Undersøgelse af kemiske bestanddele af Cistanche Deserticola, en kinesisk urtemedicin til næring til nyrerne og styrkelse af Yang
Mar 09, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
Intro
Cistanche deserticolasom tilhører familien af Orobanchaceae er den tørre kødfulde stængel af Cistanche deserticola, som er sød, salt og varm. Det har virkningerne af at tonificere nyrerne, styrke Yang, fugte tarmene og afslappe tarmen. Det bruges hovedsageligt til behandling af impotens, forkølelse og smerter i talje og knæ, infertilitet, tørhed i tarmen og forstoppelse. De farmakologiske virkninger af Cistanche deserticola er også blevet rapporteret.
Instituttet for traditionel kinesisk medicin ved det kinesiske akademi for traditionel kinesisk medicin har udført kemiske og farmakologiske undersøgelser afCistanche deserticola. Det er bevist, at dets ethanolekstrakt påvirker immunsystemet. Ni forbindelser blev adskilt og identificeret som D-Mannitol - Sitosterol, daucosterol, ravsyre, Triacontanol, 8-epibrucin glucosid, betain, koffeinsyreglycolipid og polysaccharidforbindelser. Ud over mannitol og 8-epibrucin glucosid, blev andre komponenter opnået fra Cistanche deserticola for første gang. Koffeinsyreglycolipid, betain, mannitol, ravsyre og andre forbindelser har en række fysiologiske aktiviteter. De har virkninger på immunsystemet, den seksuelle funktion, det kardiovaskulære system, leveren, anti-aging og så videre.
Eksperimentel del
Smeltepunktet blev målt med Boetius PHMK-mikroskopet, og termometeret blev ikke justeret; Massespektrometrien (EI) blev bestemt med MMH 70-70 instrument (UK), og FD blev bestemt ved M-80 gaskromatografi-massespektrometer (Japan); Kernemagnetisk resonans (brintspektrum) blev bestemt af typen JEOL FX 90Q instrument (Japan); ultraviolet spektrum blev bestemt af typen UV-3000 instrument; infrarødt spektrum blev målt med Hitachi type 260-50 instrument, KBr tablettering og silicageler blev fremstillet fra Qingdao marine kemiske anlæg, gel LH-20 blev fremstillet i Sverige. Tørrede kødstængler af Cistanche deserticola blev købt fra Beijing Medicinal Materials Company og identificeret af Zhang Yanzhen.
1. Ekstraktion og separation
Cistanche deserticola knuses, perkoleres med 95 procent ethanol, opløsningsmidlet genvindes, opløses i en lille mængde vand, ekstraheres med ether, silicagelsøjlekromatografi, elueres med petroleumsether-ether (6:4) for at opnå den hvide krystal ( JEG). Vandlaget ekstraheret med ether inddampes, opvarmes og opløses i ethanol, afkøles til opnåelse af flokkulent udfældning (II). Cistanche deserticola er perkoleret med 50 procent ethanol. Ekstraheret med ethylacetat, silicagelsøjlekromatografi, elueret med ethylacetat, 20ml hver (det samme nedenfor) I alt 37 prøver blev opsamlet og undersøgt ved tyndtlagschromatografi. Den del, der indeholdt krystal (III), der oprindeligt strømmede ud, blev kombineret. 24 ~ 37 prøver blev filtreret ud af hvid flokk (II) og inddampet til tørhed. Remanensen blev underkastet silicagelsøjlekromatografi og elueret med butanon-ethylacetat-benzen-vand (4:3:2:0,2). 12 prøver blev indsamlet, hvoraf 8 ~ 11 prøver blev adskilt af orange krystaller; vandlaget ekstraheret med ethylacetat blev ekstraheret ved n-butanol, silicagelsøjlekromatografi og elueret med chloroform-methanol-vand (6:4:1). Den femte prøve opløste en tynd skive krystallisation (IV), den anden del af tyndtlagskromatografien, kombineret med den blå fluorescensdel, anvendte derefter silicagelsøjlekromatografi, elueret med chloroform-methanol-vand (7:3:2,5) ), brugte den samme metode kombineret med den blå fluorescensdel, gennemgik gel LH-20 kolonnen, eluerede med methanol-vand (1:1), Den ottende prøve opløste noget gult pulver (V), fortsæt med at eluere til 37 dele, kombineret med den påkrævede del ovenfor, silicagelsøjlekromatografi, spredt med butanon-ethylacetat-benzen-vand (4:3:2:0,2), afskåret det blå fluorescerende segment og elueret med methanol for at opnå lys brunt pulver (VI).
95 procent ethanolekstrakt, fjernelse af petroleumsether og dichlormethan, opløsning i methanol, lavtrykssilicagelsøjlekromatografi, eluering med methanol-chloroform (9:l), 20 ml hver, 18. ~ 28. dele opløste nogle farveløse krystaller (VII) ; ekstraheret med vand resten af Cistanche deserticola efter ethanolekstraktion, koncentrerede derefter resten, afkøling, opløste et stort antal hvide krystaller (VIII), fjernelse af opløsningen af krystalliseret vand og behandlede derefter med 4 gange mængden af ethanol for at fremstille mere nedbør (IX).
2. Identifikation
Forbindelse I: hvid nålekrystal blev opnået ved omkrystallisation med acetone, smp. 136 ~ 137 grader. Eddikesyreanhydrid-koncentreret svovlsyrereagens viste en positiv reaktion (grøn). EIMS m/z:414(M plus). Tyndtlagskromatografi Rf-værdi og infrarødt spektrum var i overensstemmelse med - Sitosterol-standard, så det er bekræftet som - Sitosterol.
Forbindelse II blev omkrystalliseret ved opvarmning og tilbagesvaling med ethanol to gange for at opnå hvid flokkulent udfældning, smp. 290-291 grader. Eddikesyreanhydrid-koncentreret svovlsyrereagens viste positiv reaktion (grøn), - Naphthol-reagens viste positiv reaktion. EIMS m/z:396 (basetop), 382, 255, 213, 81, 57, 43. Tyndtlagskromatografi var i overensstemmelse med det kendte produkt af daucosterol, og blandingens smeltepunkt faldt ikke. Det blev bekræftet som daucosterol.
Forbindelse III methanolen omkrystalliserede til nogle aflange krystaller, mpl87 ~ 189 grader, pH 2. EIMS m/z:119(M plus 1), 118(M plus), 101, 100, 74, 73, 55 (basistop), 45, 28, 27. IR (KBr) cm-1: 3100 ~ 2500 (bredde, OH), 1690 (C=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. RF-værdien af tyndtlagskromatografi er den samme som for ravsyrestandard. Derudover er det i overensstemmelse med standard massespektrum og standard infrarødt spektrum af ravsyre, og smeltepunktet for blandingen falder ikke. Det er bekræftet som ravsyre
Forbindelse IV omkrystalliseres med ethanol som et hvidt skinnende fast stof, smp. 83 ~ 84 grader. EIMS m/z: 420 (M plus -H20), 57 (basetop). Rf-værdien for tyndtlagschromatografi er den samme som for kendt triacontanol, og blandingens smeltepunkt falder ikke. Ovenstående data er i overensstemmelse med Triacontanol rapporteret i litteraturen.
Forbindelse VI: efter opløsning med acetone blev silicagelsøjlekromatografi udført og elueret med 60 procent methanol for at opnå lysegule tynde amorfe krystaller, som er letopløselige i vand og opløselige i methanol, ethanol og acetone, - Naphthol-reagenset viste positiv reaktion . IR (KBr) cm-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C=C), 1440, 1350 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV X nm (log e): 218 (sh, 4,30), 249 (3,91), 291 (4,08), 330 (4,15). H-NMR (CD3COD3) δ ppm: 1,18 (3H, D, J=6, CH3 på rhamnose), 2,75 (2h, t, J=7,2, 2H på position C), 4,75 ( 1H, D, J=8, C1-H på glucose), 5,17 (1H, D, J=1,8, C1-H på rhamnose), 4,20 ~ 3,30 (12H, m, 2H på position C, 6H på glucose, 4H på rhamnose), 6,27 (1H, D, J=16, 1H på position C), 7,52 (1H, a, J {{76} } Position C (1H), 6,60 (1H, a, J=8, C5 "'-H), 6,90 (1H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7,10 (1H, D, J=2, C2 "'-H), 6,70 (1H, D, J=2, C2-H), 6,65 (1H, D, J {{ 105}}, C5-H), 6,52 (1H, DD, J=8/2, C6-H), H-NMR (DMOS) δ ppm: 7,43 (1H. s, OH), 8,07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), forsvandt efter forværrende vandudskiftning. [a] 22D: - 68.37 grader (C {{126} }.67MeOH). FDMS m/z: 647 (M plus plus Na), 625 (M plus plus 1), 624 (M plus), 479 (M plus 1- rhamnosyl), 478 (M plus -rhamnosyl ), som er i overensstemmelse med molekylformlen C29H36O15. Efter sur hydrolyse af forbindelse VI vises to brune pletter på papirchromat grafik. Rf-værdien stemmer fuldstændig overens med rhamnose og glucose, og smeltepunktet falder ikke, når det blandes med det kendte acteosid. Ovenstående data stemmer overens med 3,4-dihydroxygruppen beskrevet i litteraturen - Phenethoxy-o- - L-rhamnosyl (1 → 3) - 4-o-koffeinsyregruppe- D- glucopyranosid er grundlæggende kræftfremkaldende.
Forbindelse VII er en hvid krystal opnået ved omkrystallisation af acetonemethanol, over smp. 299 grader (nedbrydning), ekstremt opløselig i vand, let udflydende og opløselig i ethanol og methanol. Alkaloidreagens viser en positiv reaktion. Eksperimentelle værdier (procent) af grundstofanalyse: C47.29, H9.16, N10.54; teoretiske værdier (procent): C47,54, H9,52, N11,11. Det er i overensstemmelse med molekylformlen C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) cm-1: 3360 (associeret NH, OH), 2940, 1620 (C=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- NMR (D20) 5 ppm: 3,28 (9 H, s, 3*CH3), 3,88 (2 H, s, CH2), 4,68 (D20). EIMS m/z:117(M plus ), 100, 85, 73, 59, 58 (basistop), 44, 42. Tyndtlagskromatografi er fuldstændig i overensstemmelse med Rf-værdien af betainstandarden og smeltepunktet for blandingen falder ikke. Det nukleare magnetiske resonansspektrum, infrarøde spektrum og massespektrum er i overensstemmelse med standardspektret for betain, så betain genkendes.
Forbindelse IX: opløst i vand, ekstraheret med n-butanol-chloroform (1:4), og urenhederne blev fjernet. Vandlaget blev behandlet med 4 gange mængden af ethanol, bundfaldet blev opløst i vand, affarvet med hydrogenperoxid, og de små molekylære forbindelser blev fjernet ved dialyse. Membranen blev behandlet med 5 gange mængden af ethanol til opnåelse af et lysegult bundfald. Fehlings reaktion var negativ før hydrolysen af bundfaldet, og et brunligt-rødt præcipitat blev produceret efter hydrolyse. Efter syrehydrolyse blev hydrolysatet underkastet papirkromatografi. Sammenlignet med standardsukkeret blev der kun påvist glucose, så det blev bekræftet, at der blev påvist polysaccharider, som hovedsageligt er sammensat af glucose.
