Afdækning af nye indikationer og potentielle interventionsmål for podocytsygdomme

Denne undersøgelse er opdelt i to dele, klinisk forskning og dyreforskning. Den kliniske forskningsdel er et multicenterstudie, der analyserede den positive rate af anti-Nephrin-antistoffer hos patienter med voksne glomerulære sygdomme (herunder MCD, FSGS, MN, immunoglobulin A nefropati [IgAN], neutrofile cytoplasmatiske antistoffer [ANCA]-relateret glomerulonephritis og lupus nefritis [LN]), børn med idiopatisk nefrotisk syndrom (INS) og kontroller. Det er værd at bemærke, at data for voksne og pædiatriske patienter hovedsageligt kommer fra Europa (Tyskland, Italien, Frankrig).

Klik til Cistanche for nyresygdom

Dyreforskningsdelen er at etablere en relevant musemodel, specifikt han-vildtype BALB/c-mus, der modtog subkutan immunisering med rekombinant muse-nephrin og komplet Freunds adjuvans. Kontrolgruppemusene modtog komplet Freunds adjuvans blandet med phosphatpufret saltvand.

Selvfølgelig brugte denne undersøgelse innovativt immunpræcipitation til at påvise anti-Nephrin. Tidligere undersøgelsesmetoder, såsom Blot, ELISA osv., kan ikke nøjagtigt kvantificere eller kvantificere anti-Nephrin-antistoffer, men immunpræcipitationsmetoden er anderledes. Specifikt blev anti-nephrin-autoantistofstatus bestemt ved immunpræcipitation under anvendelse af rekombinant humant nephrin-ydre domæne (aminosyrer A36 til L1052). Proteiner blev inkuberet med humant serum eller plasma natten over, og derefter blev protein G tilsat. Immunpræcipitater blev opsamlet, underkastet elektroforese, blottet og analyseret for nephrin under anvendelse af et anti-nephrin-antistof (AF4269; R&D Systems). Prøver blev analyseret på en blind måde, og sygdomsdiagnose og kliniske data blev først afsløret, efter at anti-nephrin-autoantistofstatus blev bestemt. Til en kvantitativ udlæsning af anti-nephrin-autoantistoffer blev der etableret et hybridassay, der inkluderede immunpræcipitation og immunpræcipiteret nephrin-kvantificering. Et sådant assay muliggør den klareste og mest utvetydige påvisning af anti-nephrin-antistoffer.

1 Oplysninger om basislinje

I alt 656 deltagere blev inkluderet i denne undersøgelse, herunder 357 voksne med glomerulær sygdom, 182 børn med glomerulær sygdom og 117 kontroller (67 voksne og 50 børn). De specifikke sygdomme hos patienter med glomerulære sygdomme omfattede MCD, FSGS, MN, immunoglobulin A nefropati (IgAN), anti-neutrofil cytoplasmatisk antistof-associeret nefritis (ANCA-GN), lupus nefritis (LN) og idiopatisk nefrotisk syndrom.

2 Fordeling af anti-Nephrin-antistoffer hos voksne patienter

Blandt voksne patienter blev 46 (44%) af 105 MCD-patienter og 7 (9%) af 74 primære FSGS-patienter fundet positive for anti-Nephrin-autoantistoffer, mens næsten ingen patienter (n Mindre end eller lig med 1) med andre glomerulære sygdomme var positive for anti-Nephrin-autoantistoffer. Hvis MCD-patienter ikke modtog nogen immunsuppressiv behandling, var den positive rate af anti-Nephrin-autoantistoffer så høj som 69% (24/35), hvilket var højere end for MCD-patienter, der modtog immunsuppressiv behandling (36/59).

3 børnepatienter

Hos børn med idiopatisk nefrotisk syndrom (INS) var den samlede andel af positive anti-Nephrin autoantistoffer 52 %. I den undergruppe, der ikke modtog immunsuppressiv behandling, var den samlede andel af positive anti-Nephrin-autoantistoffer så høj som 90 %, mens anti-Nephrin-autoantistoffer hos raske børn var næsten negative, med kun én patient, der viste positive resultater. Det er værd at bemærke, at da børn sjældent gennemgår nyrebiopsi, har disse data en stærk klinisk vejledningsbetydning.

4 Sammenhæng mellem positiv undersøgelse og kliniske karakteristika

Uanset om det er hos voksne eller børn, har patienter med positive anti-Nephrin-antistoffer et højere urinprotein-kreatinin-forhold (UPCR) eller urinalbumin-kreatinin-forhold (UACR), mens patienter med negative anti-Nephrin-antistoffer normalt har en UACR eller UPCR på<0.3.

Hvis niveauet af anti-Nephrin-antistoffer ændrer sig, efter at patienten har modtaget effektiv immunsuppressiv terapi, vil patientens UACR-niveau også ændre sig. For eksempel viste en case-rapport af en patient, at patientens anti-nephrin-antistof- og proteinuri-niveauer vendte tilbage efter at have modtaget glukokortikoider og cyclosporin A-behandling, mens anti-nephrin-antistof- og UACR-niveauerne efter at have modtaget rituximab fortsatte med at falde og var tæt på { {3}}. Dette er naturligvis ikke et enkeltstående tilfælde, og mange patienter har lignende resultater. Dataanalyse viste, at der var en stærk sammenhæng mellem alle målte anti-Nephrin-autoantistofniveauer og urinalbumin til kreatinin-forhold (r=0.64).

Sammenfatning af kliniske studier

Generelt er anti-Nephrin-autoantistoffer i vid udstrækning til stede hos MCD-voksne og ISN-børn og er effektive biomarkører til at forudsige proteinuri hos patienter, og titeren af ​​anti-Nephrin-autoantistoffer kan vejlede klinisk medicinering. Derfor er anti-Nephrin-autoantistoffer en ny klassificeringsbiomarkør for podocytsygdom og en ny standard for patologisk klassificering, som kan bruges til overvågning af sygdomsaktivitet, forudsigelse af prognose og behandlingsvejledning.

1 Nyrebiopsiresultater og kliniske karakteristika

Han-vildtype BALB/c-mus modtog subkutan immunisering med rekombinant muse-nephrin og komplet Freunds adjuvans (interventionsgruppe). Kontrolgruppemusene modtog komplet Freunds adjuvans blandet med phosphatpufret saltvand. Interventionsgruppen mus udviklede hurtigt nefrotisk syndrom efter 3 uger.

Nyrebiopsier af de to grupper af mus viste, at selvom der ikke var signifikante forskelle mellem de to grupper i PAS-farvningsundersøgelse, viste elektronmikroskopi udbredt udslettelse af podocytfodprocesser og ingen elektrontætte aflejringer i interventionsgruppens mus, mens der ikke var nogen lignende fænomen i kontrolgruppen. Specifikt viste immunogold-mærkning af muse-IgG i interventionsgruppemus, at det var specifikt lokaliseret til spaltemembranen mellem områderne for udslettelse af podocytfodprocesser.

Derudover viste interventionsgruppen mus en omfordeling af nephrin fra membranen til cytoplasmaet med muse-IgG-positivitet i et fint punktformet mønster, delvist kolokaliseret med nephrin, og ingen immuncelleinfiltration, reduceret podocyttal eller komplementaflejring.

2 Molekylær mekanisme

For at afklare, om anti-nephrin-autoantistoffer har en direkte effekt på nephrin-signalering og downstream-veje, udførte forskerne proteomiske og phosphoproteomiske analyser på glomeruli isoleret fra kontrolmus. Resultaterne viste øget phosphorylering af Nphs1, en tyrosinrest svarende til Y1176 af human nephrin.

Dette phosphoryleringssted er kendt for at være involveret i nephrin-signalering, hvilket fører til actinsamling, cytoskeletreorganisering og nephrinendocytose. Proteomics viste, at niveauerne af adapterproteiner som ShcA (Shc1) og clathrin (Cltc) involveret i endocytisk nephrin-transport steg i glomeruli fra interventionsgruppens mus, mens det kernespalte-diafragma-relaterede protein blev signifikant nedreguleret, hvilket er en vigtig årsag til podocytlæsioner. Det vil sige, at anti-Nephrin-autoantistoffer inducerede nefrotisk syndrom, Nephrin-phosphorylering og celleomlejring på det proteomiske niveau, hvilket fører til ultrastrukturelle ændringer, der er typiske for MCD.

Hvordan behandler Cistanche nyresygdom?

Cistancheer en traditionel kinesisk urtemedicin brugt i århundreder til at behandle forskellige helbredstilstande, herundernyresygdom. Det er afledt af de tørrede stængler afCistanchedeserticola, en plante hjemmehørende i Kinas og Mongoliets ørkener. De vigtigste aktive komponenter i cistanche erphenylethanoidglykosider, echinacoside, ogakteosid, som har vist sig at have gavnlige virkninger pånyresundhed.

Nyresygdom, også kendt som nyresygdom, refererer til en tilstand, hvor nyrerne ikke fungerer korrekt. Dette kan resultere i en ophobning af affaldsstoffer og toksiner i kroppen, hvilket fører til forskellige symptomer og komplikationer. Cistanche kan hjælpe med at behandle nyresygdom via flere mekanismer.

For det første har cistanche vist sig at have vanddrivende egenskaber, hvilket betyder, at det kan øge urinproduktionen og hjælpe med at fjerne affaldsstoffer fra kroppen. Dette kan hjælpe med at lindre byrden på nyrerne og forhindre ophobning af toksiner. Ved at fremme diurese kan cistanche også hjælpe med at reducere forhøjet blodtryk, en almindelig komplikation til nyresygdom.

Desuden har cistanche vist sig at have antioxidantvirkninger. Oxidativ stress, forårsaget af en ubalance mellem produktionen af ​​frie radikaler og kroppens antioxidantforsvar, spiller en nøglerolle i udviklingen af ​​nyresygdom. De hjælper med at neutralisere frie radikaler og reducere oxidativt stress og beskytter derved nyrerne mod skader. De phenylethanoidglycosider, der findes i cistanche, har været særligt effektive til at fjerne frie radikaler og hæmme lipidperoxidation.

Derudover har cistanche vist sig at have anti-inflammatoriske virkninger. Betændelse er en anden nøglefaktor i udviklingen og progressionen af ​​nyresygdom. Cistanches anti-inflammatoriske egenskaber hjælper med at reducere produktionen af ​​pro-inflammatoriske cytokiner og hæmmer aktiveringen af ​​obligatoriske veje for inflammation og lindrer dermed inflammation i nyrerne.

Endvidere har cistanche vist sig at have immunmodulerende virkninger. Ved nyresygdom kan immunsystemet være dysreguleret, hvilket fører til overdreven betændelse og vævsskade. Cistanche hjælper med at regulere immunresponset ved at modulere produktionen og aktiviteten af ​​immunceller, såsom T-celler og makrofager. Denne immunregulering hjælper med at reducere inflammation og forhindre yderligere skade på nyrerne.

Desuden har cistanche vist sig at forbedre nyrefunktionen ved at fremme regenereringen af ​​nyrerør med celler. Renale tubulære epitelceller spiller en afgørende rolle i filtreringen og reabsorptionen af ​​affaldsprodukter og elektrolytter. Ved nyresygdom kan disse celler blive beskadiget, hvilket fører til beskadiget nyrefunktion. Cistanches evne til at fremme regenereringen af ​​disse celler hjælper med at genoprette den korrekte nyrefunktion og forbedre den generelle nyresundhed.

Ud over disse direkte virkninger på nyrerne, har cistanche vist sig at have gavnlige virkninger på andre organer og systemer i kroppen. Denne holistiske tilgang til sundhed er særlig vigtig ved nyresygdom, da tilstanden ofte påvirker flere organer og systemer. che har vist sig at have en beskyttende virkning på leveren, hjertet og blodkarrene, som ofte er påvirket af nyresygdom. Ved at fremme disse organers sundhed hjælper cistanche med at forbedre den generelle nyrefunktion og forhindre yderligere komplikationer.

Som konklusion er cistanche en traditionel kinesisk urtemedicin, der har været brugt i århundreder til at behandle nyresygdom. Dens aktive komponenter har vanddrivende, antioxidante, anti-inflammatoriske, immunmodulerende og regenerative virkninger, som hjælper med at forbedre nyrefunktionen og beskytte nyrerne mod yderligere skade. , cistanche har gavnlige virkninger på andre organer og systemer, hvilket gør det til en holistisk tilgang til behandling af nyresygdom.