Del 1 DsbA-L interagerer med VDAC1 i mitochondrionmedieret tubulær celleapoptose og bidrager til udviklingen af ​​akut nyresygdom

Resumé

1. Baggrund

vi demonstrerede, at disulfidbinding A-oxidoreduktase-lignende protein (DsbA-L) var involveret i udviklingen af ​​nyrefibrose. Den præcise funktion af DsbA-L ved akut nyreskade (AKI) og de involverede mekanismer er dog endnu ikke klarlagt.

2. Metoder

Vi illustrerer DsbA-L interageret med VDAC1 ved co-IP (co-immunpræcipitation) in vitro og Viv og fandt interaktionsdelene af dem ved mutationseksperiment. Ovenstående resultater blev verificeret ved samlokalisering af dem. Derudover konstruerede vi de to modeller af PT-DsbA-L og VDAC1 KO mus for at verificere funktionen af ​​DsbAL og VDAC1 i modeller af VAN, CL, P og I/R-induceret AKI.

3. Fund

PT-DsbA-L-KO-musene viste forbedring af I/R-, VAN- og CLP-induceret AKI-progression via nedregulering af VDAC1. Endelig bekræftede vi disse ændringer i signalmolekyler ved at undersøge HK-2-celler og nyrebiopsier taget fra patienter med iskæmisk eller akut interstitiel nefritis (AIN)-induceret AKI. Mekanistisk interagerede DsbA-L med aminosyrerne 9-13 og 22-27 af VDAC1 i mitokondrierne af BUMPT-celler for at inducere nyrecelleapoptose og mitokondriel skade.

4. Fortolkning

Dette arbejde antydede, at DsbA-L, der er placeret i de proksimale tubulære celler, driver progressionen af ​​AKI ved direkte at opregulere niveauerne af VDAC1. Running Title: The Role of DsbA-L in AKI.

5. Finansiering

National Natural Science Foundation i Kina, et tilskud fra nøgleprojektet i Hunan-provinsens videnskabs- og teknologiinnovation, Institut for Videnskab og Teknologi i Hunan-provinsen Projekt for internationalt samarbejde og udveksling, Changsha Science and Technology Bureau-projekt, Natural Science Foundation i Hunan-provinsen, Fundamental Forskningsmidler til de centrale universiteter ved Central South University, Hunan Provincial Innovation Foundation for Postgraduate China Hunan Provincial Science and Technology Department.

Nøgleord

DsbA-L; VDAC_I; Bax; Cyt-c; AKI

Klik her for at få Cistanche-fordele og for at købe Cistanche-piller

Introduktion

Akut nyreskade (AKI), en ødelæggende klinisk komplikation med høj morbiditet og dødelighed, påvirker millioner af patienter over hele verden(1). AKI induceres normalt af sepsis, nefrotoksiske midler og iskæmi-reperfusionsskade (IRI)(2). Endnu er de molekylære mekanismer, der ligger til grund for AKI, endnu ikke fuldt belyst. Derfor er der ingen effektive behandlingsstrategier tilgængelige for AKI.

Beskadigelse af rørceller har i årtier været anerkendt som en vigtig drivkraft for AKI.3 Efterhånden som forskningen er skredet frem, har et stigende antal forskere identificeret, at mitokondrieskader spiller en nøglerolle i skader på rørceller, og at denne initiale skade er forårsaget af akkumulering af ROS, produktion af cytokiner og cellulær død (herunder både nekrose og apoptose); tilsammen bidrager disse processer alle til AKI.4-6 Selvom en voksende mængde forskning har fokuseret på de mekanismer, der ligger til grund for mitokondriel skade i AKI, er den præcise mekanisme, der er ansvarlig for mitokondriel skade, endnu ikke blevet identificeret.

Disulfid-binding Et oxidoreduktase-lignende protein (DsbAL) blev først identificeret som et mitokondrieprotein i rotteleverceller.13 Tidligere undersøgelser har vist, at DsbA-L forhindrede diæt eller diabetisk nefropati (DN)-induceret fedme, inflammation, insulinresistens eller nyreskade.14-18 Interessant nok fandt vores nylige undersøgelse, at DsbA-L-medieret unilateral ureteral obstruktion (UUO)-induceret nyrefibrose. Rollen og mekanismen af ​​tubulær DsbA-L i AKI er dog stadig fuldstændig ukendt.

I denne undersøgelse resulterede den proksimale tubulære deletion af DsbA-L (PT-DsbA-L-KO) i en musemodel i den bemærkelsesværdige svækkelse af I/R sammen med vancomycin (VAN) - og cecal ligering og punktur (CLP) )-induceret AKI. Konsekvent medierede DsbA-L også I/R, VAN- og LPS-induceret apoptose i mus nyre proksimale tubulære epitelceller (BUMPT). Interessant nok fandt vi, at DsbA-L interagerede med 9-13 og 22 27 regionerne i den spændingsafhængige anionkanal 1 (VDAC1), et nøglemedlem i VDAC-familien af ​​proteiner19 21; disse virkninger blev observeret i både in vivo og in vitro mitokondrielle prøver og humane AKI-prøver. Desuden påviste vi, at PTVDAC1-KO også forbedrede nyrecelleapoptose i både in vitro- og in vivo-modeller af AKI. Samlet viste vi, at DsbA-L interagerede med VDAC1 i mitokondriemedieret tubulær celleapoptose og derfor forårsagede progressionen af ​​AKI.

Cistanche tubulosa

Materialer og metoder

1. Etikerklæring

Undersøgelsen blev godkendt af Review Board for Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina (NO. 2018065), og denne undersøgelse rekrutterede 18 patienter. Alle deltagere før inklusion i undersøgelsen blev rekrutteret med skriftligt informeret samtykke. Alle dyreforsøg overholdt de vejledende principper godkendt af Animal Care Ethics Committee på Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina (NR. 2020310).

2. Antistoffer og reagenser

Anti-COXIV (ab33985, RRID: AB_879754), VDAC1 (ab14734, RRID: AB_443084), and PGC-1a (ab191838, RRID: AB_2721267) antibodies were obtained from Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Anti-Caspase3 (9662, RRID: AB_331439) and cleavedcapase3 (9664, RRID: AB_2070042) antibodies were purchased from Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Anti-Bax (50599-2-Ig, RRID: AB_2061561), Cyt-c (10993-1-AP, RRID: AB_2090467), NRF1 (12482- 1-AP, RRID: AB_2282876), GAPDH (60004-1-Ig, RRID: AB_2107436), and b-tubulin (10094-1-AP, RRID: AB_2210695) antibodies were obtained from Proteintech (Rosemont, IL, USA). The anti-DsbA-L antibody was provided by Dr. Feng Liu(14). All secondary antibodies (MitoTracker Green FM and MitoTracker Red CMXRos) were obtained from Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). The calcium ionophore was purchased from Sigma-Aldrich (Shanghai, China). Antimycin A (>95 procent ren, ab141904) og et Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (ab65320) blev købt fra Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Målsekvensen for mus DsbAL er blevet beskrevet tidligere.22

3. Oprettelse af AKI-modeller ved iskæmisk reperfusion, CLP og VAN

C57BL/6J hanmus (RRID: MGI:5657312) i alderen 8-10 uger blev købt fra Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd. Mus, der udviste proksimal tubuli-specifik DsbA-L eller VDAC1 deletion, blev produceret ved at krydse DsbA-L (flox/flox) mus (leveret af Dr. Feng Liu) eller VDAC1 (flox/flox) mus (opnået fra Shanghai modelorganismer) med PEPCK-Cre mus (leveret af Dr. Volker Haase (University of Pennsylvania, Philadelphia, PA) ) som beskrevet tidligere.22,23 Hanmus (8-10 uger gamle) blev udsat for iskæmi, CLP og VAN nefrotoksisk AKI, som beskrevet tidligere.23 27 For iskæmisk AKI blev den bilaterale nyrearterie kontinuerligt klippet for 28 minutter efterfulgt af reperfusion i 24 timer eller 48 timer. Musenes kropstemperatur blev holdt på ca. 37 grader. For CLP-induceret AKI blev blindtarmen ligeret tæt i en position 1,5 cm fra spidsen. Dette blev efterfulgt af en punktering i 18 h. Til VAN-skade blev musene intraperitonealt injiceret med en enkelt dosis VAN i en dosis på 600 mg/kg i 7 på hinanden følgende dage, som beskrevet tidligere.28,29 Derudover blev C57BL/6-musene injiceret med DsbA-L- eller VDAC1-plasmider eller VDAC1-siRNA (i en dosis på 15 mg/kg) via halevenen to gange om ugen22; saltvand blev brugt som en kontrolinjektion. For hver undersøgelse analyserede vi prøverne sammen for at undgå bias, baseret på de tidligere undersøgelser, og brugte PASS-softwaren til at bestemme prøvestørrelsen(n=6). Vi udelukkede prøven, der døde eller svigtede modeletableringen før endepunktet. De eksperimentelle mus blev grupperet efter tilfældige tal tabel. Efterforskere blev ikke blindet under eksperimentet, men blev blindet under tildelingen, prøveindsamlingen og dataanalysen. Alle dyreforsøg fulgte de vejledende principper godkendt af Animal Care Ethics Committee på Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina. Musene blev anbragt i et 12-t lys/mørkt miljø med fri adgang til en standard gnaverdiæt og vand.

Herba Cistanche

4. Cellekultur og en iskæmi-reperfusionsmodel

BUMPT-celler opnået fra Dr. Wilfred Lieberthal (Boston University School of Medicine) eller HK{{0}}-celler opnået fra Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech blev dyrket med DMEM (Gibco, 11965092) tilsat 10 procent FBS (Gibco, 10100147) og 1 procent Penicillin-Streptomycin (Gibco, 15140163) ved 37 grader i 5 procent CO2. Til den iskæmiske cellemodel blev BUMPTs-celler behandlet med 10 mM antimycin A (en inhibitor af mitokondriekompleks III, Abcam, ab141904) og 1,5 mM calciumionophor (Sigma, A23187) i Hanks' Balanced Salt Solution (Hyclone, SH32030.03030) for 2 timer.30 Vi erstattede derefter HBSS med DMEM-medium i 0, 2 og 4 timer til reperfusionsstadiet. Celleapoptose blev detekteret ved morfologi og immunblotting for apoptotiske indikatorer, herunder spaltet-caspase3, Bax og Cyt-c. Adskillige plasmider blev skabt og transficeret ind i celler ved lipofektion: DsbA-L, HA-VDAC1-1-25, HA-VDAC1-26-366, HA-VDAC1-fuld længde, HA-VDAC{{33 }}D9-13,22-27, HAVDAC1-D39-45,55-57 og HA- VDAC1-D9-13, 22-27 D39-45,55-57 og siRNA for DsbA-L og VDAC1. Seks til otte timer efter transfektion blev dyrkningsmediet erstattet med DMEM. Sekvenserne af DsbA-L siRNA og VDAC1 siRNA for mus var henholdsvis 50 - GCAUGGAGCAACCAGAGAUTT -30 og 50 - CCAGAGCAACTTCGCAGTT -30; sekvenserne for det kodede NC siRNA var 50 -UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-30. Sekvenserne af DsbA-L siRNA og VDAC1 siRNA for mennesker var henholdsvis 50 - UCAUUUGCCAUGUAUAGUCCU-30 og 50 -UAUUAAGCCAAAUCCAUAGCC -30; sekvenserne for det kodede NC siRNA var 50 -AACCACUCAACUUUUUCC CAA -30. IR-modellen blev derefter induceret, når celletætheden nåede 90 procent.

5. Flowcytometri

Flowcytometrien blev betjent i overensstemmelse med instruktionerne fra FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit (BD, 556547). BUMPT eller HK-2 Celler med forskellige behandlinger blev opsamlet under anvendelse af trypsin uden EDTA og vasket tre gange med PBS efterfulgt af FITC i 15 minutter og PI i 5 minutter ved stuetemperatur og til sidst undersøgt ved flowcytometri.

6. AKI-patienter og prøveindsamling

Protokollen blev godkendt af Review Board for Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina. Denne undersøgelse rekrutterede 18 patienter, herunder 12 mænd og 6 kvinder. Rekrutteringsprincippet var baseret på nyrebiopsi. Patientoplysninger er suppleret i tabel 1. Nyrebiopsiprøverne blev opnået fra patienter, der lever med minimale forandringssygdomme (MCD) (n=6) og iskæmisk eller akut interstitiel nefritis (AIN)-induceret AKI (n{{6} }). Vi erklærer, at alle undersøgelser overholder alle relevante etiske regler for forskning med menneskelige deltagere og er udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringens principper, og at undersøgelsen er i overensstemmelse med vejledningen fra Ministeriet for Videnskab og Teknologi for gennemgang og godkendelse af Menneskelige genetiske ressourcer. Inklusions- og eksklusionskriterierne for MCD blev beskrevet i vores tidligere undersøgelse.23 For IR: Inklusionskriterier:1 Biopsi for iskæmi-reperfusionspatienter,2 Alder under 75 år; Eksklusionskriterier1: udelukker patienter med tumorer fundet i postoperative lægeundersøgelser,2 udelukker patienter med henholdsvis diabetes, gigt, hypertension, urintuberkulose eller infektion i anamnesen. For AIN: Inklusionskriterier1: Klinisk diagnosticeret som akut interstitiel nefritis2 Biopsibekræftede AIN-patienter,3 Alder under 75 år; Eksklusionskriterier1: Udelukke patienter med unormalt blodkreatinin før indlæggelse,2 udelukke patienter med tidligere diabetes, gigt, hypertension, urintuberkulose eller infektion. Disse prøver blev derefter brugt til farvning af HE, TUNEL og immunhistokemi samt immunpræcipitation (IP) og immunblotting.

7. Immunpræcipitation

Cytoplasmaet og mitokondrierne fra BUMPT-celler og nyrevæv fra mus og AKI-patienter blev adskilt under anvendelse af Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (Abcam, ab65320); sættet blev brugt i henhold til producentens instruktioner. Antistofferne (DsbA-L, VDAC1, HA eller IgG) blev bundet til de magnetiske perler. Dernæst tilføjede vi mitokondrier/cytoplasma-lysatet og inkuberede det i tre timer. Derefter blev blandingen elueret og undersøgt for ekspression af associerede markører ved immunblotting.

8. Relativ kvantitativ PCR (qPCR)

RNA blev ekstraheret fra BUMPT-celler eller nyrevæv med Trizol-reagenset (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). RNA blev derefter revers-transkripteret til første-strengs cDNA under anvendelse af Prime Script RT Reagent kit og gDNA Eraser (TaKaRa, RR037A), som tidligere beskrevet.31'34 Dernæst brugte vi cDNA'et som en skabelon med TB-grøn (TaKaRa, RR820A) og en Light cycler 96 (Roche) med følgende primerpar: DsbA-L: 5 - AAATATGGGGCCTT TGGGCT-3'(fremad) og 5'- TAGCAACTCCAAGCGGTCA G-3'(baglæns); og GAPDH: 5'-GGTCTCCTCTGACTTCACA-3'(fremad) og 5'-GTGAGGGTC TCTCTCTTCCT-3'(baglæns); PGC- 1a: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCTTTCC-3 (fremad) og 5'-CTCCCGCTTCTCGTGCTCTTTG-3'(baglæns); NrF1:5'-TCTGCTGTGGCTGATGGAGA GG-3'(fremad) og NrF1:5'-GATGCTTGCGTCGTCTGGATGG-3 (omvendt);

9. BUN og kreatinin påvisning

Påvisningen af ​​BUN og kreatinin blev udført i henhold til protokollen for BUN (Urea Nitrogen Content Assay Kit Beijing Boxbio Science & Technology Co, Ltd.) og Creatinine Assay Kit (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kina).

10. HE-farvning, TUNEL-farvning, immunkemi, immunfluorescens og immunblotting

Nyrevæv blev indlejret i paraffin og derefter skåret i sektioner til forskellige typer farvning, som beskrevet tidligere.26,35 Histologi blev vurderet ved hæmatoxylin- og eosinfarvning. Kriterierne, der blev brugt til at score renal tubulær skade, er beskrevet tidligere.23 TUNEL-farvning blev brugt til at evaluere apoptose i nyrecellerne. Andelen (procent) af TUNEL-positive celler i 10-20 mikroskopiske felter pr. vævssnit blev brugt som en kvantitativ indikator for apoptose.26 Til immunokemifarvning blev vævssnit inkuberet natten over ved 4 grader C med et specifikt primært antistof ( DsbA-L 1:200 eller VDAC1 1:100). Den følgende morgen blev sektionerne inkuberet med et sekundært antistof i 30 minutter ved 37 grader og derefter reageret med DAB i 5-10 min. Til immunfluorescensfarvning blev sektionerne inkuberet med et specifikt primært antistof (DsbA-L 1:200, VDAC1 1:100) natten over ved 4 grader efterfulgt af et sekundært fluorescerende antistof i 1 time ved 37 grader i mørke. DAPI blev derefter tilsat i 3-5 min., og snittene blev observeret ved fluorescensmikroskopi. Mitokondriel farvning blev udført ved en standardprotokol. Proteinlysater fra BUMPT-celler eller nyrer blev høstet og derefter centrifugeret for at opsamle supernatanten indeholdende proteinerne. Supernatanten blev underkastet SDS-PAGE og derefter overført til en PVDF-membran. Membranerne blev derefter inkuberet med et primært antistof natten over ved 4 grader efterfulgt af et sekundært antistof i 1 time ved stuetemperatur. Koncentrationen af ​​antiCOXIV, VDAC1, PGC-1a, Bax, Cyt-c, NRF1, GAPDH og b-tubulin er 1:1000. Koncentrationen af ​​anti-Caspase3 og spaltet-capase3 er 1:2000.

Cistanche tillæg

11. Statistik

Alle data blev præsenteret som middel § SD. To-halede Student t-test blev brugt til to gruppesammenligninger. Envejs ANOVA efterfulgt af Tukeys post hoc analyse blev brugt til flere sammenligninger. Kruskal Walls-testen blev brugt til data med ikke-normal fordeling. Graph Pad-softwaren 8.0 blev brugt til at analysere dataene og P<0.05 was considered statistically significant.

12. Finansieringskildens rolle

Finansierne var ikke involveret i undersøgelsens design, dataindsamling, analyse, fortolkning eller skrivning af manuskriptet.

Referencer

1 Zuk A, Bonventre JV. Akut nyreskade. Annu Rev Med. 2016;67:293-307.

2 Zhou D, Tan RJ, Lin L, Zhou L, Liu Y. Aktivering af hepatocytvækstfaktorreceptor, c-met, i nyretubuli er påkrævet for renobeskyttelse efter akut nyreskade. Nyre Int. 2013;84(3):509-520.

3 O'Neal JB, Shaw AD, Billings FT. Akut nyreskade efter hjertekirurgi: nuværende forståelse og fremtidige retninger. Crit Care. 2016;20(1):187.

4 Ishimoto Y, Inagi R. Mitokondrier: et terapeutisk mål ved akut nyreskade. Nephrol skivetransplantation. 2016;31(7):1062-1069. officiel udgivelse af European Dialysis and Transplant Association - European Renal Association.

5 Linkermann A, Chen G, Dong G, Kunzendorf U, Krautwald S, Dong Z. Reguleret celledød i AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(12):2689-2701.

6 Agarwal A, Dong Z, Harris R, et al. Cellulære og molekylære mekanismer af AKI. J Am Soc Nephrol. 2016;27(5):1288-1299.

7 Morigi M, Perico L, Rota C, et al. Sirtuin 3-afhængige mitokondrielle dynamiske forbedringer beskytter mod akut nyreskade. J Clin Investig. 2015;125(2):715–726.

8 Yu X, Xu M, Meng X, et al. Nuklear receptor PXR retter sig mod AKR1B7 for at beskytte mitokondriel metabolisme og nyrefunktion i AKI. Sci Transl Med. 2020;12(543):7591-7605.

9 Stoppe C, Averdunk L, Goetzenich A, et al. Den beskyttende rolle af makrofag-migreringshæmmende faktor ved akut nyreskade efter hjertekirurgi. Sci Transl Med. 2018;10(441):4886-4898.

10 Wei Q, Sun H, Song S, et al. MicroRNA-668 undertrykker MTP18 for at bevare mitokondriel dynamik ved iskæmisk akut nyreskade. J Clin Investig. 2018;128(12):5448–5464.

11 Tran M, Tam D, Bardia A, et al. PGC-1alfa fremmer restitution efter akut nyreskade under systemisk inflammation hos mus. J Clin Investig. 2011;121(10):4003-4014.

12 Lan R, Geng H, Singha PK, et al. Mitokondriel patologi og glykolytisk skift under proksimal tubuliatrofi efter iskæmisk AKI. J Am Soc Nephrol. 2016;27(11):3356-3367.

13 Harris JM, Meyer DJ, Coles B, Ketterer B. En ny glutathiontransferase (13-13) isoleret fra matrixen af ​​rottelevermitokondrier har strukturel lighed med klasse theta-enzymer. Biochem J. 1991;278(Pt 1):137-141.

14 Bai J, Cervantes C, Liu J, et al. DsbA-L forhindrer fedme-induceret inflammation og insulinresistens ved at undertrykke den mtDNA-frigivelsesaktiverede cGAS-cGAMP-STING-vej. Proc Natl Acad Sci USA. 2017;114(46):12196-12201.

15 Chen H, Bai J, Dong F, et al. Hepatisk DsbA-L beskytter mus mod diæt-induceret hepatosteatose og insulinresistens. FASEB J. 2017;31(6):2314–2326.

16 Liu M, Xiang R, Wilk SA, et al. Fedtspecifik DsbA-L-overekspression fremmer adiponectin-multimerisering og beskytter mus mod diæt-induceret fedme og insulinresistens. Diabetes. 2012;61(11):2776-2786.

17 Chen X, Han Y, Gao P, et al. Disulfid-binding Et oxidoreduktase-lignende protein beskytter mod ektopisk fedtaflejring og lipid-relateret nyreskade ved diabetisk nefropati. Nyre Int. 2019;95(4):880–895.

18 Dai XG, Xu W, Li T, et al. Involvering af fosfatase og tensin-homolog-induceret formodet kinase 1-Parkin-medieret mitofagi ved septisk akut nyreskade. Chin Med J (eng.). 2019;132(19):2340-2347.

19 Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R. VDAC1, mitokondriel dysfunktion og Alzheimers sygdom. Pharmacol Res. 2018;131:87-101.

20 Geisler S, Holmstrom KM, Skujat D, et al. PINK1/Parkin-medieret mitofagi er afhængig af VDAC1 og p62/SQSTM1. Nat Cell Biol. 2010;12(2):119-131.

21 Lipper CH, Stofleth JT, Bai F, et al. Redox-afhængig gating af VDAC af mitoNEET. Proc Natl Acad Sci USA. 2019;116(40):19924–19929.

22 Li X, Pan J, Li H, et al. DsbA-L-medieret renal tubulointerstitiel fibrose i UUO-mus. Nat Commun. 2020;11(1):4467.

23 Zhang D, Liu Y, Wei Q, et al. Tubular p53 regulerer flere gener for at mediere AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(10):2278-2289.

24 Xu X, Wang J, Yang R, Dong Z, Zhang D. Genetisk eller farmakologisk hæmning af EGFR forbedrer sepsis-induceret AKI. Oncotarget. 2017;8(53):91577–91592.

25 Wang J, Li H, Qiu S, Dong Z, Xiang X, Zhang D. MBD2 opregulerer miR-301a-5p for at inducere nyrecelleapoptose under vancomycin-induceret AKI. Celledød Dis. 2017;8(10):e3120.

26 Xu L, Li X, Zhang F, Wu L, Dong Z, Zhang D. EGFR driver progressionen af ​​AKI til CKD gennem HIPK2-overekspression. Teranostik. 2019;9(9):2712-2726.

27 Zhang P, Yi L, Qu S, et al. Biomarkøren TCONS_00016233 driver septisk AKI ved at målrette mod miR-22-3p/AIFM1-signaleringsaksen. Mol Ther Nukleinsyrer. 2020;19:1027-1042.

28 Chen J, Wang J, Li H, Wang S, Xiang X, Zhang D. p53 aktiverer miR-192-5p for at mediere vancomycin-induceret AKI. Sci Rep. 2016;6:38868.

29 Xu X, Pan J, Li H, et al. Atg7 medierer renal tubulær celle apoptose i vancomycin nefrotoksicitet gennem aktivering af PKC-delta. FASEB J. 2019;33(3):4513–4524.

30 Lee HT, Emala CW. Forkonditionering og adenosin beskytter humane proksimale tubuliceller i en in vitro-model af iskæmisk skade. J Am Soc Nephrol. 2002;13(11):2753-2761.

31 Ge Y, Wang J, Wu D, et al. lncRNA NR_038323 Undertrykker nyrefibrose ved diabetisk nefropati ved at målrette miR-324-3p/DUSP1-aksen. Mol Ther Nukleinsyrer. 2019;17:741-753.

32 Wang J, Pan J, Li H, et al. lncRNA ZEB1-AS1 blev undertrykt af p53 for nyrefibrose ved diabetisk nefropati. Mol Ther Nukleinsyrer. 2018;12:741-750.

33 Song YX, Sun JX, Zhao JH, et al. Ikke-kodende RNA'er deltager i det regulatoriske netværk af CLDN4 via ceRNA-medieret miRNA-unddragelse. Nat Commun. 2017;8(1):289.

34 Zhu M, Liu J, Xiao J, et al. Lnc-mg er et langt ikke-kodende RNA, der fremmer myogenese. Nat Commun. 2017;8:14718.

35 Kishi S, Brooks CR, Taguchi K, et al. Proximal tubulus ATR regulerer DNA-reparation for at forhindre maladaptive nyreskaderesponser. J Clin Investig. 2019;129(11):4797-4816.

Xiaozhou Li,a,b,1 Jian Pan,a,b,1 Huiling Li,c Guangdi Li,g Bohao Liu,a,b Xianming Tang,a,b Xiangfeng Liu,f Zhibiao He,a,b Zhenyu Peng,a ,b Hongliang Zhang,a,b Luxiang Wang,a,b Yijian Li,d Xudong Xiang,a,b Xiangping Chai,a,b Yunchang Yuan,e Peilin Zheng,h og Dongshan Zhang a,b *

en afdeling for akutmedicin, Folkerepublikken Kina

b Emergency Medicine and Difficult Diseases Institute, Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan 410011, Folkerepublikken Kina

c Oftalmologisk afdeling, Folkerepublikken Kina

d Urinkirurgisk afdeling, Folkerepublikken Kina

e Department of Chest Surgery, Folkerepublikken Kina

f Department of General Surgery, Second Xiangya Hospital, Folkerepublikken Kina

g Institut for Folkesundhed, Central South University, Changsha, Hunan, Folkerepublikken Kina

h Department of Endocrinology, Shenzhen People's Hospital, The Second Clinical Medical College ved Jinan University, The First Affiliated Hospital of Southern University of Science and Technology, Shenzhen, Folkerepublikken Kina

1 Xiaozhou Li og Jian Pan bidrog ligeligt til denne undersøgelse