Virkninger af Cistanche Deserticola på akut lungeskade hos rotter med sepsis

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

[Abstrakt]Formål: At undersøge effekten afCistanche deserticolapå akutlungeskade(ALI) hos rotter med sepsis. Metoder: Modellen af ​​sepsis blev lavet ved cecal ligering og punktering. De histopatologiske undersøgelser blev udført, og de biologiske markører for ALI blev målt. Resultater: Under lysmikroskop i saltvandsgruppen var der ødem aflunge mellemrum, et stort antal erytrocytter og neutrofiler og plasmaprotein i de alveolære hulrum. Detlungevåd/tør vægt, antallet af neutrofiler og proteinindholdet i den pulmonale alveolære skyllevæske pulmonal vaskulær permeabilitet og pulmonal alveolær permeabilitet og MDA, SOD samt MPO var tilsvarende signifikant forøget. I gruppen medCistanche deserticolabehandling, var disse indeks for ALI signifikant lavere end dem i gruppen med saltvand.

Konklusion: Cistanche deserticolahar stor effekt på ALI hos rotter med sepsis. Den terapeutiske mekanisme er muligvis gennem hæmning af neutrofiler og oxidative frie radikaler.

【Nøgleord】Sepsis; Akut lungeskade; Cistanche deserticola

Sepsis er en klinisk nødsituation og kritisk sygdom, og at søge effektiv behandlingsmedicin har altid været et stort problem i klinisk og grundforskning. Den traditionelle kinesiske medicins patogenese af sepsis er mangel på retfærdighed og ondskabens overflod. Den angribende terapi for kroppens onde velstand er en af ​​de effektive behandlingstiltag.Cistancheer en traditionel tonic kinesisk medicin. Farmakologiske undersøgelser har bekræftet, at det har beskyttende funktioner, såsom at øge hastigheden af ​​cellulær DNA-syntese og modstå iltfrie radikaler. Forfatteren observerer eksperimentelt effekten afCistanche på lungeproblemskadei sepsis, for at give effektiv udforskning til behandling af sepsis.

Cistanche Echinacoside behandler lungesygdomme

1 Materiale og metoder

1. 1 DyrSundhed 40 5D-hanrotter, der vejer 200~250g, leveret af Forsøgsdyrscentret ved Huazhong University of Science and Technology, kvalitetsinspektionsnummer: TJLA—2008—1670 blev tilfældigt opdelt i 3 grupper: 8 normal saltvandsgruppe, Ig/ Der var 12 rotter i ml auberginepasta-gruppen og 12 i 5g/mlCistanchegruppe. Forsøgsdyrene fik de tilsvarende lægemidler ved rutinemæssig sondeernæring i 15 dage, to gange om dagen (denCistanchedeserticola-ekstrakt blev leveret af det traditionelle kinesiske medicinforberedelsesrum på dette hospital), og doseringen på 200 mg/kg blev brugt til forsøgsdyrene i overensstemmelse med litteraturmetoden U] 12 minutter efter cecal ligering og perforering. Samling af prøver.

1.2 Rotte lunge histologisk undersøgelse.Tag en lille mængde af dyrets venstre laplungefra hver gruppe, fikser den med 10 procent formaldehyd, paraffinindstøb sektionen, og HE-farver, observer med et almindeligt optisk mikroskop, og tag på dette grundlaglungeproblem at lave 1 mm3 til 25 Det blev fikseret i procent glutaraldehydopløsning, derefter fikseret i 1 procent tetroxidopløsning, dehydreret med ethanol og acetone, indlejret i Epon 81, forberedt ultratynde snit, farvet med uran-bly og observeret af transmissionselektron mikroskop.

1.3 Bestemmelse af våd/tørvægtsforhold af rottelungeproblem, celletalforhold i alveolær skyllevæske og proteinindhold Vægtforhold.En anden gruppe rotter gennemgik alveolær skylning efter thorakotomi, og skyllevæsken gennemgik celletælling og celleklassificering under et mikroskop. Coomassie brilliant blue metode bruges til at bestemme proteinindhold og beregnelungepermeabilitetsindeks (alveolær skyllevæskeprotein/plasmaprotein, LPI).

1.4 Ændringer i pulmonal vaskulær permeabilitet (PVP) hos rotterIfølge metoden introduceret af Zhou et al. (2) efter indgivelsen undergik dyr i hver gruppe cecal ligering og perforering, og femoral veneinjektion af 50 mg/kg lanthan blev anvendt til at åbne brystet og fjerne lungerne. Fjern de omkringliggende problemer, gennemblødlungeri formamidopløsningen (mængden af ​​formamid er 20mg/100g kropsvægt), inkuberet i en 45-50T-inkubator i 72 timer, vent til alle pigmenterne i problemerne er udvasket, tag problemerne ud, centrifuger og tag supernatanten, Brug et ultraviolet spektrofotometer til at udføre kolorimetri ved 620 nm, og beregn ethanolindholdet i henhold til standardkurven for at bestemme ændringen af ​​PVP.

1.5 Bestemmelse af malondialdehyd (MDA) i rottelungeproblemThiobarbitursyre (TBA)-metoden blev anvendt til at bestemme MDA-aktivitet. Tilsæt 4mL 1,67mol/L svovlsyre. 0.541 procent phosphonsyre til 50 ml testprøve, bland godt, centrifuger ved 3000 r/min i 10 minutter, og bearbejd udfældningen igen som ovenfor, tilsæt derefter 1 ml dobbeltdestilleret vand, 1 ml TBA-opløsning, 95 procent vandfri bad i 60 minutter, ekstraktion med 5 mL n-butanol, tetraethoxypropan som standard, slutkoncentrationen af ​​lnmol/L, fluorescensspektrofotometer ved 532 nm for at måle absorbansen.

1.6 Bestemmelse af superoxiddismutase (SOD) ved rottelungeproblemerIfølge metoden i litteraturen [4] blev SOD-aktiviteten bestemt ved Huangpuyin-oxidasemetoden (kit købt fra Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.7 Bestemmelse af myeloperoxidase (MPO) hos rotterlungeproblem.Tag lungeproblem for at vaske det resterende blod så meget som muligt i isotonisk saltvand, og anbring det i fosfatbuffer indeholdende {{0}}.5 procent cetyltrimethylbromid (PH6. 0) Lav 5 procent af homogenatet, og betjening i henhold til vejledningen til sættet.

1.8 Statistiske metoderBrug SPSS statistisk software, og mål data i (x±s) form ved hjælp af t-test og X2 test.

Cistanche

2 resultater

2.1 Sammenligning af våd/tør vægtforhold pålungeproblemer, celletalsforhold og proteinindhold i alveolær skyllevæske i hver gruppe er vist i tabel 1.lungevåd/tør vægtforhold i saltvandsgruppen var signifikant højere end iCistanchegruppe (s<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistanchegruppen var signifikant lavere end dem i saltvandsgruppen (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tabel 1 Sammenligning af våd/tørvægt-forholdet mellem lungeproblem og celletalsforholdet og proteinindholdet i den alveolære skyllevæske hos rotter i hver gruppe (X ± S)

Sammenlignet med den normale saltvandsgruppe, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Sammenligning af de morfologiske ændringer af lungeproblemerne hos rotterne i hver gruppe. Generel bemærkning: Denlungeri saltvandsgruppen var signifikant forstørrede og mørkerøde, med varierende grader af overbelastning og ødem på overfladen, og et stort antal lungeinfarkter i kanten; lungerne iCistanchegruppen var lyserød med en overflade Mild overbelastning og ødem, ingen tydelig lungeinfarkt. Lysmikroskopobservation viste, at der i saltvandsgruppen var alveolær og pulmonal interstitiel kongestion og ødem, et stort antal diffus neutrofil infiltration i alveolærhulen, en vis abscesdannelse og varierende grader af atelektase, nekrose og kompenserende emfysem. , Thrombus og lignende transparent membrandannelse. De ovennævnte læsioner i Cistanche-gruppen blev signifikant reduceret. I saltvandsgruppen kvældede alveolære epitelceller, lamellære blodlegemer tømte tydeligt, store vakuoler blev dannet, kapillære endotelceller blev hævede, endotelceller blev kontinuerligt beskadiget, det intercellulære rum blev udvidet, kapillærer og alveolære basalmembraner var løse. Uregelmæssig fortykkelse, ujævn tykkelse. I Cistanche-gruppen var alveoleepitelcellerne ikke hævede, lamellegemetømningen var reduceret, antallet af dannede vakuoler var lille, forbindelsen mellem kapillære endotelceller var tæt på normal, og basalmembranen var lidt løs og uregelmæssigt fortykket. Sammenlignet med Ig/niL-cistanche-gruppen havde 5g/mL-cistanche-gruppen et mindre udvalg af lungeproblem morfologiske ændringer, og graden af ​​lungeskade var lettere.

2.3 Sammenligning af LPI og PVP for rotter i hver gruppe er vist i tabel 2. LPI og PVP for saltvandsgruppen var signifikant højere end dem for Cistanche-gruppen (PV0.05 eller 0,01 ). LPI og PVP for Cistanche-gruppen var lavere, hvilket havde et signifikant dosis-effektforhold.

2.4 Sammenligningen af ​​aktiviteten af ​​MDA.SOD.MPO ilungeproblemer med rotter i hver gruppe er vist i tabel 3. MDA-indholdet ilungeproblemet med saltvandsgruppen var betydeligt højere end problemet med saltvandsgruppenCistanchegruppe, mens SOD-aktiviteten og MPO-aktiviteten i lungeproblemet i Cistanche-gruppen var signifikant øget (F<0.05 or="">

3 Diskussion

Multipel organsvigt er den grundlæggende årsag til den irreversible tilstand og høj dødelighed i det sene stadium af sepsis (5). Beskyttelse af organfunktion er af stor betydning for at reducere den høje kliniske dødelighed af sepsis. Lungen er det første organ for multipel organsvigt. 1/3 af patienter med sepsis dør af akut lungeskade (ALI) og akut respiratory distress syndrome (ARDS). Den vigtigste patofysiologiske mekanisme for ALI er akkumulering af et stort antal neutrofiler i lungeproblemet, og det aktiverer og klæber til vaskulære endotelceller. Samtidig stiger koncentrationen af ​​reduceret coenzym II-oxidase, der overfører enkelte elektroner, hvilket forårsager respiratoriske udbrud, genererer en stor mængde frie iltradikaler og forårsager beskadigelse og funktion af cellemembraner og membranstrukturer gennem stærk oxidation. Forhindringer⑹. Lipidperoxid afspejler ændringen af ​​iltfrie radikaler i problemet og er direkte relateret til graden af ​​lungeskade (7). I kroppens enzymatiske og ikke-enzymatiske anti-radikale oxidationssystem opretholder aktiviteten af ​​SOD en god korrelation med graden af ​​problemskade ⑺. Sammenlignet med den fysiologiske saltvandsgruppe viste MDA- og SOD-aktiviteterne i Cistanche-gruppen statistisk signifikante forskelle. Cistanche har funktionerne til at forbedre immunfunktionen, anti-aging og øge celle-DNA-syntesehastigheden. De eksperimentelle resultater viste, at lungekoefficienten, PLT, alveolær skyllevæske neutrofilforhold og pulmonal vaskulær permeabilitet for Cistanche-gruppen var signifikant reduceret, MDA-aktiviteten af ​​lungeproblem faldt, SOD steg signifikant, og MPO-aktiviteten faldt. Samtidig viste morfologiske observationer, at graden af ​​lungeproblemskade var signifikant reduceret, infiltrationen af ​​neutrofiler var reduceret, og 5g/mL Cistanche-gruppen havde mindre lungeskade end Ig/mL Cistanche-gruppen, og der var en god dosis-effekt forhold. Det tyder på, at Cistanche har en betydelig beskyttende effekt på ALI. Mekanismen kan være: (1) Hæmme migrationen af ​​inflammatoriske celler ilunger, reducere de frie iltradikaler produceret af neutrofiler og andre aktiverede celler, så biofilmen er beskyttet; (2) Fremme nukleinsyre- og proteinsyntese og beskytte mod lungeskade Effekt; (3) Forbedre immunfunktionen af ​​fagocytter og reducerelungeproblemskader forårsaget af endotoksin. Forsøgsresultaterne giver et forsøgsgrundlag for behandling af akut lungeskade ved klinisk sepsis ved at styrke kroppen og styrke mangelen.

referencer

[1] Jin Huiming. Sepsis model efter cecal ligering og perforering [J]. Chinese Journal of Pathophysiology "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Rolle af blodpladeaktiverende faktor i pancreatitis associeret akut lungeskade hos rotter [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Eksperimentelle metoder for moderne medicin [M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Moderne klinisk biokemisk laboratorievidenskab [M]. Beijing: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Chokstudier [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoksin ved human sygdom, del 2Biologisk effekt og klinisk evaluering af anti-endotoksin-terier[J]