Cistanches Tubulosa Vandekstrakt beskytter testiklen mod cyclophosphamid-induceret skade: Effekt og mekanisme

XIA Lun-bin1,2 ,JIANG Ping 1,2 ,HE Yan-fei 1,2 ,SUN Tao-tao 1 ,ZHOU Yu1 ,ZUO Ｒui-hua 1,2

1． School of Biological and Pharmaceutical Engineering, West Anhui College, Lu ＇an, Anhui 237012, Kina; 2. Anhui Engineering Laboratory for Conservation and Sustainable Use of Traditional Chinese Medicine Ｒesources, Lu＇an, Anhui 237012, Kina

【Abstrakt】

Formål: At undersøge den beskyttende effekt afCistanche tubulosa vandekstrakt (CTWE) mod cyclophosphamid (CTX)-induceret testikelskade (TI) hos mus og dens virkningsmekanisme.

Cistanche ekstrakt pulver

Klik her for at se produkter fra Cistanche for nyresygdom

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Metoder: Tredive hanmus blev ligeligt randomiseret til en normal kontrol, en CTX-induceret TI-modelkontrol og en CTWE-behandlingsgruppe. Efter 7 dages adaptiv fodring blev musene i CTWE-behandlingsgruppen behandlet intragastrisk med CTWE ved 1{{2{{30}}}} g/kg/d, dem i den normale kontrol- og TI-model kontrolgrupper med samme volumen af ​​normalt saltvand qd alle i 35 på hinanden følgende dage, og dem i TI-modelkontrol- og CTWE-behandlingsgrupperne ved intraperitoneal injektion af cyclophosphamid ved 80 mg/kg/d ved 7,14,21 ,28 og 35 dage. Derefter blev alle dyrene vejet, blodprøver taget, og deres testikler og bitestikler høstet til påvisning af serum-T-indholdet, undersøgelse af sædkvalitet, måling af testikelvægt, observation af histopatologiske ændringer i testiklerne og bestemmelse af niveauerne af super oxiddismutase (SOD) og malondialdehyd (MDA) i testikelvævet og mＲNA-ekspressionerne af generne relateret til den nukleare faktor erythroid{{10}}relateret faktor (Nrf2) signalvej. Ｒresultater: Musene i TI-modelkontrolgruppen viste, sammenlignet med de normale kontroller, signifikante fald i kropsvægten (［34． 13 ± 1． 56］vs.［47． 08 ± 1． 98］g ,P ＜ 0． 05), testis vægt (［81． 82 ± 1{{101}}． 61］vs ［148． 50 ± 14． 82］mg,P ＜ 0． 05), sædkoncentration (［32． 60 ± 5． 29］vs ［78． 9{{162} ± 7． 95］ × 106 /ml,P ＜ 0． 05), spermmotilitet (［45． 20 ± 7． {{186 }}9］ procent vs. 86. 70 ± 5. 64. procent ］ng /L,P ＜ 0． 05), og SOD-niveau (［152． 22 ± 10． 66］vs［356． 10 ± 30． 95］U/mg prot,P ． stigning) i procenten af ​​morfologisk abnorm sæd (MAS) (［39． 30 ± 7． 36］ procent vs.［14． 40 ± 3.53］ procent, P ＜ 0． 05) og MDA-niveau (±．5 4. 12］vs［31． 71 ± 3． 57］nmol/mg prot, P ＜ 0． 05) ． Dyrene behandlet med CTWE udviste i sammenligning med TI-modellens kontroller markant øget kropsvægt (［40． 67 ± 2． 13］i forhold til［34． 13 ± 1． 56］g, P ＜ 0．, test 5) . ( ［121． 21 ± 17． 38］vs ［81． 82 ± 10． 61］mg,P ＜ 0． 05), sædkoncentration (［58． 40 ± 9［9．s 29 ］ × 106/ml, P ＜ 0． 05), sædmotilitet (［72． 30 ± 7． 51］ procent vs.［45． 20 ± 7． 09］ procent ,P ． um 0． s 0＼ indhold 10． 89 ± 1． 07］vs［7． 49 ± 1． 03］ng /L,P ＜ 0． 05) og SOD-niveau (［217． 69 ± 24． 0.5 ． 59． 2 ± 1 s 59．s 6 ］U/mg prot,P ＜ 0． 05), men reduceret procentdel af MAS (［22． 20 ± 6． 07］ procent vs. ［39． 30 ± 7． 36］ procent ,P ＜0 procent ,0 og MDA-niveau (［36． 41 ± 4． 27］vs ［54． 91 ± 5． 12］nmol/mg prot, P ＜ 0． 05) . mＲNA-ekspressionerne af Nrf2,HO-1 og NQO-1 i testikelvævet var signifikant nedreguleret i TI-modelkontrollerne sammenlignet med dem i de normale kontroller (P ＜ 0． 05), og bemærkelsesværdigt opreguleret i CTWE-behandlingsgruppen sammenlignet med dem i TI-modelgruppen (P ＜ 0． 05), mens den for Caspase3 steg markant i TI-modelkontrollerne (P ＜ 0． 05) og faldt i CTWE-behandlingsgruppen (P ＜ 0． 05) . Histopatologisk viste testisvævet i TI-modellens kontroller utydelige konturer fra bunden af ​​sædrøret til lumenoverfladen, med uarrangerede og reducerede lag af spermatogene celler og nedsat antal sædceller i sædrørene, mens strukturen af ​​sædrørene. kom sig næsten til normal i CTWE-behandlingsgruppen.

Konklusion: Cistanches tubulosa-vandekstrakt kan effektivt inhibere cyclophosphamid-induceret testikelskade ved at øge aktiviteten af ​​antioxidantenzym og regulere udtryk for de Nrf2-signalvej-relaterede gener.

Cistanche pulver

【Nøgleord】Cistanche tubulosa vandekstrakt; testis; cyclophosphamid; oxidativt stress; mus

Cyclophosphamid (CTX), som et antitumorlægemiddel [1] og immunsuppressivt middel [2], har været meget brugt i medicinsk klinisk praksis. Det har dog også betydelige cytotoksiske virkninger, og skader på forplantningssystemet er en af ​​dens bivirkninger. Tidligere undersøgelser har vist, at CTX kan forårsage oxidativ stress skade på testikelvæv hos hanner eller handyr, hvilket fører til spermatogen dysfunktion såsom nedsat sædtal og bevægelighed [3-6]. Derfor er udforskning af metoder til at reducere eller eliminere CTX-skader på testikelvæv og reparere dets normale spermatogene funktion blevet et forskningshotspot.

Cistanche deserticola blev første gang optaget i "Shennong Materia Medica Classic" og er en traditionel og dyrebar kinesisk medicin. Det har virkningerne af at tonificere essens og blod, tonificere nyre-yang, nærende nyre-yin, fugte tarmene og lindre forstoppelse. Ifølge den kinesiske farmakopé er Cistanche deserticola en flerårig urteagtig parasitplante i familien Orobaceae. Cistanche deserticola YCMa eller Cistanche tubulosa (Schenk) Light er en tør, skællende, kødfuld stængel. Ifølge "Medicinal Meaning" [8] hører Cistanche deserticola "til yin af yang... det er det vigtigste nyrestyrkende stof og er et produkt, der hjælper med at styrke yang og essens". Materia Medica-præparatet [9] understreger, at nøglen til at bruge Cistanche deserticola som medicin er at "pleje nyrerne og nære tarmene". Cistanche deserticola er meget udbredt i recepter på traditionel kinesisk medicin og er en af ​​de mest brugte lægeurter til at tonificere nyrerne, styrke yang og styrke formler. I de senere år har kemiske analyser og farmakologiske undersøgelser fundet, at Cistanche deserticola indeholder forskellige aktive ingredienser såsom phenylethanoid glycosider, iridoider og deres glycosider, lignaner og deres glycosider, polysaccharider, alkaloider, aminosyrer og sporstoffer [10]. 

Cistanche deserticola-effekt - Tonificerende nyre

Moderne farmakologisk forskning har vist, at det ikke kun har farmakologiske virkninger såsom anti-aging [11-12], anti-træthed [13], antioxidant [14], immunregulering [15] og nervebeskyttelse [{{6] }}] men forbedrer også den reproduktive funktion markant [18]. LI et al. [19] rapporterede, at Cistanche deserticola kunne vende den tri pterygium glycosid-inducerede reproduktionstoksicitet hos mus; Wang Dejun et al. [20] beviste, at Cistanche deserticola kan fremme testikelspermatogenese og forbedre mikromiljøet i epididymis; Zhao Donghai et al. [21] fandt, at phenylethanoidglycosider fra Cistanche deserticola har en signifikant terapeutisk effekt på CTX-inducerede spermatogene lidelser hos mus, og påpegede, at dets mekanisme kan være relateret til at forbedre testosteronniveauet i testikelvæv. Der er dog få rapporter om mekanismen af ​​Cistanche deserticolas effekt på at fremme reproduktive funktioner såsom spermatogenese, og yderligere dybdegående udforskning er nødvendig. Denne eksperimentelle undersøgelse brugte CTX til at konstruere en musemodel af testikelvævsskade og undersøgte reparationseffekten af ​​Cistanche tubulosa Water Extract (CTWE) på beskadiget testikelvæv hos mus. Undersøgelsen blev udført ved hjælp af histologiske, fysiologiske og biokemiske metoder. Studiet af antioxidantindikatorer og ekspressionen af ​​gener relateret til den nuklear faktor E2-relaterede faktor 2 (Nrf2) signalvej i testikelvæv har til formål at berige det farmakologiske grundlag for Cistanche deserticola og give et videnskabeligt grundlag for dets medicinske værdi og produktudvikling.

1 Materiale og metoder

1.1 Materialer

1.1.1 Forsøgsdyr

40 hvide Kunming-mus af ren kvalitet, han, med en kropsvægt på (18 ± 2) g, købt fra Experimental Animal Center ved Anhui Medical University, med dyrelicensnummer SCXK (Anhui) 2017-001. Musene blev opdrættet i separate bure, fodret og drak frit ved stuetemperatur på 20-24 grader og luftfugtighed på 55 procent -65 procent. Efter 7 dages adaptiv fodring blev de brugt til forsøget.

1.1.2 Medicinske materialer og reagenser

Tørrede Cistanche deserticola tabletterblev købt fra lægeurtemarkedet i Bozhou City, Anhui-provinsen. De blev identificeret som rørformet Cistanche deserticola af professor Chen Naidong fra Traditional Chinese Medicine Teaching and Research Office på School of Biological and Pharmaceutical Engineering, Wanxi University. Standardprodukt af Echinacetin (renhed større end eller lig med 98 procent), Shanghai Tongtian Biotechnology Co., Ltd; Hæmatoxylin eosin farvning (HE) farvestof, Zhuhai Besso Biotechnology Co., Ltd; Malondialdehyd (MDA), superoxiddismutase (SOD) ELISA kit, Nanjing Jiancheng Technology Co., Ltd; CTX, Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd; Testosteron ELISA Kit, Shanghai Zhenke Biotechnology Co., Ltd; UNlQ-10 kolonne Trizol total RNA-ekstraktionssæt, Shenggong Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd; EasyScript One Step gDNA-fjernelse og cDNA Synthesis SuperMix, Trans Start Green qPCRSuperMix, Beijing Quanshi Biotech Co., Ltd.

Tørrede Cistanche deserticola tabletter

1.1.3 Instrumenter og udstyr

BX53 mikroskop, Olympus selskab; YD-335 paraffinskærer, Zhejiang Jinhua Yidi Medical Equipment Co., Ltd; RE-2002 roterende fordamper, Shanghai Yaote Instrument Equipment Co., Ltd; TU-1950 UV Visible Spectrophotometer, Beijing Puxi General Instrument Co., Ltd; NanoDrop2000 Ultramicro Spectrophotometer, Thermo Fisher Scientific; Agilent 1260 Infinity II Prime væskekromatografisystem, Agilent Technologies; Trin et plus fluorescens kvantitativt PCR-instrument, Applied Biosystems.

1.2 Metode

1.2.1 Udarbejdelse af CTWE

Med henvisning til varmtvandsekstraktionsmetoden rapporteret i reference [22], med små forbedringer. Knus 500 g Cistanche deserticola og nedsænk den i 5 L destilleret vand. Kog og ekstraher ved 100 grader i 2 timer. Filtrer og opsaml filtratet. Tilsæt 5 L destilleret vand til filterresten og fortsæt med at ekstrahere. Gentag ekstraktionen tre gange, bland filtratet, inddamp det under et vakuum ved 65 grader, og koncentrer det til et råt lægemiddelindhold på 0,5 g/ml. Kvalitetskontrollen af ​​CTWE er baseret på indholdet af Echinacetin [23]. Indholdet af Echinacetin i CTWE bestemmes ved højtydende væskekromatografi til (7,63 ± 0,08) mg/ml.

1.2.2 Dyregruppering og administration

30 mus blev tilfældigt opdelt i en normal kontrolgruppe, en modelgruppe og en Cistanche deserticola-behandlingsgruppe med 10 mus i hver gruppe. Behandlingsgruppemusene fik en 10 g/kg legemsvægtdosis af CTWE ved sonde [beregnet som 20 gange voksen 0,5 g/(kg · d) [13]], mens kontrolgruppen og modelgruppens mus fik samme volumen af fysiologisk saltvand ved sondemad en gang dagligt i 35 på hinanden følgende dage; På den 7., 14., 21., 28. og 35. dag for administration fik modelgruppen og musene i Cistanche deserticola-behandlingsgruppen en dosis på 80 mg/kg kropsvægt CTX til intraperitoneal injektion, mens kontrolgruppens mus fik samme volumen fysiologisk saltvand til intraperitoneal injektion.

1.2.3 Prøveindsamling og -behandling

Efter den sidste injektion af CTX og faste i 12 timer blev kropsvægten målt, og blodprøver blev indsamlet. Derefter blev musene i hver gruppe bedøvet med chloralhydrat (0,3 ml/100 g) intraperitonealt, og testiklerne blev fjernet og vejet; Tag epididymalt væv fra begge sider til spermkvalitetstestning; Tag den venstre testikel og opbevar i en 4 procent paraformaldehydopløsning til vævssektionering og histopatologisk undersøgelse; Tag den rigtige testikel og opbevar den i flydende nitrogen til vævsbiokemiske indikatorer og fluorescens kvantitativ PCR-detektion.

1.2.4 Spermkvalitetstestning

Skær det opsamlede epididymisvæv og anbring det i forvarmet 37 graders fysiologisk saltvand. Inkuber ved konstant temperatur i 15 minutter for at lade sæden svømme helt ud og klargør en sædsuspension. Tag sædsuspensionen og anbring den på en sædtælleplade, der er forvarmet til 37 grader. Observer under et mikroskop og vælg sædceller, der kan bevæge sig i en lige linje eller en urettet retning som levende sæd. Andre sædceller, der kun kan rotere eller forblive inaktive på plads som døde sædceller. Tæl antallet af levende sædceller i 200 sædceller og beregn spermmotilitetshastigheden [24]; Tag 10 μ Efter fortynding af sædsuspensionen med 20 gange fysiologisk saltvand, beregnes sædkoncentrationen ved hjælp af blodcelle-tælleplademetoden; Tag sædsuspensionen og bland den med 1 procent eosinopløsning i et forhold på 10:1 til farvning, smøring, lufttørring, fikser den i methanol, observer under et mikroskop, og beregn sæddeformitetsraten.

1.2.5 Patologisk observation af testikelvæv

Tag den venstre testikel konserveret i 4 procent paraformaldehyd-opløsning, trim den til en vævsblok på ca. 0,5 cm3 i størrelse med et blad, indstøb den i paraffin, farv den med HE, og observer de patologiske ændringer af testikler væv under et mikroskop.

1.2.6 Påvisning af biokemiske indikatorer i testikelvæv

I henhold til instruktionerne fra SOD- og MDA-detektionssættet skal du tage testikler opbevaret i flydende nitrogen og forberede et 10 procent homogenat. Følg instruktionerne i sættet for at detektere indholdet af SOD og MDA i testikelvæv.

1.2.7 Påvisning af serumtestosteronindhold

I henhold til betjeningsvejledningen til testosteron ELISA-detektionssættet skal du påvise indholdet af testosteron i museserum.

1.2.8 Mustestikelvæv

Indholdet af gener relateret til Nrf2-signalvejen blev detekteret ved hjælp af fluorescenskvantitativ PCR til at detektere mRNA-ekspressionsniveauerne af gener såsom Nrf2, Caspase-3, hæmoxygenase-1 (HO-1) , NADPH kininoxidoreduktase-1 (NQO-1) og Kelch-lignende ECH-associeret protein-1 (Keap1) i testikelvæv fra mus. Metoden blev rapporteret i reference [25] og lidt modificeret . Total-RNA blev ekstraheret fra muse-testikelvæv ved anvendelse af et kolonneformet Trizol-total-RNA-ekstraktionssæt. cDNA blev syntetiseret ved omvendt transkription ved hjælp af EasyScript One Step gDNA-fjernelse og cDNA Synthesis SuperMix og detekteret ved RTFQ PCR ved hjælp af Trans Start Green qPCRSuper Mix kit. Primerne for Nrf2, Caspase3, HO-1, NQO-1 og Keap1 blev designet og syntetiseret af Bioengineering (Shanghai) Co., Ltd. Primersekvenserne er vist i tabel 1. Dataene blev registreret ved hjælp af den indbyggede software af det fluorescens kvantitative PCR-instrument, og Ct-værdierne af prøverne blev stabilt udtrykt i mus. Actin er et endogent internt referencegen [26]. Formel 2 - ΔΔ Beregn det relative mRNA-ekspressionsniveau ved hjælp af CT.

1.3 Statistisk analyse

Alle data blev analyseret ved hjælp af SPASS 19.0 for envejs ANOVA, med måledata repræsenteret ved x ± s og P Mindre end eller lig med 0.05, hvilket indikerer statistisk signifikante forskelle.

Tabel 1. Prime sekvenser af Nrf2,Caspase3,HO-1,NQO-1,Keap1 og -actin brugt i RTFQ-PCR

2 resultater

2.1 Effekt af CTWE på kropsvægt og testikelmasse hos mus med testikelskade forårsaget af CTX

Sammenlignet med den normale kontrolgruppe var kropsmassen og testikelmassen af ​​modelgruppemusene signifikant reduceret (P<0.05); Compared with the model group, the body mass and testicular mass of mice treated with Cistanche deserticola significantly increased (P<0.05). See Table 2.

2.2 Effekt af CTWE på sædkvalitet hos mus med testikelskade induceret af CTX

Fra tabel 3 kan det ses, at sammenlignet med den normale kontrolgruppe var sædmotiliteten og koncentrationen af ​​modelgruppemusene signifikant reduceret (P<0.05), while the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.05); Compared with the model group, the sperm motility and sperm concentration in the Cistanche deserticola treatment group were significantly increased (P<0.05), while the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.05). The results showed that CTWE significantly improved the semen quality of mice with testicular injury caused by CTX.

Tabel 2. Kropsvægt og testikelvægt af musene i forskellige grupper (x ± s)

NC: Normal kontrol; TIMC: testis skade model kontrol; CTWE: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; * : P ＜ {{0}}． 05 versus NC-gruppen; #: P ＜ 0. 05 versus TIMC-gruppen.

Tabel 3. Spermmotilitet, sædkoncentration og procentdel af morfologisk unormal sæd (MAS) hos musene i forskellige grupper (x ± s)

NC: Normal kontrol; TIMC: testis skade model kontrol; CTWE: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; * : P ＜ {{0}}． 05 versus NC-gruppen; #: P ＜ 0. 05 versus TIMC-gruppen.

Figur 1. Patomorfologiske billeder af musenes testikelvæv i forskellige grupper (HE × 400)

A＇ og A: Normal kontrol; B & B: kontrol af testikelskademodel; C & C: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; Pile peger på ændringerne i lagene af spermatogene celler på alle niveauer i sædrørene; bokse angiver uarrangerede og reducerede lag af spermatogene celler; og cirkler i indikerer det reducerede antal sædceller i sædrørene

2.3 Effekten af ​​CTWE på de patologiske ændringer af testikelvæv hos mus med CTX-induceret testikelskade

Som det kan ses af figur 1, sammenlignet med den normale kontrolgruppe, er strukturen af ​​sædrøret i testikelvævet hos modelgruppemusene ændret væsentligt. Omridset af basalmembranen af ​​sædrøret er uklart, niveauerne af spermatid på alle niveauer i lumen er reduceret og arrangeret i uorden, og antallet af sædceller i lumen er signifikant reduceret (figur 1B, B '); Sammenlignet med modelgruppen, efter behandling i Cistanche deserticola-behandlingsgruppen, blev omridset af basalmembranen af ​​sædrøret i musetestis fuldstændig og klart, lagene af spermatid i lumen steg, og deres arrangement havde en tendens til at være regelmæssigt, og antallet af sædceller i lumen steg signifikant (figur 1C, C ').

2.4 Effekt af CTWE på SOD- og MDA-niveauer i testikelvæv fra mus med CTX-induceret testikelskade

Sammenlignet med den normale kontrolgruppe faldt SOD-indholdet i testikelvævet hos modelgruppemusene signifikant (P<0.05) and the MDA content significantly increased (P<0.05); Compared with the model group, the SOD content in the testicular tissue of mice treated with Cistanche deserticola significantly increased (P<0.05) and the MDA content significantly decreased (P<0.05). The results showed that CTWE had a significant improvement effect on SOD and MDA indicators in the testicular tissue of mice with CTX-induced testicular injury. See Table 4.

Tabel 4. Niveauer af SOD og MDA i testikelvævet hos musene i forskellige grupper (x ± s)

SOD: superoxiddismutase; MDA: malondialdehyd; NC: Normal kontrol; TIMC: testis skade model kontrol; CTWE: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; * : P ＜ {{0}}． 05 versus NC-gruppen; #: P ＜ 0. 05 versus TIMC-gruppen.

2. 5 Effekt af CTWE på serumtestosteronindhold i mus med testikelskade induceret af CTX

Ifølge tabel 5, sammenlignet med den normale kontrolgruppe, var serumtestosteronindholdet i modelgruppemusene signifikant reduceret (P<0.05); Compared with the model group, the serum testosterone content of mice treated with Cistanche deserticola significantly increased (P<0.05). This indicates that CTWE not only has a good anti-injury and repair effect on CTX-induced testicular injury in mice but also significantly increases the serum testosterone content in testicular injury mice.

Tabel 5. Indhold af serum T i forskellige grupper af musene (x ± s)

NC: Normal kontrol; TIMC: testis skade model kontrol; CTWE: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; * : P ＜ {{0}}． 05 versus NC-gruppen; #: P ＜ 0. 05 versus TIMC-gruppen.

2. 6 Effekten af ​​CTWE på ekspressionen af ​​Nrf2 pathway-gener i testiklerne hos mus med CTX-induceret testikelskade

Som vist i figur 2, sammenlignet med den normale kontrolgruppe, var mRNA-ekspressionsniveauerne af NQO-1, HO-1 og Nrf2 i testikelvævet af modelgruppemusene signifikant nedreguleret (P<0.05), while the mRNA expression level of the apoptotic gene Caspase3 was significantly upregulated (P<0.05); Compared with the model group, the expression levels of NQO-1, HO-1, and Nrf2 mRNA in the testicular tissue of mice treated with Cistanche deserticola were significantly upregulated (P<0.05), while the expression levels of Caspase3 mRNA were significantly downregulated (P<0.05); The mRNA expression level of Keap1 gene showed no significant difference between the normal control group, model group, and Cistanche deserticola treatment group (P>0.05). Således kan CTWE reparere den oxidative skade af CTX på muse-testikelhistiocytter ved at opregulere ekspressionen af ​​NQO-1, HO-1 og andre antioxidantfaktorer, der reguleres af Nrf2 og hæmme ekspressionen af ​​apoptose-genet Caspase3 .

Figur 2. Ｒelative udtryk for de Nrf2-signalvej-relaterede gener i forskellige grupper af musene

NC: Normal kontrol; TIMC: testis skade model kontrol; CTWE: Cistanche tubulosa vandekstraktbehandling; * : P ＜ {{0}}． 05 versus NC-gruppen; #: P ＜ 0. 05 mod TIMC-gruppen

3 Diskussion

Som et antitumor- og immunsuppressivt lægemiddel har CTX stærk reproduktionstoksicitet og stor skade på fertiliteten [27]. Resultaterne af denne undersøgelse viste, at testikelvævet fra CTX-modelmusene var betydeligt beskadiget, konturen af ​​sædrørets basalmembran var uklar, diameteren af ​​lumen var reduceret, og niveauerne af spermatid på alle niveauer blev reduceret, og forstyrret, sperm deformitetsraten blev øget, og sædcellens levedygtighed og koncentration blev reduceret, hvilket var i overensstemmelse med forskningsresultaterne fra Jiang Ping [24], hvilket yderligere indikerer, at CTX havde stærk reproduktionstoksicitet. Cistanche deserticola er en god medicin til at styrke yang og tonificere nyrerne. Resultaterne af denne undersøgelse viser, at CTWE effektivt kan reparere reproduktionstoksiciteten af ​​CTX i mus. Vægten og testikelkvaliteten af ​​mus i behandlingsgruppen af ​​Cistanche deserticola steg signifikant, sædkoncentrationen og levedygtigheden steg signifikant, sæddeformitetsraten faldt signifikant, og serumtestosteronindholdet steg signifikant; Med hensyn til histopatologi viste HE-farvningsobservationen af ​​vævssnit, at skaden af ​​testikelvæv var væsentligt forbedret, konturen af ​​sædrørets basalmembran blev fuldstændig og klar, niveauet af spermatid i lumen var klart og havde en tendens til at være regelmæssigt, og vævsmorfologien havde en tendens til at være normal, hvilket var i overensstemmelse med forskningsrapporten fra Wang Dejun et al. [20], hvilket indikerer, at CTWE havde virkningen af ​​at reparere skaden af ​​muse-testikelvæv forårsaget af CTX.

Ørken levende cistanche - Tonificerende nyre

Under normale fysiologiske forhold eliminerer kropsvævene kontinuerligt frie iltradikaler og deres peroxider produceret af metaboliske aktiviteter gennem antioxidantsystemet, hvorved den dynamiske balance i kroppens redoxsystem opretholdes og oxidativ stressskade i væv undgås [28]. SOD og MDA er vigtige indikatorer for vævsantioxidantaktivitet, hvilket afspejler henholdsvis vævsantioxidantkapacitet og graden af ​​oxidativ stressskade [29]. Ma Xiaoqing et al. [30] fandt, at Cistanche deserticola signifikant kan øge niveauet af SOD og reducere niveauet af MDA i rottenyrevæv, og dermed have en vis beskyttende effekt på gentamicin-induceret skade på rottenyrevæv. Resultaterne af denne undersøgelse viser, at CTWE effektivt kan øge niveauet af SOD-aktivitet og reducere indholdet af MDA i det beskadigede testikelvæv hos mus, svarende til ovenstående forskningsresultater, hvilket indikerer, at CTWE kan modstå skader ved oxidativ stress ved at øge antioxidantkapaciteten af testikelvæv.

Superman urter cistanche - Tonificerende nyre

Nrf2 er medlem af Cap'n'collar transkriptionsfaktorfamilien og spiller en vigtig rolle i forskellige sygdomsprocesser såsom tumorer og inflammation [31]. Nrf2 er en nøgletransskriptionsfaktor, der regulerer cellulært antioxidantstress. Når kroppen oplever oxidativ stress, går den ind i kernen og binder sig til nedstrøms antioxidantresponselementer (ARE), der regulerer transkriptionsaktiviteten af ​​forskellige endogene antioxidantfaktorer, herunder SOD, HO-1 og NQO-1, og hæmning af oxidative reaktioner [32]. Under patologiske forhold er Nrf2-reguleringsfunktionen unormal, og histiocytter beskadiges af oxidativt stress. Le et al. [33] rapporterede, at CTX spiller en rolle i reproduktionstoksicitetsskade ved at nedregulere ekspressionen af ​​Nrf2 og derved hæmme ekspressionen af ​​antioxidantfaktorer såsom HO-1 og NQO-1. I denne undersøgelse blev ekspressionen af ​​Nrf2-, HO-1- og NQO-1-gener i testikelvævet hos modelgruppens mus signifikant nedreguleret, og ekspressionen af ​​apoptose-genet Caspase3 blev opreguleret, hvilket indikerer, at CTX kan fremme apoptose af musetestikulær histiocyt gennem Nrf2-signalvejen, hvilket forårsager testikelvævsskade, hvilket er i overensstemmelse med ovenstående forskningsresultater; Ekspressionen af ​​Nrf2, NQO-1 og HO-1 i testikelvæv fra mus behandlet med Cistanche deserticola var signifikant opreguleret, mens ekspressionen af ​​Caspase3 var signifikant nedreguleret, hvilket indikerer, at Cistanche deserticola kunne fremme Nrf2-nuklear indgang og ARE-integration, opreguler ekspressionen af ​​NQO-1, HO-1 og andre antioxidantfaktorer reguleret af Nrf2, reparerer den oxidative skade af CTX på muse-testikelhistiocytter og genopretter testikelspermatogenic fungere.

Sammenfattende kan CTWE lindre CTX-induceret testikelvævsskade hos mus, reparere den beskadigede testikelvævsstruktur og genoprette testikelspermatogen funktion. Mekanismen kan være relateret til CTWEs evne til at øge antioxidantenzymaktivitet, regulere ekspressionen af ​​antioxidant stressfaktorgener relateret til Nrf2-signalvejen og nedregulere ekspressionen af ​​det apoptotiske gen Caspase3. Denne artikel udforsker hovedsageligt den antioxidative stressskadeseffekt af CTWE på testikelvæv, og der er behov for yderligere forskning i dets virkningsmekanisme.

reference

［1］ Smolej L, Brychtová Y, Cmunt E, et al. Lavdosis fludarabin og cyclophosphamid kombineret med rituximab i førstelinjebehandlingen af ​​ældre/komorbide patienter med kronisk lymfatisk leukæmi/lille lymfatisk lymfom (CLL/SLL): Langsigtede resultater af projekt Q-lite af den tjekkiske CLL Study Group. Br J Haematol, 2021,193( 4): 769-778．

［2］ Li Ruijun, Qin Yong, Zhou Yalin, et al. Effekt af kikærtepeptid på immunfunktion hos immunkompromitterede mus. fødevarevidenskab, 2020, 41 (21): 133-139

［3］Liu Bo, Li Ye, Wu Qi, et al. Virkningen af ​​Erxian Tang på den reproduktive funktion af cyclophosphamid-inducerede oligospermi-modelmus. Chinese Journal of Andrology, 2018, 24 (6): 547-552

［4］Lai Yongwei, Xi Yanli, Shao Minghai, et al. Beskyttende virkning af Myrica rubra flavonoider på cyclophosphamid-induceret reproduktionstoksicitet hos hanmus. Health Research, 2020, 49 (5): 790 - 794

［5］Liu Jianguo, Zhao Hongle, Li Jiaojiao, et al. Effekt af Bushen Huoxue-opskrift på apoptose af musetestikulære spermatidceller induceret af cyclophosphamid. Chinese Journal of Andrology, 2020, 26 (9): 826-831

［6］Mi Zhaoyan, Zhang Yanan, Hua Rui, et al. Den beskyttende virkning af resveratrol på cyclophosphamid inducerede oxidativ skade i menneskelig sæd. Journal of Modern Urology, 2021, 26 (4): 340-344

［7］National Pharmacopoeia Commission. Folkerepublikken Kinas farmakopé: Del 1. Beijing: China Medical Science and Technology Press, juli 2022

［ 8 ］ Jia Suo Xue. Farmaceutisk kemi. Beijing: China Traditional Chinese Medicine Press, juli 2015

［9］Wang Ang. Udarbejdelse af Materia Medica. Beijing: China Traditional Chinese Medicine Press, 2009.121

［10］Zhi Yajing, Zhen Yaqin, Tian Wei, et al. Forskningsfremskridt i den kemiske sammensætning og farmakologiske virkninger af Cistanche deserticola og forudsigelsesanalyse af kvalitetsmarkører (Q-Markers). Chinese Herbal Medicine, 2021, 52 (9): 2758-2767

［11］Wu Yan, Zhang Hong, Bu Ren, et al. Undersøgelse af den beskyttende virkning af Cistanche deserticola polysaccharid på D-neneneba galactose-induceret akut ældningsmodel. Chinese Pharmacological Bulletin, 2017, 33 (7): 927-933

［12］ Wang NQ, Ji SZ, Zhang H, et al. Herba Cistanches: Anti-aging. Aging Dis,2017,8( 6) : 740-759．

［13］Wang Xiaoming. Forskning i de effektive komponenter og virkningsmekanisme af Desert Cistanche til at lindre fysisk træthed (doktorafhandling). Beijing: Peking Union Medical College, 2019.139-145

［14］Guo Qiaoli, Wu Zhibo, Zhou Yubi, et al. Sammensætningsanalyse og antioxidantaktivitet af polysaccharider fra Lanzhou Cistanche deserticola. Food Industry Technology, 2021, 42 (15): 96-103

［15］Yang Xiumei, Yang Yu, Wang Danyang, et al. Ethanolekstraktet af Cistanche deserticola i Xinjiang regulerer den immunforstærkende effekt af DCs modning på Th1/Th2 i mus. Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2021, 52 (3): 820-830

［16］Wang Jingkang, Wang Lichao, Jiang Yong, et al. Undersøgelse af den beskyttende virkning og mekanisme af alkoholekstrakt fra Cistanche deserticola på neuronal skade forårsaget af hypoxi/hypoglykæmi reperfusion. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2019, 44 (13): 2686-2690

［17］Cai Kerui, Liu Zhixin, Sun Xiaodong, et al. Beskyttende effekt og mekanisme af Cistanche deserticola polysaccharid på hjerneneuroner i aldrende mus induceret af D-neneneba galactose. Chinese Journal of Gerontology, 2018, 38 (19): 4732-4734

［18］Wang Qixin, Chen Zehua, Luo Hujie, et al. Effekten af ​​forskellige ekstrakter af Cistanche deserticola på forbedring af seksuel evne hos rotter med nyre-yang-mangel. Chinese Journal of Experimental Prescriptions, 2018, 24 (22): 95-101

［19］ Li J, Huang D, He LQ. Effekt af Ｒoucongrong (Herba Cistanch es Deserticolae) på reproduktionstoksicitet hos mus induceret af glycoside af Leigongteng (Ｒadix et Ｒhizoma Tripterygii) . J Tradit Chin Med,2014,34( 3): 324-328．

［20］Wang Dejun, Sheng Shuqing, Liang Hong. Virkningen af ​​Cistanche deserticola på morfologien og histokemien af ​​mus testikler og bitestikler. Anatomical Research, 2000, 22 (2): 101-103158

［21］Zhao Donghai, Zhang Lei, Zhang Yan, et al. Den terapeutiske virkning og mekanisme af phenylethanolglycosider fra Cistanche deserticola på cyclophosphamid-inducerede spermatogene lidelser hos mus. Journal of Jilin University (Medical Edition), 2014, 40 (3): 612-615

［22］Li Y, Peng Y, Wang MY, et al. Human gastrointestinal metabolisme af cistanches herba vandekstrakt in vitro: Belysning af den metaboliske profil baseret på omfattende metabolitidentifikation i mavesaft, tarmsaft, humane tarmbakterier og tarmmikrosomer. J Agricult Food Chemist, 2017,65( 34): 7447-7456．

［23］Xu Shanshan, Wu Kangyu, Tu Xingming. Bestemmelse af Echinacetin i vandekstrakt af Cistanche deserticola ved HPLC. Ny kinesisk medicin og klinisk farmakologi, 2019, 30 (5): 598-601

［24］Jiang Ping, Xu Qinghong, Chen Cunwu, et al. Effekten af ​​Jingui Shenqi Wan på ekspressionen af ​​Nrf2-signalvejsgener i testikelvæv fra mus med cyclophosphamid-induceret testikelskade. Chinese Journal of Andrology, 2020, 26 (2): 160-166

［25］Ma Chaoyang, Zhu Lijuan, Luo Chenxi, et al. Betulinsyres beskyttende virkning på leverskade induceret af cyclophosphamid hos mus. fødevarevidenskab, 2020, 41 (21): 147-153

［26］Hai Zhuo, Xiong Xianrong, Ma Hongcheng, et al. Screening af interne referencegener til fluorescenskvantitativ PCR-analyse af musetestes. Journal of Southwest University for Nationalities (Natural Science Edition), 2020, 46 (5): 448-456

［27］ Guo XB, Zhai JW, Xia H, et al. Beskyttende effekt af knoglemarvs mesenkymale stamcelle-afledte exosomer mod den reproduktive toksicitet af cyclophosphamid er forbundet med p38MAPK/EＲK og AKT signalvejene. Asian J Androl, 2021,23( 4) : 386-391．

［28］ Liu M, Li H, Zhang L, et al. Bomuldsfrøolie lindrer iskæmisk slagtilfælde-induceret oxidativ stressskade ved at aktivere Nrf2-signalvejen. Mol Neurobiol,2021,58( 6): 2494-2507．

［29］ Yang Y, Wu ZZ, Cheng YL, et al. Ｒesveratrol beskytter mod oxidativ beskadigelse af retinale pigmentepitelceller ved at modulere SOD/MDA-aktivitet og aktivere Bcl-2-ekspression. Eur Ｒev Med Pharmacol Sci,2019,23( 1) : 378-388．

［30］Ma Xiaoqing, Wang Jie, Hu Junping, et al. Farmakodynamisk undersøgelse af totale glycosider af phenylethanol fra Cistanche deserticola på gentamicin induceret akut nyreskade hos rotter. Journal of Xinjiang Medical University, 2020, 43 (7): 942-946950

［31］ Huang Y, Yang Y, Xu Y, et al. Nrf2 /HO-1-aksen regulerer angiogenesen af ​​gastrisk cancer via målretning mod VEGF. Cancer Manager Ｒes,2021,13( ​​1): 3155-3169．

［32］ Zhao Y, Wang Y, Zhang M, et al. Beskyttende virkninger af ginsenosider (20Ｒ) -Ｒg3 på H 2O 2-induceret myokardiecelleskade ved at aktivere Keap-1 /Nrf2 /HO-1-signalvejen. Chemist Biodiver, 2021, 18( 4): e2001007.

［33］ Le X, Ping L, Gu Y, et al. Blæksprutteblækpolysaccharid reducerer cyclophosphamid-induceret testikelskade via Nrf2 /AＲE-aktiveringsvej hos mus. Iranian J Basic Med Sci, 2015,18( 8): 827-831．