Abstrakt

Objektiv:At undersøge den neurobeskyttende effekt af glycosider af Cistanches (GC'er) i en 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP)-induceret Parkinsons sygdom (PD) musemodel og at udforske den potentielle mekanisme.

Metoder:Fyrre mus blev tilfældigt opdelt i en kontrolgruppe, PD gruppe, GCs gruppe og levodopa (L-DOPA) gruppe (n=10 pr. gruppe). Kontrolgruppen modtog intraperitoneale injektioner af normalt saltvand, hvorimod de andre grupper blev injiceret intraperitonealt med MPTP (30 mg/kg) én gang dagligt i 5 på hinanden følgende dage. Efter modeletablering blev kontrol- og PD-grupperne administreret normalt saltvand intragastrisk én gang dagligt i 28 på hinanden følgende dage. GCs-gruppen og L-DOPA-gruppen modtog intragastrisk administration én gang dagligt i 28 på hinanden følgende dage i doser på henholdsvis 100 mg/kg og 50 mg/kg. Open field-testen og rotarod-testen blev brugt til at evaluere motorens funktion. Immunhistokemi blev udført for at påvise antallet af tyrosinhydroxylase (TH)-positive neuroner i substantia nigra i mellemhjernen. Transmissionselektronmikroskopi (TEM) blev brugt til at observere mitokondriel ultrastruktur i substantia nigra. Biokemiske assays blev brugt til at bestemme niveauer af glutathion (GSH), malondialdehyd (MDA), total superoxiddismutase (T-SOD) og reaktive oxygenarter (ROS) i substantia nigra-væv. Western blotting blev brugt til at vurdere TH, nuklear faktor erythroid 2-relateret faktor 2 (Nrf2), Kelch-lignende ECH-associeret protein 1 (Keap-1) og hæm oxygenase-1 (HO-1) proteinekspression i substantia nigra væv.

 

 

Resultater:Sammenlignet med kontrolgruppen udviste mus i PD-gruppen markant nedsat motorisk funktion, signifikant nedsat T-SOD-aktivitet, tydelige reduktioner i TH-positive neuroner og GSH-indhold og forhøjede MDA- og ROS-niveauer i substantia nigra (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen viste mus i GCs-gruppen forbedret motorisk funktion, øget T-SOD-aktivitet, et højere antal TH-positive neuroner og forhøjet GSH-indhold, ledsaget af nedsatte MDA- og ROS-niveauer (P < 0,05). I kontrolgruppen udviste substantia nigra mitokondrier normal morfologi uden slørede membranstrukturer eller vakuolær degeneration. PD-gruppen viste mitokondriel hævelse, uordnede cristae og vakuolære ændringer; disse patologiske ændringer blev lindret i GCs-gruppen. Sammenlignet med kontrolgruppen var TH-, Nrf2- og HO-1-proteinniveauer signifikant nedreguleret, mens Keap-1-proteinekspression var markant opreguleret i PD-gruppen (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen viste GCs-gruppen signifikant opregulering af TH-, Nrf2- og HO-1-proteinniveauer og en bemærkelsesværdig reduktion i Keap-1-proteinniveau (P < 0,05).

Konklusion:GC'er forbedrer motorisk dysfunktion og dæmper dopaminerge neuronale og mitokondrielle skader i MPTP-inducerede PD-modelmus. Disse effekter kan være forbundet med modulering af Nrf2/HO-1 pathway-relateret proteinekspression, forbedring af antioxidantkapacitet og lindring af oxidativt stress.

Nøgleord:Parkinsons sygdom; glycosider af Cistanches; oxidativ stress; Nrf2/HO-1 sti; dopaminerg neuron; ROS

 

Indledning

Parkinsons sygdom (PD) er den næsthyppigste neurodegenerative sygdom på verdensplan. Patienter har typisk motoriske symptomer såsom hvilende tremor, muskelstivhed, bradykinesi og nedsat postural balance. Med den accelererende befolknings aldring fortsætter antallet af individer med PD med at stige, hvilket i alvorlig grad påvirker livskvaliteten [1]. Nuværende kliniske behandlinger lindrer hovedsageligt symptomer og har stadig svært ved at standse sygdomsprogression. Derfor er screening med lav toksicitet og effektive neurobeskyttende midler fra naturlige produkter blevet et forskningshotspot.

Glycosider of Cistanches (glycosider of cistanches, GC'er) er vigtige aktive bestanddele af Cistanche og udviser antioxidant, anti-apoptotisk og neurobeskyttende virkning [2]. Oxidativt stress refererer til en ubalance mellem produktionen af ​​reaktive oxygenarter (ROS) og kroppens antioxidantforsvarsmekanismer, hvilket resulterer i cellulær skade, inflammation og andre patologiske ændringer [3]. Tidligere undersøgelser [4] har vist, at nuklear faktor erythroid 2-relateret faktor 2 (Nrf2), som en central transkriptionsfaktor, der regulerer redox-homeostase, er et afgørende signalmål, der medierer neuronal beskyttelse. Målretning af Nrf2 antioxidativ stress-vej kan således repræsentere en potentielt effektiv interventionsstrategi til PD-forebyggelse og -behandling.

Vores foreløbige forskning indikerede, at GC'er kan reducere tabet af dopaminerge neuroner i substantia nigra af PD-modelmus og forbedre motorisk funktion [5]. Hvorvidt GC'er udøver anti-Parkinson-effekter via Nrf2/HO-1-signalvejen, er dog stadig uklart. I denne undersøgelse etablerede vi en MPTP-induceret PD-musemodel for at evaluere de neurobeskyttende virkninger af GC'er og yderligere udforske den underliggende molekylære mekanisme.

 

1 Materialer og metoder

1.1 Materialer

1.1.1 Forsøgsdyr

Fyrre 8 uger gamle SPF-grade sunde C57BL/6 hanmus (kropsvægt 21-23 g) blev købt fra Beijing SBF Biotechnology Co., Ltd., produktionslicensnummer: SCXK (Beijing) 2024-0001. Mus blev akklimatiseret i 1 uge før forsøg. Husforholdene var temperatur (23±1)∘C(23 \\pm 1)^\\circ\\text{C}(23±1)∘C, relativ luftfugtighed 50%-60%, ad libitum mad og vand og en 12 timer/12 timer lys/mørke cyklus. Alle procedurer overholdt strengt "Regler for administration af forsøgsdyr" og blev godkendt af den dyreetiske komité ved Baotou Medical College (godkendelsesnr.: 包医伦审〔2022〕第60号).

1.1.2 Reagenser og instrumenter

GC'er (indhold større end eller lig med 85%) blev leveret af Baoji Kosmai Plant Polysaccharide Development Co., Ltd. (Lot No.: KM20220609011). MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin) blev købt fra Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd. (kat.nr.: S31504). Primære antistoffer: tyrosinhydroxylase (TH; Kat. Nr.: 25859-1-AP), Nrf2 (Kat. Nr.: 16396-1-AP), Keap-1 (Kat. Nr.: 10503-2-AP) og HO-1 (Kat. Nr.: 10701 Protein-AP) (USA) var fra Protein-1tech. GAPDH (Kat. Nr.: 48620), -actin (Kat. Nr.: 21338-1) og sekundært antistof (Kat. Nr.: L3012) var fra Signalway Antibody (USA). Universal to-trins detektionskit (kat.nr.: PV-9000) og DAB-kit (kat.nr.: ZLI-9017) var fra Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co., Ltd. PAGE-gelaccelerator (kat.nr.: T8090) var fra Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. (Kat. Nr.: R0010), T-SOD (Kat. Nr.: G4306), GSH (Kat. Nr.: G4305), MDA (Kat. Nr.: G4302) og ROS kit (Kat. Nr.: G1746) var fra Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. Rotarod og open field apparatur fra Shanghai Elektroforeseinstrument var fra Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. Mikropladelæser var fra Thermo Fisher (USA). Paraffinmikrotom og lysmikroskop var fra Leica (Tyskland). Gel billeddannelsessystem var fra Shanghai Tanon Technology Co., Ltd.

1.2 Metoder

1.2.1 Dyregruppering og behandlinger

Mus blev tilfældigt allokeret til fire grupper: Kontrolgruppe, PD gruppe, GCs gruppe og L-DOPA gruppe (n=10 pr. gruppe). Ifølge tidligere litteratur [6] blev en MPTP intraperitoneal injektionsprotokol brugt til at etablere en PD-musemodel. Med undtagelse af kontrolgruppen modtog alle andre grupper MPTP med 30 mg/kg intraperitonealt én gang dagligt i 5 på hinanden følgende dage; kontrolgruppen modtog intraperitoneale injektioner af et tilsvarende volumen normalt saltvand.

Efter modellering blev lægemiddelinterventioner påbegyndt: GCs-gruppen modtog GCs 100 mg/kg ved sonde; L-DOPA-gruppen modtog L-DOPA 50 mg/kg ved sonde; kontrol- og PD-grupperne modtog lige store volumener af normalt saltvand ved sonde. Alle grupper blev behandlet én gang dagligt i 28 på hinanden følgende dage.

1.2.2 Vurdering af motorisk funktion

1.2.2.1 Åben felttest

Et standardiseret åbent felt-apparat blev brugt. Mus blev placeret i det centrale område af et 50 cm x 50 cm x 50 cm kammer og fik lov til at akklimatisere sig i 5 minutter. Derefter optog et videosporingssystem lokomotoriske baner og total rejsedistance over 5 min.

1.2.2.2 Rotarod-test

Mus blev anbragt på en rotarod-anordning. Hastighed steg fra 0 til 30 r/min inden for 30 s, med en samlet testvarighed på 300 s. Latensen til første fald blev registreret. Hver mus blev testet tre gange, og middelværdien blev brugt.

1.2.3 Vævsindsamling

En time efter den endelige administration blev mus bedøvet via intraperitoneal injektion af 0,3% natriumpentobarbital (0,15 ml/10 g). I hver gruppe blev tre mus tilfældigt udvalgt til perfusionsfiksering: hjertet blev eksponeret hurtigt, og mus blev perfunderet med normalt saltvand, indtil leveren blev bleg, efterfulgt af perfusion med 4% paraformaldehyd. Hele hjerner blev fjernet og efterfikseret i 4% paraformaldehyd i 24 timer efterfulgt af dehydrering, indlejring og sektionering. De resterende mus blev kun perfunderet med normalt saltvand; hele hjerner blev opsamlet, substantia nigra-regionen af ​​mellemhjernen blev dissekeret på is, og prøver blev opbevaret ved -80 grader til analyser.

1.2.4 Immunhistokemi (IHC)

Midbrain substantia nigra væv blev paraffin-indlejret og skåret i 5 μm sektioner. Sektioner blev anbragt i natriumcitratbuffer, opvarmet til kogning, derefter afkølet naturligt og vasket med PBS tre gange. Endogent peroxidaseblokerende reagens blev påført ved stuetemperatur i 10 minutter efterfulgt af PBS-vask. Sektioner blev inkuberet med fortyndet TH primært antistof ved 4 grader natten over, vasket med PBS, inkuberet med enhancer-reagens ved stuetemperatur i 20 minutter, vasket, inkuberet med enzymmærket sekundært reagens ved stuetemperatur i 20 minutter og vasket igen. DAB arbejdsopløsning (50 μL) blev påført ved stuetemperatur i 2 min. Sektioner blev skyllet, differentieret, blånet, dehydreret, renset i xylen og monteret med neutral harpiks. TH-positive celletal blev kvantificeret ved hjælp af ImageJ.

1.2.5 Bestemmelse af oxidativ stressindikatorer

Substantia nigra-væv blev vejet, homogeniseret og centrifugeret i 10 minutter (12.000 r/min, 4 grader). Supernatanten blev opsamlet. Assays blev udført strengt i overensstemmelse med kit instruktionerne. Standardkurver blev genereret og brugt til at beregne T-SOD-aktivitet, MDA, GSH og ROS-niveauer i prøver.

1.2.6 Western blotting

Substantia nigra-væv blev lyseret med proteinlysebuffer og proteaseinhibitorer, grundigt homogeniseret og lyseret på is i 30 minutter. Lysater blev centrifugeret ved lav temperatur i 10 minutter (12.000 r/min). Proteinkoncentration blev bestemt ved BCA-assay. Prøver blev fremstillet, denatureret ved 100 grader i 10 minutter og opbevaret til brug. SDS-PAGE blev udført efterfulgt af overførsel til membraner og blokering. Efter TBST-vaske blev membraner inkuberet med primære antistoffer ved 4 grader natten over, vasket, inkuberet med sekundært antistof ved stuetemperatur i 2 timer, vasket igen og udviklet med kemiluminescerende substrat. ImageJ blev brugt til densitometrisk semi-kvantificering.

1.2.7 Transmissionselektronmikroskopi (TEM)

Substantia nigra-væv fra tre grupper blev udtaget. Hver prøve blev hurtigt fikseret med 2,5 % glutaraldehyd elektronmikroskopifiksativ og holdt ved 4 grader natten over, efterfulgt af fiksering med 1 % osmiumtetroxid ved lav temperatur, ethanolgradientdehydrering og epoxyharpiksinfiltration/-indlejring. Ultratynde snit (60 nm) blev farvet med 1 % uranylacetat og blycitrat. TEM blev brugt til at observere mitokondrielle ultrastrukturelle ændringer og til at fange repræsentative billeder.

1.3 Statistisk analyse

GraphPad Prism 10.0 blev brugt til dataanalyse. Normalitet og varianshomogenitet blev testet. Måledata er udtrykt som middel ± SD. Envejs ANOVA blev brugt til sammenligninger mellem flere grupper, og Tukeys post hoc test blev brugt til parvise sammenligninger. P < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

 

2 resultater

2.1 Effekter af GC'er på motorisk funktion i PD-mus

Åbne felttestresultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen udviste PD-gruppen en reduceret total rejsedistance (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen viste GCs-gruppen og L-DOPA-gruppen øget total rejsedistance (P < 0,05) (se fig. . 1A, 1B). Rotarod-testresultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen udviste PD-gruppen en forkortet latenstid til at falde (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen viste GC'er- og L-DOPA-grupperne forlænget latenstid til fald (P < 0,05) (se fig. . 1C).

 

Fig.1 Adfærdspræstation af mus i hver gruppe (x  s, n=10) A, B: Open field test; C: Rotarod test; a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; d: L-DOPA gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

Fig.2 Ekspression af TH-positive celler i mus i hver gruppe og tilsvarende søjlediagrammer ( x  s, n=3) a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; d: L-DOPA gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

Fig.3 TH-proteinekspressionsbånd fra mus i hver gruppe og tilsvarende søjlediagrammer (x  s, n=3) a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; d: L-DOPA gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.2 Effekter af GC'er på TH i substantia nigra af PD-mus

IHC-resultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen var antallet af TH-positive celler i substantia nigra pars compacta reduceret i PD-gruppen (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen viste GCs-gruppen og L-DOPA-gruppen øgede TH-positive celleantal (P < 0,05) (se fig. . 2). Western blot-resultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen var TH-proteinekspression i substantia nigra reduceret i PD-gruppen (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen var TH-proteinekspression i substantia nigra øget i GC'er og L-DOPA-grupperne (P < 0,05) (se fig. . 3).

 

Fig.4 Sammenligning af ROS-indhold i PD-modelmus (x  s, n=3) a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.3 Effekter af GC'er på ROS i substantia nigra af PD-mus

Sammenlignet med kontrolgruppen var substantia nigra ROS-niveauer øget i PD-gruppen (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen var substantia nigra ROS-niveauer faldet i GCs-gruppen, og forskellen var statistisk signifikant (P < 0,05) (se fig. . 4).

2.4 Effekter af GC'er på MDA, T-SOD og GSH i substantia nigra af PD-mus

Sammenlignet med kontrolgruppen var substantia nigra T-SOD-aktivitet og GSH-indhold faldet i PD-gruppen (P < 0,01), mens MDA-indholdet var øget (P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen udviste GCs-gruppen øget T-SOD-aktivitet og GSH-indhold (P < 0,05) og nedsat MDA-indhold (P < 0,05) (se fig. . 5).

 

Fig. 5 Virkningerne af GC'er på MDA, T-SOD og GSH i mellemhjernen substantia nigra hos mus i hver gruppe (x  s, n=3) a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

2.5 Effekter af GC'er på neuronal mitokondriel ultrastruktur i substantia nigra af PD-mus

I kontrolgruppen var substantia nigra neuronale mitokondrier for det meste ovale med intakte indre og ydre membraner og klare grænser; mitokondrielle cristae var velordnede. Sammenlignet med kontrolgruppen udviste PD-gruppen tydelig mitokondriel hævelse, uklare indre/ydre membrangrænser, uorganiserede og delvist knækkede cristae og vakuollignende ændringer. Sammenlignet med PD-gruppen blev mitokondriel ultrastrukturel skade signifikant lindret i GCs-gruppen: mitokondriel morfologi var mere regelmæssig, hævelse og vakuollignende ændringer blev reduceret, og membrangrænsen og kristae-klarheden blev forbedret (se fig. . 6).

 

Fig.6 Virkningerne af GC'er på ultrastrukturen af ​​substantia nigra neuroner i PD mus ×20 000 A: Kontrolgruppe; B: PD-gruppe; C: GCs gruppe; Røde pile indikerer mitokondrier.

 

2.6 Effekter af GC'er på Nrf2/HO-1 pathway-relaterede proteiner i substantia nigra af PD-mus

Western blot-resultater viste, at sammenlignet med kontrolgruppen var Nrf2- og HO-1-proteinekspressionsniveauer faldet i PD-gruppen, mens Keap-1-proteinekspression var øget; forskelle var statistisk signifikante (alle P < 0,01). Sammenlignet med PD-gruppen udviste GCs-gruppen øget Nrf2- og HO-1-proteinekspression og nedsat Keap-1-proteinekspression; forskelle var statistisk signifikante (alle P < 0,05) (se fig. . 7).

Fig.7 Repræsentative Western blot-bånd og kvantitative søjlediagrammer af Nrf2-, Keap-1- og HO-1-proteinekspression i mus i hver gruppe (x  s, n=3) a: Kontrolgruppe; b: PD-gruppe; c: GCs gruppe; **P<0.01 vs Control group; #P<0.05 vs PD group.

 

3 Diskussion

De kernemotoriske symptomer på PD omfatter bradykinesi, rigiditet, hvilende tremor og postural ustabilitet eller gangforstyrrelse [7]. I PD-dyremodeller kan reduceret spontan aktivitet og nedsat motorisk koordination vurderes ved henholdsvis open field- og rotarod-tests [8]. Tidligere undersøgelser [9] rapporterede, at MPTP-inducerede PD-mus viser unormal motorisk funktion, såsom reduceret rejsedistance og forkortet rotarod-latens til at falde. I overensstemmelse med disse rapporter fandt vores undersøgelse, at efter MPTP-administration udviste mus signifikant reduceret rejsedistance og forkortet latens til at falde, hvilket indikerer svækket spontan aktivitet og motorisk koordination. L-DOPA, et almindeligt anvendt klinisk lægemiddel til PD, forbedrede signifikant MPTP-induceret motorisk dysfunktion hos mus, hvilket yderligere understøttede pålideligheden af ​​modellen og adfærdsevalueringen. Efter GCs-intervention blev både rejseafstand og latenstid til at falde væsentligt forbedret, hvilket tyder på, at GC'er kan lindre MPTP-induceret PD-lignende motorisk dysfunktion og kan give beskyttelse mod relateret neuronal skade. Disse resultater giver et eksperimentelt grundlag for yderligere farmakodynamisk evaluering og mekanistiske undersøgelser.

Progressiv degeneration og tab af dopaminerge neuroner i substantia nigra er et kernepatologisk træk ved PD, hvilket fører til dysfunktion af det nigrostriatale dopaminerge system [10]. Tidligere undersøgelser [11] vurderede dopaminerge neuronskader ved TH-immunhistokemi og observerede et signifikant fald i TH-positive celler i PD-modelmus, ledsaget af motoriske abnormiteter. Yildirim et al. [12] rapporterede på samme måde, at antallet af TH-positive celler i substantia nigra var signifikant reduceret i MPTP-inducerede PD-mus. I overensstemmelse med disse undersøgelser viste vores resultater, at MPTP-behandling reducerede TH-positive celleantal og inducerede motorisk dysfunktion, hvilket indikerer skade på det substantia nigra dopaminerge system. L-DOPA-intervention hæmmede delvist faldet i TH-positive celler. GCs-intervention svækkede også signifikant den MPTP-inducerede reduktion i TH-positive celler, selvom de ikke fuldt ud genoprettede dem til normale niveauer. Dette tyder på, at GC'er delvist kan forbedre MPTP-induceret substantia nigra dopaminerge systemskade og kan udøve beskyttende virkninger på dopaminerge neuroner.

Undersøgelser [13-14] har rapporteret, at MPTP inducerer oxidativ stressskade hos mus, manifesteret som mitokondriel strukturel forstyrrelse, nedsat T-SOD-aktivitet, reduceret GSH-indhold og øget ROS- og lipidperoxidationsprodukt MDA-niveauer. I vores undersøgelse udviste MPTP-behandlede mus mitokondriel strukturel skade i substantia nigra, forhøjede ROS- og MDA-niveauer og nedsat T-SOD-aktivitet og GSH-indhold, hvilket bekræfter, at den MPTP-inducerede PD-model, der anvendes her, er pålidelig. Efter GCs-behandling blev mitokondrielle strukturelle skader signifikant hæmmet, ROS- og MDA-niveauer faldt, og T-SOD-aktivitet og GSH-indhold steg, hvilket indikerer en antioxidanteffekt.

Nrf2 er en kerne transkriptionel regulator, der opretholder cellulær redox-homeostase. Dens aktivering fremmer ekspressionen af ​​antioxidantproteiner såsom HO-1 og forbedrer derved cellulær antioxidantforsvarskapacitet [15]. Lu et al. [16] fandt, at Nrf2-proteinekspression var signifikant reduceret i MPTP-inducerede PD-mus. I overensstemmelse med dette observerede vi, at MPTP reducerede Nrf2- og HO-1-proteinekspression, ledsaget af nedsat antioxidantenzymaktivitet og øget lipidperoxidation, hvilket tyder på undertrykkelse af antioxidantforsvar. GCs-behandling vendte signifikant den MPTP-inducerede nedregulering af Nrf2 og HO-1, hvilket antyder, at GC'er kan forbedre antioxidantforsvaret ved at regulere Nrf2/HO-1-signalvejen.

Derudover viste vores undersøgelse, at GC'er reducerede Keap-1-proteinekspression i PD-modelmus. Tidligere forskning [17] viste, at Keap-1 er en vigtig negativ regulator af Nrf2. Under homøostatiske forhold binder Keap-1 Nrf2 og fremmer dets ubiquitinering og proteasomale nedbrydning, og opretholder lavt Nrf2-ekspression. Når Keap-1-funktionen hæmmes, stabiliseres Nrf2 og translokeres til kernen for at inducere antioxidantgener såsom HO-1. Derfor kan GC'er svække Keap-1-medieret hæmning af Nrf2, fremme Nrf2-stabilisering og nuklear translokation og forbedre nedstrøms HO-1-ekspression og derved udøve antioxidative stresseffekter.

GC'er er en effektiv fraktionsblanding sammensat af flere komponenter såsom phenylethanoidglycosider og iridoidglycosider. Tidligere undersøgelser [18] bekræftede, at GC'er kan udøve neurobeskyttende virkninger gennem antioxidant, anti-apoptotiske, antiinflammatoriske virkninger og vedligeholdelse af mitokondriel homeostase, hvilket forbedrer funktionelle underskud i modeller af cerebral iskæmi, Alzheimers sygdom, PD og andre neurologiske skader. Nuværende PD-relateret forskning om GC'er fokuserer for det meste på overordnet farmakodynamisk evaluering, mens den integrerede mekanisme, der involverer mitokondriel struktur og Nrf2/HO-1-vejen, ikke er blevet systematisk afklaret. I denne undersøgelse aktiverede GC'er Nrf2/HO-1-vejen, inhiberede mitokondrielle strukturelle skader og reducerede ROS-medieret oxidativ stress og udøvede derved neurobeskyttende virkninger mod PD.

Echinacosid er den mest udbredte og mest aktive markørkomponent i GC'er og er blevet rapporteret at have signifikant neurobeskyttende aktivitet [7]. Hvorvidt echinacosid medierer anti-PD-neurobeskyttelse via aktivering af Nrf2/HO-1-vejen, skal dog endnu bekræftes. Fremtidige undersøgelser bør fokusere på vigtige monomerer såsom echinacosid for at identificere de vigtigste aktive bestanddele, der er ansvarlige for Nrf2/HO-1 pathway-aktivering og den kerne neurobeskyttende effekt.

Sammenfattende forbedrede GC'er motorisk dysfunktion i PD-modelmus. Mekanismen kan involvere regulering af Nrf2/HO-1-signalvejen, forøgelse af antioxidantenzymaktivitet og dæmpning af ROS-drevet oxidativt stress, og derved producere neurobeskyttende effekter.

 

Referencer

[1] Balestrino R, Schapira AH V. Parkinsons sygdom.Eur J Neuro, 2020, 27(1): 27-42. doi:10.1111/ene.14108.
[2] Cheng N, Wang H, Hao H, et al. Forskningsfremskridt på polysaccharidkomponenter afCistanche deserticolasom potentielle farmaceutiske midler.Eur J Med Chem, 2023, 245: 114892. doi:10.1016/j.ejmech.2022.114892.
[3] Mimura T, Noma H. ​​Oxidativ stress i diabetisk retinopati: En omfattende gennemgang af mekanismer, biomarkører og terapeutiske perspektiver.Antioxidanter, 2025, 14(10): 1204. doi:10.3390/antiox14101204.
[4] Wang K, Han C, Yang J, et al. Benfotiamin beskytter MPTP-induceret Parkinsons sygdom musemodel via aktiverende Nrf2-signalvej.PLoS One, 2024, 19(7): e0307012. doi:10.1371/journal.pone.0307012.
[5] Xu ZP, Wang XY, Yao SQ, et al. Neuroprotektive virkninger af glykosider afCistanchepå MPTP-inducerede Parkinsons sygdom modelmus.J Shenyang Med Coll, 2026, 28(3): 246-251. doi:10.16753/j.cnki.1008-2344.2026.03.004.
[6] Yao SQ, Xu ZP, et al. Neuroprotektiv effekt afCistanche deserticolaglykosider i MPTP-induceret Parkinsons sygdom musemodel involverer Nrf2-aktivering.J Toxicol Environ Health A, 2025, 88(14): 576-588. doi:10.1080/15287394.2025.2470847.
[7] Yang X, Yv Q, Ye F, et al. Echinacoside beskytter dopaminerge neuroner gennem regulering af IL-6/JAK2/STAT3-vejen i Parkinsons sygdomsmodel.Front Pharmacol, 2022, 13: 848813. doi:10.3389/fphar.2022.848813.
[8] Tarakad A. Motoriske træk ved Parkinsons sygdom.Neurol Clin, 2025, 43(2): 279-289. doi:10.1016/j.ncl.2024.12.007.
[9] Yan YQ, Zheng R, Liu Y, et al. Parkin regulerer mikroglial NLRP3 og undertrykker neurodegeneration ved Parkinsons sygdom.Aldrende celle, 2023, 22(6): e13834. doi:10.1111/acel.13834.
[10] Ahumada-Montalva P, Muñoz-Carvajal F, Bórquez-Macaya S, et al. TMBIM6 forbedrer dopaminerge neuronoverlevelse ved at modulere IRE1-vejen ved Parkinsons sygdom.Celledød Dis, 2026, 17(1): 385. doi:10.1038/s41419-025-08391-5.
[11] Sharma R, Neupane C, Pham TL, et al. Tonic aktivering af NR2D-holdige NMDAR'er forværrer dopaminerge neuronale tab hos MPTP-injicerede parkinsonmus.J Neurosci, 2023, 43(46): 7730-7744. doi:10.1523/jneurosci.1955-22.2023.
[12] Yildirim S, Ozkan A, Aytac G, et al. Melatonins rolle i TLR4-medieret inflammatorisk vej i den MTPT-inducerede musemodel.Neurotoksikologi, 2022, 88: 168-177. doi:10.1016/j.neuro.2021.11.011.
[13] Lin ZH, Liu Y, Xue NJ, et al. Quercetin beskytter mod MPP+/MPTP-induceret dopaminerge neurondød ved Parkinsons sygdom ved at hæmme ferroptose.Oxid Med Cell Longev, 2022, 2022: 7769355. doi:10.1155/2022/7769355.
[14] Yue D, Zeng C, Okyere SK, et al. Glycin nano-selen forhindrer oxidativt stress i hjernen og neuroadfærdsmæssige abnormiteter forårsaget af MPTP hos rotter.J Trace Elem Med Biol, 2021, 64: 126680. doi:10.1016/j.jtemb.2020.126680.
[15] Yordanov Y, Stefanova D, Kondeva-Burdina M, et al. Kilder til oxidativ stress i Parkinsons sygdom: veje og terapeutiske implikationer.Antioxidanter, 2026, 15(2): 187. doi:10.3390/antiox15020187.
[16] Lu R, Zhou X, Zhang L, et al. Nrf2-mangel forværrer Parkinsons sygdom ved at forværre NLRP3-inflammasomaktivering i MPTP-inducerede musemodeller og LPS-inducerede BV2-celler.J Inflamm Res, 2024, 17: 6277-6295. doi:10.2147/jir.s478683.
[17] Delobel V, Grenier C, Boulestreau R, et al. Endothelial TRIM47 regulerer blod-hjernebarriere-integritet og kognition via KEAP1/NRF2-signalvejen hos mus.Commun Biol, 2026, 9: 399. doi:10.1038/s42003-026-09628-5.
[18] Wang L, Wu LE, Jia J X. Farmakologiske virkninger af Roucongrong (Cistanches herba) og dets forskningsfremskridt inden for sygdomme i centralnervesystemet.Chin Arch Tradit Chin Med, 2024, 42(3): 50-54. doi:10.13193/j.issn.1673-7717.2024.03.008.

 

Prøvekøb/fabriksoplysninger (leverandør af Cistanche-ekstrakt)

Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd. (WECISTANCHE)beskrives som en stor producent/leverandør med fokus på Cistanche-urteindustrialisering og Cistanche-ekstraktprodukter, etableret i 2003 og med hovedkontor i Luopu County, Xinjiang, Kina. Profilen angiver, at den har en integreret Cistanche-industrikæde, herunder frøavl, dyrkningsbaser, frisk materialeindsamling og lagerkapacitet og en GMP-produktionsfacilitet. Indholdet "Om os" viser certificeringer såsom China SC, HACCP, organisk-relaterede certificeringer (inklusive NOP), og angiver flere Cistanche-relaterede patenter (f.eks. membranseparationsteknologi).

 

Kontakt (fra det leverede Om os-indhold):

E-mail: wallence.suen@wecistanche.com

Adresse: No.1, Floor 26, Unit 1, Building 6, No.133 Sheng'an Street, High-tech District, Chengdu, China (Sichuan) Pilot Free Trade Zone.

Kilde: "Om os - WECISTANCHE" (https://www.xjcistanche.com/about-us)

 

Hvis du vil, kan jeg også:

konverter dette til enjournal-klar Word-stil(IMRAD-overskrifter, figurforklaringer bevares), eller

generere ennøgleordsrig grafisk abstrakt tekst(til indeksering/SEO på et laboratoriewebsted), eller

pudse englænderne tilindfødt videnskabelig stilmens den oprindelige betydning bevares uændret.