Renobeskyttende virkninger af en Cistanche-baseret Bushen Kaixuan Tongluo-formel i Db/db-mus via aktivering af CAMP/PKA/CREB-signalvejen

3. Resultater

3.1 Effekter af den Cistanche-baserede Bushen Kaixuan Tongluo-formel på den generelle tilstand af db/db-mus

Mus i den tomme gruppe var aktive og havde blank pels. I modsætning hertil virkede mus i modelgruppen overvægtige, sløve og signifikant mindre aktive. Mus i behandlingsgrupperne viste varierende grader af forbedring i almentilstanden sammenlignet med modelgruppen.

 

 

 

Cistanche-baseret Bushen Kaixuan Tongluo-formel om nyre- og leversundhed

 

3.2 Effekter af formlen på kropsvægt af db/db mus

Gennem hele forsøgsperioden steg kropsvægten af ​​mus i modelgruppen signifikant sammenlignet med den tomme gruppe (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Cistanche-baseret formelgruppen viste den mest udtalte effekt. (Se tabel 2)

3.3 Virkninger på nyrefunktionen

Sammenlignet med den blanke gruppe viste serumkreatinin (Scr) i modelgruppen en opadgående tendens, dog ikke statistisk signifikant, mens blodurinstofnitrogen (BUN), urinalbumin (uALB) og albumin-til-kreatinin ratio (ACR) var signifikant forhøjet (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Virkninger på leverfunktion og lipidmetabolisme

Sammenlignet med den tomme gruppe var ALT, AST, total kolesterol (TC) og triglycerider (TG) signifikant forøget i modelgruppen (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Virkninger på glukosemetabolisme

Sammenlignet med den tomme gruppe var niveauerne af fastende blodsukker (FBG), leptin (LEP), glykosyleret serumprotein (GSP) og insulin (INS) signifikant forhøjet i modelgruppen (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Cistanche-baseret formelgruppe, der viser den bedste effekt. (Se tabel 5)

 

3.6 Virkninger på nyrehistopatologi

HAN farvning: Den tomme gruppe viste normal nyrearkitektur med regulær glomerulær morfologi og intakte tubulære epitelceller. Modelgruppen udviste uregelmæssige glomeruli, moderat mesangial celleproliferation, inflammatorisk infiltration og vakuolær degeneration i tubulære epitelceller. Disse patologiske træk blev lindret i grupperne med lav-, mellem- og højdosisformel og irbesartan. (Se figur 1)

PAS-farvning: Den tomme gruppe viste minimal ekstracellulær matrix (ECM) aflejring. Modelgruppen havde markeret ECM-akkumulering og fortykkede basalmembraner. Behandlingsgrupperne viste varierende grader af forbedring. (Se figur 2)

Masson farvning: Den tomme gruppe afslørede normal glomerulær struktur med minimal kollagenaflejring. Modelgruppen viste omfattende blåfarvet kollagen i glomeruli og renalt interstitium. De patologiske forandringer blev lindret i alle behandlingsgrupper. (Se figur 3)

 

3.7 Virkninger på p-PKA og p-CREB ekspression i nyrevæv

Sammenlignet med den blanke gruppe var p-PKA- og p-CREB-farvning i nyrevævet i modelgruppen signifikant reduceret (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 Effekter på p-PKA, PKA, p-CREB, CREB og Bcl-2 proteinekspression

Sammenlignet med den tomme gruppe viste modelgruppen signifikant nedsat ekspression af p-PKA/PKA, p-CREB/CREB og Bcl-2 (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Cistanche-baseret formelgruppe (s<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Diskussion

Selvom traditionel kinesisk medicin (TCM) litteratur ikke eksplicit beskriver diabetisk nyresygdom (DKD), stemmer symptomer som skummende urin med TCM-tilstande såsom "urin turbiditet" og "guan ge." Baseret på årtiers klinisk erfaring udviklede professor Lü CuiyanBushen Kaixuan Tongluo Formel, ved hjælp afCistanchei stedet for Astragalus som monark-urten til tonificering af Qi og Yang, parret med Aconite for at opvarme nyrerne og transformere uklarhed.

Salvia og Hirudo fungerer som urter for at aktivere blod og fjerne blokering af sikkerhedsstillelser, mens Saposhnikovia, Bombyx batryticatus og cikadeslough udviser vind og patogener. Rehmannia og Cornus nærer nyreessens; Achyranthes leder urter nedad; Rosa laevigata, Euryale, Rubus og Cnidium konsoliderer essensen; Dioscorea styrker milt og nyre. Kombinationen opnår milt-nyre-tonificering, fjernelse af turbiditet og staseopløsning, hvilket viser lovende klinisk effekt.

Moderne farmakologiske undersøgelser viser, at formlens komponenter virker på flere mål for at forbedre nyrefunktionen:

Tanshinone IIAoghirudinhæmmer TGF-/Smad-signalering, reducerer fibrose og mikrokredsløbsforstyrrelser

Saposhnikovia polysaccharidernedregulere NF-KB-medieret inflammation

Iridoid glykosider fra Cornusaktiverer Nrf2/ARE-vejen for at forbedre antioxidantenzymer

Achyranthes sterolermodulerer PI3K/Akt pathway, hæmmer podocytapoptose

Dioscinaktiverer AMPK/mTOR for at regulere autofagi og epitelcellemetabolisme

DecAMP signalvej, central for cellulær energimetabolisme og genekspression, er afgørende for renal homeostase. Adenylatcyclase (AC) genererer cAMP, som allosterisk aktiverer PKA; aktiveret PKA phosphorylerer CREB til dannelse af p-CREB, som translokerer til kernen og initierer transkription af målgener som f.eks.Bcl-2, fremmer anti-apoptotiske virkninger og reducerer nyreskade.

I DKD forstyrrer vedvarende hyperglykæmi cAMP-balancen ved at hæmme AC-funktionen og øge PDE-medieret nedbrydning, hvilket fører til nedsatte cAMP-niveauer. Dette svækker PKA/CREB-signalering, kompromitterer mitokondriel funktion, antioxidantforsvar og anti-apoptotisk genekspression, accelererer glomerulær sklerose og interstitiel fibrose.

Det viser forskningaktivering af cAMP/PKA-vejenhjælper med at opretholde podocytspaltemembranens integritet og reducere proteinuri. DesudenCREBtranskriptionelt inducerer antioxidant enzymer somSOD2, afbødende tubulær oxidativ stress.Bcl-2reducerer også mitokondriel ROS-lækage, beskytter podocytter og tubulære celler under hyperglykæmi.

Gendannelse af normale glukoseniveauer reducerer AGE-akkumulering, lindrer basalmembranfortykkelse og podocytskade. Forbedring af lipidprofiler reducerer renal lipidaflejring og makrofaginfiltration, hvilket forsinker fibroseprogression.

Imidlertid,forskning i, hvordan Bushen Kaixuan Tongluo-formlen påvirker DKD via cAMP-vejen, er fortsat begrænset.

I denne undersøgelse blev db/db mus brugt til at simulere human DKD. DeCistanche-baseret formelsignifikant forbedret nyrefunktion, generel tilstand og metaboliske forstyrrelser hos mus, med gunstige leversikkerhedsprofiler. Histopatologi viste reduceret glomerulær basalmembranfortykkelse, mesangial ekspansion og interstitiel kollagenaflejring - kendetegnende DKD-læsioner.

På molekylært niveau formlenopreguleret mRNA og proteinekspression af PKA, CREB og Bcl-2phosphorylering af PKA og CREB, dervedaktivering af cAMP-vejen, forbedrer antioxidantkapaciteten og genopretter filtreringsbarrierefunktionen.

Konklusion

DeCistanche-baseret Bushen Kaixuan Tongluo Formel:

Forbedrer lever- og nyrefunktion

Korrigerer glukose og lipid metaboliske forstyrrelser

AktiverercAMP/PKA/CREB signalvej

Reducerer nyrefibrose og oxidativt stress

Giver nyrebeskyttelse i DKD

Disse resultater giver et farmakologisk grundlag for dets kliniske anvendelse og understøtter målretning mod cAMP-vejen som en potentiel strategi for DKD-behandling. Fremtidig forskning bør udforske nedstrøms molekyler såsom BDNF for yderligere at belyse mekanismen.