Udforskning af de terapeutiske virkninger og mekanismer af Yishen Tonglong afkog på godartet prostatahyperplasi hos rotter via IL-6/STAT3-signalvejen
Dec 17, 2025
Abstrakt
Objektiv:For at undersøge, gennem interleukin (IL)-6/signaltransduceren og transkriptionsaktivatoren (STAT)3 signalvejen, de forbedrende virkninger og mekanismer af Yiqi Wenshen Tonglong Decoction (her forkortet som Yishen Tonglong Decoction) på benign prostatahyperplasi (BPH) hos rotter.
Metoder:Sprague-Dawley (SD) hanrotter blev kastreret og derefter subkutant injiceret med testosteronpropionat for at etablere en BPH-model. Rotter blev tilfældigt tildelt følgende grupper (n=12/gruppe): model; Yishen Tonglong Decoction lav- og højdosisgrupper (15 og 30 g/kg); STAT3-aktivatorgruppe (Colivelin, 1 mg/kg); og kombineret højdosis Yishen Tonglong Decoction (30 g/kg) + Colivelin (1 mg/kg) gruppe. Yderligere 12 SD-hanrotter tjente som en sham-opereret gruppe. Efter gruppespecifikke behandlinger med Yishen Tonglong Decoction og/eller Colivelin vurderede vi forholdet mellem prostataindeks (PI) og østradiol (E2)/testosteron (T); evalueret prostata histomorfologi og fibrose med hæmatoxylin-eosin (HE) og Massons trichrome farvning; målte Ki-67-ekspression ved immunhistokemi; kvantificerede IL-6 og IL-1 niveauer i prostatavæv og serum ved ELISA; og detekterede kollagen I/III og IL-6/STAT3 pathway-relaterede proteiner ved Western blotting.
Resultater:Sammenlignet med sham viste modelgruppen markant prostatahyperplasi og fibrose med signifikante stigninger i PI, Ki-67 optisk tæthed, væv/serum IL-6 og IL-1, kollagen I/III, IL-6 protein og p-STAT3/STAT3, sammen med et signifikant fald i E2/05 P <.05 (alt). I forhold til modelgruppen lindrede både lave og høje doser af Yishen Tonglong Decoction hyperplasi og fibrose, reducerede PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 protein og p-STAT3/STAT3 og øgede E2/T (alle P < 0,05). Højdosis afkog gav større forbedringer end den lave dosis (P < 0,05). Colivelin alene forværrede hyperplasi og fibrose og øgede yderligere PI, Ki-67, IL-6, IL-1, collagen I/III, IL-6 og p-STAT3/STAT3, mens E2/T faldt (P < 0,05). Samtidig administration af Colivelin svækkede fordelene ved højdosis afkog, hvilket signifikant forværrede alle ovennævnte indeks sammenlignet med højdosis afkog alene (P < 0,05).
Konklusion:Yishen Tonglong Decoction dæmper inflammation og forbedrer BPH-patologi hos rotter, i det mindste delvist ved at undertrykke aktivering af IL-6/STAT3-signalvejen.
Nøgleord:IL-6/STAT3-signalering; Yishen Tonglong afkog; benign prostatahyperplasi; urt til helbredelse af prostatitis problemer
Urte Cistanche kosttilskud
Flere detaljer om ny tcm urt til prostata sundhed
Indledning
Benign prostatahyperplasi (BPH) er en almindelig obstruktiv tilstand i de nedre urinveje hos midaldrende og ældre mænd, karakteriseret ved epitel- og stromal proliferation og prostataforstørrelse, hvilket fører til tøven, hyppighed og trang til urinvejene, som signifikant forringer livskvaliteten [1,2]. Inflammation er en vigtig drivkraft for BPH-patogenese; det fremmer epitel- og stromal glatmuskelproliferation og fibrotisk ombygning. Anti-infektiøse og anti-inflammatoriske strategier er derfor effektive til forebyggelse og behandling af BPH [3,4].
IL-6 er et pleiotropt proinflammatorisk cytokin, der er bredt udtrykt i vævsceller. Den aktiverer STAT3 for at udløse inflammatoriske programmer [5]. Hæmning af IL-6/STAT3-aktivering reducerer nedstrøms proinflammatoriske mediatorer, afbryder inflammatoriske kaskader, mindsker hypertrofi-associeret immuninfiltration og fibrose og bremser i sidste ende BPH-progression [6,7]. Derfor er IL-6/STAT3 et rationelt terapeutisk mål i BPH.
Yishen Tonglong Decoction er en klassisk kinesisk urteformel med traditionelle funktioner til at nære Yin og støtte Yang, tonificere Qi og nyrer og fremme blodcirkulationen med fugtlindring. Klinisk bruges det til dysuri på grund af fugt-varme og blodstase med nyre-Qi-mangel, og det er blevet rapporteret at dæmpe prostatabetændelse og hyperplastiske ændringer i BPH [8]. Ud over BPH hæmmer det human prostatacancercelleproliferation, fremmer apoptose og undertrykker invasion og migration [9]. Netværksfarmakologi og molekylær docking foreslår, at nøglemål, der er relevante for prostatasygdomsmodulation, omfatter blandt andre AKT1, IL-6 og VEGFA [10]. Baseret på dette teoretiske rationale og tidligere beviser antog vi, at Yishen Tonglong Decoction forbedrer BPH via undertrykkelse af IL-6/STAT3-signalering. Vi testede denne hypotese i en rotte BPH-model.
Materialer og metoder
Dyr
SD-hanrotter, SPF-kvalitet, 200-230 g, 6-7 uger gamle, blev opnået fra Daoke Pharmaceutical Technology (Guangdong) Co., Ltd. (SCXK [Yue] 2022-0060). Rotter blev anbragt ved mindre end eller lig med 4 pr. bur under 12 timers lys/mørke cyklusser, 50-60% luftfugtighed og 23-25 grader.
Reagenser og instrumenter
Yishen Tonglong Decoction rå urter: Anemarrhena asphodeloides (Zhi Mu), Phellodendron chinense (Huang Bai), Cinnamomum cassia (Rou Gui), Rehmannia glutinosa tilberedt rod (Shu Di Huang), Cornus officinalis (Shan Zhu Yu), Dioscorea opposita (Shan coaingo Paonia) suffruticosa-bark (Mu Dan Pi), Achyranthes bidentata (Niu Xi), Aconitum carmichaeli-bearbejdet siderod (Fu Zi), Sparganium stoloniferum (San Leng), Curcuma zedoaria (E Zhu), Prunus persica-frø (Tao Ren), Vaccaria segetalis-frø (Xing-Zinga-Liua-plante), frø (Xing-Zaqua Liua). Kommer fra Beijing Tongrentang (Anguo) Chinese Herbal Slices Co., Ltd.
Colivelin (HY-P1061), MCE (USA).
Testosteronpropionat (renhed 98%, T7260); ELISA-sæt til rotte IL-1 (SEKR-0002), E2 (SEKR-0107), T (SEKSM-0003), Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.
HE farvningssæt (ab245880), anti-p-STAT3 (ab76315), Masson's kit (ab150669), anti-STAT3 (ab68153), anti-kollagen I (ab270993), anti-Ki-67 (ab16649), anti-kollagen (ab16649), anti-kollagen anti-IL-6 (ab259341), HRP æsel anti-kanin sekundær (ab205722), rotte IL-6 ELISA (ab234570), Abcam (USA).
Anti-aktin (AF5003), Beyotime (Shanghai).
Paraffinmikrotom HS-2205 (Olabao, Jinan), KP-PH100S mikroskop (Shenzhen KEPUS), UMR-9600 mikropladelæser (Hangzhou Youmi), PowerPac Basic 1645050 og PROTEAN strømforsyninger (Bio-Rad, USA).
BPH Model og gruppering
Rotter blev bedøvet med natriumpentobarbital (45 mg/kg, 3% vægt/volumen, intraperitoneal), testiklerne blev ydre og kirurgisk fjernet. Efter 3 dages bedring modtog rotter daglige subkutane injektioner af testosteronpropionat (5 mg/kg i olivenolie) i 21 dage. Grov forstørrelse og histopatologisk hyperplasi bekræftede BPH-modelleringssucces [11]. Sham-rotter gennemgik scrotal incision uden orkidektomi og modtog vehikelolivenolie.
Forberedelse og administration
En recept af Yishen Tonglong Decoction indeholdt: Zhi Mu, Huang Bai, Shan Zhu Yu, Shan Yao, Fu Ling, Mu Dan Pi, Wang Bu Liu Xing, Ze Xie (hver 15 g); Niu Xi, Shu Di Huang, Tao Ren (hver 20 g); Fu Zi, San Leng, E Zhu, Rou Gui (hver 10 g). Urter blev afkogt to gange med vand, filtrater kombineret og koncentreret til 1,5 eller 3,0 g/ml. Colivelin blev opløst i saltvand til 0,1 mg/ml.
Lav- og højdosis afkogsgrupper: sondemad 15 eller 30 g/kg (10 mL/kg ved 1,5 eller 3,0 g/mL), plus intraperitonealt saltvand (10 mL/kg).
Colivelin-gruppe: gavage saltvand (10 ml/kg) plus intraperitoneal Colivelin 1 mg/kg (10 ml/kg af 0,1 mg/ml).
Højdosis + Colivelin gruppe: sondemad 30 g/kg afkog plus Colivelin 1 mg/kg ip
Sham- og modelgrupper: gavage saltvand og ip saltvand (10 ml/kg).
Alle behandlinger var én gang dagligt i 21 dage.
Prostataindeks og E2/T; Samling af prøver
Fireogtyve timer efter den endelige behandling blev rotter bedøvet (som ovenfor). Kropsmasse og våd prostatavægt blev registreret for at beregne PI=prostata vådvægt/kropsmasse. Abdominalt aortablod blev opsamlet, centrifugeret (2000 rpm, 15 min) for at opnå serum. E2 og T blev målt ved ELISA og E2/T beregnet; resterende serum blev opbevaret ved -80 grader. Ca. 0,7 g prostatavæv blev lynfrosset i flydende nitrogen til proteinassays; resten blev fikseret, dehydreret, paraffin-indlejret og sektioneret ved ~5 μm.
HE og Masson's Staining
Afparaffinisering i xylen og graderede ethanoler (100%, 90%, 80%, 75%) blev efterfulgt af hydrering. Sektioner blev farvet med HE og Massons kits i henhold til producentens instruktioner (3 objektglas hver), derefter vasket, dehydreret, renset og monteret til mikroskopi.
Immunhistokemi for celleproliferation
Efter afparaffinering/hydrering blev sektioner behandlet med 3 % H2O2, blokeret med gedeserum og inkuberet natten over med anti-Ki-67 (1:150). Detektion brugte et SP-kit med DAB-kromogen. Billeder blev erhvervet og Ki‑67 optisk tæthed kvantificeret ved ImageJ.
ELISA for IL‑6 og IL‑1 i prostata og serum
Frosset prostatavæv blev hakket, homogeniseret i RIPA-buffer og centrifugeret (3000 rpm, 20 min) for at opnå totale proteinlysater. Proteinkoncentrationer blev bestemt ved BCA. Alikvoter (0,2 ml) af vævslysat og optøet serum blev analyseret for IL-6 og IL-1 ved ELISA.
Western Blot for kollagen I/III og IL-6/STAT3 pathway proteiner
Denaturerede prøver (100 grader) blev adskilt ved SDS-PAGE og overført til nitrocellulose. Membraner blev opdelt efter molekylvægt for kollagen I, kollagen III, -actin, IL-6, STAT3 og p-STAT3. Efter 3 % BSA-blokering blev primære antistoffer påført, efterfulgt af HRP-konjugeret sekundært antistof. Bånd blev visualiseret ved kemiluminescens og kvantificeret med ImageJ.
Statistik
Data blev analyseret ved hjælp af SPSS 26.0 med envejs ANOVA og SNK-q post hoc test.
Resultater
BPH modelleringssucces: Sammenlignet med sham udviste modelgruppen tydelige stigninger i prostatastørrelse og histologisk hyperplasi og fibrose. PI, Ki‑67 optisk tæthed, prostata/serum IL‑6 og IL‑1, kollagen I/III, IL‑6 og p‑STAT3/STAT3 var alle signifikant forhøjet, mens E2/T var reduceret (P < 0,05).
Terapeutiske virkninger af Yishen Tonglong Decoction: Både 15 og 30 g/kg doser mindskede prostataforstørrelse og fibrose. Disse behandlinger sænkede signifikant PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6-protein og p-STAT3/STAT3 og øgede E2/T (P < 0,05). Den høje dosis gav overlegne virkninger i forhold til den lave dosis (P < 0,05).
Effekter af STAT3-aktivering: Colivelin forværrede prostatahyperplasi og fibrose og øgede yderligere inflammatoriske og fibrotiske markører, mens E2/T faldt i forhold til model (P < 0,05).
Antagonisme af Colivelin: Samtidig behandling med Colivelin svækkede fordelene ved højdosis afkog, hævede inflammatoriske/fibrotiske indekser og reducerede E2/T sammenlignet med højdosis afkog alene (P < 0,05).
Diskussion
Mekanistisk begrundelse: IL-6/STAT3-aksen er en central inflammatorisk vej, der er involveret i ombygning af prostatavæv. IL-6-binding aktiverer JAK/STAT3-signalering, driver transskription af proinflammatoriske og profibrotiske gener, fremmer epitel-/stromal proliferation, immuncelleinfiltration og ekstracellulær matrixaflejring. Vores resultater - forbedring med urteformlen og forringelse med en STAT3-aktivator - understøtter en kausal mekanistisk sammenhæng, hvorved Yishen Tonglong Decoction lindrer BPH ved at dæmpe IL-6/STAT3-aktivering.
Urteformelperspektiv (urt til helbredelse af prostatitisproblemer): Urtekomponenterne giver komplementære virkninger, der er relevante for BPH og prostatitislignende betændelse:
Fugt-varme clearing og anti-inflammatorisk: Zhi Mu (Anemarrhena), Huang Bai (Phellodendron), Mu Dan Pi (Paeonia bark), Ze Xie (Alisma).
Qi/nyre-tonificering og endokrin modulering: Shu Di Huang (Rehmannia), Shan Zhu Yu (Cornus), Shan Yao (Dioscorea), Fu Ling (Poria).
Blodaktivering og antifibrotisk potentiale: San Leng (Sparganium), E Zhu (Zedoary), Tao Ren (ferskenkerne), Wang Bu Liu Xing (Vaccaria).
Opvarmer Yang og forbedrer mikrocirkulationen: Rou Gui (kanel), Fu Zi (akonit, forarbejdet).
Sene/knoglestøtte og bækkencirkulation: Niu Xi (Achyranthes).
Denne synergi kan kollektivt reducere inflammatoriske cytokiner (IL-6, IL-1), proliferation (Ki-67) og fibrose (collagen I/III), i overensstemmelse med undertrykkelse af IL-6/STAT3-signalering observeret i Western blots. Stigningen i E2/T tyder på delvis rebalancering af kønssteroidmiljøet, hvilket også kan påvirke prostatavækstdynamikken.
Klinisk oversættelse og begrænsninger: Selvom disse prækliniske data er lovende for BPH og potentielt for prostatitis-lignende inflammation, kræver ekstrapolering til mennesker forsigtighed. Dosiskonvertering, kvalitetskontrol af multi-urtepræparater og urte-lægemiddel-interaktioner kræver yderligere undersøgelse. Ikke desto mindre styrker den pathway-centrerede evidens (fordel ved afkog, skade ved STAT3-aktivering og pathway-aflæsninger) det teoretiske grundlag for klinisk udforskning af denne urtebaserede tilgang til helbredelse af prostatitisproblemer og BPH.
Konklusion
Yishen Tonglong Decoction lindrer prostatahyperplasi og fibrose hos BPH-rotter ved at hæmme IL-6/STAT3-aktivering og reducere inflammatorisk og profibrotisk signalering med dosisafhængig effekt. Disse resultater giver mekanistisk støtte til dets traditionelle brug og en moderne, pathway-baseret begrundelse for yderligere udvikling som en urtebaseret terapi for BPH og prostatitis-relaterede tilstande.
Referencer
[1–13] Som citeret i den originale tekst.
