Virkning af næringscalcium- og fosfatbelastning på calciproteinpartikelkinetikken hos voksne med normal og nedsat nyrefunktion

Abstrakt

Plasma nærmer sig metastabilitet med hensyn til dets indhold af calcium og fosfat, med kun mindre forstyrrelser i ionisk aktivitet, der er nødvendige for at opretholde krystalvækst, når den først er kerneformet. Fysiologisk absorberes calcium og fosfat intermitterende fra kosten hver dag, men plasmakoncentrationerne af disse ioner afviger minimalt post-prandialt. Dette indebærer eksistensen af ​​et blodbåret mineralbuffersystem til at binde calciumphosphater og minimere risikoen for aflejring i det bløde væv. Calciprotein-partikler (CPP), endogene mineral-protein-kolloider, der indeholder plasmaproteinet fetuin-A, kan opfylde denne funktion, men der mangler definitive beviser, der forbinder kostens mineralbelastning med deres dannelse. Her demonstrerer vi, at CPP dannes som en normal fysiologisk reaktion på fodring hos raske voksne, og at dette sker på trods af minimal ændring i konventionelle serummineralmarkører. Hos personer med kronisk nyresygdom (CKD), hvor mineralhåndtering er nedsat, viser vi endvidere, at både fastende og post-prandiale niveauer af CPP-prækursorer er markant forøgede og stærkt omvendt korreleret med nyrefunktionen. Denne undersøgelse fremhæver det vigtige, men ofte forsømte, bidrag fra kolloid biokemi til mineralhomeostase og giver ny indsigt i dysreguleringen af ​​mineralmetabolisme i CKD.

Klik her for at købe Cistanche-produkter

Introduktion

Calcium og fosfat danner meget uopløselige salte i vandig opløsning, og mens metabolisme i alle levende organismer er afhængig af disse essentielle næringsstoffer, skaber deres sameksistens i biologiske væsker en iboende mineraliseringsrisiko og behovet for stram regulering1. De fleste ekstracellulære væsker som plasma anses for at være metastabile eller nærme sig metastabilitet med hensyn til deres calcium- og fosfat-ioniske aktiviteter2, hvilket let opretholder krystalvækst, hvis de er kernedannet. Denne tendens til udfældning af calcium og fosfat er blevet udnyttet af hvirveldyr for deres unikke biomekaniske egenskaber under udviklingen af ​​skelet- og tandvæv. Men på samme tid pålagde dette mekanismer for hurtig mobilisering og effektiv bulktransport af mineralprækursorer for at imødekomme kravene til vækst og reparation af disse hårde væv, samt strategier for at begrænse mineralisering til disse steder og forhindre uønsket forkalkning i blødt væv3 . Faktisk er selv beskedne stigninger i plasmacalcium- og fosfatkoncentrationer forbundet med en øget risiko for patologisk forkalkning af arterierne og væv4. Da overskydende calcium og fosfat næsten udelukkende udskilles af nyrerne, er denne risiko sammen med de tilhørende kardiovaskulære følgesygdomme væsentligt højere hos dem med kronisk nyresygdom (CKD), hvor forstyrrelser i mineralmetabolismen bliver tydelige med relativt små fald i glomerulær filtration rate (GFR)5,6. I betragtning af den overflod af calcium og fosfat i kosten, som pattedyr periodisk udsættes for, kan man mistænke risikoen for ektopisk mineralisering for at være størst efter et måltid på grund af den forventede stigning i mineralioner absorberet fra tarmen. Alligevel, i modsætning til denne forventning, ændres plasmacalcium- og fosfatkoncentrationerne minimalt i den post-prandiale periode, og mens øget urinudskillelse hjælper med at opretholde homeostase7, er denne respons ikke øjeblikkelig og forsinker nogle timer efter indtagelse af millimolære mængder calcium og fosfat8. Som en løsning på denne fysiologiske udfordring har der længe været mistanke om et blodbåret system til buffering og transport af mineraler9, og den seneste tid har opmærksomheden rettet sig mod kolloide mineral-proteinkomplekser, der kunne opfylde denne funktion og sikkert lede den intermitterende flux af mineraler gennem det ekstracellulære væske til steder for anvendelse eller bortskaffelse10.

I plasma er den mest potente og rigelige proteinmineraliseringsregulator det leverafledte glycoprotein fetuin-A11, som interagerer med spirende kolloide mineral-proteinkomplekser for at danne calciproteinpartikler (CPP)12,13. Analogt med hvordan apolipoproteiner solubiliserer deres lipidlast til transport, stabiliserer fetuinA dårligt opløselige calciumphosphater, forhindrer krystalvækst og udfældning, samtidig med at de letter deres optagelse i væv til udnyttelse eller clearance14-16. En manglende evne til at lave eller tilstrækkeligt stabilisere CPP, som det ses hos fetuin-A knockout mus, resulterer i en af ​​de mest alvorlige fænotyper af ektopisk forkalkning kendt17, hvor mineralholdige komplekser udfældes direkte i lumen af ​​mikrovaskulaturen, hvilket fører til okklusion, iskæmi, nekrose og fbrose18. CPP genereres gennem en række ordnede trin, indledningsvis med binding af spontant dannede klynger af calcium- og phosphationer til fetuin-A, der danner calciproteinmonomerer (CPM)19, som derefter tjener som byggesten til større polymere strukturer; først koalescerer for at danne sfærisk primær CPP (CPP-I) indeholdende amorft calciumphosphat, før det transformeres til større og tættere ellipsoidal sekundær CPP (CPP-II) indeholdende krystallinsk hydroxyapatit12.

Ud over den påståede fysiologiske rolle af CPP-dannelse i sekvestrering og spredning af overskydende mineraler, observeres forhøjede niveauer også i tilstande af nedsat mineralmetabolisme, herunder i CKD20. I denne indstilling er højere serumniveauer af CPM og CPP blevet forbundet med en øget risiko for kardiovaskulære hændelser21-25 og dødelighed22. Prækliniske undersøgelser tyder på, at CPP direkte kan inducere vaskulær glatmuskelcelleforkalkning26,27, aktivering af cellulære inflammatoriske og cytotoksiske veje28,29 såvel som vaskulære luminale og endoteliale læsioner30. Tilsammen er det blevet foreslået, at langvarig eksponering for kronisk forhøjede niveauer af serum CPP kan hjælpe med at forklare sammenhængen mellem overskydende kostmineraler og dårlige patientresultater i CKD14,31. Spændende nok tyder nyere data også på, at cirkulerende CPM filtreres ved glomerulus29, hvilket antyder, at nedsat nyrefunktion kan påvirke CPP-metabolismen via flere mekanismer.

Nylige metodiske fremskridt tillader direkte kvantificering af CPM32, CPP-I og CPP-II33, med disse assays nu anvendt på tværs af adskillige observationelle og interventionelle kliniske undersøgelser24,25,34-39. En anden ny komplementær metode til vurdering af dette system er T50-testen, en funktionel vurdering af serums kapacitet til at modstå ex vivo-dannelse af CPP-II, når den udsættes for overmættende mængder calcium og fosfat40. Et lavere T50 er konsekvent blevet forbundet med en øget risiko for vaskulær patologi og dødelighed hos personer med normal nyrefunktion41, såvel som i forskellige CKD-kohorter, herunder både ikke-dialyse22,42,43 og også dialyseafhængig CKD44. Ud over kinetikken for CPP-II-dannelse kan størrelsen (hydrodynamisk radius) af CPP-II-molekylerne genereret i T50-analysen også måles40,45 og kan give yderligere prognostisk information om vaskulær risiko46,47.

Forestillingen om en diætoprindelse af CPP er stærkt understøttet af observationen, at fodring med højt fosfat er forbundet med øgede omgivende niveauer af CPM48 og CPP33 i dyreforsøg og reduktionen i serum CPM34 og CPP37 hos hæmodialysepatienter behandlet med intestinale fosfatbindere. Der mangler dog endelig observation af virkningen af ​​ernæringsmineralindtag på akut CPP-kinetik hos mennesker. Ydermere er virkningen af ​​CKD på post-prandial CPP-metabolisme endnu ikke dokumenteret. For at løse disse nøglebevishuller gennemførte vi en kontrolleret undersøgelse af effekten af ​​standardiseret fødeindtagelse på serum-CPM, CPP-I, CPP-II, T50 og CPP-II-størrelse hos fastende voksne med normal eller nedsat nyrefunktion.

Cistanche ekstrakt

Metode

1. Studiepopulation.

Vi undersøgte 14 personer med kronisk nyreinsufficiens og 16 alders- og kønsmatchede raske kontroller. Hver deltager skulle være mindst 18 år for at være berettiget. Deltagerne blev udelukket, hvis de: (i) havde en historie med mineral- eller knoglesygdom, bortset fra relateret til CKD; (ii) blev behandlet med et intestinalt fosfatbindemiddel eller calcitriol; eller (iii) havde en gastrointestinal lidelse, historie med laktoseintolerance eller var uvillige til at indtage undersøgelsesmåltidet. Til CKD-gruppen rekrutterede vi syv individer med en estimeret glomerulær filtrationshastighed (eGFR) mellem 30 og 60 ml/min/1,73 m2 og syv med en eGFR<30 mL/min/1.73 m2, excluding participants who required dialysis or with a previous kidney transplant. Healthy controls had no history of chronic medical conditions and had normal kidney function (eGFR>60 ml/min/1,73 m2). Undersøgelsen blev udført af Helsinki-erklæringen.

Alle personer gav skriftligt informeret samtykke, og undersøgelsen blev godkendt af den lokale etiske komité (Melbourne Health Human Research Ethics Committee MH2018.363).

2. Fremgangsmåde.

Hver deltager blev undersøgt efter faste natten over, og prøveindsamlingen begyndte mellem kl. 7.30 og kl. 9.30. En intravenøs kanyle blev indsat ved starten af ​​undersøgelsesperioden. Før hver blodprøve blev opsamlet, blev en indledende 5 ml udtagning fra kanylen kasseret. To indledende fastende blodprøver blev taget med 30 minutters mellemrum for at tage højde for basislinjevariation. Middelværdierne af disse to-tidspunkter blev brugt som "tid 0". Umiddelbart efter indsamlingen af ​​den anden fasteprøve indtog deltagerne et standardiseret måltid (Sanitarium Up&Go flydende morgenmad; 250 ml, vaniljesmag) indeholdende 815 kJ energi, 300 mg calcium og 188 mg fosfat (tabel 1). Deltagerne blev instrueret i at indtage hele drinken inden for 5 min. Serielle blodprøver blev indsamlet på fem post-prandiale tidspunkter (30, 60, 120, 180 og 240 minutter) fra begyndelsen af ​​måltidet. I løbet af undersøgelsesperioden fik deltagerne lov til at drikke vand, men måtte ikke indtage anden mad eller drikke.

3. Resultatmål.

Blod blev opsamlet til gentagen måling af nye markører for mineralmetabolisme (CPM, CPP-I, CPP-II, T50 og CPP-II-størrelse) på hvert tidspunkt. Fetuin-A blev målt på hvert tidspunkt, givet dets rolle som det vigtigste mineralbindende protein til stede i CPM og CPP. Vi målte også serumfosfat, total calcium, magnesium, albumin og bicarbonat på hvert tidspunkt og serum intakt parathyroidhormon (PTH) og intakt fibroblast vækstfaktor-23 (iFGF23) på tre tidspunkter ({{12 }}, 120 og 240 min). Serumcitrat blev målt ved 0, 30 og 60 min. Serumurinstof, kreatinin og 1,25 dihydroxy D-vitamin blev målt én gang ved fastende baseline (0 min). Blodprøver for nye markører for mineralmetabolisme, PTH, iFGF23, 1,25 dihydroxy-vitamin D og serumcitrat, fik lov til at størkne i 30 minutter før centrifugering, og derefter blev serumalikvoter opbevaret ved -80 grader indtil batchanalyse. Alle andre biokemiske målinger blev udført på tidspunktet for prøveindsamling ved anvendelse af standard laboratoriemetoder.

4. Gel-fltration og flowcytometriske assays for CPM og CPP.

Vi brugte to komplementære assays til at kvantificere forskellige fraktioner af den cirkulerende CPP-pulje49. Begge analyser anvender det fluorescensmærkede bisphosphonatderivat, OsteoSense 680EX (Perkin Elmer), som binder specifikt til fastfase calciumphosphat og fortrinsvis til krystallinske faser (f.eks. hydroxyapatit). 'gel-fltration'-metoden ifølge Miura et al.32 blev brugt til at måle små (<50 nm diameter), low-density mineral-laden fetuin-A colloids. Briefly, frozen serum samples were thawed for 24 h at 25 °C to induce aggregation of CPM and phase transition to crystalline calcium phosphate. Samples were then centrifuged for 30,000g for 2 h at 4 °C to remove larger CPP-I and CPP-II, leaving less dense crystal-laden fetuin-A monomer and multimers for staining with OsteoSense (0.5 µM) in HEPES-buffered DMEM (pH 8.0). Unbound dye was subsequently removed by gel filtration (Micro Bio-Spin® Columns with Bio-Gel® P-30, Bio-Rad) and the resultant fluorescence was measured using an infrared scanner (Odyssey CLx, LI-COR; EX 685 nm, EM 700 nm). Miura and colleagues32 referred to the mineral detected as low-density (L)-CPP, however, here we refer to them as CPM to reflect the origin of this mineral fraction in vivo. In our hands, the mean interassay analytical coefficient of variation (CVA) for the CPM assay was 4.9%.

Til flowcytometrisk analyse blev alikvoter af frosset serum behandlet under anvendelse af de standardiserede procedurer beskrevet tidligere50. CPP-I og CPP-II blev målt som tidligere beskrevet ved hjælp af en BD FACSVerse flowcytometer opsætning til at opløse partikler<200 nm from the background and operate with fluorescence triggering on OsteoSense-positive events33,37. In this assay, CPP is distinguished from membrane-delimited mineral-containing extracellular vesicles using phosphatidyl serine–binding cadherin-FITC (Haematologic Technologies Inc., Essex Junction, VT). CPP-I and CPP-II were distinguished by differences in side scatter (SSC) intensity (related to particle size) and OsteoSense fluorescence intensity. Interassay CVA for CPP-I and CPP-II were<15% and<10%, respectively.

5. Andre mineralske markører.

Serum T50 blev målt af Calciscon AG, Biel, Schweiz, som tidligere beskrevet under anvendelse af et Nephelostar nefelometer (BMG Labtech, Ortenberg, Tyskland)40. Den gennemsnitlige interassay-CVA for T50 var 3,4 procent. CPP-II hydrodynamiske radius blev målt ved dynamisk lysspredning under anvendelse af en DynaPro Plate Reader II (Wyatt Technology, Santa Barbara, CA, USA) som beskrevet af Chen et al.47 Te interassay CVA for CPP-II størrelse var 4 procent. Kommercielle immunoassays blev brugt til at måle iFGF23 (Kainos Laboratories, Tokyo, Japan), 1,25 dihydroxy vitamin D Immunodiagnostic Systems, Boldon, UK) og fetuin-A (R&D Systems, Minneapolis, USA) i henhold til producentens instruktioner. Gennemsnitlig interassay-CVA var henholdsvis 3,8 procent, 5,5 procent og 3,2 procent. Serumcitrat blev målt under anvendelse af et kolorimetrisk assay (Sigma-Aldrich, Darmstadt, Tyskland) med en gennemsnitlig interassay-CVA på 3,5 procent.

6. Statistisk analyse.

Using GLIMPSE, a validated linear mixed model power and sample size calculator51, we estimated that 10 participants would provide>90 procent effekt til at detektere en fordobling af CPP i den post-prandiale periode med en type I fejlrate på 0,05. Undersøgelsen var ikke drevet til at opdage en forskel mellem grupper.

Demografiske og fastende biokemiske data blev sammenlignet mellem grupper ved hjælp af en uparret t-test eller Kruskal-Wallis-test for henholdsvis normale og skæve kontinuerte variabler og en chi-kvadrat-test for kategoriske variabler.

Vi havde til formål at beskrive den inden for og mellem gruppens post-prandiale respons for hver gentagne parameter. For at gøre dette tilpassede vi lineære mixed-effects-modeller (LMM) for hver parameter ved at bruge en begrænset maksimal sandsynlighedstilgang og med en ustruktureret kovariansmatrix52. For hver LMM modellerede vi gruppe, kategorisk tid og gruppe-for-tids-interaktion som faste effekter, og en tilfældig opsnapning blev inkluderet for hver deltager for at tage højde for korrelationen af ​​gentagne mål. Kontrolgruppen og tiden '0' blev brugt som referenceværdier for henholdsvis gruppen og tiden. Koefficientestimater for gruppe-for-tid interaktionsudtryk blev brugt til at teste for forskelle i post-prandial respons mellem CKD og kontrolgrupper. Efter tilpasning af hver LMM udførte vi også post hoc parvise sammenligninger for at teste for forskelle i middelværdier mellem grupper på hvert tidspunkt og for at teste for afvigelse fra den fastende baseline inden for hver gruppe. Til disse parvise sammenligninger brugte vi Bonferroni-korrektionsmetoden til at justere for flere sammenligninger. CPM, CPP-I, CPP-II, CPP-II størrelse, PTH og iFGF23 blev naturligt log-transformeret før montering af LMM'er for at sikre normal fordeling af rester. For at lette fortolkningen blev koefficientestimater for interaktionsudtryk fra disse modeller derefter eksponentieret for at udlede estimater af den procentvise ændring. For LMM af CPM antydede gruppe-for-tid interaktionsudtryk en signifikant forskel i post-prandial respons mellem grupper. For yderligere at udforske virkningen af ​​nyrefunktion på post-prandiale niveauer af CPM beregnede vi også arealet under kurven (AUC) for CPM ved hjælp af cubic spline-metoden (tid 0 til 240 min) og undersøgte forholdet mellem eGFR , AUC og maksimal koncentration af CPM (ved brug af Spearman-rangkorrelation) samt mellem CKD og tidspunktet for maksimal CPM-koncentration (ved brug af chi-kvadrattest).

Flere prøver havde uopdagelige niveauer af CPP-I (2 prøver i kontrolgruppen og 6 i CKD-gruppen) eller CPP-II (5 i kontrolgruppen og 10 i CKD-gruppen). Til hovedanalyserne blev den nedre grænse for kvantificering for assayet (133 partikler/ml) brugt til disse venstrecensurerede værdier. For at vurdere for potentiel bias fra denne tilgang udførte vi en følsomhedsanalyse, hvor LMM'er for CPP-I og CPP-II blev genmonteret efter imputering af lefcensurerede værdier ved hjælp af multi-level Tobit-regression, hvor tid og gruppe blev indtastet som uafhængige variabler 53.

To-halede p-værdier<0.05 were considered significant. All data were analyzed using Stata MP version 17.0 (StataCorp, College Station, USA) and figures were produced using GraphPad Prism version 9.2.0 (GraphPad Sofware, San Diego, USA).

Herba Cistanche

Diskussion

Så vidt vi ved, er dette den første undersøgelse, der rapporterer en signifikant post-prandial effekt af ernæringsindtag på serumniveauer af CPM, CPP-I og CPP-II hos mennesker. Disse virkninger var almindelige for personer med normal og nedsat nyrefunktion; dog var den post-prandiale ekskursion af serum-CPM meget mere udtalt hos CKD-deltagere. Vi fandt også en tidlig og forbigående post-prandial effekt på T50, som var til stede uanset nyrefunktion og ledsaget af en samtidig stigning i serum fetuin-A.

Vores resultater er i overensstemmelse med forestillingen om, at intestinal absorption af en diætmineralbelastning direkte kan føre til dannelsen af ​​cirkulerende CPM, CPP-I og CPP-II. Dette er tidligere blevet foreslået10,15,16, men er i høj grad baseret på dyredata33,48. I modsætning hertil har evidens hos mennesker været indirekte, og kommer fra undersøgelser af intestinale fosfatbindere hos hæmodialyse-afhængige CKD-patienter34,37,55. En lille undersøgelse af Yamada et al. foreslog daglig variation i serum CPP med post-prandiale toppe, men denne undersøgelse brugte en ældre analyseteknik, der ikke var i stand til separat at kvantificere CPM og CPP underarter, og deltagerne blev alle indlagt på hospitalet for håndtering af ustabil diabetes56. I modsætning hertil var alle deltagere i denne undersøgelse klinisk stabile, og så vidt vi ved, har vi for første gang vist, at post-prandiale ekskursioner ikke kun ses hos personer med CKD, men også hos raske voksne, hvilket underbygger rollen af CPM- og CPP-dannelse i den normale fysiologiske reaktion på indtagelse af mad.

Stigninger i serum CPM og CPP blev set selv efter relativt beskedne og fysiologisk relevante ernæringsmæssige mineralbelastninger (tabel 1). I modsætning hertil var der minimal post-prandial variation i de mere konventionelle markører for mineralmetabolisme. Tidligere undersøgelser har tilsvarende vist begrænset post-prandial afvigelse i fosfat7,57, undtagen når forsøgspersoner er udfordret med store farmakologiske belastninger58,59. I sundhed reguleres totalfosfat i kroppen, således at nettooptagelsen i tarmen modsvares af urinudskillelse8. Dette respons er dog ikke øjeblikkeligt, og der kan ses et forsinkelse på flere timer, før der sker en forøgelse af urinfosfatudskillelsen, selv når fosfatbelastningen gives intravenøst8. I stedet har dyremodeller vist, at andre, ikke-renale, mekanismer tjener til at opretholde serumioniske koncentrationer mere akut via distribution til knogler og andre væv59-61. Det er sandsynligt, at dannelsen af ​​CPM og CPP kan være et vigtigt yderligere midlertidigt depot af fosfat (og calcium), som akut kan buffere lokale mineralbelastninger, såsom fra mave-tarmsystemet14. De fysisk-kemiske egenskaber af CPM og CPP betyder, at potentielt store mængder af ellers uopløselige mineraler kan eksistere i kredsløbet uden risiko for nedbør, hvilket tilsyneladende letter, at mineraler sikkert kan transporteres i bulk til steder, hvor de bruges eller ryddes.

Vi observerede en forbigående stigning i serum fetuin-A i CKD-gruppen. I modsætning hertil forekom fetuin-A stabil i kontroller, men når parvise sammenligninger blev gentaget uden korrektion for flere sammenligninger, var der signifikante stigninger efter 30 og 60 minutter i kontroller (Supplerende Tabel S8), hvilket indikerer, at vi måske har været underpowered til at opdage en underliggende effekt. Ud over at være en negativ akutfasereaktant, med niveauer stærkt undertrykt som reaktion på akut og kronisk betændelse62, vides der kun lidt om andre mekanismer, der direkte regulerer den hepatiske syntese og sekretion af fetuin-A, og der er en mangel på tidligere data om daglig, eller akut post-prandial variation i enhver art. I betragtning af den observerede stigning i serum fetuin-A efter fodring, især i CKD-gruppen, og fetuin-A's nødvendige rolle i CPM- og CPP-dannelse, er det spændende at overveje, om fodring kan "fornemmes" via en endnu ukendt mekanisme, fører til, at hepatisk frigivelse af fetuinA falder sammen med en tilstrømning af mineral fra tarmene. Uedono et al. for nylig foreslået, at CPP i sig selv kan være en trigger for fetuin-A-ekspression i dyrkede hepatocytter63. Således berettiger mekanismer, der kontrollerer fetuin-A-frigivelsen og deres reaktion på mineralbelastning, yderligere undersøgelse.

T50 er en funktionel vurdering af serumets evne til at modstå ex vivo CPP-II-dannelse, der repræsenterer en sammensætning af forskellige potentierende (herunder calcium og fosfat) og hæmmende (herunder fetuin-A, albumin, magnesium, citrat og bicarbonat) forkalkningsfaktorer40. Vi observerede en tidlig, men forbigående stigning i T50. Dette blev set i begge grupper, men i CKD-gruppen var toppen sammenfaldende med stigninger i serum fetuin-A. Yderligere, blandt alle deltagere, var ændring i T50 fra baseline meget tæt korreleret med ændring i serum fetuin-A (Supplerende Fig. S2), hvilket tyder på, at fetuin-A kan være den vigtigste faktor, der ligger til grund for de observerede ændringer i T50. Faktisk fandt vi ikke tilsvarende tidlige post-prandiale ændringer i andre kendte modulatorer af T50 (serumphosphat, calcium, bicarbonat, magnesium eller albumin), selvom dette ikke udelukker mere subtile ændringer i en eller en kombination af disse faktorer . For eksempel var en positiv gruppe-for-tid interaktion til stede for serumbicarbonat i CKD-gruppen efter 120 minutter, hvilket overlappede med stigningen i T50. Hvad angår fetuin-A, var der også en sammenhæng mellem ændringen i bicarbonat og T50 fra baseline (Supplerende Fig. S4), omend denne var relativt svag sammenlignet med korrelationen med førstnævnte (r=0.385 vs. r=0.839). Ikke desto mindre er det post-prandiale "alkaliske tidevand" et anerkendt fænomen, og det er sandsynligt, at flere faktorer har bidraget til de observerede post-prandiale ændringer i T5064. Undersøgelsesmåltidet indeholdt også en overraskende mængde citrat (~16 mM), en kendt potent hæmmer af CPP-dannelse, men selvom der var en lille stigning i serumcitrat i CKD-gruppen, faldt denne ændring ikke sammen med de observerede ændringer i T50, og der var heller ikke nogen overordnet sammenhæng mellem ændring i T50 og serumcitrat på tværs af begge grupper. Andre tidligere beskrevne modulatorer af T50, såsom pyrophosphat og zink, blev ikke målt i denne undersøgelse. Selvom disse, eller andre endnu ukendte, faktorer også kan have bidraget til den observerede post-prandiale stigning i T50, bemærker vi, at ret betydelige ændringer i koncentrationen af ​​disse små uorganiske molekyler generelt er nødvendige for at påvirke T5065 betydeligt. I modsætning til de post-prandiale effekter på T50 forblev den hydrodynamiske radius af CPP-II tilsyneladende uændret i begge grupper.

Cistanche kapsler

Mens post-prandiale udflugter af CPM blev observeret i begge grupper, var CPM-niveauerne konsekvent højere i CKD-gruppen på hvert af tidspunkterne, og gruppe-for-tid interaktionsudtryk indikerede, at størrelsen af ​​den post-prandiale respons var signifikant større hos CKD-deltagere end hos kontroller. Følgelig var der i eksplorativ analyse en stærk korrelation mellem eGFR og CPM AUC og maksimal koncentration. Spidsniveauer af CPM havde også en tendens til at forekomme senere i CKD-gruppen. Teoretisk set kunne disse forskelle indikere øget produktion af CPM efter ernæringsindtag og/eller en svækket evne til at fjerne CPM hos personer med CKD. Sidstnævnte understøttes af nyere data fra Koeppert et al., som brugte levende to-fotonmikroskopi til at vise, at cirkulerende CPM overvejende fjernes ved glomerulær filtration i mus29. En rimelig forudsigelse kan derfor være, at kapaciteten til at cleare CPM bliver svækket, efterhånden som GFR falder. Ændringer i andre aspekter af mineralhomeostase, herunder knogleomsætning66, og forsinket nyreudskillelse af akutte fosfatbelastninger7,59 ses dog også almindeligt ved CKD og kan meget vel have bidraget til stigninger i post-prandiale niveauer. Nylige beviser har sat spørgsmålstegn ved den langvarige opfattelse af, at CKD påvirker netto intestinal fosfatabsorption57,67,68. Vi bemærkede dog, at seks af de 14 personer i CKD-gruppen tog cholecalciferol. I betragtning af potentialet for stimulerende virkninger af vitamin D på intestinal mineralabsorption, udførte vi en ad hoc eksplorativ analyse for at teste, om brugen af ​​ernæringsmæssigt vitamin D påvirkede det akutte respons af CPM, CPP-I og CPP-II på fodring (Supplerende tabeller) S9-S11). Bortset fra en enkelt positiv gruppevis interaktion for CPP-I efter 30 minutter hos dem, der tog cholecalciferol, var alle andre interaktionsudtryk og post hoc parvise sammenligninger for CPM, CPP-I og CPP-II ikke signifikante, hvilket tyder på, at cholecalciferol brug var usandsynligt at have haft en væsentlig effekt på post-prandial CPM/CPP kinetik. Mens den lille prøvestørrelse og potentialet for forvirring kan udelukke definitive konklusioner, kan den manglende effekt også afspejle overvægten af ​​fosfatabsorption via den paracellulære vej, når mineralet er rigeligt, hvilket ikke er aktivt reguleret af vitamin D-aksen69.

I modsætning til CPM observerede vi ikke en stærk effekt på nyrefunktionen i hverken CPP-I eller CPP-II. I modsætning til CPM fjernes cirkulerende CPP primært fra cirkulation af ikke-renale mekanismer. Dyre- og in vitro-modeller har foreslået hurtig clearance af CPP-I overvejende af sinusformede endotelceller i leveren28 og af CPP-II af residente makrofager i leveren og milten70. Det er sandsynligt, at mens deltagere i vores CKD-gruppe viste tegn på ændret CPM-metabolisme, var disse diskrete CPP-clearance-veje tilstrækkelige til at opretholde normale post-prandiale CPP-profiler. Vi havde forventet, at CKD-gruppen ville have mærkbart højere niveauer af CPP sammenlignet med kontroller baseret på tidligere undersøgelser, selvom disse undersøgelser inkluderede patienter med mere fremskreden CKD, som var dialyseafhængige33, eller brugte den ældre og indirekte metode til CPP-måling20,23. Personer med mere fremskreden CKD end dem, der er undersøgt her, kan udvise større forskelle i fastende og post-prandiale CPP-niveauer. Manglen på adskillelse for CPP mellem vores CKD og kontrolgruppe kan også skyldes vores begrænsede deltagerantal, som også begrænsede vores evne til formelt at teste for en effekt af CKD-stadiet (Supplerende Fig. S6). Faktisk var vores undersøgelse baseret på at undersøge post-prandiale svar snarere end forskelle mellem grupper. Det er værd at bemærke, at CPP-I så ud til at vende tilbage til fasteniveauer tidligere i kontroller end CKD-deltagere, og der var en positiv gruppe-for-tid-interaktion for CPP-II hos CKD-deltagere efter 120 min. Begge resultater signalerer potentielt, at vi muligvis har observeret mere udtalte effekter mellem grupper i en større kohorte. Højere analytisk unøjagtighed for flowcytometri-baserede CPP-målinger kan også have bidraget til nulfundene.

Ud over at give ny indsigt i fysiologien af ​​CPM og CPP metabolisme, har vores undersøgelse også direkte relevans for at optimere brugen af ​​disse nye markører for mineralmetabolisme i fremtidige undersøgelser. Mens hver af disse nye assays har vist lovende i tidligt klinisk arbejde, har meget få undersøgelser rapporteret43 eller kontrolleret for fastende/absorberende status46,56. I denne undersøgelse havde flere individer uopdagelige niveauer af CPP-I eller CPP-II i den fastende og tidlige post-prandiale periode, og denne dybe virkning af faste på serum CPP er i sig selv tidligere urapporteret og bemærkelsesværdig finansiering. I modsætning hertil var fastende CPM-niveauer målbare og signifikant højere i CKD-gruppen end i kontroller, hvilket tyder på, at vedvarende stigninger i CPM ikke nødvendigvis manifesterer sig i forhøjede CPP-niveauer hos dem med ikke-dialyseafhængig CKD.

Tidligere epidemiologiske undersøgelser har antydet sammenhænge mellem forhøjede niveauer af CPM og CPP med en række surrogatmarkører for vaskulær sygdom21,23,24 såvel som med kardiovaskulære hændelser25 og dødelighed af alle årsager22. Yderligere har laboratoriebaserede undersøgelser givet plausible mekanismer, hvorved CPP kan mediere disse patologiske vaskulære resultater26-28. Men mens in vitro undersøgelser har antydet, at mange af disse toksiciteter induceres på en dosisafhængig måde, hvis CPP har en normal fysiologisk rolle i sundheden, så er det uklart, på hvilket tidspunkt disse partikler kan blive skadelige. Viden om virkningen af ​​ernæringsindtag på CPP-kinetikken som afsløret her kan vise sig at være afgørende for yderligere at forstå denne proces. En tærskelkoncentration for indtræden af ​​patologiske virkninger af CPM og CPP kan (i det mindste initialt) kun nås i den post-prandiale tilstand in vivo. Hvis det er tilfældet, kan dynamisk testning af den post-prandiale respons give yderligere muligheder for at evaluere tidligere manifestationer af dysreguleret mineralmetabolisme, såvel som risikoen for associeret vaskulær sygdom. En anden vigtig mulighed er, at sammensætningen og dermed den iboende toksicitet af CPP-I og CPP-II er forskellig mellem sundhed og CKD45.

Cistanche tillæg

Begrænsninger

Vi anerkender, at denne undersøgelse har flere begrænsninger, herunder begrænset patientantal, som allerede diskuteret. Det er bemærkelsesværdigt, at vi også brugte et standardiseret måltid givet efter en faste natten over, så vi kan ikke udtale os om effekten af ​​varierende måltidssammensætning eller effekten af ​​efterfølgende måltider givet resten af ​​dagen. Vi valgte måltidet baseret på dets kommercielle tilgængelighed, hvilket muliggjorde standardisering mellem deltagerne, og fordi det repræsenterede fysiologisk relevante ernæringsmæssige belastninger (tabel 1). Det er dog muligt, at hvis deltagerne blev udfordret med større mineralbelastninger, kan yderligere adskillelse mellem dem med normal og nedsat nyrefunktion have været tydelig. På samme måde, da vi kun observerede individer i fire timer efter måltid, er det tænkeligt, at den kumulative effekt af efterfølgende måltider også kan have skelnet grupper yderligere.

Vi genfandt ikke afføring eller urin og kan derfor ikke kommentere på de samlede mineraler, der blev absorberet eller udskilt under undersøgelsen. Vi antager, at ændringer i hvert mål set efter fodring er direkte relateret til næringsindtaget. Denne antagelse understøttes indirekte af detaljerede billeddannelsesundersøgelser, der viser flux af calcium og fosfationer efter fødeindtagelse57, såvel som direkte beviser fra dyreforsøg, der viser, at akut oral sondeernæring af mus med en bufret fosfatopløsning resulterer i serumspidser i CPM/CPP48. Ikke desto mindre observerede vi ikke deltagere under længerevarende fasteforhold, og vi kan derfor ikke endegyldigt redegøre for ikke-kostrelaterede daglige udsving i nogen af ​​de undersøgte parametre. Vi havde dog to fasteprøver, hvis gennemsnit blev brugt som "tid 0", og variabiliteten mellem disse fastende prøver var triviel sammenlignet med størrelsen af ​​ændringer set i perioden efter måltidet.

Vi brugte Bonferroni-metoden til at tage højde for de flere post hoc parvise sammenligninger mellem og inden for grupper for hver parameter. Dette er utvivlsomt en konservativ tilgang, og så vidt vi ved ikke en, der ikke er vedtaget af andre lignende fodringsundersøgelser af post-prandial mineralmetabolisme. Vi valgte denne tilgang i betragtning af det store antal tidspunkter og sammenligninger, der blev foretaget og begrundede, at det var at foretrække at fokusere på de mest robuste og signifikante signaler. Men som følge heraf kan vi have savnet mindre, men potentielt relevante effekter. Vi korrigerede ikke for flere tests på tværs af forskellige mineralparametre i betragtning af sandsynligheden for indbyrdes afhængige fysiologisk forbundne ændringer.

Cistanche tubulosa

Konklusion

Vores undersøgelse har for første gang afsløret, at ernæringsmineralindtag fører til dannelsen af ​​CPM og CPP i blodet som en normal fysiologisk reaktion på fodring. Disse resultater bekræfter hypotesen om, at CPM/CPP-dannelse hjælper med at opbygge post-prandiale mineralbelastninger, der fungerer som et midlertidigt cirkulerende lager af bulk calciumphosphater, der i sidste ende er bestemt til udnyttelse/opbevaring (f.eks. et mineralprækursor for knoglemineralisering) eller eliminering. Vi observerede også højere fasteniveauer af serum-CPM og en større post-prandial respons hos dem med nedsat nyrefunktion, hvilket tyder på, at CPM-metabolismen er tydeligt ændret ved CKD. Analyse af post-prandial CPM/CPP-håndtering kan give ny indsigt i de mekanismer, der forbinder overdreven calcium- og fosfatindtagelse i kosten med øget risiko for hjerte-kar-sygdom hos patienter med nedsat mineraludskillelse. Mere generelt understreger disse nye resultater det vigtige, men ofte forsømte, bidrag fra kolloid biokemi til mineralhomeostase.

Referencer

1. Magalhães, MCF, Marques, PAAP & Correia, RN Biomineralization—Medical Aspects of Solubility (red. Königsberger, E. & Königsberger, L.). 71-123. (Wiley, 2006).

2. Holt, C., Lenton, S., Nylander, T., Sorensen, ES & Teixeira, SC Mineralisering af blødt og hårdt væv og stabiliteten af ​​biovæsker. J. Struct. Biol. 185, 383-396 (2014).

3. Reznikov, N., Steele, JAM, Fratzl, P. & Stevens, MM En materialevidenskabelig vision om ekstracellulær matrixmineralisering. Nat. Rev. Mater. 1, 16041 (2016).

4. Smith, ER Vaskulær forkalkning i uræmi: New-age begreber om et alderdomsproblem. Metoder Mol. Biol. 1397, 175-208 (2016).

5. Chen, J. et al. Koronararterieforkalkning og risiko for hjertekarsygdomme og død blandt patienter med kronisk nyresygdom. JAMA Cardiol. 2, 635-643 (2017).

6. Kestenbaum, BR et al. Forekomst og progression af koronar forkalkning ved kronisk nyresygdom: Den multietniske undersøgelse af aterosklerose. Nyre Int. 76, 991-998 (2009).

7. Isakova, T. et al. Postprandial mineralmetabolisme og sekundær hyperparathyroidisme i tidlig CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 615-623 (2008).

8. Scanni, R., vonRotz, M., Jehle, S., Hunter, HN & Krapf, R. Den menneskelige reaktion på akutte enterale og parenterale fosfatbelastninger. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 2730-2739 (2014).

9. Pasch, A., Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Fosfat, forkalkning i blod og mineralstress: Det fysiologiske blodmineralbuffersystem og dets sammenhæng med kardiovaskulær risiko. Int. J. Nephrol. 2018, 9182078 (2018).

10. Jahnen-Dechent, W. et al. Mudder i blodet: Protein-mineralkompleksers og ekstracellulære vesiklers rolle i biomineralisering og forkalkning. J. Struct. Biol. 212, 107577 (2020).

11. Schinke, T. et al. Serumproteinet alpha2-HS glycoprotein/fetuin hæmmer apatitdannelse in vitro og mineraliserende calvariaceller. En mulig rolle i mineralisering og calciumhomeostase. J. Biol. Chem. 271, 20789-20796 (1996).

12. Heiss, A. et al. Strukturelt grundlag for forkalkningsinhibering af alfa 2-HS glycoprotein/fetuin-A. Dannelse af kolloide calciproteinpartikler. J. Biol. Chem. 278, 13333-13341 (2003).

13. Cai, MM, Smith, ER & Holt, SG Fetuin-A's rolle i mineralsmugling og aflejring. Bonekey Rep. 4, 672 (2015).

14. Smith, ER, Hewitson, TD & Jahnen-Dechent, W. Calciprotein-partikler: Mineral opfører sig dårligt? Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 29, 378-386 (2020).

15. Jahnen-Dechent, W., Schäfer, C., Ketteler, M. & McKee, MD Mineralske chaperoner: En rolle for fetuin-A og osteopontin i hæmningen og regression af patologisk forkalkning. J. Mol. Med. (Berl.) 86, 379-389 (2008).

16. Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Naturens middel mod fosfatproblemer: Calciproteinpartikler regulerer systemisk mineralmetabolisme. Nyre Int. 97, 648-651 (2020).

17. Schafer, C. et al. Serumproteinet alfa 2-Heremans-Schmid glycoprotein/fetuin-A er en systemisk virkende hæmmer af ektopisk forkalkning. J. Clin. Investere. 112, 357-366 (2003).

18. Herrmann, M. et al. Lumenal forkalkning og mikrovaskulopati i fetuin-A-deficiente mus fører til morbiditet i flere organer. PLoS ONE 15, e0228503 (2020).

19. Heiss, A., Pipich, V., Jahnen-Dechent, W. & Schwahn, D. Fetuin-A er et mineralbærerprotein: Neutronspredning med små vinkler giver ny indsigt i Fetuin-A-kontrolleret forkalkningsinhibering. Biofys. J. 99, 3986-3995 (2010).

20. Smith, ER et al. Serum fetuin-A-koncentration og fetuin-A-holdige calciproteinpartikler hos patienter med kronisk inflammatorisk sygdom og nyresvigt. Nephrology (Carlton) 18, 215-221 (2013).

21. Smith, ER et al. Fosforylerede fetuin-A-holdige calciproteinpartikler er forbundet med aortastivhed og et procyklisk miljø hos patienter med CKD før dialyse. Nephrol. Urskive. Transplantation. 27, 1957-1966 (2012).

22. Smith, ER et al. Serumforkalkningstilbøjelighed forudsiger dødelighed af alle årsager i prædialyse CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 339-348 (2014).

23. Hamano, T. et al. Fetuin-mineralkomplekset afspejler ekstraossøs forkalkningsstress ved CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 21, 1998-2007 (2010).

24. Nakazato, J. et al. Forening af calciproteinpartikler målt ved en ny metode med koronararterieplak hos patienter med koronararteriesygdom: Et tværsnitsstudie. J. Cardiol. 74, 428-435 (2019).

25. Gatate, Y. et al. Mid-term prædiktiv værdi af calciproteinpartikler i vedligeholdelseshæmodialysepatienter baseret på et gelfiltreringsassay. Aterosklerose 303, 46-52 (2020).

26. Cai, MMX, Smith, ER, Tan, SJ, Hewitson, TD & Holt, SG Sekundære calciproteinpartiklers rolle i mineraliseringsparadokset ved kronisk nyresygdom. Calcif. Væv. Int. 101, 570-580 (2017).

27. Aghagolzadeh, P. et al. Forkalkningen af ​​vaskulære glatte muskelceller induceres af sekundære calciproteinpartikler og forstærkes af tumornekrosefaktor alfa. Atherosclerosis 251, 404-414 (2016).

28. Koppert, S. et al. Cellulær clearance og biologisk aktivitet af calciproteinpartikler afhænger af deres modningstilstand og krystallinitet. Foran. Immunol. 9, 1991 (2018).

29. Koeppert, S. et al. Levende billeddannelse af calciproteinpartikelclearance og receptormedieret optagelse: Calciproteinmonomers rolle. Foran. Celle. Dev. Biol. 9, 633925 (2021).

30. Shishkova, D. et al. Calciumphosphatbioner forårsager intimal hyperplasi i intakte aorta hos normolipidæmiske rotter gennem endotelskade. Int. J. Mol. Sci. 20, 5728 (2019).

31. Kuro-o, M. Et fosfatcentreret paradigme for patofysiologi og terapi af kronisk nyresygdom. Nyre Int. Suppl. 2011(3), 420-426 (2013).

32. Miura, Y. et al. Identifikation og kvantificering af plasma calciprotein partikler med distinkte fysiske egenskaber hos patienter med kronisk nyresygdom. Sci. Rep. 8, 1256 (2018).

33. Smith, ER et al. En ny fluorescerende probe-baseret flowcytometrisk analyse for mineralholdige nanopartikler i serum. Sci. Rep. 7, 5686 (2017).

34. Nakamura, K. et al. Effekten af ​​lanthancarbonat på calciproteinpartikler hos hæmodialysepatienter. Clin. Exp. Nephrol. 24, 323-329 (2020).

35. Tiong, MK et al. Effekt af en medium cut-of dialysator på proteinbundne uremiske toksiner og mineralmetabolismemarkører hos patienter i hæmodialyse. Hæmodial. Int. https://doi.org/10.1111/hdi.12924 (2021).

36. Tiong, MK, Smith, ER, Toussaint, ND, Al-Khayyat, HF & Holt, SG Reduktion af calciproteinpartikler hos voksne, der modtager infliximab for kronisk inflammatorisk sygdom. JBMR Plus 5, e10497 (2021).

37. Smith, ER, Pan, FFM, Hewitson, TD, Toussaint, ND & Holt, SG Effekt af sevelamer på calciproteinpartikler hos hæmodialysepatienter: Te sevelamer versus calcium for at reducere fetuin-A-holdige calciproteinpartikler i dialyse (SCaRF) randomiseret kontrolleret forsøg. Nyre Int. Rep. 5, 1432-1447 (2020).

38. Ruderman, I., Smith, ER, Toussaint, ND, Hewitson, TD & Holt, SG Langsgående ændringer i knogle- og mineralmetabolisme efter ophør af cinacalcet hos dialysepatienter med sekundær hyperparathyroidisme. BMC Nephrol. 19, 113 (2018).

39. Bressendorf, I. et al. Effekten af ​​at øge dialysatmagnesium på calciproteinpartikler, inflammation og knoglemarkører: Post hoc-analyse fra et randomiseret kontrolleret klinisk forsøg. Nephrol. Urskive. Transplantation. 36, 713-721 (2021).

40. Pasch, A. et al. Den nanopartikelbaserede test måler den overordnede tilbøjelighed til forkalkning i serum. J. Am. Soc. Nephrol. 23, 1744-1752 (2012).

41. Eelderink, C. et al. Serumforkalkningstilbøjelighed og risikoen for kardiovaskulær mortalitet og dødelighed af alle årsager i den almindelige befolkning: PREVENT-undersøgelsen. Arterioskler. Tromb. Vasc. Biol. 40, 1942-1951 (2020).

42. Bundy, JD et al. Serumforkalkningstilbøjelighed og koronararterieforkalkning blandt patienter med CKD: Te CRIC (Chronic Renal Insufficiency Cohort) undersøgelse. Er. J. Nyre. Dis. 73, 806-814 (2019).

43. Bundy, JD et al. Serumforkalkningstilbøjelighed og kliniske hændelser ved CKD. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 14, 1562-1571 (2019).

44. Pasch, A. et al. Blodforkalkningstilbøjelighed, kardiovaskulære hændelser og overlevelse hos patienter, der modtager hæmodialyse i EVOLVE-studiet. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 12, 315-322 (2017).

45. Smith, ER, Hewitson, TD, Hanssen, E. & Holt, SG Biokemisk transformation af calciproteinpartikler i uræmi. Bone 110, 355-367 (2018).

46. ​​Chen, W. et al. Forbindelser af serum calciprotein partikelstørrelse og transformationstid med arteriel forkalkning, arteriel stivhed og dødelighed hos hæmodialysepatienter. Er. J. Kidney Dis. 77, 346-354 (2021).

47. Chen, W. et al. Patienter med fremskreden kronisk nyresygdom og vaskulær forkalkning har en stor hydrodynamisk radius af sekundære calciproteinpartikler. Nephrol. Urskive. Transplantation. 34, 992-1000 (2019).

48. Akiyama, KI et al. Calciproteinpartikler regulerer ekspression af fibroblastvækstfaktor-23 i osteoblaster. Nyre Int. 97, 702-712 (2020).

49. Smith, ER Calciprotein-partikler: En mineralsk biomarkør med behov for bedre måling. Aterosklerose 303, 43-45 (2020).

50. Smith, ER Te isolering og kvantificering af fetuin-A-holdige calciproteinpartikler fra biologiske væsker. Metoder Mol. Biol. 1397, 221-240 (2016).

51. Guo, Y., Logan, HL, Glueck, DH & Muller, KE Valg af en prøvestørrelse til undersøgelser med gentagne målinger. BMC Med. Res. Metode. 13, 100 (2013).

52. Liu, C., Cripe, TP & Kim, MO Statistiske spørgsmål i longitudinelle dataanalyse til undersøgelser af behandlingseffektivitet i de biomedicinske videnskaber. Mol. Ter. 18, 1724-1730 (2010).

53. Tobin, J. Estimering af sammenhænge for begrænsede afhængige variable. Econometrica 26, 24-36 (1958).

54. Ter Meulen, KJ et al. Citronsyredialysat forbedrer forkalkningstilbøjeligheden hos hæmodialysepatienter: Et multicenter prospektivt randomiseret cross-over forsøg. PLoS ONE 14, e0225824 (2019).

55. Tiem, U. et al. Effekten af ​​fosfatbindemiddelterapi med sucroferric oxyhydroxid på forkalkningstilbøjelighed hos kroniske hæmodialysepatienter: et randomiseret, kontrolleret, krydsforsøg. Clin. Nyre J. 14, 631-638 (2021).

56. Yamada, H. et al. Daglig variation i serumniveauer af calciproteinpartikler og deres sammenhæng med mineralmetabolismeparametre: En tværsnitspilotundersøgelse. Nephrology (Carlton) 23, 226-230 (2018).

57. Stremke, ER et al. Intestinal fosforabsorption hos moderat CKD og raske voksne blev bestemt ved hjælp af et radioisotopisk sporstof. J. Am. Soc. Nephrol. 32, 2057-2069 (2021).

58. Volk, C. et al. Akutte virkninger af et uorganisk fosfortilsætningsstof på mineralmetabolisme og kardiometaboliske risikofaktorer hos raske forsøgspersoner. J. Clin. Endokrinol. Metab. 107, e852–e864 (2022).

59. Turner, ME et al. Nedsat fosfattolerance blev afsløret med en akut oral udfordring. J. Bone Miner. Res. 33, 113-122 (2018).

60. Tomas, L. et al. Akut tilpasning til oral eller intravenøs fosfat kræver parathyreoideahormon. J. Am. Soc. Nephrol. 28, 903-914 (2017).

61. Zelt, JG et al. Akut vævsmineralaflejring som reaktion på en fosfatpuls i eksperimentel CKD. J. Bone Miner. Res. 34, 270-281 (2019).

62. Lebreton, JP et al. Serumkoncentrationen af ​​humant alpha 2 HS glycoprotein under den inflammatoriske proces: bevis på, at alpha 2 HS glycoprotein er en negativ akut-fase reaktant. J. Clin. Investere. 64, 1118-1129 (1979).

63. Uedono, H. et al. Virkninger af fetuin-A-holdige calciproteinpartikler på posttranslationelle modifikationer af fetuin-A i HepG2-celler. Sci. Rep. 11, 7486 (2021).

64. Niv, Y. & Fraser, GM. Det alkaliske tidevandsfænomen. J. Clin. Gastroenterol. 35, 5-8 (2002).

65. Smith, ER, Hewitson, TD & Holt, SG Diagnostiske tests for vaskulær forkalkning. Adv. Kronisk Nyre Dis. 26, 445-463 (2019).

66. Sprague, SM et al. Diagnostisk nøjagtighed af knogleomsætningsmarkører og knoglehistologi hos patienter med CKD behandlet ved dialyse. Er. J. Kidney Dis. 67, 559-566 (2016).

67. Vorland, CJ et al. Nyresygdomsprogression nedsætter ikke intestinal fosforabsorption i en rottemodel for kronisk nyresygdom-mineral knoglelidelse. J. Bone Miner. Res. 35, 333-342 (2020).

68. Marks, J. et al. Intestinal fosfatabsorption i en model for kronisk nyresvigt. Nyre Int. 72, 166-173 (2007).

69. Hill Gallant, KM & Vorland, CJ Intestinal phosphorabsorption: Nylige resultater i translationel og klinisk forskning. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 30, 404-410 (2021).

70. Herrmann, M. et al. Clearance af fetuin-A-holdige calciproteinpartikler medieres af scavenger-receptor-A. Circ. Res. 111, 575-584 (2012).

71. Sanitarium Health Food Company. UP&GO™ smag af vaniljeis. https://www.sanitarium.com.au/products/up-and-go/up-and-go/ vanilla-ice-favor (2021).

72. Australian Government National Health and Medical Research Council. Næringsstofreferenceværdier for Australien og New Zealand. https://www.nrv.gov.au/nutrients (2021).

Mark K.Tiong1,2, Michael MX Cai1 , Nigel D.Toussaint1,2, Sven‑JeanTan1,2, Andreas Pasch3,4,5 & Edward R. Smith1,2

1 Nefrologisk afdeling, Royal Melbourne Hospital, Grattan Street, Parkville, VIC 3052, Australien.

2 Institut for Medicin (RMH), University of Melbourne, Parkville, Australien.

3 Calciscon AG, Biel, Schweiz.

4 Lindenhofspital Bern, Bern, Schweiz.

5 Institut for Fysiologi og Patofysiologi, Johannes Kepler Universitet, Linz, Østrig.