Ekstraktionsparametre og tørremetoder for Cistanche Deserticola

Cistanche er Cistanche deserticola YC Ma ellerCistanche tubulosa (Schenk) Wighttør kødfuld stilk med skællende blade af Orobanchiaceae-plantenCistanche deserticola YC Ma[1]. Den vigtigste aktive ingrediens i Cistanche deserticola er phenylethanolglycosider [2-4]. Farmakologiske undersøgelser har vist, at det har funktionerne somafrodisiakum, forbedring af immuniteten, ogforbedre hukommelsen[4-9].

I de senere år er responsoverflademetodologi blevet brugt i vid udstrækning i udvindingen af ​​traditionel kinesisk medicin [{{0}}]. Responsoverflademetoden har de iboende fordele med høj detektionsnøjagtighed, mindre antal nødvendige eksperimenter, nøjagtig forudsigelse af funktionsmodeller og evnen til at afspejle forholdet mellem faktorer og forudsagte værdier [15-17]. Derfor bruger dette eksperiment den omfattende score af indholdet af de fem phenylethanolglycosider som responsværdi og bruger Design-Expert 8.0.6.1 software til at designe eksperimentet, optimere ekstraktionsprocessen af ​​Cistanche deserticola og give information til identifikation og etablering af kvalitetsstandarder forCistanche deserticola.

I øjeblikket er indeksetkomponenter echinaceaside og verbascosideer varme forskningsemner inden for udvindings- og forarbejdningsteknologi afCistanche deserticola. 2015-udgaven af ​​den kinesiske farmakopé bestemmer, at behandlingsmetoden for Cistanche deserticola er "fjern urenheder, vask, fugt, skær i tykke skiver og tør." [1], er der ingen klare regler for tørremetoden. Derfor brugte dette eksperiment otte forskellige tørremetoder, herunder soltørring, skyggetørring, ovntørring (40, 60, 80, 100, 120 grader) og frysetørring, til at behandle Cistanche deserticola [18], hvilket gav teoretisk grundlag for tørreproces af Cistanche deserticola.

På vejledning.

CISTANCHE EKSTRAKT MED 30% ECHINCAOSIDE

1 Materialer og instrumenter

Frisk Cistanche deserticola blev høstet i oktober 2018. Oprindelsesstedet er Mitan Township, Minqin County, Baiyin, Gansu-provinsen. Lektor Guo Yehong fra Gansu Agricultural University identificerede den som Cistanche deserticola YC Ma, en kødfuld stilk med skælblade. Referencestoffer echinaceaside (batchnummer 82854-37-3, massefraktion større end eller lig med 98 %), cistancheaside A (batchnummer 93236-42-1, massefraktion større end eller lig med 95 %), verbascoside (batchnummer { {5}}, massefraktion større end eller lig med 98 %), isomurabasin (batchnummer 61303-13-7, massefraktion større end eller lig med 98 %), 2'-acetylverbascoside (batchnummer 94492-24-7 , massefraktion større end eller lig med 95%) blev købt fra Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; myresyre og methanol er af kromatografikvalitet, Merck Company i Tyskland; vand er renset vand, og andre reagenser er af analytisk kvalitet.

Waters Acquity væskekromatograf, PDA detektor, Empower kromatografi arbejdsstation og kvartært opløsningsmiddel management system; KQ-100E ultralydsrenser, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Selskab; AL104 analytisk balance, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 frysetørrer, Telstar, Spanien.

2 Metoder og resultater

2.1 Fremstilling af referenceopløsning

Nøjagtig vej de passende mængder afechinaceaside, cistancheosid A, verbascoside, isorbascosid, og 2'-acetyl verbascoside referencestandarder, og tilsæt 70% methanol for at gøre massekoncentrationerne 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 og 0,48 mg/ml blandet referenceopløsning.

2.2 Kromatografiske forhold for Cistanche deserticola

Vandsymmetri C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); kolonnetemperatur 30 grader, volumenstrøm 1,0 mL/min; mobil fase er methanol-0.1% vandig myresyreopløsning, elueringsgradient: 0~12 min, 29%~34% methanol; 12-40 min., 34 %-40 % methanol; 30-35 min, 40 %-35 % methanol; 35-40 min., 30 % methanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteosid 5-2′-acetylacteosid

Fig. 1 HPLC af blandet reference (A) og C. deserticola prøve (B)

2.3 Fremstilling af testopløsning

Vej nøjagtigt 1 g tørret Cistanche deserticola-pulver i en Erlenmeyer-kolbe (passet gennem en 65-maskesigte), tilsæt 50 ml 50% methanol, vej massen, ultralyd ved 40 kHz ved 150 W, afkøl til stuetemperatur , og fyld massen op for at få den.

2.4 Undersøgelse af lineær sammenhæng

Tag {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 og 8 mL af ovenstående blandede referenceopløsning i en 10 mL målekolbe, og tilsæt 70 % methanol til mærket. Træk nøjagtigt 10 μL og mål i henhold til de kromatografiske betingelser for "2.2". Massekoncentrationen er abscissen (X), og toparealet er ordinaten (Y). Udfør lineær regression, og regressionsligningerne er: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, lineært område 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, lineært område 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glycoside Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, lineært område 4,8~384,0 ug/mL.

2.5 Metodegennemgang

2.5.1 Præcisionsinspektion

Tag 20 μL af den blandede referenceopløsning i punkt "2.1" og injicer 6 gange kontinuerligt for at måle toparealerne af echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascosid og 2'-acetylverbascosid. RSD'erne er henholdsvis 0.23 %. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, hvilket indikerer, at instrumentet har god præcision.

2.5.2 Repeterbarhedstest

Tag 6 portioner af den samme Cistanche deserticola-prøve, klargør testopløsningen i henhold til punkt "2.3", injicer prøven under de kromatografiske betingelser i punkt "2.2", og mål toparealet. Resultater De gennemsnitlige massefraktioner af echinaceaside, cistancheosid A, verbascosid, isorebascosid og 2'-acetyl verbascosid var 1,83 %, 0,21 %, 2,34 %, 0,13 % og {{15 }},68% henholdsvis, og RSD'erne var henholdsvis 1,32. %, 0,83 %, 1,24 %, 2,19 %,

0.78 %, hvilket indikerer, at metoden har god repeterbarhed.

2.5.3 Stabilitetstest

Bestem stabiliteten af ​​den samme testopløsning (fremstillet i henhold til "2.3") ved 0, 2, 4, 8, 12, 24 og 48 timer for at opnå echinaceaside, cistancheosid A, verbascoside og isolebascosid. , 2'-acetyl verbascoside topareal, RSD var henholdsvis 0.58%, 0.21%, 1.58%, 1.46%, 2.19%, hvilket indikerer, at testopløsningen var stabil inden for 48 timer.

2.5.4 Prøvegenvindingstest

Tag 1 g af 6 Cistanche deserticola-prøver med kendt indhold, og tilsæt nøjagtigt en vis mængde blandet referenceopløsning (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheosid A 0.86 mg /ml, Verbascoside 2,17 mg/mL, Isolebascoside 0,79 mg/ml, 2'-acetyl verbascoside 0,91 mg/mL), tilsæt 70 % methanol for at fylde op til 50 ml, og injicer prøver i henhold til de kromatografiske betingelser i "2.2". De gennemsnitlige målte inddrivelser er henholdsvis 101,52 %, 99,21 % og 102,62 %. , 98,62%, 97,36%, RSD er henholdsvis 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13%, og prøvegenvindingshastigheden er god.

Cistanche er en velkendt styrkende urt, der kan nære og beskytte nyrerne. I traditionel kinesisk medicinteori er Cistanche den bedste urt til nyrer. Cistanche er rig på echinacosid, acteosid og flavonoider. Disse effektive ingredienser i Cistanche kan reducere nyrecelleapoptose og øge nyrecelleproliferation. Derfor er Cistanche et naturligt nyretilskud.