Phenylethanoid Glycosider of Cistanche på overgangsalderens syndrommodel i mus

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ShuoTian, ​​Mingsan Miao, MingBai, Zhenzhen Wei

Department of Pharmacology, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450008, Kina Tilgængelig online 10. maj 2017.

Abstrakt

Cistanche er den traditionelle og dyrebare kinesiske urte, med to tusind års brugshistorie i Kina. Det virker tonificerende af nyrerne, stærke tilskud til lever og nyrer og genopfylder essens og blod, kendt som "ørkenginsengen". Her undersøgte vi mekanismen forPhenylethanoid Glycosider of Cistanche(PGC) til modelmusene afmenopausalt syndrom, samt den terapeutiske virkning og karakteristika af PGC tilmenopausalt syndrom. I denne undersøgelse blev KM-mus reproduceret ved fuldstændig resektion af æggestokkene på begge sider af ryggen for at etablere modelmusene formenopausalt syndrom(MPS), og modtog henholdsvis destilleret vand eller lægemidler. Modelmus modtog destilleret vand. Mus modtog 200 mg/(kg dag) høje doser afPhenylethanoid Glycosider of Cistanche(HPGC), 100 mg/(kg dag) mellemdoser afPhenylethanoid Glycosider of Cistanche(MPGC), og 50 mg/(kg dag) lave doser afPhenylethanoid Glycosider of Cistanche(LPGC). Efter 21 dage kunne den bestemme antallet af selvstændige aktiviteter og antallet af stående, den latente periode for første indtræden i mørkerummet og det elektriske antal. Den beregnede også indvoldeindekset for livmoderen, thymus, milten, målte niveauerne af østradiol (E2), testosteron (T), luteiniserende hormon (LH) og follikelstimulerende hormon (FSH) i serum. Desuden observerede den de patologiske ændringer i uterus, thymus, milt og hypofyse hos mus. Resultaterne viste, at adfærdsindikatorer: Sammenlignet med modelgruppen (MG), HPGC, MPGC, LPGC kunne øge de uafhængige aktiviteter (P < 0.01);="" hpgc,="" mpgc="" kunne="" øge="" antallet="" af="" stående,="" den="" latente="" periode="" for="" første="" indtræden="" i="" mørkerummet="" og="" reducere="" det="" elektriske="" tal="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" kunne="" øge="" antallet="" af="" stående="" (p="">< 0.05);="" indvoldeindeks:="" sammenlignet="" med="" mg,="" hpgc="" kunne="" mpgc="" øge="" indvoldeindekset="" i="" uterus,="" thymus,="" milt="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" kunne="" øge="" livmoderens="" viscera-indeks="" (p="">< 0,05);="" serumindeks:="" sammenlignet="" med="" mg="" kunne="" alle="" grupper="" reducere="" niveauerne="" af="" lh="" i="" serumet="" (p="">< 0,01);="" hpgc,="" mpgc="" kunne="" forbedre="" niveauerne="" af="" e2,="" t="" og="" reducere="" niveauerne="" af="" lh,="" fsh="" i="" serumet="" (p="">< 0,01);="" lpgc="" kunne="" forbedre="" niveauerne="" af="" e2="" og="" reducere="" niveauerne="" af="" fsh="" i="" serumet="" (p="">< 0,05).="" i="" mellemtiden="" havde="" den="" tendensen="" til="" at="" forbedre="" niveauerne="" af="" t="" i="" serumet.="" patologiske="" ændringer:="" sammenlignet="" med="" mg="" kunne="" hpgc="" signifikant="" forbedre="" de="" patologiske="" ændringer="" i="" uterus,="" thymus,="" milt="" og="" hypofyse="" hos="" mus;="" andre="" grupper="" har="" også="" en="" vis="" effekt.="" resultaterne="" indikerede,="" at="" pgc="" kunne="" forbedre="" kønshormonforstyrrelsen="" ved="" mps="" og="" genoprette="" funktionen="" af="" ​​livmoderen,="" thymus="" og="" milten="" med="" bedre="" terapeutisk="" effekt="" på="">

Grafisk abstrakt

Nøgleord: PGC;Menopausalt syndrom; Mus

Forkortelser

MPSmenopausalt syndromPGCPolyethylenglycosider af CistancheHPG Høje doser afPhenylethanoid Glycosider of CistancheMPGC medium doser af Phenylethanoid Glycosider af CistancheLPGClow doser afPhenylethanoid Glycosider of CistancheTtestosteronE2EstradiolLHluteiniserende hormoner follikelstimulerende hormon

Phenylethanoid Glycosider of Cistanche på menopausalt syndrom

1. Introduktion

Cistanche, de tørrede kødfulde stængler med skællende blade af Cistanche deserticola YC Ma og C. tubulosa (Schrenk) Wight (Chen et al., 2013), er et berømt lægemiddel og meget brugt i tusinder af år. Den stammer fra "Shen Nong's Herbal Classic" (Liu et al., 2013), salt i smagen og varm i naturen. Det har den effekt at tonificere nyrerne, stærke tilskud til lever og nyrer, genopfylde essens og blod, fugte tarmene for at lindre forstoppelse og anden effekt. Det bruges hovedsageligt til at behandle mangel på nyre-yang (som fører til impotens), prospermi, kold sperm og sterilitet på grund af kulde i livmoderen, forstoppelse, enurese, hyppighed af vandladning og en anden sygdom. Moderne forskning viser, at det kan forbedre menneskets immunitet, hukommelse og indlæringsevne med anti-aging, anti-inflammatoriske, anti-træthed og andre effekter (Li et al., 2010, Rashid et al., 2017).

MPS er et syndrom af dysfunktion i det autonome nervesystem forårsaget af østrogenudskillelsesforstyrrelse og ledsaget af neuropsykiatriske symptomer. Det har forskellige grader af hedeture, irritabilitet, svimmelhed, tinnitus, hjertebanken, søvnløshed osv., med synlig osteoporose, hukommelsestab, kognitiv svækkelse, hjerte-kar- og cerebrovaskulære sygdomme i den sene periode. Hovedårsagen er det gradvise fald og forsvinden af ​​ovariefunktion (Ia, 2016). I øjeblikket kan den vigtigste anvendelse af hormonsubstitutionsterapi (HRT) til behandling af MPS, direkte tilskud af østrogen, langsigtet HRT forårsage vaginal blødning, ømhed i brysterne, endometriecancer, brystkræft og andre negative virkninger. Derudover er effekten endnu ikke tilfredsstillende - dosen af ​​østrogen på immunsystemet har stadig hæmmet effekt (Ma et al., 2016, Nawaz et al., 2017). Især den nylige opdagelse viser, at det kan øge risikoen for kardiovaskulær og cerebrovaskulær sygdom og andre alvorlige bivirkninger, der væsentligt begrænser den kliniske anvendelse. I den presserende markedsefterspørgsel, mere og mere opmærksomhed fra den traditionelle kinesiske (TCM) medicin til at søge efter behandling af MPS-lægemidler (Halim og Phang, 2017, Mustafa et al., 2017). TCM behandler MPS med en lang historie (Zhang og Miao, 2011) ved at regulere hypothalamus-hypofyse-ovarieaksen (HPOA), genopretning af ovariefunktion og forsinkelse af æggestokkens aldring. Det har vist sig, at størstedelen af ​​lægemidler af nyre-yang har en bedre terapeutisk effekt på MPS (Wei og Miao, 2013).

Cistancheer den højeste frekvens af lægemidler, der genopbygger nyre-yang i tidligere dynastier (Tu et al., 2011). De vigtigste effektive komponenter afCistancheer phenylethanoid glycosider, med en androgen effekt. Det er legemliggørelsen af ​​moderne medicin nyre-yang (Zhao og Pan, 2013), med de højeste aktive ingredienser i Cistanche (Yan et al., 2012). Det er hovedsageligt gennem to måder at fungere på (Wumaierjiang og Yao, 2016). For det første har det funktionen at styrke hypothalamus-hypofyse-binyrefunktionen og fremme frigivelsen af ​​neurotransmittere og hormoner i kroppen; for det andet har det funktionen som anti-træthed, hvilket forbedrer kroppens funktion. Virkningen af ​​den genopfyldende nyre af Cistanche er forskellig fra de generelle nyrelægemidler, såsom Epimedium brevicornum Maxim, Morinda officinalis How.Cistancheskader ikke yin, men genopbygger nyren. Det vises ikke med retfærdighed, mundtørhed og andre symptomer til langvarig brug.

2. Materiale og metoder

2.1. Materiale og reagenser

Cistanche(Batch nr. 20130501) blev købt fra Anhui, Dechang Pharmaceutical Pieces Co., Ltd. Prøverne blev identificeret af professor Chen Suiqing (Henan University of Chinese Medicine, identifikation af kinesisk lægemiddeldisciplin) som de tørrede kødfulde stængler med skællende blade afCistanchedeserticolaY. C. Ma, samt de tørrede kødfulde stængler med skællende blade af henholdsvis C. tubulosa (Schrenk) Wight. GC (batch nr. 120303) blev leveret af Shanxi star Pharmaceutical Co., Ltd.; Echinacoside-referencestof (batchnr.111670-200503) blev leveret af National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products; AB-8 makroporøs absorptionsharpiks (batch nr. 20130618) blev leveret af Tianjin Guangfu fra Institute of Superfine Chemical Industry; Natriumcarboxymethylcellulose (batch nr. 20120418, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Co., Ltd.), Benzylpenicillin natrium til injektion (batch nr. c1206807, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikationen: 4 millioner enheder), 0,9 procent natrium Kloridinjektion (batchnr. 1301265303, Chen Xin Pharmaceutical Co., Ltd; specifikationer: 250 ml), klorhydrat (batchnr. 20120827, Tianjin Institute of Fine Chemical Industry), E2 ELISA-analysesæt (Batch nr. 2001A3, R1001A3 Kina), T ELISA assay kit (batch nr. 20131001A, R&D Systems China), LH ELISA assay kit (batch nr. 20131001A, R&D Systems China), FSH ELISA assay kit (batch nr. 20131001A, R&D Systems China).

2.2. Prøveforberedelse

2.2.1. Fremstillingsmetoder

Proceduren for prøveforberedelse var som følger: Ved hjælp af litteraturmetoderne (Gu et al., 2011) var vi under vejledning af Feng Suxiang (Farmaceutisk analyse kursusdisciplin, Henan University of Chinese Medicine). DetCistancheknust til måltidet ved hjælp af metoderne tilbagesvalingsekstraktion for at ekstrahere 2 gange med mængden af ​​ethylalkohol (indholdet af ethylalkoholen var 70 procent). Tidspunktet for tilbagesvalingsekstraktion var 1,5 time for én gangs skyld, og derefter kombineredes alkoholekstraktionsvæsken 2 gange. Ekstraktionsvæsken blev dekomprimeret og beriget uden alkoholsmag, og det destillerede vand blev brugt til at dispergere (koncentrationen er 0,5 g/ml, som prøveopløsningen. Prøveopløsningen blev installeret i AB-8-harpiksen med flow (forholdet mellem prøveopløsningen og harpiksen var 1:10), efter at have stået i 5 timer, indtil prøveopløsningen var fuldstændig adsorberet. Og derefter først med 10 gange kolonnevolumenet af destilleret vand for at vaske AB{{12} } harpiks med prøveopløsningen, blev den efterladt til vandet; For det andet blev urenhederne fjernet med 10 gange kolonnevolumenet af ethylalkoholen (indholdet af ethylalkoholen er 10 procent ), for det tredje med 7 gange kolonnevolumenet af ethylalkoholen (indholdet af ethylalkoholen var 60 procent) til eluering, opsamlede vi eluatet og tørrede eluatet, dvs.Phenylethanoid Glycosider of Cistanche.

Phenylethanoid Glycosider of Cistanche på menopausalt syndrom

2.2.2. Valg af bestemmende bølgelængde

Vælg {{0}}.5 mL kontrolproduktopløsning, og tilsæt 5 procent natriumnitritopløsning 1 mL til kontrolproduktet. Ryst derefter og stille sted i 6 min. Derefter tilsættes 10 procent aluminiumnitratopløsning til ovenstående blanding. Derefter rystes og stilles i 6 min. Tilsæt 10% natriumhydroxid 10 ml til ovenstående blanding, blandingens volumen blev fikseret til 25 ml med vandet. Ryst og stille sted i 18 min. som kontrolproduktopløsning. Vælg 0,5 mlPhenylethanoid Glycosider of Cistancheløsning, som ovenstående metodekonfiguration, som testløsning. Blindprøven var blindopløsningen med undtagelse af kontrolproduktopløsningen og prøveopløsningen, ligesom metodekonfigurationen ovenfor. I UV-spektrofotometeret med bølgelængdeområdet på 200-800 nm blev den fulde bølgelængde brugt til at scanne ovenstående 3 løsninger. Kontrolproduktopløsningen og prøveopløsningen havde den maksimale absorptionstop ved 507 nm, så bølgelængden på 507 nm blev bestemt som absorptionsbølgelængden.

EfterPhenylethanoid Glycosider of Cistancheopløsning (1) og Echinacoside referencestoffet (2) (superposition kontrast), farven fremkom (se næste figur)

2.2.3. Metode til indholdsdetektering

Nøjagtig vej 1 ml, mens du venter på bestemmelsen af ​​opløsningen, tilsæt 1 ml 5 procent natriumnitritopløsning til kontrolproduktet, ryst og sæt stille i 6 min. Og tilsæt derefter 10 procent aluminiumnitratopløsning til ovenstående blanding. Ryst og stil stille i 6 min. Tilsæt 10 ml 10 procent natriumhydroxid til ovennævnte blanding, og volumenet af blandingen blev fikseret til 25 ml med vandet. Ryst og stille sted i 18 min; blindprøven blev fremstillet ved samme metode med blindprøven uden prøveopløsning. Med UV-spektrofotometri til bestemmelse ved spektrofotometri på 507 nm.

2.2.4. Metodeundersøgelse

2.2.4.1. Tilberedning af kontrolopløsningen og prøveopløsningen

Fremstilling af kontrolopløsningen: Vej nøjagtigt 3.06 mg echinacosid med tørring til konstant vægt som referencestof, og kom det i målekolben på 25 ml. Brug derefter 70 procent ethanolopløsning fortyndet til skalaen, og ryst blandingen som kontrolopløsning. Indholdet af kontrolopløsningen var 0,1224 mg/ml.

Forberedelse af prøveopløsningen: Nøjagtig vej 5 mgPhenylethanoid Glycosider of Cistancheog kom det i målekolben på 10 ml. Brug derefter 70 procent ethanolopløsning fortyndet til skalaen, og ryst blandingen som prøveopløsning.

2.2.4.2. Udarbejdelse af standardkurve

Tegn kontrolløsningen nøjagtigt af {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10 }}, 5.0 og 6,0 mL i henhold til "Selektion af bestemmende bølgelængde", og målte absorbansen. Regressionsligningen blev opnået ved at bruge koncentrationen til absorbansen: Y=20.296X - 0.0015 (r=0.9994), og det lineære område var 4.90-29.4 ug/ml.

2.2.4.3. Præcisionstest

Parallelbestemt absorbansen af ​​prøveopløsningen 6 gange i henhold til punktet "Metode til indholdsdetektion". Efter beregning af absorbansens relative standardafvigelse var absorbansen 0.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0 .297 og 0.297, og den gennemsnitlige absorbans var 0.298, med RSD=0.330 procent (n=6).

2.2.4.4. Stabilitetstest

Bestem absorbansen af ​​prøveopløsningen, efter at opløsningen var fuldfarvet i {{0}}, 15, 30, 50 og 60 min iht. punktet "Metode til indholdsdetektering". Efter beregning af absorbansens relative standardafvigelse var absorbansen 0,300, 0,296, 0,295 og 0,295, og den gennemsnitlige absorbans var 0,299, med RSD=1,362 procent (n {{17 }}).

Phenylethanoid Glycosider of Cistanche på menopausalt syndrom

2.2.4.5. Gentagne test

Forbered 6 prøveopløsninger i henhold til punktet "Forberedelse af prøveopløsningen", og beregn absorbansen og indholdet i henhold til punktet "Metode til indholdspåvisning". Indholdet var henholdsvis 65,2 procent , 65,6 procent , 66,7 procent , 67,2 procent og 66,5 procent , og det gennemsnitlige indhold var 66,2 procent med RSD=1.142 procent (n=6).

2.2.4.6. Prøve genvindingshastighedstest

Præcisionsvej 9 stykker af prøveopløsningen, hvor indholdet var kendt, og hvert stykke var 0,5 mL. Tilsæt henholdsvis 200, 250 og 300 ul standardopløsning til prøveopløsningen. Beregn indvindingsgraden og den relative standardafvigelse afPhenylethanoid Glycosider of Cistanche, og inddrivelsesraterne var 101,45 procent , 99,26 procent , 98,94 procent , 101,83 procent , 99,05 procent , 99,47 procent , 98,72 procent , 99,17 procent og 100,64 procent . Den gennemsnitlige gendannelsesrate var 99,84 procent med RSD=1,164 procent (n=9).

2.2.5. Bestemmelse af prøvens indhold

Forbered 3 prøveopløsninger i henhold til punktet "Forberedelse af prøveopløsningen". Beregn derefter absorbansen i henhold til punktet "Method of the content detection" ved spektrofotometrien på 507 nm, og beregn indholdet. Tabel 1 viser resultaterne.

Tabel 1. Resultat afPhenylethanoid Glycosider of Cistancheindhold.

2.3. Forsøgsdyr

KM hunmus (20-25 g) blev købt fra Wuhan Institute of Biological Products. Dyretilladelsesnummer: 42000400000611, laboratoriecertifikat nr. SYXK (Henan) 2010-001.

2.4. Eksperimentelt instrument

Højhastighedsbordcentrifuge, Shanghai Anting videnskabelig instrumentfabrik, Model: TGL-168; Elektronisk analytisk vægt, Ohaus (Shanghai), model: AR1140/C; Testinstrument for autonome aktiviteter for mus, Chengdu Taming Science and Technology Limited Company, Model: ZZ-6; Mus mørkt instrument, Chengdu Taming Technology Co., Ltd., Model: BA-200; Enzymmærkeinstrument, USA BIO-RAD, Model: 680; Elektrisk mikroskop, japansk OLYMPUS Company, Model: BX61.

2.5. Eksperimentel dyremodel

100 KM mus (23-25 ​​g) blev vægtet og intraperitoneal injektion af 10 procent hydrat af chloraldehyd (0,03 ml/10 g), abdominal fiksering efter bedøvelse. 12 mus blev tilfældigt udvalgt som den tomme kontrolgruppe (BC) med den falske operation; andre blev udført med MPS-modellen. Under bagsiden af ​​musens sidste ribben klippes musenes hår ved skæringspunktet mellem den midterste aksillære linje og afstand fra den laterale rygsøjle ca. 1 cm. Efter desinficering åbnes huden og rygmusklen ca. 0,5-1 cm, vi fandt en mælkehvid fedtmasse i snittets synsfelt, og æggestokken var indlejret i fedtet. Træk forsigtigt fedtet ud af snittet med pincet, og adskil fedtet, det kunne konstateres, at den tynde tråd uregelmæssig gul-rød æggestok. Først, æggestokkene var under æggelederen (inklusive fedt) med en tynd tråd ligeret, og derefter fjerne æggestokkene var. Efter operationen blev livmoderen sat tilbage i bughulen. Sy musklerne og huden, og de bilaterale æggestokke blev fjernet med samme metode. Omhyggelig fodring efter operation, intramuskulær injektion af penicillin 200 tusind U/kg, i tilfælde af infektion, en gang dagligt i 3 dage. Efter operation i 5 dage blev musens vaginale udstrygninger testet en gang dagligt i 5 dage for at bestemme, om æggestokkene var fuldstændigt fjernet.

2.6. Eksperimentel gruppering

Musene havde brunstperioden, da vaginale udstrygninger blev forladt, og 72 mus med kastration blev tilfældigt opdelt i fem grupper (n=12 pr. gruppe), nemlig modelgruppe (MG), GC, HPGC, MPGC og LPGC.

2.7. Dispenseringsmetode

{{0}},5 procent CMC: Natriumcarboxymethylcellulose 4 g, med destilleret vand som 800 ml. Lægemiddeldosis af HPGC, MPGC og LPGC var henholdsvis 200, 100 og 50 mg/kg (doseringsvolumen: 0,1 ml/10 g). Vægt PGC på 2000 mg, 1000 mg og 500 mg, opløst med en lille mængde på 0,5 procent CMC. Indstil derefter volumen til 100 ml, og bland suspensionen. Lægemiddeldosis af GC var 675 mg/kg, med 9 piller af GC opløst med en lille mængde på 0,5 procent CMC. Derefter indstilles volumenet til 40 ml, og suspensionen blandes.

2.8. Lægemiddeladministration

Dyr i hver gruppe blev administreret svarende til lægemidler på den 10 dag efter operationen. GC-gruppen fik administreret GC-suspension som 675 mg/kg, og HPGC-, MPGC- og LPGC-grupperne fik administreret HPGC, MPGC, LPGC-suspension som 200 mg/kg, 100 mg/kg og 50 mg/kg. BC- og MG-grupperne blev administreret med det samme volumen af ​​0,5 procent CMC-opløsning én gang dagligt i 21 dage.

2.9. Fastlæggelse af de selvstændige aktiviteter og antallet af stående

Mus i hver gruppe administreret i 18 dage blev sat ind i det uafhængige aktivitetsinstrument, tilpasset miljøet i 1 min. Bestem derefter antallet af selvstændige aktiviteter og stående inden for 5 min.

2.10. Bestemmelse af den latente periode for første indtræden i mørkerummet og det elektriske nummer

Mus i hver gruppe blev administreret i 19 dage, hvilket fik musehalen til at vende mod den lille dør ind i mørkerummet ind i bestemmelsesboksen. Efter 24 timer (indgivet i 20 dage), bestemmes den latente periode for første gangs indtræden i mørkerummet og det elektriske nummer inden for 5 min.

2.11. Beregning af viscera-indekset

Mus efter den sidste administration på 2 timer (fastede i 12 timer). Efter at have taget blod blev musene aflivet og dissekeret. Fjern thymus, milt og livmoder, og vej den våde vægt af organet. Beregn derefter indvoldeindekset (indvoldsindeks=Organ vådvægt mg/Kropsvægt g).

2.12. Måling af indholdet af E2, T, LH, FSH

Mus blev efter den sidste administration på 2 timer (fastet i 12 timer) vejet og derefter taget blod. Adskil serumet, og bestem indholdet af E2, T, LH og FSH i serumet som specifikationen.

2.13. Observation af de morfologiske ændringer i livmoderen

Ifølge ændringerne i forsøgsmusene i endometriet, kirtlerne og muskellaget blev de semikvantitative kriterier brugt til at måle livmoderen. Den patologiske organisationsmorfologi kunne opdeles i fire niveauer: niveauet "−" betød, at endometrieepitelcellerne, kirtlerne og muskellaget var normale; niveauet af " plus " den lille del af endometrieepitelceller og kirtler var atrofi, og muskellaget var normalt; niveauet af " plus plus " betød, at en del af endometrieepitelceller og kirtler var atrofi, og muskellaget havde en lille atrofi; niveauet af " plus plus plus " betød, at endometrieepitelcellerne og kirtlerne var atrofi signifikant, og muskellaget var atrofi.

2.14. Måling af tykkelsen af ​​thymus cortex

Den gennemsnitlige tykkelse af thymuscortex blev målt med mikrometeret til musene.

2.15. Måling af tykkelsen af ​​miltknude

Tykkelsen af ​​miltknuden på begge sider blev målt med mikrometeret med den centrale arterie som centrum. Beregn derefter gennemsnittet som tykkelsen af ​​miltknuden.

2.16. Beregning af antallet af den basofile celle og den forreste hypofysecelle

Beregn antallet af den basofile celle og den forreste hypofysecelle i et område på 10,000 μm2 kvadratiske rektangulære rammer under et synsfelt med høj styrke.

2.17. Statistisk analyse

Alle data blev analyseret af SPSS 17.0 statistisk pakke til statistisk analyse af medicinske data. Måledataene blev brugt til at addere og subtrahere standardafvigelsen i gennemsnit. (^-x± s). Grupperne blev sammenlignet ved at bruge enkeltfaktoranalyse (ANOVA) af varians, og varianshomogeniteten blev brugt til LSD-analysemetoderne, variansens heterogenitet blev brugt i Games-Howell, og datoen for karakterdata blev brugt Ridit-testen .

3. Resultater

3.1. Effekten af ​​de selvstændige aktiviteter og antallet af stående i mus

Fig. 1, Fig. 2 viser data for de selvstændige aktiviteter og antallet af stående. Det viser, at MG-mus er bemærkelsesværdigt reduceret sammenlignet med BC (P < 0.01),="" hvilket="" afspejler,="" at="" nysgerrigheden="" til="" det="" friske="" miljø="" er="" reduceret.="" musene="" i="" gc,="" hpgc,="" mpgc="" og="" lpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" forbedre="" de="" uafhængige="" aktiviteter="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0.01);="" dem="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" forbedre="" de="" uafhængige="" aktiviteter="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0,01);="" dem="" i="" lpgc="" kan="" forbedre="" antallet="" af="" stående="" lidt="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 1. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de uafhængige aktiviteter i musene. De uafhængige aktiviteter registreres som gennemsnit ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

Fig. 2. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på antallet af stående i musene. Antallet af stående registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

3.2. Effekten af ​​den latente periode med først at komme ind i mørkerummet og det elektriske nummer

Som vist i fig. 3, fig. 4, viste dataene for den latente periode for første gang at komme ind i mørkerummet og det elektriske tal, at MG-mus er bemærkelsesværdigt reduceret sammenlignet med BC (P < 0).{{4="" }}1),="" hvilket="" afspejler="" faldet="" i="" hukommelsen="" i="" mps-musene.="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" øge="" den="" latente="" periode="" for="" første="" gang="" at="" komme="" ind="" i="" det="" mørke="" rum="" og="" reducere="" det="" elektriske="" tal="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0,01),="" samt="" forbedre="" hukommelsen.3.2.="" effekten="" af="" ​​den="" latente="" periode="" med="" først="" at="" komme="" ind="" i="" mørkerummet="" og="" det="" elektriske="">

Som vist i fig. 3, fig. 4, viste dataene for den latente periode for første gang at komme ind i mørkerummet og det elektriske tal, at MG-mus er bemærkelsesværdigt reduceret sammenlignet med BC (P < 0).{{4="" }}1),="" hvilket="" afspejler="" faldet="" i="" hukommelsen="" i="" mps-musene.="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" øge="" den="" latente="" periode="" for="" første="" gang="" at="" komme="" ind="" i="" det="" mørke="" rum="" og="" reducere="" det="" elektriske="" tal="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0,01),="" samt="" forbedre="">

Fig. 3. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på den latente periode, hvor musene først kommer ind i det mørke rum. Den latente periode for første indtræden i det mørke rum registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

Fig. 4. Effekter af GC, HPGC, MPGC og LPGC på det elektriske nummer i musene. Det elektriske tal rapporteres som middel ± SE For hver gruppe,^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01 sammenlignet med modelgruppe ved brug af ANOVA med LSD-analysen.

3.3. Virkning af indvoldeindekset

Som vist i fig. 5 viser dataene for viscera-indekset for uterus, thymus og milt, at MG-mus er bemærkelsesværdigt reduceret sammenlignet med BC (P < 0.01),="" hvilket="" afspejler="" livmoderen="" og="" mps-musens="" immunorgan="" er="" atrofieret.="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" forbedre="" viscera-indekset="" for="" uterus,="" thymus="" og="" milt="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" musene="" i="" lpgc="" har="" en="" smule="" forbedret="" viscera-indekset="" for="" livmoderen="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 5. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på viscera-indekset i musene. Indvoldeindeksene registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

3.4. Effekt af indholdet af E2, T, LH og FSH

Som vist i fig. 6 viser dataene for niveauet af E2 og T, at MG-mus er bemærkelsesværdigt reduceret, og dataene for niveauet af LH og FSH viser, at MG-mus er bemærkelsesværdigt øget sammenlignet med BC (P < 0.01),="" afspejlede="" det,="" at="" kønshormonniveauerne="" i="" serum="" er="" forstyrrede="" i="" mps-musene.="" alle="" grupper="" af="" mus="" er="" signifikant="" nedsat="" med="" niveauet="" af="" lh="" i="" serum="" sammenlignet="" med="" bc="" (p="">< 0.01).="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" forbedre="" e2,="" t="" og="" reducere="" niveauet="" af="" lh,="" fsh="" i="" serum="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0,01).="" musene="" i="" lpgc="" kan="" forbedre="" e2="" en="" smule="" og="" sænke="" niveauet="" af="" fsh="" i="" serum="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 6. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på E2, T, LH, FSH i musene. Niveauet af E2, T, LH og FSH registreres som gennemsnit ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

3.5. Observation af de patologiske morfologiske ændringer i livmoderen

Som vist i fig. 7, fig. 8, viser de morfologiske ændringer i livmoderen med mikrometerskalaen, at MG-mus har signifikante patologiske ændringer i livmoderen sammenlignet med BC (P < 0.0="" 1).="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" forbedre="" de="" patologiske="" morfologiske="" ændringer="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" musene="" i="" mpgc="" kan="" forbedre="" de="" patologiske="" morfologiske="" ændringer="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 7. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de patologiske morfologiske ændringer af livmoderen hos musene. Ændringerne af den patologiske morfologiske rapporteres som fotos for hver gruppe.

Fig. 8. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de patologiske morfologiske ændringer i musene. Ændringerne af den patologiske morfologiske er rapporteret som de semikvantitative kriterier for at måle livmoderen, og den patologiske organisationsmorfologi kan opdeles i fire niveauer for hver gruppe og beregne antallet af mus.

Ændringerne af den patologiske morfologiske er rapporteret som de semikvantitative kriterier for at måle livmoderen, og den patologiske organisationsmorfologi kan opdeles i fire niveauer for hver gruppe og beregne antallet af mus.

3.6. Måling af tykkelsen af ​​thymus cortex

Som vist i fig. 9, fig. 10, med mikrometerskalaen, viser datoen for tykkelsen af ​​thymuscortex, at MG-mus er signifikant reduceret sammenlignet med BC (P < 0).="" 01),="" hvilket="" indikerer,="" at="" volumenet="" af="" thymus="" er="" nedsat="" efter="" etablering="" af="" mps-modelmusene.="" musene="" i="" hpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" øge="" tykkelsen="" af="" ​​thymuscortex="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0,01).="" musene="" i="" mpgc="" kan="" øge="" tykkelsen="" af="" ​​thymuscortex="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 9. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de patologiske morfologiske ændringer af thymus i musene. Ændringerne af den patologiske morfologiske rapporteres som fotos for hver gruppe.

Fig. 10. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på tykkelsen af ​​thymuscortex i musene. Tykkelsen af ​​thymus cortex registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

3.7. Mål tykkelsen af ​​miltknuden

Som vist i fig. 11, fig. 12, med mikrometerskalaen, viser datoen for tykkelsen af ​​miltknude, at MG-mus er signifikant reduceret sammenlignet med BC (P < 0).01="" ),="" hvilket="" indikerer,="" at="" miltens="" volumen="" er="" reduceret="" efter="" etablering="" af="" mps-modelmusene.="" musene="" i="" hpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" øge="" tykkelsen="" af="" ​​miltknude="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" musene="" i="" mpgc="" kan="" øge="" tykkelsen="" af="" ​​miltknude="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 11. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de patologiske morfologiske ændringer af milten i musene. Ændringerne af den patologiske morfologiske rapporteres som fotos for hver gruppe.

Fig. 12. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på tykkelsen af ​​miltknuder i musene. Tykkelsen af ​​miltknuden registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

3.8. Beregning af antallet af den basofile celle og den forreste hypofysecelle

Som vist i fig. 13, fig. 14, viser datoen for antallet af den basofile celle og den forreste hypofysecelle, at MG-mus er signifikant reduceret sammenlignet med BC (P < 0).0="" 1),="" hvilket="" indikerer,="" at="" antallet="" af="" cellekilden="" for="" sekretorisk="" gonadotropin="" er="" reduceret="" efter="" etablering="" af="" mps-modelmusene.="" alle="" modtagne="" lægemiddelgrupper="" kan="" øge="" antallet="" af="" basofile="" celler="" bemærkelsesværdigt="" sammenlignet="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" musene="" i="" gc,="" hpgc="" og="" mpgc="" kan="" bemærkelsesværdigt="" øge="" antallet="" af="" den="" forreste="" hypofysecelle="" sammenlignet="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 13. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på de patologiske morfologiske ændringer af hypofysen hos musene. Ændringerne af den patologiske morfologiske rapporteres som fotos for hver gruppe.

Fig. 14. Virkninger af GC, HPGC, MPGC og LPGC på antallet af basofile celler og den forreste hypofysecelle i musene. Antallet af basofile celler og den anteriore hypofysecelle registreres som middel ± SD for hver gruppe. Sammenlignet med modelgruppen^☆P < 0.05 og^☆☆P < 0.01, brugte ANOVA med LSD-analysemetoderne.

4. Diskussion

Optegnelser afmenopausalt syndromi gamle bøger er hovedsageligt spredt i beskrivelsen af ​​"liljesygdom", "zigzag" syndrom, "melankoli", "unormal menstruation" og andre (Chen et al., 2015, Ma og Chen, 2015). For kvinden over fyrre år blev Yin Qi skåret halvt; Tiangui er tørret ud; nyre Qi blev gradvist afvist; Yin Jing var mangelfuld; balancen mellem Yin og Yang gik tabt. Dens primære præstation var, når menstruationsforstyrrelser eller overgangsalderen opstår, såsom tidevandsfeber og sveden, følelsesmæssig irritabilitet, rastløshed, hjertebanken og søvnløshed, rygsmerter, ødemer i ansigtet og lemmerne, svimmelhed, tinnitus og hudfølelse som en myresygdom. Den stærke tilbagegang af nyre Qi er den iboende årsag til, at menstruationen kommer eller afbrydes. Nyremangel er hovedårsagen tilmenopausalt syndrom(Tan et al., 2013), og nyren er oprindelsen til menneskeliv, kaldet det "medfødte fundament". Stigningen og faldet af nyreessens dominerer væksten og den reproduktive funktion af modenhed og tilbagegang (Wang og Huang, 2011). Undersøgelser har vist, at faldet i ovariefunktion er essensen af ​​nyremangelsyndrom, og ubalancen i nyrernes Yin og Yang er tæt forbundet med forstyrrelsen af ​​endokrin sekretion og dysfunktion i det autonome nervesystem. Ændringen af ​​E2, FSH og LH er et udtryk for nyremangel og nyre Yin og Yang ubalance (Shi et al., 2007). Tonificerende nyre-yang-lægemidler bruges til at regulere hormonniveauet i hypothalamus-hypofyse-ovarieaksen eller spiller en direkte rolle i regulering af ovariefunktion. Moderne kinesisk medicin mener, at ætiologien og patogenesen afmenopausalt syndromer nyremangel (Razali og Said, 2017).

Undersøgelsen brugte fuldstændig resektion af æggestokkene på begge sider af ryggen til at reproducere MPS-musemodellen. 90 procent østrogen af ​​kvinder blev udskilt af æggestokken, og æggestokken blev fjernet. Det forårsagede kunstigt niveauet af østrogen, der pludselig blev reduceret og derefter simulerede MPS. Denne model var den klassiske model med en høj succesrate, stabilitet og pålidelighed og så videre. Gennem selvstændige aktiviteter og antallet af stående, den latente periode for første gang at komme ind i mørkerummet og det elektriske nummer, observerede vi forbedringen af ​​indlærings- og hukommelsesfunktionen og nysgerrigheden i det friske miljø ved hjælp af medicinen. Ovariefunktionen blev nedsat med kønshormonsekretionen faldet. Endvidere blev gonadotropinet øget hos MPS-patienter. Niveauerne af E2, T i serum var lavere end den person uden MPS-symptomerne, mens niveauerne af LH, FSH var signifikant højere end den person uden MPS-symptomerne. Derfor, gennem måling af E2-, T-, FSH- og LH-niveauer i serum, kunne det bruges de visuelle indikatorer til identifikation af MPS, afspejler virkningen af ​​lægemidler på MPS-sygdommen. Undersøgelsen viste, at ovariefunktionsnedgangen var konnotationen af ​​nyremangel, og ændringen af ​​E2, T, FSH og LH var en slags udtryk for nyremangel (Li et al., 2014, Cheng og Tian, ​​2012).Cistanchevar gennem effekten af ​​genopfyldning af nyrerne for at øge immuniteten (Zhang et al., 2009, Shareef et al., 2017).

Vi brugte den nyrefornyende medicin til at behandle MPS, hvilket var innovativt. Resultaterne viste også, at PGC kunne forbedre niveauet af lidelseshormon hos MPS-mus og øge niveauerne af E2, T, LH og FSH i serum. I mellemtiden kunne det forbedre de patologiske ændringer i livmoderen, thymus, milt og hypofyse hos mus, hvilket er i overensstemmelse med litteraturen, at nyremangel er fundamental i MPS.

5. Konklusion

Vores undersøgelsesresultater indikerede, at PGC havde en god terapeutisk effekt for MPS - det kunne øge de uafhængige aktiviteter og antallet af stående, den latente periode for første gang ind i mørkerummet, indvoldene i thymus, milt og livmoder, E2, T as samt reducere det elektriske tal, LH og FSH. Phenylethanoidglycosiderne blev udvalgt iCistanchefor den høje effektivitet og bekvemmelighed af MPS-forskningen for at forbedre behandlingen afperimenopausalt syndrom. Dets kvalitetsstandarder er nemme at kontrollere, hvilket fremmer innovativ forskning og industrialiseringsudvikling af lægemidler. Det giver en ny måde at tænke på i behandlingen af ​​MPS.

Interessekonflikt

Forfatterne har ingen interessekonflikt at rapportere.

Anerkendelser

Denne forskning blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81274154); Henan Science and Technology Innovation Team (2012IRTSTHN011); videnskabs- og teknologiinnovationsteamet i byen Zhengzhou (131PCXTD612); det centrale medicinske laboratorium for transformationen af ​​kinesisk medicin i Zhengzhou City (121PYFZX1820).

Referencer

Chen et al., 2013 F. Chen, Z. Chen, XF Xing, SX Liu, TJ Zhang, CQ Chen Forskningsproces iCistancheHerba Drug Eval. Res., 6 (2013), s. 469-475

Se post i ScopusGoogle Scholar

Chen et al., 2015 ZF Chen, XX Zhang, YY Zhao, X. Wang, YL Ren, HQ Liao, Y. Li, L. Zhao Data mining om akupunkturvalg i behandlingen afperimenopausalt syndromWorld Chin. Med., 4 (2015), s. 482-489

Se post i ScopusGoogle Scholar

Cheng og Tian, ​​2012 K. Cheng, SL Tian Effekter af forebyggende elektroakupunktur af "Guanyuan"(CV4) og "Sanyinjiao"(SP6) på hypothalamus - hypofyse - ovarieakse i ovarietomiserede rotter akupunktur. Res., 1 (2012), s. 15-19

Se post i ScopusGoogle Scholar

Gu et al., 2011 JH Gu, XH Yu, R. Wu, XK Zhao, L. Zhao Optimering af isolerings- og oprensningsteknologien af ​​Phenylethanoid Glycosider fraCistancheTubulosa af Macroporous Adsorption Resin China Acad. J. Electron. Publ. House, 11 (2011), s. 1007-1009

Se post i ScopusGoogle Scholar

Halim og Phang, 2017 ANI Halim, IC Phang Salicylsyre dæmper pb-stress i Nicotiana tabacum Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), s. 16-19

Se post i ScopusGoogle Scholar

Ia, 2016 YM Ia Påvirkningsfaktorerne for perimenopausale kvinders livskvalitet og modforanstaltningerne Chin. J. Clin. Rational Drug Use, 2B (2016), s. 154-155

Se post i ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2010 Y. Li, YY Song, HQ Zhang Fremskridt inden for forskning i kemiske bestanddele og medicinsk aktivitet afCistancheHage. Wild Plant Resour., 1 (2010), s. 7-11

Se post i ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2014 Y. Li, L. Xu, Z. Qian, K. Cheng Effekter af elektroakupunktur-stimulering af "Sanyinjiao"(SP6) på hypothalamus-hypofyse - ovarieakse i perimenopausale rotter akupunktur. Res., 3 (2014), s. 198-201

Se post i ScopusGoogle Scholar

Liu et al., 2013 X. Liu, CM Li, JD Gao, R. Wu Forskningens fremskridt vedr.CistancheHage. J. Tradit. Med. Sci. Technol., 5 (2013), s. 575-577

Se post i ScopusGoogle Scholar

Ma et al., 2016 XZ Ma, QY Li, QF Chen, SN Li Forskningsfremskridt for TCM-behandling afperimenopausalt syndromVerden J. Integr. Tradition. Western Med., 9 (2016), s. 1329-1332

Se post i ScopusGoogle Scholar

Ma og Chen, 2015 K. Ma, YX Chen Diskussion om strategien for behandling afperimenopausalt syndrommed kinesisk og vestlig medicin, Kina J. Chin. Material, 2 (2015), s. 3899-3906

Se post i ScopusGoogle Scholar

Mustafa et al., 2017 G. Mustafa, R. Arif1, A. Atta, S. Sharif, A. Jamil Bioaktive forbindelser fra lægeplanter og deres betydning for lægemiddelopdagelse i Pakistan Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), s. 17-26

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Nawaz et al., 2017 S. Nawaz, M. Shareef, H. Shahid, M. Mushtaq, M. Sarfraz En gennemgang af den antihyperlipidæmiske effekt af syntetiske phenolforbindelser Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), s. 22-26

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Rashid et al., 2017 M. Rashid, MI Saleem, F. Deeba, MS Khan, SA Mahfooz, AA Butt, MW Abbas Sæsonens effekt på forekomsten af ​​mastitis hos geder hos biller i Faisalabads præmis Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), s. 19-21

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Razali og Said, 2017 MAA Razali, FM Said Produktion af rødt pigment af monascus purpureus i bioreaktor med rørt tromle Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), s. 13-15

Se post i ScopusGoogle Scholar

Shareef et al., 2017 M. Shareef, M. Jamal, M. Sarfraz En gennemgang af antibakteriel aktivitet af Nigella sativa i tarmen på slagtekyllinger Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), s. 27-32

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Shi et al., 2007 HB Shi, YB Miao, SL Zhong, W. Wang, LP Wang Effekt af Fuchun Granule på det neuroendokrine system hos rotter med menopause-yin-mangel Chin. J. Tradit. Med. Sci. Technol., 1 (2007), s. 16-17

Se post i ScopusGoogle Scholar

Tan et al., 2013 XJ Tan, WH Li, YQ Zeng, SL Xu, J. Qin, JM Cui, NG Shi Diskuter vedligeholdelse afperimenopausalt syndromfra patogenesen af ​​nyremangel Lishizhen Med. Materia Medica Res., 9 (2013), s. 2212-2213

Se post i ScopusGoogle Scholar

Tu et al., 2011 PF Tu, Y. Jiang, YH Guo, XB Li, YZ Tian Undersøgelse omCistanchedeserticola og dets industriudvikling Chin. J. Pharmacol., 12 (2011), s. 882-886

Se post i ScopusGoogle Scholar

Wang og Huang, 2011 J. Wang, H. Huang Traditionel kinesisk medicin og traditionel kinesisk kultur Clin. J. Tradit. Hage. Med., 2 (2011), s. 95-105

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Wei og Miao, 2013 ZZ Wei, MS Miao Karakteristisk analyse af forstærkende nyre traditionel kinesisk medicin i behandlingen afperimenopausalt syndromKina J. Chin. Med., 11 (2013), s. 1688-1691

Se post i ScopusGoogle Scholar

Wumaierjiang og Yao, 2016 YHF Wumaierjiang, G. Yao Fremskridt i en eksperimentel undersøgelse af effektiviteten afCistancheHunan J. Tradit. Hage. Med., 4 (2016), s. 193-195

Se post i ScopusGoogle Scholar

Yan et al., 2012 GH Yan, JH Tian, ​​BW Long, N. Li Fremskridt inden for phenylethanoid glycosider fraCistancheCentral South Pharm., 9 (2012), s. 692-695

Se post i ScopusGoogle Scholar

Zhao og Pan, 2013 W. Zhao, YN Pan Fremskridt inden for forskning af farmakologisk aktivitet af phenylethanoid glycosider iCistancheAsien-Stillehavstradition. Med., 5 (2013), s. 77-79

Se post i ScopusGoogle Scholar

Zhang og Miao, 2011 Y. Zhang, MS Miao Undersøgelse af almindeligt anvendt traditionel kinesisk medicin, der tonificerer nyre-yang til behandling af climacteric syndrom China J. Chin. Med., 9 (2011), s. 1084-1087

Se post i ScopusGoogle Scholar

Zhang et al., 2009 YZ Zhang, LL Yang, HF Song, Du. Yimin Anti-stress farmakologisk virkning afCistanchedeserticola og mekanismen: forskning fremskridt J. Int. Pharmaceut. Res., 5 (2009), s. 344-347

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Fra: Saudi Pharmaceutical Journal

Bind 25, udgave 4, maj 2017, sider 537-547