Beskyttende virkninger af echinacoside på diabetisk nefropati

For flere oplysninger:ali.ma@wecistanche.com

Beskyttende virkninger af echinacosid fra cistanche på nyrefunktion, nyrevæv og mesangial celleskade hos rotter med diabetisk nefropati

He Qin, Liu Fan, Wang Hongli, Li Jianping, Duan Jun (Department of Cadre Medical Care, Caotang Ward, Sichuan Academy of Medical Sciences, Sichuan Provincial People's Hospital, Chengdu, Sichuan)

Nøgleord: Cistanche; echinacoside;Cistanche ekstrakt,diabetisk nefropati; nyre interstitiel fibrose; apoptose; rotte

Diabetikernefropati(DN) er en almindeligdiabetikermikrovaskulær komplikation, som ikke kun kan forårsage nyreskade, men også påvirke andre organer. Renal tubulointerstitiel fibrose er det vigtigste patologiske træk i klinisk [1]. Patogenesen afdiabetisk nefropatier kompliceret. Tidligere undersøgelser [2-3] mente, at sygdommen hovedsageligt var forårsaget af hyperglykæmi idiabetikerpatienter, hvilket forårsagede nyrehæmodynamiske ændringer og unormalt stofskifte. De kliniske manifestationer var proteinuri og nedsat glomerulær filtrationshastighed. Vente. På nuværende tidspunkt er patienter meddiabetisk nefropatimangler stadig effektive kliniske behandlingsmetoder og at finde nye effektive lægemidler er nøglen til behandlingen afdiabetisk nefropati.

Echinacoside(ECH) er et af uddragene afCistanchetubulosa, som har den effekt at nære nyren og styrke yang [4]. Det viser moderne farmakologisk forskning [5]echinacosidefracistanchehar antioxidations-, anti-apoptose-, anti-inflammatoriske og farmakologiske virkninger såsom at forbedre blodgennemstrømningen og mikrocirkulationen.Echinacosidefracistanchekan også regulere kroppens glukosemetabolisme og forbedre glukosetolerancen. I de senere år har undersøgelser [6] vist detechinacosidefracistanchekan hæmme nyrefibrose afdiabetisk nefropatirotter ved at hæmme den transformerende vækstfaktor (TGF-) signalvej og beskytte rottenyrevæv. Der er dog få rapporter i litteraturen om behandling afdiabetisk nefropatimedCistancheechinacosideog dens specifikke mekanisme til beskyttelsediabetisk nefropatihos rotter er stadig uklart. Derfor undersøgte denne undersøgelse yderligere virkningerne og mulige mekanismer afechinacosidefraCistancheom nyrefibrose og nyrevævscelleapoptose idiabetisk nefropatirotter og havde til formål at give et teoretisk grundlag for den kliniske anvendelse afechinacosidefraCistanche.

Echinacoside fra Cistanchebeskytterdiabetisk nefropati

Klik for at Cistanche tubulosa fordele og bivirkninger

1 Materiale og metoder

1.1 Dyr

60 SD-rotter, han-, SPF-grad, 8 uger gamle, kropsvægt 240-280 g, leveret af Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd., dyrelicensnummer: SCXK (Beijing) 2015-0001, dyr Kvalitetscertifikat nummer: 11400700106210, opvokset i dyrecentrets laboratorium på hospitalet, holder stuetemperaturen konstant på 25 grader, simulerer dagen og natten, ændrer lysforholdene en gang hver 12. time, og dyrene er frie til at spise og drikke.

1.2 Lægemidler og reagenser

Echinacoside, China Food, and Drug Control Research Institute, partinummer: 111670-201706; Losartan Potassium, Hangzhou Merck Pharmaceutical Co., Ltd., National Medicine Standard: H20030654; Streptozotocin, American Sigma Company, partinummer: 040103; Urinproteinindholdstestsæt, Ningbo Meikang Biotechnology Co., Ltd. Science And Technology Co., Ltd., batchnummer: 20170612; TUNEL-detektionskit, Amictech Technology Co., Ltd., batchnummer: 20180406; RNA-ekstraktionssæt, revers transkriptionssæt, Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd., batchnummer: 20180705, 20180904; Serumhyaluronsyre (HA), vævsmetalloproteinasehæmmer-1 (TIMP-1) ​​og laminin (Laminin, LN) detektionskit, Shanghai Yuanmu Biotechnology Co., Ltd., batchnumre er: 20180612, 20180624, 20180706; Vaskulær celleadhæsionsmolekyle 1 (vascular cell adhæsion molecule- 1, VCAM- 1), transformerende vækstfaktor (Transforming growth factor, TGF-) og -Smooth muscle actin (-SMA) antistoffer, Santa Cruz Company, USA, batchnumre: sc13160, sc130348, sc-324317; peberrodsperoxid Enzym (peberrodsperoxidase, HRP) mærket ged anti-kanin IgG, Danmark DAKO firma, batchnummer: P0447.

1.3 Apparatmodel

7600 automatisk biokemisk analysator, Japan HITACHI selskab; bærbare blodsukkermålere; Beijing Yicheng Bioelectronics Technology Co, Ltd; BX60 optisk mikroskop, Japan OLYMPUS selskab; SN-695B radioimmunoassay-analysator, Shanghai Rihuan Instruments Shenbei Co., Ltd.; IQTM5 fluorescerende kvantitativ PCR-instrument, American Bio-Rad Company; DYY-6C elektroforeseinstrument, Beijing Liuyi Instrument Factory; AlphaImager HP gel-billeddannelsesanalysesystem, American Alpha Innotech Company.

1.4 Gruppering, modelreplikering og administrationsmetoder

60 rotter blev forfodret i 1 uge og tilfældigt opdelt i kontrolgruppe, modelgruppe,echinacosidehøj-, mellem- og lavdosisgrupper og Losartan-kaliumgruppe, 10 rotter i hver gruppe. Modelgruppen,echinacosidegruppe, og losartan-kalium-gruppen blev behandlet med en diæt med højt fedtindhold og højt sukkerindhold kombineret med lavdosis streptozotocin for at inducere en rottemodel afdiabetisk nefropati[6]. Før modellen blev replikeret, fastede rotterne med vand i 12 timer. Rotterne i kontrolgruppen blev fodret med almindeligt foder, og de øvrige grupper fik foder med højt fedtindhold og højt sukkerindhold. Efter 4 ugers kontinuerlig fodring modtog rotterne i kontrolgruppen en enkelt intraperitoneal injektion af et tilsvarende volumen citratbuffer, og de resterende grupper modtog en enkelt intraperitoneal injektion af streptozotocin Bacteriocin (40 mg·kg-1) til replikere rottemodellen afdiabetisk nefropati. 72 timer efter, at rotterne blev injiceret med streptozotocin, var blodsukkeret større end eller lig med 16,7 mmol·L-1, og 24-timers urinproteinudskillelseshastigheden efter 3 uger var højere end for kontrolgruppen, og kvantificeringen af ​​24-timers urinprotein var større end 50 procent, før modellen blev replikeret, hvilket indikerer, at modellen var vellykket. Fire uger efter injektionen af ​​streptozotocin, lav, medium og høj dosisechinacosidegrupperne fik 20 mg·kg-1, 50 mg·kg-1 og 100 mg·kg-1echinacoside(Opløses i normalt saltvand ved 37 grader i henhold til standarden på 5 mL·kg-1 for kropsvægten af ​​rotter. Rotter i Losartan Kalium-gruppen får oral administration af Losartan Kalium 16 mg·kg-1 Modelgruppen og kontrolgruppen får samme volumen. Det normale saltvand blev givet én gang dagligt i 2 uger.

1.5 Prøvesamling

Efter den sidste administration har rotterne fastet uden mad og vand, og mængden af ​​vand, som rotterne forbrugte i 24 timer, blev registreret, og urinen i 24 timer blev opsamlet. Tidligt om morgenen den anden dag blev rotterne vejet. Efter opsamling af urin, intraperitoneal injektion af 2 procent pentobarbital-natriumopløsning 2 mL·kg-1 til bedøvelse, adskillelse af abdominal rotteblod fra aorta, centrifugering (3 500 r·min-1, 15 min.) og serum blev opsamlet. Opbevar midlertidigt i køleskab ved -20 grader ; adskille rottenyrevæv og opdele i to dele, den ene del fikseres i 4 procent paraformaldehyd, den anden del fremstilles som 10 procent homogenat og placeres i et -80 graders køleskab til senere brug.

1.6 Bestemmelse af glukose og lipidmetabolisme hos rotter

Tag serum fra hver gruppe af rotter, brug et blodsukkermåler til at måle fastende blodsukker og en automatisk biokemisk analysator til at detektere triglyceridester, kolesterol, lipoproteinniveauer med lav densitet.

1.7 24 urinprotein, nyrefunktion og nyrefibrose-relaterede indikatorer blev taget

24 timers urin fra hver gruppe af rotter, 24-h urinens mikroproteinindhold blev bestemt ved radioimmunoassay, og operationen blev udført strengt efter instruktionerne. Serum fra hver gruppe af rotter blev opsamlet, og indholdet af blodkreatinin og urea-nitrogen blev detekteret med en automatisk biokemisk analysator, serum-TIMP-1-niveauet blev detekteret ved ELISA, og HA- og LN-niveauerne blev detekteret af radioimmunoassay. Operationen blev udført strengt efter instruktionerne.

1.8 HE-farvning for at observere de patologiske ændringer af nyrevæv og TUNEL-farvning

Observer apoptose af nyrevævsceller. Tag det fikserede nyrevæv fra hver gruppe, indlejr dem i paraffin og snit dem. Et afsnit bruges til HE-farvning for at observere de morfologiske ændringer af renale tubuli, glomeruli og renal interstitium under et lysmikroskop; den anden sektion bruges til TUNEL-farvning, opererer i henhold til vejledningen i kittet og observerer antallet og positiviteten af ​​nyrevævsceller under mikroskopet. Antallet af celler, forholdet mellem antallet af positive celler og antallet af nyrevævsceller er beregnet, som er apoptosefrekvensen.

2 resultater

1. Western Blot-metode til at bestemme ekspressionen af ​​VCAM-1-, TGF- og -SMA-protein i nyrevæv

Tag ca. 50 mg rottenyrevævshomogenat, opløs det med cellelysat indeholdende proteasehæmmere, og ekstraher totalt protein med cellelysat ved hjælp af BCA-metoden til proteinkvantificering. Den samlede proteinprøve ekstraheret med 50 μmol·L -1 blev overført til en nitrocellulosemembran ved polyacrylamidgelelektroforese og forseglet med 5 procent skummetmælk, og derefter blev det primære antistof (1∶1000) og -actinprotein tilsat hhv. Monoklonalt antistof (1:300), inkuberes natten over ved 4 grader. Til sidst tilsættes det sekundære antistof og inkuberes i 2 timer ved 37 grader og monitoreres ved elektrokemiluminescens. Brug Photoshop billedanalysesoftware til at analysere gråværdien af ​​proteinbånd.

2 Resultaterne viser effekten af ​​echinacoside på glukose- og lipidmetabolisme hos rotter med diabetisk nefropati.

Sammenlignet med kontrolgruppen var den fastende blodsukker hos modelgrupperotterne signifikant øget, og forskellen var statistisk signifikant (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" increased,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05) ). Sammenlignet med modelgruppen, den fastende blodsukker hos rotter i mellem- og højdosisgrupperneechinacosideog losartan-kaliumgruppen var signifikant reduceret, og forskellen var statistisk signifikant (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" were="" reduced,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05).

3 Effekterne af echinacosid på 24-timers urinprotein og nyrefunktion hos rotter med diabetisk nefropati.

Sammenlignet med kontrolgruppen var urinmikroalbumin-, urinstofnitrogen- og kreatininniveauerne i modelgruppen signifikant øget, og forskellene var statistisk signifikante (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" middle="" and="" high="" dose="">echinacosidegrupper Niveauerne af urin mikroalbumin, urinstofnitrogen og kreatinin hos rotter i kalium- og losartan-kaliumgruppen var signifikant reduceret, og forskellene var statistisk signifikante (P<>

4 Effekterne af echinacosid på nyrefibrose hos diabetiske nefropati-rotter.

Sammenlignet med kontrolgruppen var serumniveauerne af HA, TIMP-1 og LN i modelgruppen signifikant øget, og forskellene var statistisk signifikante (P<0.05); the="" levels="" of="" ha,="" timp-1,="" and="" ln="" of="" rats="" in="" the="" sartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" reduced,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

5 HE-farvning for at observere de patologiske ændringer af nyrevæv hos rotter med diabetisk nefropati.

Cellestrukturen af ​​nyrevævet var fuldstændig, og der blev ikke set nogen tydelige patologiske ændringer. HE-farvningen af ​​rotter i modelgruppen og lavdosisechinacosidegruppe viste: glomerulus hævede og øgede i volumen, renale tubulære epitelceller hævede eller faldt, nyre-interstitium ledsaget af inflammatorisk celleinfiltration, og en vis mesangial hyperplasi og interstitiel proliferation var også synlig. Fibrose. HE farvning af rotter i midten og høje doser afechinacosideog losartan-kalium-gruppen viste, at nyrevævslæsioner var signifikant reduceret, med en lille mængde inflammatorisk celleinfiltration, mesangial hyperplasi og interstitiel fibrose var også lettere end modelgruppen.

6 Effekten af ​​echinacosid på apoptose af nyrevæv hos rotter med diabetisk nefropati.

TUNEL-farvning viste, at sammenlignet med kontrolgruppen var apoptoseraten for rotter i modelgruppen signifikant øget, og forskellen var statistisk signifikant (P＜0.05); Den apoptotiske hastighed af rotter i den tan-kalium-gruppe var signifikant reduceret, og forskellene var statistisk signifikante (P<>

7 Effekterne af echinacosid på ekspressionen af ​​apoptose-relaterede gener i nyrevæv fra diabetiske nefropati-rotter.

RT-PCR-resultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen var ekspressionen af ​​Bax og Caspase-3 mRNA i modelgruppen signifikant opreguleret, og ekspressionen af ​​Bcl-2 mRNA var signifikant nedreguleret , og forskellen var statistisk signifikant (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group="" in="" comparison,="" the="" expression="" of="" bax="" and="" caspase-3="" mrna="" was="" significantly="" down-regulated="" in="" the="" middle="" and="" high-dose="">echinacosidegrupper og losartan-kalium-gruppen, og ekspressionen af ​​Bcl-2 mRNA var signifikant opreguleret, og forskellene var statistisk signifikante (P<>

8 Effekterne af echinacosid på ekspressionen af ​​VCAM-1-, TGF- og -SMA-proteiner i diabetiske nefropati-rotter.

Sammenlignet med kontrolgruppen var ekspressionen af ​​VCAM-1-, TGF- og -SMA-protein i modelgruppen signifikant opreguleret, og forskellen var statistisk signifikant (P<0.05); the="" expressions="" of="" vcam-1,="" tgf-β,="" and="" α-sma="" proteins="" in="" rats="" in="" the="" dose="" group="" and="" the="" losartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" down-regulated,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

3 Diskussion

Begyndelsen afdiabetisk nefropatier skjult, og patogenesen er kompleks og mangfoldig. Når først dannet, er det svært at helbrede. Det er en kronisk sygdom med stor skade og en vigtig årsag til nyresygdom i slutstadiet [8]. Patienter meddiabetisk nefropatibehandles ofte med angiotensin-konverterende enzymhæmmere og angiotensinreceptorantagonister, men den kliniske behandlingseffekt er ikke særlig tilfredsstillende [9]. Losartan kalium er en angiotensin Ⅱ receptorantagonist, som kan bruges til at behandle essentiel hypertension. Nogle undersøgelser [10-11] viser, at Losartan kalium også kan hæmme det renale interstitium hos rotter meddiabetisk nefropatiFibrose, beskytte nyrefunktionen. Derfor valgte denne undersøgelse Losartan kalium som den positive kontrol at sammenligne de beskyttende virkninger afechinacosidepå nyrevævet hos rotter meddiabetisk nefropati.Kliniske undersøgelser [12-13] har vist, at indholdet afechinacosidei Changui Yishen Kapsler er omkring 3,104 mg · kg-1. Efter konvertering baseret på human og mus administration dosis, den laveste dosis af Changui Yishen kapsler tildiabetisk nefropatirotter er 0.648 g·kg-1, og dosis omregnet tilechinacosideer omkring 2 mg·kg-1. Da der er få kliniske rapporter om behandling afechinacosidefor diabetes eller nefropati vælger denne undersøgelse 10 gange den laveste kliniske dosis, dvs. 20 mg·kg-1 echinacosid som den lave dosis, og øges i rækkefølge. 50 mg·kg-1echinacosideer en medium dosis og 100 mg·kg-1echinacosideer en høj dosis.

Echinacoside fra cistanche behandler diabetisk nefropati

I denne undersøgelse lavdosisechinacosidehar ingen tydelig effekt på nyrevævet afdiabetisk nefropatirotter, mens mellemstore og høje doser afechinacosidekan markant forbedre de patologiske forandringer af nyrevæv og forbedre nyrevævsskader idiabetisk nefropatirotter. , Foreslår, at mellemstore og høje doser afechinacosidekan beskytte nyrevævsskaden afdiabetisk nefropatirotter på en koncentrationsafhængig måde, og det forventes at blive brugt til behandling af kliniskediabetisk nefropati. I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan øge kropsmassen af ​​rotter markant meddiabetisk nefropatiog reducere deres vandindtag, urinproduktion og fastende blodsukker. Kliniske undersøgelser [14] har vist, at insulin hos patienter meddiabetisk nefropatier i absolut eller relativ mangel, og blodsukkerniveauet er forhøjet. For høj blodsukkerkoncentration vil overstige den glomerulære reabsorptionskapacitet, udskilles med urin, hyppigheden af ​​vandladning øges, og drikkevandet stiger. Faldet i kropsmasse er i overensstemmelse med resultaterne af denne undersøgelse, hvilket tyder påechinacosidekan øge kropsmassen afdiabetisk nefropatirotter ved at sænke blodsukkeret og reducere deres drikke- og urinproduktion.

I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan signifikant reducere urin mikroalbumin, kreatinin og urea nitrogen hos rotter meddiabetisk nefropati. Kreatinin og urea nitrogen udskilles hovedsageligt fra kroppen gennem glomerulær filtration, som mere præcist kan afspejle nyrefunktionen. Ved nyreinsufficiens falder den glomerulære filtrationshastighed, koncentrationen af ​​blodkreatinin og urea-nitrogen vil stige betydeligt [15]. Urinproteinniveauet er en af ​​de mest almindeligt anvendte indikatorer til at afspejle graden af ​​glomerulær skade, som direkte kan beskadige mesangiale celler og også kan forværre nyreskade og nyreinsufficiens [16]. Forskning af Zhang Yun et al. [17] viste, at hyperglykæmi hos rotter meddiabetisk nefropatikan forårsage et fald i glomerulær filtrationshastighed, hvilket fører til en stigning i blodkreatinin, urea nitrogen og urin mikroalbumin niveauer. Resultaterne af denne undersøgelse tyder på detechinacosidekan reducere blodsukkeret, forbedre nyrefunktionen, reducere blodkreatinin, urea nitrogen og urin mikroalbumin niveauer og forbedre nyrevæv celleskade.

I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan signifikant nedregulere ekspressionen af ​​Bax og Caspase-3 mRNA idiabetisk nefropatirotter, opregulerer ekspressionen af ​​Bcl-2 mRNA og hæmmer apoptose af nyrevævsceller. Bax-genet er et pro-apoptotisk medlem af Bcl-2-familien. Under fysiologiske forhold danner Bax og Bcl-2 en heterodimer, som reducerer cellemembranpermeabilitet og cytochrom C-frigivelse. Når ekspressionen af ​​Bcl-2 er nedreguleret, vil det forårsage stigning i cellepermeabilitet, frigivelse af cytochrom C, aktivere nedstrøms Caspase-kaskaden og inducere celleapoptose [18]. Caspase-3 er et udøvende apoptosemolekyle, som kan nedbryde en række vigtige proteiner i celler og deltage i celleapoptose [19]. Studiet af Dong et al. [20] viste detechinacosidekan hæmme apoptose af en række celler, hvilket er i overensstemmelse med resultaterne af denne undersøgelse, hvilket tyder på, atechinacosidekan hæmme apoptose af nyrevævsceller og derved beskytte nyrevævsskade. I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan signifikant nedregulere ekspressionen af ​​VCAM-1-protein idiabetisk nefropatirotter. VCAM-1 er et vigtigt vaskulært celleadhæsionsmolekyle, som er tæt forbundet med forekomsten og udviklingen afdiabetisk nefropaty og kan bruges til den kliniske evaluering af patienter meddiabetisk nefropati[21]. Studiet af Zhang et al. [22] viste, at VCAM-1 kan inducere neuronal apoptose efter intracerebral blødning hos rotter. Resultaterne af denne undersøgelse tyder på, at mellemstore og høje doser afechinacosidekan hæmme ekspressionen af ​​VCAM-1 og hæmme nyrecelleapoptose hos rotter med diabetisk nefropati.

I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan signifikant reducere niveauerne af HA, TIMP-1 og LN hos rotter meddiabetisk nefropati.HA er hovedkomponenten i den ekstracellulære matrix, og LN er et vigtigt strukturelt glycoprotein, som er en almindeligt anvendt klinisk indikator for vævsfibrose [23]. TIMP-1 er en hæmmer af matrixmetalloproteinaser (MMP), som kan hæmme ekspressionen af ​​MMP, hæmme nedbrydningen af ​​ekstracellulær matrix og fremme nyrevævsfibrose [24]. Undersøgelsen af ​​Bieniaa et al. [25] viste, at TIMP-1 kan hæmme ekspressionen af ​​MMP, fremme ekspressionen af ​​HA og LN og fremme forekomsten og udviklingen af ​​nyrevævsfibrose. Dette er i overensstemmelse med resultaterne af denne undersøgelse, hvilket tyder påechinacosidekan hæmme HA-, TIMP-1- og LN-niveauer, hæmme forekomsten og udviklingen af ​​nyrefibrose. I denne undersøgelse er mellemstore og høje doser afechinacosidekan signifikant nedregulere ekspressionen af ​​TGF- og -SMA-proteiner idiabetisk nefropatirotter. Et stort antal undersøgelser [26-27] har vist, at TGF-/Smad-signalvejen spiller en vigtig rolle i forekomsten og udviklingen af ​​nyre-interstitiel fibrose. Når TGF- binder til sin receptor i cellemembranen, kan den fosforylere Smad2 og Smad3, og den aktiverede Smad danner en trimer, som overføres til kernen for at regulere ekspressionen af ​​nedstrøms effektormolekyler såsom -SMA og matrix metalloproteinaser. Fremkalde produktionen af ​​nyre interstitiel fibrose [28]. -SMA er et tegn på omdannelsen af ​​fibroblaster til myofibroblaster, som kan fremme udskillelsen og aflejringen af ​​ekstracellulær matrix og fremme forekomsten af ​​nyre interstitiel fibrose. Ulempen er, at stikprøvestørrelsen er lille, hvilket kan forårsage visse statistiske fejl i resultaterne, men det kan give et vist teoretisk grundlag for doseringsvalg og klinisk anvendelse afechinacoside.

referencer:

[1] ZANCHI C, MASSONI D, TRIONFINI P, et al. MicroRNA-184 er en nedstrøms effektor af albuminuri, der driver nyrefibrose hos rotter meddiabetisk nefropati[J]. Diabetologia, 2017, 60(6): 1114-1125.

[2] TENCEL GC, YILDIRIM S. Øget udtryk for eNOS og iNOS korrelerer med apoptose afdiabetisk nefropatii streptozotocin-induceret type 1diabetikerrotter [J]. J Comp Pathol, 2016, 154(1): 63.

[3] SCHALKWIJK CG, CHATURVEDI N, TWAAFHOVEN H, et al. Amadori-albumin korrelerer med mikrovaskulære komplikationer og går forud for nefropati i type 1diabetikerpatienter.[J]. Eur J Clin Invest, 2015, 32(7): 500-506.

[4] Wei Dawei, Ge Xinyu, Liu Yihan, et al.Echinacosideinducerer mesenkymale stamceller i knoglemarv til at vokse. Undersøgelse om differentiering af osteoblaster[J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2017, 33(2): 48-52.

[5]MORIKAWA T, NINOMIYA K, IMAMURA M, et al. Acylerede phenylethanoidglycosider,echinacosideog acteosid fraCistanchetubulosa, forbedre glukosetolerance hos mus[J]. J Nat Med, 2014, 68(3): 561-566.

[6]Guo Congcong, Jiao Mingwen, Zhang Yaqin, et al. Forbedring og evaluering af modelleringsmetoden for unilateralnefrektomikombineret med streptozotocin-induceretdiabetisk nefropatihos rotter[J]. Advances in Veterinary Medicine, 2019, 40 (2): 135-139.

[7] He Zhu, Kuang Shixiang, Zhang Shusen, et al. Naotong-afkog på hippocampale neuroner hos hypoxi-/reoxygeneringsrotter Indflydelsen af ​​Bcl-2, Bax og Caspase-3-ekspression[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2015, 23 (24): 6973-6976.

[8]ROSSING P. Fremme, forudsigelse og forebyggelse af progression afnefropatived type 1 diabetes mellitus [J].DiabetikerMed, 2015, 15 (11): 900-919.

[9] Bao Jianzhou, Zhou Baohua. Klinisk undersøgelse af 68 tilfælde afdiabetisk nefropatibehandlet af Yiqi Yangyin Huoxue Decoction [J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2015, 31(2): 177-178.