Resultater fra den tyske kroniske nyresygdom (GCKD) undersøgelse understøtter sammenslutningen af relativ telomerlængde med dødelighed i en stor kohorte af patienter med moderat kronisk nyresygdom
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488-497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nephrology. Udgivet af Elsevier Inc. Dette er en artikel med åben adgang under CC BY-licensen
Telomerlængde er kendt for at være omvendt forbundet med aldring og er blevet foreslået som en markør for aldring-relaterede sygdomme. Telomer-nedslidning kan fremskyndes af oxidativt stress og inflammation, som begge er almindeligt forekommende hos patienter med kronisk nyresygdom. Her undersøgte vi, om relativ telomerlængde er forbundet med dødelighed i en stor kohorte af patienter med kronisk nyresygdom stadium G3 og A1-3 eller G1-2 med åbenlys proteinuri (A3) ved indskrivning. Relativ telomerlængde blev kvantificeret i perifert blod ved en kvantitativ PCR-metode hos 4.955 patienter fra GCKD-studiet, en igangværende prospektiv observationskohorte. Komplet fireårig opfølgning var tilgængelig fra 4.926 patienter, hvor vi registrerede 354 dødsfald. Relativ telomerlængde var en stærk og uafhængig prædiktor for dødelighed af alle årsager. Hvert fald på 0.1 relativ telomerlængdeenhed var stærkt forbundet med en 14 procent øget risiko for død (hazard ratio1.14 [95 procent konfidensinterval 1.06-1.22]) i en model justeret for alder, køn, baseline eGFR, urin albumin/creatinin ratio, diabetes mellitus, udbredt hjertekarsygdom, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, rygning, body mass index, systolisk og diastolisk blodtryk, C-reaktivt protein og serumalbumin. Dette oversattes til en 75 procent højere risiko for dem i den laveste sammenlignet med den højeste kvartil af relativ telomerlængde. Sammenhængen var hovedsageligt drevet af 117 kardiovaskulære dødsfald (1,20 [1.05-1.35]) samt 67 dødsfald som følge af infektioner (1.27 [1.07-1.50]). Vores resultater understøtter således en sammenhæng mellem kortere telomerlængde med dødelighed af alle årsager, kardiovaskulær dødelighed og død som følge af infektioner hos patienter med moderat kronisk nyresygdom.
SØGEORD:kronisk nyresygdom; infektioner; dødelighed; relativ telomer længde
Kronisk nyresygdom(CKD) er en kompleks sygdom, og dens arvelighed er blevet estimeret til at være 30 procent –70 procent 0,9-12 I de seneste år har genom-dækkende associationsundersøgelser identificeret mange genetiske loci forbundet med nyrefunktion og CKD.13-17
Indeks enkeltnukleotidpolymorfismer ved de identificerede loci forklarer dog kun en mindre del af arveligheden, og yderligere genetiske bidragydere mangler muligvis. Til dato har kun få små undersøgelser undersøgt sammenhængen mellem TL og nyresygdom. Nogle undersøgelser fandt, at kort TL korrelerer med nedsat nyrefunktion i den generelle befolkning,18,19 såvel som hos hjertesvigtpatienter.20 Vi har for nylig beskrevet signifikant kortere relativ TL (RTL) hos patienter med moderat svær kronisk nyrefunktion, som har udbredt kardiovaskulær sygdom ( CVD),21 samt en sammenhæng med varighed22 og progression af CKD.23 Patienter, der har nået nyresvigt behandlet med hæmodialyse, beskrives som at have reduceret TL i sammenligning med raske kontroller,24-27 og reduceret TL er omvendt forbundet med dødelighed. 28 Kun få undersøgelser er blevet udført hos ikke-dialyseafhængige nyrepatienter.21–23,29,30 Så vidt vi ved, er den aktuelle undersøgelse den første prospektive undersøgelse, der undersøger sammenhængen mellem leukocyt-RTL og årsager til dødelighed i en stor ikke-dialyseafhængig CKD-kohorte.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunktionen
RESULTATER
Baseline karakteristika for undersøgelsespopulationen
RTL blev kvantificeret i perifert blod ved en kvantitativ polymerasekædereaktionsmetode hos 4955 patienter fra det tyskeKronisk nyresygdomundersøgelse. En komplet {{0}}års opfølgning var tilgængelig fra 4926 patienter. Baselinekarakteristika for disse 4926 patienter i henhold til kvartiler af RTL er angivet i tabel 1. RTL varierede fra et minimum på {{10}}.40 til et maksimum på 2.31 (Supplerende figur S1) ), med en middelværdi ± SD på 0.95 ±0.19 og en median på 0.92 (1. kvartil ¼ 0.82; 3. kvartil ¼ 1 .05). RTL var negativt korreleret med alder (r ¼ –{{30}},36, P < 0,001)="" og="" positivt="" korreleret="" med="" estimeret="" glomerulær="" filtrationshastighed="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" og="" urinalbumin–="" kreatininforhold="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" da="" vi="" justerede="" rtl="" for="" alder="" og="" køn,="" observerede="" vi="" ikke="" længere="" en="" signifikant="" korrelation="" med="" egfr="" og="">
Fremadrettet opfølgning og dødelighed
I alt 354 dødsfald indtraf i løbet af en median opfølgningsperiode på 4 år (1483 dage). Dødsårsagerne var CVD inklusive myokardieinfarkt, koronar hjertesygdom, pludselig hjertedød, kongestiv hjertesvigt, lungeemboli, hjerteklapsygdom og iskæmisk slagtilfælde (117 patienter, 33,1 procent), infektioner (67 patienter, 18,9 procent), ikke-iskæmisk cerebrovaskulær årsager (9 patienter, 2,5 procent), perifer vaskulær sygdom (7 patienter, 2,0 procent), nyresvigt (8 patienter, 2,3 procent), forskellige andre årsager (103 patienter, 29,1 procent) og ukendte årsager ( 43 patienter, 12,1 procent).
Kumulative forekomstplot viser, at forekomsten af dødelighed af alle årsager (figur 1a) stiger med kortere RTL, med den højeste forekomst med laveste RTL kvartil. I de kumulative incidensfunktionskurver for kardiovaskulær (figur 1b) og infektionsdødelighed (figur 1c) var forskellen mellem kvartilerne mindre udtalt, men rækkefølgen af kvartilerne var den samme.
Figur 1|Kumulativ incidensfunktion for (a) mortalitet af alle årsager, (b) dødelighed af hjertekarsygdomme (CVD) og (c) død som følge af infektioner, efter kvartiler (Q) af relativ telomerlængde (RTL). Q1 er kvartilen inklusive patienter med den korteste RTL.
Resultater af Cox-regressionsmodeller, der anvender forskellige justeringer, er angivet i tabel 2 og viste en signifikant sammenhæng mellem kortere RTL og risikoen for dødelighed af alle årsager. Evalueret kontinuerligt, var hvert fald på 0.1 RTL-enheder forbundet med en 16 procent øget risiko for død i en model justeret for alder og køn (hazard ratio [HR], 1,16; 95 procent konfidensinterval [CI], 1.08-1.24; P ¼ 1.7e-05). Sammenhængen forblev signifikant efter en udvidet justering for eGFR, urinalbumin-kreatinin ratio, diabetes mellitus og udbredt hjertekarsygdom (model 2: HR, 1,16; 95 procent CI, 1,08-1,24) samt de yderligere CVD-risikofaktorer lav tæthed lipoprotein kolesterol, high-density lipoprotein kolesterol, rygning, body mass index, systolisk blodtryk, diastolisk blodtryk, C-reaktivt protein og serumalbumin ved baseline (model 3: HR, 1,14; 95 procent CI, 1,06-1,22; P ¼ 3,5e-04). Ikke-lineære P-spline-analyser er givet i figur 2 og afslørede en næsten lineær sammenhæng mellem RTL og dødelighed af alle årsager. Patienter med den korteste RTL (1. kvartil) havde en 75 procent højere risiko for dødelighed af alle årsager sammenlignet med dem i kvartilen med den længste RTL (Supplerende tabel S1, fuldt justeret model: HR, 1,75; 95 procent CI, 1,22-2,50 P ¼ 0,0024).
Dernæst analyserede vi, hvad der driver forbindelsen mellem RTL og dødelighed af alle årsager (tabel 2). Vi evaluerede de 2 hyppigste specifikke dødsårsager og observerede, at hvert fald på 0.1 RTL-enheder var forbundet med en 20 procent øget risiko for CVD-død i den fuldt justerede model (HR, 1.2) 0; 95 procent CI, 1.05-1,35; P ¼ 0,0052). Reduceret RTL var også signifikant omvendt forbundet med død på grund af infektioner. Hvert fald på 0,1 enhed af RTL var forbundet med en 1.27-gang højere risiko for død som følge af infektioner (HR, 1,27; 95 procent CI, 1,07-1,50; P ¼ 0,0051). Ser man på estimaterne for de forskellige kvartiler i den supplerende tabel S1, afsløredes det for død som følge af infektioner, at estimaterne for hver af kvartilerne 1, 2 og 3 var tilsvarende forhøjede sammenlignet med det for kvartil 4. Analysen med andre dødsårsager som f.eks. såvel som ukendte dødsårsager var åbenlyst for heterogene og afslørede ikke nogen sammenhæng med RTL (data ikke vist).
Grafen over de skalerede Schoenfeld-residualer og testen på proportionelle fareantagelser antydede ikke nogen tidsvarierende effekter for RTL på nogen af de undersøgte resultater. Underfordelings-HR'erne for både kardiovaskulær og infektionsdød, rapporteret i Supplerende Tabel S2, er kun svagt svækket sammenlignet med de årsagsspecifikke HR'er.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 i de fuldt tilpassede modeller). I betragtning af at vi for nylig observerede en U-formet sammenhæng mellem varigheden af CKD og RTL,22 udførte vi en følsomhedsanalyse, der yderligere justerede for varigheden af CKD ved baseline defineret som mindre end 6 måneder, mellem 6 måneder og 5 år og mere end 5 flere år. Denne yderligere justering resulterede i kun marginale ændringer af HR'erne opnået for alle 3 endepunkter (Supplerende tabel S3).
Cistanche fordel: forbedre nyrefunktionen
DISKUSSION
Resultaterne af denne undersøgelse viste en signifikant sammenhæng mellem RTL og dødelighed af alle årsager i en ikke-dialyseafhængig CKD-kohorte. Kortere RTL var forbundet med en højere risiko for dødelighed uafhængigt af nyrefunktion og traditionelle CVD-risikofaktorer. Denne association var drevet af død på grund af CVD såvel som død på grund af infektioner.
Sammenhæng med dødelighed af alle årsager
Tidligere studier,5,6,31–35med få undtagelser,36,37 har vist en negativ sammenhæng mellem RTL og dødelighed af alle årsager i den generelle befolkning. Den hidtil største undersøgelse (n ¼ 64.637) blev udført af Rode et al., med en justeret HR for dødelighed på 1,40 for decilen med den korteste versus decilen med den længste RTL.35I overensstemmelse med disse resultater viste vores undersøgelse for hvert fald på 0.1 RTL-enheder en 14 procent højere risiko for dødelighed af alle årsager, hvilket oversættes til en 75 procent højere risiko for dem i den laveste sammenlignet med den højeste kvartil af RTL. Så vidt vi ved, er det kun Carrero et al.28har undersøgt sammenhængen mellem RTL og dødelighedsrisiko hos CKD-patienter. De undersøgte 175 patienter med nyresygdom i slutstadiet behandlet med hæmodialyse, hvoraf 70 døde i løbet af en median på 31 måneders observation. Forfatterne observerede, at TL uafhængigt forudsagde patientens overlevelse efter yderligere justering for alder, køn og inflammation. Den nuværende undersøgelse udvider disse observationer til den meget større gruppe af individer med CKD, som ikke kræver dialyse.
Figur 2|Justerede ikke-lineære splines (og 95 procent konfidensbånd) for sammenhængen mellem stigende relativ telomerlængde (RTL) og hazard ratio (HR) af (a) dødelighed af alle årsager, (b) kardiovaskulær død og (c) død som følge af infektioner . HR er angivet som log-skala på skatterne. Grayline: Justeringsmodel 1 (tilpasset alder og køn). Blueline: tilpasningsmodel 3 (justeret for alder, køn, estimeret [fortsat]
Sammenhæng med CVD-dødelighed
Ingen undersøgelser har hidtil undersøgt sammenhængen mellem RTL og CVD-dødelighed hos CKD-patienter, selvom dette er den vigtigste dødsårsag hos disse patienter. Afhængigt af den undersøgte etnicitet og af datajusteringsmodellerne rapporterede nogle, men ikke alle, undersøgelser i den generelle befolkning en sammenhæng mellem lave RTL- og CVD-udfald.33,38–41Stærk støtte til en årsagssammenhæng kom fra en mendelsk randomiseringsundersøgelse, hvor genetiske varianter forbundet med kortere RTL blev fundet at være forbundet med iskæmisk hjertesygdom.40I denne undersøgelse identificerede vi en signifikant sammenhæng mellem RTL og kardiovaskulære dødsfald, med en 20 procent højere risiko med hvert fald i RTL med 0.1 enheder eller en 75 procent højere risiko for disse patienter i kvartilen med den korteste TL sammenlignet med kvartilen med de længste TL'er. Dette fund er i overensstemmelse med vores tidligere rapport om en sammenhæng med udbredte kardiovaskulære hændelser i denne patientpopulation: hvert fald i RTL med 0,1 enheder var signifikant forbundet med et 6 procent højere odds for udbredt hjerte-kar-sygdomme i en model, der justerede for alder, køn, nuværende rygning, hypertension, diabetes status, low-density lipoprotein kolesterol, high-density
lipoprotein kolesterol, C-reaktivt protein, eGFR og body mass index.21Den prospektive opfølgning hos disse patienter i nærværende undersøgelse afslørede, at især den laveste kvartil af RTL var forbundet med en markant øget risiko, hvorimod de øvrige 3 kvartiler viste meget ens estimater (Figur 1b).
Sammenhæng med dødsfald på grund af infektioner
Selvom eksperimentelle beviser understøtter en rolle af celleældning og kort TL i svækket immunrespons, er epidemiologiske undersøgelser sparsomme, især hos CKD-patienter. Helby et al. gennemførte den største (n ¼ 75.309) prospektive befolkningsbaserede undersøgelse, der undersøgte RTL og risikoen for hospitalsindlæggelse for smitsomme sygdomme og risikoen for infektionsrelateret død. I løbet af 7 års opfølgning observerede de en højere risiko for eventuelle infektioner i kvartilen med den korteste sammenlignet med kvartilen med den længste RTL.42 Tidligere undersøgelser med mindre stikprøvestørrelser rapporterede modstridende resultater.32,43,44Vores fund hos CKD-patienter beskriver for første gang sammenhængen mellem kort RTL og højere risiko for død på grund af infektioner i denne højrisikopopulation.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunktionen
Potentiel mekanisme
Den biologiske mekanisme, der ligger til grund for forholdet mellem RTL og dødelighed, er stadig uklar. Sammenhængen identificeret af vores undersøgelse belyser ikke, om RTL-forkortelse er kausalt relateret til hjerte-kar-sygdomme og infektioner. Et genom-dækkende associationsstudie efterfulgt af en genetisk risikoscore-analyse, der kombinerede ledende varianter på 7 genetiske loci, viste imidlertid en association af allelerne forbundet med kortere RTL med øget risiko for koronararteriesygdom. Dette fund giver mulig støtte til en potentiel kausal rolle af RTL i CVD.45,46Desuden kan cellulær senescens induceret af telomer-nedslidning være en udløser af aterosklerose såvel som arteriosklerose. Akkumuleringen af senescerende celler i karret bidrager til aterosklerotisk plakdannelse og medieforkalkninger, hvilket resulterer i øget arteriel stivhed som et dominerende træk ved uremisk arteriel sygdom.47De fleste af undersøgelserne har målt RTL i DNA'et fra perifere leukocytter. Der er imidlertid vist en tæt sammenhæng mellem leukocyt- og aortavægsvæv TL.48Derfor kan cellulær senescens påvirke endotelceller, hvilket fører til dysfunktion i karvæggen og fremmer adhæsionen af immunceller, en primær begivenhed i åreforkalkning. Desuden aktiverer korte telomerer p53 og autofagi i hjertestamceller, hvilket destabiliserer balancen mellem hvile og proliferation mod differentiering og senescens, hvilket fører til en udmattelse af hjertestamceller.49Telomerdysfunktion har vist sig at inducere dybtgående p53-afhængig undertrykkelse af masterregulatorerne for mitokondriel biogenese og funktion, hvilket fører til bioenergetisk kompromis på grund af nedsat oxidativ fosforylering og generering af adenosintrifosfat.50,51
Der er også flere sammenhænge mellem RTL og infektioner. Tabet af telomerer er blevet observeret under T-celledifferentiering,52ved kroniske virusinfektioner,53og med alderen.54Endvidere er kort leukocyt-TL blevet rapporteret som en risikofaktor ved forskellige immunrelaterede sygdomme55og diabetes.56Leukocytkortere TL forårsager celleældning, der efterfølges af en reduktion af immuncellernes proliferative kapacitet. TL kan også være involveret i aldersrelaterede fald i immunfunktion relateret til utilstrækkelig respons på vacciner og akutte infektioner.57–59En potentiel rolle af TL i infektioner understøttes også af en nylig genom-dækkende associationsundersøgelse i en kinesisk befolkning. Dorjee og kolleger observerede en sammenhæng mellem en TL-reducerende allel og død på grund af luftvejsinfektion.60RTL-nedslidning kan være stærkt udløst af tilstedeværelsen af forhøjet oxidativ stress, en almindelig tilstand ved CKD.61 Adskillige in vitro og in vivo undersøgelser viste, at oxidativ stress accelererer nedslidning af telomerer.62,63Faktisk er telomerer, med deres høje guaninindhold, meget modtagelige for oxidativ skade,64og enkeltstrengede DNA-brud induceret af oxidativt stress kunne være en vigtig faktor for telomerforkortelse under DNA-replikation.65
Cistanche fordel: forbedre nyrefunktionen
Styrker og begrænsninger
Styrker ved denne undersøgelse inkluderer den store stikprøvestørrelse af en veldefineret population med en medianopfølgning på 4 år med næsten ingen tab til opfølgning, homogenitet i undersøgelsespopulationen og en centraliseret vurdering af TL og resultatmål. Målingen af RTL er især af yderste vigtighed, fordi standardisering mellem laboratorier ikke er let at opnå, og derfor bør processen udføres i det samme laboratorium under nøjagtig de samme forhold med hensyn til protokol, referencegen, instrument, personale,66 og DNA udvindingsprocedure.67
Der er nogle begrænsninger for denne undersøgelse. Først blev RTL målt i perifere leukocytter. Det er kendt, at hastigheden af progression til senescens er forskellig blandt lymfocytundergrupper. 59Desværre var der ingen data tilgængelige om blodcelletypesammensætning på tyskKronisk nyresygdomundersøgelse, og det var derfor ikke muligt at undersøge dette aspekt. At kende RTL fra forskellige nyrecelletyper ville være interessant, men det er ikke muligt at opnå i et stort epidemiologisk studie, da dette ville kræve vævsmateriale fra biopsier. Den anden begrænsning omfatter undersøgelsens observationsdesign, som ikke giver mulighed for afklaring af kausalitet eller biologisk mekanisme. For det tredje rekrutterede undersøgelsen hovedsagelig CKD-patienter i stadie G3 eller A3, og resultaterne kan muligvis ikke generaliseres til andre stadier af CKD. For det fjerde kunne sammenhængen med specifikke dødsårsager have været begrænset af statistisk magt, men var stadig til stede for de 2 specifikke hovedårsager til dødsfald. Endelig, selvom vores analyser blev justeret for traditionelle kardiovaskulære risikofaktorer såvel som nyrefunktionsparametre, kan vi ikke udelukke muligheden for resterende konfounding ved ukendt eller umålt
variabler. Det var dog meget interessant at se, at de alders- og kønsjusterede estimater af RTL for forskellige udfald var meget stabile med yderligere justering for de andre variable, hvilket indikerer, at RTL er relativt uafhængig af andre variabler, når data justeres for alder og køn.
Konklusioner
Kort relativ TL kvantificeret fra perifere blodleukocytter var uafhængigt forbundet med dødelighed af alle årsager i løbet af 4 års opfølgning hos patienter med moderat svær CKD. Denne association var drevet af død på grund af CVD såvel som død på grund af infektioner.
Cistanche fordel: forbedre nyrefunktionen
METODER
Studiepopulation
Den tyskeKronisk nyresygdom study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min pr. 1,73 m2 i nærvær af åbenlys proteinuri (stadium G1-G2, A3). Eksklusionskriterier var ikke-kaukasisk etnicitet, solid organ- eller knoglemarvstransplantation, aktiv malignitet inden for 24 måneder før screening, New York Heart Association Stage IV hjertesvigt og lovlig tilstedeværelse eller manglende evne til at give samtykke. De præsenterede laboratorieparametre blev alle målt fra indsamlede bioprøver i et centralt laboratorium som beskrevet tidligere.68 Information om sociodemografiske faktorer, medicinsk og familiehistorie, medicin og sundhedsrelateret livskvalitet blev indhentet af uddannet personale gennem standardiserede spørgeskemaer. Udbredt kardiovaskulær sygdom ved baseline blev defineret som en anamnese med ikke-dødelig myokardieinfarkt, koronararterie-bypass-transplantation, perkutan transluminal koronar angioplastik, slagtilfælde og indgreb i carotisarterierne (carotis-endarterektomi og/eller carotisballonangioplastik eller stentimplantation).
Alle deltagere gav skriftligt informeret samtykke, og undersøgelsen blev godkendt af alle deltagende institutioners etiske udvalg og registreret i det nationale register for kliniske studier (DRKS 00003971). Alle metoder blev udført i overensstemmelse med godkendte retningslinjer og Helsinki-erklæringen. Data indsamles og administreres ved hjælp af Askimed (https://www.askimed.com) som en cloud-baseret webplatform til indsamling og håndtering af sagsrapportformularer og laboratoriedata.
Kliniske endepunkter under prospektiv opfølgning
Som beskrevet for nylig følges 69 patienter på årsbasis af uddannet personale, der skifter ansigt-til-ansigt besøg med telefonbesøg. Under disse besøg opdateres data om indlæggelser, udfaldshændelser og sygehistorie som en del af et struktureret interview. Eventuelle hospitalsudskrivningsrapporter indsamles fra de behandlende læger og/eller hospitaler. Endpoints abstraheres løbende fra disse rapporter af en trænet og overvåget endpoint-komité bestående af 3 uafhængige læger i henhold til et forudspecificeret effektparameterkatalog. Oplysninger om dødsårsagen er hentet fra disse rapporter samt fra dødsattester indsamlet fra folkeregisterkontorerne, hver gang undersøgelsespersonalet informeres om en undersøgelsesdeltagers død.
Den aktuelle analyse inkluderer alle endepunkter, der fandt sted indtil 4-års opfølgning. Hvis en patient gik glip af 4-års opfølgningsbesøg, inkluderede vi alle endepunkter indtil 4,5 år efter det respektive baselinebesøg. Derfor var censureringstiden enten 4-års opfølgningsdato eller 4,5 år efter baseline. Det primære resultat var dødelighed af alle årsager. For at vurdere, om identificerede sammenhænge kunne tilskrives en specifik dødsårsag, blev død fra kardiovaskulære årsager og infektionssygdomme betragtet som sekundære udfald. Gruppen af CVD-død omfattede myokardieinfarkt, koronar hjertesygdom, pludselig hjertedød, kongestiv hjertesvigt, lungeemboli, hjerteklapsygdom og iskæmisk slagtilfælde. Andre dødsårsager blev også registreret, men disse undergrupper var ikke store nok til at udføre yderligere årsagsspecifikke analyser.
Måling af RTL
Genomisk DNA blev ekstraheret fra fuldblod i et centralt laboratorium med Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Tyskland). Den aktuelle analyse var baseret på 4926 patienter, for hvem målinger af RTL i baseline-blodprøver og data om dødelighed var tilgængelige. RTL blev målt i firdobbelt ved anvendelse af en kvantitativ polymerasekædereaktion-baseret assay udviklet af Cawthon70 og modificeret som beskrevet tidligere.71 DNA-prøver blev kørt i 15-ml reaktioner indeholdende 1x Quantifast TM SYBR Green PCR master mix (Qiagen, Hilden, Tyskland), 10 ng DNA, 1 mM telomer-primer eller 250 nm husholdningsgen 36B4-primer. Vi bestemte det relative forhold mellem telomer-gentagelseskopinummer (T) og enkeltkopi-genkopinummer (36B4-gen, der koder for ribosomalt phosphoprotein PO, placeret på kromosom 12; S). T/S-forholdene er proportionale med individuelle RTL. Automatiseringen af denne høje gennemløbsprocedure resulterede i meget gode kvalitetskontrolforanstaltninger med en lav inter-assay-variationskoefficient af T/S-forhold. Et kommercielt tilgængeligt DNA inkluderet i alle de kvantitative polymerasekædereaktionsplader blev brugt til at kontrollere udførelsen af assayet over hele undersøgelsen. Interassay-variationskoefficienten af T/S-forhold for denne prøve analyseret i 112 uafhængige eksperimenter var 9,6 procent før normalisering og faldt til 4,0 procent efter normalisering (Supplerende figur S2).
Statistisk analyse
Vi sammenlignede basislinjekarakteristika for deltagere (tabel 1) ved hjælp af Kruskal-Wallis-testen for kontinuerlige variable og chi-kvadrat-tests for kategoriske variable. Kumulative incidensfunktionskurver blev brugt til at estimere den kumulative forekomst af de forskellige dødsårsager, der tegner sig for den konkurrerende risiko.72 Cox proportional hazards regressionsmodeller blev udført for at evaluere associationerne af RTL med 3 udfald: (i) dødelighed af alle årsager, ( ii) død på grund af CVD og (iii) død på grund af infektioner. For begge årsagsspecifikke endepunkter (ii og iii) blev patienterne censureret, hvis døden skete af en anden årsag. Derudover blev associationer til disse årsagsspecifikke endepunkter undersøgt ved hjælp af overlevelsesregression med konkurrerende risici, idet alle dødsfald fra andre årsager blev betragtet som konkurrerende begivenheder. Derfor rapporteres både årsagsspecifikke HR'er og underafdelings HR'er for død på grund af CVD eller infektioner. Cox proportional hazards-modeller blev monteret ved hjælp af 3 forskellige justeringsniveauer: model 1 justeret for alder og køn; model 2 yderligere justeret for baseline eGFR, urin albumin-kreatinin ratio, udbredt CVD og diabetes; model 3 yderligere justeret for de traditionelle CVD-risikofaktorer af low-density lipoprotein kolesterol, high-density lipoprotein kolesterol, body mass index, rygning, systolisk og diastolisk blodtryk, C-reaktivt protein og albumin. Udvælgelsen af variabler justeret for i de forskellige modeller var baseret på forskellene i de kliniske karakteristika mellem kvartilerne af RTL angivet i tabel 1. I regressionsmodellerne blev RTL analyseret kontinuerligt og som en kategorisk prædiktor (i kvartiler af RTL). I betragtning af at de første resultater indikerede en højere risiko, især for lave værdier af RTL, rapporteres den (årsagsspecifikke) HR også for kvartil 1, 2 og 3 sammenlignet med kvartil 4 som reference (Supplerende tabel S1). Yderligere downstream-analyse var baseret på visuel inspektion af P-spline for at udlede formen af forholdet mellem RTL og dødelighedsrisiko. Vi brugte Spearmans rangkorrelationskoefficient til at vurdere sammenhængen mellem undersøgelsesvariabler. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-værdier<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERENCER
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. En meget konserveret gentagen DNA-sekvens, (TTAGGG)(n), til stede ved telomererne af humane kromosomer. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622-6626.
2. Baird DM. Telomer-dynamik i menneskelige celler. Biochimie. 2008;90:116-121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomerer som biomarkører for aldring og aldersrelaterede sygdomme. Curr Mol Med. 2005;5:197-203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Telomerlængde i Parkinsons sygdom: en meta-analyse. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Leukocyttelomerlængde og alle årsager, kardiovaskulær sygdom og cancerdødelighed: resultater fra individuelle deltagerdata meta-analyse af 2 store prospektive kohorteundersøgelser. Am J Epidemiol. 2017;185:1317-1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Telomerlængde og dødelighed af alle årsager: en metaanalyse. Aging Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomerer og telomerase i nyresundheden. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Er der en sammenhæng mellem inflammation, telomeraseaktivitet og transkriptionsstatus af telomerase revers transkriptase ved nyresvigt? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222-236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Genetisk modtagelighed for kronisk nyresygdom - nogle flere brikker til arvelighedspuslespillet. Front Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Den familiære klynge af nyresygdom og relaterede fænotyper. Med Clin North Am. 2005;89:447-456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Genomomfattende undersøgelser for at identificere risikofaktorer for nyresygdom med fokus på patienter med diabetes. Nephrol skivetransplantation. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Indsigt i nyresygdomme fra genom-dækkende associationsstudier. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549-562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Sammenslutning af eGFR-relaterede loci identificeret af GWAS med hændelse CKD og ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM, et al. Genetiske loci, der påvirker nyrefunktionen og kronisk nyresygdom. Nat Genet. 2010;42:373-375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Nye loci forbundet med nyrefunktion og kronisk nyresygdom. Nat Genet. 2010;42:376-384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Genetiske associationer ved 53 loci fremhæver celletyper og biologiske veje, der er relevante for nyrefunktionen. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et al. Et katalog over genetiske loci forbundet med nyrefunktion fra analyser af en million individer. Nat Genet. 2019;51:957-972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Sammenhæng mellem nyrefunktion og telomerlængde: hjerte- og sjælsundersøgelsen. Am J Nephrol. 2012;36:405-411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. Kort telomerlængde er forbundet med nedsat nyrefunktion hos japanske personer med kardiovaskulær risiko. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. Renal dysfunktion er forbundet med kortere telomerlængde ved hjertesvigt. Clin Res Cardiol. 2009;98:629-634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Forening af relativ telomerlængde med kardiovaskulær sygdom i en stor kronisk nyresygdomskohorte: GCKD-undersøgelsen. Åreforkalkning. 2015;242:529-534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Har telomerer højere plasticitet end antaget? Resultater fra den tyske undersøgelse af kronisk nyresygdom (GCKD) som en højrisikopopulation. Exp Gerontol. 2015;72: 162-166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Forening af relativ telomerlængde med progression af kronisk nyresygdom i to kohorter: effektmodifikation ved rygning og diabetes. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. For tidlig aldring af cirkulerende T-celler hos patienter med nyresygdom i slutstadiet. Nyre Int. 2011;80:208-217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Telomerisk G-hale længde og hospitalsindlæggelse for kardiovaskulære hændelser hos hæmodialysepatienter. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117-2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Stress-induceret for tidlig senescens i mononukleære celler fra patienter i langvarig hæmodialyse. Am J Nyre Dis. 2005;45:353-359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Telomeraseaktiviteten er nedsat i perifere mononukleære blodceller hos hæmodialysepatienter. Am J Nephrol. 2006;26:91-96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Telomer-nedslidning er forbundet med inflammation, lave fetuin-A-niveauer og høj dødelighed hos udbredte hæmodialysepatienter. J Intern Med. 2008;263:302-312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Telomer-nedslidning, nyrefunktion og udbredt kronisk nyresygdom i USA. Oncotarget. 2017;8:80175-80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Telomeraseaktivitet hos patienter med stadium 2-5D kronisk nyresygdom. Nefrologia. 2017;37:592-597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Sammenhæng mellem fedt, telomerlængde og dødelighed: data fra NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198-204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Leukocyttelomerlængde og dødelighed i kardiovaskulær sundhedsundersøgelse. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421-429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Leukocyttelomerlængde og dødelighed i National Health and Nutrition Examination Survey, 1999-2002. Epidemiologi. 2015;26:528-535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Telomerlængde og dødelighed i Ludwigshafen risiko- og kardiovaskulær sundhedsundersøgelse. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Perifert blod leukocyttelomerlængde og dødelighed blandt 64 637 individer fra den generelle befolkning. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Leukocyttelomerlængde og dødelighed blandt amerikanske voksne: effektmodifikation ved fysisk aktivitetsadfærd. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et al. Leukocyttelomerlængde og epigenetisk-baseret risikoscore for dødelighed: sammenhænge med dødelighed af alle årsager blandt ældre voksne. Epigenetik. 2018;13:846-857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Sammenhæng mellem forkortet leukocyttelomerlængde og kardiometaboliske resultater: systematisk gennemgang og meta-analyse. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Leukocyttelomerlængde og risiko for kardiovaskulær sygdom: systematisk gennemgang og meta-analyse. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Kort telomer længde og
iskæmisk hjertesygdom: observationelle og genetiske undersøgelser i 290.022 individer. Clin Chem. 2016;62:1140-1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Leukocyttelomerlængde og kardiovaskulær sygdom hos afroamerikanere: Jackson Heart Study. Åreforkalkning. 2017;266:41-47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. Kortere leukocyttelomerlængde er forbundet med en højere risiko for infektioner: en prospektiv undersøgelse af 75.309 individer fra den generelle befolkning. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Sammenhæng mellem telomerlængde i blod og dødelighed hos personer i alderen 60 år eller ældre. Lancet. 2003;361:393-395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Sammenhæng mellem telomerlængde, specifikke dødsårsager og år med sundt liv i sundhed, aldring og kropssammensætning: en befolkningsbaseret kohorteundersøgelse. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identifikation af syv loci, der påvirker middel telomerlængde og deres sammenhæng med sygdom. Nat Genet. 2013;45:422-427.
46. Zhan Y, Hägg S. Telomerlængde og risiko for kardiovaskulær sygdom. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. CDKN2A/p16INK4a-ekspression er forbundet med vaskulær progeria ved kronisk nyresygdom.
Aldring (Albany. NY). 2017;9:494-507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Blod leukocyttelomer DNA indhold forudsiger vaskulær telomer DNA indhold hos mennesker med og uden vaskulær sygdom. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Korte telomerer inducerer p53 og autofagi og modulerer aldersrelaterede ændringer i hjertestamcellers skæbne. Stamceller. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Transkriptionelle coaktivatorer PGC-la og PGC-lb kontrollerer overlappende programmer, der kræves til perinatal modning af hjertet. Genes Dev. 2008;22:1948-1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomerer og mitokondrier i det aldrende hjerte. Circ Res. 2012;110:1226-1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Telomerfluorescensmålinger i granulocytter og T-lymfocytundergrupper peger på en høj.