Forholdet mellem iskæmi-reperfusionsskade (IRI) og nyrefunktion

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

DEL Ⅰ: Metformin-prækonditionering og postkonditionering for at reducere lskemi-reperfusionsskade i en isoleret ex vivo-rotte- og svinenyre-normotermisk maskinperfusionsmodel

Tobias M.Huink, Leonie H.Venemal, Rene A.Posma, Nyke J.de Vries, Andrie C.Westerkampl, & et al.

HVAD ER DEN AKTUELLE VIDEN OM EMNET?

Skæmi-reperfusionsskade (IRI) påvirker resultaterne af nyretransplantation negativt, hvorimod metformin er blevet foreslået at svække IRI ud over dets glukosesænkende virkninger. Maskinperfusion giver en platform til at tilføje beskyttelsesmidler, såsom metformin, før eller under reperfusion for at reducere IRI. Tidligere data viste, at metformin-prækonditionering var i stand til at forbedre hepatobiliær funktion under normotermisk maskinperfusion og efterfølgende transplantation af rottelever.

cistanche urteplantetilnyrefunktioner

HVILKE SPØRGSMÅL RETTEDE DENNE UNDERSØGELSE?

I denne undersøgelse blev potentielle gavnlige virkninger af prækonditionering og postkonditionering med metformin på IRI evalueret i forskellige isolerede ex vivo normotermiske maskinperfusionsmodeller ved hjælp af rotte- og svinenyrer.

HVAD TILFØJER DENNE UNDERSØGELSE TIL VORES VIDEN?

Vi viser, at både metformin-prækonditionering og postkonditionering reducerede rotte- og svinenyreskader, men at forbedringerne var mindre. Det er stadig ukendt, om tilsætning af metformin under maskinperfusion resulterer i forbedret organkvalitet efter transplantation. Desuden viser vi, at brugen af ​​in vivo toksiske koncentrationer af metformin under maskinperfusion ikke var forbundet med cellulær skade, hvilket indikerer, at det ser ud til at være sikkert at bruge disse koncentrationer under ex vivo perfusion af nyrer.

HVORDAN KAN DETTE ÆNDRE KLINISK FARMAKOLOGI ELLER TRANSLATIONEL VIDENSKAB?

Maskinperfusion er bredt implementeret og er en ideel platform til farmakologiske indgreb for at mindske eller forhindre IRI og til at teste terapeutika i isolerede ex vivo-organer. Da virkningerne af metformin var mindre, er det stadig uklart, om det skal bruges som et genbeskyttende middel før transplantation. Vores resultater taler ikke nødvendigvis for brugen af ​​metformin som en intervention forud for nyretransplantation, men fremtidig forskning er påkrævet for at undersøge, om metformin i kombination med andre potentielle behandlinger kan være gavnlige.

hvor kan jeg købecistanche pulver

RESULTATER

Perfusionsparametre

IVR forblev konstant under NMP i rottemodellen uden signifikante forskelle mellem behandlingsgrupperne (figur S1a). Der blev ikke fundet signifikante forskelle i svinenyregrupperne med hensyn til IVR (figur S1b). Nyrefunktionsparametre

Ingen signifikante forskelle i total kreatininclearance blev observeret mellem alle behandlingsgrupper i rotteundersøgelsen (figur 2a). I svineundersøgelsen var den totale kreatininclearance ikke forskellig mellem metforminbehandlede nyrer og kontroller (figur 2b), selvom der var en tendens til lavere kreatininclearance i den metforminbehandlede gruppe (P=0.07).

Metformin-forbehandlede rotter, hvoraf nyrerne blev perfunderet med 30 mg/L metformin, havde en signifikant lavere urinproduktion sammenlignet med rotter forbehandlet med metformin uden efterfølgende perfusion med metformin (P= 0.02), og rotter forbehandlet med oralt saltvand, hvis nyrerne blev postkonditioneret med 30 mg/L metformin (P=0.04). Postkonditionering med 300 mg/L metformin gav ingen signifikant forskel i urinproduktion, uanset prækonditioneringsbetingelser. Sammenlignet med kontroller var total urinproduktion i svinenyrer signifikant lavere i met-forminbehandlede nyrer (P=0.004; figur 2c,d).

I rotteundersøgelsen var den totale proteinudskillelse lavere i metformin-prækonditionerede nyrer uden efterfølgende perfusion med metformin end kontrolgruppen (P=0.001). Ingen forskelle i total proteinudskillelse blev observeret mellem alle andre forsøgsgrupper (figur 2e).

Under NMP af svinenyrer blev der ikke fundet signifikante forskelle i urinproteinudskillelse mellem metformin- og kontrolgruppen (figur 2f).

cistanche tubulosa

Skademarkører

Metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer ikke var perfunderet med metformin, havde lavere LDH-frigivelse end kontroller (P= 0.005). Metformin prækonditionerede rotter, hvis nyrer efterfølgende blev perfunderet med 30 mg/L metformin, havde lavere LDH-frigivelse end kontroller (P=0.01) og havde en lavere LDH-frigivelse end saltvands-prækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 30 mg/L metformin (P=0.04). Perfusion med 300 mg/L metformin resulterede ikke i nedsat LDH-frigivelse (figur 3a). Total LDH-frigivelse under NMP var ikke forskellig mellem metforminbehandlede svinenyrer og kontroller (figur 3b).

Både prækonditionering og postkonditionering med metformin var ikke forbundet med en signifikant forskel i den samlede mængde af frigivet ASAT i rottestudiet (figur 3c). Ligeledes blev der ikke fundet forskelle mellem metformin-behandlede nyrer og kontroller i ASAT-niveauer i svinenyrer (figur 3d).

Morfologiske tegn på iskæmisk reperfusionsskade Sammenlignet med kontrolgruppen var tubulær nekrose signifikant reduceret i nyrer, der blev perfunderet med 300 mg/L metformin, uafhængigt af saltvand (P=0.02) eller metformin (P=0). 02) forkonditionering. Metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 300 mg/L metformin, havde mindre tubulær nekrose sammenlignet med metformin-prækonditionerede rotter uden efterfølgende metformin-perfusion (P=0.01) og metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 30 mg/l metformin (P=0.02; figur 3e).

Vakuolering af proksimale tubulære celler blev signifikant reduceret hos saltvandsprækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 300 mg/L metformin sammenlignet med saltvandsprækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 30 mg/L metformin (P=0.05). Vakuolering var også signifikant lavere i metformin prækonditionerede nyrer perfunderet med 300 mg/L metformin sammenlignet med metformin prækonditionerede nyrer uden metformin perfusion (P=0.02) (figur 3g). Ingen statistiske forskelle med hensyn til ødemdannelse blev set i rotteundersøgelsen (figur 3f). Ingen forskelle i morfologiske tegn på IRI blev observeret ved slutningen af ​​NMP i svinenyrer (figur 3h).

Figur 3Skademarkører i perfusionsvæske og morfologiske skader i væv efter normoterm maskinperfusion. Samlede skadesmarkører blev beregnet som arealet under kurven. Samlet mængde af lactatdehydrogenase (LDH) (a, b) og aspartataminotransferase (ASAT) (c, d) i perfusatet. Væv blev vurderet på proksimal tubulær celle-nekrose (spænder fra mild til svær: 1-5), ødem (spænder fra mild til svær: 1-4) og proksimal tubulær cellevakuolation (spænder fra mild til svær: 1-4) i henholdsvis rottestudiet (e–g). Tegn på iskæmisk reperfusionsskade i svinenyrer blev bedømt (h). Data præsenteres som middelværdi ± standardfejl af middelværdien. Grupper indeholder 5-7 nyrer. *P < 0.05,="" **p="">< 0,01="" sammenlignet="" med="" alle="" andre="">

Genekspression

Relativ mRNA-ekspression af gener involveret i reguleringen af ​​den vaskulære tonus blev evalueret i både rotte- og svinenyrer. Sammenlignet med kontroller var ekspressionen af ​​EDN-1 signifikant reduceret i rottenyrer perfunderet med 300 mg/L metformin, uanset prækonditionering med saltvand (P=0.002) eller metformin (P{{4} }.005;Figur 4a). Sammenlignet med saltvandsforbehandlede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 30 mg/L metformin, var eNOS-ekspression signifikant reduceret i kontroller (P=0.04) og saltvandsforkonditionerede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 300 mg/L metformin (P=0.04) {11}}.01; figur 4b). Der blev ikke fundet forskelle med hensyn til EDN-1 eller eNOS-ekspression i svinenyreundersøgelsen (figur 4h). KLF-2-ekspression var ikke forskellig mellem grupperne i både rotte- og svinenyreundersøgelsen (figur 4c,h).

cistanche Kina urtpdf

Desuden blev gener involveret i endotelaktivering evalueret. vWF-ekspressionen var ikke forskellig mellem behandlingsgrupper i både rotte- og svinenyrer (figur 4d). Sammenlignet med kontroller var genekspression af VCAM-1 signifikant nedsat i rottenyrer perfunderet med 30 mg/L metformin, uanset prækonditionering med saltvand (P=0.002) eller metformin (P=0 .03). Saltvandsforbehandlede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 30 mg/L metformin, havde lavere VCAM-1-ekspression end metformin-forkonditionerede rotter, hvis nyrer også var perfunderet med 30 mg/L metformin (P=0.04). Saltvandsprækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 300 mg/L metformin, havde signifikant højere VCAM-1-ekspression end saltvandskonditionerede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 30 mg/L metformin (P=0.002). på den anden side havde metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 300 mg/L metformin, signifikant højere VCAM-1-ekspression end kontroller (P=0.03; figur 4e).

Sammenlignet med metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer var perfunderet med 300 mg/L metformin, var L-6-genekspressionen faldet i metformin-prækonditionerede rotter, hvis nyrer ikke var perfunderet med metformin (P=0.03) og metformin -prækonditionerede rotter, hvis nyrer blev perfunderet med 30 mg/L metformin (P=0.004; figur 4f).

HSP-70-ekspression i rottenyrer var ikke forskellig mellem behandlingsgrupper (figur 4g). Ekspression af vWF, VCAM-1 og IL-6 var ikke signifikant forskellig mellem eksperimentelle grupper i svinenyren undersøgelse (figur 4i). HSP-70 blev dog opreguleret i metforminbehandlede svinenyrer (P=0.03; figur 4l).

Figur 4Relativ mRNA-ekspression af gener, der er involveret i reguleringen af ​​vaskulær tonus, herunder vasokonstriktion (endotelin 1 (EDN-1)), vasodilatation (endotel nitrogenoxidsyntase (eNOS)) og laminar flow shear stress (Krüppel-lignende faktor 2) (KLF-2)) i både rotte (henholdsvis a–c) og svineundersøgelse (h). Gener involveret i aktiveringen af ​​endotelet, spiller en rolle i blodplader (von Willebrand faktor (vWF)) og leukocytadhæsion (vaskulær celleadhæsionsmolekyle 1 (VCAM-1)) og inflammatoriske processer (IL{{7} }) blev vurderet i rotte (henholdsvis d-f) og svinenyrer (i). Heat-shock protein 70 (HSP{{10}})-ekspression blev også evalueret i både rotte- og svinenyrer (henholdsvis g, i). Data præsenteres som middelværdi ± standardfejl af middelværdien. Grupper indeholder 5-7 nyrer. *P < 0,05,="" **p=""><>

KLIK HER FOR AT DEL Ⅱ & Ⅲ

Bemærk: Det traditionelle kinesiske lægemiddelurtecistanche(også kendt som "drageurten" og "ørkenginseng"), vokser kun i de tørre og varme ørkener. Som en af ​​de ni udødelige urter,Cistanche(cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) indhold med rige effektive ingredienser såsom echinacosid, acteosid, totale phenylethanoid glycosider, flavonoider, polysaccharider osv. disse effektive ingredienser fremstilletcistancheen dyrebar nærende urt og madmateriale til menneskers immunitet, indre organer og hjerneceller og neuroner osv. De moderne farmakologiske undersøgelser har bekræftet følgende virkninger af cistanche(fordelene ved cistanche): forbedre immunitet;forbedre seksuel funktion og nyrefunktionn; anti-træthed; anti aldring; forbedre hukommelsen; anti-Parkinsons sygdom; anti-Alzheimers sygdom; antioxidation; let-forstoppelse; anti-inflammatorisk; fremme knoglevækst, blegning af hud; beskytte leveren; etc.