført i tre eksemplarer, og resultaterne er udtrykt som middel ± standardfejl. Korrelationskoefficienten (R2) mellemantioxidantindhold og antioxidantaktiviteter blev bestemt ved hjælp af SigmaPlotversion 12.2-software. Forskellen mellem de to gennemsnit blev evalueret ved hjælp af Students t-test. Forskelle blev betragtet som signifikante, når P-værdien var mindre end 0.05.

Resultater

Ekstraktionsudbytter

Tabel 1 viser de videnskabelige navne, kuponnumre og plantedele af de 14 thailandske planter, der blev brugt i denne undersøgelse. Udbytteprocenten af ​​ekstrakterne varierede fra 0,73 procent til 31,11 vægtprocent (tabel 1). Ardisia elliptica Thunb. havde det højeste udbytte i petroleumsether (19,89 procent) og ethanolekstrakter (31,11 procent), hvorimod Garcinia mangostanaL. havde det højeste procentvise udbytte fra dichlormethanekstraktion (11,07 procent).

Fenolindhold i 14 thailandske planter

Derfor blev det totale phenolindhold i planterne bestemt ved Folin-Ciocalteu-metoden. Ekstrakterne havde et bredt område i antallet af phenoler som vist i tabel 2, og værdierne varierede med 33-fold blandt ekstrakterne. Ardisiaelliptica Thunb. havde det højeste phenolindhold i alle tre typer ekstrakter, hvorimod det laveste phenolindhold var til stede i Stemona curtissi-krogen. f. petroleumsetherekstrakt.

Flavonoidindhold i 14 thailandske planter

Svarende til phenoler, i altflavonoidindholdet varierede væsentligt blandt plantearterne, varierende fra 2.04 ± 0.16 til 31.38 ± 0.81 mg QE pr. g tørt materiale (tabel 2). Generelt gav dichlormethan-ekstraktion det højesteflavonoidniveau sammenlignet med de andre opløsningsmidler. Af alle ekstrakter blev den højeste flavonoid-mængde fundet i ethanolekstraktet fra Senna alata (L.) Roxb-blade (31,38 ± 0,81 mg QE perg tørt materiale). På den anden side Ardisia elliptica Thunb.(23,14 ± 1,10 mg QE pr. g tørt materiale). havde det rigeste flavonoidindhold i dichlormethanfraktionen. Desuden er Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. havde det højeste flavonoidindhold blandt petroleumsetherekstrakterne (27,48 ± 2,59 mg QE pr. g tørt materiale). Det laveste påviselige flavonoidniveau var i ethanolekstraktet fra Daturametel L. I skarp kontrast,flavonoiderblev ikke fundet i petroleumsether- og dichlormethanekstrakter fra Stemona curtisii Hook.f., og petroleumsetherekstrakter fra Streblus asper Lour. og Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Det samlede flavonoidindhold korrelerede ikke med det totale phenolindhold (R2=0.0284, Fig. 1a).

DPPH radikalopfangende aktivitet i forskellige ekstrakter fra 14 thailandske planter

Frie radikaler rensende aktivitet ved hjælp af DPPH som indikator er en grundlæggendeantioxidantassay [12]. Som vist i tabel 3 varierede udrensningsaktiviteterne af ekstrakterne meget, varierende fra 7,11 ± 0.59 procent til 96.17 ± 0.05 procent. Ardisia ellipticaThunb ethanolekstraktet havde den højeste rensende aktivitet på 96 procent. Desuden den næststærkesteantioxidant activities (>90 procent) blev observeret i ethanolfraktioner fra Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels. og Garcinia mangostana Linn. Med hensyn til de andre opløsningsmidler havde Ardisia elliptica Thunb også den rigeste rensende aktivitet blandt petroleumsetherfraktionerne, og Garcinia mangostana L. havde den højeste antioxidantaktivitet i dichlormethanfraktionerne. Den laveste renseevne blev påvist i Croton sublyratus Kurz i petroleumsetherfraktionen. Ingen rensende aktivitet blev påvist i 7 petroleumsetherekstrakter og 2 dichlormethanekstrakter.

ABTS radikal opfangende aktivitet i forskellige ekstrakter fra 14 thailandske planter

Antioxidantaktiviteten af ​​vandige og lipidfaser i planterne er også blevet evalueret ved en affarvningsanalyse ved brug af ABTS [13]. Igen tjente ascorbinsyre som standardenantioxidant. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 procent, og rensende aktivitet blev påvist i alle dichlormethanekstrakter og petroleumsetherekstrakter fra Annona squamosa L. og Ipomoea pes-caprae(L.) R.br. som ikke blev påvist af DPPH-assayet.

Inhibering af tyrosinaseaktivitet af planteekstrakter

Evnen af ​​forbindelser fra de thailandske planter til at hæmme svampetyrosinaseaktivitet blev evalueret under anvendelse af et invitro-assay med L-DOPA som substrat. Kojic acid tjente som en kendt hæmmer og forårsagede maksimalenzymatisk hæmning på 93,38 ± 1,63 procent. Som vist i tabel 5 inhiberede kun ethanolekstrakter signifikant tyrosinaseaktivitet med Ardisia elliptica Thunb. præparater er undtagelsen. Petroleumsether- og dichlormethanfraktionerne af Ardisia elliptica Thunb. hæmmede tyrosinaseaktiviteten med cirka 20 procent. Ethanolfraktionen fra Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz (IC50-værdi på 271,50 ug/ml) var den mest potente tyrosinaseinhibitor, efterfulgt af ethanolekstrakterne fra Ardisia ellipticaThunb. og Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Andre ethanolfraktioner reducerede den enzymatiske aktivitet signifikant med mere end 20 procent (tabel 5), hvorimod de resterende ekstrakter ikke havde påviselig inhiberende aktivitet (data ikke vist).

Kollagenaseaktivitetshæmning af 14 planter

Ekstrakter blev testet for anti-collagenase aktivitet under anvendelse af Clostridium histolyticum collagenase og N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) som substrat. Epigallatecatechin gallat er en kendt kollagenasehæmmer og nedsat enzymatisk aktivitet med 90,51 ± 2,79 procent. Som vist i tabel 5 indeholdt kun 4 ethanolekstrakter påviselig kollagenaseinhiberende aktivitet. Af dem, der forårsager hæmning, er Ardisia elliptica Thunb. (IC50-værdi på 157,78 ug/ml) udviste det højeste niveau af kollagenaseinhibering, efterfulgt af Annona squamosa L. (IC50-værdi på 426,67 ug/ml), Senna alata (L.) Roxb. og Croton sublyratusKurz i rang bestille. Andre planteekstrakter inhiberede ikke signifikant kollagenaseaktivitet under reaktionsbetingelserne anvendt i denne undersøgelse (data ikke vist).

Diskussion

Solstråling er en væsentlig miljøfaktor i hudskader og kan fremkalde hudkræft [14]. UV-stråling forårsager en pro-inflammatorisk respons, ekstracellulær matrixnedbrydning ogantioxidantudtømning [15, 16]. UV forårsager dannelsen af ​​reaktive oxygenarter (ROS), der inducerer hyperpigmentering og kollagenaseekspression [17, 18]. Vores undersøgelse undersøgte 14 thailandske planter ekstraheret med tre forskellige opløsningsmidler for deres potentiale som anti-rynke og hudblegende ingredienser. I denne undersøgelse brugte vi petroleumsether, dichlormethan og ethanol til planteekstraktion ved hjælp af Soxhlet-apparatet. Ardisia elliptica Thunb. havde det højeste udbytte i petroleumsether- og ethanolekstrakterne, hvorimod Garcinia mangostana L. havde det højeste procentudbytte fra dichlormethanekstraktion. Disse opløsningsmidler er en serie af organiske opløsningsmidler med stigende polariteter. Variation mellem de procentvise udbytter afhang af plantearten og afspejlede sandsynligvis forskelle i planternes kemiske sammensætning.

Fenoler er den største gruppe af fytokemikalier, der findes i planter, og de har forskellige biologiske aktiviteter i dyr, herunder mennesker [19]. Det samlede phenolindhold i planterne blev bestemt ved Folin Ciocalteu-metoden. Samlet set havde ethanolfraktionen det rigeste phenolindhold, efterfulgt af dichlormethan, mens petroleumsether med lav polaritet havde det laveste phenolindhold sammenlignet med de andre opløsningsmidler. I denne undersøgelse, Ardisia elliptica Thunb. havde det højeste phenolindhold i alle tre typer ekstrakter. I tidligere undersøgelser har dichlormethanbladekstrakter af Ardisia elliptica Thunb. et phenolindhold på 101 ± 1,3 mg GAE pr. g tørplantemateriale, hvilket er mere end indholdet i en kvistekstrakt [20]. Desuden indeholdt et methanolekstrakt af moden Ardisia frugt 5,64 ± 0,37 g GAE pr. 100 g ekstrakt [21]. Derfor blade og frugter af Ardisia ellipticaThunb. har et højt phenolindhold, der let kan ekstraheres med methanol, dichlormethan og ethanol.

Flavonoiderer pigmenter i blomster, blade, frugter og frø. Disse forbindelser er sekundære metabolitter af planter og er vidt udbredt blandt plantearter [22]. Dernæst blev flavonoidindholdet i de thailandske planter evalueret ved hjælp af aluminiumchlorid kolorimetrisk assay. Vores resultater viste, at den højeste flavonoid-mængde blev fundet i ethanolekstraktet fra Senna alata (L.) Roxbleaves. I en tidligere undersøgelse blev der fundet højt flavonoidindhold i vand (4,25 mg QE pr. 100 g) og methanolfraktioner (3,97 mg QE pr. 100 g) af Senna alata (L.) Roxb.[23]. Senna alata (L.) Roxb-præparater har således et højt flavonoidindhold, når de ekstraheres med opløsningsmidler med høj polaritet, herunder ethanol, methanol og vand. Ardisiaelliptica Thunb. havde det rigeste flavonoidindhold i dichlormethanfraktionen. Frugten af ​​denne plante har også et højt flavonoidindhold på 36,91 ± 2,37 mg QE pr. g ekstrakt [24]. Derfor er frugten og bladene af Ardisia elliptica Thunb. er rige på flavonoider. Det samlede flavonoidindhold korrelerede ikke med det samlede phenolindhold. Imidlertid,flavonoiderhar mange biologiske aktiviteter såsom UVB-beskyttelse [25], anti-inflammatorisk [26], antihepatotoksicitet [27] og anti-cancer [28].

Frie radikaler rensende aktivitet ved hjælp af DPPH og ABTSassay. I DPPH-assayet modtager DPPH et hydrogenatom fra enantioxidant[29]. Vi fandt ud af, at Ardisiaelliptica Thunb ethanolekstrakt havde den højeste rensende aktivitet. Andre efterforskere har også rapporteret dichlormethanfraktioner af Ardisia elliptica Thunb. blade og stængler har høje niveauer afantioxidantaktiviteten bestemmes af DPPH-analysen, og derfor er denne plante meget interessant at undersøge nærmere som en urtebehandling [20]. Ekstrakterne fra ethanolfraktionen med høj polaritet viste klart bedreantioxidantaktivitet end fraktioner med lavere polariteter indeholdende dichlormethan og petroleumsether. Ethanolekstrakter indeholdt de højeste niveauer af fri radikal-fjernende aktivitet sammenlignet med de andre ekstrakter, og alle ethanolekstrakter var aktive. I ABTS-analysen omdannes ABTS til sin radikalisering ved tilsætning af kaliumpersulfat. I nærvær af en antioxidant omdannes den reaktive ABTS-kation (eller ABTS• plus ) til sin farveløse naturlige form [9]. I overensstemmelse med DPPH-assayet indeholdt ethanolekstrakter de højeste niveauer af scavenger-aktivitet sammenlignet med de andre ekstrakter. Igen var de højeste opfangningsaktiviteter iethanol, dichlormethan og petroleumsetherekstrakter fra de samme planter som vist ved DPPH-assayet. Resultaterne af DPPH- og ABTS-assayene var højkorrelerede som forventet (fig. 1f).

Dog den samledeflavonoidindholdet af planteekstrakterne korrelerede ikke med frie radikal-fjerneraktivitet som påvist ved DPPH-assayet (fig. 1c) eller ved ABTS-assayet (fig. 1e). Vores resultater af ingen signifikant sammenhæng mellemflavonoidindhold og scavenger-aktivitet ved brug af ABTS-analysen er i overensstemmelse med andre efterforskeres resultater [30]. I modsætning hertil korrelerede det totale phenolindhold i plantepræparatet positivt med scavengeraktivitet målt ved begge assays (fig. 1b og d) i overensstemmelse med en tidligere undersøgelse [31]. Det er bemærkelsesværdigt, at renseaktiviteten afhang af det totale phenolindhold og opløsningsmidler med høje polariteter, såsom ethanol og dichlormethan. Disse resultater tyder på, at phenolindholdet er hovedbestanddelen medantioxidantaktivitet i de 14 thailandske planter.

Melanin, det vigtigste pigment i hud- og hårfarve, syntetiseres af melanocytter i melanosomer. Overproduktion og ophobning af melanin i huden kan føre til topigmentære lidelser og æstetiske problemer. Hyperpigmentering forekommer i soleksponerede områder af huden [32]. Ved melanogenese,tyrosinaseer nøgleenzymet i det hastighedsbegrænsende trin, hvor L-tyrosin hydroxyleres til L-DOPA, som yderligere oxideres til DOPAquinon. Derefter omdannes det til DOPAchrome, der er et substrat for melaninsyntese [3]. Nedregulering aftyrosinaseaktivitet er blevet foreslået at være ansvarlig for nedsat melaninproduktion. Udviklingen af ​​nye blegningsfytokemiske forbindelser fra naturlige produkter er for nylig blevet en voksende trend. Vores fund viste, at ethanolfraktionen fra Rhinacanthus nasutus (L.) Kurzwa var den mest potente tyrosinaseinhibitor, efterfulgt af ethanolekstrakterne fra Ardisia elliptica Thunb. og Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Det er klart, at 7 planter fra 14 planter havde et højt phenolindhold, især Ardisiaelliptica Thunb. og Annona squamosa L. Desuden, Senna alata (L.) Roxb. havde den rigesteflavonoidindhold, som kan hæmme tyrosinaseaktivitet. Aktive forbindelser fra planterne, såsom arbutin, aloesin, gentisinsyre, flavonoider, hesperidin, lakrids, niacinamid, gærderivater og polyphenoler, kan hæmme melanogenese uden cytotoksicitet for melanocytter [6].

Kollagenase er en transmembran zinkpeptidase, der spalter X-Gly-bindingen af ​​kollagen. Kollagen er et rigeligt strukturelt protein og ekstracellulær matrixkomponent [33]. Nedsat kollagen- og elastinfibre øges med alderen og skader fra UV-stråling, der inducerer rynket hud[34]. Kollagenasehæmning er blevet foreslået for at forhindre hudens aldring. Af dem, der forårsager hæmning i vores undersøgelse, Ardisiaelliptica Thunb. udviste det højeste niveau af kollagenaseinhibering efterfulgt af Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb. og Croton sublyratus Kurz i rækkefølge. I en tidligere undersøgelse havde kakaobælgeekstrakt phenolsyre ogflavonoidersom hæmmede elastase- og kollagenaseaktivitet [35]. Det er bemærkelsesværdigt, at tre ethanolekstrakter (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. og Senna alata (L.) Roxb. hæmmede beggetyrosinaseog kollagenase. Disse planter havde også høje phenol- og flavonoidniveauer, ogantioxidantaktivitet. Interessant nok har disse ekstrakter mulige anvendelser som ingredienser til kosmetiske produkter.

Konklusion

Vores resultater viser, at ekstrakter af 14 thailandske planter har varierende grader af total phenol ogflavonoidindhold samt frie radikaler fjernende aktiviteter, afhængigt af ekstraktionsopløsningsmidlerne. Der var en høj korrelation mellem totalt phenolindhold og frie radikaler-fjernende aktivitet vurderet ved DPPH- og ABTS-assays. Ethanolfraktionen af ​​Ardisia ellipticaThunb. havde det højeste phenolindhold, efterfulgt af Annona squamosa L. Begge planter hæmmede signifikant tyrosinase- og collagenaseaktiviteter, mens Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz viste den højeste tyrosinasehæmning. Desuden Senna alata (L.) Roxb. var rigest på flavonoidindhold, og udstillede ogsåtyrosinaseog kollagenasehæmmende adfærd. Ethanolfraktionen af ​​tre planter, nemlig Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb og Senna alata (L.) Roxb., har potentiale til at være ingredienser i kosmetiske produkter til anti-rynke samt hudblegning. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at undersøge de aktive komponenter og sikkerheden af ​​disse ekstrakter.

cistanche bodybuilding

Referencer

1. Moehrle M. Udendørs sport og hudkræft. Clin Dermatol. 2008;26(1):12–5.

2. Lopez-Camarillo C, Ocampo EA, Casamichana ML, Perez-Plasencia C, Alvarez-Sanchez E, Marchat LA. Proteinkinaser og transkriptionsfaktorer aktivering som svar på UV-stråling af huden: implikationer for carcinogenese. Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Iwata M, Corn T, Iwata S, Everett MA, Fuller BB. Forholdet mellem tyrosinaseaktivitet og hudfarve i menneskelig forhud. J Investig Dermatol.1990;95(1):9-15.

4. Stævn RS. Behandling af fotoaldring. N Engl J Med. 2004;350(15):1526-34.

5. Levin CY, Maibach H. Exogen ochronosis. En opdatering om kliniske træk, forårsagende stoffer og behandlingsmuligheder. Am J Clin Dermatol. 2001;2(4):213-7.

6. Zhu W, Gao J. Brugen af ​​botaniske ekstrakter som topiske hudlysende midler til forbedring af hudpigmenteringsforstyrrelser. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Zongo C, Savadogo A, Ouattara L, Bassole IHN, Ouattara CAT, Ouattara AS, Barro N, Koudou J, TraoreI AS. Polyphenolindhold, antioxidant og antimikrobielle aktiviteter af Ampelocissus grantii (baker) Planch. (Vitaceae): en lægeplante fra Burkina Faso. Int J Pharmacol. 2010; 6(880-887)

8. Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Elektrokemisk metode til at estimere de antioxidative virkninger af methanolekstrakter af rå lægemidler. Chem Pharm Bull (Tokyo). 1994;42(8):1663-5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidantaktivitet ved at anvende en forbedret ABTS radikal kationaffarvningsanalyse. Free Radic Biol Med. 1999;26(9-10):1231-7.

10. Nithitanakool S, Pithayanukul P, Bavovada R, Saparpakorn P. Moleculardocking undersøgelser og anti-tyrosinase aktivitet af thailandske mango frø kernelextract. Molekyler. 2009;14(1):257–65.

11. Bonvicini F, Antognoni F, Iannello C, Maxia A, Poli F, Gentilomi GA. Relevant og selektiv aktivitet af Pancratium Illyricum L. mod Candida Albicans kliniske isolater: en kombineret effekt på gærvækst og virulens. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Sharma OP, Bhat TK. DPPH antioxidant-assay genbesøgt. Food Chem. 2009;113(4):1202–5.

13. MacDonald-Wicks LK, Wood LG, Garg ML. Metode til bestemmelse af biologisk antioxidantkapacitet in vitro: en gennemgang. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046-56.

14. Armstrong BK, Kricker A. Epidemiologien af ​​UV-induceret hudkræft. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Bashir MM, Sharma MR, Werth VP. UVB og pro-inflammatorisk cytokinessynergistisk aktiverer TNF-produktion i keratinocytter gennem forbedret gentranskription. J Investig Dermatol. 2009;129(4):994-1001.

16. Watson RE, Gibbs NK, Griffiths CE, Sherratt MJ. Skader på hudens ekstracellulære matrix forårsaget af UV-eksponering. Antioxid redox signal. 2014;21(7):1063-77.

17. D'Orazio J, Jarrett S, Amaro-Ortiz A, Scott T. UV-stråling og huden. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222-48.

18. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Rolle ofmatrix Metalloproteinases in Photoaging and Photocarcinogenesis. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Sulaiman CT, Balachandran I. Total phenolics og total flavonoids inselekterede indiske lægeplanter. Indian J Pharm Sci. 2012;74(3):258–60.

20. Mamat N, Jamal JA, Jantan I, Husain K. Xanthine Oxidase-inhiberende og DPPH-radikalopfangende aktiviteter af nogle Primulaceae-arter. Sains Malaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T. Antioxidantaktiviteter af nogle thailandske og eksotiske frugter dyrket i Thailand. Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Falcone Ferreyra ML, Rius SP, Casati P. Flavonoider: biosyntese, biologiske funktioner og bioteknologiske anvendelser. Front Plant Sci. 2012;3:222.

23. Devendra K, Kiran D, Ritesh V, Satyendra B, Abhishek K. Til evaluering af Total Phenolics and Flavonoids in different Plant of Chhattisgarh. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Siti-Azima AM, Northam A, Nurhuda M. Antioxidantaktiviteter af SyzygiumCumini og ArdisiaElliptica i forhold til deres estimerede phenoliske sammensætninger og kromatiske egenskaber. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Solovchenko A, Schmitz-Eiberger M. Betydning af hudflavonoider for UV-B-beskyttelse i æblefrugter. J Exp Bot. 2003;54(389):1977-84.

26. Gonzalez-Gallego J, Sanchez-Campos S, Tunon MJ. Anti-inflammatoriske egenskaber af diætflavonoider. Nutr Hosp. 2007;22(3):287-93.

27. Sudha A, Sumathi K, Manikandaselvi S, Prabhu NM, Srinivasan P. Antihepatotoksisk aktivitet af rå Flavonoidfraktion af Lippia Nodiflora L. onethanol-induceret leverskade hos rotter. Asiatisk J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Sak K. Cytotoksicitet af diæt-flavonoider på forskellige humane cancertyper. Pharmacogn Rev. 2014;8(16):122-46.

29. Kedare SB, Singh RP. Genese og udvikling af DPPH-metoden til antioxidantassay. J Food Sci Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Boo HO, Kim TS, Koshio K, Shin JH, Chon SU. Samlede phenoliske niveauer og antioxidantegenskaber i methanolekstrakter fra flere vietnamesiske vilde planter. Koreanske J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Dudonne S, Vitrac X, Coutiere P, Woillez M, Merillon JM. Sammenlignende undersøgelse af antioxidantegenskaber og totalt phenolindhold i 30 planteekstrakter af industriel interesse ved hjælp af DPPH-, ABTS-, FRAP-, SOD- og ORAC-assays. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768-74.

32. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melaninpigmentering hos pattedyrs hud og dens hormonelle regulering. Physiol Rev. 2004;84(4):1155-228.

33. Shoulders MD, Raines RT. Kollagen struktur og stabilitet. Annu RevBiochem. 2009;78:929-58.

34. Cua AB, Wilhelm KP, Maibach HI. Elastiske egenskaber af menneskelig hud: forhold til alder, køn og anatomisk region. Arch Dermatol Res. 1990;282(5):283-8.

35. Karim AA, Azlan A, Ismail A, Hashim P, Gani SSA, Zainudin BH, Abdullah NA. Fenolsammensætning, antioxidant, anti-rynke og tyrosinaseinhiberende aktiviteter af kakaobælgeekstrakt. BMC Komplement Altern Med. 2014;14(381):1–13.