Matrixmetalloproteinase 12 er en uafhængig prognostisk faktor, der forudsiger postoperativt tilbagefald af konventionelt nyrecellekarcinom - En kort rapport

for mere information:ali.ma@wecistanche.com

Bence Beres¹· Maria Yusenko²· Lehel Peterf¹· Gyula Kovacs^1,3· Daniel Banyai¹

Abstrakt

Formål Ca. 15% af klinisk lokaliseret konventionelNyrecellekarcinomer(cRCC) udvikle metastaser inden for 5 års opfølgning. Sarkomatous cRCC er en meget ondartet kræft i nyrerne. Formålet med vores undersøgelse var at identificere biomarkører til estimering af cRCC'ernes postoperative progression.

Metoder Global mikroarray-baseret genekspressionsanalyse af RCC'er med og uden sarkomatoøse ændringer afslørede, at en høj MMP12 (Matrix metalloproteinase 12)udtryk var forbundet med sarkomatous histologi. Derudover analyserede vi MMP12-udtryk ved hjælp af et multivævsarray bestående af 736 cRCC-patienter uden metastase på operationstidspunktet. Medianopføldringstiden var 66±29 måneder.

Resultater Immunohistokemi afslørede MMP12-ekspression i 187 af 736 cRCC'er med gode opfølgningsdata. Efterfølgende Kaplan-Meier-analyse viste, at patienter med MMP12-positive tumorer udviste en signifikant kortere tumorfri overlevelse (p<0.001). in="" multivariate="" cox="" regression="" analysis,="" a="" weak="" to="" strong="">(Matrix metalloproteinase 12)udtryk angivet en 2,4-2,8 gange højere risiko for tilbagefald af postoperativ tumor (p<0.001;><0.003,>

Konklusioner MMP12(Matrix metalloproteinase 12)kan tjene som en biomarkør til at estimere postoperativt cRCC-tilbagefald og som et muligt mål for penfuridolbehandling.

Nøgleord KonventionelleNyrecellekarcinom · SarkomatousNyrecellekarcinom· MMP12 · Immunhistokemi · Prognose

1 Indledning

Konventionelle RCC'er (cRCC'er) udgør 85% af alleNyremaligniteter [1]. Ca. 20-25% af patienterne diagnosticeret med cRCC bærer allerede metastaser på tidspunktet for præsentation. Metastatiske cRCC'er er resistente over for kemo- og strålebehandling og vise lave reaktioner på målrettede terapier [2]. I øjeblikket tidlig diagnose i forbindelse med kirurgi er den bedste mulighed for at behandle cRCC, mens adjuverende terapi kan kun forlænge livet for patienter med metastatisk sygdom.

Som et resultat af den udbredte anvendelse af billeddannelsesteknikker, en stigende antal patienter diagnosticeres med i øvrigt opdaget lilleNyremasser begrænset til nyrerne [3]. Den antal tilfældigt påviste pT1a (<4 cm="" in="" diameter)="" and="" pt1b=""><7 cm="" in="" diameter)="" tumours="" is="" increasing="" in="" the="" operation="" statistics="" of="" most="" urological="" centres.="" however,="" approximately="" 15%="" of="" clinically="" localised="" crccs="" operated="" with="" curative="" intent="" will="" develop="" metastases="" within="" 5="" years.="" in="" the="" case="" of="" pt1="" crcc="" confined="" to="" the="" kidney,="" tnm="" classification="" cannot="" be="" used="" to="" estimate="" the="" postoperative="">

Det er almindeligt accepteret, at cRCC stammer fra proksimal tubuli af den voksne nyre. Under udvikling og progression bevarer langt de fleste cRCC'er deres epitel karakteristika. Men de mest aggressive varianter af cRCC gennemgår epitel-mesenkymal overgang (EMT) ved gradvist at miste epitelegenskaber og få sarkomatous histologi [4]. Under EMT-tumorceller mister ekspressionen af flere membranproteiner, der spiller en sæd rolle i opretholdelsen og funktionen af normal polariseret proksimale rørformede celler. Den invasive og metastatiske vækst af cRCC er ikke kun afhængig af gevinsten af en fibroblast-lignende / rhabdoid histologi, men også på evnen til at nedbryde kældermembran og modificere den ekstracellulære matrix [5].

Her analyserede vi globale genekspressionsmønstre af cRCC'er og papillære RCC'er (pRCC) og af dem, der udviser sarkomatous histologi og en hurtig progression. Vi identificerede MMP12 som det mest signifikante overudtrykte gen i sarkomato cRCC'er. Efterfølgende immunhistokemisk analyse af en stor cRCC-kohorte afslørede, at udtrykket af MMP12(Matrix metalloproteinase 12)korrelerer signifikant med postoperativ cRCC tilbagefald begrænset til nyrerne på tidspunktet for operationen.

Klik for atcistanche para que sirve til behandling af nyresygdom

2 Materialer og metoder

2.1 Mikroarray-baseret genekspressionsanalyse

RCC-prøver og tilsvarende normale nyreprøver blev indsamlet på Institut for Urologi, University of Heidelberg, Tyskland i perioden 1995-1996. Homogene områder af tumorprøverne blev snapfrosset i flydende nitrogen umiddelbart efter en operation og opbevares på –80 °C til efterfølgende analyse. Parallelt blev tumorprøver fastgjort i 4% formaldehyd til histologisk undersøgelse. Til global genekspressionsanalyse valgte vi 17 cRCC'er, 18 pRCC'er med epitel histologi. samt 3 cRCC'er og 2 pRCC'er med sarkomatous histologi. Diagnosen af tumorerne blev bekræftet genetisk før brug i denne undersøgelse. RNA blev isoleret ved hjælp af en Qiagen RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Tyskland). Efterfølgende cDNA-syntese og hybridisering blev udført ved Genomics Kernefaciliteten i EMBL, Heidelberg ved hjælp af en Affymetrix Humant genom U133 Plus 2.0 array (Affymetrix, Julemanden Clara, CA, USA) indeholdende 54.675 sonder. Normalisering blev udført ved hjælp af R-algoritmen leveret af Bioconductor. Differentielt udtrykte gener blev identificeret ved anvendelse af Gensæt berigelse analyse. Visualisering af differentielt udtrykte gener var udført ved hjælp af Multiple Array Viewer-software (HTTP:// www.tm4.org/index.html). Udtrykket profildata er deponeret i NCBI Gene Expression Omnibus under tiltrædelsesnummer GSEA 11151.

2.2 Patienter og tumorprøver

Den anvendte kohorte bestod af 736 patienter, der blev udsat for radikal eller delvis tumornefhrektomi mellem 2000 og 2015. Den histologiske diagnose og TNM-klassificering blev bestemt af en af forfatterne (GK) i henhold til Heidelberg-klassifikationen og TNM-systemer, der anvendte 3 trier-klassificeringer [6, 7]. Vi holdt os tilbage til Heidelberg-klassifikationen, fordi den er baseret på robuste tumorspecifikke genetiske ændringer og ikke på variable cytologiske egenskaber. Omtrent 70% af cRCC'erne var sammensat af "klare" celler og resten af "eosinofile" (tidligere kaldet "granulære") celler eller blandede klare og eosinofile celler. Data om regelmæssig opfølgning og tumorspecifik død blev indhentet fra Urologisk Afdelings register. Opfølgning blev defineret som tiden fra driften til den sidst registrerede kontrol, eller kræftspecifik død. Patienter, der døde af andre årsager end RCC ikke blev medtaget i denne analyse. Præoperativ klinisk iscenesættelse inkluderet abdominal og bryst beregnet tomografi (CT) scanninger. Knoglescanninger og hjerne CT-scanninger var opnås kun, når det er indiceret ved kliniske tegn. Nærværet af nodalmetastase blev bekræftet ved histologisk undersøgelse og ved fjerne metastaser ved radiografisk undersøgelse. Postoperative patienter blev undersøgt hver 6. måned af abdominal ultralyd og måling af serumkreatinin og eGFR, og hver 12. måned ved CT-scanninger.

2.3 Vævsmikroarray (TMA) konstruktion

Repræsentative tumorområder blev identificeret ved hjælp af hæmatoxylin og eosinfarvede dias og udvalgt til TMA-konstruktion. Fra tumorer med områder med forskellig morfologi eller klassificering 2-4 biopsier blev taget. Biopsier med diameter på 0,6 mm blev anbragt i en modtagerblok ved hjælp af en manual Tissue Arrayer (MTA1, Beecher Instruments, Inc., Sun Prairie, USA). Føstre og voksne nyre-, hjerne- og leverbiopsier var inkluderet i TMA.

2.4 Immunohistokemi

4 μm TMA-sektioner blev afvokset i xylen og rehydreret i gradueret ethanol. Dernæst blev antigenhentning udført ved kogning af diasene i EnVision FLEX Target Hentningsopløsning, høj pH (DAKO, Glostrup, Danemark) i 2100-Retriever (Pick-Cell Laboratories, Amsterdam, The Holland). Endogen peroxidaseaktivitet og uspecifik farvning blev blokeret ved hjælp af et Envision FLEX Peroxidase Blocking Reagens (DAKO) i 10 minutter ved stuetemperatur. De resulterende dias blev efterfølgende inkuberet til en time i et fugtigt kammer med en anti-MMP12(Matrix metalloproteinase 12)antistof (NBP1-31225, Novus Biologicals, Littleton, CO, USA) på 1:250 fortynding. EnVision, efterfulgt af et FLEX hesteradise-peroxidase konjugeret sekundært antistof (DAKO) til 30 minutter ved stuetemperatur. Som en negativ kontrol glider blev inkuberet med kun det sekundære antistof. Signalerne blev visualiseret med DAB (3,3'-Diaminobenzidin) (DAKO). Vævssektioner blev modfarvet med Mayers hæmatoxylin (Lillies modifikation, DAKO) og efter 10 s blåning i ammoniumhydroxidopløsning, monteret i glycergel (DAKO). Immunreaktionerne blev evalueret af BB og GK blindet for de kliniske data. Der blev taget billeder ved hjælp af et Leitz DMRBE-mikroskop, udstyret med en HC PLAN APO 20×0.70 mål og et Progres C14 kamera. Da procentdelen af positivt farvede celler repræsenteret mindst 90% af tumorcellerne i alle positive biopsier, det gjorde vi ikke evaluere antallet af positive celler som en parameter. Vi klassificerede farvningsintensiteten som ingen farvning, svag farvning eller stærk farvning (se fig. 1 b-d).

Cistanche til forbedring af nyrefunktionen

2.5 Statistisk analyse

Dataanalyse blev udført ved hjælp af SPSS Statistics-software pakke version 20.0 (IBM,35 Armonk, NY, USA). Korrelationer mellem MMP12(Matrix metalloproteinase 12)ekspression og klinisk-patologiske parametre blev vurderet ved hjælp af Chi-square-testen. Den effekt af de forskellige variabler (alder, køn, tumorstørrelse, TNM-klassificering, klasse, trin og ekspression af MMP12) om patienternes overlevelsestid blev estimeret ved hjælp af Kaplan-Meier analyse. Sammenligninger af overlevelseskurver blev lavet ved hjælp af Log-rank-testen. Univariate og multivariate overlevelsesanalyser blev udført ved hjælp af COX regressionsmodel. Patienter i live og sygdomsfri blev censureret. Diferenser blev betragtet som betydningsfulde ved p<>

3 Resultater og diskussion

Vi evaluerede udtryksprofilerne for 17 cRCC'er og 18 pRCC'er med epitel histologi mod dem af tre cRCC'er og to pRCC'er med sarkomato histologi. Dernæst udvalgte vi 50 gener ved Gene Set Enrichment Analysis (GSEA), der blev opreguleret i de sarkomatoøse RCC'er. Resultaterne af de tre mest fremtrædende udtrykte gener (MMP12, ANLN og ADAM12) er vist i fig. 1A. MMP12(matrix metalloproteinase 12)blev overudtrykt i fire aggressivt voksende epitel cRCCs samt. Ingen af de pRCC'er, der blev udstillet MMP12 overekspression.

Fig. 1 MMP12(Matrix metalloproteinase 12)ekspression i normal nyre ogNyrecellekarcinom(RCC). (A) Del af et varmekort, der viser differentiel genekspression i konventionel RCC (cRCC), papillær RCC (pRCC) og sarkomato RCC (sRCC). Udtrykket af MMP12 såvel som ANLN og ADAM12, er opreguleret i sRCC (rød). Ingen af pRCC'erne, men 4 cRCC'er uden sarkomato histologi, udviste en høj MMP12 udtryk. B) Immunohistokemi af MMP12-ekspression. (a) Stærk MMP12-ekspression i distale tubuli (DT) i den voksne nyre; proksimale tubuli (PT) er negative. b) Manglende MMP12-udtryk i en cRCC. c) Diffus, svag MMP12-ekspression i en cRCC med epitel histologi. d) Stærkt MMP12-udtryk i en sRCC. e) Stærk cytoplasmatisk MMP12-ekspression i en rhabdoid cRCC. f) Papillær voksende epitel-cRCC, der viser stærkt MMP12-udtryk i basale områder af tumorcellerne (pile).

MP12-ekspression blev udelukkende påvist i distal rørformede celler i normale følære og voksne nyrer, mens proksimale rørformede celler var negative (fig. 1B, a). Immunohistokemi afslørede en svag eller stærk cytoplasmatisk MMP12 farvning i 187 af de 736 cRCC'er, mens 549 cRCC'er var negative (fig. 1B, b-f). Den positive farvning var begrænset til tumorcellerne, og der blev ikke påvist MMP12-protein i tumormikromiljøet med undtagelsen af nogle tumorrelaterede makrofager. De fleste af de svage positive cRCC'er udviste epitel histologi, mens tumorer med en stærk MMP12(Matrix metalloproteinase 12)udtryk udviste sarkomato eller rhabdoide egenskaber (fig. 1B. d, e). I flere tumorer, en ophobning af MMP12-proteinet blev set ved tumor-stroma-grænsen (Fig. 1B f).

Af de 736 cRCC-patienter var 426 (58 %) mænd og 310 (42 %) var kvinder Patienternes gennemsnitsalder var 60,9±11,2 år (interval 23-88 år). Den gennemsnitlige tumor størrelsen var 49,5±25,3 mm. Under en median opfølgning af 66±29 måneder, tumortilbagefald blev observeret hos 119 patienter (16%). Af de 736 tumorer blev 574 (78 %) klassificeret som pT1. Størstedelen af cRCC'erne (510 af 736; 69%) udstillede tumorklasse G1. Med hensyn til tumorstadiet er 668 (91 %) af tilfælde blev klassificeret som fase I eller II. Foreninger mellem MMP12(Matrix metalloproteinase 12)ekspression og klinisk-patologiske parametre såsom postoperativt tumortilbagefald og størrelse, klasse, T-stadion og tumorstadium samt koagulationsnekrose er afbildet i tabel 1. Alle parametre viste en signifikant korrelation (p<0.001) with="" mmp12="">

Kaplan-Meier-analyse afslørede, at cRCC-patienter udviser et svagt eller stærkt MMP12-udtryk, havde en signifikant kortere sygdomsfri overlevelse sammenlignet med dem uden MMP12-udtryk (fig. 2). Den samlede 5-årige overlevelsesrater for MMP12 stærk, svag positiv og negative grupper var henholdsvis 52,8%, 75,2% og 95,3%. Den gennemsnitlige overlevelse for patienter med stærk MMP12(Matrix metalloproteinase 12)farvning var 74 (61-87) ±7 måneder, med en svag farvning 105 (85-125) ± 10 måneder og med en negativ farvning 176 (164–188) ±6 måneder, med en samlet overlevelse på 154 (143-164) ±5 måneder. Univariat Cox-regressionsanalyse afslørede, at tumorstørrelse, kvalitet, T-klassificering, nekrose og MMP12-positivitet var signifikant forbundet med postoperativ tumorprogression (alle p<0.001). however,="" in="" multivariate="" cox="" regression="" analysis="" only="" tumour="" grade,="" stage="" and="" mmp12="" positivity="" remained="" as="" independent="" predictors="" of="" relapse.="" in="" this="" correlation,="" a="" weak="" or="" strong="" mmp12="" staining="" indicated="" a="" 2.4–2.8="" times="" higher="" risk="" of="" postoperative="" tumour="" relapse=""><0.001 and=""><0.003, respectively)="" (table="">

Tabel 1 Sammenslutning af MMP12 ekspression med klinisk-patologiske parametre af konventionelle RCC'er uden metastase på tidspunktet for drift (n=736)

Fig. 2 Kaplan-Meier estimater af gentagelsesfri overlevelse i henhold til til immunhistokemi hos 736 patienter uden metastatisk sygdom på tidspunktet for operationen. Svag eller stærk MMP12(Matrix metalloproteinase 12)udtryk afviser sin prognostisk værdi (p<>

Tabel 2 Multivariat analyse: ekspression af MMP12(Matrix metalloproteinase 12)protein er en uafhængig prognostisk faktor, der indikerer 2-3 gange højere risiko for tilbagefald af kræft (s≤0.001; s≤0.003)

Det er almindeligt accepteret, at cRCC stammer fra proksimal tubuli af nyrerne, som er af mesodermal oprindelse. Under nyreudvikling, blastemale celler gennemgår mesodermal til epitelovergang (MET) til dannelse af polariserede celler i det proksimale rørformede system. I meget ondartet sarkomatous cRCC den modsatte biologiske proces, dvs. EMT, forekommer, hvilket ikke resulterer i kun i tab af tumorens polariserede epitelkarakter celler, men også i tab af cellulær kontakt [4]. Samtidig ændringer i tumormikromiljø (TME), herunder ændringer i den ekstracellulære matrix (ECM) kan bane vejen til invasiv vækst og metastase [8]. ECM består af fibrillære og ikke-fibrillære proteiner, opløselige ekstracellulære proteiner, cytokiner og ECM-nedbrydende enzymer såsom som MMP12(Matrix metalloproteinase 12). Under metastase bryder tumorceller igennem basalmembranen, der adskiller dem fra TME og derved invadere TME og derefter blodkar. I dette kompleks proces, tumor-associerede fibroblaster og immunceller spiller grundlæggende roller ved at producere interleukiner, vækstfaktorer og matrixnedbrydende enzymer [9]. Tumorceller kan også ændre deres eget mikromiljø ved at producere vækst faktorer og matrixnedbrydende enzymer såsom MMP12. Som MMP'er spiller en vigtig rolle i den metastatiske vækst af tumorer, de kan være af prognostisk betydning [10]. MMP'er vides at være involveret i normale fysiologiske processer såsom embryonal udvikling, sårheling og væv ombygning og støtte den invasive vækst og spredning af kræftceller [11, 12]. MMP12-udtryk har vist sig at være forbundet med udviklingen af flere kræftformer [13-16]. Ud over sin rolle i at fjerne fysiske barrierer, MMP12 kan generere proangiogene faktorer som VEGF for at danne nye blodkar, der er nødvendige for tumorvækst [8]. Omvendt det har vist sig, at MMP12 kan have en antitamørigen virkning gennem hydrolyse af plasminogen til dannelse af potent angiogenesehæmmer angiostatin [17-19]. Derfor MMP12 kan have tumorrigen såvel som anti-tumorigen virkninger, afhængigt af hvilken type væv der er involveret.

Her viser vi, at MMP12 virker som en pro-tumorigen faktor i cRCC. MMP12(matrix metalloproteinase 12)udtryk korrelerer betydeligt med forekomsten af postoperativt RCC-tilbagefald. MMP12 udtryk kan anvendes til identifikation af patienter med høj risiko for tumorprogression, til tæt postoperativ overvågning og til anvendelse af målrettet behandling så tidligt som muligt som muligt. For nylig har det vist sig, at høj MMP12 ekspression kan være forbundet med progression af lunge adenocarcinom og denne penfuridolbehandling kan begrænse migrationen og metastatisk vækst af MMP12, der udtrykker tumorceller [20]. Vi foreslår, at MMP12(Matrix metalloproteinase 12)kan også tjene som et terapeutisk mål for penfuridol i RCC.

Forfatterbidrag G.K udtænkte og overvågede projektet og konstruerede TMA. B.B. udførte IHC-farvningen og med hjælp fra G.K. analyserede resultaterne. M.Y. udførte den statistiske analyse. B.B., P.L. og D.B. skrev det første udkast, og G.K. gennemgik papir. Alle forfattere har læst og accepteret den indsendte version af manuskriptet.

Finansiering af open access-finansiering fra University of Pécs. Denne Studiet blev støttet af en bevilling fra Det Medicinske Fakultet, University of Pecs, Ungarn (PTE-AOK-KA-2018/41) til D.B.

Datatilgængelighed Fulde data vil være tilgængelige fra den tilsvarende forfatter efter rimelig anmodning.

Cistanche-nyresygdom symptomer

Erklæringer

Erklæring fra Institutional Review Board Indsamlingen og anvendelsen af alle vævsprøver til denne undersøgelse blev godkendt af den etiske komité for Universitetet Pecs, Ungarn (nr. 5343/2014).

Erklæring om informeret samtykke Der blev indhentet informeret samtykke fra alle patienter involveret i denne undersøgelse.

Interessekonflikt Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konflikt mellem interesse.

Open Access Denne artikel er licenseret under en Creative Commons Attribution 4.0 International License, som tillader brug, deling, tilpasning, distribution og reproduktion i ethvert medium eller format, så længe når du giver passende kredit til den eller de oprindelige forfattere og kilden, angive et link til Creative Commons-licensen og angive, om ændringer blev lavet. Billederne eller andet tredjepartsmateriale i denne artikel er inkluderet i artiklens Creative Commons licens, medmindre andet er angivet ellers i en kreditlinje til materialet. Hvis materiale ikke er inkluderet i artiklens Creative Commons licens og din tilsigtede brug er ikke tilladt ved lovregulering eller overstiger den tilladte brug, vil du skal indhente tilladelse direkte fra indehaveren af ophavsretten. Sådan får du vist en kopi af denne licens, besøg http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Referencer

1. F. Bray, J. Ferlay, I. Soerjomataram, R.L. Siegel, L.A. Torre, A. Jemal, Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimater af incidens og dødelighed på verdensplan for 36 kræftformer i 185 lande. CA Kræft J. Clin. 68, 394–424 (2018)

2. V. Mollica, V. Di Nunno, L. Gatto, M. Santoni, M. Scarpelli, A. Cimadamore, A. Lopez-Beltran, L. Cheng, N. Battelli, R. Montironi, F. Massari, Resistens over for systemiske agenser iNyre cellekarcinomforudsige og overvinde genomiske strategier vedtaget af tumor. Kræft 11, 830 (2019)

3. W.H. Chow, L.M. Dong, S.S. Devesa, Epidemiologi og risikofaktorer for nyrekræft. 7, 245-257 (2010)

4. J.L. Conant, Z. Peng, M.F. Evans, S. Naud, K. Cooper, Sarcomatoidnyrecellekarcinomer et eksempel på epitel-mesenkymal overgang. J. Clin. Pathol. 64, 1088–1092 (2011)

5. K. Kessenbrock, V. Plaks, Z. Web, Matrix metalloproteinaser: regulatorer af tumormikromiljøet. Celle 141, 52-67 (2010)

6. G. Kovacs, M. Akhtar, B.J. Beckwith, P. Bugert, C.S. Cooper, B. Delahunt et al., Heidelberg-klassificeringen afNyrecelle Tumorer. J. Pathol. 183, 131–133 (1997)

7. J.D. Brierley, M.K. Gospodarowicz, C. Wittekind (red.), TNM Klassificering af maligne tumorer, 8. hule. (Wiley Blackwell, Oxford, 2017)

8. M. Wang, J. Zhao, L. Zhang, F. Wei, Y. Lian, Y. Wu, Z. Gong, S. Zhang, J. Zhou, K. Cao et al., Tumormikromiljøets rolle i tumorgenese. J. Kræft 8, 761–773 (2017)

9. A.D. Theocharis, S.S. Skandalis, C. Gialeli, N.K. Karamanos, Ekstracellulær matrixstruktur. Adv. Drug Deliv. Åb 97, 4-27 (2016)

10. G. Gonzalez-Avila, B. Sommer, A.A. García-Hernández, C. Ramos, Matrix metalloproteinasernes rolle i tumormikromiljø. Adv. Exp. Med. Biol. 1245, 97–131 (2020)

11. J. Lyu, C.K. Joo, Wnt-7a opregulerer matrixmetalloproteinase-12 ekspression og fremmer celleproliferation i hornhindeepitel celler under sårheling. 280, 21653–21660 (2005)

12. L.A. Schuman-Moss, S. Jensen-Taubman, W.G. Stetler-Stevenson, Matrixmetalloproteinaser: skiftende roller i tumorprogression og metastase. Am. J. Pathol. 181, 1895–1899 (2012)

13. E. Ella, Y. Harel, M. Abraham, H. Wald, O. Benny, A. KarschBluman et al., Matrix metalloproteinase 12 fremmer tumorudbredelse i lungen. J. Thorac. Kardiovasc. 155, 2164-2175 (2018)

14. F.Z. Lv, J.L. Wang, Y. Wu, H.F. Chen, X.Y. Shen, Knockdown af MMP12(Matrix metalloproteinase 12)hæmmer væksten og invasionen af lungeadenocarcinom Celler. Int. J. Immunopathol. Pharmacol. 28, 77–84 (2015)

15. F. Ren, R. Tang, X. Zhang, W.M. Madushi, D. Luo, Y. Dang, Z. Li, K. Wei, G. Chen, Overekspression af MMP-familiemedlemmer fungere som prognostisk biomarkør for brystkræftpatienter: A systematisk gennemgang og metaanalyse. PLoS ONE 10, e0135544 (2015)

16. R. Yang, Y. Xu, P. Li, X. Zhang, J. Wang, D. Gu, Y. Wang, J.M. Kim, H.J. Kim, B.S. Koo et al., Ekspression af matrixmetalloproteinase-12 er korreleret med den ekstrakapsulære spredning af tumor fra knuder med metastase i pladecellecarcinom i hoved og hals. Eur. Arch. Otorhinolaryngol. 270, 1137–1142 (2012)

17. L.A. Cornelius, L.C. Nehring, E. Harding, M. Bolanowski, H.G. Velgus, D.K. Kobayashi, R.A. Pierce, S.D. Shapiro, Matrix metalloproteinaser genererer angiostatin: Virkninger på neovaskularisering. J. Immunol. 161, 6845–6852 (1998)

18. M.S. O'Reilly, L. Holmgren, Y. Shing, C. Chen, R.A. Rosenthal, M. Moses, W.S. Lane, Y. Cao, E.H. Sage, J. Folkman, Angiostatin: En ny angiogenesehæmmer, der formidler undertrykkelsen af metastaser af et Lewis lungekarcinom. Celle 79, 315-328 (1994)

19. M.J. Gorrin Rivas, S. Arii, M. Furutani, M. Mizomoto, A. Mori, K. Hanaki, M. Maeda, H. Furuyama, Y. Kondo, M. Imamura, Mus makrofag metalloelastase genoverførsel til en murine melanom undertrykker primær tumorvækst ved at standse angiogenese. Kl. 6, 1647–1654 (2000)

20. W.Y. Hung, W.J. Lee, G.Z. Cheng, C.H. Tsai, Y.C. Yang, T.C. Lai, J.Q. Chen, C.L. Chung, J.H. Chang, M.H. Chien, Blokering af MMP12-moduleret epitel-mesenkymal overgang ved at genbruge penfuridol begrænser lunge adenocarcinom metastase via uPA/ uPAR/TGFb/AKT vej. Celle. Oncol. 44, 1087–1103 (2021)

Publisher's Note Springer Nature forholder sig neutralt med hensyn til jurisdiktionskrav i offentliggjorte kort og institutionelle tilhørsforhold.