Del 2 Kronisk nyresygdom og aldring reducerer knoglemateriale og mikroarkitektur differentielt i C57Bl/6-mus

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Venligst klik her til del 1

Cistanche kan hjælpe med nyresygdom meget godt

3. Resultater

3.1 Bekræftelse af nyresygdom

Ved undersøgelsens endepunkt tre måneder efter operationen havde mus med 5/6 Nx signifikant forhøjet serumurinstof og nedsat urinurinstof, hvilket var i overensstemmelse med nedsat nyrefunktion (tabel 1). Serum PTH og fosfat var signifikant øget som de vigtigste virkninger af CKD. Serumcalcium var ikke signifikant påvirket af CKD. For alle serum- og urinmålinger var alder ikke en signifikant hovedeffekt.

3.2 Aldring og CKD reducerer kortikal og trabekulær mikroarkitektur

Aldringog CKD påvirkede både kortikal geometri og trabekulær mikroarkitektur negativt (Tabel 2-3, Figur 1).Aldringfra 6 mdr. til 24 mdr. signifikant øget kortikalknogletværsnitsdimensioner (øget polært inertimoment, PMI), porøsitet (Ct. Po) og vævsmineraltæthed (TMD) og nedsat kortikal knogletykkelse (Ct. Th), kortikalknoglevolumen (nedsat knoglevolumenfraktion (BV/TV),knoglearealfraktion (BA/TA). Aldring reducerede også trabekulært antal (Tb. N) og tykkelse (Tb. Th), trabekulær knoglevolumenfraktion (BV/TV) og volumetrisk knoglemineraltæthed (vBMD). Som med aldring havde CKD også en væsentlig negativ hovedeffekt påknoglelydstyrke via nedsat BV/TV, Tb. N, BA/TA, Ct. Th, og øget Ct.Po. Disse virkninger var additive, således at det værste knoglevolumen blev observeret for gamle mus med CKD. I modsætning til aldring reducerede CKD signifikant BMI og TMD. Aldring og CKD havde ikke en signifikant interaktion for nogen kortikal eller trabekulær mikroarkitekturmåling.

3.3 Aldring og kronisk nyreinsufficiens mindsker forskelligt de mekaniske og materielle egenskaber af hele knoglerne

På hele knogleniveauet blev materielle og mekaniske egenskaber begge formindsket af ældning og CKD (tabel 4, supplerende tabel 1).Aldringfra 6 mdr. til 24 mdr. reducerede væsentligt de fleste helknoglematerialeegenskaber (f.eks. modul, flydespænding, maksimal spænding), men påvirkede ikke sejheden. CKD reducerede arbejdet betydeligt til brud, men de fleste andre materielle og mekaniske parametre blev ikke påvirket af CKD som hovedeffekt. Sejhed, den geometri-uafhængige analog af arbejde til brud, havde en signifikant interaktion mellem aldring og CKD (p=0.011). Fra post-hoc test blev det set ved 18 måneder, at CKD kan sænke sejheden (-47,9 procent, p=0.023) (figur 2d).

3.4 Aldring og CKD reducerer FEA strukturel stivhed ved den proksimale tibia

Vi brugte FEA til at evaluere, hvordan aldring og CKD påvirker mekaniske egenskaber via ændringer i den trabekulære og kortikale struktur. FEA strukturel stivhed ved den proksimale skinneben faldt signifikant med aldring og CKD (tabel 4). Der var ikke en væsentlig interaktion mellemaldringog CKD. FEA-stivhed korrelerede positivt med lårbensstivhed fra trepunktsbøjning (r2=0.67).

3.5 Aldring sænker mikroskala knoglestivhed, mens CKD reducerer mikroskala knoglevæv rumlig variation

At vurdere hvordanaldringog CKD påvirker materialeegenskaber i vævsskala af corticaleknogle, brugte vi nanoindentation og Raman-spektroskopi på matchede steder for at evaluere mikroskalaknoglevævsmodul og sammensætning (tabel 5). Knoglevævsheterogenitet blev evalueret gennem vurderingen af ​​rumlig varians af disse egenskaber. Middel reduceret modul (Er) og standardafvigelsen af ​​Er blev henholdsvis signifikant faldet og øget med alderen. CKD reducerede standardafvigelsen markant, men ikke gennemsnittet af Er. Knoglevævssammensætning i mikroskala vurderet ved Raman-spektroskopi (dvs. middelmineral: matrix, carbonat: fosfat, krystallinitet) ændrede sig ikke signifikant med hverken alder eller CKD. Imidlertid blev standardafvigelsen af ​​krystallinitet signifikant reduceret med CKD.

3.6 Aldring og kronisk nyreinsufficiens påvirker kollagenfibrillers nanomekanik forskelligt

Vi evaluerede, om CKD og aldring påvirker kollagen nanomekanik via small-angle x-ray scattering (SAXS) samtidig med trækbelastning. I overensstemmelse med resultaterne fra bøjning viste trækmålinger, at aldring signifikant reducerede vævsydelsesstress og maksimal stress. Kollagennanomekanik blev påvirket forskelligt af alder og CKD (tabel 6, figur 2).Aldringreducerede kollagenstammen målt ved maksimal vævsbelastning, men påvirkede ikke den procentvise kollagenstamme (kollagenstamme / total vævsstamme, procent ColMax). Derimod øgede CKD procenten ColMax markant.

3.7 Kollagen-tværbindinger adskilte sig ikke med aldring og CKD

Vi søgte at forstå, om den ændrede kollagen-nanomekanik observeret i CKD kunne tilskrives ændringer i skelet-tværbindinger. Vi karakteriserede derfor enzymatisk (hydroxylysylpyridinolin, HP og lysylpyridinolin, LP) og ikke-enzymatisk tværbinding (pentosidin) med højtydende væskekromatografi (HPLC). Tværbindingerne HP, LP og pentosidin havde højere middelkoncentrationer med stigende alder, men disse ændringer var ikke signifikante (tabel 7). På samme måde var der en tendens til lavere LP med CKD, men denne effekt var ikke signifikant. Vi kvantificerede yderligere totale fluorescerende avancerede glycation slutprodukter (AGE'er) og fandt ud af, at totale fluorescerende AGE'er ikke adskilte sig med aldring eller CKD.

3.8 Aldersrelaterede osteocyt-lacunargeometriændringer observeres ikke hos aldrende mus med CKD

Osteocyte perilacunar/canalicular remodeling (PLR) reagerer på ændringer i mineralhomeostase og er vigtig for at bestemmeknoglebrudmodstand. Vi evaluerede osteocyt lacunar geometri for at bestemme omaldringmed CKD ændrer PLR (tabel 8). Effekterne af aldring alene (uden CKD) for disse Sham-mus blev tidligere rapporteret (21). Kort sagt, for Sham-mus blev lakunerne mindre, mere sfæriske og mindre talrige med øget alder. Når aldring og CKD blev analyseret sammen til denne undersøgelse, reducerede aldring signifikant lacunar taltæthed, volumen og overfladeareal og øgede sfæricitet, oblateness og span theta. Der var ikke en signifikant effekt af CKD for nogen foranstaltning. Der var dog en signifikant interaktion mellem alder og CKD for sfæriskhed. Mens sfæriciteten steg med alderen for Sham-mus, var dette mål størst for midaldrende mus med CKD og faldt derefter for gamle mus til en værdi svarende til den, der blev observeret hos unge mus. Med andre ord blev lakuner kun mindre og rundere ialdringShammus, og ikke hos aldrende mus med CKD. Dette mønster blev også observeret med CKD for lacunar taltæthed, volumen og overfladeareal, selvom interaktionen mellem aldring og CKD ikke var signifikant.

Størrelsen af ​​osteocyt-lakune steg ikke med alderen for mus med CKD, men steg i stedet med fosfatdysregulering. Specifikt for mus med CKD, osteocyt lacunar volumen (Spearman ρ {{0}} plus 0.584, p=0.017), overfladeareal (ρ=plus 0,603 p=0.013) og sfæricitet (ρ=- 0.500, p=0.048) var korreleret med serumphosphat vurderet ved undersøgelsens endepunkt. I modsætning hertil korrelerede mål relateret til lacunae-prævalens og orientering (dvs. osteocytantalsdensitet, det nærmeste massecenter, span theta) ikke signifikant med cirkulerende fosfat. Ingen osteocyt-lacunarmålinger var signifikant korreleret med serumcalcium, serumurinstof eller urinurinstof. For Sham-mus var osteocyt lacunar taltæthed positivt korreleret med serumcalcium (ρ=plus 0,681, p=0.004). Alle andre lakunære osteocytmålinger korrelerede kun svagt med serum- og urinkemi.

Forholdet mellem osteocyt-lacunastørrelse og serumphosphat for mus med CKD var ikke direkte forårsaget af øget PTH. Når man betragter Sham- og CKD-mus sammen, korrelerede fosfat signifikant med øget PTH (Spearman ρ {{0}} plus 0.562, p=0.001). Men selvom fosfat og PTH begge blev øget som en hovedeffekt af CKD, var disse mål ikke signifikant korreleret med hinanden for CKD-mus (p > 0,05). Ingen målinger af osteocyt-lakunargeometri korrelerede signifikant med PTH for Sham- eller CKD-mus.

3.9 Regressionsanalyse afslører, at ændret kollagen-nanomekanik påvirker sejheden

Vi søgte at identificere, hvordan ændringer i hel-knoglesejhed fra bøjning var relateret til ændringer i nano-til mikroskalamålinger afknoglekvalitet til Sham og CKD mus. Vi udførte en regression af helknoglesejhed som knoglekvalitetsmål ved mindre længdeskalaer for Sham- og CKD-mus ved at bruge alder som en kovariat. For Sham-mus var ingen knoglekvalitetsmål signifikante forklarende variabler for sejhed. For CKD var den eneste signifikante forudsigelse af sejhed (T) procent ColMax (ln(T)=2.437 – 0.00371* procent ColMax; r2=49 0,4 procent, p < 0,05).="" styrken="" af="" ​​regressionen="" blev="" ikke="" forbedret="" ved="" at="" justere="" for="">

3.10 Ændringer i knoglekvaliteten kan ikke forklares med variation i PTH

Vi vurderede Spearman-korrelationer mellem knoglekvalitetsmål og PTH for at forstå, om mus med højere PTH havde det værreknoglekvalitet. Selvom PTH var signifikant højere med 5/6 Nx, var der ingen signifikant korrelation mellem PTH og mikroskala knoglekvalitet.

4. Diskussion

Formålet med denne undersøgelse var at undersøge, hvordan 5/6 Nx – inducerede CKD ogaldringhver formindsker knoglekvaliteten, herunderknoglemikroarkitektur samt knoglevævsmaterialeegenskaber. CKD reducerede knoglekvaliteten, inklusive mikroarkitektur og materiale, fra mikrometerlængdeskalaen til helknogleskalaen. I vores undersøgelse blev knoglekvalitetsfald observeret på tværs af flere modaliteter og længdeskalaer. Effekten af ​​CKD var at mindske kortikal og trabekulær mikroarkitektur, ændre rumlig variation i mikroskala materialeegenskaber og også ændre kollagen nanomekanik. Derudover havde CKD og aldring en

interaktiv effekt på en sejhed, der var størst for midaldrende mus. Vores resultater fremhæver, at flere nøglekomponenter af knoglekvalitet er svækket ved CKD. Disse observationer understøtter en voksende mængde beviser fra gnavere og kliniske undersøgelser om, at knoglekvaliteten er reduceret ved CKD og sandsynligvis bidrager til tab af frakturmodstand.

Tabet afknoglemikroarkitektur med CKD opstod ud over de skadelige virkninger afaldringog bidrog til tab af hel-knoglestyrke. Det fandt vi i denne undersøgelsealdringog CKD reducerede begge signifikant kortikal og trabekulær mikroarkitektur. Aldring og CKD resulterede hver især i tyndere, mere porøs kortikal knogle og færre og tyndere trabekler. Den eneste undtagelse var knoglemineral vurderet ved mikroCT (dvs. TMD), som steg med alderen og blev formindsket ved CKD. For alle kortikale og trabekulære målinger var den værste knoglemikroarkitektur tydelig i gamle mus med CKD. Tabet afknoglemikroarkitektur påvirkede hele knoglestrukturens integritet. Fra FEA blev det fundet, at aldring reducerede knoglemikroarkitekturen ved den proksimale tibia, mens CKD reducerede strukturel stivhed.

For foranstaltninger vedrknoglematerialekvalitet, alder og CKD havde forskellige virkninger (figur 2). Med øget alder blev helknoglemodul og maksimal stress begge reduceret, ligesom vævsmodul i mikrometerskala. Yield og maksimal stress fra træktest af ulnaradius faldt også med alderen. Yderligere, i overensstemmelse med humane prøver undersøgt med SAXS,aldringvar forbundet med øget kollagenbelastning ved maksimal belastning, hvilket indebar en stivning af kollagenfibre (26). CKD påvirkede ikke helknoglemodul eller styrke, men reducerede i stedet væsentligt arbejde til fraktur og ændrede vævsskalamateriale rumlige variation. Ydermere kan CKD reducere sejhed hos midaldrende mus, da byrden af ​​trækbelastning med denne sygdom blev flyttet til kollagenfibre. Øget procentdel kollagen ved maksimal belastning var den eneste signifikante forklarende variabel for reduceret sejhed ved CKD, hvilket tyder på, at tabet af hel-knoglesejhed i det mindste delvist kan forklares af ændret kollagenmekanik.

Oprindelsen af ​​ændret kollagen nanoskala mekanisk adfærd er usikker. Der var en tendens til lavere skelet-tværbindinger med CKD. Imidlertid korrelerede HP og LP målt fra humerus ikke med kollagenmekaniske egenskaber fra SAXS målt ved ulna/radius-komplekset, måske på grund af forskellige analysesteder. Dette skift i stammen kan også skyldes ændret mineralindhold eller -fordeling eller ændringer i binding mellem kollagen og mineral. Øget procent ColMax er muligvis ikke direkte ansvarlig for tabet af sejhed ved CKD, men kan være et symptom relateret til ændret omsætning og mangler i mineralorganisationen. For eksempel kan ændret mineralisering gøre kollagenet mere mobilt eller kan sprede mindre energi gennem mikrokrakning. Disse ændringer kunne producere det observerede tab af sejhed med CKD såvel som den øgede belastningsbyrde på kollagenfibre. I fremtidige undersøgelser vil det være vigtigt at identificere, hvorfor CKD skifter belastning til kollagenfibre, men her bemærker vi, at denne ændring i kollagenadfærd ser ud til at spille en vigtig rolle i, hvordan CKD formindsker helknoglematerialeegenskaber.

Da der sker ændringer i knoglematerialeegenskaber med CKD, og ​​osteocytten er kendt for at modulere vævsskalaknoglekvalitet gennem perilacunar/canalicular remodeling (PLR), sigtede vi også på at forstå, om 3D osteocyt lacunar morfologier blev modificeret i CKD (15, 16). Mens lakuner i osteocytter blev mindre, sparsommere og mindre på linje med øget alder for Sham-mus, forblev lakuner fremherskende og store for gamle mus med CKD.

I stedet for, for mus med CKD, var serumphosphat signifikant og positivt korreleret med osteocyt-lacunastørrelsen. Selvom både fosfat og PTH var signifikant forhøjet

med CKD havde mus med højere PTH ikke højere fosfat. Disse resultater er ikke nødvendigvis uoverensstemmelser. Serumfosfat er nettoresultatet af fosfat tilsat fra intestinal absorption ogknogleresorption mindre fosfat fjernet ved nyreudskillelse og knogledannelse. Selvom vores CKD-mus generelt havde forhøjet PTH, kan de med højere fosfat have udtømt andre systemiske kompenserende mekanismer.

Osteocytter udtrykker større FGF23 i sammenhæng med nedsat mineralisering (f.eks. DMP1 knockout, x-bundet hypofosfatæmi) (20,48,49) såvel som ved kronisk nyresygdom (14,48,50). Nylige beviser tyder på, at ud over denne endokrine rolle kan osteocytten direkte deltage i fosfatmineralhomeostase viaPLR (20). Osteocyt-lacunae-volumener blev fundet at stige med x-bundet hypophosphatæmi. Behandling med enten FGF23 eller 1,25 dihydroxyvitamin D blokerende antistoffer genoprettede osteocyt lacunar volumen til værdier tættere på vildtype sammenligninger (20). Ved CKD anspores mineraldysregulering oprindeligt af den nedsatte fosfatfiltrering af den syge nyre. Øgetknogleomsætning er en utilpasset reaktion, der indikerer, at systemiske kompensatoriske mekanismer til opretholdelse af fosfatkontrol er overvældet (6,7). I dette tilfælde antyder forholdet mellem forhøjet fosfat og øget osteocyt lacunar volumen, at PLR kunne være en yderligere mineral homeostase reguleringsstrategi. Yderligere undersøgelse er påkrævet for at undersøge, hvordan osteocyt-lacunære geometrier og PLR er relateret til ændret knogleomsætning, knoglevævsmaterialekvalitet og frakturmodstand ved CKD.

Vores resultater tyder på, at processer påvirkerknoglematerialet er forskelligtaldringversus CKD. Hos aldrende mennesker såvel som hos mus,knogleomsætning (dvs. osteoklastisk resorption og osteoblastisk dannelse) aftager, og vævsmodenhed øges. I denne undersøgelse producerede 5/6 Nx distinkte knoglekvalitetsdefekter fra aldring, såsom lavere knogletæthed fra microCT, ændret variabilitet af vævsskala materialeegenskaber og større deltagelse af kollagen i trækbelastning. Selvom PTH var signifikant højere med CKD, havde mus med højere PTH ikke lavere knoglekvalitet. Flere årsager kan forklare dette fund. For det første havde mus i vores undersøgelse meget lavere PTH end i undersøgelser med svær CKD og samtidig sekundær hyperparathyroidisme (9, 12). Det er muligt, at ændringer i knogleomsætning var relativt beskedne i vores undersøgelse. Vi vurderede dog ikke direkte knogleomsætning, så denne mulighed er spekulativ. For det andet er CKD, uanset omsætningsstatus, blevet eksperimentelt forbundet med ændret knoglekvalitet. Iwasaki og kolleger rapporterede, at høj-omsætning CKD fra 5/6 Nx såvel som lav-omsætning CKD fra 5/6 Nx og thyroparthyroidektomi begge resulterede i tilsvarende ændret knoglemekanik og tilskrev disse ændringer til uræmi (11). Det er muligt, at tab af knoglekvalitet ikke udelukkende er baseret på sekundær hyperfosfatæmi, men også påvirkes af mere beskedne ændringer i knogleomsætning og akkumulering af uremiske toksiner.

Vi forventede, at flereknoglekvalitetsmålinger, herunder helhedknoglesejhed, pentosidin, mineral: matrix og carbonat: fosfat ville ændre sig fra 6 til 24 måneder (25,26,30,51,52). Mens hver af disse målinger ændrede sig i den forventede retning med øget alder, var effekten af ​​alder ikke statistisk signifikant. Post-hoc effektanalyse ved hjælp af G*Power (53) tyder på, at sejhed, pentosidin og mineral: matrix var understyrket til at detektere effekten afaldring, mens carbonat: fosfat sandsynligvis ikke var påvirket af alder i denne undersøgelse. Derudover var kollagen-tværbindingen LP understyrket til påvisning af en effekt af CKD (supplerende tabel 2). Der er flere muligheder for, at nogle mål for knoglekvalitet i sidste ende blev underbelastet i denne undersøgelse. Først brugte vi et brugerdefineret Raman-nanoindentationsinstrument med den unikke fordel ved co-lokaliserede målinger. Signalintensiteten er lavere på dette brugerdefinerede instrument end selvstændige Raman-instrumenter, og det er derfor muligt, at vores signal: støj-forhold ikke var tilstrækkeligt til at skelne aldersrelaterede ændringer. Sejhed (beregnet fra arbejde til brud) er et mål, der er udsat for høj variabilitet (54), og variabiliteten i mekaniske egenskaber øges yderligere for geriatriske mus (25). Større variabilitet i pentosidin er også blevet observeret med øget alder i undersøgelser af mennesker og gnavere (52,55,56). Det er således sandsynligt, at høj varians i disse mål tilslørede forskelle mellem evaluerede grupper.

Flere begrænsninger påvirkede resultaterne af denne undersøgelse. Dynamisk kvantitativ histomorfometri blev ikke udført, men fremtidige undersøgelser ville muliggøre evaluering af osteoblast-, osteoklast- og osteocytaktiviteter samtknogleomsætning. Mens vi har identificeret adskillige knoglekvalitetsforringelser, der opstår med CKD og skadeligt påvirker hel-knoglesejhed, er der behov for yderligere arbejde for at bekræfte oprindelsen af ​​disse svækkelser såvel som osteocyttens rolle i deres forekomst. Analyse af gen- og proteinekspression ville være nyttig til at identificere oprindelsen af ​​svækket kollagen-nanomekanik, da denne svækkelse ikke var påvirket af ændringer i kollagen-tværbindinger. Derudover kræver vores fortolkning af, hvordan osteocytten kan deltage i regulering af mineralhomeostase og opretholdelse af knoglekvalitet ved CKD yderligere globale (dvs. genekspression) og lokale målinger (dvs. histologisk vurdering af knogleresorption og dannelse).

Sammenfattende fandt vi, at CKD sænker knoglekvaliteten ud over virkningerne afaldringalene. CKD og aldring reducerer på samme måde kortikale og trabekulæreknoglemikroarkitektur således, at det mest dybtgående tab af mikroarkitektur blev observeret hos gamle mus mednyre sygdom. CKD formindskede også knoglematerialeegenskaber, hvilket resulterede i knogle med nedsat tilsyneladende vævsmodenhed med ændret kollagen-nanomekanik. Disse reduktioner iknoglekvalitet, herunder mikroarkitektur og knoglematerialeegenskaber, giver indsigt i, hvordan brudmodstanden tabes ved CKD. Yderligere de kombinerede effekter afaldringog CKD på knoglekvalitet hjælper med at forklare, hvorfor ældre personer med CKD har den højeste risiko for fraktur.

Supplerende materiale

Se webversionen på PubMed Central for supplerende materiale.

Anerkendelser:

Vi vil gerne takke William Schroeder for deres fremragende pleje af studiedyr, og William Schroeder og Ryan Clark for serumkemianalyser. Support blev ydet til CMH gennem NIHT32 AG000279. Finansiering til dette arbejde blev også givet til KBK og VLF af NIH/NCATS Colorado CTSA Grant Number UL1 TR001082, Co-Pilot Team Science Award. Finansiering til TA blev leveret af R01 DE019284. Kombineret analyse ved hjælp af nanoindentation og Raman-spektroskopi blev muliggjort ved brug af et brugerdefineret instrument finansieret af NSF Major Research Instrumentation-pris #1338154. Røntgenspredning ved Beamline 7.3.3 af Advanced Light Source blev støttet af US Department of Energy Offices grundlæggende energividenskaber under kontrakt nr. DE-AC02– 05CH11231. Vi takker også AZ Weber-gruppen hos LBL for at levere deres træktrin, som blev støttet af DOE EERE Fuel-Cell Performance and Durability Consortium (FC-PAD).

Referencer

1. Nickolas TL, McMahon DJ, Shane E. Forholdet mellem moderat til sværnyre sygdomog hoftebrud i USA. J Am Soc Nephrol 2006 11;17(11):3223-32. [PubMed: 17005938]

2. Nitsch D, Mylne A, Roderick PJ, Smeeth L, Hubbard R, Fletcher A.Kronisk nyresygdomog hoftebrud-relateret dødelighed hos ældre mennesker i Storbritannien. Nephrol Dial Transplant 2009 5;24(5):1539–

44. [PubMed: 19075194]

3. Yenchek RH, Ix JH, Shlipak MG, Bauer DC, Rianon NJ, Krichevsky SB, et al. Knoglemineraltæthed og risiko for brud hos ældre personer med CKD. Clin J Am Soc Nephrol 2012;7 (marts 1997).

4. Naylor KL, Mcarthur E, Leslie WD, Fraser L, Jamal SA, Cadarette SM, et al. Den treårige forekomst af fraktur ikronisk nyresygdom. Kidney Int 2014;86(4):810–8. [PubMed: 24429401]

5. Kim SM, Long J, Montez-rath M, Leonard M, Chertow GM. J BMR hoftefraktur hos patienter med ikke-dialysekrævendeKronisk nyresygdom

6. Moe S, Drüeke T, Cunningham J, Goodman W, Martin K, Olgaard K, et al. Definition, evaluering og klassifikation af renal osteodystrofi: en holdningserklæring fraNyre sygdom: Forbedring af globale resultater (KDIGO). Nyre Int 2006 6;69(11):1945–53. [PubMed: 16641930]

7. Hruska K, Teitelbaum S. Renal osteodystrofi. N Engl J Med 1999;30(3):773-773.

8. Tillæg KI. KDIGO 2017 RETNINGSLINJER FOR KLINISK PRAKSIS OPDATERING TIL DIAGNOSE, EVALUERING, FOREBYGGELSE OG BEHANDLING AFKRONISK NYRESYGDOM– MINERAL OG 2017;1–59.

9. Moe SM, Chen NX, Newman CL, Gattone VH, Organ JM, Chen X, et al. En sammenligning af calcium til zoledronsyre til forbedring af kortikal knogle i en dyremodel af CKD. J Bone Miner Res 2014;29(4):902–10. [PubMed: 24038306]

10. Heveran CM, Ortega AM, Cureton A, Clark R, Livingston EW, Bateman TA, et al. Moderatkronisk nyresygdomforringer knoglekvaliteten i C57Bl/6J mus. Bone 2016;86:1-9. [PubMed: 26860048]

11. Iwasaki Y, Kazama JJ, Yamato H, Matsuzaki A, Nakano T, Fukagawa M. Ændrede materialeegenskaber er ansvarlige for knogleskørhed hos rotter med kronisk nyreskade. Bone 2015;81:247–54. [PubMed: 26187196]

12. Allen MR, Newman CL, Chen N, Granke M, Nyman JS, Moe SM. Ændringer i skeletkollagen-tværbindinger og matrixhydrering ved høj og lav omsætningkronisk nyresygdom. Osteoporos Int 2015 3;26(3):977–85. [PubMed: 25466530]

13. Kadokawa S, Matsumoto T, Naito H, Tanaka M. Original vurdering af trabekulær knoglearkitektur og iboende egenskaber af corticalknogleVæv i en musemodel afKronisk nyresygdom. J Hard Tissue Biol 2011;20(2):79–86.

14. Stubbs JR, He N, Idiculla A, Gillihan R, Liu S, David V, et al. Longitudinel evaluering af FGF23-ændringer og mineralmetabolismeabnormiteter i en musemodel af kroniskenyre sygdom. J Bone Miner Res 2012;27(1):38–46. [PubMed: 22031097]

15. Tang SY, Herber RP, Ho SP, Alliston T. Matrix metalloproteinase-13 er påkrævet til osteocytisk perilacunar remodeling og opretholder knoglebrudsmodstand. J Bone Miner Res 2012;27(9): 1936–50. [PubMed: 22549931]

16. Dole NS, Mazur CM, Acevedo C, Lopez JP, Monteiro DA, Fowler TW, et al. Osteocyte-Intrinsic TGF- RQP c / c RR 2017;21(9):2585–96.

17. Alliston T Biologisk regulering af knoglekvalitet. Curr Osteoporos Rep 2014;12(3):366–75. [PubMed: 24894149]

18. Kaya S, Basta-Pljakic J, Seref-Ferlengez Z, Majeska RJ, Cardoso L, Bromage T, et al. Laktationsinducerede ændringer i volumen af ​​osteocyt Lacunar-Canalicular Space ændrer mekaniske egenskaber i kortikalt knoglevæv. J Bone Miner Res 2017;32(4):688–97. [PubMed: 27859586]

19. Bonewald LF. Den fantastiske osteocyt. JKnogleMiner Res 2011;26(2):229–38. [PubMed: 21254230]

20. Tokarz D, Martins JS, Petit ET, Lin CP, Liu ES, Program M, et al. Hormonel regulering af osteocyt perilacunar og kanalikulær remodeling i hyp-musemodellen af ​​x-bundet hypophosphatæmi. J Bone Miner Res 2018;33(3):499–509. [PubMed: 29083055]

21. Heveran CM, Rauff A, King KB, Carpenter RD, Ferguson VL. Et nyt open source-værktøj til måling af 3D-osteocyt-lacunære geometrier fra konfokal laserscanningsmikroskopi afslører aldersrelaterede ændringer i lakunarstørrelse og -form i kortikal museknogle. Bone 2018;110.

22. Lewis LMT, Xie Y, Hulbert MA, Campos R, Dallas MR, Bonewald LF, et al. Degeneration af osteocytnetværket i C57Bl/6-musemodellen for aldring.Aldring(Albany NY) 2017;9(10):2190–

208. [PubMed: 29074822]

23. Hemmatian H, Laurent MR, Bakker AD, Vanderschueren D, Klein-Nulend J, van Lenthe GH. Aldersrelaterede ændringer i hunmus cortical knogle mikroporøsitet.Knogle2018;113(april):1–8. [PubMed: 29738854]

24. Hemmatian H, Bakker AD, Klein-Nulend J, van Lenthe GH.Aldring, Osteocytter og Mekanotransduktion. Curr Osteoporos Rep 2017;15(5):401–11. [PubMed: 28891009]

25. Ferguson VL, Ayers RA, Bateman TA, Simske SJ. Knogleudvikling og aldersrelateret knogletab hos C57BL/6J-hanmus. Bone 2003;33(3):387–98. [PubMed: 13678781]

26. Zimmerman EA, Schaible E, Bale H, Barth HD, Tang SY, Reichert P, et al. Aldersrelaterede ændringer i plasticiteten og sejheden af ​​menneskelig kortikal knogle på flere længdeskalaer. Proc Natl Acad Sci 2011;108(35):14416–21. [PubMed: 21873221]

27. Seeman E, Delmas PD. Knoglekvalitet — Materialet og det strukturelle grundlag for én styrke og skrøbelighed. N Engl J Med 2006;354:2250–61. [PubMed: 16723616]

28. Halloran BP, Ferguson VL, Simske SJ, Burghardt A, Venton LL, Majumdar S. Ændringer i knoglestruktur og -masse med stigende alder hos den mandlige C57BL/6J-mus. J Bone Miner Res 2002;17(6):1044-50. [PubMed: 12054159]

29. Lauretani F, Bandinelli S, Griswold ME, Maggio M, Semba R, Guralnik JM, et al. Langsgående ændringer i BMD ogknoglegeometri i en befolkningsbaseret undersøgelse. J Bone Miner Res 2008;23(3): 400–8. [PubMed: 17997708]

30. Yerramshetty JS, Lind C, Akkus O. Den sammensætningsmæssige og fysisk-kemiske homogenitet af mandlig femoral cortex stiger efter det sjette årti. Bone 2006 12;39(6):1236-43. [PubMed: 16860007]

31. Currey JD. Forholdet mellem stivheden og mineralindholdet i knogler. J Biomech 1969;2:477-80. [PubMed: 16335147]

32. Szulc P, Seeman E. At tænke i og uden for knoglehylstret: Dedikeret til PDD Osteoporos Int 2009;20(8):1281–8. [PubMed: 19590836]

33. Miyazaki-Anzai S, Levi M, Kratzer A, Ting TC, Lewis LB, Miyazaki M. Farnesoid × receptoraktivering forhindrer udviklingen af ​​vaskulær forkalkning i ApoE−/−mus med kronisk nyresygdom. Circ Res 2010;106(12):1807–17. [PubMed: 20431060]

34. Bouxsein ML, Boyd SK, Christiansen BA, Guldberg RE, Jepsen KJ, Müller R. Retningslinjer for vurdering af knoglemikrostruktur hos gnavere ved hjælp af mikrocomputertomografi. J Bone Miner Res 2010;25(7):1468–86. [PubMed: 20533309]

35. Turner CH, Burr DB. Grundlæggende biomekaniske målinger af knogle: En tutorial.Knogle1993;14(4): 595-608. [PubMed: 8274302]

36. Lau AG, Kindig MW, Kent RW. Morfologi, fordeling, mineraltæthed og volumenfraktion af humant forkalket kystbrusk. Acta Biomater 2011;7(3):1202–9. [PubMed: 20974298]

37. Lau AG, Kindig MW, Salzar RS, Kent RW. Mikromekanisk modellering af forkalkning af menneskelig kystbrusk ved hjælp af den generaliserede cellemetode. Acta Biomater 2015;18:226–35. [PubMed: 25712387]

38. Hexemer A, Bras W, Glossinger J, Schaible E, Gann E, Kirian R, et al. En SAXS/WAXS/GISAXS strålelinje med flerlags monokromator. J Phys Conf Ser 2010;247.

39. Barth HD, Zimmermann EA, Schaible E, Tang SY, Alliston T, Ritchie RO. Karakterisering af virkningerne af strålebestråling på den hierarkiske struktur og mekaniske egenskaber af menneskelig kortikal knogle. Biomaterials 2011;32(34):8892-904. [PubMed: 21885114]

40. Acevedo C, Bale H, Gludovatz B, Wat A, Tang SY, Wang M, et al. Alendronatbehandling ændrer knoglevæv på flere strukturelle niveauer i raske hunde corticale knogler.Knogle2015;81:352-63. [PubMed: 26253333]

41. Abramoff MD, Magalhães PJ, Ram SJ. Biofotonik international. Biophotonics Int 2004;11(7): 36–42.

42. Oliver WC, Pharr GM. En forbedret teknik til at bestemme hårdhed og elasticitetsmodul ved hjælp af belastnings- og forskydningsfølende fordybningseksperimenter. Vol. 7, Journal of Materials Research 1992

p. 1564–83.

43. Bushby a. J, Ferguson VL, Boyde A. Nanoindentation af knogle: Sammenligning af prøver testet i væske og indlejret i polymethylmethacrylat. J Mater Res 2004 3;19(01):249–59.

44. Bank RA, Beekman B, Verzijl N, De Roos JADM, Nico Sakkee A, Tekoppele JM. Følsom fluorimetrisk kvantificering af pyridinium- og pentosidin-tværbindinger i biologiske prøver i en enkelt højtydende væskechromatografisk kørsel. J Chromatogr B Biomed Appl 1997;703(1-2):37-44.

45. Oren TW, Botolin S, Williams A, Bucknell A, King KB. Artroplastik hos veteraner: Analyse af brusk, knogler, serum og ledvæske afslører forskelle og ligheder i slidgigt med og uden komorbid diabetes. J Rehab Res Dev 2015;48(10):1195–210.

46. ​​Bank RA, Jansen EJ, Beekman B, Te Koppele JM. Aminosyreanalyse ved omvendt fase højtydende væskekromatografi: Forbedrede derivatiserings- og detektionsbetingelser med 9- fluorenylmethylchlorformiat. Anal Biochem 1996;240(2):167-76. [PubMed: 8811901]

47. Burr DB, Hooser M. Ændringer til en bloc grundlæggende fuchsinfarvningsprotokol til demonstration af mikroskader produceret in vivo.Knogle1995;17(4):431-3. [PubMed: 8573418]

48. Feng JQ, Ye L, Schiavi S. Bidrager osteocytter til fosfathomeostase? Curr Opin Nephrol Hypertens 2009;18(4):285–91. [PubMed: 19448536]

49. Feng JQ, Ward JM, Liu S, Lu Y, Xie Y, Yuan B, et al. Tab af DMP1 forårsager rakitis og osteomalaci og identificerer en rolle for osteocytter i mineralmetabolisme. Nat Genet 2006;38(11): 1310–5. [PubMed: 17033621]

50. Komaba H, Fukagawa M. FGF23-parathyroid interaktion: implikationer i kronisk nyresygdom. Nyre Int 2010;77(4):292–8. [PubMed: 20010546]

51. Boskey A, Coleman R. Aldring og knogle. J Dent Res 2010 12;89(12):1333-48. [PubMed: 20924069]

52. Wang X, Shen X, Li X, Mauli Agrawal C. Aldersrelaterede ændringer i kollagennetværket og sejhed af knogler.Knogle2002;31(1):1-7. [PubMed: 12110404]

53. Faul F, Erdfelder E, Lang AG, Buchner A. G*Power 3: Et fleksibelt statistisk magtanalyseprogram for de sociale, adfærdsmæssige og biomedicinske videnskaber. IEEE Int Symp Inf Theory - Proc 2007;39(2):175–91.

54. Ritchie RO, Koester KJ, Ionova S, Yao W, Lane NE, Ager JW. Måling af sejheden af ​​knogler: En tutorial med særlig reference til små dyreforsøg. Bone 2008;43(5):798-812. [PubMed: 18647665]

55. Nyman JS, Roy A, Acuna RL, Gayle HJ, Reyes MJ, Tyler JH, et al. Aldersrelateret effekt på koncentrationen af ​​kollagen-tværbindinger i humant osteonalt og interstitielt knoglevæv.Knogle2006;39(6):1210-7. [PubMed: 16962838]

56. Saito M, Fujii K, Mori Y, Marumo K. Rolle af kollagen enzymatisk og glycation inducerede tværbindinger som en determinant af knoglekvalitet i spontant diabetiske WBN / Kob rotter 2006;1514-23.