Abstrakt

Baggrund:Der er mangel på billedbehandlings- og billedbehandlingsteknikker til nøjagtig diskrimination og kvantificering af den dermale ekstracellulære matrix (ECM), primært kollagen. Denne undersøgelse havde til formål at udvikle og demonstrere en holistisk billedbehandlings- og billedbehandlingstilgang til at visualisere og kvantificere kollagenombygning på makro-, mikro- og nanoskala ved hjælp af histokemisk billeddannelse, Reflectance Confocal Microscopy (RCM) og Atomic Force Microscopy (AFM) , henholdsvis.

Glycoside af cistanche kan også øge aktiviteten af ​​SOD i hjerte- og levervæv og reducere indholdet af lipofuscin og MDA i hvert væv betydeligt, effektivt opfange forskellige reaktive oxygenradikaler (OH-, H₂O₂ osv.) og beskytte mod DNA-skader forårsaget af OH-radikaler. Cistanche phenylethanoid glycosider har en stærk opfangningsevne af frie radikaler, en højere reducerende evne end C-vitamin, forbedrer aktiviteten af ​​SOD i spermsuspension, reducerer indholdet af MDA og har en vis beskyttende effekt på spermmembranfunktionen. Cistanche-polysaccharider kan øge aktiviteten af ​​SOD og GSH-Px i erytrocytter og lungevæv fra eksperimentelt senescent mus forårsaget af D-galactose, samt reducere indholdet af MDA og kollagen i lunge og plasma, og øge indholdet af elastin, har en god rensende effekt på DPPH, forlænge hypoksitiden hos senescent mus, forbedre aktiviteten af ​​SOD i serum og forsinke den fysiologiske degeneration af lunge hos eksperimentelt senescerende mus Med cellulær morfologisk degeneration har forsøg vist, at Cistanche har den gode antioxidantevne og har potentialet til at være et lægemiddel til at forebygge og behandle hudaldringssygdomme. Samtidig har echinacosid i Cistanche en betydelig evne til at opfange DPPH-frie radikaler og har evnen til at opfange reaktive oxygenarter og forhindre frie radikal-induceret kollagen-nedbrydning, og har også en god reparationseffekt på anionskader af thymin frie radikaler.

Klik på Sådan bruger du Antioxidant Cistanche

【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Materialer og metoder:For proof-of-concept blev et kommercielt anti-aldringsprodukt, der er kendt for at inducere kollagen-neosyntese og reorganisering, testet ex vivo på humane hudbiopsier fra to ældre kvinder.

Resultater:I forhold til ubehandlet hud var kollagenfibre (RCM) og fibriller (AFM) længere og justerede efter behandlingen. Indholdet af kollagen og elastin (histokemisk billeddannelse og ELISA) blev statistisk forbedret efter behandling.

Konklusion:Baseret på vores resultater kan vi konkludere: (1) AFM, RCM og histokemisk billeddannelse kan præcist skelne kollagen fra andre ECM-komponenter i huden, og (2) billedbehandlingsmetoderne kan muliggøre kvantificering og dermed fange små forbedringer i kollagen-ombygning efter behandling (kommercielt kosmetisk produkt med kollagenorganiseringsteknologi som proof-of-concept). Den rapporterede holistiske billedbehandlingstilgang har direkte kliniske implikationer for videnskabsmænd og hudlæger til at træffe hurtige, realtids- og præcise beslutninger inden for hudforskning og -diagnostik.

SØGEORD

anti-aldring, atomkraftmikroskopi, kollagen reorganisering, dermal remodeling, ekstracellulær matrix, reflektans konfokal mikroskopi (Vivascope)

1. INTRODUKTION

Kontrolleret remodellering af den dermale ekstracellulære matrix (ECM) er afgørende for normal udvikling og homeostase af huden og andre organer. ECM-ombygning er kendetegnende for patofysiologien af ​​hudældning,1 sårheling og nogle dødelige sygdomme, herunder men ikke begrænset til kræft og fibrose.2 Der er talrige æstetiske og medicinske muligheder for at behandle disse hudsygdomme, men billeddannelsesmetoder er knappe for realtidsvisualisering af ECM-remodellering, primært kollagen, som er den mest udbredte strukturelle komponent i den dermale ECM. Selvom de er under udvikling, er nogle af de nye ikke-invasive realtids kliniske billeddannelsesteknikker til at visualisere kollagen og dets organisation Multi-Photon Microscopy with Second Harmonic Generation (MPM-SHG),3 Reflectance Confocal Microscopy (RCM),4 Optical Coherence Tomography (OCT),5,6 Lindfield Confocal Optical Coherence Tomography (LC-OCT) baseret på kombinationen af ​​modaliteter af RCM og OCT,7 magnetisk resonansbilleddannelse (MRI),8 og ultralydsbilleddannelse.9 Af disse er RCM, MPM og LC-OCT er CE-certificerede hudbilledinstrumenter. Men blandt dem alle er RCM-teknikken (Vivascope® 1500 og 3000 fra Lucid, Inc. USA) den eneste FDA-godkendte kliniske dermatologiske diagnostiske teknik (510(k)# K080788), som også er dækket af de fleste forsikringer i USA til at diagnosticere hudlæsioner.10 Det er et ikke-invasivt og omkostningseffektivt alternativ til klassiske biopsi- og histopatologiske teknikker til at diagnosticere og overvåge hudkræft og deres behandling.10 Blandt prækliniske billeddannelsesmetoder til at visualisere kollagenorganisation, atomkraftmikroskopi ( AFM), 11 elektronmikroskopi, 11,12 histokemisk billeddannelse ved hjælp af fluorescensmikroskopi, 13 polariseret lysmikroskopi, 14 konfokal laser scanningsmikroskopi (CLSM), 15,16 multimodal konfokal reflektans og fluorescensmikroskopi,17 og røntgenspredning med små vinkler18 er Kendt.

En af de væsentligste forbehold, der begrænser brugen af ​​de ovennævnte kliniske billeddannelsesteknikker, er, at det kræver kedelig manuel vurdering, fordi ekspertise og erfaring med emner til nøjagtigt at analysere sort-hvide billeder af hudstrukturer er en forudsætning.19,20 Derfor er der en større indsats. påkrævet inden for billedbehandling for at udvikle og validere algoritmer og software til at automatisere analyse,5 producere letfortolkede digitalt farvede billeder16,17 og udtrække kvantitativ information for at overvåge sygdomsprogression og terapi, herunder kollagenorganisation i sammenhæng med vores forskning.3,6,12–14 Det vil gøre det muligt for ikke-hudlæger og hudlæger at træffe beslutninger hurtigere og med mere selvtillid, da beslutningerne vil blive truffet ud fra en større stikprøvestørrelse af de randomiserede billeder. Nogle grundlæggende undersøgelser er blevet udført for at vise brugen af ​​RCM og MPM til at forstå aldersrelaterede hudændringer (inklusive kollagenorganisering) hos unge versus gamle eller fotoaldrende forsøgspersoner.21,22 Der er dog en begrænset indsats i at udvide kraften af disse billedbehandlingsteknikker for at fange forbedringer i behandlingen, som kræver sofistikeret billedbehandling for at opnå kvantitativ information.3,13,16

Denne undersøgelse havde til formål at udvikle og demonstrere en holistisk billedbehandlings- og billedbehandlingstilgang til at visualisere og kvantificere forbedringer i dermal remodeling (primært kollagen). Som proof-of-concept blev et klinisk bevist kommercielt anti-aging kosmetisk produkt med kollagenorganiseringsteknologi brugt til at vurdere gennemførligheden af ​​at bruge billedbehandling til at kvantificere mindre ændringer i kollagen før og efter behandling.

2 MATERIALER OG METODER

2.1 Hudbiopsier og deres behandling

Hudbiopsier, der blev brugt i denne forskning, var restmateriale fra abdominal plastikkirurgi opnået fra to donorer efter deres samtykke (samtykke bevaret af klinikkerne). Donor#1 (62 år) og donor#2 (52 år) var begge kvinder og Fitzpatrick hudtype II. Biopsier blev opretholdt under standarddyrkningsbetingelser og behandlet dagligt med testprodukt eller kontrol (ubehandlet eller placebo) i 6 dage og høstet på dag 7 til billeddannelse og ELISA. Biopsier fra donor #1 blev brugt til ELISA, RCM og AFM, mens biopsier fra donor #2 blev brugt til histokemisk billeddannelse.

2.2 RCM og AFM billeddannelse

Hudbiopsierne fra donor nr. 1 blev høstet på dag 7 og afbildet direkte uden snit og farvning. AFM (Bruker, Multimode 8 AFM) og RCM (Vivascope® 1500) blev brugt til at opnå højopløselige nano- og mikroskalabilleder af kollagen i hud behandlet med testproduktet og ubehandlet som kontrol. Til alle eksperimenter var AFM udstyret med en lille cantilever (PPP-FMR- 20, nanosensorer): fjederkonstant, k=0.5-9.5 N/m, resonansfrekvens, f {{13} }–115 kHz i luft og blev drevet i tappetilstand ved stuetemperatur. Hudprøverne blev monteret lateralt på en magnetisk skive (1 mm × 1 mm) og placeret på scenen. AFM-billederne blev erhvervet gennem et side-/sidebillede af hudbiopsierne for at undgå sektionering. Til RCM-billeddannelse blev syv tilfældige billeder erhvervet fra behandlede og ubehandlede biopsier fra toppen (Stratum corneum-siden) og bunden (dermis-siden) for at opnå billeder af høj kvalitet af kollagen. RCM-billeder blev behandlet og analyseret ved hjælp af ConfoScan® for kollagentekstur for at rapportere det gennemsnitlige fragmenteringsindeks. Fragmenteringsindekset er defineret ved arealet af objekter divideret med antallet af objekter opnået efter behandling af de rå billeder til kollagentekstur. Figur S1 viser billedbehandling ved hjælp af ConfoScan® for at opnå kvantitative værdier på kollagenfragmenteringsindekset (CFI).

2.3 Histokemisk billeddannelse

For at teste effekten af ​​anti-aldringsproduktet på behandling af fotoældet hud (genvinding af fotobeskadiget kollagen og elastin), blev biopsierne fra donor nr. 2 udsat for en simuleret dosis af UV (6 J/cm2 med 96 procent UVA) ). Prøverne og betingelserne testet i eksperimenterne var: (A) negativ kontrol (ubehandlet, ingen UV og intet testprodukt), (B) positiv kontrol (hud udsat for UV, men intet testprodukt) og (C) behandlet ( hud udsat for UV, efterfulgt af daglig behandling med testprodukt). Hudbiopsier blev høstet på dag 7, sektioneret, farvet for kollagen (Picosirius-farvning) og elastin (immunfarvning) og afbildet. Billederne blev behandlet og analyseret ved hjælp af en proprietær billedanalysealgoritme for at opnå kvantitativ information om indholdet af kollagen og elastin i papillærdermis. Kort fortalt omfatter den analytiske proces til opnåelse af kvantitativ information om kollagen- og elastinindhold konvertering af RGB-billeder til LAB-farverum, frafiltrering af baggrunden for at opnå klare billeder af kollagen og elastin og derefter normalisering af kollagen- og elastinindholdet i papillærdermis til det samme område eller flere pixels. Der var seks biopsier eller hudprøver for hver tilstand og to sektioner eller billeder fra hver prøve, hvilket resulterede i N=12 billeder og datapunkter til statistisk test. Figur S2 viser skemaet for billedbehandlingstilgangen for at opnå kvantitative værdier på kollagenindholdet.

2.4 ELISA

Efter vævshøst på dag 7 blev en 4 mm diameter udstansning brugt til at opnå mindre biopsier og udvalgte to biopsier med ~25 mg/biopsi. De udstansede biopsier (50 mg totalvægt) blev blandet i en lyseringsbuffer indeholdende 0,1 procent Triton og proteaseinhibitorcocktail, efterfulgt af homogenisering af vævet under anvendelse af en automatiseret dobbeltbehandlingshomogenisator med mekaniske og ultralydsfunktioner for fuldstændigt at lysere væv. Det lyserede væv blev centrifugeret, supernatanten blev opsamlet, delt i alikvoter i to og opbevaret ved -80◦C indtil brug. Udover normalisering vedrørende vægt (50 mg) blev prøverne også normaliseret til det totale proteinindhold i supernatanten. Supernatanten blev analyseret for Pro-Collagen 1, Elastin, Alpha-Smooth Muscle Actin (A-SMA), Tenascin-X og Hyaluronsyre under anvendelse af kommercielle ELISA-sæt. Statistikken blev udført på N=6 datapunkter (3 biopsier × 2 alikvoter).

3 RESULTATER

Histokemisk billeddannelse (figur 1) gav makroskopisk information om fordelingen og mængden af ​​kollagen og elastin. Et tydeligt fald i den røde farve af kollagen- og elastinfiberbundterne blev observeret efter behandling af hudbiopsierne med UV.

Tabel 1 viser de kvantitative værdier af kollagen- og elastinindhold i tre behandlingsbetingelser. Disse værdier gjorde det muligt for os at måle forbedringer i kollagen- og elastinindhold og lave statistiske sammenligninger. Faldet i indholdet af kollagen (-23 procent vs. ubehandlet) og elastin (-30 procent vs. ubehandlet) efter UV-eksponering var signifikant (figur 2). Efter behandling med testproduktet i 6 dage var de UV-eksponerede hudbiopsier i stand til at genvinde kollagen (plus 18 procent vs. UV-behandlet) og elastin (plus 46 procent vs. UV-behandlet). Selvom organiseringen af ​​kollagen ikke er tydelig i histokemiske billeder (fordi kollagenet er mest udbredt og tæt pakket i huden), observeres karakteristisk vinkelret justering af elastinfibre, der løber mod epidermis i naturlig (Figur 1A) og UV-beskadiget hud efter behandling med testprodukt (figur 1C).

ELISA (figur 3) sammenligner niveauerne af biomarkører udtrykt af hudbiopsier behandlet med testproduktet eller placebo (der mangler en cocktail af aktive ingredienser kendt for dermal remodeling). Sammenlignet med placebo var der en stigning på 2-3 gange i niveauet af elastin og kollagen, især type 1 pro-collagen (testprodukt vs. placebo). Selvom det ikke var signifikant, blev der også observeret en mærkbar stigning (P < 0.1) i hyaluronsyre og tenascin-X.

RCM var i stand til med succes at afsløre organiseringen af ​​kollagenfibre (bundt af kollagenfibriller) i huden (figur 4). På grund af dens konfokale og kvartbølgeplade optiske funktioner var teknikken i stand til med succes at skelne kollagen (stærkt endogent kontrastmiddel med dobbeltbrydning) fra andre matricer uden at sektionere og farve huden. Det korte fragmenterede kollagen og dets sammenkrøppede arrangement (karakteristisk for beskadiget og dårligt organiseret kollagen i ældet/fotoældet hud) observeres i ubehandlet hudbiopsi. Efter behandling med testproduktet i 6 dage ser arrangementet af kollagenfibre i denne 62-årige kvindehudbiopsi (donor #1) relativt mere organiseret ud end ubehandlede kollagenfibre med længder på mere end 100 µm løbende parallelt med hinanden. Selvom kontrasten er ringe, kan vi observere formen og størrelsen af ​​fibroblasterne (fremhævet med pile i figur 4), store og spredte fibroblaster med regelmæssige former i den behandlede hud vs. ubehandlet hud. Lyse runde celler i figur 4C er af særlig interesse. De kunne være mastceller eller inflammatoriske celler. Det er ikke klart, om disse inflammatoriske celler er repræsentative for normale hudsundhedstilstande, eller om de blev udtrykt som reaktion på betydelig kraft påført laserhovedet for at forsøge at opnå bedre kontakt mellem laserhovedet og huden for billeder af høj kvalitet af kollagenet. fibre.

Tabel 2 viser det gennemsnitlige fragmenteringsindeks bestemt ved ConfoScan®-analyse af syv tilfældige billeder af behandlet versus ubehandlet hud. Kollagen betyder fragmenteringsindeks for den behandlede versus ubehandlede gruppe var 0.0 henholdsvis 32 og 0,064. Et fald i fragmenteringsindekset indikerer forbedring i kollagenorganisationen.

For at tage et dybere kig på kollagenarrangementet blev AFM-billeder erhvervet for at visualisere kollagenarrangementet på nanoskala (figur 5). Vi kan se individuelle kollagenfibriller (det bundt til at danne en kollagenfiber) af nanometer tykkelse. Yderligere kan vi også se det karakteristiske tværbåndsmønster af kollagenfibriller (D ~ 68 nm), som er i overensstemmelse med litteraturen11 og validerer, at AFM var i stand til at skelne kollagen fra andre ECM-fibre. I konsensus med RCM blev en relativt parallel organisering af kollagenfibriller også observeret under AFM for behandlet versus ubehandlet hud.

4 DISKUSSION

I denne forskning undersøgte vi potentialet ved at bruge tre billedbehandlingsteknikker til at visualisere ændringer i kollagen i humane hudbiopsier behandlet med et kommercielt anti-aging produkt indeholdende nogle benchmark syntetiske peptider, der er kendt for at inducere kollagen ombygning. De histokemiske billeddannelses- og RCM-billeddannelsesteknikker blev kombineret med billedbehandling for at opnå semi-kvantitativ information om kollagenindhold og fragmentering som et indeks for at score forbedring i kollagen efter behandling med anti-aldringsproduktet.

Interessant nok viste vores undersøgelse en meget stærk sammenhæng mellem histokemisk billeddannelse og ELISA for at rapportere en signifikant stigning i kollagen- og elastinniveauer efter behandling med testproduktet. Type 1 pro-collagen er markøren for nyligt syntetiseret kollagen, og dets overekspression af fibroblaster som reaktion på Matrixyl® (Sederma/Croda) er en velkarakteriseret mekanisme for anti-aldringseffekten.23,24 Der var også en signifikant stigning. i ekspressionen af ​​A-SMA, en markør unik for myofibroblaster, som er specielt differentierede fibroblastceller. Rollen af ​​A-SMA i fibroblast-medieret ECM-kontraktion og -ombygning er velkendt,25 og en direkte sammenhæng mellem A-SMA-ekspression og fibroblast-kontraktionsaktivitet er rapporteret.26 En stigning i hyaluronsyre, selvom den ikke er signifikant, kan primært være tilskrives tilstedeværelsen af ​​hyaluronsyre som en fugtgivende ingrediens i anti-aldringsproduktet. TNSX er et nyt ECM-protein, der er lokaliseret mellem eller på overfladen af ​​kollagenfibriller i huddermis27, og TNSX er rapporteret at inducere dosisafhængig kollagenfibrillogenese,28,29 selvom der er uenighed om TNSX binder specifikt til pro-kollagentypen 1 eller andre kollagen- og ECM-biomolekyler også.28,29 En dosisafhængig stigning i TNSX som reaktion på SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics), en aktiv ingrediens i anti-aldringstestproduktet, er rapporteret (International patentansøgning# PCT /IB2017/056370). Derfor kan det antages, at Matrixyl® (Sederma/Croda) og SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics) i testproduktet arbejder sammen for at lette syntesen og tilpasningen af ​​nysyntetiseret kollagen, procollagen type 1. Et signifikant fald i kollagen og elastin efter UV-behandling (fotobeskadiget hudmodel), efterfulgt af deres reparation efter behandling med et anti-aldringsprodukt (jævner tilbage til naturlig hud, der ikke er udsat for UV) indikerer evnen af ​​den histokemiske billeddannelse (polariseret mikroskopi) og billedbehandlingsteknik til at måle små ændringer i indholdet af ECM-komponenter (figur 1 og 2). Der blev gjort en flittig indsats for at forsøge at afbilde kollagen- og elastinorganisation (efter immunfluorescensmærkning) ved hjælp af det nyindkøbte Thunder Leica fluorescensbilleddannelsessystem. Opløsningen var dog ikke høj nok, og der kunne derfor ikke konkluderes noget pålideligt om organisationen. Den fluorescens-baserede CLSM-billeddannelse tilbyder højere opløsning end konventionel widefield-fluorescens-billeddannelse for at muliggøre klar visualisering af kollagen og elastin-organisation. Konventionel widefield fluorescensbilleddannelse er begrænset af dominansen af ​​sekundær fluorescens og tykkelsen af ​​prøverne, hvilket ikke er et problem for CLSM.

Vi var i stand til at visualisere kollagenorganisation ved hjælp af RCM (figur 4). RCM er et bedre valg end CLSM, fordi (1) RCM ikke bruger nogen mærkning eller farvning (i modsætning til fluorescens-CLSM, som kræver immunfluorescensmærkning), hvilket fjerner enhver chance for usikkerhed eller uspecificitet på grund af etiketter, og (2) RCM er en almindelig brugt klinisk dermal billeddannelsesteknik til kollagen. En forbedring af teksturen af ​​kollagenfibre, lange og tynde fibre efter behandling med et anti-aging produkt (i forhold til tætte og korte fragmenterede kollagenfibre i ubehandlet hud) indikerer dets virkemåde på det strukturelle niveau. RCM-opløsningen var høj nok til selv at fange fibroblastceller, hudens kollagensyntesefabrik. Kollagenfibrene viklet rundt om fibroblasterne kunne være de nyligt syntetiserede kollagenfibre, da det er tyndere i diameter end omgivende kollagenfibre og deres bundter (figur 4). Baseret på ConfoScan®-analyse af randomiserede RCM-billeder kan vi konkludere, at ubehandlet hud har et meget højere indeks af fragmenteret kollagen sammenlignet med den behandlede hud. Selvom vi i RCM-billeder kan se den parallelle justering af kollagenfibre efter behandling med testproduktet, kan det ikke konkluderes, medmindre isotropi/anisotropi-forholdet er beregnet, hvilket var uden for rammerne af denne forskning. AFM's ultrahøje opløsning på nanoskalaniveau afslører dog bevis for kollagenjustering på enkeltfibrillersniveau. Baseret på den positive korrelation mellem RCM- og AFM-billeder på den parallelle justering af kollagenfibre (ubehandlet vs. behandlet), er der en stærk mulighed for, at antialdringsproduktet har den påståede kollagen-reorganiseringsegenskab. Til fremtidig forskning bør undersøgelsen udføres for at overvåge den samme plet (kollagenfibre) over tid (langsgående undersøgelse) før og efter behandling med testproduktet for at undersøge, om det er justeringen af ​​eksisterende kollagen eller de nysyntetiserede kollagenfibre, der er mere afstemt. Imidlertid vil en sådan longitudinel undersøgelse kræve integration af RCM- og AFM-instrumenter til levende vævsbilleddannelseskapacitet og time-lapse-billeddannelse for at fange ændringer i realtid i kollagenombygning.

5. KONKLUSIONER

Baseret på vores forskningsresultater fra denne proof-of-concept-undersøgelse kan vi konkludere, at AFM, RCM og histokemiske billeddannelsesteknikker er i stand til at overvåge ændringer i kollagenorganisationen på henholdsvis nano-, mikro- og makroskala. AFM- og RCM-billeder viser tegn på kollagenjustering på nano- og mikroskala efter behandling med testproduktet. Analysen af ​​randomiserede RCM og histokemiske billeder ved hjælp af proprietære billedbehandlingsmetoder indikerer yderligere, at hud efter behandling med testproduktet har lavere kollagenfragmentering og højere kollagenfortætning sammenlignet med ubehandlet. Selvom der er blevet lagt en del indsats i at udvikle og validere billedbehandlingsalgoritmer3,5,6,12-14,16,17, er der behov for mere forskning i denne retning for at opnå datadrevne prækliniske og kliniske forsknings- og diagnostiske beslutninger. Vores holistiske tilgang til at anvende billedbehandlingsteknikker med høj opløsning og højt indhold i kombination med kraftfulde og robuste billedbehandlingsalgoritmer og software er et skridt i denne retning.

Selvom omfanget af denne forskning var begrænset til at undersøge kollagenorganisationen som svar på et anti-aldringstestprodukt på ex vivo human hudbiopsi, har disse billeddannelsesteknikker implikationer for overvågning og kvantificering af ECM-ombygning, som er kendetegnende for normal udvikling, sårheling, samt en nøglemarkør i patofysiologien af ​​livstruende tilstande såsom fibrose og kræft, der opstår fra ukontrolleret ECM-ombygning.2

INTERESSEKONFLIKT

Forfatterne erklærer, at ingen interessekonflikter kan opfattes som en skade for upartiskheden af ​​den rapporterede forskning.

REFERENCER

1. Shin JW, Kwon SH, Choi JY, Na JI, Choi HR, Park KC. Molekylære mekanismer for dermal aldring og antialdringsmetoder. Int J Mol Sci. 2019;20(9):2126.

2. Cox TR, Erler JT. Remodeling og homeostase af den ekstracellulære matrix: Implikationer for fibrotiske sygdomme og cancer. Dis Model Mek. 2011;4(2):165–78

3. Pittet JC, Freis O, Vazquez-Duchene MD, Perie G, Pauly G. Evaluering af elastin/kollagenindhold i human dermis in-vivo ved multifoton tomografi-variation med dybde og korrelation med aldring. Kosmetik. 2014;1(3):211–21

4. Longo C, Casari A, Beretti F, Cesinaro AM, Pellacani G. Hudens aldring: Mikroskopisk vurdering af epidermale og dermale ændringer ved hjælp af konfokal mikroskopi. J Am Acad Dermatol. 2013;68(3):e73–82.

5. Yamazaki K, Li E, Miyazawa A, Kobayashi M. Dybdeløst undersøgelse af flere optiske egenskaber og rynkemorfologi i øjenhjørneområder med multi-kontrast Jones matrix optisk kohærens tomografi. Skin Res Technol. 2020;27(3):435-443.

6. Yow AP, Cheng J, Li A, Srivastava R, Liu J, Wong DWK, et al. Automatiseret in vivo 3D high-definition optisk kohærens tomografi hudsystem. Annual Int Conf IEEE Eng Med Biol Soc. 2016;2016:3895–8

7. Ruini C, Schuh S, Sattler E, Welzel J. Linjefelt konfokal optisk kohærens tomografi-praktiske applikationer i dermatologi og sammenligning med etablerede billeddannelsesmetoder. Skin Res Technol. 2021;27:340-52.

8. Tal S, Maresky HS, Bryan T, Ziv E, Klein D, Persitz A, et al. MRI ved påvisning af kosmetiske injicerbare fyldstoffer til ansigtet. Hoved Ansigt Med. 2016;12(1):27.

9. Mandava A, Ravuri PR, Konathan R. Ultralydsbilleddannelse i høj opløsning af kutane læsioner. Indian J Radiol Imaging. 2013;23(3):269–7.

10. Edwards SJ, Mavranesouli I, Osei-Assibey G, Marceniuk G, Wakefield V, Karner C. Vivascope 1500 og 3000 systemer, der detekterer og overvåger hudlæsioner: En systematisk gennemgang og økonomisk evaluering. Health Technol Assess. 2016;20(58):1–260.

11. Ushiki T. Kollagenfibre, retikulære fibre, elastiske fibre. En omfattende forståelse fra et morfologisk synspunkt. Arch Histol Cytol. 2002;65(2):109-26

12. Starborg T, Kalson NS., Lu Y, Mironov A, Cootes T, Holmes D, et al. Brug af transmissionselektronmikroskopi og 3view(R) til at bestemme kollagenfibrillernes størrelse og tredimensionelle organisation. Nat Protoc. 2013;8(7):1433–48.

13. Wegner KA, Keikhosravi A, Eliceiri AW, Vezina CM. Fluorescens af picosirius rød multiplekset med immunhistokemi til kvantitativ vurdering af kollagen i vævssnit. J Histochem Cytochem. 2017;65(8):479–90.

14. Changoor A, Tran-Khanh N, Methot S, Garon M, Hurtig MB, Shive MS, et al. En polariseret lysmikroskopimetode til nøjagtig og pålidelig gradering af kollagenorganisation i bruskreparation. Slidgigt Cartil. 2011;19(1):126–35.

15. Bernstein EF, Chen YQ, Kopp JB, Fisher L, Brown DB, Hahn PJ, et al. Langvarig soleksponering ændrer kollagenet i den papillære dermis. Sammenligning af solbeskyttet og fotoældret hud ved Northern-analyse, immunhistokemisk farvning og konfokal laserscanningsmikroskopi. J Am Acad Dermatol. 1996;34(2 pkt. 1):209-18.

16. Schuurmann M, Stecher MM, Paasch U, Simon JC, Grunewald S. Evaluering af digital farvning til ex-vivo konfokal laserscanningsmikroskopi. JEADV. 2020;34(7):1496–9.

17. Gareau DS. Gennemførlighed af digitalt farvede multimodale konfokale mosaikker til at simulere histopatologi. J Biomed Opt. 2009;14(3):034050.

18. Zhang Y, Ingham B, Cheong S, Ariotti N, Tilley RD, Naffa R, et al. Real-time Synchrotron lille vinkel røntgenspredningsundersøgelser af kollagenstruktur under læderbehandling. Ind Eng Chem Res. 2018;57(1):63–9.

19. Fra billede til information: Billedbehandling i dermatologi og kutanbiologi. I: Hamblin, M., Avci, P., Gupta, G., redaktører. Imaging in dermatology, 1st ed.Academic Press: Amsterdam, Holland; 2016. s. 519-35.

20. Schneider SL, Kohli I, Hamzavi IH, Council ML, Rossi AM, Ozog DM. Nye billeddannelsesteknologier i dermatologi, del II: Anvendelser og begrænsninger. J Am Acad Dermatol. 2019;80(4):1121-31.

21. Guida S, Pellacani G, Ciardo S, Longo C. Refleksmikroskopi billeddannelse af aldrende hud og hudkræft. Dermatol Prac Concept. 2021;11(3):2021068.

22. Wang H, Shyr T, Fevola MJ, Cula GO, Stamatas GN. Aldersrelaterede morfologiske ændringer af den dermale matrix i menneskelig hud blev dokumenteret in vivo ved multifotonmikroskopi. J Biomed Opt. 2018;23(3):1–4.

23. Jones RR, Castelletto V, Connon CJ, Hamley IW. Kollagenstimulerende virkning af peptid amfifil C16-KTTKS på humane fibroblaster. Mol Pharm. 2013;10(3):1063–9.

24. Gorouhi F, Maibach HI. Aktuelle peptiders rolle i forebyggelse eller behandling af ældet hud. Int J Cosmet Sci. 2009;31(5):327-45.

25. Shinde AV, Humeres C, Frangogiannis NG. Rollen af ​​a-glat muskel-aktin i fibroblast-medieret matrixkontraktion og ombygning. Biochim Biophys Acta. 2017;1863(1):298-309.

26. Hinz B, Coletta G, Tomasek JJ, Gabbiani G, Chaponnier C. Alfa glatmuskelaktinekspression opregulerer fibroblastkontraktil aktivitet. Mol Biol Cell. 2001;12(9):2730-41.

27. Valcourt U, Alcaraz LB, Exposito JY, Lethias C, Bartholin L. Tenascin-X: Ud over den arkitektoniske funktion. Cell Adh Migr. 2015;9(1–2):154–65.

28. Egging D, van den Berkmortel F, Taylor G, Bristow G, Schalkwijk J. Interaktioner af humane tenascin-X-domæner med dermale ekstracellulære matrixmolekyler. Arch Dermatol Res. 2007;298(8):389-96.

29. Minamitani T, Ikuta T, Saito Y, Takebe G, Sato M, Sawa H, et al. Modulation af kollagen fibrillogenese af tenascin-X og type VI kollagen. Exp Cell Res. 2004;298(1):305-15

STØTTENDE INFORMATION

Yderligere understøttende oplysninger kan findes i onlineversionen af ​​artiklen på udgiverens websted.

【For mere information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】