Coelomocytes of the Oligochaeta Earthworm Lumbricus Terrestris (Linnaeus, 1758) Som evolutionær nøgle til forsvar: en morfologisk undersøgelse

Abstrakt

Metazoer har flere mekanismer for indre forsvar for deres overlevelse. Det indre forsvarssystem udviklede sig sammen med organismerne. Annelidae har cirkulerende coelomocytter, der udfører funktioner, der kan sammenlignes med hvirveldyrs fagocytiske immunceller. Adskillige undersøgelser har vist, at disse celler er involveret i fagocytose, opsonisering og patogengenkendelsesprocesser. Ligesom hvirveldyrmakrofager fanger eller indkapsler disse cirkulerende celler, der gennemtrænger organer fra det coelomiske hulrum, patogener, reaktive oxygenarter (ROS) og nitrogenoxid (NO). Desuden producerer de en række bioaktive proteiner involveret i immunrespons og udfører afgiftningsfunktioner gennem deres lysosomale system.

Coelomocytter kan også deltage i litiske reaktioner mod målceller og frigivelsen af ​​antimikrobielle peptider. Vores undersøgelse identificerer immunhistokemisk coelomocytter af Lumbricus terrestris spredt i epidermal og bindelaget nedenfor, både i det langsgående og i det glatte muskellag, immunreaktive for TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang. TLR2 og CD14 er ikke fuldt kolokaliseret med hinanden, hvilket tyder på, at disse coelomocytter kan tilhøre to forskellige familier. Ekspressionen af ​​disse immunmolekyler på Annelidae coelomocytter bekræfter deres afgørende rolle i det indre forsvarssystem af disse Oligochaeta-protostomer, hvilket tyder på en fylogenetisk konservering af disse receptorer. Disse data kunne give yderligere indsigt i forståelsen af ​​Annelidas indre forsvarssystem og de komplekse mekanismer i immunsystemet hos hvirveldyr.

Coelomocytter er tæt beslægtet med immunitet. Coelomocytter er celler relateret til immunsystemet. De kan udskille en række forskellige immunfaktorer, såsom cytokiner, interleukiner, antigener og antistoffer, for at regulere og styrke kroppens immunforsvar.

Coelomocytter spiller en række forskellige immunfunktioner, herunder regulering af cellulære immunresponser som antigenpræsenterende celler, direkte dræbning af patogener og unormale celler og deltagelse i reguleringen af ​​inflammation og immunresponser. Derudover har nogle undersøgelser vist, at coelomocytter også kan forbedre immuniteten over for potentielle patogener ved at akkumulere immunhukommelsesceller og derved forbedre kroppens immunitet.

Derfor er opretholdelse af normal funktion og mængde af coelomocytter afgørende for kroppens immunitet. Samtidig kan kroppens immunitet også forbedres ved at regulere og forbedre coelomocytternes immunfunktion for bedre at forebygge og behandle forskellige sygdomme. Ud fra dette kan vi se vigtigheden af ​​immunitet. Cistanche kan øge immuniteten. Cistanche er rig på en række antioxidantstoffer, såsom C-vitamin, C-vitamin, carotenoider osv. Disse ingredienser kan fjerne frie radikaler, reducere oxidativt stress og forbedre immuniteten. system modstand.

Klik cistanche tubulosa fordele

Nøgleord

Annelid, Coelomocytter, Regnorm, Evolution, Immunitet.

Introduktion

De interne forsvarsmekanismer tillader værtens overlevelse i metazoanen. Disse mekanismer bliver mere og mere komplekse, efterhånden som organismer udvikler sig. I modsætning til hvirveldyrs deuterostomer mangler protostomer adaptiv immunitet, hvilket baserer deres forsvar på medfødt immunitet [56]. Den indledende forsvarslinje mod bakterier og mikroorganismer hos hvirveldyr er den hurtige aktivering af medfødte immunceller og molekyler. For nylig er hvirvelløse dyr blevet kandidater til medfødt immunitetsanalyse for at afsløre strategier og kompleksiteter af hvirveldyrs adaptive immunrespons. Invertebrater har udviklet en række aktive immunmekanismer, herunder produktion af antimikrobielle peptider, koagulation, fagocytose og indkapslingsreaktioner [20, 24]. Disse mekanismer afhænger af "mønstergenkendelsesreceptorer" (PRR'er), medfødte immunmolekyler, som kan skelne "selv" fra "ikke-selv"-membrankomponenter.

Anerkendelsen af ​​"patogen-associerede molekylære mønstre" (PAMP'er) regulerer starten af ​​essentielle signalveje op til aktiveringen af ​​gener, der koder for inflammatoriske mediatorer, antimikrobielle peptider og fagocytoseregulatorer [32]. Oligochaetes annelids (regnorme) er blevet en model for komparativ immunologi og bruges ligesom igler til jord- og vandmiljøbiomonitorering (B.-T. [48, 52, 53, 72]. Regnorme er forsynet med medfødte, højt udviklede og effektive forsvarsmekanismer mod farlige miljømæssige mikroorganismer. Den første mekanisk-biologiske forsvarslinje, der adskiller kroppen af ​​annelider fra det ydre miljø, er tegumentet, der består af en epidermis og muskellag. Det har en neglebånd med et tyndt lag af mucopolysaccharider og proteiner, der fungerer som en antimikrobiel barriere [20].

Hos regnorme arbejder det cellulære og humorale immunsystem sammen for første gang i metazoens evolution. Væsken i det coelomiske hulrum menes at være ansvarlig for humorale immunologiske aktiviteter. Regnormes coelomiske hulrum er fyldt med væsker, der indeholder frie og omvandrende coelomocytter og deres pigmenterede aggregater, kaldet brune kroppe, et produkt af indkapslingen af ​​invaderende bakterier og partikelrester. Adskillige biologiske processer, herunder hæmolytiske, proteolytiske, cytotoksiske og antibakterielle, udføres af regnormes coelomiske væske [19, 24, 29]. Coelom kommunikerer direkte med det ydre miljø gennem de dorsale porer og de koblede nefridiale tubuli, der udskiller metabolitterne. Disse porer er også involveret i elimineringen af ​​bakterier og udmattede coelomocytter. Under stressforhold kan den coelomiske væske og de suspenderede celler hurtigt udstødes af stigningen i det intracoloniske tryk [24].

Coelomocytter af regnorme er et væsentligt element i cellulær medfødt immunitet. Disse celler ligner hvirveldyrs leukocytter i både morfologi og funktion [33]. Coelomocytter udfører en bred vifte af opgaver, herunder cellecytotoksicitet, indkapsling og fagocytose. De kan opdeles i to primære subpopulationer: melanocytter og amøbocytter (hyalin og granuleret) [33]. Hyaline og granulære amøbocytter er involveret i fagocytose og indkapsling, der udtrykker forskellige PRR'er [23, 60]. Disse cirkulerende celler, der migrerer ind i væv fra det coelomiske hulrum, ligner meget hvirveldyrmakrofager, der opsluger eller indkapsler patogener, reaktive oxygenarter (ROS) og nitrogenoxid (NO) [39]. Eleocytter producerer en bred vifte af bioaktive proteiner, der er involveret i det humorale immunrespons og også afgiftende kroppen gennem deres lysosomale system [24]. Coelomocytter kan deltage i litiske reaktioner mod målceller og frigivelse af antimikrobielle peptider. Blandt immunmekanismerne har transplantationsforsøg påvist eksistensen af ​​selvgenkendelse hos regnorme [28].

Annelid coelomocytter danner hurtigt immunmekanismer mod bakterier, parasitter og gærarter gennem cellulære reaktioner [59]. Denne hurtige reaktion medieres af opløselige antibakterielle molekyler, såsom lysozym, lysenin og lubricin [22, 42, 68]. Højt konserverede immunologiske molekyler, såsom celleoverfladeindikatorer, blev opdaget på coelomocytter ved hjælp af cytometri til analyse. Især reagerede coelomocytter med pattedyrspecifikke antistoffer og viste overfladisk positivitet over for antistofferne anti-CD11a, CD45RA, CD45RO, CDw49b, CD54, b2-M og Ty-1 [30, 34].

Vores undersøgelse har til formål at immunhistokemisk evaluere tilstedeværelsen af ​​TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang i coelomocytter af Lumbricus terrestris (Linnaeus, 1758), en bred, multi-segmenteret, cylindrisk regnorm, der tilhører familien Lumbricidae (Annelida, Oligochaeta) , hermafrodit, 8 til 10 cm lang [55]. Forbedring af viden om hvirvelløse dyrs indre forsvarssystem kan hjælpe med forståelsen af ​​hvirveldyrs mere sofistikerede immunitet og følgelig udviklingen af ​​immunresponset [63].

Materialer og metoder

Prøver og vævsforberedelse

Lombricus terrestris prøver kommer fra vores laboratorie histotheca. Tidligere blev de taget i den uforurenede åbne mark og akklimatiseret i to uger i frisk jord, som rapporteret af Licata et al. [51], og blev derefter fremstillet ved hjælp af standardmetoderne til lysmikroskopi. Prøver blev nedsænket i immun (paraformaldehyd 4 procent) (05-W01030705, BioOptica Milano SpA, Milano, Italien) i to timer. Derefter blev de behandlet med en dehydrerende ethanolskala (fra 30 til 100 procent ethanol) og derefter forberedt til inklusion i paraffin under anvendelse af xylen.

Når de var inkluderet, blev to tynde sektioner på 3-5 μm skåret med en roterende mikrotom placeret på hvert objektglas.

Histologi

Morfologiske og histokemiske pletter blev brugt til at behandle objektglassene [4, 6]. Skiverne blev derefter rehydreret ved hjælp af progressive alkoholopløsninger (fra 100 til 30 procent ethanol) til destilleret vand efter at være blevet afparaffineret i xylen [17], G. [75], efterfølgende blev de farvet med Mallory trichrom og AB/PAS [3] . Efter farvning blev objektglassene monteret under anvendelse af Eukitt (BioOptica Milano SpA, Milano, Italien, Europa). Data om stammerne anvendt i denne undersøgelse er inkluderet i tabel 1.

Immunfluorescens

Deparafniserede sektioner blev behandlet med en 5 procent opløsning af natriumborhydrid for at eliminere autofluorescens, derefter blev en 2,5 procent opløsning af bovint serumalbumin (BSA) brugt, og derefter blev skiverne inkuberet natten over med primære antistoffer mod TLR2, CD14 og -Tubulin [40 ]. Derefter blev inkubationen af ​​sekundære antistoffer udført. For at undgå blegning blev skiverne monteret under anvendelse af Fluoromount™ Aqueous Mounting Medium (Sigma-Aldrich, Taufkirchen Tyskland, Europa). Eksperimenter blev kørt uden de primære antistoffer som en negativ kontrol (data ikke vist). For at bekræfte, at de primære antistoffer var immunopositive, blev rottehudsvæv anvendt som en positiv kontrol (data ikke vist) [5, 47, 74].

Sektionerne blev analyseret under et Zeiss LSM DUO konfokalt laserscanningsmikroskop med et META-modul (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, Jena, Tyskland, Europa) med helium-neon (543 nm) og argon (458 nm) lasere af forskellige bølgelængder [7] . For at forbedre billeder blev Zen 2011 (LSM 700 Zeiss-software, Oberkochen, Tyskland, Europa) brugt. Ved at bruge Adobe Photoshop CC version 2019 (Adobe Systems, San Jose, CA, USA) blev de digitale billeder slået sammen til en sammensat figur. Fluorescensintensitetskurverne blev derefter evalueret ved hjælp af Zen 2011 "Display profile"-funktionen [58]. Detaljer om antistoffer er opsummeret i tabel 2.

Kvantitativ analyse

Data blev indsamlet til den kvantitative analyse gennem undersøgelse af ti sektioner og tyve felter pr. prøve. Cellepositiviteten og antallet blev vurderet ved hjælp af ImageJ software 1.53e. Antallet af coelomocytter, der er positive for TLR2, CD14 og -Tubulin, blev talt ved hjælp af SigmaPlot version 14.0 (Systat Software, San Jose, CA, USA). De normalt fordelte data blev analyseret ved hjælp af envejs ANOVA og en Students t-test. Middelværdier og standardafvigelser (SD) af antallet af immunoreaktive coelomocytter er rapporteret: ** p Mindre end eller lig med 0.01, * p Mindre end eller lig med 0,05.

Resultater

Regnormen Lumbricus terrestris har et mono-lagdelt epitel og en dækkende fibrøs kutikula, der udgør epidermis. Binde- og muskelvæv, der udgør det meste af kropsvæggen, ligger under epidermis. Det epidermale epitel holder den kollagenøse kutikula adskilt fra resten af ​​organismen og er ansvarlig for produktionen af ​​dette cutikulære kollagen. Kutikula, epidermis, langsgående muskel og den cirkulære muskel er alle synlige ved histologisk inspektion af tværsnittet af regnormes kropsvæg. Epidermis er morfologisk veldefineret; det er enten et enkelt epitellag eller pseudostratificeret; den består af støttende, basale, kirtel- og sanseceller (fig. 1). Immunofluorescensanalyse, ved den konfokale mikroskopobservation, viser positive coelomocytter for TLR2 (fig. 2, 3), CD14 (fig. 2) og -Tubulin (fig. 3), spredt i epidermal og bindelaget nedenfor, både i det langsgående og i det glatte muskellag. TLR2 og CD14 er ikke fuldstændigt kolokaliseret med hinanden, hvilket tyder på, at disse coelomocytter kan tilhøre to forskellige familier (fig. 2). Endvidere var slimkirtelceller tubulin-positive i epidermis (fig. 3). Ved at analysere funktionen "visningsprofil" af det konfokale mikroskop bekræftede vi fluorescenstoppene for kolokalisering mellem testede antistoffer.

Kvantitativ analyse afslørede et tilsvarende antal positive coelomocytter for de individuelle testede antistoffer, som vist i tabel 3.

Diskussion

Værtsreaktioner mod invaderende patogener er fysiologiske mekanismer, der tilhører alle levende organismer. Siden fremkomsten af ​​de første eukaryote celler har adskillige forsvarsprocesser udviklet sig for at garantere celleintegritet, homeostase og værtsoverlevelse [25]. Invertebrater har udviklet en række forsvarsreaktioner, der effektivt genkender og fjerner fremmede materialer, mikrober eller parasitter. Mens chordater har adaptiv immunitet, stoler lophotrochozoaner som regnorme primært på medfødte immunceller, såsom fagocytter (amoebocytter, coelomocytter), der involverer fylogenetisk konserverede PRR'er til at mediere immunresponset [41]. Scavenger-receptorer, TLR'er og Nod-lignende receptorer (NLR'er) er fremtrædende repræsentanter hos hvirvelløse dyr. Efter receptor-ligandbinding initierer signaltransduktion en kompleks kaskade af cellulære reaktioner, hvilket fører til produktionen af ​​et eller flere effektormolekyler involveret i immunresponset [61]. Det coelomiske cytolytiske protein (CCF), det lipopolysaccharid-bindende protein (EaLBI/BPI) og den Toll-lignende EaTLR-receptor er de tre typer PRR'er, der hidtil er blevet identificeret i regnorme [65, 66]. CCF er blevet identificeret og karakteriseret som et immunmolekyle af den coelomiske væske og coelomocytter af Eisenia foetida (Savigny, 1826). CCF, der binder til de mikrobielle antigener, kan udløse prophenoloxidase-kaskaden, en vigtig invertebrat-immunmekanisme, der også udøver opsoniserende egenskaber og dermed fremmer fagocytose [18, 35].

TLR'er er evolutionært konserverede membrangenkendelsesreceptorer [9, 15], der genkender fremmede antigener ved hjælp af PAMP'er [2] og bidrager til moduleringen af ​​immunresponset [8, 9, 11, 36]. Bodó et al. [24] viste tilstedeværelsen af ​​TLR på coelomocytter af en annelid oligochaete Eisenia andrei (Bouché, 1972) [24]. Skanta et al. (2013) isolerede regnorm TLR (EaTLR) fra E. andrei. Den høje intraartsdiversitet af denne receptor indikerer tilstedeværelsen af ​​flere TLR-gener i E. andrei-genomet. En TLR fra annelid polychaete Capitella teleta (Blake, Grassle og Eckelbarger, 2009), EaTLR og TLR'er af bløddyr og pighuder deler mange ligheder ifølge fylogenetisk forskning [66]. Prochazkova et al. fremhævede EaTLR og multiple cysteine ​​cluster (MCC) EaTLR udtrykt i hele kroppens væv af regnorme. Den første er særligt udbredt i fordøjelsessystemet, mens den anden kan virke i embryonal udvikling og responsen mod parasitter [61]. Desuden kan dets tilstedeværelse i coelomocytter overudtrykkes på grund af bakteriel akkumulering [66]. Coelomocytter af Lumbricus terrestris var i stand til at genkende monocytter in vitro som ikke-selv, hvilket bekræfter deres evne til immungenkendelse [62]. Transkriptomiske undersøgelser bekræfter tilstedeværelsen af ​​18 TLR'er i polychaete annelid Arenicola marina (Linnaeus, 1758) [67].

Vi har tidligere påvist tilstedeværelsen af ​​TLR2 i flere hvirveldyr [4, 11, 12, 16, 46, 54] og urochordater [14, 45].

Efter disse data karakteriserede vores undersøgelse immunhistokemisk TLR2 i coelomocytter af Lumbricus terrestris for første gang. Vi kolokaliserede TLR2/CD14 og TLR2/-Tubulin, hvilket bekræfter to celletyper af coelomocytter, som rapporteret af Engelmann [33]. Ikke alle coelomocytter blev kolokaliseret for de testede antistoffer, hvilket tyder på en sandsynlig funktionel og strukturel diversificering af disse celler. Selvom der ikke er nogen eksperimentel evidens, kan tilstedeværelsen af ​​TLR2/CD14 kolokaliserede coelomocytter tyde på, at disse celler kunne være amøbocytter involveret i fagocytose, mens coelomocytter, der kun udtrykker TLR, kan være melanocytceller involveret i immunresponset, men som ikke udfører fagocytiske funktioner [1, 37 , 38], SJ [49, 50], s., [57, 71]. På trods af Bodó et al. hvilket tyder på fraværet af TLR i E. andrei melanocytter ved hjælp af qPCR [23], TLR2-positive melanocytter påvises i L. terrestris, hvilket tyder på en forskel mellem regnormearter, som allerede er antaget på en nuklear genomisk base [64].

En undersøgelse af Eguielor et al. [31] i igle Glossiphonia complanata (Linnaeus, 1758) identificerede morfologisk og histokemisk tre hovedcelletyper (makrofaglignende celler, NK-lignende celler, granulocytter type I og II) ved hjælp af forskellige anti-humane markører i mus, der er specifikke for makrofager CD14 og CD61 [44] og NK-celler CD56 og CD57 [43]. Denne krydsreaktivitet til antistoffer genereret mod pattedyr-CD-antigener stemmer overens med litteraturdata om fylogenetiske korrelationer mellem annelider og hvirveldyr [21, 30] og kunne være et eksempel på den evolutionære bevarelse af disse immunmolekyler.

Muse anti-humant anti-CD24, anti-tumor nekrose faktor (TNF)-, anti-CD45RA og anti-CD45RO antistoffer er blevet lokaliseret i coelomocytoverfladerne af regnormen Eisenia foetida [30, 34], hvilket tyder på, at disse molekyler er meget konserveret under fylogenese. Disse undersøgelser er i overensstemmelse med tidligere forskning, der viser, at coelomocyt-overfladeantigener er krydsreaktive med antistoffer mod CD14, CD11b og CD11c produceret i pattedyr Temiste petricola (Amor, 1964), der karakteriserer fagocytter, der er positive over for anti-CD14, CD11b og CD11c antistoffer [21 ]. Ud fra disse data viste vores resultater fagocytiske celler immunreaktive over for CD14 i Lumbricus terrestris.

Desuden demonstrerede vi immunopositiviteten af ​​coelomocytter til -Tubulin, kolokaliseret med TLR2, hvilket viste en forbindelse mellem cytoskelet, mikrotubuli og medfødt immunrespons medieret af TLR2. Kolokalisering af TLR2 og -Tubulin bekræfter involveringen af ​​tubulin i transporten af ​​TLR'er på membranoverfladen. En undersøgelse af Heli Uronen-Hansson et al. [70] udviste omfattende tubulovesikulær ekspression af TLR2 og TLR4 på interne og eksterne monocytter såvel som i dendritiske celler. Da disse receptorer er kolokaliseret med -Tubulin og koblet direkte til Golgi-komplekset, kan mikrotubuli tjene som en kanal til overførsel af TLR-vesikler [70]. Tubulin er også til stede i epidermis, der hjælper med at bevare dets integritet [27] og griber ind i sårheling [73], og hjælper således det medfødte immunsystem, som også rapporteret af undersøgelser af Nematoda Caenorhabditis elegans (Maupass, 1900) [27, 69].

Kolokalisering, bekræftet af "visningsprofil"-funktionen af ​​det konfokale mikroskop, bekræfter de opnåede resultater, hvilket fremhæver toppen af ​​fluorescens svarende til bindingen af ​​antistofferne til de tilsvarende antigener.

Som konklusion identificerer vores undersøgelse ved konfokal mikroskopi coelomocytter, der er immunreaktive over for TLR2, CD14 og -Tubulin for første gang i Oligochaeta annelid Lumbricus terrestris. Disse data validerer ikke kun den vigtige evolutionære bevarelse af disse molekyler, men uddyber også vores viden om det indre forsvarssystem for hvirvelløse dyr, især anneliderne, og kan give nyttige indikationer for fremtidige undersøgelser, hvilket forbedrer studiet af de komplekse medfødte immunmekanismer af øvre hvirveldyr.

Udtalelse fra institutionelle revisionsnævn

Etisk gennemgang og godkendelse blev frafaldet for denne undersøgelse, fordi der ikke blev anvendt eksperimentelle procedurer på prøverne.

Forfatteres bidrag

Konceptualisering, Alessio Alesci; formel analyse, Alessio Alesci og Angelo Fumia; undersøgelse, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi og Eugenia Rita Lauriano; datakuration, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi og Eugenia Rita Lauriano.; skrivning — originalt udkast til forberedelse, Alessio Alesci; skrivning – anmeldelse og redigering, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizi og Eugenia Rita Lauriano; visualisering, Alessio Alesci og Angelo Fumia; supervision, Eugenia Rita Lautiano. Alle forfattere har læst og accepteret den offentliggjorte version af manuskriptet.

Finansiering

Denne forskning modtog ingen ekstern finansiering.

Tilgængelighed af data og materialer

Dataene præsenteret i denne undersøgelse er tilgængelige i artiklen.

Erklæringer

Etisk godkendelse og samtykke til deltagelse

Ikke anvendelig.

Konkurrerende interesser

Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.

Referencer

1. Aderem A, Underbakke DM. Mekanismer for fagocytose i makrofager. Annu Rev Immunol. 1999;17(1):593-623. https://doi.org/10.1146/annur ev.immunol.17.1.593.

2. Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. Patogengenkendelse og medfødt immunitet. Celle. 2006;124(4):783-801. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.02.015.

3. Alesci A, Albano M, Savoca S, Mokhtar DM, Fumia A, Aragona M, Lo Cascio P, Hussein MM, Capillo G, Pergolizzi S, Spanò N, Lauriano ER. Konfokal identifikation af immunmolekyler i hudklubceller fra zebrafsh (Danio rerio, Hamilton 1882) og deres mulige rolle i immunitet. Biologi. 2022;11(11):1653. https://doi.org/10.3390/biology11111653.

4. Alesci A, Capillo G, Fumia A, Messina E, Albano M, Aragona M, Lo Cascio P, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Konfokal karakterisering af intestinale dendritiske celler fra myxiner til teleosts. Biologi. 2022;11(7):1045.https://doi.org/10.3390/biology11071045.

5. Alesci A, Capillo G, Mokhtar DM, Fumia A, D'Angelo R, Lo Cascio P, Albano M, Guerrera MC, Sayed RKA, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Ekspression af antimikrobisk peptid Piscidin1 i gæller mastceller af kæmpe mudderskipper Periophthalmodon schlosseri (Pallas, 1770). Int J Mol Sci. 2022;23(22):13707. https://doi.org/10.3390/ijms232213707.

6. Alesci A, Cicero N, Fumia A, Petrarca C, Mangifesta R, Nava V, Lo Cascio P, Gangemi S, Di Gioacchino M, Lauriano ER. Histologiske og kemiske analyser af tungmetaller i nyrer og gæller af bryster Boops: Melanomakrofager-centre og Rodlet-celler som miljømæssige biomarkører. Giftstoffer. 2022;10(5):218. https://doi.org/10.3390/toxics10050218.

7. Alesci, A., Fumia, A., Miller, A., Calabrò, C., Santini, A., Cicero, N., & Lo Cascio, P. (2022). Spirulina fremmer makrofagaggregering i zebrafisk (Danio rerio) leveren. Nat Prod Res, 1–7. https://doi.org/10.1080/14786419. 2022.2089883.

8. Alesci, A., Gitto, M., Kotańska, M., Lo Cascio, P., Miller, A., Nicosia, N., Fumia, A., & Pergolizzi, S. (2022). Immunogenicitet, effektivitet, sikkerhed og psykologisk virkning af COVID-19 mRNA-vacciner. Human Immunol, S0198885922001586. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2022.08.004.

9. Alesci, A., Lauriano, ER, Aragona, M., Capillo, G., & Pergolizzi, S. (2020). Markering af hvirveldyrs Langerhans-celler, fra fisk til pattedyr. Acta Histochemica, 122(7): 151622. https://doi.org/10.1016/j.acthis.2020.151622.

10. Alesci A, Lauriano ER, Fumia A, Irrera N, Mastrantonio E, Vaccaro M, Gangemi S, Santini A, Cicero N, Pergolizzi S. Forholdet mellem immunceller, depression, stress og psoriasis: Kan brugen af ​​naturlige produkter være hjælpsom? Molekyler. 2022;27(6):1953.

11. Alesci, A., Pergolizzi, S., Capillo, G., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Rodlet-celler i nyre hos guldfisk (Carassius auratus, Linnaeus 1758): En let og konfokal mikroskopiundersøgelse. Acta Histochemica, 124(3):151876.

12. Alesci, A., Pergolizzi, S., Fumia, A., Calabrò, C., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Mastceller i guldfisk (Carassius auratus) tarm: Immunhistokemisk karakterisering. Acta Zoologica.

13. Alesci A, Pergolizzi S, Fumia A, Miller A, Cernigliaro C, Zaccone M, Salamone V, Mastrantonio E, Gangemi S, Pioggia G, Cicero N. Gravide kvinders immunsystem og psykologiske tilstand under COVID-19 .Pandemi: Er mikronæringsstoffer i stand til at understøtte graviditet? Næringsstoffer. 2022;14(12):2534. https://doi.org/10.3390/nu14122534. 14. Alesci, A., Pergolizzi, S., Lo Cascio, P., Capillo, G., & Lauriano, ER (2022). Lokalisering af vasoaktivt intestinalt peptid og toll-lignende receptor 2 immunreaktive celler i endostyle af urochordate Styela plicata (Lesueur, 1823). Microsc Res Tech, https://doi.org/10.1002/jemt.24119.

15. Alesci A, Pergolizzi S, Lo Cascio P, Fumia A, Lauriano ER. Neuronal regenerering: Komparativt overblik over hvirveldyr og nye perspektiver for neurodegenerative sygdomme. Acta Zoologica. 2021. https://doi.org/10. 1111/azo.12397.

16. Alesci A, Pergolizzi S, Savoca S, Fumia A, Mangano A, Albano M, Messina E, Aragona M, Lo Cascio P, Capillo G, Lauriano ER. Påvisning af tarmbægerceller af bredgællet Hagfsh Eptatretus Cirrhatus (Forster, 1801): En konfokal mikroskopivurdering. Biologi. 2022;11(9):1366.https://doi.org/10.3390/biology11091366.

17. Alturkistani HA, Tashkandi FM, Mohammedsaleh ZM. Histologiske pletter: En litteraturgennemgang og casestudie. Global J Health Sci. 2015;8(3):72.https://doi.org/10.5539/gjhs.v8n3p72.

18. Beschin A, Bilej M, Brys L, Torreele E, Lucas R, Magez S, De Baetselier P. Konvergent evolution af cytokiner. Natur. 1999;400(6745):627–8.https://doi.org/10.1038/23164.

19. Bilej M, De Baetselier P, Beschin A. Antimikrobielt forsvar af regnormen. Folia Microbiol. 2000;45(4):283-300. https://doi.org/10.1007/BF028 17549.

20. Bilej M, Procházková P, Šilerová M, Josková R (2010) Earthworm Immunity. I: Söderhäll K, edotiro. Invertebrate Immunity, Vol. 708. Boston: Springer; s. 66-79). https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.

21. Blanco GAC, Escalade AM, Alvarez E, Hajos S. LPS-induceret stimulering af fagocytose i sipunculan-ormen Themiste petricola: Mulig involvering af humane CD14-, CD11B- og CD11C-krydsreaktive molekyler. Dev Comp Immunol. 1997;21(4):349-62. https://doi.org/10.1016/ S0145-305X(97)00007-4.

22. Bodó K, Boros Á, Rumpler É, Molnár L, Böröcz K, Németh P, Engelmann P. Identifikation af nye lubricin-homologer i Eisenia andrei regnorme. Dev Comp Immunol. 2019;90:41–6.

23. Bodó, K., Ernszt, D., Németh, P., & Engelmann, P. (2018). Distinkte immun- og forsvarsrelaterede molekylære fingeraftryk i adskilte coelomocytundergrupper af Eisenia andrei regnorme. Invertebrat Survival J, 338-345.

24. Bodó K, Kellermayer Z, László Z, Boros Á, Kokhanyuk B, Németh P, Engelmann P. Skade-induceret medfødt immunrespons under segmentregenerering af regnormen, Eisenia andrei. Int J Mol Sci. 2021;22(5):2363.

25. Buchmann, K. (2014). Udvikling af medfødt immunitet: spor fra hvirvelløse dyr via fisk til pattedyr. Grænser i immunologi.

For more information:1950477648nn@gmail.com