Mekanistisk undersøgelse af forbedringen af kronisk prostatitis ved hjælp af Cistanche-tabletter via STAT3/HIF-1 /glykolyseaksen
Nov 11, 2025
Abstrakt
Denne undersøgelse undersøger den terapeutiske mekanisme afCistanche-tabletter (CT)i behandlingen af kronisk prostatitis gennemSTAT3/HIF-1 /glykolyse-signaleringsakse. En rottemodel for eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) blev etableret for at evaluere effektiviteten af Cistanche-tabletter. Wistar-hanrotter blev tilfældigt opdelt i seks grupper (n=7 pr. gruppe): kontrol-, model-, lav-, mellem- og højdosis CT-grupper (henholdsvis 197,2, 591,5 og 1774,4 mg/kg/dag) og en positiv kontrolgruppe (Pusitai, 34,2 mg/kg/dag). Efter modelinduktion blev alle behandlinger administreret i fire på hinanden følgende uger.
Histologisk analyse ved brug af hæmatoxylin og eosin (HE)-farvning vurderede prostatabetændelse og kirtelskader. Serumniveauer af interleukin-8 (IL-8), interleukin-1 (IL-1) og immunglobulin G (IgG) blev målt via ELISA. Proteinekspression af phosphoryleret STAT3 (p-STAT3), HIF-1, multipel inositolpolyphosphatphosphatase 1 (MINPP1) og hexokinase (HK) i prostatavæv blev evalueret gennem Western blotting og immunhistokemi. Ikke-målrettet metabolomik blev brugt til at identificere differentielle metabolitter og associerede metaboliske veje.
Resultaterne viste, at CT signifikant lindrede patologisk skade i prostata. ELISA afslørede reducerede serumniveauer af IL-8, IL-1 og IgG. Western blot og immunhistokemi viste, at CT nedregulerede p-STAT3, HIF-1 og HK, mens den opregulerede MINPP1. Metabolomics identificerede 96 differentielle metabolitter og afslørede, at CT kan udøve sin terapeutiske effekt ved at modulere glykolyse og arachidonsyremetabolisme.
Konklusion:Cistanche-tabletter kan lindre inflammation og hæmme progressionen af kronisk prostatitis ved at målrette STAT3, undertrykke HIF-1-signalering og regulere glykolytisk metabolisme.
Nøgleord: Cistanche tabletter; ckronisk prostatitis; metabolomics; HIF-1 signalvej; glykolyse
Cistanche-fordele for prostata og nyrer
Tilføj cistanche-piller til kurven
Supportive Service Of Wecistanche - Den største cistanche-eksportør i Kina:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
eller
Indledning
Kronisk prostatitis er en almindelig urologisk tilstand hos mænd, kendetegnet ved urindysfunktion, smertefuld vandladning, uopsættelighed og perinealt ubehag. Det er den mest udbredte form for prostatitis, som i væsentlig grad påvirker patienternes livskvalitet. Undersøgelser rapporterer en prævalens på 6,0%-32,9% hos kinesiske mænd og 2,0%-16,0% internationalt. Nuværende vestlige behandlinger er afhængige af antibiotika og NSAID'er, men langvarig brug fører ofte til gastrointestinale bivirkninger.
Ætiologien og patogenesen af kronisk prostatitis er kompleks og involverer immun dysregulering, neuroendokrin ubalance og livsstilsfaktorer. Immunologiske abnormiteter og metabolisk dysfunktion betragtes som centrale bekymringsområder.
Fra perspektivet af traditionel kinesisk medicin (TCM) er kronisk prostatitis forbundet med nyre-qi-mangel, ophobning af fugtig varme og blodstase.Cistanche tabletter, afledt af en traditionel in-hospital formulering [Godkendelse nr. Z04000524], er baseret på den klassiske formel "Cheng's Bi Xie Fen Qing Yin" kombineret med "Cuscuta Pill". Denne formel indeholder ti urter som f.eksCistanche deserticola, Dioscorea, ogPolyporus umbellatus, og bruges traditionelt til at tonificere nyrerne, sikre essens, fremme vandladning og eliminere uklarhed.
Kliniske undersøgelser har bekræftet, at Cistanche-tabletter effektivt reducerer symptomer på prostatitis og forbedrer livskvaliteten med en god sikkerhedsprofil. Den meste eksisterende forskning fokuserer dog på kliniske observationer, og de præcise terapeutiske mekanismer er stadig uklare.
Nylige beviser tyder på, at kronisk prostatitis involverer unormal glykolyse og overekspression af hypoxi-inducerbar faktor 1 (HIF-1), hvilket gør det til et potentielt mål for behandling. Desuden er regulering af STAT3-vejen dukket op som en ny strategi til at kontrollere kronisk inflammation og autoimmune reaktioner. Denne undersøgelse udforsker den terapeutiske mekanisme af Cistanche-tabletter baseret på in vivo-eksperimenter og metabolomik, med det formål at tilvejebringe ny evidens for brugen af urteformuleringer ved kronisk prostatitis.
Materialer og metoder
1. Materialer
Dyr:42 Wistar-hanrotter af SPF-grad (190-210 g) blev købt fra Suzhou SPF Biotechnology Co., Ltd. Dyrene blev anbragt under standardforhold (20±3 grader, 55%±5% luftfugtighed, 12-timers lys/mørke-cyklus) og forsynet med mad og vand ad libitum. Undersøgelsen blev godkendt af Institutional Animal Ethics Committee (godkendelsesnr.. 2023112001).
Lægemidler og reagenser:
Cistanche tabletter
Pusitai tabletter (positiv kontrol)
Saltopløsning, PBS-buffer, komplet Freunds adjuvans
ELISA-sæt til IL-8, IL-1 og IgG
Antistoffer: p-STAT3, HIF-1, MINPP1, HK
Sekundære antistoffer og immunhistokemiske reagenser
Instrumenter:
LC-MS-systemer (Triple TOF 6600, Agilent 1290 Infinity LC)
Højhastighedscentrifuge, homogenisator, mikropladelæser og præcisionsbalance
2. Metoder
2.1 In vivo undersøgelse
2.1.1 Model for kronisk prostatitis
En eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) model blev induceret under anvendelse af homogeniseret prostatavæv emulgeret med komplet Freunds adjuvans. Rotter modtog subkutane injektioner på dag 1 og 28 på flere steder (nakke, lyske og bagpoter). Kontrolrotter modtog saltvandsinjektioner. Modelsucces blev bekræftet af adfærdsmæssige tegn og histopatologi.
2.1.2 Gruppering og behandling
Efter modelbekræftelse blev rotter tilfældigt opdelt i seks grupper: kontrol-, model-, lav-, medium-, højdosis-CT- og Pusitai-gruppe. CT medium dosis blev indstillet i henhold til klinisk ækvivalent dosering. Behandlinger blev givet oralt én gang dagligt i 28 dage.
2.1.3 Prøveindsamling
På den sidste dag blev 24-timers urin- og vandindtag registreret. Efter eutanasi blev blod- og prostatavæv opsamlet. Prostataindeks (prostatavægt/kropsvægt) blev beregnet. Væv blev enten fikseret i formalin eller frosset i flydende nitrogen til yderligere analyse.
2.1.4 Generelle bemærkninger
Igennem modellering og behandling blev rotter overvåget for adfærd, pelstilstand og generel sundhed.
2.1.5 ELISA for serumcytokiner
Serum IL-8, IL-1 og IgG-niveauer blev målt ved hjælp af ELISA efter producentens instruktioner.
2.1.6 Histopatologi (HE-farvning)
Formalin-fikseret prostatavæv blev paraffin-indlejret og sektioneret til HE-farvning. Betændelse og vævsskade blev observeret under et mikroskop.
2.1.7 Immunhistokemi for MINPP1 og HK
Standard IHC-procedurer blev fulgt, inklusive afparaffinisering, antigen-hentning, blokering, primær og sekundær antistof-inkubation, DAB-farvning og hæmatoxylin-modfarvning. ImageJ-software blev brugt til at kvantificere positiv farvning.
2.1.8 Western Blot for p-STAT3 og HIF-1
Frosne prostatavæv blev lyseret og proteinkoncentrationer bestemt. SDS-PAGE og PVDF-membranoverførsel blev efterfulgt af blokering, primær/sekundær antistofinkubation, ECL-udvikling og densitometri ved hjælp af ImageJ.
2.1.9 Statistisk analyse
Data blev analyseret ved hjælp af GraphPad Prism 9.5.1. Resultater blev udtrykt som middel ± SD. Envejs ANOVA efterfulgt af LSD post hoc test blev brugt. P<0.05 was considered statistically significant.
2.2 Serummetabolomik
2.2.1 Prøveforberedelse
Serum fra kontrol-, model- og mellemdosis CT-grupper blev optøet, blandet med koldt methanol-acetonitril-vand, sonikeret og centrifugeret. Supernatanter blev tørret og rekonstitueret til LC-MS-analyse.
2.2.2 LC-MS-betingelser
Metabolitter blev adskilt under anvendelse af en UPLC BEH Amide-søjle med en specifik gradientelueringsprofil. Data blev erhvervet i både positiv og negativ ion-tilstand ved hjælp af højfølsom IDA-tilstand.
2.2.3 Databehandling
Raw data were converted to .mzML format, processed using XCMS for peak identification, alignment, and normalization. Metabolites with >50% missing values were removed. PCA and PLS-DA were used for multivariate analysis. Significant metabolites were filtered based on VIP >1.0 og s<0.05, and KEGG pathway enrichment was performed.
Resultater og diskussion
Cistanche-tabletter forbedrede signifikant prostata-histopatologiske ændringer, reducerede inflammatoriske cytokiner og regulerede nøgleproteinudtryk i STAT3/HIF-1/glykolyseaksen. Metabolomics afslørede modulering af glykolyse og arachidonsyremetabolisme, hvilket tyder på både antiinflammatoriske og metaboliske reguleringsmekanismer.
Disse resultater understøtter udviklingen afCistanche-baserede urtetilskudsom en lovende naturlig terapi for kronisk prostatitis, der tilbyder multi-target regulering med god sikkerhed.
