Effekt af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på apoptose og fibrose af nyrevæv hos rotter med 5/6 nefrektomi baseret på HIF-1/PKM2

3.4 Effekter af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på proteinudtryk af -SMA, TGF-, FN og kollagen-1 i nyrevæv fra CRF-rotter

Som vist i figur 3~6, ​​sammenlignet med den sham-opererede gruppe, var proteinekspressionerne af -SMA, TGF-, FN og collagen-1 i nyrevæv fra modelgruppen signifikant forøget (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

Tabel 2 Effekter af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på serumniveauer af urinstof, Scr og ₂-MG hos CRF-rotter (x̄±s, n=10)

Gruppe	Urinstof/(mmol/L)	Scr/(μmol/L)	₂-MG/(mg/L)
Sham-opereret gruppe	6.23±0.63	37.35±0.83	0.98±0.13
Modelgruppe	23.02±0.73*	118.57±1.03*	3.95±1.07*
Lavdosis gruppe	21.23±0.69#	112.45±0.87#	2.57±0.35#
Medium-dosis gruppe	18.02±0.54#	93.18±1.17#	1.98±0.09#
Højdosis gruppe	15.23±0.33#	87.24±1.08#	1.13±0.17#
Benazepril gruppe	19.09±0.59#	105.77±0.67#	2.48±0.15#

Bemærk: *P<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group

3.5 Effekter af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på mRNA-ekspressioner af HIF-1, PKM2 og HK2 i nyrevæv hos CRF-rotter

Som vist i figur 7, sammenlignet med den sham-opererede gruppe, var mRNA-ekspressionerne af HIF-1, PKM2 og HK2 i nyrevæv fra modelgruppen signifikant forøget (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Figur 3. Effekter af den nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formel på -SMA-proteinekspression i nyrevæv fra CRF-rotter (ICH, ×400)

A. Sham-drevet gruppe
B. Modelgruppe
C. Lavdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
D. Medium-dosis nyre-tonificerende, blodaktiverende og turbiditets-eliminerende formelgruppe
E. Højdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
F. Benazepril Group

 

Figur 4. Virkninger af den nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formel på TGF-proteinekspression i nyrevævet hos CRF-rotter (ICH, ×400)

A. Sham-drevet gruppe
B. Modelgruppe
C. Lavdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
D. Medium-dosis nyre-tonificerende, blodaktiverende og turbiditets-eliminerende formelgruppe
E. Højdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
F. Benazepril Group

 

 

Klik for flere detaljer

 

Supportive Service Of Wecistanche-For flere detaljer om samarbejde
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

 

3.6 Effekter af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på proteinudtryk af HIF-1, PKM2 og HK2 i nyrevæv hos CRF-rotter

Som vist i figur 8, sammenlignet med den sham-opererede gruppe, var proteinekspressionerne af HIF-1, PKM2 og HK2 i nyrevæv fra modelgruppen signifikant forøget (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

3.7 Effekter af Bushen Huoxue Xiezhuo afkog på proteinudtryk af Bax, Bcl-2 og Caspase-3 i nyrevæv fra CRF-rotter

Som vist i figur 9, sammenlignet med den sham-opererede gruppe, var proteinekspressionen af ​​Bax og Caspase-3 i nyrevæv fra modelgruppen signifikant øget, mens proteinekspressionen af ​​Bcl-2 var signifikant reduceret (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Figur 7. Virkninger af den nyretonificerende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formel på ekspressionen af ​​HIF-1 , PKM2 og HK2 mRNA i nyrevævet hos CRF-rotter

A. Sham-drevet gruppe
B. Modelgruppe
C. Lavdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
D. Medium-dosis nyre-tonificerende, blodaktiverende og turbiditets-eliminerende formelgruppe
E. Højdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
F. Benazepril Group
Bemærk: Sammenlignet med den sham-opererede gruppe,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

Figur 8. Virkninger af den nyretonificerende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formel på HIF-1-, PKM2- og HK2-proteiner i nyrevævet hos CRF-rotter

A. Sham-drevet gruppe
B. Modelgruppe
C. Lavdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
D. Medium-dosis nyre-tonificerende, blodaktiverende og turbiditets-eliminerende formelgruppe
E. Højdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
F. Benazepril Group

 

Figur 9. Virkninger af den nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formel på ekspressionen af ​​Bax-, Bcl-2- og Caspase-3-proteiner i nyrevævet hos CRF-rotter

A. Sham-drevet gruppe
B. Modelgruppe
C. Lavdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
D. Medium-dosis nyre-tonificerende, blodaktiverende og turbiditets-eliminerende formelgruppe
E. Højdosis nyreforstærkende, blodaktiverende og turbiditetseliminerende formelgruppe
F. Benazepril Group

Bemærk: Sammenlignet med den sham-opererede gruppe,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

 

4 Diskussion

I de senere år har antallet af patienter med CKD været stigende, og dets prævalens er også steget markant. Baseret på den grundlæggende patogenese af CKD som "mangel kompliceret med overskud", foreslog professor Tan Jinchuan det terapeutiske princip om at tonificere nyre og milt, aktivere blodcirkulationen og dræne turbiditet. Tidligere undersøgelser har vist, at Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction kan regulere veje som autofagi, apoptose og fibrose for at beskytte nyrefunktionen. Relevante undersøgelser har vist, at rabarber, astragalus, angelica, salvia miltiorrhiza og deres aktive ingredienser alle kan hæmme nyrefibrose og beskytte nyrefunktionen [7]. Resultaterne af denne undersøgelse viste, at sammenlignet med modelgruppen forbedrede alle dosisgrupper af Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction serumniveauer af Urea, Scr og ₂-MG, såvel som kollagenfiberaflejring i nyrevæv i varierende grad, hvilket tyder på, at Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction spiller en vigtig rolle i at beskytte nyrefibrosis.

Navnlig er lignende nyrebeskyttende virkninger blevet rapporteret for Cistanche tubulosa, en klassisk TCM-urt kendt som "ørkenginseng" og anerkendt som et nyre-nærende lægemiddelmateriale af højeste kvalitet [15]. I TCM-teorien er Cistanche tubulosa højt værdsat for sin evne til at "oplive nyre-yang og genopbygge essens", og moderne forskning har bekræftet, at den er rig på aktive ingredienser såsom echinacoside, verbascoside og flavonoider [15]. Disse komponenter kan hæmme nyrecelleapoptose, fremme nyrecelleproliferation, reparere beskadiget nyrevæv og udvide nyreblodkar-effekter, der stemmer overens med de nyrebeskyttende mekanismer observeret i Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction [15]. Sådanne fund fremhæver potentialet af TCM-urter med nyre-nærende egenskaber i behandlingen af ​​CKD.

Apoptose er en af ​​de vigtige mekanismer, der ligger til grund for patogenesen af ​​CRF. Under fysiologiske forhold opretholdes en delikat dynamisk balance mellem pro-apoptotiske og anti-apoptotiske familiemedlemmer. Når først apoptose er overdrevent aktiveret, vil det føre til patologiske ændringer i glomeruli og renale tubuli og derved skade nyrefunktionen. Når det pro-apoptotiske protein Bax aktiveres, inducerer det en stigning i mitokondriel ydre membranpermeabilitet, hvilket resulterer i kollaps af mitokondrielt indre membranpotentiale og frigivelse af cytochrom C (CytC) i cytoplasmaet, som aktiverer Caspase-9 og yderligere udløser den Caspase-3-afhængige apoptotik [8]. Relevante undersøgelser har vist, at i proksimale tubulære epitelceller kan det effektivt hæmme den apoptotiske proces, hvis man slår Bax-genet ud eller opregulerer Bcl-2-ekspression [9]. Denne undersøgelse fandt, at alle doser af Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction signifikant nedregulerede udtryk for pro-apoptotiske faktorer Bax og Caspase-3 og opregulerede ekspressionen af ​​den anti-apoptotiske faktor Bcl-2, hvilket tyder på, at Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction kan forbedre nyrefunktionen ved at blokere den apoptotiske vej.

Nyrefibrose er en kronisk nyresygdom medieret af flere cytokiner, reguleret af flere signalveje og drevet af flere faktorer. Det er en almindelig vej, der fører til nyresygdom i slutstadiet, karakteriseret ved nyrevævsskade, inflammation, ECM-aflejring og tubulær epitel-mesenkymal overgang. Nyrefibrose omfatter glomerulær fibrose og tubulointerstitiel fibrose [8]. Undersøgelser har bekræftet, at den vigtigste patologiske manifestation af tidlig CRF er nyrefibrose, og at forsinke udviklingen af ​​nyrefibrose er af stor betydning for at reducere nyreskade og lindre udviklingen af ​​nyresvigt [10]. TGF- er en nøgleundertype, der driver fibrose, som regulerer ECM-syntese gennem Smad-signalvejen. FN er involveret i celleadhæsion, migration og ECM-samling. Den vigtigste cellulære kilde til overdreven ECM-aflejring er myofibroblaster, og deres strukturelle transdifferentiering er en nøglefaktor i forekomsten og udviklingen af ​​nyrefibrose. Kollagen-1 er hovedsageligt afledt af myofibroblaster, og -SMA, som en af ​​de vigtigste morfologiske karakteristika og aktiveringsmarkører for myofibroblaster, er ekspressionsniveauerne af begge positivt korreleret med graden af ​​nyrefibrose [11]. Relevante undersøgelser har vist, at ved forskellige kroniske nyresygdomme er mRNA- og proteinekspressionen af ​​-SMA og Collagen-1 signifikant øget, ledsaget af svær nyrefibrose [12]. I denne undersøgelse reducerede Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction udtrykket af fibrosemarkører som -SMA, TGF-, FN og Collagen-1 signifikant, hvilket indikerer, at Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction har vigtige effekter på at forbedre nyrefunktionen og bremse udviklingen af ​​nyrefibrose.

HIF-1 /PKM2-signalvejen er tæt relateret til apoptose. HIF-1 kan fremme apoptose ved transkriptionelt at aktivere Bax og hæmme Bcl-2, og PKM2 kan udøve effekter ved at regulere apoptose-relaterede proteiner såsom p53 efter nuklear translokation [13]. Som en af ​​nøgleregulatorerne af pattedyrets hypoxiske respons kan HIF-1 opregulere TGF-ekspression gennem HIF-1 i hypoxiske renale tubulære epitelceller i en nyre-interstitiel fibrosemodel, og derved aktivere Smad-relaterede veje og inducere ekspressionen af ​​fibrosemarkører såsom -SMA og Collagen-1. Ud over at deltage i apoptoseregulering understøtter PKM2 også fibrotiske cellers energibehov ved at regulere glykolytisk metabolisme [14]. Resultaterne af denne undersøgelse viste, at niveauerne af HIF-1 , PKM2 og HK2 i nyrevæv i CRF-modelgruppen var signifikant forhøjet, mens niveauerne i TCM-grupperne var signifikant reduceret, hvilket tyder på, at Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction kan hæmme apoptose og forsinke nyrefibrose ved at undertrykke aktiveringen af ​​renal væv i /HIF-1.

Sammenfattende kan Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction hæmme celleapoptose og fibrose hos CRF-rotter, forbedre nyreskade hos CRF-modelrotter, og dets mekanisme kan være relateret til reguleringen af ​​HIF-1 /PKM2-signalvejen.

Referencer

[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Kdigo 2024 klinisk praksis retningslinjer for evaluering og håndtering af kronisk nyresygdom[J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M, et al. Hypoxi-induceret HE4 i tubulære epitelceller fremmer ekstracellulær matrixakkumulering og nyrefibrose via NF-KB[J]. FASEB Journal, 2020, 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y, et al. Sanqi oral opløsning forbedrer nyrefibrose ved at undertrykke fibroblastaktivering via HIF-1 /PKM2/glykolysevej ved kronisk nyresygdom[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, et al. Pyruvatkinase M2 regulerer Hif-1-aktivitet og IL-1-induktion og er en kritisk determinant for Warburg-effekten i LPS-aktiverede makrofager[J]. Cellemetabolisme, 2015, 21(1): 65-80.[5] Se EJ, Cullen V. Kommentar til 2021-opdateringen af ​​KDIGO-retningslinjen for klinisk praksis til behandling af blodtryk ved kronisk nyresygdom[J]. Nephrology (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M, et al. Udforskning af virkningerne af Rabarber Xiezhuo Decoction på autofagi og apoptose hos rotter med kronisk nyresvigt baseret på mTORC1/p70S6K pathway [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW, et al. Forskningsfremskridt i mekanismen af ​​de vigtigste aktive komponenter i rabarberanthraquinoner mod nyrefibrose[J]. Traditional Chinese Medicine Research, 2023, 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et al. Beskyttende virkninger af hydrogensulfid på kronisk nyresygdom ved at reducere oxidativt stress, inflammation og apoptose[J]. EXCLI Journal, 2018, 17: 14-23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG, et al. Hantavirus hæmmer apoptose ved at forhindre mitokondriemembranpotentialetab gennem opregulering af pro-overlevelsesfaktoren BCL-2[J]. PLoS Pathogens, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H, et al. Icariin hæmmer Epo-promotor-hypermethylering, regulerer pericyte-myofibroblast-overgang og forbedrer nyreanæmi hos 5/6 nefrektomiserede rotter [J/OL]. Farmakologi og klinikker for kinesisk materia medica: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat forbedrer nyreskade og fibrose i en dyremodel[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020, 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R, et al. Polysaccharider ekstraheret fra Balanophora polyandra Griff (BPP) forbedrer nyrefibrose og EMT via inhibering af Hedgehog-vejen[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. CoCl2-simuleret hypoxi inducerer celleproliferation og ændrer ekspressionsmønsteret af hypoxi-associerede gener involveret i angiogenese og apoptose[J]. Biologisk forskning, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D, et al. Transkriptomiske signaturer, der reagerer på PKM2-aktivator TEPP-46 i hyperglykæmiske humane proksimale epitheliale tubulære celler[J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche til nærende nyre[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.