Undersøgelse af neuroendokrin-immun funktion af phenylethanoid-glykosider af ørkenlevende cistanche-urter i perimenopausal rottemodel

for flere oplysninger:ali.ma@wecistanche.com

Shuo Tiana, et al

Abstrakt

Etnofarmakologisk relevans:

ØrkenlivCistancheurtblev først indspillet i "Shen Nong'Herbal Classic" og opført som den bedste urtemedicin i den.Phenylethanoidglykosiderer vejledende komponenter til identifikation og indholdsbestemmelse af ørkenlivCistancheurti kinesisk farmakopé, som også er en af ​​de vigtigste aktive komponenter. I denne undersøgelse undersøgte vi mekanismen forphenylethanoidglykosideraf ørkenlivCistancheurttil de perimenopausale modelrotter.

Sigte:

Formålet med denne undersøgelse er at undersøge effekterne afphenylethanoidglykosideraf Desertliving Cistancheherb (PGC) påneuroendokrine-immunfunktion af perimenopausalt syndrom af perimenopausale modelrotter.

Materialer og metoder:

Wistar hunrotter blev udvalgt. De venstre æggestokke for alle rotter undtagen i den tomme kontrolgruppe (BC) blev fjernet, og de højre æggestokke blev fjernet i 80 procent. Den vaginale udstrygning viste uregelmæssige ændringer i østroscyklus for de perimenopausale modelrotter. Og de perimenopausale modelrotter blev gavaget Gengnian'an,PhenylethanoidGlykosideraf DesertlivingCistancheurthøj, medium, en lav suspension, som er 450 mg/(kg dag), 133,33 mg/(kg dag), 66,67 mg/(kg dag), 33,33 mg/(kg dag); gruppen af ​​BC og modelgruppen (MC) fik destilleret vand i samme volumen som lægemiddelgruppen i 30 på hinanden følgende dage. Horisontale vertikale træningsresultater blev målt efter 29 dages dosering. Efter den sidste administration blev blodet taget fra abdominal aorta, og niveauerne af E2, LH, FSH, GnRH, BGP i serum og niveauerne -EP i plasma blev målt henholdsvis. Organindekser for thymus, milt og livmoder blev beregnet. Indholdet af østrogenreceptorer (ER) i hypothalamus-, hypofyse- og livmodervæv og indholdet af androgenreceptor (AR) i hypothalamus-homogenatet blev målt. De patologiske ændringer i thymus, milt, livmoder, æggestok blev observeret ved HE-farvning.

Resultater:

Sammenlignet med MC øger PGC aktiviteten, organindekset (thymus, milt, uterus), E2, T, BGP-niveau i serum, -EP-niveau i plasma, AR-niveau i hypothalamus, ER-niveau i hypothalamus, hypofyse, livmoder hos perimenopausale modelrotter. Og det reducerede også FSH, LH, GnRH-niveauer i serum og forbedrede uterus- og ovarielæsioner hos perimenopausale modelrotter.

Konklusion:

Hver dosis PCG kunne modvirke forstyrrelsen af ​​kønshormon hos perimenopausale modelrotter, korrigere ubalancen af ​​ER- og AR-niveauer, forstærke og genoprette virkningen af ​​livmoderen og nervecellerne i hypothalamus og forbedreimmunfungere.

Nøgleord:Phenylethanoidglykosideraf ørkenliv,Cistancheurt, Perimenopausale modelrotter,Neuroendokrin-immunfungere

PhenylethanoidglykosiderafCistancheUrthar enNeuroendokrin-immunfungere

Klik for at Cistanche stamme

1. Introduktion

Med befolkningens aldring er forekomsten af ​​perimenopausalt syndrom stigende. Nogle undersøgelser har fundet ud af, at alderen for debut af det perimenopausale syndrom har været faldende internationalt og er faldet fra 65 til 35 år. Moderne medicin mener, at perimenopausalt syndrom refererer til symptomer forårsaget af fald i ovariefunktion (Miao et al., 2017a,b). Østrogenniveauet er lavt, hvilket forårsager unormale funktioner som endokrine, nervøse ogimmunfunktioner. De vigtigste kliniske manifestationer er hedeture, svedtendens, hjertebanken, søvnløshed, irritabilitet, uregelmæssig menstruation, osteoporose og forekomsten af ​​hjerte-kar-sygdomme (Lobo et al., 2014; Alvarado-García et al., 2015), som alvorligt påvirker liv. af perimenopausale kvinder. Hormonerstatningsterapi (HRT) er hovedmetoden til behandling af dette syndrom, men langtidsbehandling af østrogenerstatning kan forårsage uønskede virkninger såsom koprofagi, udspilede smerter i brystet, karcinom i endometrium, brystkræft og øget forekomst af kardiovaskulære og cerebrovaskulære sygdomme, og det er modtageligt for recidiv (Perrone et al., 2013). Disse symptomer begrænser deres kliniske anvendelse, så folk er mere og mere opmærksomme på problemerne i denne særlige fase af overgangsalderen.

Karakteristikaene for syndromer som "indvolde", "gammel blodkoagulering", "liljesygdom", "depressionssyndrom" og "ikke-ulydighed" registreret i traditionel kinesisk medicin ligner dem ved moderne medicinsk menopausalt syndrom. De tilhører kategorien af ​​forskellige symptomer før og efter overgangsalderen. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun," sagde: "Ren-kanalen er svag, da folk var 49, og Thoroughfare Vessel skal reducere, den sex-stimulerende essens er udtømt, og andre fænomener, derfor mister en kvinde funktionen som en foster." Og den kønsstimulerende essens omdannes af nyreessens, så traditionel kinesisk medicin (TCM) mener, at sygdommens vigtigste patogen er nyreinsufficiens (Peng, 2014). Undersøgelser har også vist, at faldet i ovariefunktion er årsagen til nyre-asthenia-syndrom i TCM-terminologi. Reduktionen af ​​niveauerne af E2, LH, FSH er et udtryk for renal asteni (Liu et al., 2010), og undersøgelsen havde fundet ud af, at de fleste af de genopfyldende nyre-yang-lægemidler har en bedre behandlingseffekt på perimenopausalt syndrom (Zhang og Miao, 2011; Cao et al., 2016; Wang et al., 2016; Tian et al., 2017a,b), så vi skal fast forstå rollen som "nyremangel" i TCM-terminologien som den vigtigste patogenese i den kliniske behandling, og understreger hovedmålet med at genopbygge nyre. Undersøgelser har vist, at kinesisk medicin ved at genopbygge nyrerne kan regulere dysfunktionen af ​​HPO-aksen, forsinke æggestokkens aldring, regulerenervøs endokrin-immunsystem, forbedre immunitet og forebygge osteoporose (Shi et al., 2007), blandt andre effekter. ØrkenlivCistancheurter en tør, skællende kødfuld stængel af Cistanche deserticoLa YCMa eller Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, det er en flerårig parasitisk lægeplante. Det har den virkning at genopbygge nyrerne, genopfylde essens og blod, løsne tarmen for at lindre forstoppelse og andre effekter. ØrkenlivCistancheurter almindeligt anvendt i traditionel kinesisk medicin til at styrke nyrerne og styrke yang, som kaldes "ørkenginseng". Moderne forskning har vist, at det blandt andet har anti-aldringseffekter, forbedrer kroppens immunitet, forbedrer indlærings- og hukommelsesevnen, antiinflammatoriske og anti-træthedseffekter (Li et al., 2010). Den kemiske sammensætning af Desertliving Cistanche-urten er kompleks, og indholdet afphenylethanoidglykosiderer den højeste i de originale medicinske materialer. Det er også en af ​​de vigtigste aktive komponenter i DesertlivingCistancheurtat udøve en androgenlignende effekt og immunmodulerende egenskaber (Zhao og Pan, 2013). Og PGC kunne forbedre kønshormonforstyrrelsen (E2, T, FSH, LH) hos perimenopausale mus, og det har en god terapeutisk effekt på perimenopausale mus, se den relaterede undersøgelse (Tian et al., 2017a,b).

På nuværende tidspunkt fokuserer forskningen i perimenopausalt syndrom på det endokrine system, nervesystemet,immunfunktion osv., men forstyrrelsen af ​​endokrine-immunregulering er hovedårsagen til perimenopausalt syndrom (Wang et al., 1999; Zhang og Wang, 2001). Denne undersøgelse undersøgte effekten af ​​PGC på de perimenopausale modelrotter ud fra endokrin-immunfungere.

2. Materialer og metoder

2.1. Forsøgsdyr

Wistar hunrotter (210-230 g) blev købt fra ShandongLukang Pharmaceutical Co., Ltd., dyretilladelsesnummer: 0017216, laboratoriecertifikat nr. SYXK (Henan) 2010-001. Alle rotter blev holdt med fri adgang til mad og vand i plastbure ved 22 ± 2 grader, relativ luftfugtighed på 50 procent –60 procent. Og dyrene blev opstaldet i en uge før forsøgene.

2.2. Materialer og reagenser

Natriumcarboxymethylcellulose, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., batchnr.: 20120418; Benzylpenicillin kalium til injektion, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikation: 4 millioner enheder, produktionsbatch nr.: c1206807; Formaldehydopløsning (analytisk ren), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., produktionsbatchnr.: 20130902; chloralhydrat, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, batchnummer 20120827; rotte E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, -EP ELISA detektionsreagensboks, R&D, lotnummer: 20140101A.

2.3. Eksperimentelle lægemidler

Den specifikke fremstillingsmetode og indholdsdetektionen af ​​PGC er blevet offentliggjort. Se litteraturen og indholdet er 66,47 procent (Tian et al., 2017a,b). Gengnian Capsule, ingredienser: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Perlemor, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Flydende Hvede, Polygonum multiflorum. Indikationer: nærende yin og yang, slippe af med besværet og beroligende sindet, og bruges til overgangsalderen med hedeture, svedtendens, svimmelhed tinnitus, irritabilitet og søvnløshed. Specifikationer: 0,3 g pr. kapsel. Anvendelse og dosering: Oral, 3 kapsler ad gangen, 3 gange dagligt. Produktionsvirksomhed: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Produktionsbatchnummer: 121104. Godkendelsesnummer: National Medicine Zhunzi Z14021848.

PhenylethanoidglykosiderafCistancheUrthar enNeuroendokrin-immunfungere

2.4. Eksperimentelt instrument

Åbning af aktivitetstestkammer, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., model OFT-100; motoriseret mikroskop, Japan OLYMPUS selskab, model: BX61; mikropladelæser, amerikansk BIO-RAD-firma, model: 680; X3R højhastigheds kølecentrifuge, USA Mercury Technology Co., Ltd.

2.5. Udarbejdelse og gruppering af dyremodeller

Taget firs rotter, der vejede 210-230 g, og 12 rotter blev tilfældigt udvalgt som BC-gruppen, og de resterende rotter blev brugt til perimenopausale dyremodeller. Forberedelsesmetoden for perimenopausale modelrotter, referencelitteraturmetoden (Miao et al., 2015), fjernede den venstre ovarie fuldstændigt, 80 procent af den højre sideovarie blev fjernet. Omhyggeligt opdrættet efter operationen, og til forebyggelse af infektion til injektion af penicillin 20U/kg (0,1 ml) ved intramuskulær til, i 3 på hinanden følgende dage, en gang dagligt. Efter 5 dages operation blev vaginal udstrygningsundersøgelse af rotterne udført en efter en, en gang om dagen, og på hinanden følgende i 5 dage. Rotter med brunstreaktioner blev kasseret. Tres ovariektomerede rotter blev tilfældigt og ligeligt opdelt i 5 grupper til eksperimentel brug. De var modelgruppe (MC), Gengnian'an gruppe (GC),PhenylethanoidGlykosideraf DesertlivingCistancheurthøj (PGC-HD), medium (PGC-MD), lav dosis gruppe (PGC-LD).

2.6. Lægemiddelkonfigurationsmetode

(1) Doserne af PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD er henholdsvis 133,33 mg/kg, 66,67 mg/kg og 33,33 mg/kg (administrationsvolumen 1 ml/100 g). Konfigurationsmetode: Vej PGC 1333,3 mg, 666,7 mg, 333,3 mg, først opløst med en lille mængde destilleret vand og derefter tilsat destilleret vand til 100 ml, og bland godt, det vil sige den nødvendige PGC-HD, PGC-MD, PGC -LD suspension.

(2) Dosis af GC er 450 mg/kg, og administrationsvolumenet er det samme som ovenfor, hvilket svarer til 10 gange den kliniske dosis. Konfigurationsmetode: Tag 15 kapsler GengnianCapsule, opløs det først med en lille mængde destilleret vand, og sæt det derefter til 100 ml, og bland det. Dette er den ønskede GC suspension.

2.7. Administrationsmetode

Hver gruppe af dyr fik det tilsvarende lægemiddel på den 10. dag efter operationen. GC-gruppen blev administreret med 450 mg/kg Gengnian Capsule Suspension, og PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD blev henholdsvis administreret med PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD suspension, som er 133,33 mg/kg, 66,67 mg /kg, 33,33 mg/kg. BC- og MC-gruppen blev henholdsvis administreret med det samme volumen destilleret vand en gang dagligt i 30 dage.

2.8. Åbent felt test

Rotterne i hver gruppe blev testet for horisontal-lodrette træningsscore efter 29 dages administration. Det eksperimentelle apparat er en kubisk åben kasse med en højde på 40 cm og en længde på 80 cm og en bredde på 80 cm. Den perifere væg og bundfladen er sorte, og bundfladen er sammensat af 25 blokke med lige store areal, som er opdelt med hvide linjer. Under eksperimentet blev rotterne anbragt i firkanten af ​​den åbne kasse, og de horisontale aktivitetsscore af strålerne, der passerede gennem bunden inden for 5 minutter (de firkanter, hvori alle fire kløer blev indtastet) blev observeret, og den vertikale aktivitet score af antallet af bagben blev rejst (to forpoter blev forladt eller klatrede op ad væggen). Afføringen skal fjernes fuldstændigt efter hvert forsøg og måles én gang efter 2 timers administration. Dette eksperiment blev udført i et stille rum.

2.9. Bestemmelse af niveauet af E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP i serum og niveauer af -EP i plasma

Rotter i hver gruppe efter sidste administration på 2 timer (fastende i 12 timer), abdominal anæstesi, blodet blev taget fra abdominal aorta, serum og plasma blev adskilt (4 grader, 3500 rpm, 10min), opbevaret i køleskab kl. -80 grader. Ved hjælp af enzym-linked immunosorbent assay målte niveauet af E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP i serum og niveauet af -EP i plasma. Den specifikke operationsmetode blev udført i henhold til instruktionerne.

2.10. Bestemmelse af ER og AR i hypothalamus-, hypofyse- og livmodervævshomogenater

Efter at have taget blod fra den abdominale aorta, blev rotterne aflivet. Hypothalamus, hypofysen og livmoderen blev taget fra kroppen. Hypothalamus, hypofysen og 1/2 livmoder blev homogeniseret. Homogeniseringsmetoden var som følger:

Vævsblokken blev skyllet i iskold 0,9 procent natriumchlorid, blodet blev fjernet, og filtrerpapiret blev brugt til at tørre væv, vævet blev vejet og skåret i glashomogenatrør og homogeniseret vha. tilsætning af forkølet 0,9 procent natriumchlorid (Forholdet mellem væv og 0,9 procent natriumchlorid er 1:9). Det venstre håndholdte homogeniseringsrør indsættes i beholderen, der indeholder is-vand-blandingen. Højrehånden indsættes lodret i huset og drejes op og ned adskillige gange (6-8 min), males fuldstændigt, homogeniseres vævet, centrifugeres (4 grader, 3500 rpm, 10 min), og opbevares ved -80 grader i køleskabet .
ER-indhold i homogenater af hypothalamus-, hypofyse- og livmodervæv og AR-indhold i homogenater af hypothalamus blev bestemt ved enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) i henhold til instruktionerne.

PhenylethanoidglykosiderafCistancheUrthar enNeuroendokrin-immunfungere

2.11. Beregning af organindekset

Rotter i hver gruppe efter den sidste administration på 2 timer (fastende i 12 timer), blev rotterne aflivet, og thymus, milt, livmoder og resterende 20 procent af ovarievævet blev fjernet, de våde vægte blev vejet og organet. indeks for thymus, milt, livmoder blev beregnet. Formlen er som følger:

Organindeks=Vådorganvægt (mg)/rottekropsmasse (g)

2.12. Observation af morfologisk måling af uterus, æggestokke, thymus, milt og tykkelsesmåling af thymus cortex og miltknuder

Thymus, milt, livmoder og æggestok blev fikseret i 10 procent formaldehydopløsning, indlejret i paraffin, snittet, HE-farvet, og histomorfologiske ændringer blev observeret under et lysmikroskop. Ved hjælp af mikrometeret blev tykkelsen af ​​thymus cortex målt ved de tykkeste og smalleste punkter for hver rotte i hver forsøgsgruppe. Gennemsnittet er tykkelsen af ​​thymus cortex. Mikrometerets basislinje blev placeret på miltknuderne til midten. Bestemmelse af miltens tykkelse på begge sider med den centrale arterie som centrum, og gennemsnittet er miltens tykkelse.

2.13. Statistisk analyse

Dataanalyse bruger SPSS21.0 medicinsk statistisk pakke til at udføre statistisk behandling af data, og de metrologiske data er udtrykt som middel ± standardafvigelse(x(-) ± s), sammenligningen mellem grupperne bruger en enkelt faktor variansanalyse. LSD-metoden blev brugt til varianstestens homogenitet, Games-Howell-metoden blev brugt til varianstesten ujævn, og Ridit-testen blev brugt til karakterdata.

3. Eksperimentelle resultater

3.1. Virkninger af adfærd på perimenopausale modelrotter

Fra fig. 1 (A og B). Det kan ses, at sammenlignet med BC var de horisontale og lodrette bevægelsesscores for MC-gruppens rotter signifikant reduceret (P < 0.01),="" hvilket="" afspejlede="" rotternes="" nysgerrighed="" over="" for="" det="" ukendte="" miljø.="" sammenlignet="" med="" mc="" kunne="" hver="" gruppe="" øge="" den="" horisontale="" træningsscore="" for="" rotter="" signifikant="" (p="">< 0.01),="" og="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" øgede="" den="" vertikale="" bevægelsesscore="" for="" rotter="" signifikant="" (p="">< 0,05).="" pgc-ld-gruppen="" havde="" en="" tendens="" til="" at="" øge="" rotters="" vertikale="">

3.2. Effekt af relateret organindeks på perimenopausale modelrotter

Fra fig. 2(A, B, C) kunne vi se, at sammenlignet med BG var organindekset for thymus, milt og livmoder hos rotter i MC-gruppen reduceret signifikant (P < 0).{{3}="" }1),="" hvilket="" indikerer,="" at="" thymus,="" milt="" og="" livmoder="" syntes="" at="" skrumpe="" i="" perimenopausale="" modelrotter="" forårsaget="" af="" ufuldstændig="" fjernelse="" af="" æggestokken.="" sammenlignet="" med="" mc="" var="" organindekset="" for="" thymus="" og="" milt="" hos="" de="" perimenopausale="" modelrotter="" øget="" signifikant="" i="" hver="" lægemiddelgruppe="" (p="">< 0.01).="" pgc-hd-,="" pgc-md-="" og="" gc-grupperne="" øgede="" uterinindekset="" for="" perimenopausemodelrotterne="" signifikant="" (p="">< 0,01).="" pgc-md="" øgede="" uterusindekset="" for="" perimenopausale="" modelrotter="" signifikant="" (p=""><>

3.3. Effekt af biokemiske indikatorer i perimenopausale modelrotter

Som vist i fig. 3. (A, B, C, D), sammenlignet med BC-gruppen, var niveauerne af E2 og T i serum i MC-gruppen signifikant faldet (P < 0).{{4="" }}1),="" og="" niveauerne="" af="" lh="" og="" fsh="" var="" signifikant="" øget="" (p="">< 0.{{10}}1),="" hvilket="" indikerer,="" at="" ufuldstændig="" fjernelse="" af="" æggestokken="" i="" perimenopausale="" modelrotter="" fører="" til="" til="" kønshormonforstyrrelsen="" blev="" de="" perimenopausale="" modelrotter="" med="" succes="" replikeret.="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen="" kunne="" hver="" lægemiddelgruppe="" signifikant="" øge="" niveauerne="" af="" e2,="" t="" i="" serum="" og="" reducere="" niveauerne="" af="" fsh="" (p="">< 0,01);="" pgc-md,="" gc-gruppe="" kunne="" signifikant="" reducere="" de="" forhøjede="" lh-niveauer="" (p="">< 0,01),="" pgc-hd="" kunne="" signifikant="" reducere="" niveauet="" af="" lh="" (p="">< 0,05);="" pgc-ld="" kunne="" reducere="" niveauet="" af="">

Fra fig. 3 (E, F), sammenlignet med BC-gruppen, var niveauet af GnRH i MC-gruppen i serum signifikant forøget, og niveauet af - EP i plasma var signifikant reduceret (P < 0).="" 01),="" er="" det="" angivet,="" at="" ufuldstændig="" ovarieablation="" fører="" til="" en="" kønshormonforstyrrelse="" hos="" de="" perimenopausale="" modelrotter,="" og="" de="" relaterede="" hormoner="" udskilt="" af="" hypothalamus="" var="" også="" forstyrrede="" på="" grund="" af="" negativ="" feedback-regulering.="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen="" var="" niveauet="" af="" gnrh="" i="" hver="" lægemiddelgruppe="" signifikant="" reduceret="" (p="">< 0.01);="" niveauet="" af="" -ep="" var="" signifikant="" forhøjet="" i="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc-gruppe="" (p="">< 0,01),="" niveauet="" af="" -ep="" i="" plasma="" var="" signifikant="" forhøjet="" i="" pgc-ld="" (p=""><>

3.4. Effekt af BGP-niveauer i serum hos perimenopausale modelrotter

Det kan ses af fig. 4, at niveauet af BGP i serum i MC-gruppen var signifikant lavere end BC-gruppen (P < 0.01),="" hvilket="" indikerer,="" at="" niveauet="" af="" bgp="" i="" perimenopausale="" modelrotter="" med="" ufuldstændige="" æggestokke="" blev="" reduceret.="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen="" var="" bgp-niveauerne="" i="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc-gruppen="" øget="" signifikant="" (p=""><>

3.5. Effekt af ER, AR i perimenopausale modelrotter

Det kan ses fra fig. 5, at sammenlignet med BC-gruppen var ER- og AR-niveauerne i de perimenopausale modelrotter signifikant faldet (P < 0.01),="" det="" indikerede,="" at="" hormonet="" receptorer="" i="" det="" kropsrelaterede="" væv="" fra="" de="" perimenopausale="" modelrotter="" forårsaget="" af="" ufuldstændig="" ovariektomi="" blev="" reduceret,="" hvilket="" reducerede="" de="" biologiske="" virkninger="" af="" østrogen="" og="" androgen.="" som="" vist="" i="" fig.="" 5="" (a,="" b,="" c),="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen,="" kunne="" hver="" lægemiddelgruppe="" signifikant="" øge="" niveauet="" af="" er="" i="" hypothalamus,="" hypofysen="" og="" uterus="" (p="">< 0.01);="" fra="" fig.="" 5(d)="" var="" niveauerne="" af="" ar="" i="" hypothalamus="" i="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc-gruppen="" signifikant="" forøget="" (p=""><>

3.6. Effekt af patologisk morfologi af livmoderen i perimenopausale modelrotter

Ifølge ændringerne i endometrium, kirtler og muskellag hos rotterne i hver gruppe, blev semikvantitative kriterier brugt til at klassificere histopatologien i fire niveauer af "-, plus, plus plus, plus plus plus". Fra Ridits test kan det ses af fig. 6 og tabel .1, at i forhold til BC viste livmoderen på MC signifikante patologiske ændringer (P < 0.01).="" sammenlignet="" med="" mc="" kunne="" hver="" lægemiddelgruppe="" signifikant="" forbedre="" de="" patologiske="" vævslæsioner="" i="" livmoderen="" (p=""><>

3.7. Effekt af patologisk morfologi på ovarievæv hos perimenopausale modelrotter

Baseret på ændringerne af ovariefollikler, corpus luteum, granulosaceller og blodkar på forskellige niveauer i forsøgsgrupperne, blev de semikvantitative kriterier vedtaget for at klassificere den patologiske vævsmorfologi i fire niveauer: "-, plus , plus plus , plus plus plus". Baseret på Ridit-testen kan det ses af Fig. 7 og Tabel .2, at sammenlignet med BC-gruppen viste æggestokken i MC-gruppen signifikante patologiske læsioner (P < 0).01="" ).="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen="" kunne="" hver="" lægemiddelgruppe="" signifikant="" forbedre="" de="" patologiske="" ændringer="" af="" ovarievæv="" (p=""><>

3.8. Effekt af thymusvævsmorfologi hos perimenopausale modelrotter

Det kan ses af fig. 8, at tykkelsen af ​​thymus cortex i MC-gruppen var signifikant nedsat sammenlignet med BC-gruppen (P < 0.01),="" hvilket="" indikerer,="" at="" thymusatrofien="" blev="" observeret="" i="" de="" perimenopausale="" modelrotter.="" sammenlignet="" med="" mc-gruppen="" kunne="" alle="" grupper="" øge="" thymus="" corticale="" tykkelse="" signifikant="" (p=""><>

Fig. 8. Effekt af patologisk morfologi af thymusvæv i perimenopausale modelrotter. (A): Patologiske ændringer i thymustissue(HE × 200); (B): Thymiccortical tykkelse (μm); I B repræsenterer "a", at der er en signifikant forskel mellem MC-gruppen og BC-gruppen (P < 0,01);="" "b"="" repræsenterer,="" at="" der="" er="" en="" signifikant="" forskel="" mellem="" forskellige="" administrationsgrupper="" og="" mc-gruppen="" (p="">< 0,01),="" n="" ​​="12">

3.9. Virkninger af miltvævsmorfologi på perimenopausale modelrotter

Det kan ses fra fig. 9, at sammenlignet med BC blev miltknudevolumenet i MC-gruppen reduceret signifikant (P < 0.01),="" hvilket="" indikerer,="" at="" miltatrofien="" blev="" observeret="" i="" de="" perimenopausale="" modelrotter.="" sammenlignet="" med="" mc="" var="" niveauet="" af="" miltknudevolumen="" signifikant="" forøget="" i="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc-gruppen="" (p=""><>

Fig. 9. Effekt af patologisk morfologi af milt fra perimenopausale modelrotter. (A): Miltens histopatologi(HE × 200); (B): Tykkelse af miltknuder (μm); I B repræsenterer "a", at der er en signifikant forskel mellem MC-gruppen og BC-gruppen (P < 0,01);="" "b"="" repræsenterer,="" at="" der="" er="" en="" signifikant="" forskel="" mellem="" forskellige="" administrationsgrupper="" og="" mc-gruppen="" (p="">< 0,01),="" n="" ​​="">

4. Diskussion

4.1. Udvalg af dyremodeller

Med udviklingen af ​​forskningen i perimenopausalt syndrom opstår der også løbende forberedelsesmetoderne for forskellige perimenopausale dyremodeller, såsom kastrationsdyremodeller, røntgenbestrålingsdestruktion af ovariedyremodellen (Li et al., 2012), {{ 2}}vinylring Dyremodel for udtømning af ethylenfollikel (Brooks et al., 2016), en dyremodel for alkohol-induceret ovarieskade (Huang et al., 2007), en dyremodel for perimenopausal depression (Miao et al., 2017a,b), en dyremodel for peri-menopausalt syndrom med hedeture (Zhang et al., 2010), naturlig peri-menopausal dyremodel (Cai et al., 2007) osv. Forskellige dyremodeller har deres egne applikationer og deres egenskaber. Denne undersøgelse er baseret på dyremodelanalyse af karakteristika ved kliniske symptomer på det perimenopausale syndrom (Tian et al., 2015) i henhold til den nye metode til evaluering af traditionel kinesisk medicin-dyremodel etableret i den tidlige fase af vores laboratorium (Tian et al. al., 2017a,b) og udarbejdelsen af ​​en dyremodel for det perimenopausale syndrom (Draft) (Miao et al., 2018). Denne undersøgelse blev brugt perimenopausale modelrotter med den ufuldstændige kastrationsmetode, og denne dyremodel er meget brugt til at studere perimenopausale kvinder med osteoporose, fedme, åreforkalkning og andre tilstande, og den brugte også studierne om faktorer relateret til østrogenvirkning, som f.eks. forholdet mellem østrogen og autoimmunitet, kræft (Sun og Jin, 2005), og modellen har høj succesrate, moden og stabil, og er meget brugt af forskere. Derudover syntetiserer æggestokken ikke kun østrogen, men deltager også i kroppensimmunfunktion, udskiller og syntetiserer andre hormoner. Og funktionen af ​​de menneskelige perimenopausale æggestokke er ikke fuldstændig tabt, dyremodellen for ufuldstændig kastration er tættere på menneskelig perimenopause. Det er mere i overensstemmelse med karakteristika ved kliniske symptomer.

4.2. Valg af positiv kontrol

Denne undersøgelse tog Gengnian'an kapsel som det positive kontrollægemiddel, Gengnian'an kapsel er et klinisk anerkendt lægemiddel til behandling af perimenopausalt syndrom, det kan effektivt forbedre det perimenopausale syndrom kliniske symptomer på tidevandsfeber med svedtendens, vertigo og tinnitus, vågenhed, rastløshed og andre. Og kliniske og eksperimentelle undersøgelser har vist, at Gengnian'an kapsel regulerer den endokrine ogimmunfunktioner hos perimenopausale patienter som helhed og kunne forbedre de kliniske symptomer hos perimenopausale kvinder på forskellige måder. Det har en god terapeutisk effekt på perimenopausalt syndrom (Ou et al., 2011; Wang et al., 2010; Yu et al., 2010; Li og Liu, 2011; Xie, 2003).

PhenylethanoidglykosiderafCistancheUrthar enNeuroendokrin-immunfungere

4.3. Virkninger på det neuroendokrine system

Den menneskelige HPO-akse er et koordineret neuroendokrint system, og det styres af centralnervesystemet. Under normale omstændigheder udskiller hypothalamus GnRH og fremmer syntesen og frigivelsen af ​​FSH og LH i hypofysen og fremmer derved udskillelsen af ​​kønshormoner og væksten og udviklingen af ​​folliklerne. Interaktionen af ​​HPO holder kvindelige reproduktive endokrine relativt stabile. Når kvinder kommer ind i den perimenopausale periode, falder ovariefunktionen, sekretionen af ​​østrogen falder, og den negative feedback til hypothalamus og hypofysen svækkes, hypofysen udskiller en stor mængde FSH og LH, hvilket fører til en ubalance af HPO, en lidelse af et endokrine system, og dermed overvære symptomerne på hedeture, svedtendens, osteoporose og andre relaterede symptomer.

Ændringerne i FSH- og LH-indhold er direkte udtryk for hypofysesekretionsfunktion. Ændringerne i GnRH- og -EP-indhold afspejler direkte sekretionstilstanden af ​​hypothalamus i HPO-aksen. Sekretionen af ​​E2 og T bestemmes af æggestokkens funktionelle status. Hypothalamus, hypofysen, livmoderen og andre væv har ER-fordeling, AR er bredt fordelt i centralnervesystemet og hjernebarken, så det kan repræsentere funktionen af ​​HPO-aksen og afspejle tilstanden af ​​det neuroendokrine system, som påvisningen af ​​FSH , LH, GnRH, - EP, E2, T, ER, AR i det relevante væv, serum og plasma. Derudover kan niveauet af BGP direkte afspejle osteoblasternes aktivitet (Xun og Wang, 2017), østrogen kan hæmme antallet og aktiviteten af ​​osteoklaster, det har en indvirkning på knoglemetabolismen, bestemmelsen af ​​dette indeks kan afspejle de perimenopausale rotter. tilfælde af osteoporose. Derfor testede dette eksperiment de ovennævnte biokemiske indikatorer og observerede patologiske ændringer af livmoder og æggestokke hos perimenopausale rotter for bedre at bestemme effekten afphenylethanoidglykosiderpå det neuroendokrine system hos perimenopausale rotter.

4.4. Virkninger på immunfunktionen

Thymuskirtlen er en vigtig centralimmunorgan (Han og Lu, 2017), og det er også et endokrint organ. Under perimenopause-perioden, på grund af manglen på fysiologisk østrogenstimulering og reduktionen af ​​intracellulære østrogenreceptorer, kan thymusstrukturen reduceres og sekretionen af ​​thymosin reduceres, atrofien af ​​thymus vil uundgåeligt direkte påvirke den cellulæreimmunfunktion, og det har en indirekte effekt på humoral immunitet. De immunaktive celler i thymus kan frigive polypeptidfaktorer og videregive informationen til det neuroendokrine system, hvilket producerer relevante fysiologiske eller patofysiologiske reaktioner, såsom niveauet af østrogen er sænket, det kan reducere produktionen af ​​IL-2 , -EP og andre immunmodulerende stoffer iimmunceller. Milten er den største perifereimmunorgan og det er også et sted at modtage antigen stimulering og immunrespons. Milten og thymus er vigtige komponenter i kroppens immunsystem. Derfor kroppensimmunfunktion kan indirekte reagere med thymus og miltindeks.

I denne artikel, gennem undersøgelsen af ​​thymus, miltorganindeks, histopatologiske ændringer, thymus corticale tykkelse, tykkelsen af ​​miltknuder osv., svarer det, at PGC har en effekt på at forbedreimmunfunktion af perimenopausale modelrotter og forbedring af de patologiske ændringer i thymus og milt.

5. Konklusion

Hver dosis PGC kunne ikke kun modvirke forstyrrelsen af ​​kønshormoner (E2, T, FSH, LH) i perimenopausalt syndrom, øge kønshormonniveauerne, men også forbedre ubalancen i niveauerne af androgenreceptoren (ER, AR), og også forbedre kroppensimmunfunktion og korrigering af osteoporose, kan det forbedre og genoprette organindekset i de relaterede organisationer og forbedre de patologiske ændringer i livmoderen, thymus og milten. Derudover har PGC, sammenlignet med GC, ingen signifikant forskel i den horisontale-lodrette bevægelse, organindeks, kønshormonforstyrrelser osv. Selv ved forbedring af E2-niveauet i serum reducerede niveauet af FSH i serum, forbedrede ekspressionsniveau af ER i livmoderen og hypothalamus, og de patologiske ændringer af beslægtede væv, som er mere effektive end GC, især PGC-HD og PGC-MD. Dette indikerer, at PGC er reguleret af den endokrine ogimmunsystemet som helhed spiller det ikke blot rollen som østrogen, men forbedrer symptomerne og livskvaliteten ved forskellige mekanismer, det giver et eksperimentelt grundlag for en bred vifte af kliniske anvendelser for DesertlivingCistancheurtog udvikling af nye lægemidler til traditionel kinesisk medicin. I opfølgningen af ​​denne undersøgelse udføres relevante mekanismer for at klarlægge den specifikke virkningsmekanisme forphenylethanoidglykosiderfra det neuroendokrine-immunnetværk i behandlingen af ​​det perimenopausale syndrom.

Derudover viste denne undersøgelse, at PGC kunne øge niveauet af BGP i serum fra perimenopausale modelrotter, og det har en effekt på knoglemetabolisme, hvilket tyder på, at PGC kan have en bedre terapeutisk effekt på osteoporose forårsaget af perimenopause syndrom, den relevante forskning at osteoporose forårsaget af perimenopause syndrom kan udføres i det senere stadium, og udvikle nye applikationer. Denne undersøgelse giver et godt eksperimentelt grundlag for den nye kliniske anvendelse af PGC, og den giver nye forskningsidéer til undersøgelse af lignende lægemidler.

Erklæring om forfatterbidrag

Mingan Miao og Xiumin Li designede og guidede eksperimenterne, Mingsan Miao, Xiumin Li, Shuo Tian, ​​Ming Bai, Yanyi Wu og Zhenzhen Wei udførte eksperimenterne og analyserede de målte data, Miao Mingsan og Xiumin Li lavede den endelige konklusion. Begge forfattere anmeldte manuskriptet.

Anerkendelser

National international samarbejdsbase (2016-65); lærd i det centrale Kina (162101510003); Videnskabeligt og teknologisk gennembrud i Henan-provinsen (162102310181). Vi takker hr. Henry Ehrlich for at have læst og redigeret vores manuskript.

PhenylethanoidglykosiderafCistancheUrthar enNeuroendokrin-immunfungere

References

Alvarado-García, A., Hernández-Quijano, T., Hernández-Valencia, M., Negrín-Pérez, MC, Ríos-Castillo, B., Valencia-Pérez, GU, Vital-Reyes, VS, BasavilvazoRodríguez, MA, Torres-Arreola, LP, Ortiz-Luna, GF, Sánchez-Aguirre, F., Montaño-Uscanga, A., 2015. Diagnose og behandling af postmenopausal og perinemopausi. Rev. Med. Inst. Mex. Seguro Soc. 53, 214-225.
Brooks, HL, Pollow, DP, Hoyer, PB, 2016. VCD-musemodellen for overgangsalder og perimenopause til undersøgelse af kønsforskelle i hjerte-kar-sygdomme og metabolisk syndrom. Physiology 31, 250-257.
Cao, S., Tian, ​​S., Bai, M., Liu, SY, Jia, JJ, Miao, MS, 2016. Effekter af Curculigo orchioides totale glucosider i mus perimenopause model af beslægtede organisation og organer Morfologi. Bangladesh J. Pharmacol. 11, S72-S81.
Cai, X., Huang, H., Wang, L., 2007. Fremskridt inden for forskning i klimatiske dyremodeller. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulas 13, 71-73.
Han, SH, Lu, JB, 2017. Effekten af ​​thymektomi på kroppen og nye alternative behandlingsformer. Chin J Cell Mol Immunol 12, 1722-1726.
Huang, C., Zhu, XF, Ye, P., 2007. Fremskridt inden for dyreforsøgsforskning om forebyggelse og behandling af klimakteriets syndrom ved traditionel kinesisk medicin. Journal of Jiangxi University of TCM 19, 92–93.
Lobo, RA, Davis, SR, De Villiers, TJ, Gompel, A., Henderson, VW, Hodis, HN, Lumsden, MA, Mack, WJ, Shapiro, S., Baber, RJ, 2014. Forebyggelse af sygdomme efter overgangsalderen . Climacteric 17, 540-556.
Li, H., Liu, GZ, 2011. Klinisk undersøgelse om behandling af klimakterisyndrom med gengnianan kapsel. J. Shanxi Coll. Tradition. Hage. Med. 2, 34-35.

Li, Y., Song, YY, Zhang, HQ, 2010. Fremskridt inden for forskning af kemiske bestanddele og medicinsk aktivitet af cistanche. Hage. Vilde Plante Res. 29, 7-11.

Liu, YL, Song, ZM, Ding, Y., 2010. Eksperimentel undersøgelse af forholdet mellem overgangsalderens depression og hippocampus og cortex 5-HTR1A mRNA. Lishizhen medicin og materia medica forskning 21, 1898-1900.

Li, RQ, Bai, M., Miao, MS, 2012. Karakteristika og udsigter for dyremodeller for overgangsalderens syndrom. Kinas tidsskrift for kinesisk medicin 27, 708-710.
Miao, MS, Guo, L., Wang, T., Wang, T., Cao, S., Liu, SY, Fang, XY, 2015. Effekter af curculigo totale glykosider på perimenopausalt syndrom rotter model baseret på endokrine hormoner teori. Basic Clin. Pharmacol. Toxicol. 117, 5-6.
Miao, MS, Tian, ​​S., Bai, M., Xin, WY, 2017a. Totale glucosider af Curculigo rhizom til perimenopausal periode musemodel. Pak. J. Pharm. Sci. 30, 975-978.
Miao, MS, Tian, ​​S., Guo, L., Bai, M., Fang, XY, Liu, SY, 2017b. Effekten af ​​Curculigoside på en musemodel af perimenopausal depression. Saudi J. Biol. Sci. 24, 1894-1902.
Miao, MS, Tian, ​​S., Xin, WY, Bai, M., 2018. Standard (udkast) til udarbejdelse af perimenopausal syndrommodel. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 3, 996-1000.
Ou, Y., Zhang, YP, Xu, J., Kong, DM, 2011. Eksperimentel undersøgelse af effekten af ​​ligustrum lucidum-forbindelse på reguleringen af ​​neuro-endokrine -immunfunktion hos ældre hunmus. J. Guiyang Coll. Tradition. Hage. Med. 33, 18-19.
Perrone, G., Capri, O., Galoppi, P., Patacchioli, FR, Bevilacqua, E., De Stefano, MG, Brunelli, R., 2013. Menopausale symptomer efter seponering af langvarig hormonbehandling hos kvinder under 60: en 3-års opfølgning. Gynecol. Obstet. Undersøg. 76, 38-43.
Peng, X., 2014. Den seneste udvikling inden for traditionel kinesisk medicin til det perimenopausale syndrom. CJGMCM 29, 1118-1120.
Shi, HB, Miao, YB, Zhong, CL, Wang, W., 2007. Effekt af Fushun-granulat på det neuroendokrine system hos rotter med menopause-yin-mangel. Chinese Journal of Traditional Medical Science and Technology 14, 16-17.
Sun, YH, Jin, RM, 2005. Fremskridt i forskning om etablering af kvindelige klimasyndrom-dyremodeller. Lishizhen medicin og materia medica forskning 16, 570-573.
Tian, ​​S., Miao, MS, Bai, M., Wei, ZZ, 2017a.Phenylethanoidglykosiderafcistancheom overgangsalderens syndrommodel hos mus. Saudi Pharmaceut. J. 25, 537-547.
Tian, ​​S., Bai, M., Miao, MS, 2015. Kliniske træk i dyremodeller baseret på det perimenopausale syndrom. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulas 21, 217-221.
Tian, ​​S., Cao, LH, Miao, MS, Bai, M., 2017b. En ny metode til evaluering af dyremodeller brugt i traditionel kinesisk medicin baseret på de kliniske karakteristika af kinesisk og vestlig medicin. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica 33, 165-169.
Wang, R., Fu, Q., Li, LF, Ma, SP, 2010. Effekt af gengnianan kapsel på ovariektomi af hunmus. Pharmaceutical and Clinical Research 18, 247-249.
Wang, T., Miao, MS, Li, Y., Li, M., Zhang, Y., Tian, ​​S., 2016. Effekt af Monomorium flavonoider på morfologien af ​​perimenopausal depression musemodel. Saudi Pharmacertical Journal 24, 322-328.
Wang, WJ, Yu, J., Li, DJ, Bu, SZ, 1999. Observation af ændringerne af miltens ER-, IL-2- og TNF-niveauer i aldrende hunrotter. Chin J Endocrinol Metab 15, 225-228.
Xie, CX, 2003. Georgisk 'en kapsel blev brugt til at behandle 100 tilfælde af climacteric syndrom. Hunan Journal of traditionel kinesisk medicin 6, 44.
Xun, CF, Wang, LZ, 2017. Korrelation mellem østrogenniveauer og ændringer af knoglemetaboliske markører hos perimenopausale kvinder. Mødre- og børnesundhedspleje i Kina 32, 1229-1232.
Yu, LL, Kong, DM, Zhang, YP, 2010. Eksperimentel undersøgelse af virkningerne af gengnianyi kapsel på inkretionsfunktion hos ovariektomiserede rotter. Lishizhen medicin og materialemedicinsk forskning 21, 3131–3132.
Zhang, Y., Miao, MS, 2011. Undersøgelse af almindeligt anvendt traditionel kinesisk medicin, der tonificerer nyre-yang til behandling af klimakteriets syndrom. Kina tidsskrift for kinesisk medicin 26, 1084-1087.
Zhao, W., Pan, YN, 2013. Fremskridt inden for forskning af farmakologisk aktivitet afphenylethanoidglykosideri cistanche. Asia-Pacific Traditional Medicine 9, 77-79.
Zhang, YP, Wang, XX, 2001. Effekt af kunningan pille på reproduktiv endokrin-immunfunktion hos patientermeddet climacteric syndrom. ITCM 18, 52-54.
Zhang, XP, Liu, ZP, Xiang, Q., Wang, W., Zhang, X., Li, N., 2010. Sammenlignende undersøgelse af to hedeture dyremodeller af kvinder i overgangsalderen. Sundhedsforskning 39, 110–111.