Enteral ferricitratabsorption er afhængig af jerntransportproteinet Ferroportin

Abstrakt

Jerncitrat er godkendt som et jernerstatningsprodukt til patienter med ikke-dialyse kronisk nyresygdom og jernmangelanæmi. Jern-citrat-leveret jern absorberes enteralt, men de specifikke involverede mekanismer er ikke blevet evalueret, herunder mulighederne for konventionel, transcellulær ferroportin-medieret absorption og/eller citrat-medieret paracellulær absorption. Her demonstrerer vi først effektiviteten af ​​ferricitrat i modeller med høj hepcidin, herunder Tmprss6 knockout-mus (karakteriseret ved jern-ildfast jernmangelanæmi) med og uden adenin diæt-induceret kronisk nyresygdom. For at vurdere, om enteral ferricitratabsorption er afhængig af ferroportin eller ej, evaluerede vi virkningerne af ferricitrat i en tamoxifen-inducerbar, enterocytspecifik ferroportin knockout murin model (Villin-Cre-ERT2, Fpn flox/flox). I denne model var ferroportin-deletion effektiv, da tamoxifen-injektion inducerede et 4000-fold fald i duodenum ferroportin-mRNA-ekspression med ikke-detekterbart ferroportinprotein på et Western blot af duodenale enterocytter, hvilket resulterede i en alvorlig jernmangelanæmi-fænotype. Hos ferroportin-mangelmus forbedrede tre ugers kosttilskud på 1 procent ferricitrat, en dosis, der forhindrede jernmangel hos kontrolmus, ikke jernstatus eller reddede jernmangelanæmi-fænotypen. Vi gentog det betingede ferroportin knockout-eksperiment i forbindelse med uræmi, ved at bruge en adenin nefropati-model, hvor tre uger med 1 procent ferricitrat kosttilskud igen ikke formåede at forbedre jernstatus eller redde jernmangelanæmi-fænotypen. Vores data tyder således på, at enteral ferricitratabsorption er afhængig af konventionel enterocytjerntransport af ferroportin, og at der i disse modeller ikke forekommer signifikant paracellulær absorption.

Nøgleord

ferricitrat; ferroportin; hepcidin; jern; anæmi; kronisk nyresygdom.

Klik her for at vide, hvad Cistanche har på nyrerne

Introduktion

Auryxia (ferric citrate [FC]; Akebia Therapeutics, Inc., Cambridge, MA) er en ny forbindelse, der er godkendt til klinisk brug som en enteral fosfatbinder hos voksne patienter med kronisk nyresygdom (CKD) i dialyse. I randomiserede, placebo-kontrollerede undersøgelser udført i ikke-dialyseafhængige CKD-patienter, reducerede FC serumfosfatkoncentrationerne signifikant.1,2 I randomiserede, aktivt kontrollerede forsøg udført i dialyseafhængige CKD-patienter producerede FC lignende reduktioner i serumfosfatkoncentrationer. .3,4

Auryxia er også godkendt i USA til klinisk brug som et jernerstatningsprodukt hos CKD-ikke-dialysepatienter med jernmangelanæmi. I de 4 førnævnte randomiserede kontrollerede forsøg, udført i både ikke-dialyseafhængige og dialyseafhængige CKD-kohorter, øgede FC signifikant serumtransferrinmætning (TSAT).1-4 Således kan FC fungere som både en effektiv enteral fosfatbinder og en enteral jernkilde.

Det er bemærkelsesværdigt, at FC korrigerer en jernmangel i forbindelse med CKD og endda nyresygdom i slutstadiet, da disse er tilstande med høje hepcidinniveauer. kendt cellulær jerneksportør.9 Ved høje hepcidin-niveauer er aktiviteten af ​​ferroportin – placeret på den basale overflade af enterocytter – nedsat, hvilket hæmmer kostens og medicinske jernabsorption fra det gastrointestinale lumen 10.

Mekanismerne, hvorved FC overvinder den enterale jernblok induceret af høje hepcidin- og lave ferroportinniveauer, er uklare. En hypotese er, at citratdelen i FC chelaterer calciumioner, hvilket fører til forstyrrelse af intercellulære tight junctions mellem enterocytter, hvilket muliggør paracellulær jernabsorption, der er uafhængig af hepcidin-ferroportin-vejen. Et interessant punkt at bemærke er, at citratforbindelser er blevet bemærket for at lette paracellulær enteral absorption af aluminium,11,12, hvilket øger muligheden for, at jernabsorption forbedres af den samme mekanisme. For at vurdere, om FC-associeret enteral jernabsorption sker via en transcellulær, ferroportin-afhængig rute, versus en paracellulær, ferroportin-uafhængig rute, evaluerede vi enteral FC-absorption i murine modeller, med eller uden CKD, med lav eller fraværende enterocyt ferroportin-aktivitet.

Cistanche tillæg

METODER

1. Museksperimenter

Eksperimenter blev udført af University of California, Los Angeles (UCLA) Division of Laboratory Animal Medicine retningslinjer, og undersøgelsesprotokollerne blev godkendt af UCLA Office of Animal Research Oversight. Musene blev anbragt på UCLA i standardbure med strøelse af træflis, der blev skiftet to gange om ugen. Dyrestalde var temperatur- og fugtkontrollerede med en 12-timers lyscyklus. Vi vurderede først virkningerne af FC i transmembran serinprotease 6 (Tmprss6) knockout-mus, en model karakteriseret ved høje hepcidinniveauer, lav ferroportinaktivitet og resulterende jern-ildfast jernmangelanæmi13 både uden og med tilsætning af adenin-diæt -induceret CKD, som yderligere øger hepcidinniveauerne.14 For fuldstændigt at hæmme enteral ferroportinaktivitet vurderede vi derefter virkningerne af FC i en tamoxifen-inducerbar, enterocytspecifik ferroportin (FPN) knockout-model (Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox). Endelig vurderede vi virkningerne af FC i en Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox-model med adenin diæt-induceret CKD.

2. Tmprss6 knockout-mus

Tmprss6 knockout-mus på en C57BL/6 genetisk baggrund blev venligt leveret af Dr. Jodie Babitt (Massachusetts General Hospital). Vi vurderede først virkningerne af FC i Tmprss6 knockout-mus og vildtype (WT) kuldkammerater uden CKD. Mus i alderen 4-7 uger blev fodret med 50 ppm jerndiæter uden adenin (Envigo, Hackensack, NJ) med eller uden 0.1 procent FC (Akebia Therapeutics, Inc.) i 3 uger , og blev derefter aflivet. Vi vurderede derefter virkningerne af FC i Tmprss6 knockout-mus og WT-kuldkammerater med CKD. Mus i alderen 8-12 uger blev fodret med 50 ppm jerndiæter med 0,2 procent adenin (Envigo) for at inducere CKD,15-17 i 6 uger. I de sidste 3 uger af diæterne blev 0,1 procent FC (Akebia Therapeutics, Inc.) tilføjet for én gruppe og ikke tilføjet for en anden. Denne FC-dosis i mus svarer til en typisk voksen human FC-dosis; hos et voksent menneske indeholder 2 Auryxia-tabletter taget tre gange dagligt (6000 mg FC) en kumulativ daglig jerndosis på 1260 mg, en mængde svarende til ca. en tredjedel af kroppens samlede jern. Hos mus svarer ca. en tredjedel af det samlede jern i kroppen til ~0,8 mg jern-(III)-jern dagligt eller ~4 mg FC dagligt, hvilket givet et murint dagligt foderforbrug på ~4 g, svarer til foder, der indeholder 0,1 procent FC. I disse eksperimenter indeholdt hver gruppe ca. halvdelen hanner og halvdelen hunner. Efter aflivning indsamlede vi fuldblod, serum, lever og duodenale enterocytter. For at isolere duodenale enterocytter blev den proksimale sektion af duodenum (~2 cm) skåret op på langs og overført til iskold ethylendiamintetraeddikesyreopløsning. Opløsningen blev hvirvelbehandlet for at lette celleløsning, og de dispergerede celler blev opsamlet ved filtrering.

3. Ikke-CKD enterocyt-specifikke ferroportin knockout mus

Tamoxifen-inducerbare, enterocyt-specifikke ferroportin (FPN) knockout-mus blev genereret ved at avle Villin-Cre-ERT2-mus med Fpnflox/flox-mus, som begge er på C57BL/6 genetiske baggrunde. Villin-Cre-ERT2-mus blev venligst stillet til rådighed af Dr. Peter Tontonoz (UCLA). For at karakterisere denne model vurderede vi Fpnflox/flox-mus, med eller uden VillinCre-ERT2, med eller uden tamoxifen-induktion (0.075 mg/g kropsvægt, injiceret ip én gang dagligt i 4 på hinanden følgende dage; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). For at vurdere virkningerne af FC i denne model brugte vi Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox-mus i alderen 6-8 uger, der blev ip injiceret med enten solsikkeolievehikel (uinduceret gruppe) eller tamoxifen (0,075 mg/g kropsvægt; induceret gruppe) én gang dagligt i 4 på hinanden følgende dage. Mus blev holdt på 50 ppm jerndiæter (Envigo) og blev derefter aflivet 7 uger efter injektion. Nogle af de tamoxifen-inducerede mus fik tilsat 1 procent FC til deres diæter i de 3 uger umiddelbart før aflivning. I disse eksperimenter blev 1 procent FC - en suprafysiologisk dosis - valgt for ikke at gå glip af en effekt sekundært til utilstrækkelig FC-dosering. For at demonstrere effektiviteten af ​​denne dosis udførte vi et separat positivt kontroleksperiment, hvor vi vurderede, om 3 uger med 1 procent FC kosttilskud kan redde jernmangelanæmi-fænotypen i uinducerede Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox-mus fodret med en jernfattig (4 ppm) diæt (Envigo). I de ikke-CKD enterocytspecifikke ferroportin knockout-eksperimenter indeholdt hver gruppe både hanner og hunner. Efter aflivning indsamlede vi fuldblod, serum, lever, duodenale enterocytter og hele duodenum til jernfarvning. Duodenale enterocytter blev isoleret som beskrevet ovenfor. Til duodenal jernfarvning blev proksimale duodenale prøver fikseret i formalin og derefter indlejret i paraffinblokke, hvorfra objektglas blev skabt. Afparaffiniserede sektioner blev farvet med Perls Prussian blue farvning for non-heme jern og modfarvet med nuklear fast rød. Graden af ​​duodenal enterocytjernfarvning blev vurderet på en semikvantitativ skala af en blindet anmelder (SN).

4. CKD enterocyt-specifikke ferroportin knockout mus

For at gentage ovenstående eksperiment i forbindelse med CKD, blev han Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox-mus i alderen 6 uger startet på 0.2 procent adenin-diæter (Envigo) for at inducere CKD. I betragtning af kønsforskelle i den adenin-diæt-inducerede gnaver-CKD-model (hunner er mere modstandsdygtige over for virkningerne af adenin i kosten),18 blev kun hanmus brugt. I en alder af 8 uger blev mus ip injiceret, som beskrevet ovenfor, med solsikkeolievehikel eller tamoxifen. I en alder af 12 uger, efter 6 ugers adenin-diæt, blev mus skiftet til standard, ikke-adenin, 50 ppm jerndiæt med eller uden 1 procent FC tilsat. Mus blev aflivet i en alder af 15 uger, 7 uger efter injektion og efter 3 ugers behandling med eller uden FC. Fuldblod til måling af hæmoglobin og røde blodlegemer blev opsamlet, når mus var 8 uger gamle (på tidspunktet for injektion), 12 uger (ved påbegyndelse af diæter med eller uden FC) og 15 uger (ved aflivning). Serum til urea-nitrogen- og jernmåling blev opsamlet, når musene var 12 og 15 uger gamle. Lever- og duodenale enterocytter blev opsamlet, som beskrevet ovenfor, ved aflivning.

Herba Cistanche

5. Blodanalyser

Komplet blodtal blev målt med Hemavet 950 automatiserede processor (Drew Scientific, Oxford, CT). Kolorimetriske metoder blev anvendt til at analysere serumurinstofnitrogen (BioAssay Systems, Hayward, CA) og serumjern (Genzyme, Cambridge, MA). In-house enzym-linked immunosorbent assays (ELISA) blev brugt til at måle serum hepcidin niveauer, som tidligere beskrevet.19 Et kommercielt tilgængeligt ELISA kit blev brugt til at måle serum erythropoietin (R&D Systems, Minneapolis, MN).

6. Kvantitative leverjernkoncentrationer

Høstede lever blev lynfrosset i flydende nitrogen og opbevaret ved -80 grader. Små stykker af leveren (~100 mg) blev vejet og homogeniseret. En proteinfældningsopløsning (0,53 N HCI og 5,3 procent trichloreddikesyre i dobbeltdestilleret vand) blev tilsat, og prøverne blev kogt og centrifugeret. Jernkoncentrationer i supernatanterne blev målt ved et kolorimetrisk assay (Genzyme), derefter normaliseret til vægten af ​​de originale prøver for at give vævsjernkoncentrationer.

7. Kvantitativ realtidspolymerasekædereaktion (PCR)

Duodenale enterocytter blev homogeniseret i Trizol (Invitrogen, Waltham, MA), og RNA blev isoleret ifølge producentens protokol. Vi udførte kvantitativ revers transkription (RT)-PCR ved hjælp af iScript RT-PCR-kittet (Bio-Rad, Hercules, CA) og primere, der er specifikke for muse-Fpn (fremad: 5'-ATGGGAACTGTGGCCTTCAC-3'; omvendt: 5' -TCCAGGCATGAATACGGAGA-3'). Vi brugte følgende PCR-betingelser: indledende denaturering ved 95 grader i 2 minutter, efterfulgt af 40 cyklusser af denaturering ved 94 grader i 30 sekunder, annealing ved 58 grader i 30 sekunder, forlængelse ved 72 grader i 1 minut og endelig forlængelse ved 72 grad i 10 minutter. Genekspression blev normaliseret til den for hypoxanthin-guanin-phosphoribosyltransferase (Hprt) (fremad: 5'-CTGGTTAAGCAGTACAGCCCCAA-3'; omvendt: 5'-CAGGAGGTCCTTTTCACCAGC-3'), og hver RNA-prøve blev analyseret i dupRNA-prøve . Relativ fold-genekspression blev beregnet ved anvendelse af delta-delta Ct-metoden.

8. Vestlig blotting

Til påvisning af ferritinprotein på Western blot var det anvendte primære antistof kanin-anti-muse FTH1 (D1D4; Cell Signaling Technology, Danvers, MA), i en koncentration på 1:10,000, og det anvendte sekundære antistof var ged anti-kanin IgG (Cell Signaling Technology), i en koncentration på 1:5000. Til ferroportin-påvisning på Western blot var det primære antistof, der blev anvendt, rotte-anti-muse-FPN (1C7; Amgen, Thousand Oaks, CA), i en koncentration på 1:3300, og det anvendte sekundære antistof var kanin-anti-rotte-IgG (ab102213; Abcam, Cambridge, MA), i en koncentration på 1:5000. Til actinproteinbelastningskontrollen blev der anvendt muse-anti-actin-antistof (A3854; Sigma-Aldrich) i en koncentration på 1:50.000. Et kemiluminescerende signal blev detekteret ved anvendelse af ChemiDoc XRS plus-systemet med Image Lab-software (Bio-Rad).

9. Statistisk analyse

Figuroprettelse og statistisk analyse blev udført ved hjælp af Graph-Pad Prism 9.2.0 (San Diego, CA). Musedata præsenteres som middelværdier ± SD'er, og t-test blev brugt til at sammenligne gruppemiddelværdier. For ikke-normalfordelte data blev logtransformation anvendt før statistisk analyse. P-værdier < 0.05 blev betragtet som statistisk signifikante.

Cistanche kapsler

DISKUSSION

I kliniske undersøgelser har FC vist sig at korrigere jernmangel hos patienter med CKD og nyresygdom i slutstadiet, som er tilstande med høje hepcidinniveauer.5-8 Ved høje cirkulerende hepcidinkoncentrationer er enteral ferroportinaktivitet nedsat, fremkalder en hepcidin-medieret slimhindeblokering til enteral jernabsorption.9 De mekanismer, hvorved FC kan overvinde denne enterale absorptive blokering, er ukendte. En hypotese er, at citratdelen løsner intercellulære tight junctions, hvilket letter paracellulær, ferroportin-uafhængig enteral jernabsorption. Vi testede denne hypotese ved at vurdere effektiviteten af ​​FC i høj-hepcidin/lav-ferroportin-modeller - med og uden CKD - ​​hvor den transcellulære jernabsorptionsvej er næsten ableret eller fuldstændig blokeret.

I vores første model, Tmprss6 knockout-mus uden CKD, hvor hepcidinniveauerne er let forhøjede, forbedrede FC jernstatus og øgede hæmoglobinkoncentrationer. Tilsvarende i vores WT- og Tmprss6-knockout-modeller med CKD, hvor hepcidinniveauerne er markant forhøjede, øgede FC antallet af røde blodlegemer og hæmoglobin. Disse data viser effektiviteten af ​​FC i tilstande med høje hepcidinniveauer og er i overensstemmelse med hvad der er blevet observeret i FC kliniske undersøgelser; disse modeller antyder imidlertid ikke, hvad mekanismerne er, hvorved FC overvinder den mucosale hepcidinblok.

I disse modeller, hvor ferroportin forbliver intakt, kan FC absorberes via en paracellulær vej, uden om hepcidin-ferroportin-aksen, eller kan absorberes via en transcellulær vej ved at bruge ferroportin. For at evaluere afhængigheden af ​​FC af enteralt ferroportin brugte vi en inducerbar, enterocytspecifik ferroportin knockout murin model. Denne model er yderst effektiv til næsten fuldstændig at udtømme enterocytt ferroportin-protein, hvilket resulterer i drastisk reduceret enteral jernabsorption og alvorlig jernmangelanæmi, en fænotype, der kan reddes ved parenteral jernadministration.26 I denne model er enhver væsentlig bypass af det kanoniske ferroportin -afhængig vej ville være let påviselig.

I vores ikke-CKD-model, i fravær af enterocytt ferroportin, forbedrede en FC-dosis, der havde været effektiv i WT-mus, ikke jernstatus eller reddede jernmangelanæmi-fænotypen. Små stigninger i antallet af røde blodlegemer og hæmoglobin var ikke statistisk signifikante, hvilket tyder på, at enteral FC-absorption overvejende er afhængig af ferroportin, og argumenterer imod omfattende paracellulær absorption. I forbindelse med CKD kan uræmi-associerede faktorer potentielt øge tarmens permeabilitet24, hvilket muligvis løsner intercellulære stramme forbindelser og letter en vis grad af paracellulær FC-absorption. I vores CKD-model forbedrede FC imidlertid jernstatus signifikant i nærvær af enterocyt ferroportin, men ikke i fravær. Disse data tyder på, at selv i forbindelse med CKD, er enteral FC-absorption overvejende medieret af ferroportin-transport og ikke mulige paracellulære veje. Hos de ikke-inducerede CKD-mus øgede FC-behandling duodenum ferroportin-protein på trods af lavere duodenum ferroportin-mRNA-ekspression, i overensstemmelse med en etableret mekanisme, hvorved intracellulær jernakkumulering udløser IRP-medieret de-repression af ferroportin-translation,21-23, hvilket letter cellulær jernabsorption og levering til kredsløbet.

Vi udførte 2 CKD-eksperimenter. Terminalgennemsnitlige serumurinstofnitrogen- og hæmoglobinkoncentrationer var ens mellem WT CKD-kontroldiætgruppen fra det første eksperiment og den ikke-inducerede, ubehandlede CKD-gruppe fra det andet eksperiment. I det første CKD-eksperiment havde WT-mus behandlet med FC imidlertid en signifikant stigning i hæmoglobin, men i det andet CKD-eksperiment havde de ikke-inducerede mus behandlet med FC ikke en signifikant stigning i hæmoglobin. Årsagen til, at FC ikke øgede hæmoglobin signifikant i de ikke-inducerede mus, på trods af klart forbedret jernstatus, er uklar; mulige medvirkende faktorer inkluderer imidlertid den multifaktorielle ætiologi af CKD-anæmi, de små prøvestørrelser af ikke-inducerede mus og den gentagne phlebotomi i dette eksperiment. En yderligere undersøgelsesbegrænsning er, at vi brugte musemodeller, hvis oversættelse til mennesker ikke er sikker. Selvom det er robust, er beviset for manglen på signifikant paracellulær absorption af FC indirekte.

Cistanche tubulosa

Sammenfattende observerede vi i vores høj-hepcidin-niveau modeller gavnlige virkninger af FC på jern og erytrocytiske parametre, hvilket tyder på effektiv enteral jernabsorption på trods af høje hepcidin niveauer. For at vurdere, om FC kan omgå slimhindehepcidinblokken via potentiel citrat-faciliteret paracellulær absorption, evaluerede vi en inducerbar, enterocytspecifik ferroportin knockout-model i nærvær eller fravær af nedsat nyrefunktion. I disse modeller reddede FC ikke jernmangelanæmi-fænotypen, hvilket viser, at enteral FC-absorption overvejende er afhængig af ferroportin, og antyder, at paracellulære veje sandsynligvis ikke udgør hovedveje for fysiologisk FC-absorption.

REFERENCER

1. Block GA, Fishbane S, Rodriguez M, et al. Et 12-uges, dobbeltblindt, placebokontrolleret forsøg med ferricitrat til behandling af jernmangelanæmi og reduktion af serumfosfat hos patienter med CKD-stadier 3-5. Am J Nyre Dis. 2015;65:728–736. [PubMed: 25468387]

2. Yokoyama K, Hirakata H, Akiba T, et al. Ferricitrathydrat til behandling af hyperphosphatæmi ved ikke-dialyseafhængig CKD. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:543-552. [PubMed: 24408120]

3. Lewis JB, Sika M, Koury MJ, et al. Jerncitrat kontrollerer fosfor og leverer jern til patienter i dialyse. J Am Soc Nephrol. 2015;26:493-503. [PubMed: 25060056]

4. Yokoyama K, Akiba T, Fukagawa M, et al. Et randomiseret forsøg med JTT-751 versus sevelamerhydrochlorid hos patienter i hæmodialyse. Nephrol skivetransplantation. 2014;29:1053-1060. [PubMed: 24376274]

5. Zaritsky J, Young B, Wang HJ, et al. Hepcidin - en potentiel ny biomarkør for jernstatus ved kronisk nyresygdom. Clin J Am Soc Nephrol. 2009;4:1051-1056. [PubMed: 19406957]

6. Ashby DR, Gale DP, Busbridge M, et al. Plasma hepcidinniveauer er forhøjede, men reagerer på erythropoietinbehandling ved nyresygdom. Nyre Int. 2009;75:976-981. [PubMed: 19212416]

7. Zaritsky J, Young B, Gales B, et al. Reduktion af serumhepcidin ved hæmodialyse hos pædiatriske og voksne patienter. Clin J Am Soc Nephrol. 2010;5:1010-1014. [PubMed: 20299375]

8. Troutt JS, Butterfield AM, Konrad RJ. Hepcidin-25-koncentrationer er markant øget hos patienter med kronisk nyresygdom og er omvendt korreleret med estimerede glomerulære filtrationshastigheder. J Clin Lab Anal. 2013;27:504-510. [PubMed: 24218134]

9. Nemeth E, Tuttle MS, Powelson J, et al. Hepcidin regulerer cellulær jernudstrømning ved at binde t ferroportin og inducere dets internalisering. Videnskab. 2004;306:2090-2093. [PubMed: 15514116]

10. Ganz T, Bino A, Salusky IB. Virkningsmekanisme og kliniske egenskaber ved Auryxia ® (ferricitrat). Narkotika. 2019;79:957-968. [PubMed: 31134521]

11. Froment DP, Molitoris BA, Buddington B, et al. Sted og mekanisme for forbedret gastrointestinal absorption af aluminium af citrat. Nyre Int. 1989;36:978-984. [PubMed: 2601265]

12. Gupta A Ferricitrathydrat som fosfatbindemiddel og risiko for aluminiumtoksicitet. Lægemidler (Basel). 2014;7:990-998. [PubMed: 25341358]

13. Folgueras AR, de Lara FM, Pendás AM, et al. Membranbundet serinproteasematriptase-2 (Tmprss6) er en vigtig regulator af jernhomeostase. Blod. 2008;112:2539-2545. [PubMed: 18523150]

14. Hanudel MR, Rappaport M, Gabayan V, et al. Øget serumhepcidin bidrager til anæmi ved kronisk nyresygdom i en murin model. Hæmatologica. 2017;102:e85–e88. [PubMed: 27884972]

15. Jia T, Olauson H, Lindberg K, et al. En ny model af adenin-induceret tubulointerstitiel nefropati hos mus. BMC Nephrol. 2013;14:116. [PubMed: 23718816]

16. Tamura M, Aizawa R, Hori M, et al. Progressiv nyredysfunktion og makrofaginfiltration i interstitiel fibrose i en adenin-induceret tubulointerstitiel nefritis musemodel. Histochem Cell Biol. 2009;131: 483-490. [PubMed: 19159945]

17. Klinkhammer BM, Djudjaj S, Kunter U, et al. Cellulære og molekylære mekanismer for nyreskade i 2,8-dihydroxyadenin nefropati. J Am Soc Nephrol. 2020;31:799-816. [PubMed: 32086278]

18. Diwan V, Small D, Kauter K, et al. Kønsforskelle i adenin-induceret kronisk nyresygdom og kardiovaskulære komplikationer hos rotter. Am J Physiol Renal Physiol. 2014;307:F1169–F1178. [PubMed: 25209863]

19. Kim A, Fung E, Parikh SG, et al. En musemodel for anæmi af inflammation: kompleks patogenese med delvis afhængighed af hepcidin. Blod. 2014;123:1129-1136. [PubMed: 24357728]

20. Finberg KE, Whittlesey RL, Fleming MD, et al. Nedregulering af Bmp/Smad-signalering af Tmprss6 er påkrævet for at opretholde systemisk jernhomeostase. Blod. 2010;115:3817-3826. [PubMed: 20200349]

21. Darshan D, Wilkins SJ, Frazer DM, et al. Reduceret ekspression af ferroportin-1 medierer diende rotters hyporesponsivitet over for stimuli, der reducerer jernabsorptionen. Gastroenterologi. 2011;141:300-309. [PubMed: 21570398]

22. Galy B, Ferring-Appel D, Becker C, et al. Jernregulerende proteiner kontrollerer en slimhindeblokering af intestinal jernabsorption. Cell Rep. 2013;3:844-857. [PubMed: 23523353]

23. Wilkinson N, Pantopoulos K. IRP/IRE-systemet in vivo: indsigt fra musemodeller. Front Pharmacol. 2014;5:176. [PubMed: 25120486]

24. Meijers B, Farré R, Dejongh S, et al. Tarmbarrierefunktion ved kronisk nyresygdom. Toksiner (Basel). 2018;10:298.

25. Schiavi SC, Tang W, Bracken C, et al. Npt2b deletion dæmper hyperphosphatæmi forbundet med CKD. J Am Soc Nephrol. 2012;23:1691-1700. [PubMed: 22859851]

26. Donovan A, Lima CA, Pinkus JL, et al. Jerneksportøren ferroportin/Slc40a1 er afgørende for jernhomeostase. Celle Metab. 2005;1:191-200. [PubMed: 16054062]

Mark R. Hanudel1, Brian Czaya2, Shirley Wong2, Maxime Rappaport1, Shweta Namjoshi1, Kristine Chua2, Grace Jung2, Victoria Gabayan2, Bo Qiao2, Elizabeta Nemeth2, Tomas Ganz2

1. Department of Pediatrics, David Geffen School of Medicine ved UCLA, Los Angeles, Californien, USA

2. Institut for Medicin, David Geffen School of Medicine ved UCLA, Los Angeles, Californien, USA