Eksisterende T-celle-immunitet mod SARS-CoV-2 i ueksponerede sunde kontroller i Ecuador, som påvist med en COVID-19 interferon-gamma-frigivelsesanalyse

ABSTRAKT

Baggrund: Undersøgelser af T-celle-immunresponser mod SARS-CoV-2 er vigtige for at forstå individers eller populationers immunstatus. Her bruger vi en enkel, billig og hurtig fuldblodsstimuleringsanalyse - en Interferon-Gamma Release Assay (IGRA) - til at studere T-celleimmunitet over for SARS-CoV-2 hos rekonvalescerende COVID-19-patienter og ueksponerede sunde kontakter fra Quito, Ecuador. Metoder: Interferon-gamma (INF-g) produktion blev målt i det hepariniserede blod fra rekonvalescente og ueksponerede forsøgspersoner efter stimulering i 24 timer med SARS-CoV-2 Spike S1 proteinet, Receptor Binding Domain (RBD) proteinet eller henholdsvis Nucleocapsid (NP) proteinet. Tilstedeværelsen af ​​IgG-RBD-proteinantistoffer i begge undersøgelsesgrupper blev bestemt med en "in-house" ELISA. Resultater: Målt med INF-g-produktion havde 80 procent af de rekonvalescente COVID-19-patienter, alle IgG-RBD-seropositive, et stærkt T-cellerespons.

Men uventet havde 44 procent af ueksponerede raske kontroller, alle IgG-RBD-seronegative, et stærkt virusspecifikt T-cellerespons med COVID-19 IGRA, sandsynligvis på grund af tidligere eksponering for almindelig forkølelsesfremkaldende coronavirus eller andre virale eller mikrobielle antigener. Konklusion og diskussion: Den høje procentdel af ueksponerede raske forsøgspersoner med en allerede eksisterende immunitet tyder på, at en del af den ecuadorianske befolkning sandsynligvis har SARS-CoV-2-reaktive T-celler. I betragtning af at IGRA-teknikken er enkel og let kan skaleres op til undersøgelser, hvor der er behov for et stort antal patienter, kan denne COVID{10}} IGRA tjene til at afgøre, om T-celle-reaktionen repræsenterer beskyttende immunitet mod SARS-CoV -2 infektion i en populationsbaseret undersøgelse. © 2021 Forfatterne. Udgivet af Elsevier Ltd på vegne af International Society for Infectious Diseases.

På samme tid, når vores immunitet er lav, er der mange måder at forbedre immuniteten på, indtagelse af fødevarer, der kan øge immuniteten, såsom cistanche, polysacchariderne, proteinerne, aminosyrerne og andre stoffer indeholdt i cistanche kan ofte regulere kroppensimmune system.

Klik cistanche tubulosa ekstrakt pulverprodukt

Introduktion

Immunresponset på SARS-CoV-2-infektion involverer ikke kun antistofproduktion, men infektionen udløser også et T-cellerespons hos patienter (Lipsitch et al., 2020, Ni et al., 2020). Generelt udføres bestemmelsen af ​​tilstedeværelsen og størrelsen af ​​et specifikt hukommelses-T-cellerespons på denne coronavirusinfektion med en ELISPOT-analyse ved at fastslå antallet af lymfocytter, der producerer IFN-g efter stimulering med sygdomsspecifikke antigener eller peptider (Ni). et al., 2020, Pai et al., 2014, Abate et al., 2013, Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al., 2020, Sekine et al., 2020).

Til denne teknik isoleres perifere blodmononukleære celler (PBMC'er) fra frisk hepariniseret blod ved densitetsgradientcentrifugering; sekretionen af ​​cytokiner fra individuelle T-celler kvantificeres med mikroskop eller med et specielt apparat – ELISPOT-pladelæseren. ELISPOT-analysen er en "kun for forskningslaboratorier"-teknik, der er meget besværlig, teknisk krævende, relativt dyr og ikke let kan bruges i et klinisk laboratorium eller anvendes i befolkningsbaserede undersøgelser. På grund af omkostningerne, infrastrukturen og laboratoriekravene, der er nødvendige for at udføre analysen, kan dens brug i ressourcebegrænsede omgivelser som Ecuador være minimal.

Cellulære immunresponser kan også bestemmes med en mere ligetil analyse: en interferon-gamma-frigivelsesanalyse (IGRA). Denne analyse, en in vitro-blodprøve, kvantificerer T-celle-udskilte cytokiner (dvs. gamma-interferon (IFN-g); dog kan andre cytokiner som TNF eller IL-2 også kvantificeres) ved stimulering af fuldblodet (ikke kun de isolerede lymfocytter) med specifikke antigener (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013). Det udskilte cytokin IFN-g måles med et ELISA-assay, en let tilgængelig teknik i de fleste laboratorier, og resultaterne aflæses med en ELISA-pladelæser. IGRA'er har fundet en anvendelse i det kliniske laboratorium og bruges til at bestemme en latent infektion med Mycobacterium tuberculosis (MTB) samt til at måle cytomegalovirus (CMV)-specifik cellemedieret immunitet og forudsige CMV-infektion hos transplantationsmodtagere (Pai et al. , 2014, Abate et al., 2013). Disse IGRA-tests er blevet grundigt evalueret, og sammenlignet med ELISPOT-analysen har de vist sig at vise lignende evner til at forudsige MTB- eller CMV-infektion. Desuden er adskillige kommercielle og FDA- eller CE-mærkede assays til at påvise immunitet mod TB eller CMV tilgængelige og udføres bredt.

I denne undersøgelse undersøger vi brugen af ​​en COVID-19 IGRA og vurderer omfanget af IFN-g-frigivelse hos rekonvalescente COVID-19-patienter og sunde COVID-19-naive kontroller som reaktion på specifikke antigener af SARS-CoV-2-virus: RBD-proteinet; S1-delen af ​​Spike-proteinet; eller nukleocapsid (N) proteinet. Derudover bestemmer vi tilstedeværelsen af ​​SARS-CoV-2-specifikke IgG-antistoffer i de deltagere med en "in-house" ELISA (Amanat et al., 2020, Guevara et al., 2021). Vi viser, at en betydelig procentdel af ueksponerede donorer har SARS-CoV-2-reaktive T-celler, og vi diskuterer disse resultater.

materialer og metoder

Rekonvalescerende COVID-19-patienter, sunde kontroller og omgivelserne

Denne undersøgelse blev udført i Quito, Ecuador, i september 2020. Der blev ikke brugt statistiske metoder til at forudbestemme stikprøvestørrelsen. Tabel 1 viser karakteristikaene for de 32 patienter i denne undersøgelse: tretten rekonvalescente COVID-19-patienter, alle med ikke-svære COVID-19-symptomer/-tegn og en positiv RT-PCR-diagnose i juni 2020; og 17 ueksponerede sunde kontroller. Disse sunde kontroller havde været ekstremt forsigtige under pandemien, undgå kontakt med andre mennesker og selvrapporterede ingen af ​​de typiske tegn og symptomer på COVID-19 i pandemiens varighed, såsom feber, en vedvarende hoste, eller tab af lugt eller smag. Desuden blev to asymptomatiske SARS-CoV-2-bærere inkluderet i denne undersøgelse. Disse to forsøgspersoner viste aldrig symptomer eller tegn på COVID-19-sygdom; RT-PCR-teknikken blev dog udført på dem som et krav for en arbejdstilladelse i juni 2020 og resulterede i positive diagnoser.

Serologi

Serologi og IGRA'er for alle patienter og kontroller blev udført i løbet af de sidste to uger af september 2020, tre måneder efter RT-PCR-diagnosen af ​​de rekonvalescente patienter. For at bestemme tilstedeværelsen af ​​coronavirus-specifikke IgG-antistoffer i vores undersøgelsesgruppe blev en "in-house" SARS-CoV-2-receptorbindingsdomæne (RBD) IgG ELISA (9, 10) brugt.

Interferon Gamma Release Assay (IGRA)

Til IGRA blev en hepariniseret blodprøve taget (4 ml) og opdelt i alikvoter på 250 ml og stimuleret med henholdsvis 2 mg/ml af RBD-proteinet (isoleringsprocedure fra reference 9) eller 2 mg/ml af det kommercielt tilgængelige Nucleocapsid (N) protein eller Spike (S1) protein (ViroGen, katalognumre: henholdsvis 00,221-V og 00,226-V). En dosiskoncentration-responskurve med blod fra IGRA-positive og IGRA-negative patienter blev brugt til at bestemme antigenernes optimale koncentration til stimulering i IGRA. Ved 2 ug/ml blev et maksimalt IFN-g-respons i blod fra COVID-19-personer fundet uden stimulering i de uinficerede kontroller. For hver deltager blev en ustimuleret kontrol (NIL) inkluderet, og vi analyserede en 250 ml blodprøve med mitogenet phytohæmagglutinin (PHA), en positiv kontrol for at vurdere blodprøvens cytokinresponshastighed. Stimulering blev realiseret i en 96-brønd fladbundet ELISA-plade ved 37 C i 24 timer. Plasma blev høstet, og IFN-g-produktion blev bestemt med en Human IFN-g ELISA (MaxTM Standard Set Biolegend kat. nr. 430.101).

Resultater

RBD IgG ELISA viste, at alle COVID{0}} symptomatiske patienter (RT-PCR-positive) var positive for IgG-antistoffer mod RBD-proteinet tre måneder efter RT-PCR-diagnosen. De to asymptomatiske RT-PCR-positive patienter og alle raske ueksponerede kontrolpatienter var seronegative med denne ELISA (se tabel 1). Resultaterne af fuldblodsstimulering i COVID-19 IGRA-analysen er vist i figur 1. Stærk induktion af IFN-g-produktion blev fundet hos 80 procent af de COVID-19-symptomatiske patienter med alle tre antigener, men N-proteinet og S-proteinet var de mest potente stimulatorer af et IFN-g-respons (figur 1 A, B, C). De to asymptomatiske, men RT-PCR-positive patienter (patienter 14 og 15), begge uden specifikke SAR-CoV-2-antistoffer, viste også et stærkt inducerbart T-celle-immunitetsrespons. Af de COVID-19 naive patienter udviste 45 procent inducerbar T-celleimmunitet. Responsen i disse raske ueksponerede kontroller med en T-celle-respons var statistisk set ikke signifikant forskellig i størrelse fra de rekonvalescente COVID-19-patienter for nogen af ​​de stimulerende antigener (p-værdi=0.271, 0,437, og 0,719 for henholdsvis RBD-, N- og S1-proteiner).

Figur 1. IFN-g-produktion efter stimulering af fuldblod fra rekonvalescerende COVID-19-patienter og raske ueksponerede kontroller med RBD-, N- eller S1-protein.

Resultaterne af stimulering af rekonvalescente patienter og kontroller med henholdsvis RBD-, N- eller S1-proteinet er vist i fig. 1A, B og C. I fig. 1D er INF-g-responserne for hver patient og på de tre antigener er grupperet. Patienter med bekræftet COVID-19-infektion er nummereret 1-15, hvoraf patienter 14 og 15 var asymptomatiske. Forsøgspersoner 16-33 er COVID{11}}-naive patienter.

Efter 24 timers stimulering blev IFN-g-koncentrationer i plasma bestemt ved hjælp af et kommercielt tilgængeligt humant IFN-g-enzym-koblet immunosorbent assay-baseret kit (Biolegend kat. nr. 430,101). Stimuleringens størrelse blev udtrykt som den optiske tæthed ved 450 nm (OD450) for blod stimuleret med antigen minus OD450 for blod uden antigenstimulering. En OD på 1,0 svarede til ca. 400 pg/ml IFN-g. Phytohæmagglutinin (PHA) blev brugt som mitogen i en slutkoncentration på 5 mg/ml i IGRA for at vurdere kvaliteten og reaktionskapaciteten af ​​blodet. Alle patienter og kontroller viste en maksimal produktion af cytokinet med dette mitogen med en gennemsnitlig optisk densitet (OD450) på 2,54 (SD=0.13), hvilket repræsenterer ca. 1000 pg/mL IFN-g. Der var ingen forskel i median-IFN-g-niveauet i det ustimulerede blod fra rekonvalescente patienter og raske kontroller (OD450=0.38, SD=0.14 versus OD450=0.32. SD=0.16). Disse resultater er ikke vist. Der er tegnet en vandret linje i hver graf for at repræsentere afskæringsværdien for stimulering. Denne værdi blev bestemt ved at beregne middelværdien plus to standardafvigelser af responsen fra ni forsøgspersoner (patienter 16, 18, 19, 22, 27-31) i kontrolgruppen med den laveste INF-g-produktion efter stimulering.

Diskussion og konklusioner

Ved at bruge en let-at-udføre fuldblodsanalyse, der vurderer T-celle-responser, fandt vi ud af, at de fleste rekonvalescente patienter og en betydelig andel af raske ueksponerede individer havde et specifikt og stærkt T-celle-respons bestemt med produktionen af ​​INF-g efter stimulering med SARS-CoV-2-specifikke antigener (figur 1). Adskillige undersøgelser, der alle anvender ELISPOT-assayet, har rapporteret tilstedeværelsen af ​​en T-celle-respons hos de fleste eller alle rekonvalescente COVID-19-patienter (Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al. , 2020, Sekine et al., 2020, Moderbacher et al., 2020, Mateus et al., 2020, Peng et al., 2020).

Med hensyn til en T-cellerespons hos raske ueksponerede kontroller er der imidlertid rapporteret responsrater mellem 28 og 50 procent (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch et al., 2020, Sagar et al., 2020) og flere undersøgelser rapporterer ingen T-cellerespons hos COVID-19 naive kontrolpatienter (de Vries, 2020, Moderbacher et al., 2020, Schwarzkopf et al., 2021). De fleste af disse undersøgelser blev udført med ELISPOT-assayet, men i Italien og USA er en IGRA også blevet brugt til at påvise SARS-CoV-2 T-cellerespons (Petrone et al., 2020, Murugesan et al. ., 2020). I begge undersøgelser blev der påvist et specifikt T-cellerespons hos rekonvalescente patienter; IGRA påviste dog ikke et INF-g-respons hos raske ueksponerede forsøgspersoner.

Eksisterende T-celle-immunitet mod SARS-CoV-2 hos COVID-19-naive forsøgspersoner er blevet gennemgået i flere publikationer (Altmann og Boyton, 2020, Dosho et al., 2020, de Vries, 2020, Sette og Crotty, 2020). Årsagen til, at en specifik COVID-19 T-celle-respons kan detekteres hos et sundt ueksponeret individ, er stadig uklar og er genstand for spekulationer. De fleste ELISPOT-undersøgelser med COVID-19-naive forsøgspersoner brugte humane blodprøver, der stammede før SARS-CoV-2-virussen blev opdaget i 2019, altså før nogen chance for eksponering. Af denne grund konkluderede disse ELISPOT-undersøgelser, at T-celleresponset hos ueksponerede raske forsøgspersoner sandsynligvis kommer fra tidligere kontakt med cirkulerende "almindelig forkølelse" coronavirus (Grifoni et al., 2020, Matheus et al., 2020) eller tidligere eksponering for influenza. og/eller CMV-vira (Mahajan et al., 2020) eller andre virale eller mikrobielle antigener (Tan et al., 2020). Vores undersøgelse brugte blod taget under pandemien fra frivillige, der selv rapporterede ingen kontakt, var seronegative for COVID-19-antigenet RBD og aldrig havde vist nogen tegn eller symptomer på COVID-19.

Derfor kan vi ikke udelukke, at T-celleresponset i nogle af vores COVID-19 "naive" sunde kontroller kommer fra asymptomatiske SARS-CoV-2 virusinfektioner. Patient 14 og 15 i vores undersøgelse er et eksempel på dette. Disse personer blev klassificeret som COVID-19-patienter på grund af en positiv RT-PCR; de var dog asymptomatiske og udviklede ikke et antistofrespons mod RBD-proteinet, men begge viste et stærkt T-cellerespons.

Det er muligt, at disse to asymptomatiske patienters immunsystem efter SARS-CoV-2 kolonisering af nasopharynx efterlod dem med en hukommelses-Tcells-only-respons, og ingen SARS-CoV-2-specifikke antistoffer var induceret. En anden forklaring er, at T-celle-responset kommer fra en tidligere corona-lignende infektion, og det allerede eksisterende T-celle-immunrespons beskyttede disse to patienter mod udviklingen af ​​et mere invasivt sygdomsmønster. Eksisterende krydsreaktive T-celler kan være væsentlige til at forklare nogle af forskellene i infektionsrater eller patologi (Le Bert et al., 2020, Sagar et al., 2020). Med hensyn til kohorten af ​​naive kontroller udelukkede vi, at denne gruppe indeholder et betydeligt antal SARSCoV-2-inficerede individer med uopdaget asymptomatisk infektion, grundlæggende fordi alle integranderne i kontrolgruppen er IgG-seronegative for RBD-antigenet.

En anden grund er, at infektionsprævalensen i Ecuador er relativt lav. På tidspunktet for denne undersøgelse, i september 2020, havde Ecuador rapporteret omkring 200 000 bekræftede COVID-19 tilfælde (ca. 1,1 procent af befolkningen). Selvfølgelig kunne den faktiske infektionsprævalens have været flere gange højere, men alligevel er det usandsynligt, at 45 procent af denne kontrolgruppe blev inficeret, og derfor ser vi på et T-cellerespons specifikt for en SARS-CoV{ {9}} infektion.

Som konklusion rejser fundet af en høj procentdel af ueksponerede raske forsøgspersoner med allerede eksisterende immunitet i Quito, Ecuador, forventningen om, at en betydelig del af vores befolkning sandsynligvis vil have SARS-CoV-2-reaktive T-celler, fordi af tidligere eksponering for influenza, CMV-virus eller almindelig forkølelsesfremkaldende coronavirus. Fremtidige undersøgelser bør sigte mod at afgøre, om det allerede eksisterende immunrespons er beskyttende og/eller kan overvinde en mere alvorlig COVID-19-sygdom eller bidrager til en hurtigere bedring.

Betydningen og begrænsningen af ​​denne undersøgelse

Vores undersøgelse viste, at COVID-19 IGRA er et nyttigt og følsomt nyt værktøj, der kan vurdere eksponering for coronavirus eller krydsreaktivitet med lignende vira ved at bestemme frigivelsen af ​​IFN-g efter stimulering med virusspecifikke antigener. Teknikken er enkel, relativt billig og kan bruges i et klinisk laboratorium. Dette er bestemt ikke tilfældet med ELISPOT-analysen. Desuden kan IGRA-analysen let skaleres op til populationsbaserede undersøgelser og undersøgelser, hvor der kræves et stort antal patienter. Sammen med serologi kan IGRA bruges til at screene både antistof- og T-celleresponser fra individuelle patienter for bedre at forstå immunitet på populationsniveau og bestemme allerede eksisterende immunitet hos seronegative individer.

En vigtig begrænsning ved vores undersøgelse er, at undersøgelsesprøven ikke er repræsentativ for befolkningen. Ingen statistiske metoder blev brugt til at forudbestemme stikprøvestørrelsen. Desuden skelnede vores assay ikke mellem IFN-g-produktion af CD4 plus eller CD8 plus celler, men stimulering med definerede CD8(plus) og CD4(plus) peptider kan overvejes (Grifoni et al., 2020, Peng et al. , 2020) og er blevet brugt i IGRA'erne beskrevet i Petrone et al., 2020 og Murugesan et al., 2020). Også induktionen af ​​andre cytokiner kan måles med denne IGRA (Petrone et al., 2020). Ligeledes kan IGRA anvendes til opfølgning på vaccination for at bestemme udviklingen af ​​T-celle-responset hos vaccinerede individer eller kan bruges til at bestemme, om tilstedeværelsen af ​​krydsreaktive hukommelses-T-celler er forbundet med beskyttende immunitet og kan mindske sygdomsmanifestationerne fra SARS-CoV-2-infektion (Sagar et al., 2020).

Etisk godkendelse og deltagelsessamtykke

Blod blev indsamlet efter informeret skriftligt samtykke. Den etiske komité under sundhedsministeriet i Ecuador godkendte undersøgelsesprotokollen 004-2020.

Interessekonflikter

Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.

Forfatterbidrag

Studere design; JHW og GE; Dataindsamling og laboratorieforsøg: GE, AG, JC, AMR og MMV; Dataanalyse; JHW, GE og ET; Skrivning: JHW, GE og ET.

Anerkendelser

Vi udtrykker vores taknemmelighed til alle donorer og sundhedspersonale, der er involveret i dette arbejde, især Sandra Vivero og Sandra Fonseca, for hjælpen med prøveindsamlingen. Denne undersøgelse blev støttet af en forskningsfond fra Universidad de las Américas. Sustainable Sciences Institute, San Francisco, Californien, USA, og "Por Todos" Foundation i Ecuador leverede RBD-proteinet og "in-house" ELISA. Tak til Howard E. Takiff og Flor Pujol (IVIC, Venezuela), Paulina E. Andrade (USFQ, Ecuador) og Lilly Verhagen (UMC, Holland) for deres frugtbare diskussioner.

Referencer

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. Sammenligning af cytomegalovirus (CMV) enzym-koblet immunosorbent plet og CMV kvantificerende gamma interferon-frigivende assays ved vurdering af risikoen for CMV infektion hos nyretransplanterede modtagere. J Clin Microbiol 2013;51(8):2501–7.

Altmann DM, Boyton RJ. SARS-CoV-2 T-celleimmunitet: specificitet, funktion, holdbarhed og rolle i beskyttelsen. Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. Et serologisk assay til påvisning af SARS-CoV-2 serokonversion hos mennesker. Nat Med 2020;26:1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F, et al. SARS-CoV-2--reaktive T-celler hos raske donorer og patienter med COVID-19. Nature 2020;587:270–4.

de Vries RD. SARS-CoV-2-specifikke T-celler hos ueksponerede mennesker: Tilstedeværelsen af ​​krydsreaktive hukommelsesceller er ikke lig med beskyttende immunitet. Sig Transduct Target Ther 2020;5:224.

Doshi P. Covid-19: har mange mennesker allerede eksisterende immunitet? BMJ 2020;370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher CR, et al. Mål for Tcell-reaktioner på SARS-CoV-2 coronavirus hos mennesker med COVID-19-sygdom og ueksponerede individer. Cell 2020;181(7)1489-501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. En lavpris SARS-CoV-2 rRBD ELISA til påvisning af serostatus i ecuadoriansk befolkning med COVID-19. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A, et al. SARS-CoV-2--specifik Tcell-immunitet i tilfælde af COVID-19 og SARS og uinficerede kontroller. Nature 2020;584(7821):457–62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Krydsreaktive hukommelses-T-celler og flokimmunitet over for SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M, et al. Immundominante T-celle-epitoper fra SARS-CoV-2-spidsantigenet afslører robust allerede eksisterende T-celle-immunitet hos ueksponerede individer. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM, et al. Selektive og krydsreaktive SARS-CoV-2 T-celleepitoper hos ueksponerede mennesker. Science 2020;370 (6512):89–94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D, et al. Antigenspecifik adaptiv immunitet over for SARS-CoV-2 ved akut COVID-19 og sammenhænge med alder og sygdommens sværhedsgrad. Cell 2020; S0092-8674(20):31235-6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K, et al. Interferon-gamma-frigivelsesassay til nøjagtig påvisning af SARS-CoV-2 T-cellerespons. Clin Infect Dis 2020;ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H, et al. Påvisning af SARS-CoV-2- specifik humoral og cellulær immunitet hos COVID-19 rekonvalescerende individer. Immunitet 2020;52(6)971-7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. Gamma-interferonfrigivelsesassays til påvisning af Mycobacterium tuberculosis-infektion. Clin Microbiol Rev 2014;27(1):3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D, et al. Bred og stærk hukommelse CD4 plus og CD8 plus T-celler induceret af SARS-CoV-2 hos rekonvalescente individer i Storbritannien efter COVID-19. NatImmunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T, et al. En fuldblodsprøve til at måle SARS-CoV-2-specifik respons hos COVID-19-patienter. Clin Microbiol Infect 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L, et al. Nylig endemisk coronavirusinfektion er forbundet med mindre alvorlig COVID-19. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM, et al. Cellulær immunitet hos COVID-19 rekonvalescent med PCR-bekræftet infektion, men med uopdagelig SARS-CoV-2-specifik IgG. Emerg Infect Dis. 2021;27(1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A, et al. Robust T-celleimmunitet hos rekonvalescente personer med asymptomatisk eller mild COVID-19. Cell 2020;183(1)158-68.

Sette A, Crotty S. Præ-eksisterende immunitet mod SARS-CoV-2: de kendte og ukendte. Nat Rev Immunol. 2020;20(8)457-8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Præ-eksisterende T-celle-medieret krydsreaktivitet over for SARS-CoV-2 kan ikke udelukkende forklares ved tidligere eksponering for endemiske humane coronavirus. bioRxiv 2020;2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com