Cistanche Aerial-Part Flavonoider forbedrer kronisk prostatitis: rottevalidering, cytokinmodulering og PI3K–AKT–EGFR–MMP9-mekanismer

2.3.1 Dyregruppering og modelinduktion

Efter en uges akklimatisering blev SD-hanrotter tilfældigt opdelt i fire grupper (n=6 pr. gruppe): sham-opereret gruppe, modelgruppe, positiv-lægemiddelgruppe (Qianliekang Pule'an-tabletter) og Cistanche-alkoholekstraktgruppe fra luften. Efter "Udkast til specifikation til fremstilling af dyremodeller for kronisk prostatitis" [20] blev 1 % carrageenan i normalt saltvand injiceret i sædblærerne for at inducere kronisk prostatitis i model-, behandlings- og positiv-lægemiddelgrupperne. Den falske gruppe modtog et lige så stort volumen af ​​normalt saltvand. Dosering begyndte efter en 3-dages restitution.

 

 

cistanche ekstrakt kosttilskud til kronisk prostatitis

Kontakt os køb nu

 

 

 

 

2.3.2 Lægemiddeladministration

Cistanche-antenneekstraktet blev indgivet ved 63 mg/(kg·d). Det positive lægemiddel blev givet ved 1,05 g/(kg·d). Bæreren var 0,5% CMC-Na, og sonde-volumenet var 1 ml pr. rotte. Sham- og modelgrupperne modtog en tilsvarende mængde køretøj. Administration blev udført én gang dagligt på et fast tidspunkt i 28 på hinanden følgende dage.

2.3.3 Kropsvægt og prostataindeks

Kropsvægten blev registreret ugentligt. 24 timer efter den sidste dosis blev rotter bedøvet; prostata blev skåret ud og vejet for at beregne prostataindekset.
Prostataindeks (%)=prostatamasse (g) / kropsmasse (g) × 100 %
Resultater: Der blev ikke observeret signifikante forskelle mellem grupper i kropsvægt eller prostatamasse. Modelgruppen viste et øget prostataindeks i forhold til shamgruppen (P < 0,05). Både den positive lægemiddelgruppe og Cistanche-ekstraktgruppen udviste reducerede prostataindeks sammenlignet med modelgruppen (P < 0,05), se tabel 3.

Cistanche introduktion til kronisk prostatitis

 

2.3.4 Serum inflammatoriske cytokiner ved ELISA

24 timer efter den sidste administration blev rotter bedøvet med 20% vandig urethanopløsning. Blod blev opsamlet fra abdominal aorta, centrifugeret og serum opbevaret ved -80 grader. Efter ELISA-kit-instruktioner blev serumniveauer af DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA og TNF- bestemt.
Sammenlignet med den falske gruppe havde modelgruppen forhøjet DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA og TNF- (P < 0,05, P < 0,01). I modsætning til modelgruppen viste Cistanche-antenneekstraktgruppen nedsatte niveauer af DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA og TNF- (P < 0,05, P < 0,01), hvilket indikerer en gunstig terapeutisk effekt mod kronisk prostatitis; se figur 4.

2.3.5 HE-farvning til prostatahistopatologi

Prostatavæv blev fikseret i vævsfikseringsmiddel i mere end 24 timer, dehydreret, paraffinindlejret, snittet og farvet med hæmatoxylin-eosin (HE). Under et lysmikroskop blev kirtelmorfologi, stromal inflammatorisk celleinfiltration og fibrøs hyperplasi registreret.
Makroskopiske og histologiske resultater efter 28 dage:

Sham gruppe:prostata var rødmosset, blød og elastisk.

Modelgruppe:prostata var mørkerød, fastere og mindre elastisk.

Cistanche-ekstrakt og positive lægemiddelgrupper: bemærkelsesværdige forbedringer sammenlignet med modelgruppen.
HE-farvningen viste:

Sham:intakte kirtler uden atrofi; enkeltlags epitelceller intakte uden hyperplasi; ingen inflammatorisk infiltration i interglandulære rum.

Model: markant kirteldeformation og atrofi; epiteleksfoliering og hyperplasi; rigelig inflammatorisk celleinfiltration i stroma.

Cistanche-ekstrakt og positive lægemiddelgrupper: forbedret kirtelmorfologi, reduceret inflammatorisk infiltration og hæmmet epitelhyperplasi; se figur 5.

2.3.6 Statistisk analyse

Data blev behandlet med SPSS 23.0 og udtrykt som x̄ ± s. To-gruppe sammenligninger brugte t-testen. P < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

 

3 Diskussion

Kronisk prostatitis er en almindelig genitourinær tilstand med en forekomst på op til 8 % blandt mænd under 50 år på verdensplan, som ofte viser sig med symptomer i de nedre urinveje og bækkensmerter [21]. Dets patogenese forbliver ufuldstændigt defineret; foreslåede bidragydere omfatter okkult mikrobiel infektion, autoimmunitet, oxidativt stress og endokrin dysregulering. Den nuværende kliniske behandling er hovedsageligt afhængig af vestlig medicin såsom -receptorblokkere, NSAID'er og quinolonantibiotika [22]. Flavonoider fra luftens dele af Cistanche udviser også terapeutiske fordele ved kronisk prostatitis. I denne undersøgelse blev netværksfarmakologi brugt til at udforske mekanismer for anti-kronisk prostatitis aktivitet af flavonoider i luftdelen fra Cistanche, efterfulgt af dyrevalidering.

UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS identificerede 44 flavonoider i det alkoholiske ekstrakt af Cistanche-antennedele. Databasescreening gav 19 aktive komponenter, 956 sygdomsmål, 138 sammensatte mål og 88 krydsende mål. Molekylær docking blev udført mellem de top 10 PPI-rangerede mål og de aktive komponenter. De fem bedst scorende par var spinacetin-EGFR, liquiritigenin-MMP2, ononin (maackiain-glycosid)-MMP9, spinacetin-MMP9 og liquiritigenin-PTGS2. Spinacetin er en vigtig isoflavonoid-relateret flavon med antioxidant og anti-infektionsfarmakologi, der er i stand til at dæmpe inflammation og oxidativ stress og reducere apoptose [23]. Liquiritigenin er et dihydroflavonoid, der nedregulerer pro-inflammatoriske cytokiner for at udøve anti-inflammatoriske virkninger [24]. Ononin kan reducere nedstrøms pro-inflammatoriske mediatorer i syge væv og viser antitumorpotentiale [25]. KEGG-berigelse implicerede PI3K-AKT, EGFR-tyrosinkinasehæmmerresistens og andre veje i den anti-kroniske prostatitis-virkning af Cistanche-flavonoider i luften.

EGFR er en transmembranreceptor, der er afgørende for regulering af cellevækst og epitelintegritet [26]. Aktiveret EGFR fremmer prostatacelleproliferation via downstream-veje inklusive PI3K-AKT; afvigende spredning kan drive stromal og fibrøs hyperplasi og unormal prostatavækst hos rotter [27]. AKT1, en AKT-isoform, er afgørende i proliferation-apoptose-balance, metabolisme og genomisk stabilitet [28], med aktivering stort set afhængig af PI3K-AKT-vejen. Efter ekstracellulære stimuli, der binder til membranreceptorer, aktiverer pathwayen AKT1 til at udføre sine funktioner [29]. Ved prostatitis fremmer AKT1-aktivering produktionen af ​​inflammatoriske cytokiner, der yderligere stimulerer lokale celler, hvilket forårsager smerte, hævelse, vævsskade og fibrose. Hæmning af AKT1-ekspression kan mildne kronisk prostatitis [30]. MMP9 er en zinkafhængig endopeptidase, der nedbryder forskellige ekstracellulære matrixkomponenter [31]. Ved kronisk prostatitis forstyrrer MMP9-overekspression vævsarkitektur, kompromitterer acinar integritet og letter inflammatorisk cellemigration fra perivaskulær region til læsionssteder, hvilket udvider inflammation. MMP9 kan interagere med PI3K-AKT-vejen på flere måder, og PI3K-AKT-aktivering kan opregulere MMP9-ekspression. Vi udleder, at Cistanche-flavonoider i luften virker mod kronisk prostatitis ved at regulere EGFR, AKT1 og MMP9 via PI3K-AKT-vejen.

For at validere effektiviteten etablerede carrageenan-inducerede sædvesikelinjektioner modellen, efterfulgt af behandling. Sammenlignet med modelgruppen viste Cistanche-gruppen nedsat serum-DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA og TNF-; forbedret kirtelmorfologi; og reduceret inflammatorisk celleinfiltration.

Sammenfattende virker flavonoider fra luftdelene af Cistanche mod kronisk prostatitis gennem multi-komponent, multi-target og multi-pathway mekanismer, der sandsynligvis regulerer EGFR, AKT1 og MMP9 via PI3K-AKT signalering. Nærværende arbejde verificerede effektiviteten af ​​disse flavonoider og foreløbigt belyst aktive bestanddele og mekanismer, hvilket giver en reference til afklaring af det farmakodynamiske materialegrundlag og virkningsmekanisme for Cistanche-antennedele.

 

Referencer

[1] Gao Xueyan, Wang Wenquan, Wei Shengli, et al. Fremskridt i de farmakologiske aktiviteter af Cistanche og dets aktive komponenter [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2009, 34(21): 2695–2700.
[2] Zhang Minjian, Chang Degui, Bin Bin, et al. Integreret kinesisk og vestlig medicin guideline til diagnosticering og behandling af kronisk prostatitis [J]. Chinese Journal of Andrology, 2023, 37(1): 3–17.
[3] Zhang Lu, Cui Jie, Wang Wenquan, et al. Fremskridt i kemiske bestanddele og farmakologiske virkninger af luftdele af Cistanche-slægten [J]. Chinese Medicinal Materials, 2018, 41(6): 1501-1505.
[4] Li Hongli. Undersøgelse af antioxidant- og anti-CNP-aktiviteter af vandopløselige komponenter fra luftdele af Cistanche [D]. Beijing: Beijing University of Chinese Medicine, 2016.
[5] Zhang Lin, Zhao Zihan, Yu Bingli, et al. Virkninger af luftdele af Cistanche på kronisk prostatitis hos rotter [J]. Kinesisk traditionel patentmedicin, 2019, 41(6): 1407–1410.
[6]–[19] (Analytiske metodologiske referencer for UPLC/ESI/Orbitrap/Q-TOF og flavonoididentifikation; samme nummerering og journaldetaljer som kilden, tilpasset til sammenhæng i sammenhængen.)
[20] Chinese Association of Traditional Chinese Medicine, Professional Committee of Experimental Pharmacology of Chinese Medicine. Udkast til specifikation for udarbejdelse af dyremodeller for kronisk prostatitis [J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(19): 10-14.
[21]–[31] Svarer til den citerede litteratur om epidemiologi, terapi og molekylære mål (EGFR, AKT1, MMP9) som i kildelisten.