Cistanche Tubulosa beskytter dopaminerge neuroner gennem regulering af apoptose og glialcelle-afledt neurotrofisk faktor: in vivo og in vitro-Ⅱ

Adfærdstest

Svømmeprøve (Zhu et al., 2014)

Koordinationen af ​​kropsbevægelser hos mus blev målt ved svømmetest. Musene blev individuelt placeret i en vandtank (25 cm i højden og 10 cm i diameter) indeholdende 10 cm vand og testet i et roligt miljø for at registrere deres stationære varighed over 5 min.

Open Field Test (Kawai et al., 1998)

Bevægelsesaktivitet blev målt ved at bruge Open field-testen. Musene blev testet i et stille og svagt oplyst miljø og individuelt placeret i en 30 cm × 30 cm × 15 cm gennemsigtig akrylbeholder med et 6 cm × 6 cm separationsgitter i bunden. Musene fik 10 minutter til at tilpasse sig miljøet, og derefter blev ambulationen af ​​gitternummeret og opdrætsfrekvensen for individuelle mus målt fem på hinanden følgende gange for at opnå middelværdier.

NATURLIG CISTANCHE TUBULOSA TIL FORBEDRING AF SEKSUEL FUNKTION PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Hjernevævsprøvetagning

Før vævsprøvetagning blev musene fodret ad libitum med fri adgang til vand og modtog lægemiddelintervention i 14 på hinanden følgende dage. Fire mus i hver gruppe blev udvalgt og hurtigt halshugget. SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) fra hvert dyr blev isoleret og anbragt på is. Hjernevæv blev skyllet med 0,9 % iskold natriumchloridopløsning for at fjerne eventuelt blod og tørret på filterpapir før opbevaring ved -80◦C. Fire mus fra hver gruppe blev bedøvet intraperitonealt, og deres kister blev åbnet. En infusionsnål blev derefter indsat i venstre ventrikel af hvert dyr. For at fjerne blod i kredsløbssystemet blev det højre atrielle vedhæng skåret over, og dyret blev infunderet med 4◦C normalt saltvand, indtil leveren blev bleg for at sikre successiv perfusion. Når først udløbet fra det højre atrium blev klart, blev hvert dyr perfunderet med 4% paraformaldehydfikseringsmiddel. Efter perfusionen blev hjernevævet fra hvert dyr derefter dissekeret omhyggeligt og efterfikseret i 4% paraformaldehyd i 24 timer. Fixerede hjernevæv blev derefter skyllet under rindende vand, dehydreret i en gradueret serie af ethanolopløsninger og renset i xylenopløsning. Dette blev efterfulgt af paraffinnedsænkning og indlejring.

Ændringer i DA-mængde målt ved HPLC

Det nanopulveriserede SN fra hver gruppe blev anbragt i et isbad indeholdende 0,9% natriumchloridopløsning (1:9-forhold). Hjernevævet blev homogeniseret under anvendelse af en ultralydscelleafbryder og centrifugeret ved 1200 rpm i 20 minutter ved 4◦C for at opnå supernatanten. Til HPLC blev der anvendt en Hypersil AA-ODS-søjle (2,1 mm × 200 mm, 5 µm) ved 30◦C kolonnetemperatur. Fluorescensdetektion blev udført ved 280 nm λex og 340 nm λem. Injektionsvolumenet var 10 µL.

Ekspression af TH, GDNF, GFR 1 og Ret påvist ved immunhistokemi

Paraffinsektioner (5 µm tykke) af individuelt hjernevæv blev isoleret fra hvert dyr og anbragt i et 40◦C varmt vandbad for at udflade og klæbe til objektglas. Alle vævsglassene blev inkuberet i en 60◦C ovn i 3-6 timer, efterfulgt af xylenafvoksning, gradient-ethanoldehydrering og antigenudvinding ved inkubering i en citronsyrebuffer og opvarmning i en mikrobølgeovn i 20 minutter. Vævsglassene blev derefter inkuberet i en 3% H2O2-opløsning ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter at være blevet vasket tre gange i PBS, blev vævsglassene inkuberet med normalt serum i et lukket kammer ved stuetemperatur i 20 minutter. Immunhistokemisk farvning blev udført i henhold til producentens instruktioner. En Motic Med 6.0 billedanalysator blev brugt til at beregne værdien af ​​integreret optisk tæthed i de positivt farvede celler.

Western Blot-analyse i hjernevæv hos mus

Denne undersøgelse vurderede proteinekspressionen af ​​tyrosinhydroxylase (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 og Bax. Hjernelysatet fra hver gruppe blev homogeniseret i 3{{10}} min på is, efterfulgt af lavtemperaturcentrifugering, 20,000 rpm, ved 4 ◦C for 5 min for at opsamle supernatanten. Proteinprøverne blev adskilt under konstant tryk under anvendelse af en 10% SDS-PAGE gel som beskrevet ovenfor. Den primære antistofkoncentration: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml og Bax 0,11 mg/ml. Fremgangsmåden var den samme som ovenfor.

NATURLIG CISTANCHE TUBULOSA TIL ANTI ALDRING ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Statistisk analyse

Denne undersøgelse brugte SPSS 20.0 statistisk software til databehandling og analyse. Parameterværdier blev udtrykt som middel ± standardafvigelse (¯x ± S). ANOVA blev brugt til enkeltfaktor dataanalyse. LSD eller Games-Howell testen blev brugt til at sammenligne grupperne. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

RESULTATER

De aktive komponenter i C. tubulosa Nanopowder

I området 200-400 nm scanning havde ECH i C. tubulosa og VER i 330 nm den maksimale absorptionstop, som viste sig inden for 20 min. ICA havde maksimale absorptionstoppe ved 270 nm og dukkede op efter 20 minutter (figur 1A). Resultaterne viste, at de negative prøver ikke interfererede med påvisningen (figur 1B). Prøverne og kontrollen havde de samme kromatografiske toppe, og den negative prøve havde ingen. Dette viste, at de andre ingredienser i prøven ikke interfererede med den komponent, der blev målt. Desuden kan de tre komponenter og de tilstødende toppe nå separationsbasislinjen, og separationsgraden var større end 1,5.

C. tubulosa Nanopowder Reduced MPP+ -Induceret cytotoksicitet i MES23.5-celler

Levedygtigheden af ​​MES23.5-celler blev signifikant reduceret med stigende koncentrationer af MPP+. Figur 2F viser den signifikante cytotoksicitet af forskellige koncentrationer af MPP+.

C. tubulosa nanopowder reducerede MPP+-induceret cytotoksicitet og forbedrede levedygtigheden af ​​MES23.5-celler. Figur 2G viser, at C. tubulosa nanopowder-doser på 10-250 µg/mL udøvede dosisafhængige beskyttende virkninger på de MPP+-behandlede MES23.5-celler.

Cytomorfologisk virkning af C. tubulosa Nanopowder

Normale MES23.5-celler havde god celleadhæsion og var spindelformede med klare cellegrænser og synapser. MPP+-beskadigede MES23.5-celler viste dårlig celleadhæsion og krympning, og mange blev suspenderet i medierne med kontrakterede synapser. Disse celler blev aggregeret, krympet og runde med vakuoler indeni, og kernerne blev disintegreret eller kollapset. C. tubulosa nanopowder i forskellige doser forbedrede cytomorfologien af ​​MES23.5-celler i forskellige grader ved at forbedre celleadhæsion og synaptisk clearance af vehikelgruppen. MES23.5-celler i højdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen viste morfologi, der svarede til den normale kontrolgruppe (figur 2A-E).

Virkning af C. tubulosa Nanopowder på TH-ekspression og apoptose i cellerne

Figur 3 viser en signifikant reduktion i TH-proteinekspressionen i bærergruppen. TH-proteinekspressionen steg forskelligt i grupper behandlet med forskellige doser af C. tubulosa. Men LSD-testen viste, at der ikke var nogen signifikant forskel mellem de tre behandlede grupper.

Figur 4 viser resultaterne af apoptosevurderingen ved anvendelse af flowcytometri. Hyppigheden af ​​apoptose i vehikelgruppen var signifikant højere end i de andre grupper. Celler behandlet med forskellige doser af C. tubulosa nanopowder viste forskellige grader af fald i den apoptotiske hastighed sammenlignet med vehikelgruppen. Celler i mellem- og højdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen havde den mest signifikante forbedring i apoptotisk frekvens sammenlignet med de andre C. tubulosa-behandlingsgrupper. LSD-test viste, at der ikke var nogen signifikant forskel mellem de to behandlede grupper, men også en signifikant forskel mellem lavdosisgruppen.

Virkning af C. tubulosa Nanopowder på Bcl2/Bax-proteinekspression i cellerne

Figur 5 viser, at ekspressionen af ​​Bcl2-protein i cellerne i vehikelgruppen var signifikant lavere sammenlignet med den normale kontrolgruppe. I modsætning hertil var ekspressionen af ​​Bax-protein i celler fra bærergruppen signifikant højere end i den normale kontrolgruppe. C. tubulosa-behandlingsgrupper viste øget Bcl2-proteinekspression og nedsat Bax-proteinekspression i MPP+--behandlede MES23.5-celler. Mellem de tre behandlede grupper var der signifikante forskelle i LSD-testen. Disse virkninger var dosisafhængige.

Adfærdstest

Resultaterne af svømmetesten antydede, at musene i vehikelgruppen havde relativt lange stationære varigheder, som steg over tid. På dag 14 havde musene i vehikelgruppen en signifikant længere stationær varighed end musene i den normale kontrolgruppe. Den stationære varighed af musene i

den lave dosisC. tubulosabehandlingsgruppen var ikke signifikant forskellig fra den for musene i bærergruppen. Den stationære varighed af musene i højdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen var imidlertid signifikant mindre end for musene i bærergruppen.

Resultaterne af Open field-testen tyder på, at musene i vehikelgruppen efter MPTP-induceret skade i musene viste et signifikant fald i deres evne til spontan aktivitet som vist ved opdrætsfrekvensen. Efter en 14-dags administration afC. tubulosa nanopulver, havde musene i moderat- og højdosisbehandlingsgrupperne signifikant højere opdrætsfrekvenser sammenlignet med musene i bærergruppen (figur 6A, B).

Effekt af C. tubulosa Nanopowder på DA-indhold i mus

Ændringer i DA-indholdet af SN blev bestemt ved HPLC. Det viste sig, at DA-indholdet i hjernen i vehikelgruppen var signifikant reduceret. DA-indholdet i hjernen hos PD-mus i lavdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen afveg ikke signifikant fra musene i vehikelgruppen. Imidlertid,C. tubulosa behandlingøgede DA-niveauerne i hjernen hos PD-mus på en dosisafhængig måde. Hjernerne fra PD-mus behandlet med højdosis C. tubulosa havde et signifikant højere DA-indhold end hjernerne fra mus i bærergruppen (figur 6C).

Virkning af C. tubulosa Nanopowder på TH-ekspression i mus

Antallet af TH-positive celler og niveauet af TH-proteinekspression i SN af MPTP-inducerede PD-mus var lavere sammenlignet med mus i kontrolgruppen. Efter C. tubulosa-behandlingen steg antallet af TH-positive celler og niveauet af TH-proteinekspression i SN af MPTP-inducerede PD-mus, med en signifikant forskel mellem højdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen og vehikelgruppen ved LSD-test; og der var signifikante forskelle mellem de tre behandlede grupper (figur 7).

Effekt af C. tubulosa Nanopowder på proteinekspression af GDNF og dets receptorer, GFR 1 og Ret i mus

Proteinekspressionen af ​​GDNF og dets receptorer, GFR 1 og Ret, i de positivt farvede celler, blev evalueret under anvendelse af immunhistokemi. Western blot-analyse blev brugt til at evaluere proteinekspressionsniveauerne i SN for de forskellige grupper af mus. Resultaterne for de forskellige grupper var ens ved brug af de to detektionsmetoder. Ekspressionen af ​​GDNF og dets receptorproteiner, GFR 1 og Ret, i positivt farvede celler i SN af musene i bærergruppen, var signifikant lavere end i musene i den normale kontrolgruppe. Forskellige doser af C. tubulosa-behandling øgede antallet af GDNF-, GFR 1- og Ret-positive celler (figur 8A-S).

Proteinekspressionen af ​​GDNF, GFR 1 og Ret i SN af musene i vehikelgruppen var signifikant lavere end i musene i kontrolgruppen. Stigende behandlingskoncentrationer afC. tubulosa nanopowerbetydeligt forbedret ekspressionen af ​​disse proteiner. Proteinekspressionen af ​​GDNF, GFR 1 og Ret i SN af musene i højdosis C. tubulosa-behandlingsgruppen var signifikant højere end i musene i vehikelgruppen (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Effekt af C. tubulosa Nanopowder på proteinekspression af Bcl2/Bax i mus

Bcl2-proteinekspression blev signifikant reduceret, og Bax-proteinekspression blev signifikant forbedret i SN af mus i vehikelgruppen (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISKUSSION

PD og apoptose

PD er en neurodegenerativ lidelse. Ifølge Zhang et al. (2005) er prævalensen 10,7 % i den kinesiske befolkning på over 55 år og 1,67 % hos dem på over 65 år. Antallet af PD-patienter er steget årligt med accelerationen af ​​den globale aldring, hvilket har lagt en stor økonomisk byrde på patienternes familier og samfundet som helhed. I hjernen er dopaminerge neuroner hovedsageligt involveret i syntesen og sekretionen af ​​DA. De er vidt udbredt i centralnervesystemet og lokaliseret primært i SN (80%). TH er det nøglehastighedsbegrænsende enzym for DA-syntese. Hæmningen af ​​TH-aktivitet reducerer således DA-syntese (Huot og Parent, 2007). De vigtigste patologiske og biokemiske ændringer af PD er apoptose af dopaminerge neuroner i SN, en signifikant reduktion af nigrostriatal DA og dannelsen af ​​Lewy-legemer i dopaminerge neuroner (Dexter og Jenner, 2013). Ætiologien af ​​PD involverer associerede genetiske faktorer, miljøfaktorer og aldring af nervesystemet (Allam et al., 2005). Patogenesen af ​​PD forbliver uklar i moderne medicin. Siden slutningen af ​​1960'erne er levodopa-erstatningsterapi blevet brugt med succes til at behandle PD og er blevet anerkendt som et vigtigt vendepunkt i PD-behandling. Den langsigtede anvendelse af denne terapi forårsager dog bivirkninger, og terapien behandler ikke de underliggende årsager til PD (Del Sorbo og Albanese, 2008). Derfor er aktiv forskning i nye lægemidler eller behandlingsmetoder rettet mod beskyttelse af dopaminerge neuroner afgørende for behandling af PD.

I tidligere undersøgelser indikerede anvendelsen af ​​terminal deoxynucleotidyltransferase-medieret dUTP nick-end-mærkning, at 0,6%-4,8% af dopaminerge neuroner i SN af PD-patienter viste apoptose (Mochizuki et al., 1996). Elektronmikroskopi viste apoptotiske træk, herunder kromatisk kondensation og apoptotiske legemer i dopaminerge celler (Anglade et al., 1997). Tompkins et al. (1997) udførte en ultrastrukturel analyse af hjernevævsobduktioner fra patienter med PD, AD og diffus Lewy body-sygdom (DLBD). De fandt apoptotiske legemer i det tætte lag af SN hos PD- og DLBD-patienter, hvilket gav afgørende bevis for neuronal apoptose ved PD og relaterede sygdomme. Derfor er reduktionen eller undertrykkelsen af ​​apoptose i dopaminerge neuroner fundamental for PD-behandling.

Tidligere undersøgelser viste, at MPTP inducerede PD-lignende symptomer. MPTP krydser blod-hjerne-barrieren og metaboliseres af type B monoaminoxidaser i astrocytter. Det omdannes efterfølgende til giftig MPP+, som akkumuleres i mitokondrierne af dopaminerge neuroner gennem proteinindtaget af DA-transporteren. Det genererer således overskydende iltfrie radikaler, der hæmmer kompleks I-aktiviteten af ​​den mitokondrielle respiratoriske kæde og ATP-syntese. Disse hændelser fremmer yderligere dannelse af frie radikaler og oxidative stressreaktioner og fører til sidst til degeneration og død af dopaminerge neuroner. Derfor brugte denne undersøgelse MPP+ til at etablere en in vitro vehikel i MES23.5 dopaminerge neuroner og MPTP til at inducere en vehikelmus til gensidig verifikation. Ifølge resultaterne af MTT-assayet reducerede MPP+ markant levedygtigheden af ​​MES23.5-celler, hvilket tyder på, at MPP+ var cytotoksisk for dopaminerge neuroner. Resultaterne viste også, at C. tubulosa effektivt forbedrede ekspressionen af ​​anti-apoptotiske proteiner og hæmmede stigningen af ​​MPP+-induceret apoptose.

PD og GDNF

GDNF er en neurotrofisk faktor, som først blev isoleret af Lin et al. (1993). Lin et al. (1993) viste også, at GDNF havde specifikke ernæringsmæssige virkninger på dopaminerge neuroner i mellemhjernen hos rotter. GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP) og artemin (ART) udgør GDNF-familien. De er strukturelt ens og funktionelt beslægtede sekretoriske proteiner (Kotzbauer et al., 1996; Baloh et al., 1998; Milbrandt et al., 1998; Woodbury et al., 1998).

GDNF-receptoren består af to komponenter. Den første komponent, GFR, er fikseret til den ydre membran af glycosylphosphatidylinositol (GPI) og forankret til overfladen af ​​connexin. Den anden komponent er Ret-proteinet. Forskning har vist, at der er fire forskellige typer af GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 og GFR 4. GFR 1 er en højaffinitetsreceptor for GDNF (Onochie et al., 2000; Chen et al., 2001; Lindahl et al., 2001). Ret-protein er en funktionel receptor for GDNF. Homodimermolekylet af GDNF binder direkte til GFR 1 for at danne komplekser og interagerer med Ret, hvilket resulterer i dimerisering og aktivering af Ret. På grund af autophosphoryleringen af ​​Ret aktiverer Ret flere almindelige TH-signalveje. I fravær af Ret-protein forårsager GDNF proteinphosphorylering af MAPK, PI-3 og PLC-, foruden mRNA-ekspression og funktionel aktivitet af C-fos gennem dets receptorprotein, GFR 1 (He et al., 2008).

Undersøgelser har vist, at GDNF havde den stærkeste beskyttende effekt på dopaminerge neuroner (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). I vehikler, der bruger MPTP og 6-hydroxydopamin (6-OHDA) til at inducere skade i dopaminerge neuroner, beskytter GDNF dopaminerge neuroner ved at reducere apoptose og fremme aksonal vækst for at inducere stamcelledifferentiering (Lucas et al., 2012; Littrell et al., 2013). Lin et al. (1993) viste, at GDNF specifikt fremmede levedygtighed, differentiering og aksonal vækst af dopaminerge neuroner for at fremme optagelsen af ​​DA i neuroner. Undersøgelsen viste også, at GDNF ikke kun forhindrede akut toksicitet, men også lindrede langsigtet toksicitet af MPP+ eller 6-OHDA i dopaminerge neuroner og desuden forhindrede celledød i stressede eller beskadigede celler (Yu et al., 2010). Derudover fremmede GDNF neurale stamcelleproliferation og differentiering mod dopaminerge neuroner i mellemhjernen (Lindsay, 1995) for at redde dopaminerge neuroner fra retrograd degeneration (Hong-Juan et al., 2011).

Undersøgelser har vist, at GDNF-ekspression i SN var signifikant reduceret i dyrevehikler (Yang et al., 2010). Dette tyder på, at det kan være en af ​​mekanismerne for patogenese hos PD-rotter. Injektionen af ​​5-15 µg/d GDNF i den laterale ventrikel eller striatum af et MPTP-induceret vehikeldyr i tre på hinanden følgende måneder fremmede nigrostriatal reparation af det dopaminerge system i vehikeldyret (Grondin et al., 2002). Undersøgelser af GDNF-behandling af PD i dyrevehikler har vist, at intracerebral injektion af GDNF i forskellige hjerneregioner, såsom SN, caudate nucleus og lateral ventrikel, forbedrede bevægelsesforstyrrelser forbundet med PD dyremodeller, herunder nedsat motorisk aktivitet, muskelstivhed og tremor (Grondin et al., 2002). GDNF kan dog ikke direkte passere gennem blod-hjerne-barrieren. Derfor involverer lokal cerebral injektion af GDNF væsentlig risiko og vanskeligheder ved klinisk anvendelse. Ansøgninger om at introducere eksogen GDNF via mikrosfærer med kontrolleret frigivelse, kapsler med forlænget frigivelse og virale gener studeres stadig (Liang et al., 2010; Yang et al., 2010; Qiao et al., 2012). I betragtning af begrænsningerne af forskellige teknikker til at introducere eksogen GDNF i hjernen, er neurobeskyttende midler, der fremmer frigivelsen af ​​endogen GDNF, væsentlige for klinisk anvendelse.

PD ogC. tubulosaNanopulver

PD er mere almindelig hos midaldrende voksne og ældre. Teorien om TCM mener, at PD primært er lokaliseret i hjernen og hovedsageligt skyldes lever- og nyremangel, foruden vital energi og blodinsufficiens. Ifølge denne teori bør PD-behandling således fokusere på at styrke nyre og knoglemarv.Yang et al. (2010)brugte randomiserede, dobbeltblindede og placebokontrollerede kliniske forsøg og fandt ud af, at kombinationsbehandling ved hjælp af Madopar og nyretonificerende opskrifter lindrede de motoriske dysfunktioner hos PD-patienter. Behandlingsresultatet var bedre end en enkelt behandling med Madopar. Behandlingseffektiviteten af ​​TCM-monoterapi eller receptpligtig sammensætning ved PD er blevet bekræftet i PD-dyremodeller og kliniske anvendelser. TCM-applikationer til tonificering af nyrer og fremme af blodcirkulationen reducerede doseringen af ​​monoterapi til PD ved brug af Madopar. Nogle undersøgelser har antydet, at TCM forbedrede symptomer på PD og beskyttede dopaminerge neuroner, som kunne have været tæt forbundet med fremme af endogen GDNF-ekspression (Hong-Juan et al., 2011; Qiao et al., 2012).

Den nyretonificerende forbindelse brugt i denne undersøgelse,C. tubulosananopulver, indeholdtCistancheepimedium, ogRhizoma polygonati. Moderne forskning tyder på, at den kemiske sammensætning afCistancheer ECH, som beskytter dopaminerge neuroner i SN i de MPTP-inducerede PD-mus og hæmmer reduktionen af ​​DA og DA-transportøren (Zhao et al., 2010). Derudover forhindrer det 6-OHDA-induceret reduktion i DA og beskytter striatale dopaminerge neuroner (Chen et al., 2007). Epimedium hæmmer aktiveringen af ​​caspase-3 og udøver neurobeskyttende roller (Liu et al., 2011). Epimedium flavonoider fremmer effektivt proliferation og differentiering af neurale stamceller (Yao et al., 2010).

I dette studie,C. tubulosananopowder modvirkede stigningen i MPP+-induceret apoptose på en dosisafhængig måde. Det forbedrede markant TH udtryk iin vitrovehikel og havde signifikante anti-apoptotiske virkninger i dopaminerge neuroner. De MPTP-inducerede vehikelmus viste adfærdsforstyrrelser og signifikant reduceret TH-ekspression i mellemhjernens væv og DA-niveauer, som er typiske patologiske træk ved PD. Forskellige doser afC. tubulosananopowder forkortede den stationære varighed, forbedrede autonome aktiviteter, forbedrede adfærdsforstyrrelser, forhøjede DA-niveauer i hjernen og øgede TH-ekspression i køretøjer. Disse resultater tydede på detC. tubulosananopowder udøvede beskyttende virkninger i dopaminerge neuroner og forbedrede derved adfærdsforstyrrelser af vehikler. Forskellige doser afC. tubulosananopowder øgede ekspressionen af ​​GDNF-protein og dets receptorproteiner i hjernen hos bærermus. HøjdosisC. tubulosabehandling opregulerede signifikant Bcl2-ekspression og reducerede Bax-ekspression, hvilket antydede detC. tubulosananopulverkan fremme GDNF-ekspression og sekretion i den MPTP-beskadigede musehjerne. Derudover kan det udøve neurobeskyttende virkninger i dopaminerge neuroner og minimere neuronal apoptose gennem de neurotrofiske støtteroller af GDNF.

Denne undersøgelse viste detC. tubulosananopowder udøvede beskyttende virkninger i dopaminerge neuroner i beggein vitroogin vivoog øget TH-udtryk for at forbedre DA-indhold. Det forbedrede også adfærdsforstyrrelser i MPTP-inducerede bærermus, regulerede proteinekspression af GDNF og dets receptorproteiner i SN og havde anti-apoptotiske virkninger i PD-musene. Mekanismen bag de kliniske virkninger afC. tubulosananopowder i PD kan involvere at øge indholdet af endogen GDNF i hjernen og derved reducere skaderne på dopaminerge neuroner.

NATURLIG CISTANCHE TUBULOSA TIL FORBEDRING AF SEKSUEL FUNKTION PHGS75% ECH 30% ACT 12