Forberedelsesteknologi til Wenyang Tongbian-granulat

Abstrakt:

ObjektivFor at bestemme og optimere præparationsteknologien for Wenyang Tongbiangranules.

MetoderVandafkog blev ekstraheret. Indholdet af echinacea-glycosid i monarchdrug og udbytteforbindelsen blev brugt som indekser. L9 (34) ortogonale test blev brugt til at optimere ekstraktionen af ​​Wenyang Tongbian granulat. Den bedste formningsproces blev optimeret baseret på granuleringssværhedsgrad, formbarhed og partikeludbytte. Resultater Den optimale ekstraktion omfattede tilføjelse af 10 fold vand og ekstraktion 3 gange, 1 time hver gang. Den bedste dannelsesproces: typen af ​​hjælpemateriale wasdextrin, forholdet mellem hjælpestoffer var 1∶0,9, og det bedste befugtningsmiddel var 85% ethanol. Konklusion Ekstraktions- og støbeprocessen er stabil og rimelig, enkel og gennemførlig, med god reproducerbarhed, hvilket kan danne grundlag for den industrielle produktion af Wenyang Tongbian-granulat.

Nøgleord: Wenyang Tongbian granlue; ortogonal test; udvinding; støbning

NY URTEFORMULERING TIL NYREYANG MANGEL

Support Service Of Wecistanche

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/tlf.:+86 15292862950

Yang mangel forstoppelseer almindelig hos ældre og kvinder. Behandlingsmetoden bør ikke være simpel udrensning. Warming Yang-metoden kan opnå gode resultater [1]. Wenyang Tongbian Granulat er et præparat på hospitalet udviklet på baggrund af den kliniske erfaring fra professor Lin Aizhen fra Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine i behandling af funktionel obstipation hos ældre. Den er sammensat af Cistanche deserticola, kanelbark, astragalus og Atractylodes macrocephala. I formlen har Cistanche deserticola funktionerne at tonificere nyre-yang og gavne essens og blod, og er den vigtigste medicin, der varmer yang; kanelbark har funktionerne til at opvarme meridianer og frigøre blodkar, genopbygge ild og støtte yang; astragalus har funktionerne at hæve yang og genopbygge qi, opsnævre sår og fremme vævsregenerering; og Atractylodes macrocephala har funktionerne til at styrke milten og genopbygge qi, udtørre fugt og fremme diurese.

Undersøgelser har vist, at phenylethanolglycosider er de vigtigste aktive ingredienser i Cistanche deserticola [2]. Blandt dem er echinacoside og verbascoside de karakteristiske ingredienser til kvalitetskontrol af Cistanche deserticola som specificeret i den kinesiske farmakopé. Liu Xianhong et al. [3] konkluderede gennem in vivo humane forsøg, at Cistanche deserticola er velegnet til klinisk behandling af forstoppelse og kan behandle både symptomerne og den grundlæggende årsag. De vigtigste kemiske komponenter i kanelbark omfatter flygtige olier, polysaccharider, flavonoider osv. Moderne farmakologiske undersøgelser har vist, at kanelbark har farmakologiske effekter såsom vasodilatation, antimavesår og antibakterielle virkninger [4]. Astragalus polysaccharider, flavonoider og astragalosid IV er de vigtigste kemiske komponenter, der udøver immunmodulerende virkninger [5]. Atractylodes macrocephala styrker milten og regulerer tarmfloraforstyrrelser og kan bruges klinisk til behandling af gastrointestinal dysfunktion [6]. Den originale recept bruges hovedsageligt i afkog til kinesisk medicin, men den har ulemper såsom besvær ved afkog, stor dosering og besvær med at bære. For at gøre denne kliniske erfaringsrecept udbredt i klinisk praksis, blev den udviklet til granulat. Dette eksperiment brugte pastaudbyttet og indholdet af echinacosid, den vigtigste aktive ingrediens i hovedmedicinen, som indikatorer, fortsatte med at bruge den traditionelle vandafkogningsproces og brugte L9 (34) ortogonale testmetode til at optimere mængden af ​​tilsat vand , afkogstid og afkogstider i ekstraktionsprocessen for at opnå den bedste ekstraktionsproces. Samtidig blev granulatstøbningsprocessen undersøgt for at bestemme en stabil og rimelig støbeproces, der giver en reference til pilotproduktion, kvalitetskontrol og klinisk anvendelse af præparatet [7-8].

1 Instrumenter og reagenser

1.1 Instrumenter

Alliance e2695højtydende væskekromatograf, 2998 diode array detektor (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 analytisk balance (Precisa, Schweiz), UPT-11-10T ultrarent vandmaskine (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dobbeltfrekvens CNC ultralydsrenser (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Forsøgsmedicin

Vin Cistanche skiver(batchnummer: 2322050113, produceret i Indre Mongoliet), kanelskiver (batchnummer: 2323020103, produceret i Guangxi), astragalus-skiver (batchnummer: 2323020105, produceret i Gansu), Atractylodes (makrocephala-skive 1 Z02-1 skive: 802, Z02-2-1 ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., alle skiver er identificeret som autentiske af Chen Shuhe, chefapoteker ved Institute ofTraditionel kinesisk medicinfra Hubei Provincial Hospital for Traditionel Kinesisk Medicin og er kvalificeret i henhold til 2020-udgaven afkinesisk Farmakopédel I). Echinacoside referencestof(batchnummer: 111670-201907, renhed: 91,8 %, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrin (batchnummer: 230102), majsstivelse (batchnummer: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), saccharose (batchnummer: TF28221205), mikrokrystallinsk cellulose (batchnummer: TF471211001), batchnummer:lactose (batchnummer: lactose (batchnummer: TF28221205) TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metoder og resultater

2.1 Bestemmelse af echinacosidindhold

2.1.1 Kromatografiske forhold: Agilent 5 TC-C18 (250 nm×4,6 mm, 5 μm) blev brugt som kromatografisk kolonne; methanol blev anvendt som den mobile fase A, 0,1% myresyreopløsning blev anvendt som den mobile fase B, gradienteluering (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 min.

29,5 %A, 54-55 min., 29,5 % → 26,5 %A; 55-60min., 26,5 %A); flowhastighed 1.0 mL·min-1; kolonnetemperatur 30 grader; diode array detektor, detektionsbølgelængde 330 nm; injektionsvolumen 10μL; teoretisk pladetal beregnet ud fra echinacoside-toppen bør ikke være mindre end 3000[9].

2.1.2 Fremstilling af referenceopløsning

Tag en passende mængde echinacosid, vej nøjagtigt 9,65 mg, anbring den i en 25 ml målekolbe, tilsæt 50 %

methanol for at opløses og fortyndes til mærket som referencestamopløsning. Pipetter 1 mL echinacosid-stamopløsning nøjagtigt i en 25 mL målekolbe, tilsæt 50 % methanol for at fortynde til mærket, ryst godt, og klargør en referenceopløsning indeholdende 14,17 ug pr. 1 mL [9].

2.1.3 Fremstilling af testopløsning

Tag ca. 0,5 g tørt pastapulver, mal det til pulver, vej det nøjagtigt, kom det i en konisk flaske med brun prop, tilsæt 50 mL 50 % methanol nøjagtigt, stop det godt, ryst det godt, vej det, ultralydsbehandle det i 40 min (effekt 250 W, frekvens 45 kHz), lad det køle af, vej det igen, tilsæt 50 % methanol for at kompensere for den tabte vægt, ryst det godt, lad det stå, tag supernatanten, filtrer det, og tag filtratet.

2.1.4 Klargøring af negativ prøveopløsning

Tag ca. 0,5 g af det tørre pastapulver med formlen uden vin Cistanche-medicinske materialer, og klargør den negative prøveopløsning i henhold til metoden under "2.1.3".

2.1.5 Specificitetstest

Pipetter testopløsningen, referenceopløsningen og den negative prøveopløsning nøjagtigt, og mål i henhold til de kromatografiske betingelser under "2.1.1". Optag kromatogrammet. Resultaterne er vist i figur 1. Der er ingen interferens med den negative prøve. Resultaterne viser, at metoden har god specificitet.

Fig. 1 Specifikt kromatogram af Wenyang Tongbian-granulat

2.1.6 Lineær sammenhængsundersøgelse

Tag en passende mængde echinacosid, vej det nøjagtigt til 10,11 mg, kom det i en 25 ml målekolbe, tilsæt 50 % methanol for at fortynde det i en række koncentrationer af referenceopløsning, og injicer det i henhold til de kromatografiske betingelser under "2.1 .1" for at bestemme toparealværdien af ​​echinacoside. Tegn en standardkurve med injektionsmængden af ​​echinacosidereference som den vandrette akse (ug, X) og toparealets integralværdi som den lodrette akse (Y), og udfør lineær regression.

Regressionsligningen er Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Resultaterne viser, at toparealets integralværdi af echinacosid-injektionsmængden er i et godt lineært forhold mellem 1,4850 og 371,2392 ug.

2.1.7 Præcisionstest

Aspirer nøjagtigt 10 μL af referenceopløsningen (massekoncentration på 37,12 ug·mL－ 1) under "2.1.6", injicer 6 gange, noter spidsarealværdien for henholdsvis echinacoside og beregn RSD-værdien til at være 1,1 %, hvilket indikerer at instrumentet har god præcision.

2.1.8 Repeterbarhedstest

Tag den samme tørre pasta, mal den til pulver, vej nøjagtigt 6 portioner, som hver er ca. 0,5 g, og læg dem i en konisk flaske med brun prop. Udtræk efter metoden under "2.1.3", bestem indholdet og beregn. Resultaterne viser, at det gennemsnitlige indhold af echinacosid i prøven er 1,46 mg·g-1, og RSD-værdien er 2,7%, hvilket indikerer, at denne metodes repeterbarhed er god.

2.1.9 Stabilitetstest

Tag den samme prøveopløsning, træk nøjagtigt 10 μL, og injicer den inden for henholdsvis 0, 2, 4, 8, 12, 18 og 24 timer. RSD-spidsværdien er 0,71 %, hvilket indikerer, at prøveopløsningen har god stabilitet inden for 24 timer.

2.1.10 Prøve-gendannelsestest

Vej nøjagtigt 6 portioner af den samme batch af testprøver, 0,24 g hver, og anbring dem i en konisk flaske med brun prop. I overensstemmelse med masseforholdet 1:1 af komponenterne i testprøven, tilsæt nøjagtigt 0,9 mL af echinacoside-referencestoffet (massekoncentrationen er 371,24 ug·mL－ 1) under "2.1.6", Forbered testopløsningen efter metoden under "2.1.3", bestem det kromatografiske topareal af echinacoside og beregn indholdet. Resultaterne viser, at den gennemsnitlige genvindingsrate for echinacoside er 101,09 %, og RSD-værdien er 1,6 %.

2.2 Forsøgsplan og evalueringsindikatorer

Mængden af ​​tilsat vand (A), ekstraktionstid (B) og antal ekstraktioner (D) blev udvalgt som de faktorer, der skulle undersøges. Tre faktorniveauer blev fastsat i henhold til resultaterne af den tidligere enkeltfaktorundersøgelse, se tabel 1. Den ortogonale testtabel L9 (34) blev brugt i forsøget, se tabel 2. Testen brugte udbyttet af pasta og indholdet af echinacosid som evalueringsindikatorer til at undersøge den optimale vandindvindingsproces.

Fane 1 Faktor og niveau for den ortogonale test

2.2.1 Ortogonal test

I henhold til receptforholdet, vej 18 portioner af hver medicinsk smag, 55 g hver, og udfør vandafkogsekstraktion i henhold til det ortogonale designskema i tabel 2. Hver gruppe har 2 parallelle portioner. Afkogningen filtreres gennem en 80-maskesigte, filtratet kombineres, afkøles, afkogningsvolumenet måles, 50 mL pipetteres nøjagtigt i en fordampningsskål, der er blevet vejet konstant, inddampet til tørhed og tørret under reduceret tryk ved 60 grader for at opnå den ortogonale forsøgsprøve tørpasta. Beregn pastaudbyttet (pastaudbytte=(tørpastavægt × medicinsk væskevolumen) / (50 × afkogsstykkevægt) × 100 %). Ifølge de kromatografiske betingelser under "2.1.1" og metoden under "2.1.3" blev ekstraktionsmængden af ​​echinacosid i de 9 grupper af ortogonale testekstrakter bestemt henholdsvis. Echinacosid-ekstraktionsmængde=tør pastavægt × echinacosidindhold/vin Cistanche afkog stykkevægt. Omfattende score=echinacoside-indhold ÷ maksimalt indhold × 0,5 × 100 % + pastaudbytte ÷ maksimalt pastaudbytte × 0,5 × 100 % [10]. Resultaterne er vist i tabel 2.

Som vist i tabel 3, idet man tager pastaudbyttet og echinacosidindholdets omfattende score som evalueringsindikatorer, viser området R-værdien i tabellen, at de primære og sekundære virkninger af hver faktor er D > B > A; variansanalyseresultaterne viser, at D-faktoren (udkogstider) er statistisk signifikant (P < 0.05), og D3-niveauet er valgt; A-faktoren (vandtilsætning) og B-faktoren (afkogstid) er ikke statistisk signifikante (P > 0,05). I betragtning af at vandabsorptionshastigheden for de medicinske materialer i dette præparat er relativt høj (155%), og kombineret med faktorer som faktiske produktionsbehov, vælges de optimale ekstraktionsbetingelser som A2B1D3, det vil sige tilsætning af 10 gange vand, afkogning 3 gange, hver gang i 1 time.