Små GTPaser af Rab- og Arf-familierne: Nøgleregulatorer af intracellulær handel i neurodegenerationⅡ

2. Rab GTPaser i neurodegeneration

Små GTPaser af Rab-familien er ansvarlige for at kontrollere vesikulær transport og membranhandel. De regulerer alle trin i denne transport; biogenese af bærere, deres bevægelse hen over cytoskelettet og deres binding i målmembranerne [38,39]. Som med resten af ​​medlemmerne af Ras-superfamilien, er aktiviteten af ​​Rab GTPaser reguleret af GEF'er, GAP'er og GDI'er. To hovedfamilier af RabGEF'er er blevet beskrevet. Den første er den DENN-domæneholdige familie af GEF'er, som kan aktivere forskellige Rab GTPaser [40]. DENN er det katalytiske domæne, der interagerer direkte med Rab GTPaser [40]. Den anden er den Vps9-domæneholdige familie af GEF'er, som er specifikke for Rab5 GTPaser [41].

   klik for at jade cistanche for Alzheimers sygdom og Parkinsons sygdom

Bortset fra disse to familier har andre proteiner vist sig at fungere som GEF'er for Rab GTPaser, såsom TRAPP I og Mon1/Ccz1 komplekserne, som er GEF'er for henholdsvis Rab1 og Rab7 [41]. På den anden side, mens GEF'er deler lav sekvenshomologi blandt dem, klassificeres Rab GAP'er i en unik familie, Tre-2/Bub2/Cdc16 (TBC)-domæne GAP'erne. Hos mennesker er der en enkelt GAP, der ikke indeholder dette TBC-domæne, Rab3GAP-komplekset [41]. Desværre er GEF'er og GAP'er for flere af Rab GTPaserne ikke blevet beskrevet endnu [41,42]. Udover at være reguleret af deres aktiveringstilstand (GDP-bundet/GTP-bundet), kan Rab GTPaser findes både i deres aktive og inaktive tilstand i cytosolen eller membranerne.

Denne lokalisering styres af prenyleringen af ​​de C-terminale cysteinrester. Når den vesikulære transport er afsluttet, skal Rab GTPaser genbruges og transporteres fra membraner tilbage til cytosolen. GDI'er binder til prenylerede og inaktive (GDP-bundne) Rab GTPaser, og derefter fjernes GTPaserne fra membranen. Genanvendelse af Rab GTPaser er således kun opnået, når den vesikulære transport er afsluttet, og GTPasen er inaktiveret af en GAP [41]. Ikke desto mindre er prenylering ikke den unikke post-translationelle modifikation, der regulerer Rab GTPaser. Nogle Rabs kan phosphoryleres af kinaser såsom p34cdc2 eller den PD-relaterede kinase LRRK2 [41,43]. De patogene varianter af LRRK2 forbundet med PD resulterer i en stigning i sådan phosphorylering. Denne post-translationelle modifikation forekommer i switch II-domænet, hvilket er afgørende for GTPase-interaktionen med dets regulatorer. Specifikt reducerer phosphorylering interaktionen af ​​GTPase med dens regulatorer [43,44].

Som tidligere nævnt styrer Rab GTPaser alle nøgletrinene i vesikulær transport og membranhandel på grund af deres evne til at interagere med forskellige effektormolekyler [45]. Til udvælgelse af last, knopskydning og pelsdannelse interagerer Rab GTPaser med proteiner såsom TIP47 eller retromer. For eksempel interagerer Rab9-GTP med TIP47 i sene endosomer, hvilket øger TIP47's affinitet til den last, der skal transporteres [46]. TIP47 genkender de cytoplasmatiske domæner af mannose 6-phosphatreceptorer (MPR), hvilket aktiverer transporten fra endosomer til Golgi-komplekset [46]. Et andet eksempel er interaktionen af ​​Rab7 med retromerkomplekset for at mediere endosom-til-Golgi-komplekstransporten [47]. Med hensyn til reguleringen af ​​vesikulær transport interagerer Rab GTPaser med motorproteiner såsom kinesiner og dyneiner. Kinesiner og dyneiner er ATPaser, der bruger ATP-hydrolyse til at inducere konformationelle ændringer, der genererer drivkraften til at flytte lasten mod henholdsvis plus- og minus-enden af ​​mikrotubuli [48].

Rab GTPaserne såsom Rab3A, 6, 8A, 10, 11A, 14, 27A og 39B interagerer med myosin type V for at transportere organeller og vesikler gennem actinfilamenter [49]. For eksempel interagerer Rab27A med myosin type V og melanophilin og danner et ternært kompleks til at transportere melanosomer mod actinfilamenter [50]. Til kontrol af afcoating og binding af vesikler associerer Rab GTPaser med proteiner såsom TRAPP, Exocyst eller p115/Golgins. Et eksempel er interaktionen af ​​Rab1 med p115, som er et bindingsprotein, der inducerer dannelsen af ​​SNARE-komplekset og stimulerer docking af COP I-coatede vesikler i Golgi-membraner [51]. Desuden interagerer Rab1 også med andre bindingsfaktorer såsom GM130 og GRASP65 for at lette fusionen af ​​Golgi-membranens vesikler [52].

GM130 er derefter ansvarlig for vedligeholdelsen af ​​Golgi-strukturen [52]. Det er kendt, at Rab GTPaser interagerer med proteiner såsom Sro7 og Rabenosyn-5 [45]. For eksempel interagerer Rab8 med Sro7 og regulerer SNARE-proteinfunktioner i fusionen af ​​vesikler til cellemembranerne, mens Rabenosyn-5 fungerer som en forbindelse mellem Rab og hVPS45 [53,54] ved at samle Rab4 og/eller Rab5 og hVPS45-associeret Rabenosyn-5, som derefter binder SNARE'er. Som konklusion er Rab GTPaser hovedregulatorerne for udvælgelse af last, dannelse, transport, docking og fusion af vesikler med målmembraner. Under hensyntagen til vigtigheden af ​​membranhandel i nervesystemet har neuroner udviklet specifikke mekanismer til at kontrollere transporten af ​​proteiner, organeller og receptorer gennem lange afstande i axoner og dendritter. Rab GTPaser regulerer genbrug, exocytose og endocytose af synaptiske vesikler; frigørelsen af ​​neurotransmittere; trafikken af ​​receptorer; og de anterograde og retrograde aksonale transporter [15].

Hvad mere er, er de også involveret i forgrening og morfogenese af dendritter, neuritvækst og neuronal migration under udvikling. I betragtning af vigtigheden af ​​sådanne processer er dysreguleringen af ​​Rab GTPaser blevet relateret til forskellige neurodegenerative sygdomme såsom AD, PD, amyotrofisk lateral sklerose (ALS) og Charcot-Marie-Tooth (CMT) [8,15]. I AD er forskellige Rab GTPaser involveret i transporten af ​​proteiner relateret til patologien, såsom Tau, APP, BACE1, -secretase, -secretase og A-peptider. Ydermere er ekspressionen af ​​disse GTPaser ændret i post-mortem AD hjernen [55]. Med hensyn til PD kontrollerer disse GTPaser transporten af ​​-syn [56]. Derudover kunne Rab GTPaser mediere toksiciteten forårsaget af LRRK2-kinasen i PD [57]. Som nævnt ovenfor er nogle Rab GTPaser substrater for LRRK2, og dysreguleringen i denne phosphorylering er blevet beskrevet for at inducere neurotoksicitet og degeneration af dopaminerge neuroner in vivo [57,58]. Nedenfor beskriver vi de specifikke roller af de vigtigste Rab GTPaser i starten og progressionen af ​​AD og PD (figur 2).

2.1. Rab1

Rab1 GTPaser kontrollerer den tovejstransport mellem det endoplasmatiske reticulum (ER) og GA, såvel som dannelsen, integriteten og genanvendelsen af ​​Golgi-membraner [38,59]. Rab1-familien er sammensat af to isoformer: Rab1A og Rab1B. GEF for begge isoformer er TRAPP I. TRAPP I er et kompleks af proteiner, der aktiverer Rab1 og er involveret i ER-Golgi-transporten [41,60]. På den anden side er det molekyle, der er ansvarlig for inaktiveringen af ​​Rab1, TBC1D20 GAP [41,61]. Mange undersøgelser fremhæver vigtigheden af ​​Rab1, såvel som dets regulatorer, i opretholdelsen af ​​integriteten af ​​Golgi-membraner.

Overekspressionen af ​​dominant-negative former af Rab1A og Rab1B, udtømningen af ​​begge GTPaser og overekspressionen af ​​TBC1D20 GAP inducerer fragmenteringen af ​​GA [38]. 2.1.1. Rab1 og ER-Golgi-trafikken Rab1 styrer transporten mellem ER og GA, da den kan interagere med p115 og GM130-GRASP65 for at favorisere fusionen af ​​ER-vesikler i GA [62-64]. Gennem sin interaktion med disse effektormolekyler styrer Rab1 dannelsen, integriteten og genanvendelsen af ​​GA-membraner. På den ene side interagerer Rab1 med p115-protein, som er en vesikelbindingsfaktor, for at kontrollere denne ER-GA-trafik [65]. På den anden side, når Rab1 associerer med GM130-GRASP65-komplekset i GA, regulerer det stablingen af ​​GA- og vesikelbindingen [66,67].

GM130 er ansvarlig for integriteten af ​​Golgi-membraner [52]. Desuden menes det, at p115 kan interagere med GM130-GRASP65 til ER-vesikelfusion i GA [62,64]. Desuden kontrollerer Rab1 også den retrograde transport mellem GA og ER. For at gøre det interagerer GTPase med GBF1, en GEF for Arf1 GTPase, der er involveret i biogenesen af ​​COP I vesikler [68,69]. Selvom Rab1's rolle i ER-GA-trafikken i AD-patogenese endnu ikke er klar, er det blevet beskrevet, at denne GTPase kunne forhindre tabet af dopaminerge neuroner i PD [19]. I PD er en af ​​de mulige mekanismer, hvorved -syn kunne inducere neurodegeneration, ved at hæmme ER-GA-trafikken [19].

Det er blevet beskrevet, at vildtype (WT) -syn, såvel som mutanten -synA53T, der forårsager tidligt opstået PD, blokerer ER-GA-trafikken, selvom -synA53T initierer denne blokering hurtigere end WT. Cooper og samarbejdspartnere har vist, at denne -syn-inducerede toksicitet forhindres i nærvær af Rab1 [19]. Faktisk reddede udtrykket af Rab1 tabet af dopaminerge neuroner i Drosophila melanogaster (D. melanogaster), Caenorhabditis elegans (C. elegans) og primære kulturer af rotteneuroner, der udtrykker WT -syn eller -synA53T. Disse data tyder på, at Rab1 kunne spille en beskyttende rolle i kontrollen af ​​ER-GA-trafik og derfor kunne forhindre neurodegeneration i PD. Rab1 og dets funktion i styringen af ​​ER-GA-trafik er også relateret til ALS. Mutationerne i SOD1-, TDP--43- eller FUS-proteiner, der forårsager denne neurodegenerative sygdom, resulterer i en fejllokalisering af Rab1, såvel som i svækket ER-GA-transport og øget ER-stress [8]. Rab1-overekspression udøver tværtimod en beskyttende rolle mod denne stress [8,21].

2.1.2. Rab1 og GA's integritet

Bortset fra de klassiske kendetegn ved AD- og PD-patologier er det blevet beskrevet, at neuroner præsenterer en fragmenteret GA i begge tilfælde [70]. Denne fragmentering er blevet tilskrevet forskellige årsager, såsom tilstedeværelsen af ​​proteinaggregater i cytoplasmaet, ændringer i cytoskelettet eller fejlfunktion af intracellulær handel. I denne henseende har Martínez-Menárguez et al. anføre, at hovedårsagen til GA-fragmentering i neurodegenerative sygdomme er ændringerne i den intracellulære transport [70]. Adskillige undersøgelser har vist, at i neurodegenerative patologier inducerer Rab1--medieret trafikdysregulering GA-fragmentering [16,17,70]. I tilfælde af AD er disse GA-ændringer blevet ligeret til pTau-niveauer [71,72].

I 2014 afslørede undersøgelsen af ​​Jiang og samarbejdspartnere, at GA-fragmentering gik forud for Tau-hyperfosforylering [71]. Ifølge dem fremmer GA-fragmentering Tau-phosphorylering gennem aktivering af cyclinafhængig kinase-5 (cdk5) og ERK. Hos AD-patienter præsenterer neuroner udsat for NFT'er desuden større defekter ved Golgi sammenlignet med neuroner uden NFT [72]. Neuroner, der akkumulerede mellemliggende niveauer af spil før NFT-dannelse, viste mellemliggende defekter i GA [72]. Dette understøtter, at den progressive akkumulering af spil er forbundet med strukturelle ændringer i GA. Ifølge Antón-Fernández og samarbejdspartnere kunne disse ændringer påvirke behandlingen og handelen med proteiner, og derfor kunne de bidrage til neuronal dysfunktion i AD [72]. Ydermere forhindrede overekspressionen af ​​Rab1A i HeLa-celler, der udtrykker humane Tau og primære neuroner fra rottecortex, GA-fragmentering, hvorimod dæmpningen af ​​GTPase af siRNA inducerede dens fragmentering [16,17].

De observerede, at Rab1A co-lokaliserede med GM130 i primære kulturer af neuroner fra rottecortex [16]. En anden effekt af Rab1A-dæmpning var opreguleringen af ​​Tau-sekretion. Således foreslog forfatterne, at Rab1 kunne være et terapeutisk mål til at modulere Golgi-dynamik og Tau-sekretion i AD [16]. Sammenfattende er GA-fraktionering forbundet med Tau-phosphorylering [71], pTau-akkumulering i NFT [72] og Tau-sekretion [16]. Derfor kunne Rab1 GTPase-regulering modulere sådanne neurodegenerative processer. Med hensyn til PD viser dopaminerge neuroner også GA-fragmentering. Specifikt udviser dopaminerge neuroner fra substantia nigra par compacta, der overudtrykker human -syn, GA-fragmentering, som reduceres ved overudtrykkelse af Rab1A [17].

Derudover, bortset fra at redde GA-fragmentering, inducerede Rab1A-overekspression i dopaminerge neuroner forbedringer i motoriske funktioner. Omvendt var overekspression af den ikke-udskrivbare Rab1A (Rab1A-∆CC) ikke i stand til at redde GA fra fragmentering. Dette viste vigtigheden af ​​Rab1A i opretholdelsen af ​​GA-integriteten og følgelig i kontrollen af ​​motoriske funktioner [17]. Disse data tyder på, at Rab1A GTPase-overekspression kunne være en terapeutisk tilgang til denne patologi. En nylig undersøgelse har analyseret dopaminerge neuroner fra substantia nigra af humane patienter med PD, og ​​de har vist, at GA er fragmenteret, og at de overlevende neuroner viser en høj overekspression af Rab1 GTPase [18].

Forfatterne foreslår, at denne overekspression af Rab1 kunne inducere GA-fragmenteringen af ​​to teoretiske foreslåede mekanismer: (1) overudtrykt Rab1 kunne ændre ER-Golgi-transport og derfor forårsage en ubalance i GA; (2) Rab1 kunne interagere med Golgin-84, hvilket ville inducere fragmenteringen [18]. Samlet set er der uoverensstemmelser med hensyn til Rab1's rolle i enten at inducere eller forhindre GA-fragmentering i PD. Bortset fra AD og PD er ALS en anden neurodegenerativ sygdom, der præsenterer GA-fragmentering. Den væsentligste årsag til dette synes at være forstyrrelser i sekretionsvejen afhængig af Rab1 [70]. Således er Rab1 og dets rolle i at opretholde GA-integritet involveret i forskellige neurodegenerative sygdomme.

2.1.3. Rab1 og kontrollen af ​​autofagosomet

Rab1 GTPase deltager sammen med andre Rab GTPaser såsom Rab5, Rab7, Rab9A, Rab11, Rab23, Rab32 og Rab33B i dannelsen af ​​autophagosomet [73] i begyndelsen ved at rekruttere det autofagi-relaterede protein 9 (Atg9), et transmembranprotein ansvarligt for at transportere membraner til fagophoren, som er strukturen forud for dannelsen af ​​autofagosomet [74,75]. Som tidligere nævnt inducerer -syn-overekspression GA-fragmentering. Dette fører til dysregulering af autofagi i SKNSH human neuroblastom cellelinje, HeLa, HEK293 og M7- -syn mus [20]. Winslow og kolleger beskrev, at -syn ændrer aktiviteten af ​​Rab1A/Atg9-aksen. Ved dæmpning af Rab1A og overudtryk -syn stoppede Atg9-proteinet med at lokalisere sig i en perinukleær position og gik over til en diffus fordeling, hvilket resulterede i en reduktion i autophagosomdannelsen [20]. En stigning i Rab1A-aktivitet kunne således begunstige autofagi og derfor reducere sygdommens sværhedsgrad, da denne mekanisme kunne bruges til at genbruge og eliminere proteinaggregater.

2.2. Rab5

Rab5 spiller en vigtig rolle i endocytose og er ansvarlig for fusionen af ​​endocytiske vesikler, der kommer fra plasmamembranen til dannelse af tidlige endosomer. Ved denne mekanisme regulerer Rab5 internaliseringen og handelen med membranreceptorer [76]. De to GEF'er beskrevet for Rab5 er Ras/Rab Interactor 3 (RIN3) og Rabex5. RIN3 er medlem af RIN-familien af ​​GEF'er sammen med RIN1 og RIN2. Alle tre har et Vps9-domæne, som er det Rab{11}}specifikke GEF-katalytiske domæne [77]. Med hensyn til Rabex5 er det det bedst forståede medlem af de Vps9-domæneholdige GEF'er. Bortset fra dets katalytiske domæne indeholder Rabex5 et Rabaptin5-bindingssted, som er et Rab5-effektormolekyle. Således binder Rabex5 tæt til Rab5-reguleret Rabaptin5, som igen regulerer Rabex5 GEF-aktivitet og danner en feedback-loop [78]. Rab5 rekrutterer Rabaptin5 i tidlige endosomer, hvor sidstnævnte er ansvarlig for docking og fusion af membraner [79].

Når det er aktiveret, er Rabex5/Rab5/Rabaptin5-komplekset lokaliseret i endocytiske vesikler og tidlige endosomer [79-81]. De tre molekyler arbejder på at stabilisere aktive Rab5, når det når sin målrettede lokalisering, og danner en positiv feedback-loop, der forstærker denne vej [38]. Som Rab5-signaleringen til Rabaptin5 [79] ovenfor beskrevet, kan Rab5 signalere gennem PI3K hVPS34-p150-komplekset, hvilket øger niveauerne af PI3P i tidlige endosomer [25,82,83]. Denne PI3P tillader rekruttering af EEA1, et andet Rab5 effektormolekyle, der regulerer docking af endocytiske vesikler før deres fusion med de tidlige endosomer [84]. Desuden kan hVPS34-p150 aktivere en negativ feedback-loop ved at aktivere TBC1D2 GAP'er, hvilket resulterer i Rab5 GTPase-inaktivering [85].

De TBC-domæneholdige GAP'er TBC1D3, RUTBC3 og USP6NL er blevet beskrevet som Rab5 GAP'er [12,41]. Rollen af ​​Rab5 i neurodegenerative sygdomme er blevet afgrænset til endosomal handel. I denne henseende har forskellige undersøgelser påvist en stigning i Rab5-aktivitet i AD [12,22,86-91], såvel som i murine modeller af PD [12,92,93]. Ved Huntingtons sygdom (HD) kontrollerer Rab5 også motiliteten af ​​tidlige endosomer. HD er forårsaget af mutationer i huntingtin (Htt) proteinet, som er placeret på GA og vesikler. Htt danner et kompleks med Htt-associeret protein 40 (HAP40) og tjener som et effektormolekyle af Rab5 [94]. I HD er HAP40 opreguleret, og Htt-HAP40-komplekset er forstyrret. Følgelig er de tidlige endosomers motilitet reduceret [94]. Rab5 kunne således være et terapeutisk mål til at forbedre endosomal motilitet ved HS.

2.2.1. Rab5 og APP Processing

Anomalierne i endocytisk handel er en af ​​hovedkarakteristikaene ved AD, og ​​ifølge Cataldo og samarbejdspartnere går de forud for A-aflejringerne [95]. En senere undersøgelse viste, at Rab5-overekspression kan reproducere sådanne endocytiske anomalier ved at øge den meget aktive behandling af APP i endosomer [22]. Overekspressionen af ​​Rab5 i murine celler inducerede endocytiske ændringer relateret til AD, såsom tilstedeværelsen af ​​store endosomer svarende til dem, der observeres i neuroner fra AD hjerner [22]. Desuden steg Rab5-overekspression med 2,5 gange niveauet af A 1-40 og A 1-42 sekretion [22].

Forfatterne observerede også en stigning i CTF-niveauerne. Disse CTF'er kolokaliseres med tidlige endosomer, hvilket tyder på et direkte forhold mellem den endosomale vej, CTF-generering og A-produktion. Derfor kunne de endosomale anomalier observeret i AD være forbundet med defekter i APP-proteolyse [22]. Dette tyder på, at Rab5 kunne være et terapeutisk mål på grund af dets relevans i styringen af ​​APP-behandling og dermed i en 1-40- og en 1-42-generation. Rollen af ​​CTF i rekrutteringen af ​​pleckstrin-homologi og phosphotyrosin-bindende domæne- og leucin lynlås-motiv-holdigt adapterprotein (APPL1) er også blevet beskrevet [91]. I endosomer stabiliserer APPL1 aktivt Rab5-GTP, hvilket fører til en patologisk dysreguleret endocytose [91].

Under hensyntagen til Rab5's rolle i den endosomale vej, forsvarer Grbovic og samarbejdspartnere, at dysreguleringerne i endosomerne giver anledning til en stigning i CTF [22], og Kim og samarbejdspartnere forsvarer, at CTF'er inducerer disse endosomale dysreguleringer [91]. Derudover vendte shRNA-silencing af BACE1 de endocytiske defekter, hvilket tyder på, at APP-proteolyse kunne være årsagen til de endocytiske defekter [96]. Som konklusion peger disse undersøgelser på en positiv feedback-loop, hvor APP-behandlingen kunne føre til dysregulering af den endosomale vej, og defekterne i den endocytiske vej kunne igen øge APP-behandlingen

2.2.2. Rab5 og Axeonal

Transport I normale basale kolinerge forhjerneneuroner (BFCN'er) binder nervevækstfaktoren (NGF) og aktiverer TrkA-receptoren ved aksonale ender. NGF-TrkA-komplekset internaliseres derefter ved endocytose medieret af Rab5. Endosomerne transporteres i retrograd retning gennem mikrotubuli til cellelegemet, hvor vækst- og differentieringssignalerne forplantes til kernen [12]. Under patologiske tilstande er der en overaktivering af Rab5 i BFCN-neuroner, hvilket resulterer i større tidlige endosomer. Disse endosomer griber ind i den retrograde aksonale transport af NGF-signaler. Derudover kan en stigning i Rab5-aktivitet også påvirke motorproteiner, ændre aksonal transport, og defekter i transporten af ​​trofiske signaler til cellekroppen fører til neuronal atrofi [12].

I denne henseende er GEF RIN3 blevet relateret til overaktiveringen af ​​Rab5 i transporten af ​​trofiske signaler [77,97]. Desuden har genom-dækkende associationsstudier (GWAS) forbundet RIN3 med risikoen for at udvikle AD [12,98-100]. Det skal dog stadig afklares, om RIN3-funktion og -ekspression er ændret i AD, og ​​om andre Rab5 GEF'er ligger til grund for Rab5-overaktivering i AD [12]. Ikke desto mindre er der en anden mulig mekanisme, der kan forklare Rab5-overaktivering. Som tidligere nævnt rekrutterer CTF APPL1 til endosomerne, hvilket stabiliserer Rab5-GTP. Dette kompleks fører til dysregulerede endocytiske veje såvel som ændret aksonal transport [12,91]. Med hensyn til PD har murine modeller, der konstitutivt udtrykker human -syn, vist den -syn-afhængige aktivering af Rab5, hvilket fører til dysregulering i Rab5 og dyneinkompleks, hvilket resulterer i endosomal dysfunktion. Dette kunne være den underliggende mekanisme, der ville forklare dysreguleringen i retrograd aksonal transport og den deraf følgende neuronale atrofi i PD [12,93].

2.3. Rab7

Rab7 GTPase regulerer vesikulær transport, specifikt den sene endocytiske vej [101]. Det udgør en fundamental rolle i modningen af ​​endosomer, i transporten af ​​endosomer og lysosomer, i fusionen af ​​sene endosomer og lysosomer og i den lysosomale biogenese [26,101,102]. Rab7 deltager også i trafikken af ​​autofagosomer [103]. I betragtning af vigtigheden af ​​alle disse processer er Rab7 blevet foreslået som et terapeutisk mål for cancer [26] og neurodegeneration [104]. Rab7-aktivering medieres af GEF Mon1-Ccz1 [27,105,106]. Mekanismen, hvormed Mon1-Ccz1 medierer Rab7-aktivering, består af dens evne til at være et effektormolekyle af Rab5 og interagere med PI3P i tidlige endosomer [102,107].

På denne måde er der en udveksling mellem Rab5 og Rab7, og endosomet går fra et tidligt endosom til et sent endosom [105,107]. På den anden side er GAP'erne beskrevet for Rab7 TBC1D2A, TBC1D5, TBC1D15 og EVI5-L [41]. Rab7-GTP i sene endosomer og lysosomer kan signalere gennem sit effektormolekyle det Rab-interagerende lysosomale protein (RILP) [108]. RILP rekrutterer dynein-dynactin motorkomplekser og følgelig transporteres endosomerne mod minusenden af ​​mikrotubulierne [109]. Det FYVE og coiled-coil domæne-holdige protein 1 (FYCO1) er et andet effektormolekyle af Rab7, der medierer den vesikulære transport mod plusenden af ​​mikrotubuli [110]. Desuden danner FYCO1 et kompleks med Rab7 og LC3-proteinet, som er ansvarlig for modningen af ​​autofagosomet [111].

Når først dette kompleks er dannet, transporteres autofagiske vesikler mod plusenden af ​​mikrotubuli [110]. Med hensyn til nervesystemet er både autofagi og den endolysosomale trafik styret af Rab7 blevet forbundet med patologier som AD, PD, HD eller Charcot-Marie-Tooth type 2B (CMT2B) [104,112]. Rab7 er involveret i trafikken af ​​toksiske peptider såsom A-vesikler [23] eller Tau-sekretion i AD [29] og -syn-clearance i PD [30].

2.3.1. Rab7 og Trafficering af giftige peptider

Ved AD kan A-akkumulering være konsekvensen af ​​en dysregulering i APP-behandlingen, såvel som en defekt i elimineringen af ​​de toksiske oligomerer [113]. Derfor er den Rab5- og Rab7-kontrollerede endolysosomale trafik vigtig for clearingen af ​​toksiske peptider såsom A . I denne henseende har undersøgelser i N2a neuroblastom musecellelinjen såvel som i primære neuronale kulturer fra mus vist, at A 1-42 er internaliseret i Rab5-positive tidlige endosomer ved starttilstande og senere, i Rab7-positive sene endosomer [23]. Disse data tyder på, at den endocytiske vej er aktivt involveret i clearance og/eller eliminering af A .

Overekspressionen af ​​de dominant-negative former af Rab5 og Rab7, ude af stand til at binde og transmittere signalet gennem deres effektormolekyler, hæmmede colokaliseringen af ​​disse GTPaser med A 1-42 monomerer og oligomerer i endosomerne [23]. Dette understøtter inddragelsen af ​​disse GTPaser og endocytose i A-clearance. Nogle undersøgelser tyder på, at den Rab5- og Rab7-medierede dysregulerede endolysosomale vej har toksiske virkninger [24,87,88]. Post-mortem AD hjerner har vist øgede Rab5- og Rab7-proteinniveauer [87,88]. Desuden har en undersøgelse af primære neuroner fra rottecortex vist, at en Rab5- og Rab7-medieret aktiv internalisering af A 1-42 fører til neuronal død [24], og tilføjer, at endocytose generel inhibitor phenylarsinoxid (PAO) svækkede toksiciteten.

Disse resultater tyder på, at blokering af Rab5- og Rab7-medieret endocytose kunne være en terapeutisk strategi til at forhindre neuronal død i AD [24]. Hvad angår Tau, udviste hjernerne hos patienter med hurtig progressiv AD- og 5XFAD-musehjerner øgede Rab7A-proteinniveauer kolokaliseret med pTau [28]. Desuden inducerede Rab7A-overekspression i primære kortikale neuroner og HeLa-celler Tau-sekretion [29]. Omvendt blokerede Rab7A-silencing, såvel som overekspressionen af ​​dens dominant-negative form, delvist Tau-sekretion [29]. Alle disse data kunne betyde, at Rab7-dysregulering kunne bidrage til Tau-akkumulering såvel som til udbredelsen af ​​dets toksiske virkninger i AD [114].

2.3.2. Rab7 og endolysosomal handel med membranmodtagelsetors

Endolysosomal pathway-dysfunktion har været relateret til PD, og ​​gener, der deltager i denne pathway, har været relateret til denne patogenese [115]. Lrrk, homologen af ​​LRRK2-kinasen i D. melanogaster, interagerer med Rab7 i membranerne af sene endosomer og lysosomer og har vist sig at hæmme den Rab7-afhængige perinukleære lokalisering af lysosomer [116]. Omvendt fremmer mutantformen af ​​Lrrk, analogen til den patogene LRRK2G2019S, den perinukleære klyngedannelse af lysosomer. Således kunne Rab7 og LRRK2G2019S ligge til grund for den dysfunktionelle endolysosomale vej i PD [116].

Det er blevet beskrevet, at LRRK2 regulerer den Rab7-afhængige endocytiske trafik af den epidermale vækstfaktorreceptor (EGFR) [31]. Ekspressionen af ​​mutanten LRRK2G2019S forårsagede en forsinkelse i tidlig til sen endosomal EGFR-handel og en deraf følgende forsinkelse i EGFR-nedbrydning. Disse defekter blev vendt tilbage ved at overudtrykke den konstitutivt aktive form af Rab7 [31]. Rab7's evne til at regulere handelen med receptorer er allerede blevet brugt i terapeutiske tilgange til multipel sklerose (MS) [33]. Overekspressionen af ​​Rab7 kan regulere tilstedeværelsen af ​​Toll-lignende receptorer (TLR'er) og derfor kontrollere det inflammatoriske respons [33]. Rab7 er dog ikke den eneste Rab GTPase, der regulerer handelen med receptorer.

Rab11 kontrollerer for eksempel TLR-handel via endosomerne [117]. I denne henseende er tilstedeværelsen af ​​specifikke enkeltnukleotidpolymorfier (SNP'er) i Evi5, en Rab11GAP, blevet korreleret til højere modtagelighed for at udvikle MS [118]. Dette tyder på, at Rab11 kunne genbruge TLR-receptorer, hvilket påvirker medfødt immunitet. For nylig er Evi5 blevet associeret med MS [119], og det er blevet brugt som en markør for sygdommen [120]. Disse data inviterer en til at udforske Rab GTPases signalregulering som en tilgang til at fremme genanvendelse af receptorer i neurodegenerative sygdomme.

2.3.3. Parkin/Rab7/RILP

Parkin er en ubiquitin E3-ligase forbundet med PD, da mutationer i dette enzym er den næstmest almindelige genetiske risikofaktor for udviklingen af ​​sygdommen [121]. Rab7 K38-rest ubiquitinering fastholder Rab7 i en aktiv form og påvirker følgelig den endocytiske trafik [32]. Eksperimenter med primære fibroblastkulturer fra PD-patienter med mangel på funktionelt Parkin og i celler, der overudtrykker Rab7K38R-mutanten, som ikke kan ubiquitineres, viste, at Rab7-kapaciteten i disse situationer til at binde til dets effektormolekyle Rab7-Interacting Lysosomal Protein (RILP) er formindsket [32]. RILP er et Rab7-effektormolekyle, der er involveret i transducering af Parkin/Rab7-aksesignaleringen.

Specifikt rekrutterer RILP dynein-dynactin motorkomplekser, så vesikler kan transporteres mod minusenden af ​​mikrotubuli [108,109]. Ifølge Song og samarbejdspartnere kunne Rab7-dysregulering være hovedårsagen til endocytiske ændringer i Parkin-/-celler. Desuden kunne disse dysreguleringer af Parkin/Rab7/endocytose-aksen bidrage til progressionen af ​​PD-patologi [32].

2.3.4. Rab7 og Autofagi

Rab7 i sin aktive form kan regulere dannelsen af ​​autophagosomet, såvel som dets modning og transport mod mikrotubuli [104]. Studiet af Rab7 og dets rolle i autofagi kunne lette udviklingen af ​​strategier til behandling af neurodegenerative sygdomme [104]. Rab7 er relateret til autofagi i CMT2B neurodegenerativ sygdom. Denne patologi er forårsaget af forskellige missense-mutationer i Rab7, der fører til den reducerede lokalisering af Rab7 til autofagiske rum og nedsat autofagi [8,34]. Det beskrives, at CMT2B er en direkte konsekvens af Rab7-dysfunktion, selvom det stadig mangler at afklares, om patologien er en konsekvens af en reduktion i den autofagiske vej på grund af Rab7-funktionstab [8].

Med hensyn til PD viste undersøgelser med HEK293 og D. melanogaster -synA53T, at Rab7-overekspression favoriserer clearance af -syn-aggregater [30]. Desuden identificerede forfatterne, at Rab7 lokaliserede sig i neuromelanin-granulatet i den humane substantia nigra [30]. Rab7/neuromelanin-granulerne er autophagosom-lignende beskyttende organeller. Rab7 deltager i biogenesen af ​​disse granula og clearance af -syn-aggregater [30]. Derudover reddede Rab7-overekspression i D. melanogaster fænotypen og forbedrede de bevægelsesmæssige underskud [30]. Ikke desto mindre er Rab7 ikke den eneste Rab GTPase beskrevet til at kontrollere -syn clearance gennem autophagy. For nylig har Rab27b vist sig at kontrollere den endolysosomale trafik og dermed sekretionen og clearance af -syn gennem autofagi [122].

I overensstemmelse hermed øgede støjdæmpningen af ​​Rab27b med shRNA de intracellulære niveauer af uopløselig -syn. Derudover har post-mortem hjerner hos PD-patienter vist øgede proteinniveauer af Rab27b [122]. Selvom de ikke er relateret til autofagiske processer, deltager andre Rab GTPaser også i homeostasen af ​​-syn; hvorimod nogle af dem går ind for rydningen af ​​aggregaterne, andre går ind for deres dannelse. For eksempel regulerer Rab39B klassisk transporten mellem GA og den postsynaptiske membran. I PD har mutationer i Rab39B resulteret i tab af funktion af GTPase og følgelig i dysregulering af -syn homeostase [123,124].

Omvendt har PD-patienter vist øgede niveauer af Rab35, hvilket fremmer en forøget aggregering og sekretion af -synA53T [125]. Desuden viste primære cellekulturer og in vivo eksperimenter, at LRRK2-medieret Rab5-dysregulering inducerede alvorlig neurotoksicitet og tab af dopaminerge neuroner [57,58].

hvorfor spise cistanche kan forebygge Alzheimers sygdom og Parkinsons sygdom

Cistanche indeholder flere aktive stoffer, som har vist sig at have neurobeskyttende virkninger, som kan hjælpe med at forhindre eller bremse udviklingen af ​​Alzheimers sygdom og Parkinsons sygdom. Disse forbindelser omfatter echinacosid, acteosid og verbascoside, som har vist sig at have anti-inflammatoriske og antioxidante egenskaber, der kan beskytte neuroner mod skader og reducere inflammation i hjernen. Derudover har cistanche vist sig at øge niveauet af acetylcholin, en neurotransmitter, der er vigtig for indlæring og hukommelse, som kan reduceres ved Alzheimers sygdom. Mens der er behov for mere forskning for fuldt ud at forstå de potentielle fordele ved cistanche til forebyggelse af disse sygdomme, er disse første resultater lovende.

Reference

19. Cooper, AA; Gitler, AD; Cashikar, A.; Haynes, CM; Hill, KJ; Bhullar, B.; Liu, K.; Xu, K.; Strathearn, KE; Liu, F.; et al. Alpha-synuclein blokerer ER-Golgi-trafik og Rab1 redder neurontab i Parkinsons modeller. Science 2006, 313, 324-328. [CrossRef]

20. Winslow, AR; Chen, C.-W.; Corrochano, S.; Acevedo-Arozena, A.; Gordon, DE; Peden, AA; Lichtenberg, M.; Menzies, FM; Ravikumar, B.; Imarisio, S.; et al. -Synuclein svækker makroautofagi: Implikationer for Parkinsons sygdom. J. Cell Biol. 2010, 190, 1023-1037. [CrossRef] [PubMed] 21. Soo, KY; Halloran, M.; Sundaramoorthy, V.; Parakh, S.; Toth, RP; Southam, KA; McLean, CA; Lock, P.; King, A.; Farg, MA; et al. Rab1-afhængig ER-Golgi-transportdysfunktion er en almindelig patogen mekanisme i SOD1, TDP-43 og FUS-associeret ALS. Acta Neuropathol. 2015, 130, 679-697. [CrossRef] [PubMed]

22. Grbovic, OM; Mathews, PM; Jiang, Y.; Schmidt, SD; Dinakar, R.; Summers-Terio, NB; Ceresa, BP; Nixon, RA; Cataldo, AM Rab5-stimuleret opregulering af den endocytiske pathway øger intracellulært beta-spaltet amyloid precursor protein carboxyl-terminal fragment niveauer og Abeta produktion. J. Biol. Chem. 2003, 278, 31261-31268. [CrossRef] [PubMed]

23. Li, J.; Kanekiyo, T.; Shinohara, M.; Zhang, Y.; Liu, MJ; Xu, H.; Bu, G. Differentiel regulering af amyloid-endocytisk handel og lysosomal nedbrydning af apolipoprotein E-isoformer. J. Biol. Chem. 2012, 287, 44593-44601. [CrossRef]

24. Song, MS; Baker, GB; Todd, KG; Kar, S. Inhibering af -amyloid1-42-internalisering dæmper neuronal død ved at stabilisere det endosomale-lysosomale system i rotte corticale dyrkede neuroner. Neurovidenskab 2011, 178, 181-188. [CrossRef] [PubMed]

25. Gillooly, DJ; Raiborg, C.; Stenmark, H. Phosphatidylinositol 3-phosphat findes i mikrodomæner af tidlige endosomer. Histochem. Cell Biol. 2003, 120, 445-453. [CrossRef] [PubMed]

26. Guerra, F.; Bucci, C. RAB7-proteinets rolle i tumorprogression og cisplatin-kemoresistens. Cancers 2019, 11, 1096. [CrossRef] 27. Nordmann, M.; Cabrera, M.; Perz, A.; Bröcker, C.; Ostrowicz, C.; Engelbrecht-Vandré, S.; Ungermann, C. Mon1-Ccz1-komplekset er GEF for den sene endosomale Rab7-homolog Ypt7. Curr. Biol. 2010, 20, 1654-1659. [CrossRef] [PubMed]

28. Zafar, S.; Younas, N.; Correia, S.; Shafiq, M.; Tahir, W.; Schmitz, M.; Ferrer, I.; Andréoletti, O.; Zerr, I. Stamme-specifik ændret regulatorisk respons af Rab7a og Tau i Creutzfeldt-Jakobs sygdom og Alzheimers sygdom. Mol. Neurobiol. 2017, 54, 697-709. [CrossRef] 29. Rodriguez, L.; Mohamed, N.; Desjardins, A.; Lippé, R.; Fon, EA; Leclerc, N. Rab7A regulerer tau-sekretion. J. Neurochem. 2017, 141, 592-605. [CrossRef]

30. Dinter, E.; Saridaki, T.; Nippold, M.; Plum, S.; Diederichs, L.; Komnig, D.; Fensky, L.; May, C.; Marcus, K.; Voigt, A.; et al. Rab7 inducerer clearance af -synuclein-aggregater. J. Neurochem. 2016, 138, 758-774. [CrossRef]

31. Gómez-Suaga, P.; Rivero-Ríos, P.; Fdez, E.; Blanca Ramírez, M.; Ferrer, I.; Aiastui, A.; López De Munain, A.; Hilfiker, S. LRRK2 forsinker nedbrydende receptorhandel ved at hindre sen endosomal knopskydning gennem faldende Rab7-aktivitet. Hum. Mol. Genet. 2014, 23, 6779-6796. [CrossRef] [PubMed]

32. Sang, P.; Trajkovic, K.; Tsunemi, T.; Krainc, D. Parkin modulerer endosomale organisering og funktion af den endo-lysosomale vej. J. Neurosci. 2016, 36, 2425-37. [CrossRef] [PubMed]

33. Klaver, EJ; van der Pouw Kraan, TCTM; Laan, LC; Kringel, H.; Cummings, RD; Bouma, G.; Kraal, G.; van Die, I. Trichuris suis opløselige produkter inducerer Rab7b-ekspression og begrænser TLR4-responser i humane dendritiske celler. Genes Immun. 2015, 16, 378-387. [CrossRef] [PubMed]

34. Colecchia, D.; Stasi, M.; Leonardi, M.; Manganelli, F.; Nolano, M.; Veneziani, BM; Santoro, L.; Eskelinen, E.-L.; Chiariello, M.; Bucci, C. Ændringer af autofagi i den perifere neuropati Charcot-Marie-Tooth type 2B. Autophagy 2018, 14, 930–941. [CrossRef] [PubMed]

35. Hill, K.; Li, Y.; Bennett, M.; McKay, M.; Zhu, X.; Shern, J.; Torre, E.; Lah, JJ; Levey, AI; Kahn, RA Munc18 interagerende proteiner: ADP-ribosyleringsfaktorafhængige pelsproteiner, der regulerer trafikken af ​​-Alzheimers precursorprotein. J. Biol. Chem. 2003, 278, 36032-36040. [CrossRef] 36. Bansal, A.; Kirschner, M.; Zu, L.; Cai, D.; Zhang, L. Kokosolie nedsætter ekspression af amyloid precursor protein (APP) og sekretion af amyloid peptider gennem hæmning af ADP-ribosyleringsfaktor 1 (ARF1). Brain Res. 2019, 1704, 78-84. [CrossRef]

37. Griffin, EF; Yan, X.; Caldwell, KA; Caldwell, GA Distinkte funktionelle roller af Vps41-medieret neurobeskyttelse i Alzheimers og Parkinsons sygdomsmodeller for neurodegeneration. Hum. Mol. Genet. 2018, 27, 4176-4193. [CrossRef] [PubMed]

38. Goud, B.; Liu, S.; Storrie, B. Rab-proteiner som hoveddeterminanter for Golgi-kompleksstrukturen. Små GTPaser 2018, 9, 66-75. [CrossRef] [PubMed]

39. Homma, Y.; Hiragi, S.; Fukuda, M. Rab familie af små GTPaser: Et opdateret syn på deres regulering og funktioner. FEBS J. 2021, 288, 36-55. [CrossRef]

40. Marat, AL; Dokainish, H.; McPherson, PS DENN Domæneproteiner: Regulatorer af Rab GTPaser. J. Biol. Chem. 2011, 286, 13791-13800. [CrossRef]

41. Müller, MP; Goody, RS Molekylær kontrol af Rab-aktivitet ved GEF'er, GAP'er og GDI. Små GTPaser 2018, 9, 5-21. [CrossRef] [PubMed]

42. Koch, D.; Rai, A.; Ali, I.; Bleimling, N.; Friese, T.; Brockmeyer, A.; Janning, P.; Goud, B.; Itzen, A.; Müller, MP; et al. En pull-down procedure til identifikation af ukendte GEF'er for små GTPaser. Små GTPaser 2016, 7, 93-106. [CrossRef]

43. Steger, M.; Tonelli, F.; Ito, G.; Davies, P.; Trost, M.; Vetter, M.; Wachter, S.; Lorentzen, E.; Duddy, G.; Wilson, S.; et al. Phosphoproteomics afslører, at Parkinsons sygdom kinase LRRK2 regulerer en undergruppe af Rab GTPaser. Elife 2016, 5, e12813. [CrossRef] [PubMed]

44. Madero-Pérez, J.; Fdez, E.; Fernandez, B.; Ordóñez, AJL; Ramírez, MB; Gómez-Suaga, P.; Waschbüsch, D.; Lobbestael, E.; Baekelandt, V.; Nairn, AC; et al. Parkinsons sygdom-associerede mutationer i LRRK2 forårsager centrosomale defekter via Rab8a-phosphorylering. Mol. Neurodegener. 2018, 13, 3. [CrossRef] 45. Hutagalung, AH; Novick, PJ Rolle af Rab GTPaser i membrantrafik og cellefysiologi. Physiol. Rev. 2011, 91, 119-149. [CrossRef]

46. ​​Carroll, KS; Hanna, J.; Simon, I.; Krise, J.; Barbero, P.; Pfeffer, SR Rolle af Rab9 GTPase i at lette receptorrekruttering af TIP47. Science 2001, 292, 1373-1376. [CrossRef] [PubMed]

47. Liu, T.-T.; Gomez, TS; Sackey, BK; Billadeau, DD; Burd, CG Rab GTPase-regulering af retromer-medieret lasteksport under endosommodning. Mol. Biol. Celle 2012, 23, 2505-2515. [CrossRef]

48. Horgan, CP; Mccaffrey, MW Rab GTPaser og mikrotubulimotorer. Biochem. Soc. Trans. 2011, 39, 1202-1206. [CrossRef]

49. Lindsay, AJ; Jollivet, F.; Horgan, CP; Khan, AR; Raposo, G.; McCaffrey, MW; Goud, B. Identifikation og karakterisering af flere nye Rab-myosin Va-interaktioner. Mol. Biol. Celle 2013, 24, 3420-3434. [CrossRef] [PubMed]

50. Nagashima, K.; Torii, S.; Yi, Z.; Igarashi, M.; Okamoto, K.; Takeuchi, T.; Izumi, T. Melanophilin forbinder Rab27a og myosin Va direkte gennem dets særskilte spiralformede områder. FEBS Lett. 2002, 517, 233-238. [CrossRef]

51. Guo, Y.; Linstedt, AD Binding af vesikel-dockingproteinet p115 til GTPase Rab1b regulerer membranrekruttering af COPI-vesikelkappen. Celle. Logist. 2013, 3, e27687. [CrossRef] [PubMed]

52. Nakamura, N. Nye roller af GM130, et cis-Golgi-matrixprotein, i højere ordens cellefunktioner. J. Pharmacol. Sci. 2010, 112, 255-264. [CrossRef]

53. Nielsen, E.; Christoforidis, S.; Uttenweiler-Joseph, S.; Miaczynska, M.; Dewitte, F.; Wilm, M.; Hoflack, B.; Zerial, M. Rabenosyn-5, en ny Rab5-effektor, er kompleksdannet med hVPS45 og rekrutteret til endosomer gennem et FYVE-fingerdomæne. J. Cell Biol. 2000, 151, 601-612. [CrossRef]

54. Rahajeng, J.; Caplan, S.; Naslavsky, N. Fælles og særskilte roller for bindingspartnerne Rabenosyn-5 og Vps45 i reguleringen af ​​endocytisk handel med pattedyrsceller. Exp. Cell Res. 2010, 316, 859-874. [CrossRef]

55. Zhang, X.; Huang, TY; Yancey, J.; Luo, H.; Zhang, Y.-W. Rolle af Rab GTPaser i Alzheimers sygdom. ACS Chem. Neurosci. 2019, 10, 828-838. [CrossRef]

56. Shi, M.; Shi, C.; Xu, Y. Rab GTPaser: Nøglespillerne i Parkinsons sygdoms molekylære vej. Foran. Celle. Neurosci. 2017, 11, 81. [CrossRef] [PubMed]

57. Jeong, GR; Jang, E.-H.; Bae, JR; Jun, S.; Kang, HC; Park, C.-H.; Shin, J.-H.; Yamamoto, Y.; Tanaka-Yamamoto, K.; Dawson, VL; et al. Dysreguleret phosphorylering af Rab GTPaser af LRRK2 inducerer neurodegeneration. Mol. Neurodegener. 2018, 13, 8. [CrossRef]

58. Steger, M.; Diez, F.; Dhekne, HS; Lis, P.; Nirujogi, RS; Karayel, O.; Tonelli, F.; Martinez, TN; Lorentzen, E.; Pfeffer, SR; et al. Systematisk proteomisk analyse af LRRK2-medieret rab GTPase-phosphorylering etablerer en forbindelse til ciliogenese. Elife 2017, 6, e31012. [CrossRef][PubMed]

59. Liu, S.; Storrie, B. Hvordan Rab-proteiner bestemmer Golgi-strukturen. Int. Rev. Cell Mol. Biol. 2015, 315, 1-22. [PubMed]

60. Ishida, M.; Oguchi, ME; Fukuda, M. Flere typer af guanin-nukleotidudvekslingsfaktorer (GEF'er) for Rab små GTPaser. Cellestruktur. Funktion. 2016, 41, 61-79. [CrossRef] [PubMed]

61. Fukuda, M. TBC-proteiner: GAP'er for pattedyrs lille GTPase Rab? Biosci. Rep. 2011, 31, 159-168. [CrossRef] [PubMed]

62. Sztul, E.; Lupashin, V. Tethering-faktorers rolle i sekretorisk membrantrafik. Er. J. Physiol. Cell Physiol. 2006, 290, C11-C26. [CrossRef]

63. Sztul, E.; Lupashin, V. Rolle af vesikelbindingsfaktorer i ER-Golgi-membrantrafikken. FEBS Lett. 2009, 583, 3770-3783. [CrossRef]

64. Grosshans, BL; Ortiz, D.; Novick, P. Rabs og deres effektorer: At opnå specificitet i membrantrafik. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2006, 103, 11821-11827. [CrossRef] [PubMed]

65. Grabski, R.; Hay, J.; Sztul, E. Tethering factor P115: En ny model for tether-SNARE interaktioner. Bioarkitektur 2012, 2, 175-180. [CrossRef] [PubMed]

66. Hu, F.; Shi, X.; Li, B.; Huang, X.; Morelli, X.; Shi, N. Strukturelt grundlag for interaktionen mellem Golgi-gensamlings-stablingsproteinet GRASP65 og Golgi-matrixproteinet GM130. J. Biol. Chem. 2015, 290, 26373-26382. [CrossRef] [PubMed]

67. Zhang, X.; Wang, Y. FÅR fat i Golgis struktur og funktion. Foran. Cell Dev. Biol. 2015, 3, 84. [CrossRef] 68. Alvarez, C.; Garcia-Mata, R.; Brandon, E.; Sztul, E. COPI-rekruttering er moduleret af en Rab1b-afhængig mekanisme. Mol. Biol. Cell 2003, 14, 2116-2127. [CrossRef] [PubMed]

69. Monetta, P.; Slavin, I.; Romero, N.; Alvarez, C. Rab1b interagerer med GBF1 og modulerer både ARF1-dynamik og COPI-association. Mol. Biol. Celle 2007, 18, 2400-2410. [CrossRef] [PubMed]

70. Martínez-Menárguez, J.Á.; Tomás, M.; Martínez-Martínez, N.; Martínez-Alonso, E. Golgi Fragmentering i neurodegenerative sygdomme: Er der en fælles årsag? Cells 2019, 8, 748. [CrossRef]

fortsættes

Alazne Arrazola Sastre 1,2, Miriam Luque Montoro 1, Hadriano M. Lacerda 3, Francisco Llavero 1,4,* og José L. Zugaza 1,2,5,

1 Achucarro Basque Center for Neuroscience, Science Park of the UPV/EHU, 48940 Leioa, Spanien; alazne.arrazola@ehu.eus (AAS); miriamluquem@gmail.com (MLM)

2 Institut for Genetik, Fysisk Antropologi og Dyrefysiologi, Universitetet i Baskerlandet UPV/EHU, 48940 Leioa, Spanien

3 Three R Labs, Science Park of the UPV/EHU, 48940 Leioa, Spain; hadrilac@gmail.com 

4 Hospital 12 de Octubre Research Institute (i plus 12), 28041 Madrid, Spanien 5 IKERBASQUE, Basque Foundation for Science, 48013 Bilbao, Spanien * Korrespondance: fcollavero.imas12@h12o.es (FL); joseluis.zugaza@ehu.es (JLZ)