DEL 2 Antioxidation og cytobeskyttelse af akteosid og dets derivater: sammenligning og mekanistisk kemi
Mar 08, 2022
Del 2 Hvordan beskytter Cistanche Acteoside antioxidant celler?
Klik her til del 1
For mere information kontakt venligst:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola har mange effekter, klik her for at vide mere
3. Diskussion
Antioxidantvirkningen af naturlige phenolforbindelser er kendt for at være involveret i elektronoverførsel (ET) [18,19]. Nogle ET-baserede metalreducerende assays er således blevet brugt i vid udstrækning til at vurdere antioxidantniveauer af phenoler, såsom FRAP- og CUPRAC-assays. FRAP-assay-retningslinjerne skal opfyldes med en pH-værdi på mindre end 3,6. Et sådant surt miljø har med succes undertrykt H plus ionisering fra phenoler; således betragtes FRAP-analysen som en ren ET-proces [20,21]. Effektiviteten afakteosidog dets derivater i FRAP-assayet indebærer, at når acteosid og dets derivater fungerer som antioxidanter, kan de bruge ET-vejen til at udøve deres antioxidantvirkning.
Desuden udførte vi også et CUPRAC-assay i en pH 7,4 buffer. Som det ses i Suppl. 1,akteosidog dets derivater dosisafhængigt øgede deres Cu2 plus-reducerende effektprocenter, hvilket indikerer, at de kunne forblive ET-potentiale ved fysiologisk pH. Imidlertid faldt deres ET potentialer i følgende rækkefølge:akteosid> forsythosid B > poliumosid (tabel 1). Denne dynamik tyder klart på, at apiosyldel i forsythosid B og rhamnosyldel i poliumosid sænkede ET-potentialet.
For at teste muligheden for, at ET opstår under deres radikal-fjernende processer, blev en oxygen-centreret fri radikal PTIO・ introduceret i undersøgelsen. Beviser for cyklisk voltammetri afslørede, at PTIO・-opfangning under pH 5.0 er en enkelt elektron-redox-reaktion. Den observation, atakteosidog dets derivater effektivt kunne opfange PTIO・ radikalet ved pH 4,5, tyder på muligheden for ET under deres radikalopfangende processer. Dette fund understøtter naturligvis yderligere de førnævnte resultater fra FRAP- og CUPRAC-assays, og tidligere resultater om, at en donerende elektron (e) er et træk ved phenoliske antioxidanter [23].
Ved fysiologisk pH 7,4 er det PTIO・-opfangende essay imidlertid ikke blot en ET-vej, men inkluderer også en proton-(H plus ) overføringsvej. Under processen er PTIO・ blevet foreslået at acceptere Hplusfra phenolics til at producere produkttoppen ([PTIO-H]plus). Fordi Hplus-overførsel er altid ledsaget af ET i trinvise eller synkrone mekanismer [24], det realistiske (eller endelige) produkt er et [PTIO-H] molekyle [22]. PTIO・-opfangningen ved pH 7,4 (Suppl. 1) indebærer, atakteosidog dets derivater har også et H plus -overførselspotentiale. IC50-værdierne (tabel 1) indikerede, at den relative Hplus-overførselspotentialer var i faldende rækkefølge afakteosid>forsythoside B > poliumosid. Det er klart, at apiosyl- og rhamnosyl-delene også svækkede Hplus-overførselspotentiale under antioxidantprocessen.
Som tidligere diskuteret, under antioxidantprocessen af phenoler, er ET normalt ledsaget af proton (Hplus) overførsel til dannelse af adskillige antioxidantmekanismer [24], såsom hydrogen-atom overførsel (HAT) [23,25-27], sekventiel elektron-proton overførsel (SEPT) [26,27], sekventiel protontab enkelt-elektron overførsel (SPLET) [26] og protonkoblet elektronoverførsel (PCET) [24-26,28]. For eksempel har ABTS plus • -opfangning, en reaktion domineret af enkelt-elektronoverførsel (SET) [29], også vist sig at være påvirket af H plus niveauer for nylig [30]. ABTS plus • -scavenging er derfor et multi-pathway-baseret antioxidantassay [21,31]. Det faktum, atakteosidog dets derivater kunne opfange ABTS plus ・ radikaler indikerer, at deres antioxidantvirkning også kan medieres via multi-pathways. Denne hypotese bekræftes yderligere af beviserne fra DPPH・-opfangende assay, en reaktion omfattende HAT, ET, SEPT og PCET multiple pathways [26,32]. Men den kvantitative analyse baseret IC50værdier (tabel 1) viste, at i multi-pathway-baseret ABTS plus --scavenging og DPPH*-scavenging aspekter,akteosidvar overlegen i forhold til dets tilsvarende forsythoside B og rhamnoside poliumosid. Det kan således udledes, at apiol- og rhamnosyl-dele til sidst hindrer multi-pathway potentialer (især ET og Hplus-overførsel) under fri-radikal-opfangningsprocessen.
Som bemærket af forfatterne og andre [14,26] kan der også forekomme en RAF-reaktion under antioxidantprocessen. For at verificere RAF-muligheden blev tre phenylpropanoidglykosider sammen med koffeinsyre imidlertid undersøgt ved hjælp af UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS-analyse. Koffeinsyre viste sig at give et dimerprodukt, mens tre phenylpropanoidglycosider ikke producerede nogen top af RAF-produkt. Dette fund tyder klart på, at tre phenylpropanoidglycosider ikke kan gennemgå RAF-vejen for at udøve deres antioxidantvirkning. Da tre phenylpropanoidglycosider kan betragtes som estere af koffeinsyre (figur 1), indikerer en sådan forskel mellem koffeinsyre og koffeinsyreestere også, at en enorm del kan hindre dannelsen af RAF.
Samlet set fra et fri-radikal-fjernende aspekt,akteosidog dets derivater kan gennemgå flere veje for at udøve deres antioxidantvirkning. Disse antioxidantveje er i det mindste involveret i ET og H plus -overførsel (men ikke RAF). Vores resultater understøttes delvist af den teoretiske undersøgelse, derakteosidkunne udøve antioxidantvirkning via SPLET-vejen. I processen kan acteosid først deprotonere (Hplus-overførsel) for at give anion. Deprotoneringen menes at forekomme i katekoldelene med svag surhed. Efterfølgende donerede anionen elektroner for at danne phenoxyradikalform [33]. Phenoxyradikaler med pn-konjugation er dog stabile til en vis grad. I denne henseende er der naturligvis behov for yderligere eksperimentelt arbejde i fremtiden.
Det er værd at nævne, at cellulært oxidativt stress også kan stamme fra overgangsmetaller (især Fe2 plus). Fe2 plusion kan imidlertid transformere H2O2molekyle til de mest skadelige •OH-radikaler via Fenton-reaktionen (Fe2plus plus H2O2 T Fe3plus plus ・OH plus OH-). Derfor vil dæmpning af Fe2plus-niveauer kan effektivt hæmme ・OH-radikaler for at frigive cellulært oxidativt stress. Faktisk er jernchelatisering af naturlige phenoliske antioxidanter nu blevet udviklet til en effektiv terapi for nogle oxidative stress-sygdomme [34,35].
I denne undersøgelse blev acteosid og dets derivater foreslået som effektiv Fe2 plus-chelatorer ved ændringerne i spektroskopi og opløsningsfarver (figur 2). Ikke desto mindre er acteosid ringere end de to glucosider i chelaterende Fe2 plusog forsythosid B med apiosyldel er ringere end poliumosid med rhamnosyldel. Baseret på sammenligningen af deres foretrukne konformationer (figur 1, til højre), foreslås det, at apiosyl (eller rhamnosyl) del kan hjælpe hovedliganden (phenylpropanoid gruppe) i chelaterende Fe2 plus. En sådan synergistisk effekt styrker utvivlsomt Fe2 plus-chelaterende evne og forstørrer UV-vis toppe. Imidlertid er rhamnosyl mere effektiv end apiosyl i sin Fe2 plus-chelaterende evne. Forskellen kan tilskrives det faktum, at rhamnosyl forekommer i en exocyklisk form (dvs. aL-rhamnopyranosyl), mens apiosyl er i en pentacyklisk form (dvs. pD-apiofuransyl). En exocyklisk form er kendt for at være større og mere stabil. Derfor er exocyklisk rhamnosyl mere effektiv sammenlignet med pentacyklisk apiosyl i dets Fe2 plus-chelaterende evne.
For at teste, om acteosid og dets derivater kan opfange ROS, udførte vi et pyrogallol-autoxidationsassay. Som det ses i Suppl. 1, kunne alle effektivt opfange det radikale, en typisk ROS, der forekommer i celler. Imidlertid faldt den relative bioaktivitet i rækkefølgen poliumosid > forsythoside B >akteosid. Denne rækkefølge er også parallel med den af de cytobeskyttende virkninger (tabel 2). Dette fund indikerer, at den generelle virkning af rhamnosyl-del eller apiosyl-del er at øge ROS-fjernende eller cytobeskyttende virkninger.
4. Materialer og metoder
4.1. Kemikalier og dyr
Acteosid (CAS-nummer: 61276-17-3, 97 procent), forsythosid B (CAS-nummer: 81525-13-5,97 procent) blev opnået fra BioBioPha (Kunming, Kina, Suppl. 3). Poliumosid (CAS-nummer: 94079-81-9, 97 procent ) blev isoleret af vores team fra den traditionelle kinesiske urtCallicarpa periHT Chang (Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetramethlychroman-2-carboxylsyre (Trolox), 2,9-dimethyl{{ 9}},10-phenanthrolin (neocuproin), 2,4,6-tripyridyltriazin (TPTZ) og pyrogallol blev købt fra Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Shanghai, Kina). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-ethylbenzen-thiazolin-6-sulfonsyrediammoniumsalt)] blev opnået fra Amresco Chemical Co. (Solon, OH, USA). PTIO・radikal blev købt fra TCI Development Co., Ltd. (Shanghai, Kina). Koffeinsyre blev købt fra National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products (Beijing, Kina). Dulbeccos modificerede Eagle's medium (DMEM), føtalt bovint serum (FBS) og trypsin blev købt fra Gibco (Grand Island, NY, USA).AnnexinV/propidiumiodid (PI) assaykit blev købt fra Invitrogen (Carlsbad, CA, USA) Alle andre reagenser var af analytisk kvalitet.
Sprague-Dawley (SD) rotter på 4 uger blev opnået fra dyrecentret ved Guangzhou University of Chinese Medicine. Protokollen for dette eksperiment blev udført under tilsyn af den institutionelle dyreetiske komité i Guangzhou University of Chinese (godkendelsesnummer 20170306A).
4.2. Metal-reducerende analyser (FRAP& CUPRAC)
Metalreducerende assays inkluderer Fe3 plus-reducerende effekt assay og Cu2 plus-reducerende effekt assay. Fe3 plus-reducerende assay blev etableret af Benzie og Strain og er formelt navngivet FRAP [20]. Den eksperimentelle protokol for dette assay blev beskrevet i en tidligere rapport [9]. Kort fortalt blev FRAP-reagenset fremstillet frisk ved at blande 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl3,og {{0}},25 M acetatbuffer i et forhold på 1:1:10 ved pH 3,6. Testprøven (x=4-20 L, 0,05 mg/ml) blev tilsat til (20 - x) 95 procent ethanol efterfulgt af 80 RL FRAP-reagens. Efter en 30- min inkubation ved omgivelsestemperatur blev absorbansen målt ved 595 nm ved hjælp af en mikropladelæser (Multiskan FC, Thermo Scientific, Shanghai, Kina). Den relative reduktionskraft af prøven blev beregnet ved hjælp af følgende formel:
hvor enmaxvar den maksimale absorbans af reaktionsblandingen med prøven, og Aminer den mindste absorbans i testen. A er absorbansen af prøven.
Cu2 plus-reducerende kraft kan også karakterisere antioxidantniveauet og kaldes derfor CUPRAC. Denne analyse blev udført i henhold til en tidligere offentliggjort metode [36]. Kort fortalt, 12 RL CuSOq vandig opløsning (10 mmol/L), 12 RL ethanolisk neocuproinopløsning (7,5 mmol/L) og (75 — x) RL CH3COONH4bufferopløsning ({{0}},1 mol/L, pH 7,5) blev tilsat til brønde med forskellige volumener prøve (0,05 mg/ml, 4-20 |^L). Absorbansen ved 450 nm efter 30 minutter blev målt under anvendelse af den førnævnte mikropladelæser. Den relative CUPRAC-effekt blev beregnet ved hjælp af formlen for FRAP. ENmaxvar den maksimale absorbans af reaktionsblandingen med prøven, og Aminer den mindste absorbans i testen. A er absorbansen af prøven.
4.3. PTI0・-Scavenging Assay
PTIO*-fjernende assays (ved pH 4,5 eller pH 7,4) blev udført baseret på vores metode [16]. Kort fortalt blev testprøveopløsningen (x=0-20 ^L, 1 mg/mL for pH 4,5 og {{10}},5 mg/mL for pH 7,4) tilsat til (20 — x) rL 95 procent ethanol, efterfulgt af 80 RL af en vandig PTIO*-opløsning. Den vandige PTIO*-opløsning blev fremstillet under anvendelse af en phosphat-smøropløsning (0,1 mM, pH 4,5 eller pH 7,4). Blandingen blev holdt ved 37 grader i 2 timer, og absorbansen blev derefter målt ved 560 nm under anvendelse af den førnævnte mikropladelæser. PTIO*-hæmningsprocenten blev beregnet som følger:
hvor A-grad er absorbansen af kontrollen uden prøven, og A er absorbansen af reaktionsblandingen med prøven.
4.4. ABTSplus*-Scavenging og DPPH*-Scavenging Assays
ABTS*plus-fjernende aktivitet blev evalueret i henhold til metoden [37]. ABTS plus * blev fremstillet ved at blande 0,2 mL ABTS diammoniumsalt (7,4 mmol/L) med 0,2 mL kaliumpersulfat (2,6 mmol/L). Blandingen blev holdt i mørke ved stuetemperatur i 12 timer for at tillade fuldførelse af radikalgenereringen, før den blev fortyndet med destilleret vand (i et forhold på ca. 1:20), således at dens absorbans ved 734 nm var { {16}}.35 土 0.01 ved hjælp af den førnævnte mikropladelæser. For at bestemme renseaktiviteten blev testprøven (x=4-20 RL, 0,05 mg/mL) tilsat til (20 — x) RL destilleret vand efterfulgt af 80 RL ABTS plus *-reagens, og absorbansen ved 734 nm blev målt 3 minutter efter indledende blanding under anvendelse af destilleret vand som blindprøve.
DPPH* radikal-fjernende aktivitet blev bestemt som tidligere beskrevet [18]. Kort fortalt blev 75 RL DPPH*-opløsning (0,1 rM) blandet med de angivne koncentrationer af prøven (0,025 mg/ml, 5-25 RL) opløst i methanol. Blandingen blev holdt ved stuetemperatur i 30 minutter, og absorbansen blev målt ved 519 nm under anvendelse af den førnævnte mikropladelæser.
Procentdelene af ABTS plus •-fjernende aktivitet og DPPH*-fjernende aktivitet blev beregnet baseret på formlen præsenteret i afsnit 4.3.
4.5. UPLC—ESI—Q-TOF—MS/MS Analyse af PPH* Reaktionsprodukter
Denne metode var baseret på vores tidligere undersøgelse [25]. Methanolopløsningen af acteosid blev blandet med en opløsning af DPPH*-radikaler i methanol i et molforhold på 1:2, og den resulterende blanding blev inkuberet i 24 timer ved stuetemperatur. Produktblandingen blev derefter filtreret gennem et 0.22-Rm-filter og analyseret ved hjælp af et UPLC-system udstyret med en C18-søjle (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, USA). Den mobile fase blev brugt til eluering af systemet og bestod af en blanding af methanol (fase A) og vand (fase B). Søjlen blev elueret ved en strømningshastighed på 0,3 ml/min med følgende gradientelueringsprogram: 0-10 min, 60-100 procent A; 10-15 min, 100 procent A. Prøveindsprøjtningsvolumenet blev indstillet til 1 RL til adskillelse af de forskellige komponenter. ESI-Q-TOF-MS/MS-analyse blev udført under anvendelse af en Triple TOF 5600plusMassespektrometer (AB SCIEX, Framingham, MA, USA) udstyret med en ESI-kilde, som blev kørt i negativ ioniseringstilstand. Scanningsområdet blev indstillet til 100-2000 Da. Systemet blev kørt med følgende parametre: ionsprayspænding, —4500 V; ionkildevarmer, 550 grader C; gardingas (CUR, N2), 30 psi; forstøvergas (GS1, luft), 50 psi; Tis gas (GS2, Air), 50 psi. Declustering potentialet (DP) blev sat til -100 V, hvorimod kollisionsenergien (CE) blev sat til -40 V med en kollisionsenergispredning (CES) på 20 V. RAF-produkterne
blev kvantificeret ved at ekstrahere den tilsvarende molekylformel fra totalionkromatogrammet (Suppl. 2).
Det førnævnte eksperiment blev gentaget under anvendelse af forsythoside B, podiumside og koffeinsyre. Den tilsvarendem/ztoppe blev ekstraheret fra den tilsvarende molekylformel fra totalionkromatogrammet (Suppl. 2).
4.6. UV-Vis-Spectra Analyse af Fe2 plus- Chelaterende produkter
Fe2 plus-chelaterende reaktionsprodukter af acteosid-Fe2 plusblev evalueret ved hjælp af UV-Vis-spektroskopi [13]. Til eksperimentet blev 300 af en methanolisk opløsning af acteosid (0,24 mM) tilsat til 700 rL af en vandig opløsning af FeCl? 4H20 (168 mM). Opløsningen blev derefter blandet kraftigt. Efterfølgende blev den resulterende blanding scannet ved hjælp af et UV-Vis spektrofotometer efter en time (Unico 2600A, Shanghai, Kina) fra 200-850 nm.
Det førnævnte eksperiment blev gentaget under anvendelse af forsythoside B, eller podium side, i stedet for acteosid.
4.7. Pyrogallol autooxidationsanalyse for superoxidanion (•O2~) Oprydning
Måling af superoxidanion (・.{{0}}) rensende aktivitet var baseret på vores metode [17]. Kort fortalt blev prøven opløst i ethanol ved 1 mg/ml. Prøveopløsningen (x rL) blev blandet med Tris-HCl-buffer (980 - x rL, 0,05 M, pH 7,4) indeholdende EDTA (1 mM). Når 20 RL pyrogallol (60 mM i 1 mM HCI) blev tilsat, blev blandingen rystet ved stuetemperatur med det samme. Absorbansen ved 325 nm af blandingen blev målt (Unico 2100, Shanghai, Kina) mod Tris-HCl-bufferen som en blindprøve hvert 30. sekund i 5 min. Opfangningsevnen blev beregnet som følger:
4.8. Cytobeskyttende effekt mod oxidativt stressede bmMSC'er (MTT-assay)
BmMSC'erne blev dyrket i henhold til vores tidligere rapporter [38] med små modifikationer. Kort fortalt blev knoglemarv opnået fra lårbenet og skinnebenet på en rotte. Marvprøverne blev fortyndet med DMEM (lav glucose) indeholdende 1 0 procent FBS. BmMSC'erne blev fremstillet ved gradientcentrifugering ved 900 g i 30 minutter ved 1,073 g/ml Percoll. De præparerede celler blev løsnet ved behandling med 0,25 procent trypsin og ført over i kulturkolber ved 1 x 104/cm2. BmMSC'erne ved passage 3 blev evalueret for dyrkede cellehomogenitet ved anvendelse af påvisning af CD44 ved hjælp af MTT-assay [39].
MTT-assayet blev brugt til at evaluere den cytobeskyttende virkning af acteosid og dets derivater mod bmMSC'er [40]. Skademodellen blev etableret på baggrund af den tidligere undersøgelse [41]. Den eksperimentelle protokol er kort illustreret i figur 3.
4.9. Statistisk analyse
Hvert eksperiment i afsnit 4.2-4.4 og 4.7 blev udført i tre eksemplarer, og MTT-assay-eksperimentet blev udført i pentaplikat. Data blev registreret som middelværdi土SD (standardafvigelse). Dosis-respons-kurverne blev plottet ved hjælp af Origin 6.0 professionel software (OriginLab, Northampton, MA, USA). IC50-værdien blev defineret som den endelige koncentration af 50 procent radikal inhibering (relativ reducerende kraft) [42]. Statistiske sammenligninger blev foretaget ved envejs ANOVA for at påvise signifikante forskelle ved brug af SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) til Windows.p< 0.05 blev anset for at være statistisk signifikant.
5. Konklusioner
Tre naturlige phenylpropanoid glycosider, nemlig acteosid, forsythoside B og podium side, kan være involveret i flere veje til at udøve antioxidant virkning, herunder ET, H plus -overførsel; og Fe2 plus-chelaterende, men ikke RAF. ET og Hplus-overførselsveje kan være hindret af rhamnosyldel eller apiosyldel; dog Fe2 plus-chelateringsvej kan forstærkes af sukkerrester (især rhamnosyldel). Den generelle effekt af rhamnosyl-del eller apiosyl-del er at forbedre multiple-pathway-involveret ROS-fjernende evne. Forsythosid B og poliumosid er således overlegne i forhold til acteosid med hensyn til cytobeskyttende virkninger.
Supplerende materialer:Supplerende materialer er tilgængelige online. 1. Dosis-respons kurver; 2. HPLC-MS-spektre; 3. Analysecertifikater for acteosid, forsythoside B og poliumosid.
Anerkendelser:Dette arbejde blev støttet af National Science Foundation of China (81573558, 81603269), Guangdong Science and Technology Project (2017A050506043) og Natural Science Foundation i Guangdong-provinsen (2 017A030312009, 2015A0303104).
Forfatterbidrag:Xian Li og Dongfeng Chen udtænkte og designede eksperimenterne; Aichi Wu fremstillede poliumosid; Yulu Xie, Qian Guo og Penghui Xue udførte antioxidanteksperimenterne; Ke Li og Wei Zhao udførte MTT-eksperimenterne; Hong Xie analyserede dataene; Jiasong Guo udførte eksperimentet i figur 2D; Xian Li skrev avisen. Alle forfattere læste og godkendte det endelige manuskript.
Interessekonflikt:Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.
akteosidicistanche
A forkortelser
ABTS plus • 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzo-thiazolin-6-sulfonsyre) radikal
bmMSCs knoglemarvs-afledte mesenkymale stamceller
CUPRAC kobberri reducerende antioxidantkapacitet
dAMP 2'-deoxyadenosin-5'-monophosphat-radikal
DMEM Dulbeccos modificerede Eagle's medium
dGMP 2/-deoxyguanosin-5'-monophosphatradikal
DPPHe 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazin-radikal
ET elektronoverførsel; FBS: Føtalt bovint serum
FRAP ferri-ion reducerende antioxidantkraft;
HAT brintatomoverførsel
MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl
PCET protonkoblet elektronoverførsel
PTIOe 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazolin-1-oxyl 3-oxidradikal
RAF radikal adduktdannelse
ROS-reaktive oxygenarter
SCNT somatisk cellekerneoverførsel
SEPT sekventiel elektron-proton overførsel
SPLET sekventiel protontab enkelt elektronoverførsel
TPTZ 2,4,6-tripyridyltriazin
Trolox (±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetramethlychroman-2-carboxylsyre
Referencer
1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Produktion af verbascoside og phenolsyrer i biomasse af Verbena Officinalis L. (vervain) dyrket under forskellige in vitro-betingelser. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663-1668.
2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Effekt af Acteosid som en cellebeskytter til at producere en klonet hund. PLoS ONE 2016,11, e0159330.
3. Wang, HQ; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sun, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside beskytter humane neuroblastom SH-SY5Y-celler mod |3-amyloid-induceret celleskade. Brain Res. 2009,1283,139-147.
4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Beskyttende virkninger af akteosid mod røntgen-induceret skade i humane hudfibroblaster. Mol. Med. Rep. 2015,12, 2301-2306.
5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Bestemmelse af forsythiaside B og poliumosid i forskellig oprindelse og dele fra Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.
6. Jiang, WL; Tian, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektiv effektivitet og terapeutisk vindue af Forsythoside B: Ina-rottemodel af cerebral iskæmi og reperfusionsskade. Eur. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.
7. Pan, N.; Hori, H. Antioxidantvirkning af akteosid og dets analoger på lipidperoxidation. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.
8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR Hurtig reparation af DNA-radikaler. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.
9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF kemisk undersøgelse af beskyttende effekt mod hydroxyl-induceret DNA-skade og antioxidantmekanisme af myricitrin. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.
10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Hurtig reparation af oxidativ DNA-skade ved phenylpropanoidglycosider og deres analoger. Mutagenese 2008, 23, 19-26.
11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Lyofiliserede vandige ekstrakter af Mori Fructus og Mori Ramulus Beskytter mesenkymale stamceller mod eOH-behandlet skade: Bioassay og antioxidantmekanisme. BMC komplement. Altern. Med. 2017, 17, 242.
12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro undersøgelser af antioxidant og beskyttende virkning af 2-substituerede-8-hydroxyquinolinderivater mod H2O2-induceret oxidativ stress i BMSC'er. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.
13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) Beskytter mesenkymale stamceller mod oxidativ stress: en bioevaluering og mekanistisk kemi. BMC komplement. Altern. Med. 2016, 16, 423.
14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Beskyttende virkning af Sinapin mod Hydroxyl radikal-induceret skade på mesenkymale stamceller og mulige mekanismer. Chem. Pharm. Tyr. 2016, 64, 319-325.
15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oxidativ status forudsiger kvalitet i humane mesenkymale stamceller. Stamcelle Res. Ther. 2017, 8, 3.
16. Li, XC 2-Phenyl-4,4,5,5-Tetramethylimidazolin-1-oxyl 3-Oxide (PTIOe) Radikalopfangning: En ny og enkel antioxidant Assay in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.
17. Li, X. Forbedret pyrogallol-autoxidationsmetode: En pålidelig og billig superoxid-fjernende analyse, der er egnet til alle antioxidanter. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.
18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Sammenligning af antioxidantvirkningerne af Quercitrin og Isoquercitrin: Forståelse af 6〃-OH-gruppens rolle. Molecules 2016, 21.1246.
19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioxidantegenskaber af phenoliske forbindelser: H-atom versus elektronoverførselsmekanisme. J. Phys. Chem. A 2004,108, 4916^922.
20. Benzie, IFF; Stamme, JJ Den ferri-reducerende evne af plasma (FRAP) som et mål for "antioxidantkraft": FRAP-assayet. Anal. Biochem. 1996, 239, 70-76.
21. Gulcin, I. Antioxidantaktivitet af fødevarebestanddele: en oversigt. Arch. Toxicol. 2012, 86, 345-391.
22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reaktioner af PTIO og Carboxy-PTIO med ・NO, ・NO2 og O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.
23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioxidantaktivitet og mekanisme af tetrahydroamentoflavon in vitro. Nat. Prod. Commun. 2013, 8, 787-789.
24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Undersøgelse af protonkoblet elektronoverførsel (PCET) med fire eksplicitte diabatiske tilstande på ab Initio-niveau. Comput. Theor. Chem. 2017, 1116, 50-58.
25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Beskyttende effekt mod hydroxyl-radikal-induceret DNA-skade og antioxidantmekanisme af [6]-gingerol: En kemisk undersøgelse. Tyr. Koreansk Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.
26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioxidantaktivitet af trans-resveratrol mod hydroxyl- og hydroperoxyl-radikaler: En kvantekemisk og beregningskinetisk undersøgelse. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Beskytter mod Hydroxyl-inducerede skader på DNA og MSC'er via antioxidantmekanisme. J. Saudi Chem. Soc. 2015,19, 454-460.
28. Amic, A.; Markovic, Z.; Markovic, JMD; Stepanic, V.; Lucic, B.; Amic, D. Mod en forbedret forudsigelse af flavonoidernes frie radikal-opfangende styrke: Betydningen af dobbelte PCET-mekanismer. Food Chem. 2014, 152, 578-585.
29. Lee, CH; Yoon, JY UV direkte fotolyse af 2,2'-og-bis(3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonat) (ABTS) i vandig opløsning: kinetik og mekanisme. J. Photochem. Fotobiol. A 2008, 197, 232-238.
30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reaktion af 2,2'-Azinobis(3-Ethylbenzothiazolin-6-Sulfonsyre (ABTS)-afledte radikaler med hydroperoxider. Kinetics and Mechanism. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.
31. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS Radikal-drevet oxidation af polyphenoler: isolering og strukturel belysning af kovalente addukter. Biochem. Biofys. Res. Commun. 2006, 346, 321-329.
32. Osman, AM Multiple Pathways of the Reaction of 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl Radical (DPPHe) med (plus)-catechin: Evidens for dannelsen af et kovalent addukt mellem DPHe og den oxiderede form af polyphenolen. Biochem. Biofys. Res. Commun. 2011, 412, 473-478.
33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Phenylpropanoid Glycoside Analogs: Enzymatisk syntese, antioxidantaktivitet og teoretisk undersøgelse af deres frie radikaler-rensemekanisme. PLoS ONE 2011, 6, e20115.
34. Perron, NR; Brumaghim, JL En gennemgang af antioxidantmekanismerne for polyphenolforbindelser relateret til jernbinding. Cell Biochem. Biofys. 2009, 53, 75-100.
35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; et al. Målretning af Chelaterbart jern som en terapeutisk modalitet ved Parkinsons sygdom. Antioxid. Redox signal. 2014, 21,195-210.
36. Cekic, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Modificeret Cupric Reducing Antioxidant Capacity (CUPRAC) Assay til måling af antioxidantkapaciteten af thiolholdige proteiner i blanding med polyphenoler. Talanta 2009, 79, 344-351.
37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Overensstemmelse mellem antioxidantaktiviteter in vitro og kemiske komponenter i Radix Astragali (Huangqi). Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050-1053.
38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Hexadecansyre fra Buzhong Yiqi afkogsinduceret spredning af mesenkymale stamceller af knoglemarv. J. Med. Food 2010,13, 967-975.
39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Beskyttende virkninger af dihydromyricetin mod »OH-induceret mesenchymal stamcelleskade og mekanistisk kemi. Molecules 2016, 21, 604.
40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP-syntese, antioxidationsaktivitet af (E)-9-p-tolyl-3-2-(8-hydroxy-quinol- 2-yl)vinyl-carbazol og (E){{8 }}(p-Anisyl)-3-2-(8-hydroxy-quinol-2-yl)vinyl-carbazol og deres induktionsproliferation af mesenkymale stamceller. Acta Chim. Synd. 2009, 67, 974-982.
41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Målretning af Shh Pathway af atractylenolider fremmer chondrogen differentiering af mesenkymale stamceller. Biol. Pharm. Tyr. 2012, 35,1328-1335.
42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin beskytter mod hydroxylradikal-inducerede skader på mesenkymale stamceller: Antioxidantevaluering og mekanistisk indsigt. Chem. Biol. Interagere. 2014, 219, 221-228.
Prøvetilgængelighed: En prøve af forbindelsen poliumosid er tilgængelig fra forfatterne.
© 2018 af forfatterne. Licenstager MDPI, Basel, Schweiz. Denne artikel er en artikel med åben adgang, der distribueres under vilkårene og betingelserne for Creative Commons Attribution (CC BY)-licensen (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
