Anti-Skin-Aging Effekt af en behandling med et kosmetisk produkt og et kosttilskud baseret på et nyt hyaluronan: et randomiseret klinisk studie i sunde kvinder, del 1

Abstrakt: Hyaluronsyre (HA) har længe været brugt for sine anti-age egenskaber, som en ingrediens i både topiske applikationer og kosttilskud. I denne undersøgelse blev et nyt natriumhyaluronat, baseret på den innovative fuldspektrumteknologi, administreret som en ingrediens i et kosmetisk produkt og som hovedbestanddelen af ​​et kosttilskud for at evaluere dets effektivitet til at modvirke hudaldringstegn. Femoghalvfjerds kvindelige forsøgspersoner blev tilfældigt tildelt følgende behandlinger i 4 uger: et aktivt kosttilskud og et placebo kosmetisk produkt, et aktivt kosmetisk produkt og et placebo kosttilskud og en kombination af de to produkter indeholdende den aktive ingrediens, dvs. , en "In&Out" behandling. Forsøgspersonerne brugte placebo-kosmetikken i yderligere 14 dage. Forbedring af alle resultatmålene (hudfugtning, elasticitet, fasthed og profilometri) blev opnået ved alle behandlinger (p < 0.05); den kombinerede behandling resulterede imidlertid i en yderligere forbedring af hudaldringstegnene vedrørende de to enkelte aktive behandlinger (p < 0,001), og en sådan effekt varede også efter opfølgningsperioden. Som konklusion bekræftede sådanne resultater, at den samtidige administration af hyaluronaner ad disse to forskellige veje repræsenterer mere end en interessant tilgang til at modvirke hudaldringstegn.

Glycoside af cistanche kan også øge aktiviteten af ​​SOD i hjerte- og levervæv og signifikant reducere indholdet af lipofuscin og MDA i hvert væv, hvilket effektivt fjerner forskellige reaktive iltradikaler (OH-, H₂O₂ osv.) og beskytter mod DNA-skader forårsaget af OH-radikaler. Cistanche phenylethanoid glycosider har en stærk opfangningsevne af frie radikaler, en højere reducerende evne end C-vitamin, forbedrer aktiviteten af ​​SOD i spermsuspension, reducerer indholdet af MDA og har en vis beskyttende effekt på spermmembranfunktionen. Cistanche-polysaccharider kan øge aktiviteten af ​​SOD og GSH-Px i erytrocytter og lungevæv fra eksperimentelt senescent mus forårsaget af D-galactose, samt reducere indholdet af MDA og kollagen i lunge og plasma, og øge indholdet af elastin, har en god rensende effekt på DPPH, forlænge hypoksitiden hos senescent mus, forbedre aktiviteten af ​​SOD i serum og forsinke den fysiologiske degeneration af lunge hos eksperimentelt senescerende mus Med cellulær morfologisk degeneration har forsøg vist, at Cistanche har den gode antioxidantevne og har potentialet til at være et lægemiddel til at forebygge og behandle hudaldringssygdomme. Samtidig har echinacosid i Cistanche en betydelig evne til at opfange DPPH-frie radikaler og har evnen til at opfange reaktive oxygenarter og forhindre frie radikal-induceret kollagen-nedbrydning, og har også en god reparationseffekt på anionskader af thymin frie radikaler.

Klik på Cistanche Tubulosa for oxidation

【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Introduktion

Huden, det største organ i den menneskelige krop, gennemgår ligesom alle andre organer fysiologisk aldring, en uundgåelig proces på grund af iboende årsager såsom kronologiske, hormonelle og genetiske faktorer samt ydre faktorer, hovedsageligt ultraviolet bestråling (UVR) og udsættelse for forurening, da huden repræsenterer hovedbarrieren for det ydre miljø [1,2]. Desuden bidrager kost og fysisk aktivitet til hudens aldring sammen med angst, stress og rygevaner [2]. Da der er blevet foreslået adskillige former for hudældning med hensyn til deres cellulære og molekylære mekanisme(r) [3], anerkendes reaktive oxygenarter (ROS) eller frie radikaler fra UV-stråler som de vigtigste bidragydere til hudens aldring (fotoaldring) [ 1]. Hudens ældningstegn, såsom tørhed, ruhed, forekomsten af ​​rynker og pigmenterede pletter og nedsat barrierefunktion, er de vigtigste histologiske ændringer som følge af hudens strukturelle og funktionelle ændringer [4-6].

Hudens hovedkomponenter er kollagen og elastin, som danner og vedligeholder dens 3D-struktur, og glycosaminoglycaner (GAG), blandt hvilke den mest relevante er hyaluronsyre (HA), en hovedkomponent i den ekstracellulære matrix (ECM), som pga. på grund af dets høje hydrofile egenskaber, bevarer fugtigheden og fastheden af ​​ECM [7,8]. Kollagen- og elastinindholdet falder med alderen, og huden mister gradvist sin mekaniske spænding [4]. Hudens HA-indhold falder også med aldring: HA-mængden i huden på en 75-årig person er mindre end en fjerdedel af mængden i huden på en 19-årig forsøgsperson [8-10]. I senil hud er HA stadig til stede i dermis, mens det helt forsvinder i epidermis [8,10] og også bliver mere vævsassocieret, en tilstand der kan nedsætte dens hygroskopiske evne med følge af tab af hudfugtighed [ 8,11].

HA, også kaldet hyaluronan, er et lineært, fleksibelt, lang-polymer-kædet naturligt polysaccharid, sammensat af gentagne disaccharidsekvenser af D-glucuronsyre og N-acetylD-glucosamin forbundet gennem alternerende -1,4 og {{7 }},3 glykosidbindinger [12].

Det syntetiseres hovedsageligt af mesenkymale celler [13,14] og gennemgår en kontinuerlig nedbrydningsproces medieret af hyaluronidaser eller oxidativ beskadigelse [12,15], som begge reducerer den oprindelige polymerstørrelse. Det er blevet foreslået, at balancen mellem disse syntese/nedbrydningsprocesser af HA i den menneskelige krop kunne have en relevant regulerende rolle, da outputtet af processen bestemmer ikke kun mængden af ​​HA, men også dens størrelse [16,17], hvilket indikerer at polymerstørrelsen og omstændighederne ved dens syntese eller nedbrydning bestemmer dens biologiske virkninger [16,17].

HA har en potentielt vigtig rolle i anti-aging hudbehandlinger på grund af dens evne til at genoprette fugt i de kutane lag og til at fremme endogen kollagensyntese gennem dens fysisk-kemiske egenskaber, dermale fibroblaster-stimulering og antioxidanteffekter samt gennem HA's signalegenskaber. fragmenter [16,18].

HA er blevet brugt i kosmetiske formuleringer i lang tid, siden det er rapporteret at trænge aktivt ind i corneumlaget [19,20], forbedre hydrering, glathed og elasticitet og forsinke dannelsen af ​​rynker og dybe linjer [21]; HA leveres også i injicerbare formler [22], og begge tilgange opretholder udefra hudindholdet af HA, som har en kort halveringstid på omkring 1-2 dage, i huden [16]. Ydermere har adskillige beviser i løbet af de sidste år indikeret, at administration af HA også ad oral vej kan opnå relevante resultater for at modvirke hudens aldring og dermed forbedre dets diffusion i nutrikosmetikapplikationer [8,9,16,23,24]. I betragtning af, at HA-tilskud kan forbedre fysiologisk HA-mangel, kan kombinationen af ​​kutan og oral HA-administration i en komplementær og samtidig "In&Out"-behandling i første omgang repræsentere en innovativ og effektiv tilgang til proaktivt at forebygge alle kliniske tegn forbundet med ældning af huden, hvilket fremmer en hudforyngende effekt, fugtgivende og fotobeskyttelse [21]; endvidere, ved at modulere rækkevidden af ​​polymerstørrelsen af ​​HA anvendt i behandlingen, kunne yderligere information om de biologiske virkninger af hyaluronaner opnås [21,25-27].

Denne nuværende kliniske undersøgelse havde til formål at evaluere hudens anti-aldringseffekt af en kombineret behandling bestående af et kosmetisk produkt indeholdende PrincipHYAL® Difference og et kosttilskud indeholdende ExceptionHYAL® Star. Begge ingredienser indeholder hyaluronaner baseret på Full Spectrum Hyaluronan (FS-HA), produceret gennem en præcis modulering af forskellige trin i fermenteringsprocessen, hvilket resulterer i et produkt, der er karakteriseret ved HA-polymerer med et bredt og specifikt spektrum af størrelser [28]. Resultatet er en ingrediens, der ligner HA, der er fysiologisk til stede i huden, og som giver differentieringssignaler til celler og har en rheostat-lignende effekt. De to ingredienser blev administreret, alene og i kombination, til raske voksne kaukasiske kvindelige forsøgspersoner i et dobbeltblindt, randomiseret, klinisk studie i 4 uger med en 14-dages opfølgningsperiode, hvor der kun blev brugt et kosmetisk placeboprodukt.

Instrumentelle parametre relateret til hudens aldring blev evalueret hver anden uge. Et spørgeskema blev administreret i slutningen af ​​behandlingsperioden og efter opfølgningsperioden for at evaluere produkternes tolerabilitet og den opfattede effekt.

2. Materialer og metoder

2.1. Studiefag 

75 raske voksne kvindelige forsøgspersoner (gennemsnitsalder 55,8 ± 7,3) blev indskrevet af en hudlæge i henhold til følgende hovedudelukkelseskriterier: ingen intensiv eksponering for UV-stråler i undersøgelsesperioden, ingen forlænget eksponering for UV-stråler i de 4 uger før undersøgelse, ikke bruger produkter (kosmetik eller kosttilskud) med aktivitet, der kan sammenlignes med undersøgelsesprodukternes, ikke gravid/ammer og anvender et passende præventionssystem, ikke under en lokal farmakologisk behandling i det hudområde, der overvåges under testen eller under behandling med kosttilskud, der kan forstyrre testprodukternes funktionalitet.

2.2. Undersøgelsesprodukter

Følgende produkter blev testet: et aktivt kosttilskud (AFS), bestående af kapsler indeholdende 200 mg ExceptionHYAL® Star, L-ascorbinsyre, gelatine, maltodextriner, magnesiumsalte af fedtsyrer, siliciumdioxid og Titandioxid; et Placebo Food Supplement (PFS), bestående af kapsler, der kun indeholder hjælpestoffer og farvestoffer. AFS- og PFS-kapsler blev leveret af Roelmi HPC SRL og viste samme aspekt, størrelse, farve og lugt; et aktivt kosmetisk produkt (ACP) indeholdende 0,5 % (vægt/vægt) PrincipHYAL®-forskel og med følgende kvalitative sammensætning som INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredient): Aqua, Helianthus Annus frøolie, Coco Caprylate/Caprate, Polyglyceryl{{4} } Methylglukosedistearat, Cetearylalkohol, Glycerylstearat, Natriumhyaluronat, Caprylylglycol, Ethylhexylglycerin, O-Cymen-5-ol, Dinatrium EDTA, Parfum; et placebo kosmetisk produkt (PCP) med samme sammensætning som ACP, men uden natriumhyaluronat. ACP og PCP blev leveret af Roelmi HPC SRL og viste de samme fysisk-kemiske egenskaber; begge produkter blev anbragt i 50 ml anonyme PE-glas.

2.3. Studere design

Dette enkeltcenter, dobbeltblindede, randomiserede, kliniske studie blev udført på Complife Italia SRL-faciliteterne i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen (1964) og ændringer. Tilmeldte forsøgspersoner blev tilfældigt tildelt 3 grupper på hver 25 forsøgspersoner som følger: gruppe G1 brugte PCP plus AFS; Gruppe G2 brugte ACP plus PFS; Gruppe G3 brugte den komplette aktive behandling, dvs. ACP plus AFS. Forsøgspersonerne blev bedt om i 28 dage at påføre en nøddeskal af det kosmetiske produkt (PCP eller ACP) om morgenen på et rent ansigt, massere indtil fuldstændig absorption og at sluge en kapsel med kosttilskud (PFS eller AFS) med et glas vand mellem måltiderne. Forsøgspersonerne fra alle grupper blev derefter bedt om at påføre en kosmetisk creme (ukendt for forsøgspersonerne, men faktisk PCP) i yderligere 14 dage (opfølgning). Kliniske besøg var planlagt ved baseline (T0), efter 14 (T14) og 28 (T28) dages brug af begge produkter og 42 dage (T42) efter den yderligere periode med PCP-brug. Under besøgene blev undersøgelsesberettigelsen vurderet, og instrumentelle målinger blev udført; forsøgspersonerne blev også bedt om at udfylde et selvevalueringsspørgeskema. Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra alle deltagere. Undersøgelsesprotokollen og Informed Consent Form blev godkendt den 4. september 2019 af "Independent Ethical Committee for Non-Farmacological Clinical Studies" Genova, Italien (Ref: 2019/09). Det kliniske studie var præregistreret (ISRCTN-39211).

2.4. Prøvestørrelse

Prøvestørrelsen blev beregnet med et tosidet 5 procents signifikansniveau og en potens på 80 procent under hensyntagen til en 20 procent variation af de primære endepunkter på grund af både interindividuel menneskelig variabilitet og fejl i måleteknikkerne. Prøvestørrelsen blev beregnet ved hjælp af PASS 11 statistisk software (version 11.0.8 til Windows), der kørte på Windows Server 2008 R2 Standard SP1 64-bit-udgave (Microsoft, Redmond, Washington, USA). En stikprøvestørrelse på 20 forsøgspersoner pr. gruppe var nødvendig, givet en forventet frafaldsrate på 20 procent.

2.5. Blænding og randomisering

Krukkerne med de kosmetiske produkter og tuberne med kosttilskud var identiske bortset fra deres batchnumre. En tekniker, der ikke var involveret i undersøgelsen, samlede kombinationen af ​​testprodukterne i henhold til deres batchnumre, og placerede dem i kasser identificeret med numeriske koder. Tildeling af behandlingen til forsøgspersonerne blev udført ved hjælp af en randomiseringsliste genereret ved hjælp af en passende statistisk algoritme ("Wei's urn"), et urnedesign til sekventielle forsøg, der sammenligner m Større end eller lig med 2 behandlinger med lige store tildelinger. Undersøgelsen fulgte etablerede procedurer for at opretholde adskillelse mellem efterforskeren og dens samarbejdspartnere og det personale, der leverede interventionen. Forsøgspersoner, efterforskere og samarbejdspartnere blev holdt maskeret til produkttildeling. Undersøgeren og de samarbejdspartnere, der opnåede resultatmålinger, blev ikke informeret om den (maskerede) produktgruppetildeling. Allokeringssekvensen blev holdt tom indtil dataanalysen.

2.6. Resultatmål

Kliniske og instrumentelle evalueringer blev udført under kontrollerede forhold (temperatur 20 ± 2 ◦C og relativ luftfugtighed 50 ± 10 procent), ved at lade forsøgspersonerne akklimatisere sig i 15-20 minutter før hvert besøg. Hudens fugtighed blev målt i ansigtet i henhold til Corneometer®-metoden under anvendelse af Corneometer® CM 825 (Courage plus Khazaka, electronic GmbH). Fordelingen af ​​hydrering på hudoverfladen blev opnået af MoistureMap MM 100, en enhed med en kapacitansbaseret sensor, der giver grafisk information om hydreringsfordelingen nær overfladen og hudens mikrotopografi. Fordelingen af ​​hydrering på hudoverfladen udtrykkes i form af det grå indeks, hvor tilstedeværelsen af ​​ledende materiale (f.eks. vand) er afbildet på billedet som mørkere pixels, mens ikke-ledende materiale resulterer i pixels på lysere side af en gråskala; derfor betyder en højere værdi af Grey Index en højere fugtfordeling.

Hudens elasticitet og hudens fasthed blev evalueret med Cutometer® MPA 580 (Courage plus Khazaka Electronic, Köln, Tyskland). Hudens elasticitet blev beregnet som R2-forholdet (Ua/Uf), det vil sige forholdet mellem den endelige deformation (Uf) og den samlede deformationsgenvinding af huden (Ua) og angiver hudens evne til at vende tilbage til sin oprindelige tilstand efter en stressende hændelse: Jo tættere værdien er på 1, jo mere elastisk er huden. Parameter R0=Uf, som indebærer hudfasthed, blev ligeledes evalueret: en reduktion af en sådan parameter indikerer en forbedring af hudens evne til at modstå deformationen påført af sonden under sugefasen. Hudprofilometri blev vurderet ved hjælp af Primos 3D (Canfield Scientific Europe, BV, Utrecht, Holland), en ikke-kontakt in vivo hudmålingsanordning baseret på strukturerede lysprojektioner, der er i stand til kvantitativt at evaluere hudoverfladeegenskaber (dvs. rynkedybde, rynkevolumen) , ru hud osv.); i denne undersøgelse blev kun rynkedybden (Rv) og hudens glathed (Ra) evalueret.

2.7. Selvevalueringsspørgeskema

Alle deltagere modtog en kopi af et 16-spørgeskema til selvevaluering af spørgsmål relateret til produkternes effektivitet, specifikke egenskaber (dvs. produkternes overholdelse og behagelighed) og tolerabilitet; hudlægen gav udtømmende information om spørgsmålene og 4-karakterevalueringsskalaen (enig, ret enig, snarere uenig, uenig) til deltagerne. Spørgeskemaet blev udfyldt af deltagerne under det 28. besøg og blev indsamlet af hudlægen. En ny kopi blev udleveret til alle deltagere, som udfyldte den efter opfølgningsperioden. Procentdelen af ​​positive svar (enig og ret enig) for hver behandling blev beregnet, og det blev antaget, at den oplevede effekt blev valideret, hvis mindst 80 procent af panelet gav positiv feedback.

2.8. Statistikker

Instrumentelle data blev indsendt til RM-ANOVA efterfulgt af Tukey-Kramer-testen (intergruppeanalyse) og til Students t-test for uparrede data (intergruppeanalyse). Variationer blev betragtet som statistisk signifikante, når p-værdien var<0.05. The statistical software used for statistical analysis was NCSS 10—PROFESSIONAL, vers. 10.0.7, released on 22 July 2015, running on Windows Server 2008 R2 Standard.

3. Resultater

3.1. Tolerabilitet

Alle deltagere gennemførte undersøgelsen, og tolerabiliteten af ​​de kosmetiske præparater og kosttilskuddene var meget god ifølge deres selvevaluering. Ingen alvorlige bivirkninger og ingen bivirkninger blev registreret gennem hele undersøgelsen.

3.2. Hudfugtning

De basale niveauer af hudfugtning viste en ikke-statistisk forskel mellem de tre grupper (figur 1a). Kronometriresultaterne (vilkårlige enheder) indikerede en progressiv stigning i den gennemsnitlige hudfugtning gennem hele produktbehandlingsperioden, hvilket resulterede signifikant ved T14 for G2 (p < 0.001) og ved T28 for alle tre grupper (p < 0.001) vedrørende T{{20}}. Fugtighedsniveauerne faldt, når de blev målt efter opfølgningsperioden, dvs. efter 14 dages brug af kun PCP; sådanne niveauer resulterede imidlertid statistisk højere sammenlignet med dem ved T0 for G1 (p < 0,05) og G2 og G3 (p < 0,001). En signifikant forskel (p < 0,05) blev observeret for G3 vs. G1 ved T28 og T42. Følgelig inducerede alle behandlinger en stigning i form af gennemsnitlig procentvis variation af hudfugtning vedrørende T0 (figur 1b), nåede en top ved T28 og derefter faldende ved T42. G2- og G3-behandlingerne, der begge indeholdt ACP, resulterede i en højere stigning vedrørende G1; G3-behandlingen viste den maksimale stigning i den gennemsnitlige procentvise variation (plus 17,4 procent ved T28).

3.3. Hudhydreringsfordeling

Resultaterne af det grå indeks viste et lignende mønster som resultaterne for fugtighedsbehandling af huden. Ved T{{0}} (figur 2a) viste det grå indeks ingen signifikante forskelle mellem grupperne, derefter blev en progressiv stigning af det gennemsnitlige grå indeks registreret i hele behandlingsperioden for alle grupper; stigningen var allerede signifikant ved T14 for G1 (p < 0.01) såvel som for G2 og G3 (p < 0.001). Det grå indeks faldt efter opfølgningsperioden; dets niveauer ved T42 var imidlertid statistisk højere for alle behandlinger (p < 0,001) i forhold til dem ved T0, uden signifikante forskelle mellem grupperne. Alle behandlinger inducerede en stigning i form af gennemsnitlig procentvis variation af det grå indeks vedrørende T0, og nåede en top ved T28 (figur 2b), med den højere stigning opnået ved G3-behandlingen (plus 12,9 procent ved T28). Derefter faldt det grå indeks ved T42, men til niveauer, der stadig var højere end ved T14. Fugtighedskortbilleder af et G3-emne gennem hele undersøgelsesperioden er vist i figur 3.

3.4. Hudens elasticitet

Ingen signifikante intergruppeforskelle for R2-parameteren blev beregnet ved T0 (figur 4a); derefter blev en progressiv stigning registreret for alle tre grupper gennem hele behandlingsperioden, hvilket var statistisk signifikant allerede ved T14 for G2 og G3 (p < 0.05 og p < 0 .001 henholdsvis) og ved T28 for alle grupper (p < 0.001). R2-værdien viste et lille fald efter opfølgningen vedrørende den tidligere værdi ved T28, men forblev på signifikant højere niveauer (p < 0.001) vedrørende dem ved T0 for alle behandlinger. Signifikante intergruppeforskelle blev beregnet på alle tidspunkter for G3 vs. G1 (p < 0,05, p < 0,1, p < 0,001, henholdsvis ved T14, T28 og T42) og ved T28 for G2 vs. G1 (p < 0,01). Figur 4b viser, at alle behandlinger inducerede en stigning i form af gennemsnitlig procentvis variation af hudens elasticitet vedrørende T0; G2- og G3-behandlingerne, der begge indeholdt ACP, resulterede imidlertid i en højere stigning vedrørende G1. Den højere stigning blev opnået ved G3-behandlingen (plus 11,1 procent) ved T28; derefter faldt den procentvise variation ved T42 for alle behandlinger, men til niveauer, der stadig var højere sammenlignet med dem ved T14.

【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】