Udforskning af de terapeutiske virkninger af Cistanche-baseret formulering på kronisk ikke-bakteriel prostatitis (CNP) og dens mekanisme via tarmmikrobiota og stofskifte i en rottemodel

Abstrakt

Baseret på eneksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) rottemodel, denne undersøgelse undersøgerterapeutiske virkninger og underliggende mekanismer af en Cistanche-baseret kapsel (CBC)i at lindrekronisk ikke-bakteriel prostatitis (CNP). Målet er at skabe et præklinisk grundlag for udvikling afforbedrede botaniske lægemidlermed udvidede indikationer for styring afkronisk prostatitis og bækkensmerter.

Metode:

Histopatologiske ændringeri rotte blev prostatavæv vurderet viahæmatoxylin-eosin (HE) farvning.

Infiltration af hvide blodlegemeroglecithin kropsdensiteti prostatahomogenater blev evalueret mikroskopisk.

Serum niveauer afsuperoxiddismutase (SOD)ogmalondialdehyd (MDA)blev målt ved hjælp af biokemisk analyse.

Inflammatoriske cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 og IL-10) blev kvantificeret vha.enzym-linked immunosorbent assay (ELISA).

16S rDNA-sekventeringblev brugt til at evaluere ændringer itarmmikrobiota.

Umålrettet metabolomicsanalyse blev udført for at belysemetaboliske veje påvirket af CBC.

Western blot (WB)blev brugt til at verificere moduleringen afSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalvej.

Resultater:

CBC administration væsentligt:

Reduceret histologisk skadetil prostatavæv;

Øget lecithin kropsdensitetognedsat leukocytinfiltration;

Sænkede pro-inflammatoriske cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);

Forhøjede det antiinflammatoriske cytokin IL-10;

Forbedret tarmmikrobiotasammensætning, især stigendeLactobacillusogBifidobacterium animalis, mens du reducererunclassified_f_PrevotellaceaeogVeillonella;

Ændrede 10 nøglemetabolitter, herundersphingosinogretinoyl-glucuronid, påvirkersphingolipid metabolismeogretinol metabolisme;

Nedreguleret SPHK1 og S1P1 ekspression, og hæmmetPI3K og Akt fosforyleringi prostatavæv.

Konklusion:

Cistanche-baserede kapsler (CBC) effektivtlindre inflammatorisk skadei prostatavævet hos EAP-rotter. Mekanismerne kan omfatte:

Modulation af intestinal mikrobiota dysbiose;

Korrektion af metaboliske dysfunktioner;

Undertrykkelse af SPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalvejen.

Disse resultater understøtter potentialet forCistanche-afledte urteformuleringersom ennaturlig multi-target terapiforkronisk ikke-bakteriel prostatitisog tilbyde en lovende retning for fremtidennaturlægemiddelinnovation.

Nøgleord:

Cistanche-baserede kapsler; kronisk ikke-bakteriel prostatitis; tarmmikrobiota; metabolomik; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt pathway; urtebehandling for prostatitis; naturlig anti-inflammatorisk behandling; EAP rottemodel

 

 

Cistanche-baseret formel te

Køb nu

 

 

Abstrakt:

Kronisk ikke-bakteriel prostatitis/kronisk bækkensmertesyndrom (CNP/CPPS), også kendt som kategori III prostatitis, tegner sig for ca.90% af alle prostatitis tilfælde. Det er karakteriseret ved ubehag i de nedre urinveje, bækken- og perineale smerter, seksuel dysfunktion og ofte psykologiske eller neurologiske symptomer. I traditionel kinesisk medicin (TCM) er CNP kategoriseret under "Jing Zhuo" (sæd-turbiditet), ofte forbundet med intern fugt-varme, miltmangel eller langvarig brug af kolde eller bitter medicin, der svækker miltens funktion, hvilket fører til ophobning af fugt og varme i prostata.

Nuværende vestlige farmakologiske behandlinger for CNP, herunder antibiotika, -blokkere og NSAID'er, fokuserer primært på symptomhåndtering og mangler ofte langsigtet effekt. I stigende grad henvender forskerne sig tilurtemedicin som et sikrere og mere holistisk alternativ.

Cistanche: En lovende urtekandidat

Cistanche, en traditionel kinesisk urt kendt for sinnyretonificerende, anti-inflammatorisk, immunmodulerende og antioxidantegenskaber, har vist potentiale til behandling af forskellige genitourinære lidelser. Moderne farmakologiske undersøgelser rapporterer detCistanche deserticolakan regulere inflammatoriske cytokiner, forbedre immunresponset og forbedre mikrocirkulationen, hvilket gør det til enlovende kandidat til CNP-behandling.

Trods voksende interesse, den præcisemekanismer, hvorved Cistanche lindrer CNP, forbliver dårligt forstået. Nylige undersøgelser tyder på dettarmmikrobiota dysbiosespiller en kritisk rolle i patogenesen af ​​CNP. Derfor undersøger denne undersøgelse de terapeutiske virkninger af enCistanche-baseret urtekapsel (CBC)på CNP ved hjælp af en rottemodel for eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP), med særligt fokus påtarmmikrobiotasammensætning og metabolomiske ændringer.

 

1. Materialer og metoder

1.1 Dyr

30 Sprague-Dawley (SD) hanrotter af SPF-grad(300-320 g) og45 SPF-grade SD-hanrotter(180-200 g) blev opnået fra Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.

Huset under standard SPF-forhold: temperatur 25±1 grad, luftfugtighed 55±5%, 12-timers lys/mørke-cyklus.

Dyreetisk godkendelse:HUCMS00302159, givet af den etiske komité ved Hubei University of Chinese Medicine.

1.2 Lægemidler og reagenser

Cistanche-baserede kapsler (CBC)(Batch: 20221226) fra en GMP-certificeret urtefarmaceutisk virksomhed.

Tamsulosin hydrochlorid kapsler(positiv kontrol) købt fra Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.

Komplet Freunds adjuvans (CFA)fra Sigma (Tyskland).

ELISA-sætfor IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF- og iNOS fra Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.

Oxidativ stress kits(MDA, T-SOD) fra Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.

Tarmmikrobiota DNA-ekstraktionssætogmetabolomiske reagenserfra Meiji Biotechnology (Shanghai).

1.3 Udstyr

Højhastighedscentrifuge (Eppendorf, Tyskland), UHPLC og Q-Exactive HF-X massespektrometer (Thermo Fisher Scientific) og andre molekylærbiologiske instrumenter til ELISA, PCR, sekventering og metabolomisk analyse.

2. Eksperimentel protokol

2.1 Induktion af eksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) model

2.1.1 Fremstilling af prostataprotein-CFA-emulsion

Prostatavæv blev ekstraheret fra donorrotter, homogeniseret i sterilt saltvand med 0,5 % TritonX-100 og centrifugeret ved 20.000 rpm i 30 minutter ved 4 grader.

Proteinkoncentration justeret til 20 mg/ml ved hjælp af BCA-assay.

Proteinekstrakt blev emulgeret med CFA i et forhold på 1:1 for at danneCNP antigen emulsion.

2.1.2 Immuniseringsprocedure

45 SD-rotter (180±20 g) blev tilfældigt opdelt, hvor 10 blev tildelt den normale gruppe.

Resterende rotter modtagetsubkutane flerpunktsinjektioneraf CNP-antigenemulsionen i lysken, inderlåret og ryggen.

Booster-immunisering blev administreret denDag 15efter samme protokol.

Normale kontroller modtog saltvandsinjektioner.

2.2 Gruppering og behandling

På dag 28 efter immunisering blev vellykket modellering bekræftet via histologi (HE-farvning).

Rotter blev tilfældigt tildelt til:

Normal kontrolgruppe

Modelgruppe

Positiv lægemiddelgruppe: Tamsulosin (0,021 mg/kg)

CBC lavdosis gruppe: 0,63 g/kg (klinisk ækvivalent dosis)

CBC High-Dose Group: 1,26 g/kg

Behandlingen blev administreret oralt én gang dagligt i 30 dage. Kontrol- og modelgrupper fik saltvand.

 

 

2.3 Prøveindsamling og -analyse

24 timer efter den sidste dosis blev rotter aflivet.

Blod blev opsamlet via abdominal aorta; serum blev separeret og opbevaret ved -80 grader.

Prostatavæv blev høstet, vejet og undersøgt makroskopisk.

DeProstataindeks (PI)blev beregnet:
PI=Prostata vådvægt / kropsvægt

Væv blev fikseret i formalin til histologi eller frosset til cytokinanalyse, Western blotting, mikrobiota-DNA-ekstraktion og metabolomik.

Konklusion og betydning

Denne undersøgelse har til formål at giveprækliniske bevisertil brug forCistanche-baseret urteterapii behandlingen afkronisk ikke-bakteriel prostatitis. Ved at integreretarmmikrobiotaanalyseogmetabolomics profilering, søger vi at afdækkemulti-target mekanismerhvorigennem Cistanche udøver sine antiinflammatoriske og immunmodulerende virkninger.

Disse resultater vil understøtteudvikling af Cistanche som et nyt naturlægemiddelfor CNP og potentielt føre tilnye indikationertil dens kliniske anvendelse.