Lipaseproduktion af Yarrowia Lipolytica i faststoffermentering ved hjælp af Amazon-frugtbiprodukter og sojabønnemel som substrat, del 2
Jun 30, 2023
2.5. Hydrolyse af fiskeolie
Lipaser er blevet brugt i hydrolyse af fedtsyrer til at koncentrere polyumættede fedtsyrer (PUFA'er) [44,45]. Den største fordel ved anvendelsen af lipaser i produktionen af flerumættede fedtsyrer er specificiteten af enzymet og reaktioner, der forekommer under moderate temperaturforhold, hvilket favoriserer opretholdelsen af strukturen af PUFA'er [44]. Anvendelsen af lipaser foretrækkes frem for kemiske metoder, da de giver glycerider med lavt udbytte og renhed [46]. Lipasernes rolle i den selektive hydrolyse af mættede fedtsyrer (SFA'er) og monoumættede fedtsyrer (MUFA'er) fra triacylglyceroler (TAG'er) er at producere glycerider rige på PUFA'er. Princippet i denne metode er den steriske hindring forårsaget af den molekylære konfiguration af carbon-cis-dobbeltbindingerne i PUFA'er, der forårsager foldning af fedtsyrekæder. Således har de enzymatiske aktive steder ikke adgang til esterbindingerne af disse fedtsyrer med deres glycerolskeletter [47,48]. Adskillige fordele er forbundet med indsættelse af fedtsyrer i kosten, såsom børns udvikling, forebyggelse af hjerte-kar-sygdomme, kræft og forskellige psykiske lidelser (depression, opmærksomhedsforstyrrelse, hyperaktivitet), foruden det anti-inflammatoriske potentiale og potentiel hypertension kontrol [49].
Glycoside af cistanche kan også øge aktiviteten af SOD i hjerte- og levervæv og signifikant reducere indholdet af lipofuscin og MDA i hvert væv, hvilket effektivt fjerner forskellige reaktive iltradikaler (OH-, H₂O₂ osv.) og beskytter mod DNA-skader forårsaget af OH-radikaler. Cistanche phenylethanoid glycosider har en stærk opfangningsevne af frie radikaler, en højere reducerende evne end C-vitamin, forbedrer aktiviteten af SOD i spermsuspension, reducerer indholdet af MDA og har en vis beskyttende effekt på sædmembranens funktion. Cistanche polysaccharider kan øge aktiviteten af SOD og GSH-Px i erytrocytter og lungevæv fra eksperimentelt senescent mus forårsaget af D-galactose, samt reducere indholdet af MDA og kollagen i lunge og plasma, og øge indholdet af elastin, har en god rensende effekt på DPPH, forlænge hypoksitiden hos senescent mus, forbedre aktiviteten af SOD i serum og forsinke den fysiologiske degeneration af lunge hos eksperimentelt senescent mus Med cellulær morfologisk degeneration har forsøg vist, at Cistanche har den gode antioxidantevne og har potentialet til at være et lægemiddel til at forebygge og behandle hudaldringssygdomme. Samtidig har echinacosid i Cistanche en betydelig evne til at opfange DPPH-frie radikaler og har evnen til at opfange reaktive oxygenarter og forhindre frie radikal-induceret kollagen-nedbrydning, og har også en god reparationseffekt på anionskader af thymin frie radikaler.
【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
Produktionen af enzymekstrakter, der skal anvendes i processer som hydrolyse, kan være en dyr opgave. At forske i råvarer, der reducerer produktionsomkostningerne, kan således give et interessant alternativ. Anvendelsen af en fast biokatalysator er ønskelig, fordi denne faste biokatalysator kan genbruges i enzymatiske reaktioner, ud over at have fremragende opbevaringsstabilitet ved stuetemperatur, uden omkostninger til nedkøling og nem transport [41]. Der har ikke været rapporter om brugen af en fast biokatalysator fra Yarrowia lipolytica til fremstilling af PUFAS ved enzymatisk hydrolyse af fiskeolie. Således blev anvendelsen af det rå enzymekstrakt og den faste biokatalysator fremstillet ved brug af andiroba-oliekage og sojaskrå (50:50) undersøgt for at evaluere den potentielle anvendelse af enzymer i hydrolyse af fiskeolie for yderligere at producere flerumættede fedtsyrer i en passende proces (Figur 6). Det er muligt at observere en høj grad af hydrolyse (DH) i kortere reaktionstider ved brug af en fast biokatalysator (63, 70,8, 72,5 og 74,7 procent) end den enzymatiske ekstrakt (47,5, 61,5, 66,5 og 74,8 procent) efter 24, 48, 72 timer og 144 timer.
Den enzymatiske hydrolyseproces anvendes konstant for at opnå koncentrerede flerumættede fedtsyrer. Gao et al. [50] brugte lipase i hydrolysen af torskeolie og indholdet af EPA og DHA blev henholdsvis forbedret 3.24-fold og 1.98-fold. Aarthi et al. [20] brugte koncentreret lipase (1000 U/mL) til hydrolyse af fiskeolier og fandt også en hydrolysehastighed på over 60 procent efter 72 timer. I dette arbejde blev der opnået bedre hydrolysegrader ved at anvende et råt enzymatisk ekstrakt af lipase (dvs. uden oprensning), når man sammenlignede den samme hydrolysetid. Andre forfattere har undersøgt hydrolysen af Musteleus mustelus-leverolie og sælspækolie, der rapporterer 75 procent og 70 procent af hydrolyse efter henholdsvis 24 og 9 timers reaktion [25,26].
Martins et al. [51] brugte en kommerciel lipase fra Burkholderia cepacia (Amano) til hydrolyse af fiskeolie og opnåede efter 48 timers reaktion 55,6 procent DHA sammenlignet med det maksimalt beregnede indhold. I vores arbejde opnåede vi i en foreløbig undersøgelse 70,8 procent af hydrolyse efter 48 timers reaktion ved brug af den faste biokatalysator.
Hidtil har sådanne fund antydet levedygtigheden af at bruge biprodukter til at producere lipase i fast-state fermentering som en måde at afbøde miljøskader, evaluere biprodukter og omkostningseffektivitet. Derudover viser resultaterne den potentielle anvendelse af lipaseenzymet i hydrolyse af fiskeolie til yderligere at producere flerumættede fedtsyrer i en passende proces.
På trods af at det er rigeligt af billige agroindustrielle biprodukter, er bestemmelsen og standardiseringen af sammensætningen, foruden omkostningsestimaten for at opnå det enzymatiske ekstrakt og den faste biokatalysator fra billige agroindustrielle biprodukter, stadig en udfordring, men ekstremt afhængig af typen af biprodukt, sæsonbestemte og genererede mængder samt den anvendte proces og geografiske placering blandt andre faktorer. Derfor skal spørgsmål såsom kompleksiteten af kæden og dens logistiske omkostninger, brugen af komplekse og omkostningskrævende processer, højt energiforbrug og regulatoriske spørgsmål, blandt andre, overvindes. I denne forstand skal forarbejdning af biprodukter overvinde flere barrierer, før den bliver økonomisk levedygtig, herunder behovet for at forarbejde store mængder råmaterialer, kapaciteten til at behandle heterogene råvarer, integreret logistik med forskellige forarbejdningsindustrier og muligheden for integration proces i forarbejdningsenheden for at give mulighed for generering af ingredienser af høj værdi, blandt andre [52-55].
3. Materialer og metoder
3.1. Materiale
Sojabønnemel blev købt fra Caramuru Alimentos (Goiás, Brasilien). Andiroba oliekage fremstillet ved olieudvinding blev leveret af Beraca Ingredientes Naturais (Pará, Brasilien). Begge substrater blev standardiseret omkring granulometri (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).
3.2. Dyrkningsbetingelser for mikroorganismer og inokulum
Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682, isoleret fra en flodmunding i Guanabara Bay, Rio de Janeiro, Brasilien [56] blev dyrket ved 28 ◦C i YPD-agarmedium (vægt/volumen: gærekstrakt 1 procent; pepton, 2 procent; glucose, 2 procent agar, 3 procent). Cellerne blev dyrket i et flydende medium indeholdende gærekstrakt 1 procent (vægt/volumen), pepton, 2 procent (vægt/volumen) og glucose 2 procent (vægt/volumen) i 72 timer, 160 rpm ved 28 ◦C.
3.3. Agro-industriel biproduktkarakterisering
Fysisk-kemiske sammensætning af sojamel og andirobaoliekage blev bestemt i form af fugt, protein, kulhydrat, aske, etherekstrakt, uopløselige fibre og indhold af opløselige fibre i henhold til metoden rapporteret af Association of Official Analytical Chemists (AOAC) ) [57]. Da lipaseproduktion af Y. lipolytica desuden påvirkes af beluftning [58], blev lejeporøsiteten i SSF evalueret i henhold til ligning (1), hvor ε er porøsiteten (udtrykt i m3 luft·m−3 leje); ρdrysolid er den tilsyneladende massefylde af den tørre prøve (kg·m−3); og ρwetsolid er densiteten af prøven efter vandtilsætning (kg·m−3) [58].
3.4. Lipase Produktion af SSF
Den faste matrix indeholdende sojaskrå og andirobaoliekage blev fremstillet før podningen i bakketypereaktoren med forskellige andele af substratet og autoklaveret ved 121 ◦C i 20 min. De faste procesparametre anvendt til lipaseproduktion var fugt på 55 procent og inokulumkoncentration på 0,71 mg tør biomasse/g substrat [24]. Reaktorerne blev inkuberet i et biokemisk iltbehov (BOD) kammer ved 28 ◦C, og offerprøver (dvs. en reaktor af bakketypen til prøvetiden) blev taget under hele fermenteringen til analyse.
SSF blev evalueret ved hjælp af forskellige kombinationer af andiroba-oliekage og sojaskrå ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 og 100:0) på forskellige tidspunkter (0, 12, 24, 32 og 48 timer). Derefter blev tilskuddet af den faste matrix indeholdende andiroba-oliekage og sojabønnemel (50:50) evalueret ved at tilsætte 1,5 (procent vægt/vol) sojaolie over tid (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, og 72 h) for at opnå en stigning i lipolytisk aktivitet. Desuden blev tilstedeværelsen af Tween 80 (0,001 % vægt/volumen) i fermenteringsmediet indeholdende 1,5 (vægt/volumenprocent) sojaolie testet. Fermentering blev overvåget ved at bestemme lipase- og proteaseaktiviteten såvel som fugtigheden og pH-værdien (beskrevet i underafsnit "3.6. Analytiske bestemmelser").
3.5. Enzymekstraktion og produktion af fast biokatalysator
Enzymekstraktionen blev udført ved at tilsætte 50 mL 50 mM kaliumphosphatbuffer pH 7,0 i bioreaktorerne efterfulgt af inkubation ved 37 ◦C, 200 rpm, i 20 min. Efterfølgende blev det fermenterede materiale suspenderet i bufferen presset ved hjælp af en masher med blik og centrifugeret ved 3000 rpm i 5 min. Den faste biokatalysator blev opnået ved frysetørring af hele massen opnået ved slutningen af fermenteringsprocessen i 72 timer og opbevaret ved stuetemperatur i 7 måneder for at verificere den enzymatiske stabilitet.
3.6. Analytiske Bestemmelser
3.6.1. Lipase aktivitet
Lipaseaktivitet blev udført under anvendelse af metoden foreslået af Freire et al. [59]. Reaktionsmediet blev emulgeret i en Ultra Turrax (IKA) homogenisator under anvendelse af 5 procent (vægt/volumen) olivenolie og 5 procent (vægt/volumen) arabisk gummi i 100 mM fosfatbuffer (pH) 7.0). Enzymatisk ekstrakt (1 ml) eller 0,5 g af den faste biokatalysator blev tilsat til 19 ml af reaktionsblandingen og inkuberet i 20 minutter, 200 rpm ved 37 ◦C. Reaktionen blev afbrudt ved tilsætning af 20 ml acetone-ethanol-opløsning, og de frie fedtsyrer blev titreret i en automatisk titrator (Metrohm 916-Ti-Touch) under anvendelse af 0,04 mol/L NaOH-opløsning. En enhed lipaseaktivitet (U) blev defineret som mængden af enzym, der producerer 1 µmol fedtsyre pr. minut under assaybetingelserne.
3.6.2. Protease aktivitet
Proteaseaktivitet blev kvantificeret ifølge metoden af Charney og Tomarelli [60]. Enzymatisk ekstrakt (0,5 ml) blev tilsat i 0,5 ml af 0,5 procent (w/v) azocaseinopløsning fremstillet med 50 mM acetatbuffer (pH) og inkuberet ved 32 ◦C i 40 min. Reaktionen blev standset ved tilsætning af 0,5 ml tri-chloreddikesyreopløsning 15 % (vægt/volumen), og prøverne blev centrifugeret ved 3000 rpm i 15 minutter. Supernatanten (100 µL) blev tilsat i en 96-mikrotiterplade indeholdende 100 µL 5 M kaliumhydroxid, og absorbansen ved 428 nm blev målt i en mikrotiterpladelæser (SpectraMax, Molecular Devices). Én aktivitetsenhed blev defineret som mængden af enzym, der var i stand til at fremme en enhedsstigning i absorbans pr. minut.
3.6.3. Fugtindhold og pH
Fugtindholdet blev overvåget ved hjælp af en fugtanalysatorbalance (AND MX-50). pH-værdien blev målt på et pH-meter (TECNAL, model TR-107 PT100, Brasilien).
3.7. SDS-SIDE
Elektroforesen blev udført i overensstemmelse med metoden rapporteret af Laemmli [61] i en polyacrylamidgel (5 procent stabling, 15 procent adskillelse, 0,75 mm tykkelse). Prøverne blev blandet i et forhold (1:4) fra en kombination af andirobaoliekage og sojabønne (50:50) med prøvebuffer indeholdende -mercaptoethanol, opvarmet ved 95 ◦C i 5 minutter og påført gelen. Elektroforese blev udført ved 150 V i 30 minutter (Bio-Rad, Hercules, CA, USA), og gelen blev afsløret ved hjælp af Coomassie Blue R-250. En standard proteinmarkør (Bio-rad, Hercules, CA, USA) med en molekylvægt i området fra 10 til 250 kDa blev anvendt.
3.8. Fiskeoliehydrolyse: en potentiel anvendelse
Graden af hydrolyse (DH) af fiskeolie blev målt ved at veje 1 g fiskeolie og tilsætte 25 ml phosphatbuffer pH 7.0 for at verificere den potentielle anvendelse af enzymet i hydrolysen af fiskeolie. Derefter blev 5 ml af den enzymatiske ekstrakt (37 U) i ravfarvede kolber omrørt i 168 timer. Reaktionen blev standset med 20 ml acetone, og de frie fedtsyrer blev titreret i en automatisk titrator med 0,1 M methanolisk KOH. Reaktionsblindprøven blev opnået ved tilsætning af enzymet først ved slutningen af reaktionen.
Graden af hydrolyse (DH) blev beregnet i henhold til ligning (2):
hvor As er prøvens surhedsgrad; Aa er surhedsgraden fra autohydrolyse; Si er forsæbningsindekset.
3.9. Statistisk analyse
Alle eksperimenter blev gentaget tre gange. I hver replikation blev analyserne udført i tre eksemplarer. Resultaterne svarede til gennemsnittet ± standardafvigelsen. Data blev analyseret ved envejsvariansanalysen (ANOVA), hvorimod Tukeys test (p < 0.05) blev brugt til at teste forskelle mellem middelværdier ved hjælp af Sisvar 5.6.
4 konklusioner
Fermenteringsmediet opnået efter blanding af andirobaoliekage og sojaskrå var meget effektivt til lipaseproduktion. Den valgte fermenteringsmatrix var blandingen af andiroba-oliekage og sojaskrå i et 50:50-forhold, hvilket producerede 63,70 U·g -1 lipolytisk aktivitet. Den maksimale lipolytiske aktivitet blev opnået (82,52 U·g −1 ) efter anvendelse af andiroba-oliekage- og sojaskrå-forholdet på 50:50 efter tilskud med Tween 80 (0,001 procent) og sojabønneolie (1,5 procent). I den elektroforetiske analyse blev der påvist bånd af proteiner, der allerede er rapporteret i litteraturen som YL Lip2 (37 og 40 kDa). Den tidligere anvendelse af lipase i oliehydrolyse gav op til 63 procent af hydrolyse efter 24 timer. Denne undersøgelse viste, at det er muligt at producere lipase ved hjælp af biprodukter fra Amazonas-regionen kombineret med sojaskrå og anvende det til fiskeoliehydrolyse for yderligere at producere flerumættede fedtsyrer i en passende proces.
Forfatterbidrag:Konceptualisering, BDR, ACL og MAZC; Metodik, ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL og MAZC; Formel analyse, ASSC, JCSS og FVdN; Efterforskning, ASSC, JCSS og FVdN; Ressourcer, ASSC, JCSS og FVdN; Datakuration, ASSC, JCSS og FVdN; Skrivning—originalt udkast til forberedelse, ASSC, JCSS, FVdN og CECdS; Skrivning – gennemgang og redigering, BDR, CECdS, ACL og MAZC; Supervision, BDR, CECdSACL og MAZC; Projektadministration, BDR, ACL og MAZC; Finansieringsanskaffelse, BDR, ACL og MAZC Alle forfattere har læst og accepteret den offentliggjorte version af manuskriptet.
Anerkendelser: Forfatterne anerkender Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES—Finance Code 001); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); og Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).
Referencer
1. Serra, JL; Rodrigues, AMdC; Freitas, RA; Meirelles, AJdA; Darnet, SH; Silva, LHMd Alternative kilder til olier og fedtstoffer fra Amazonas planter: Fedtsyrer, methylværktøjer, totale carotenoider og kemisk sammensætning. Food Res. Int. 2019, 116, 12-19. [CrossRef] [PubMed]
2. Penido, C.; Conte, FP; Chagas, MS; Rodrigues, CA; Pereira, JF; Henriques, MG Antiinflammatoriske virkninger af naturlige tetranortriterpenoider isoleret fra Carapa guianensis Aublet på zymosan-induceret arthritis hos mus. Inflamm. Res. 2006, 55, 457-464. [CrossRef] [PubMed]
3. Penido, C.; Costa, KA; Pennaforte, RJ; Costa, MF; Pereira, JF; Siani, AC; Henriques, MG Anti-allergiske virkninger af naturlige tetranortriterpenoider isoleret fra Carapa guianensis Aublet på allergen-induceret vaskulær permeabilitet og hyperalgesi. Inflamm. Res. 2005, 54, 295-303. [CrossRef]
4. Santos, KIP; Benjamin, JKF; Costa, KAD; Reis, AS; Souza Pinheiro, WB; Santos, AS Metabolomics-teknikker anvendt i undersøgelsen af phenolsyrer fra det agroindustrielle biprodukt af Carapa guianensis Aubl. arabisk. J. Chem. 2021, 14, 103421. [CrossRef]
5. Lourenço, JNP; Ferreira, LMM; Martins, GC; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brasilien, 2017; s. 36.
6. Økologisk, S. Óleo de Andiroba.
7. Conab. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: Brasília, Brasilien, 2017; Bind 1, s. 67.
8. Souza, CR; Lima, RMB; Azevedo, CP; Rossi, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: Brasilia, Brasilien, 2006; 21 s.
9. Oliveira, F.; Souza, CE; Peclat, VROL; Salgado, JM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ; Venâncio, A.; Belo, I. Optimering af lipaseproduktion af Aspergillus ibericus fra oliekager og dens anvendelse i esterificeringsreaktioner. Food Bioprod. Behandle. 2017, 102, 268-277. [CrossRef]
10. Pandey, A. Fermentering i fast tilstand. Biochem. Eng. J. 2003, 13, 81-84. [CrossRef]
11. Martínez, O.; Sánchez, A.; Font, X.; Barrena, R. Forbedring af bioproduktionen af værditilvækst aromaforbindelser via faststoffermentering af sukkerrørsbagasse og sukkerroemelasse: Operationelle strategier og opskalering af processen. Bioressource. Teknol. 2018, 263, 136-144. [CrossRef] [PubMed]
12. Ano, T.; Jin, GY; Mizumoto, S.; Rahman, MS; Okuno, K.; Shoda, M. Faststoffermentering af lipopeptidantibiotikum iturin A ved anvendelse af et nyt faststoffermenteringsreaktorsystem. J. Environ. Sci. 2009, 21 (Suppl. S1), S162–S165. [CrossRef]
13. Vandenberghe, LPS; Karp, SG; Oliveira, PZ; Carvalho, JC; Rodrigues, C.; Soccol, CR Kapitel 18 — Faststofgæring til produktion af organiske syrer. I den aktuelle udvikling inden for bioteknologi og bioteknik; Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, red.; Elsevier: Amsterdam, Holland, 2018; s. 415–434.
14. Sala, A.; Vittone, S.; Barrena, R.; Sánchez, A.; Artola, A. Scanning af agroindustrielt affald som substrater for svampebiopesticidproduktion: Anvendelse af Beauveria bassiana og Trichoderma harzianum i faststoffermentering. J. Environ. Manag. 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]
15. Banat, IM; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfactants: Den grønne generation af specialkemikalier og potentiel produktion ved hjælp af Solid-State fermentation (SSF) teknologi. Bioressource. Teknol. 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]
16. Pereira, AS; Sant'Ana, GCF; Amaral, PFF Mango agroindustrielt affald til lipaseproduktion fra Yarrowia lipolytica og potentialet af det fermenterede faste stof som biokatalysator. Food Bioprod. Behandle. 2019, 115, 68-77. [CrossRef]
17. Brígida, AIS; Amaral, PFF; Coelho, MAZ; Gonçalves, LRB Lipase fra Yarrowia lipolytica: Produktion, karakterisering og anvendelse som en industriel biokatalysator. J. Mol. Catal. B Enzym. 2014, 101, 148-158. [CrossRef]
18. Treichel, H.; Oliveira, D.; Mazutti, MA; Di Luccio, M.; Oliveira, JV En anmeldelse af mikrobiel lipaserproduktion. Food Bioprocess Technol. 2010, 3, 182-196. [CrossRef]
19. Mehta, A.; Guleria, S.; Sharma, R.; Gupta, R. 6—Lipaserne og deres anvendelser med vægt på fødevareindustrien. I mikrobiel bioteknologi i fødevarer og sundhed; Ray, RC, red.; Academic Press: Cambridge, MA, USA, 2021; s. 143–164.
20. Aarthy, M.; Saravanan, P.; Ayyadurai, N.; Gowthaman, MK; Kamini, NR En to-trins proces til fremstilling af omega 3-flerumættede fedtsyrekoncentrater fra sardinolie ved hjælp af Cryptococcus sp. MTCC 5455 lipase. J. Mol. Catal. B Enzym. 2016, 125, 25-33. [CrossRef]
21. Nascimento, FV; Castro, AM; Secchi, AR; Coelho, MAZ Indsigt i medietilskud i faststoffermentering af sojabønneskaller af Yarrowia lipolytica: Indvirkning på lipaseproduktion i bakken og isolerede bioreaktorer med pakket leje. Biochem. Eng. J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]
22. Salg, JCS; Castro, AM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Supplement af vandmelonskræller som en forstærker af lipase- og esteraseproduktion af Yarrowia lipolytica i faststoffermentering og deres potentielle anvendelse som biokatalysatorer i poly(ethylenterephthalat) (PET) depolymeriseringsreaktioner. Biocatal. Biotransform. 2020, 38, 457-468. [CrossRef]
23. Aguieiras, EKG; de Barros, DSN; Fernandez-Lafuente, R.; Freire, DMG Produktion af lipaser i bomuldsfrømel og anvendelse af det fermenterede faste stof som biokatalysator i esterificerings- og transesterificeringsreaktioner. Forny. Energi 2019, 130, 574–581. [CrossRef]
24. Souza, CEC; Farias, MA; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Tilføjelse af værdi til agroindustrielle biprodukter fra ekstraktion af raps- og sojaolie gennem lipaseproduktion ved hjælp af Yarrowia lipolytica i fast tilstandsfermentering. Valorisering af affaldsbiomasse 2017, 8, 1163-1176. [CrossRef]
25. Han, H.; Li, Y.; Zhang, L.; Ding, Z.; Shi, G. Forståelse og anvendelse af Bacillus nitrogenregulering: Et syntetisk biologiperspektiv. J. Adv. Res. 2022; I tryk. [CrossRef]
26. Almeida, AF; Taulk-Tornisielo, SM; Carmona, EC Indflydelse af kulstof- og nitrogenkilder på lipaseproduktion af en nyligt isoleret Candida Viswanathan-stamme. Ann. Microbiol. 2013, 63, 1225-1234. [CrossRef]
27. Salihu, A.; Alam, MZ; AbdulKarim, MI; Salleh, HM Lipaseproduktion: En indsigt i udnyttelsen af fornybare landbrugsrester. Ressource. Conserv. Genbruge. 2012, 58, 36-44. [CrossRef]
28. Liu, X.; Yu, X.; Han, A.; Xia, J.; Han, J.; Deng, Y.; Xu, N.; Qiu, Z.; Wang, X.; Zhao, P. One-pot fermentering til produktion af erythritol fra destilleriets korn ved co-dyrkning af Yarrowia lipolytica og Trichoderma reesei. Bioressource. Teknol. 2022, 351, 127053. [CrossRef] [PubMed]
29. Wang, W.; Wei, H.; Alahuhta, M.; Chen, X.; Hyman, D.; Johnson, DK; Zhang, M.; Himmel, ME Heterolog ekspression af xylanase-enzymer i lipogen gær Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [CrossRef] [PubMed]
30. Nascimento, FVd; Lemes, AC; Castro, AMd; Secchi, AR; Zarur Coelho, MA A Temporal Evolution Perspective of Lipase Production by Yarrowia lipolytica in Solid-State Fermentation. Processer 2022, 10, 381. [CrossRef]
31. Mandari, V.; Nema, A.; Devarai, SK Sekventiel optimering og storskalaproduktion af lipase ved hjælp af tri-substratblanding fra Aspergillus niger MTCC 872 ved faststoffermentering. Process Biochem. 2020, 89, 46-54. [CrossRef]
32. Mala, JG; Edwinoliver, NG; Kamini, NR; Puvanakrishnan, R. Blandet substrat-faststoffermentering til produktion og ekstraktion af lipase fra Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. Microbiol. 2007, 53, 247-253. [CrossRef]
33. Barth, G.; Gaillardin, C. Yarrowia lipolytica. I ikke-konventionel gær i bioteknologi; Wolf, K., red.; Springer: New York, NY, USA, 1996; s. 313-388.
34. Moftah, OA; Grbavˇci´c, S.; Zuza, M.; Lukovic, N.; Bezbradica, D.; Kneževi´c-Jugovi´c, Z. Værditilvækst til oliekagen som affald fra olieforarbejdningsindustrien: Produktion af lipase og protease af Candida, der anvendes i faststoffermentering. Appl. Biochem. Biotechnol. 2012, 166, 348-364. [CrossRef]
35. Contesini, FJ; da Silva, VC; Maciel, RF; de Lima, RJ; Barros, FF; de Oliveira Carvalho, P. Respons overfladeanalyse til produktion af en enantioselektiv lipase fra Aspergillus niger ved faststoffermentering. J. Microbiol. 2009, 47, 563-571. [CrossRef]
36. Rigo, E.; Ninow, JL; Di Luccio, M.; Oliveira, JV; Polloni, AE; Remonatto, D.; Arbter, F.; Vardanega, R.; Oliveira, D.; Treichel, H. Lipaseproduktion ved fast fermentering af sojaskrå med forskellige kosttilskud. LWT Food Sci. Teknol. 2010, 43, 1132-1137. [CrossRef]
37. Sun, SY; Xu, Y. Fermentering i fast tilstand til produktion af 'helcellet syntetisk lipase' fra Rhizopus chinensis og identifikation af det funktionelle enzym. Process Biochem. 2008, 43, 219-224. [CrossRef]
38. Farias, MA; Valoni, EA; Castro, AM; Coelho, MAZ Lipaseproduktion af Yarrowia Lipolytica i solid state-fermentering ved hjælp af forskellige agro-industrielle rester. Chem. Eng. Trans. 2014, 38, 301-306.
39. Sidhu, P.; Sharma, R.; Soni, SK; Gupta, JK Produktion af ekstracellulær alkalisk lipase af en ny termofil Bacillus sp. Folia Microbiol. 1998, 43, 51-54. [CrossRef]
40. Corzo, G.; Revah, S. Produktion og karakteristika af lipasen fra Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. Teknol. 1999, 70, 173-180. [CrossRef]
41. Souza, CEC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Karakterisering og anvendelse af Yarrowia lipolytica-lipase opnået ved SolidState-fermentering i syntesen af forskellige estere, der anvendes i fødevareindustrien. Appl. Biochem. Biotechnol. 2019, 189, 933-959. [CrossRef]
42. Fickers, P.; Fudalej, F.; Dall, MTL; Casaregola, S.; Gaillardin, C.; Thonart, P.; Nicaud, JM Identifikation og karakterisering af LIP7- og LIP8-gener, der koder for to ekstracellulære triacylglycerollipaser i gæren Yarrowia lipolytica. Svampegenet. Biol. 2005, 42, 264-274. [CrossRef]
43. Cheng, Y.-H.; Hsiao, FS-H.; Wen, C.-M.; Wu, C.-Y.; Dybus, A.; Yu, Y.-H. Blandet fermentering af sojaskrå med protease og probiotika og dets virkninger på vækstpræstation og immunrespons hos slagtekyllinger. J. Appl. Anim. Res. 2019, 47, 339-348. [CrossRef]
44. Chakraborty, K.; Paul Raj, R. Selektiv berigelse af n-3 flerumættede fedtsyrer med C18-C20 acylkædelængde fra sardinolie ved hjælp af Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipase. Food Chem. 2009, 114, 142-150. [CrossRef]
45. Zarai, Z.; Eddehech, A.; Rigano, F.; Oteri, M.; Micalizzi, G.; Dugo, P.; Mondello, L.; Cacciola, F. Karakterisering af monoacylglyceroler og diacylglyceroler rige på flerumættede fedtsyrer produceret ved hydrolyse af Musteleus mustelus leverolie katalyseret af immobiliseret bakteriel lipase. J. Chromatogr. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]
46. Yang, J.; Sang, X.; Wang, L.; Cui, Q. Omfattende analyse af metaboliske ændringer i Schizochytrium sp. stammer med forskelligt DHA-indhold. J. Chromatogr. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]
47. Yang, Z.; Jin, W.; Cheng, X.; Dong, Z.; Chang, M.; Wang, X. Enzymatisk berigelse af n-3 flerumættede fedtsyreglycerider ved selektiv hydrolyse. Food Chem. 2021, 346, 128743. [CrossRef]
48. Okada, T.; Morrissey, MT Produktion af n-3 flerumættet fedtsyrekoncentrat fra sardinolie ved hjælp af immobiliseret Candida rugosa-lipase. J. Food Sci. 2008, 73, C146-C150. [CrossRef]
49. Riediger, ND; Othman, RA; Suh, M.; Moghadasian, MH En systemisk gennemgang af n-3 fedtsyrers roller i sundhed og sygdom. J. Am. Kost. Assoc. 2009, 109, 668-679. [CrossRef] [PubMed]
50. Gao, K.; Chu, W.; Sun, J.; Mao, X. Identifikation af en alkalisk lipase, der er i stand til bedre at berige EPA end DHA på grund af fedtsyreselektivitet og regioselektivitet. Food Chem. 2020, 330, 127225. [CrossRef]
51. Martins, PA; Trobo-Maseda, L.; Lima, FA; de Morais Júnior, WG; De Marco, JL; Salum, TFC; Guisán, JM Omega-3-produktion ved fiskeoliehydrolyse ved anvendelse af lipase fra Burkholderia gladioli BRM58833 immobiliseret og stabiliseret ved postimmobiliseringsteknikker. Biochem. Biofys. Rep. 2022, 29, 101193. [CrossRef] [PubMed]
52. Lemes, AC; Egea, MB; Oliveira Filho, JGd; Gautério, GV; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Biologiske tilgange til udvinding af bioaktive forbindelser fra agroindustrielle biprodukter: En gennemgang. Foran. Bioeng. Biotechnol. 2022, 9, 1-18. [CrossRef] [PubMed]
53. Lemes, AC; Sala, L.; Ores, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF En gennemgang af de seneste fremskridt inden for krypterede bioaktive peptider fra proteinrigt affald. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef]
54. Lemes, AC; Coelho, MAZ; Gautério, GV; Paula, LC; Filho, JGdO; Egea, MB Kapitel 11—Industrielt affald og biprodukter: En kilde til funktionelle fødevarer, nutraceuticals og biopolymerer. I biopolymerer i nutraceuticals og funktionelle fødevarer; The Royal Society of Chemistry: London, Storbritannien, 2023; s. 329-360.
55. Pintado, ME; Teixeira, JA Valorização de subprodutos da industria alimentar: Obtenção de ingredienser de valor acrescentado. Bol. Bioteknol. 2015, 1, 10-12.
56. Hagler, AN; Mendonça-Hagler, LC Gær fra hav- og flodmundinger med forskellige niveauer af forurening i staten Rio de Janeiro, Brasilien. Appl. Environ. Microbiol. 1981, 41, 173-178. [CrossRef]
57. AOAC. AOAC Internationals officielle analysemetoder; Association of Official Analytical Chemists: Washington, DC, USA, 1995.
58. Castro, AMd; Castilho, LdR; Freire, DMG Karakterisering af babassu-, raps-, ricinusfrø- og solsikkekager til brug som råmaterialer til fermenteringsprocesser. Ind. Afgrøder Prod. 2016, 83, 140-148. [CrossRef]
59. Freire, DM; Teles, EM; Bon, EP; Sant' Anna, GL, Jr. Lipaseproduktion af Penicillium begrænset i en bench-scale fermentor: Effekt af kulstof og nitrogen ernæring, agitation og beluftning. Appl. Biochem. Biotechnol. 1997, 63-65, 409-421. [CrossRef]
60. Charney, J.; Tomarelli, RM En kolorimetrisk metode til bestemmelse af den proteolytiske aktivitet af duodenal juice. J. Biol. Chem. 1947, 171, 501-505. [CrossRef] [PubMed]
61. Laemmli, UK Spaltning af strukturelle proteiner under samlingen af lederen af Bacteriophage T4. Nature 1970, 227, 680–685. [CrossRef] [PubMed]
Ansvarsfraskrivelse/Udgiverens note:Udtalelserne, meningerne og dataene i alle publikationer er udelukkende de enkelte forfatter(e) og bidragyder(e) og ikke fra MDPI og/eller redaktør(erne). MDPI og/eller redaktørerne fraskriver sig ansvaret for enhver skade på personer eller ejendom som følge af ideer, metoder, instruktioner eller produkter, der henvises til i indholdet.
【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
