Forskning af effekten af ​​Cistanche på frie radikaler

For flere oplysninger:Ali.ma@wecistanche.com

Anden Skyskov En gammel Zhang Hongjing

På nuværende tidspunkt menes det, at nedgangen i maskinens immunfunktion er relateret til aldring. Baseret på undersøgelsen, derCistanchekan forbedre de humorale og cellulære immunfunktioner hos mus og bekæmpe ældningsmodellen forårsaget af d-galactose, undersøgte vi yderligere lægemidlets virkning på mus. Indånding af ozon<. 3)="" induces="" strong="" antagonistic="" effects="" of="" aging="" and="" aging="" caused="" by="" strong="">frie radikaleri kroppen. Kemiluminescensekspressionshastigheden for mus i lægemiddelgruppen steg, SOD Øget vitalitet "Indholdet af lipidperoxider i plasma, knælende og lårvæv og MAOB-vitaliteten i korridorvæv faldt; der var et dosis-effektforhold mellem forskellige dosisgrupper. -aldringseffekt af mus mod subakut aldring stemmer overens med undersøgelsen afCistanche's forbedring af immunfunktionen hos mus.Cistanchekan styrke immunforsvaret, forbedre kroppens anti-stress evne, og det er hensigtsmæssigt at modtage eller indirekte eliminere skader affrie radikalertil kroppen. , Hæmmer vitaliteten af ​​1WMAO-B. For at opnå effekten af ​​at forsinke aldring. Dette eksperiment giver det eksperimentelle grundlag for anvendelsen afCistanchei anti-aging og behandling af visse senile sygdomme.

Klik for at se fordele og bivirkninger for frie radikaler

1 Materiale og metoder

1.1 Materiale

1.1.1 Lægemiddel og reagenser:Cistanchedeserticola YC Ma blev afkogt i vand 3 gange, afkogterne blev kombineret, koncentreret til et passende volumen, og en vis mængde ethanol blev tilsat. Efter henstand i 24 timer blev den filtreret. Filtratet blev inddampet til ingen alkohol. Forbered med dampende vand, før du bruger 0,25 procent ~0,5 procent koncentration. ml indeholder råstoffer omkring lg). Luminol (luminol), ®National E Merck selskabets produkter Huang Howling Oxidation 88 (HO), Hypochromatic Howling (HX), standard tetra ethoxy propan, alle er Sigma Virksomhedens produkt, salt, benzalkonium, Changzhou Guangming Biochemical Research Institute; cyclohexan, et produkt fra Shanghai Reagent No. 1; Thiobarbitursyre, et produkt fra Shanghai Reagent No. 2, LuzhanSuperoxidDismutase, Shanghai Chinese Academy of Sciences Produkter fra Institute of Biochemical Products.

Cistanche

1.1. 2 Instrument Beckman LS-98OO33 kun væskescintillationstælling, Shimadzu RF-540 fluorescensspektrofotometer, 752 ultraviolette gitter spektrofotometer-G1-20En højhastighedskølet centrifuge, CPS-1A ultralydspulverisator.

1.1.3 Animal ICR mus, 2 måneder gamle, vejer 20±2g, leveret af Jiangsu Experimental Animal Center.

1.2 metode

Musene blev opdelt i kontrol (gå ikke ind i Q-miljøet), model og medicingruppe, hver med 10 mus, hurtig vandspisning uden begrænsninger. Medicingruppen blev opdelt i to dosisgrupper, bind 2, udgave 7, 1994, Chinese Journal of Chinese Materia MedicaCistancheekstrakt100 og 200 mg/kg (svarende til rå lægemidler 20 og 4Qg/kg) blev fodret henholdsvis. Kontrolgruppen og modelgruppen fik en lige stor mængde normalt saltvand hver dag. Administrationsgruppen og modelgruppen fik O, miljø (0,9 X 10-^Oaft grad), kontinuerlig 2. Dag. Testen af ​​hver fingerstamme blev udført på den 21. dag af eksperimentet.

1. 2.1 Udholdenhedstest Sæt musene i hver af ovenstående grupper i en vanddybde på 40 cm og 12±l. I beholderen med Water®L skal du begynde at måle, indtil den synker til bunds og ikke bevæger sig, hvilket er svømmetiden for musene.

   
   

1.2.2 Varmtæt test Musen sættes til 15 først. Svøm i vandet i 2 minutter, og gå derefter ind i en 15P fryser for at observere hele frysetiden.

1.2.3 Atmosfærisk hypoxitolerancetest Kom den lille gluten i en 250 ml bredmundet flaske fyldt med natriumkalk, og noter overlevelsestiden for musene i hver gruppe efter forsegling.

1.2.4 Bestemmelse af hjernetype B monoaminoxidase (MACXB) I henhold til litteraturens orale metode tages hele hjernen fra mus, tilsæt en passende mængde forafkølet 0.2mol/L fosfatbuffer (PH7.4) ), homogenisere og ultralyd (24kC) Knus 3 gange, i alt to gange, med et interval på 30sr1000r/min, 0C i 30min. supernatanten ved 17000 r/min., 4C i 30 min., kasser supernatanten og tag bundfaldet, og brug en passende mængde. .2mo(/L PH7.4) Syren bufres og resuspenderes til en rå fermenteringsopløsning. Tag en passende mængde rå fermenteringsopløsning, tilsæt 16 mmol/L benzamidin 0,3 ml, brug ovenstående fosfatbuffer til at fylde 3 ml, og brug fosforsyretromle 3 ml bufferopløsning bruges som et blankt rør. Alle reagensglas placeres ved 37. Ryst i vandbad i 3 timer, tag det ud, tilsæt 6 procent peroxysyre for at afslutte reaktionen, tilsæt derefter 3m [cyclohexan, ryst for at blande, centrifuger ved 1000r/min i 1 Omin, og tag det op Absorbansen af ​​den klare opløsning måles ved 242nm, og det tomme rør skal holdes varmt før tilsætning af kinesisk amin. Proteinturbiditeten bestemmes ved Folin-phenol-metoden, med kalveserumalbumin som standardprotein. En enzymaktivitetsenhed og en enzymaktivitetsenhed er defineret som 37P producerer mængden af ​​enzym med en ændring i absorbans på 0,01/3 time.'

1. 2. 5 Serumsuperoxiddismutase(SOD) aktivitetsbestemmelse (5 µl, museserum 10M, tilsat til den luminescerende blanding (blandet med 0, 1mmol/L luminol og 0,1mmol/L hypoxanthin) I 980", behold det i en 37C inkubator i 20 minutter. Efter at have taget det ud, tilsæt Huang Guanyin-oxidase for at starte reaktionen. I Beckman LS~98OO flydende flash-medium beregnes antallet af luminescens ved slutningen af ​​1 min. baseret på graden af enkelt-foton detektion. Com bruges som enhed. Luminescenshæmningshastigheden beregnes med den inferior serumgruppe som blank. Desuden er standardensuperoxiddismutationkoncentration (abscisse) og luminescenshæmningshastighed (koordinat) anvendes som standardproteinindholdsbestemmelse som før. 1. 2.6 Bestemmelse af lipidperoxid (LPO) i plasma, hjerne og lever ④ Tag 50 dåser museplasma, homogeniser lever og hjerne (brug 0.2mol/L fosfatbuffer pH7.4 , i en homogenisator Fremstillet i 10 procent koncentration) hver 50 forfædre, tilsæt l/24mol/L svovlsyre 4ml, 1 procent fosforsyre 0,5ml, blandet og anbragt i 5 minutter, centrifugeret ved 1000r/mm i 10min. og aspirerede supernatanten. Tilsæt 2 ml l/24 mol/L svovlsyre og 0,3 ml 10 procent calciumphosphat til bundfaldet, bland godt, centrifuger ved 1000 r/min, og tilsæt 1 ml modstandsdygtigt fejt vand til bundfaldet, bland godt for at danne en suspension, tilsæt knækket barbital syrereagens 1 ml, ved 95. Efter afkøling i 14 i et oliebad, tilsæt 5 ml n-butanol, bland godt *100Or/min centrifugering 10mtn, tag n-butanolfasen og mål fluorescensintensiteten på RF{{ 33}}OS-spektrofotometer (excitationsbølgelængde 515 min, emissionslængde 553 nm), Brug desuden standard tetra-ethoxypropan og relativ fluorescensintensitet som standardkurve.

   
   

2. 

2 resultater

2.1 Indvirkningen på udholdenhedstesten af ​​mus skadet af frie radikaler

Svømmetiden for mus i modelgruppen var signifikant kortere end kontrolgruppens, mens svømmetiden for administrationsgruppen varede længere, og højdosisgruppen svarede til kontrolgruppen (tabel 1).

Tabel 1: Effekten afCistanchepå svømning udholdenhedstest af gratis gravskade musemodel

2.2 Indvirkning på evnen til at holde varmen

Mus i modelgruppen fryser hurtigt ved lave temperaturer, og tiden er kortere end kontrolgruppens, mens frysetiden for to-dosis grupperne påCistancheer ikke kun længere end modelgruppen, men også længere end kontrolgruppen, hvilket indikerer, atCistanchehar ikke kun virkningen af ​​skader mod frie radikaler, men har også indlysende virkninger. Øg evnen til at holde varmen fra kulden (tabel 2).

Tabel 2: Effekten afCistanchepå evnen af ​​Senhan i mus model af fri god skade

2.3 Indvirkning på evnen til at modstå hypoxi ved atmosfærisk tryk

Efter administration afCistanche, overlevede mus under normalt tryk og hypoxi.Cistanche's effekt på evnen af ​​fri-type skade musemodel Senhan var signifikant længere end modelgruppens og også højere end kontrolgruppens, hvilket indikerer, atCistanchekan øge musenes tolerance over for hypoxi. Force (tabel 3)

Tabel 3:Cistanche's musemodel af skader fra frie radikaler

2.4 Indvirkning på MAO-B's vitalitet

Efter inhalation af O var hjernevævets MAO-B-aktivitet i modelgruppen signifikant højere end den for modpartsgruppen, og stigningen i MAO-B-aktiviteten i administrationsgruppen var signifikant hæmmet

Tabel 4: Effekten afCistanchepå aktiviteten af ​​1SB-type monoaminoxidvin (MAO~B) i musemodellen med fri gravskade

2. 5 Indvirkning på SOD-vitalitet

Kemiluminescens-hæmningshastigheden af ​​serum i modelgruppen var signifikant lavere end i de andre grupper, og SOD-aktiviteten var signifikant reduceret. SOD-aktiviteten af ​​lægemiddelgruppen var signifikant øget, og højdosisgruppen var højere end kontrolgruppens (se nedenfor tabel 5）

Tabel 5: Modelserumsuperoxiddismutase (SOD) aktivitet er den højest2.6 Effekt på indholdet af lipidperoxid (ZLPO)

2.6 Lipidperoxid-indholdet (LFO) i plasma, lever og hjernevæv i modelgruppen var signifikant øget, og LPO-indholdet var signifikant reduceret efter administration. Den store dosis og dosisgruppe havde reduceret LPO i hjernevævet til niveauet for kontrolgruppen (tabel 6).

Tabel 6: Effekten af ​​kød Axun på plasma-, lever- og lipidperoxidniveauer (LPO) i en musemodel af frie radikaler

3 Diskussion

Aldring er et positivt fænomen i livets proces. Moderlandets traditionelle medicin har akkumuleret rig erfaring og medicinkilder i anti-aging år. I de senere år har indenlandske forskere fokuseret på at finde effektive anti-aldringsmedicin fra traditionel kinesisk medicin. I øjeblikket ses der i stigende grad på teorien om frie radikaler om kropsaldring. Selvomfrie radikalerdannes i kroppen under normale forhold, er vævscellerne beskyttet på grund af den kontinuerlige fjernelse af SOD og andre anti-oxygen toksicitet enzymsystemer. Oa er en stærk oxidant. , Kan starte den frie radikal-reaktion i kroppen. Overdreven indånding af ilt forårsager generering affrie radikaleri kroppen, hvilket overstiger opfangningsevnen af ​​kroppens anti-tolerance stele-system, hvilket forårsager skade på nukleinsyrer, proteiner, aminosyrer, kulhydrater og lipidforbindelser, og derved ødelægger dannelsen og funktionen af ​​celler og fører til aldring ⑶. Dette eksperiment viser, at efter indånding af ilt7 er musenes fysiske styrke, evne til at holde varmen og tolerance over for hypoxi reduceret, svarende til udførelsen af ​​den fysiologiske funktionsnedgang hos gamle dyr. Det viser, at de unge mus kan forårsage en aldrende model efter at have modtaget d-stimulering.Cistanchehar væsentligt forbedret ændringerne i ovenstående indikatorer.

Superoxidfrie radikalereksisterer i kroppen i kort tid og elimineres hovedsageligt af SOD. Generelt afspejles niveauet af eller ved at måle aktiviteten af ​​SOD. Forskellige antioxidanter i kroppen hos naturligt aldrende mus og mus, der er beskadiget af frie radikaler, er reduceret. Aktiviteten af ​​torv falder, hvilket reducerer evnen til at opfangefrie radikaler, hvilket fører til en stigning i indholdet af lipidperoxider. Aktiviteten af ​​type B monoaminoxidase (MA0-B) i hjernen stiger med alderen. MAOB er den vigtigste kontrol af det aldrende biologiske ur i den centrale hypothalamus Clockwork er tæt forbundet med aldring. ⑴. Aktiviteten af ​​MA0-B i hjernen hos mus i denne eksperimentelle modelgruppe er øget, hvilket viser biokemiske ændringer, der stemmer overens med dem hos aldrende dyr.