Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Abstrakt:En voksende bekymring for den generelle sundhed driver et globalt marked af naturlige ingredienser, ikke kun i fødevareindustrien, men også inden for det kosmetiske område. I denne undersøgelse, en screening på potentielle kosmetiske anvendelser af vandige ekstrakter fra tre islandsketangs produceret af pulserende elektriske felter (PEF) blev udført. Producerede ekstrakter af PEF fra Ulva lactuca, Alaria esculenta og Palmaria palmata blev sammenlignet med den traditionelle varmtvandsekstraktion med hensyn til indhold af polyphenol, flavonoid og kulhydrat. I øvrigt,antioxidantegenskaber og enzymatiske inhiberende aktiviteter blev evalueret ved anvendelse af in vitro-assays. PEF udviste lignende resultater som den traditionelle metode og viste adskillige fordele, såsom dens ikke-termiske natur og kortere ekstraktionstid. Blandt de tre islandske arter viste Alaria esculenta det højeste indhold af phenol (middelværdi 8869,7 µg GAE/g dw) og flavonoid (middelværdi) værdi 12.098,7 µg QE/g dw) forbindelser, der også udviser den højesteantioxidantkapaciteter. Desuden udviste Alaria esculenta-ekstrakter fremragende anti-enzymatiske aktiviteter (76,9, 72,8, 93.0 og 100 procent for kollagenase, elastase,tyrosinaseandhyaluronidase, henholdsvis) til deres anvendelse i hudblegnings- og anti-aging-produkter. Således tyder vores foreløbige undersøgelse på, at islandske Alaria esculenta-baserede ekstrakter produceret af PEF kan bruges som potentielle ingredienser til naturlige kosmetiske og kosmetiske formuleringer.

Nøgleord:makroalger; Ulva lactuca; Alaria esculenta; Palmaria palmata; PEF-assisteret ekstraktion;bioaktive forbindelser; grøn udvinding; naturlige ingredienser; kosmetik

cistanche er blegende naturlige ingredienser

1. Introduktion

I de senere år er efterspørgslen efter nye bioaktive forbindelser med potentielle sundhedsmæssige fordele undergået en væsentlig stigning. Mange forskningsgrupper har lagt vægt på forskning i marine organismer, såsom makroalger, for at finde nye og bæredygtige kilder til naturlige forbindelser til anvendelser i agro-fødevareindustrien, farmakologi, fødevarer og for nylig inden for kosmetik [1,2] . Makroalger er en stor og heterogen gruppe af fotosyntetiske organismer karakteriseret ved enorm biodiversitet og kompleks biokemisk sammensætning. I henhold til deres kemiske struktur og pigmentindhold kan makroalger opdeles i tre slægter, herunder brunalger (Phaeophyceae), rødalger (Rhodophyta) og grønalger (Viridiplantae). Algeforbindelser opbevares inde i cellecytoplasmaet eller bundet til cellemembraner; således er celleforstyrrelser afgørende for værdiforøgelsen af ​​algebiomasse. Derudover er cellevægssammensætningen meget variabel mellem algearter lige fra små membraner til flerlags komplekse strukturer, hvilket gør genvinding af algeprodukter til en udfordring [3]. Generelt er tang fremragende kilder til polysaccharider, proteiner, lipider og en lang række sekundære metabolitter, såsom phenolforbindelser, terpenoider, carotenoider, pigmenter og nitrogenderivater [4-6]. Selvom primære metabolitter har afgørende betydning, har nyere data vist, at indholdet af sekundære metabolitter bestemmer de biologiske aktiviteter aftanguddrag [7].

En voksende bekymring for generel sundhed og velvære samt bevidsthed om skadelige kemikalier i hverdagsprodukter driver et globalt marked af naturlige og økologiske ingredienser [8]. I løbet af de seneste år har forbrugernes bevidsthed om at foretrække naturlige ingredienser og miljøvenlige produkter udvidet sig fra fødevareindustrien til kosmetik- og personlig plejeindustrien [9]. Desuden har der i den nuværende kontekst med global opvarmning og økologiske spørgsmål været stigende offentlig bevidsthed om miljøspørgsmål. I lyset af disse aktuelle bekymringer har forbrugerne vendt deres interesser mod grønne, sunde og kemikaliefrie produkter. Som følge heraf erstatter kosmetikindustrien i øjeblikket giftige kemikalier og skadelige ingredienser med nye og naturlige højværdiforbindelser for at producere "kemisk rene" skønhedsprodukter [10].

Kosmetik er traditionelt blevet defineret som produkter, der skal påføres den menneskelige krop for at rense, forskønne eller fremme tiltrækningskraft uden at påvirke kroppens struktur eller funktioner. Nye tendenser og nylige forbrugerkrav har imidlertid fremmet udviklingen af ​​nye produkter, der giver flere fordele med minimal indsats. Begrebet kosmetik bruges nu ofte til at beskrive kosmetiske produkter med bioaktive ingredienser, der hævder at have medicinske eller lægemiddellignende fordele [11]. Cosmeceuticals indeholder normalt funktionelle ingredienser såsom vitaminer, fytokemikalier, enzymer,antioxidanterog/eller æteriske olier [12]. Da en lang række af disse bioaktive forbindelser er blevet fundet i makroalger, er undersøgelsen af ​​nyetangs og marine alger-afledte ekstrakter har vist sig at være et lovende område af kosmetiske og kosmetiske undersøgelser [13,14].

En række sekundære metabolitter afledt aftangs er kendt for deres værdifulde sundhedsmæssige gavnlige virkninger på huden, såsom fotobeskyttende, fugtgivende,antioxidantanti-inflammatoriske og regenerative egenskaber [15]. Baseret på disse gavnlige virkninger er alger inkorporeret i kosmetiske produkter såsom solcreme, anti-aging produkter samt til forebyggelse af hyperpigmentering, mens polysaccharider bruges til at holde huden fugtet og forhindre tørhed [16]. Under aldring er de ekstracellulære matrixproteiner modtagelige for overdreven aktivitet af proteolytiske enzymer, såsom kollagenaser og astaser, hvilket resulterer i synlige ændringer i huden, såsom rynker eller tab af hudens elasticitet. En lovende tilgang til at forhindre ydre hudældning er hæmningen af ​​kollagenase- og elastaseaktiviteter af naturlige forbindelser. Planteekstrakter er blevet bredt undersøgt og fundet at have anti-collagenase og anti-elastase aktiviteter [17]. Der er dog ringe information om de hæmmende enzymatiske aktiviteter af tangekstrakter.

De hyppigst anvendte ekstraktionsmetoder til isolering af bioaktive stoffer fra tang er baseret på konventionelle teknikker. Ikke desto mindre har brugen af ​​traditionelle metoder adskillige ulemper, såsom brugen af ​​store mængder organiske opløsningsmidler, længere ekstraktionstider, høje temperaturer, selektivitetsproblemer, høje energikrav og coekstraktion af ikke-målrettede eller interfererende forbindelser [18]. Derfor har nye ekstraktionsteknikker baseret på grønne kemiprincipper en potentiel interesse [19].

Pulserende elektrisk felt (PEF) er en ny, ikke-termisk og energieffektiv fødevareforarbejdningsteknologi [20]. PEF involverer påføring af elektriske feltimpulser normalt ved høje spændinger (kV-område) og korte varigheder (mikro eller nano-sekunder) til et produkt placeret mellem to elektroder [21]. Anvendelsen af ​​elektriske impulser frembringer dannelsen af ​​reversible eller irreversible porer i cellemembranerne, defineret som elektroporation eller elektro-permeabilisering, som følgelig letter den hurtige diffusion af opløsningsmidlerne og masseoverførselsforøgelsen af ​​intracellulære forbindelser [22]. Nylige applikationer har fokuseret på brugen af ​​pulserende elektrisk energi som en ekstraktionsteknik (PEF-assisteret ekstraktion) fra bio-, fødevarer og landbrugsprodukter [23]. Med PEF-behandling er det muligt at opnå ekstrakter med højere renhed, øge ekstraktionshastigheden af ​​bioaktive forbindelser såsom polyphenoler, carotenoider eller anthocyaniner og eliminere brugen af ​​organiske opløsningsmidler og forkorte ekstraktionstiden [24,25]. PEF-behandling er med succes blevet anvendt til udvinding af værdifulde forbindelser fra forskellige marine kilder, såsom proteiner [26-28], kulhydrater [29,30], lipider [31,32] og pigmenter såsom carotenoider, klorofyler eller phycocyaniner [22,33 ,34] fra mikroalger og tang.

Hovedformålet med denne undersøgelse var således at vurdere de potentielle kosmetiske anvendelser af PEF-ekstrakter fra tre makroalgearter, der vokser i Island: U. lactuca (grønne makroalger), A. esculenta (brune makroalger) og P. palmata (røde makroalger) . I et forsøg på at udvikle organiske og naturlige ingredienser til grønne formuleringer, blev PEF-assisteret ekstraktion foreslået som et miljøvenligt alternativ til den traditionelle organiske opløsningsmiddeltekstraktion. Efter ekstraktionsprocessen, vandigtangekstrakter blev karakteriseret i form af polyphenol, flavonoid og kulhydratindhold. I øvrigt,antioxidantegenskaber og enzymatiske inhiberende aktiviteter blev evalueret ved anvendelse af in vitro aktivitetsassays. Resultaterne rapporteret heri vil danne grundlag for at forbedre forståelsen af ​​brune, røde og grønne makroalger for at producere aktive ingredienser til innovative formuleringer i kosmetiske produkter, der indeholder biologisk aktive forbindelser isoleret fra naturlige og bæredygtige kilder.

2. Resultater og diskussion

2.1. PEF-assisteret udvinding til forarbejdning af islandsk tangbiomasse

Resultaterne viser, at den elektriske ledningsevne var højest i suspension fremstillet af A. esculenta efterfulgt af P. palmata og U. lactuca (p < {0}}.05)="" (tabel="" 1).="" effekten="" af="" ​​behandlingstype="" blev="" dog="" ikke="" identificeret="" som="" signifikant="" (p=""> 0,05). Elektrisk ledningsevnemåling er med succes blevet brugt af andre forfattere til at evaluere effektiviteten af ​​PEF-behandling i biologiske væv til frigivelse af intracellulære ioniske stoffer som et resultat af den øgede cellemembranpermeabilisering [35-37].

I vores undersøgelse indikerede resultaterne ikke en stærkere frigivelse af disse stoffer af PEF, da ændringerne i ledningsevne induceret af ekstraktionsbehandlinger havde en tendens til at være højest i HW-suspensioner. Tidligere undersøgelser har konkluderet, at den initiale ledningsevne af det ekstracellulære medium påvirker elektroporationseffektiviteten, men der er mangel på enighed om, hvorvidt der er et positivt eller negativt forhold mellem disse to faktorer [38]. Variationer i ledningsevne og karakteristika af materialet kan gøre sammenligningen kompliceret. I vores undersøgelse var der stor forskel mellem ledningsevnen af ​​A. esculenta suspensioner og de to andre arter, hvilket ikke afspejledes i graden af ​​ledningsevneændringer under ekstraktionsbehandling. Det er blevet udtalt, at askeindholdet i brun tang kan udgøre over 50 procent af dens tørvægt [39], hovedsageligt bestående af ioner, hvilket delvist kan forklare den høje ledningsevne i A. esculenta suspensioner sammenlignet med de to andre arter.

Resultaterne viser, at pH-værdien i U. lactuca-suspensionen var lavere end for de to andre arter, men der blev ikke frembragt nogen klare effekter fra ekstraktionstypen. Temperaturen blev øget fra 22 ± 1◦C før behandling til 95 ◦C med HW (for alle arter), til 36.0 ± 1.0 ◦C, 46,3 ± 0. 6 ◦C og 51.0 ± 1◦C ved PEF, i A. esculenta, P. palmata og U. lactucasuspensioner. Samme tendens sås for grupperne behandlet med PEF, som derefter blev yderligere opvarmet af HW. Temperaturstigningen var forårsaget af omdannelsen af ​​elektrisk energi til termisk energi (ohmsk opvarmning) i suspensionen under PEF-behandling. Niveauet af temperaturstigning er kendt for at være i forhold til den påførte strøm, men i omvendt proportion til ledningsevnen. Dette kunne forklare, hvorfor P. palmata og U. lactuca nåede højere temperatur under PEF-behandlingen, selvom de har lavere ledningsevne end A. esculenta.

2.2. UV-VIS Absorptionsspektre af islandske tangekstrakter

De undersøgte tang adskiller sig i de spektrale profiler (Figur 1), hvilket tyder på, at sammensætningen og UV-absorptionspotentialet varierer mellem arter. Imidlertid udviste typen af ​​ekstraktionsteknik ikke en bemærkelsesværdig effekt i UV-absorptionsspektrene; tangekstrakter viste lignende absorptionsprofiler uanset ekstraktionsmetoden.

UV-absorptionsspektrene for grønalgen U. lactuca viste en fremtrædende top i UV-B-området (280-320 nm) (Figur 1a), mens ekstrakterne fra brunalgen A. esculenta ikke viste nogen klar dannelse af absorptionszone (Figur 1c) ). Resultater indikerede imidlertid en stærkere absorbans ved 220 nm i A. esculenta-ekstrakter sammenlignet med U. lactuca og P. palmata, som formodedes at være resultatet af det høje indhold af phenoliske forbindelser i A. esculenta (tabel 2). Et absorptionsmaksimum inden for dette område er blevet relateret til en kobling mellem fenolforbindelser og alginater. Dette forhold formodes at bevare phenolforbindelsernes UV-absorptionsevne over tid [40].

Et mere interessant fund var, at resultaterne opnået for rødalgeekstrakterne, P. palmata absorberede del af UV-A-stråling (320-400 nm). Det er kendt, at rødalger akkumulerer fotobeskyttende forbindelser med ultraviolet strålingsabsorptionsevne, såsom mycosporin-lignende aminosyrer (MAA), som absorberer i denne specifikke UV-region [41]. P. palmata udmærkede sig i UV-absorptionsspektret med fremtrædende toppe mellem 320 og 340 nm i overensstemmelse med tilstedeværelsen af ​​MAA'er, der absorberer i dette område [42], såsom palythinol (peakabsorption ved 332 nm), asterina{{9} (absorptionspeakat) 330 nm), porphyra-334 (topabsorption ved 334 nm) og andre [43]. Fordi ekstraktionsbetingelser, såsom type opløsningsmiddel, er kendt for indflydelsen på effektiviteten af ​​ekstraktion, blev resultaterne i denne undersøgelse sammenlignet med tidligere undersøgelser af ekstraktion af MAAs med vand fra P. palmata. I disse undersøgelser blev de maksimale absorptionstoppe detekteret ved 325 til 330 nm [44], som i nærværende undersøgelse. Derfor er det muligt at antage, at toppene observeret mellem 320 og 340 nm kan skyldes tilstedeværelsen af ​​MAA'er.

Forskelle i absorptionsspektrene mellem 350 og 700 nm er blevet forklaret ved tilstedeværelsen af ​​forskellige tilbehørspigmenter i respektive fotosystemer af grønne, brune og røde makroalger, klorofyl-b (450-500 nm), fucoxanthin (400-500 nm) og phycoerythrin (600-650 nm) henholdsvis [45]. Koncentrationen af ​​vandopløselige forbindelser i ekstrakterne havde stærkere virkninger. Følgelig var mønsteret, der afspejler forskellen i pigmenter mellem algearter, ikke tydeligt i denne undersøgelse.

2.3. Samlet phenol-, flavonoid- og kulhydratindhold i islandske tangekstrakter

Det samlede phenolindhold itangs varierede fra 1592 til 9368 µg GAE/g dw (tabel 2). Brunalgen A. esculenta udviste den højeste mængde (p < {3}}.05)="" af="" phenoliforbindelser="" (middelværdi="" 8869,7="" µg="" gae/g="" dw),="" efterfulgt="" af="" p.="" palmata="" (middelværdi="" 1806,2="" µg)="" gae/g="" dw)="" og="" u.="" lactuca="" (middelværdi="" 1750,7="" µg="" gae/g="" dw)="" (der="" var="" ingen="" signifikante="" forskelle="" mellem="" p.="" palmata="" og="" u.="" lactuca="" ekstrakter)).="" for="" hver="" tangart="" var="" indholdet="" af="" polyphenoler="" ikke="" forskelligt="" blandt="" ekstraktionsmetoder="" bortset="" fra="" u.="" lactuca,="" hvilke="" resultater="" viste,="" at="" hw="" var="" den="" mest="" effektive="" teknik="" (p="">< 0,05).="" imidlertid="" bør="" fordelene="" ved="" pef,="" herunder="" dets="" ikke-termiske="" natur,="" kortere="" ekstraktionstid="" (10="" min="" vs.="" 45="" min)="" og="" grønne="" proces="">

Blandt de tre algegrupper indeholder brune makroalger et højere antal polyfenoler end røde og grønne makroalger. Resultaterne var i overensstemmelse med tidlige undersøgelser [46,47], som rapporterede, at brune (f.eks. A. esculenta og Saccharina latissma) algearter havde højere phenolindhold end røde (P. palmata) og grønne arter (f.eks. U. lactuca). Dette blev understøttet af andre forfattere [48], som konkluderede, at det gennemsnitlige polyphenolindhold var artsspecifikt (A. esculenta > S. latissma > P. palmata), og phenolindholdet var mere end tre gange højere i A. esculenta end i de andre arter ( A. esculenta: 37 mg phloroglucinol-ækvivalenter (PGE)/g dw, S. latissma: 8 mg PGE/g dw, P. palmata: 5 mgGAE/g dw). Desuden rapporterede forfatterne i samme undersøgelse, at polyphenolindholdet varierer med sæsonen, mens de rumlige variationer (alger blev høstet i Norge, Frankrig og Island) viste en marginal effekt. For eksempel har Gager et al. (2020) fandt, at der var en signifikant effekt af sæsonbestemte variationer i polyphenolindholdet i A. esculenta, med mere end 300 mg GAE/g DW om efteråret sammenlignet med under 20 mg GAE/g DW om foråret. Phlorotanniner fra syv brune tang kommercielt høstet i Brittany (Frankrig) påvist ved 1H NMR og in vitro assays: tidsmæssig variation og potentialevaluering i kosmetiske applikationer. Vores prøver blev indsamlet i juli (U. lactuca og A. esculenta) og i november (P. palmata). I Roledas undersøgelse [48] var det gennemsnitlige indhold i A. esculenta fra Trondheim, Norge (ikke indsamlet i Island) om sommeren 40 mg PGE/g dw og P. palmata fra Island, men var 4 mg GAE/g dw om efteråret. De højere værdier rapporteret i sammenligning med vores undersøgelse kan forklares med det anvendte ekstraktionsmedie (80:20 acetone:vand), hvilket sandsynligvis vil resultere i højere ekstraktionsudbytter. Et højere polyphenolindhold blev også fundet for A. esculenta-ekstrakter under anvendelse af en blanding af ethanol og vand (50:50) med ultralyd [49]. Ved anvendelse af det samme ekstraktionsmedium og den klassiske opløsningsmiddelekstraktion blev A. esculenta imidlertid rapporteret at indeholde 44,1 mg GAE/100 g dw vandige ekstrakter [50], relativt svarende til det, der blev observeret i denne undersøgelse.

Gennemsnitligt flavonoidindhold var artsspecifikt (A. esculenta > U. lactuca > P. palmata;(p < 0.{{10}}5) (tabel 2). Den højeste mængde af flavonoider blev observeret for A. esculenta ekstrakter (middelværdi 12098,7 µg QE/g dw), mens lavere indhold blev fundet for U. lactuca (middelværdi 4152,4 µg QE/g dw), og et minimumsindhold blev bestemt for P. palmata ekstrakter ( middelværdi 905,8 µg QE/g dw). I lighed med adfærden fundet for det totale phenolindhold, havde typen af ​​ekstraktionsteknologi ikke signifikante effekter på flavonoidindholdet (p > 0,05), med undtagelse af U. lactuca. Resultaterne viste, at HW og kombinationen af ​​begge teknikker (PEF plus HW) var de mest effektive teknikker til ekstraktion af flavonoider i U. lactuca (p < 0,05).

Der er talrige undersøgelser af flavonoidindholdet i landplanter, men undersøgelser af flavonoidindhold i alger er sparsomme [51] og især i de arter, der er undersøgt i nærværende værk. Nemlig undersøgelsen af ​​Ummat et al. [49] rapporterede, at ultralydsassisteret ekstraktion forbedrede genvindingen af ​​flavonoider i alle 11tangs undersøgt (herunder A. esculenta) sammenlignet med konventionelle opløsningsmiddelekstraktioner under anvendelse af en blanding af 50 procent ethanol. I en anden undersøgelse blev flavonoider kvantificeret i de methanoliske ekstrakter af fire Ulva-arter (Ulva clathrata, Ulva linza, Ulva flexuosa og Ulva intestinalis) dyrket ved forskellige dele af den Persiske Golfs nordlige kyster i det sydlige Iran; flavonoidindholdet i algeekstrakt varierede fra 8 til 33 mg RE/g dw [52]. Tidligere undersøgelser foretaget af samme forskergruppe fandt dog markante ændringer i de kemiske bestanddele med ændringer af årstider og miljøforhold [53]. Det er således lidt svært at have et fuldt overblik over bibliografien over disse bioaktive forbindelser itangs, på grund af manglen på tilgængelig publiceret forskning, men også på grund af ændringerne i flavonoidindholdet påvirket af vækstbetingelser og geografisk placering.

Mean carbohydrate content of produced extracts was also species-specific (P. palmata >U. lactuca > A. esculenta; p < 0.05)="" (tabel="" 2).="" indholdet="" varierede="" fra="" 44,8="" til="" 510="" mg="" glue/gdw="" afhængigt="" af="" algeart.="" tang="" indeholder="" store="" mængder="" polysaccharider="" med="" vigtige="" funktioner="" for="" makroalgecellerne,="" herunder="" strukturel="" støtte="" og="" energilagring.="" for="" eksempel="" er="" hoveddelen="" af="" ​​røde="" og="" brune="" tangcellevægge="" repræsenteret="" af="" sulfaterede="" galaktaner,="" som="" er="" kendt="" som="" agar,="" alginat="" og="" carrageenan="" [54].="" redalgen="" p.="" palmata="" viste="" den="" højeste="" mængde="" kulhydratindhold="" (middelværdi="" 441="" mgglue/g="" dw).="" resultaterne="" var="" i="" overensstemmelse="" med="" tidligere="" undersøgelser,="" der="" rapporterede="" den="" højeste="" polysaccharidkoncentration="" i="" palmaria-arter="" [55].="" desuden="" har="" mutripah="" et="" al.="" [56]="" beskrev="" et="" samlet="" kulhydratindhold="" i="" p.="" palmata="" på="" 469="" mg/g="" tør="" tang,="" relativt="" svarende="" til="" det,="" der="" er="" observeret="" i="" denne="">

Den grønne makroalge U. lactuca viste indhold på op til 249,5 mg GluE/g dw afhængig af den anvendte ekstraktionsteknik (tabel 2). Baseret på litteratur har U. lactuca vandopløselig og uopløselig cellulose svarende til strukturelle polysaccharider med en hovedkomponent kaldet ulvan, som bidrager med fra 9 til 36 procent tørvægtsbiomasse [57]. Ulvan er hovedsageligt sammensat af sulfateret rhamnose, uronsyrer (glucuronsyre og iduronsyre) og xylose. På grund af dens polære natur forbedres opløseligheden af ​​ulvan-vandige opløsninger ved ekstraktion ved høje temperaturer (80–90 ◦C) [58]. Ekstraktionstemperaturen kan være årsagen til, at det samlede kulhydratindhold i U. lactuca-ekstrakter produceret ved den traditionelle varmtvandsekstraktion og kombinationen af ​​begge metoder (PEF plus HW) var højere (p < 0,05)="" end="" indholdet="" opnået="" kun="" ved="" brug="" af="">

På den anden side fremhæver andre forfattere vigtigheden af ​​sæsonvariationen i polysaccharidindholdet. For eksempel hævder Schiener et al. at identificere sæsonvariationer og forudsige bedste høsttider for tang. Den sæsonbestemte sammensætningsanalyse af A. esculenta viste, at maksimale værdier af kulhydrater faldt sammen med reducerede koncentrationer af protein, aske, polyphenoler og fugt [39]. Ifølge forfatterne kan disse forhold, som varierer mellem årstider og arter, bruges af industrier til at maksimere udbyttet af målrettedetangkomponenter.

2.4. Antioxidantkapacitet af islandske tangekstrakter

A. esculenta havde den stærkeste DPPH-opfangende aktivitet blandt råekstrakterne af de tre algearter (p < {0}}.05),="" med="" en="" renseeffekt="" på="" mere="" end="" 90="" procent="" (tabel="" 3).="" sammenlignet="" med="" de="" forskellige="" standardopløsninger,="" viste="" a.="" esculenta="" sammenlignelig="" renseaktivitet="" som="" 100="" µg/ml="" ascorbinsyre="" (87,9="" procent),="" gallussyre="" (91,0="" procent)="" og="" -tocopherol="" (87,9="" procent).="" vores="" resultater="" var="" i="" overensstemmelse="" med="" nyere="" undersøgelser="" [50],="" som="" også="" rapporterede="">antioxidantaktivitet af A. esculenta ekstrakter. Overraskende nok ingen signifikante forskelleantioxidantaktivitet blev observeret mellem de forskellige testede ekstraktionsmetoder (p > 0.05). Det var forventet, at PEF-ekstrakter ville vise bedre antioxidantværdier end ekstrakterne fremstillet med den varme traditionelle ekstraktion, da andre undersøgelser har vist, at grønne teknikker (såsom mikrobølgeassisteret ekstraktion eller enzymatisk ekstraktion) effektivt kunne undgå nedbrydning af bioaktive forbindelser, der udviser højere antioxidantaktiviteter [59 ,60].

Evnen tiltangekstrakter til at reducere ferri (Fe3 plus) til ferro (Fe2 plus) ion og evnen til at opfange det radikale ABTS blev også undersøgt ved henholdsvis FRAP- og ABTS-metoden. FRAP-resultater viste lignende tendenser som DPPH, hvilket viste, at A. esculenta havde den stærkeste evne til at reducere ferri (Fe3 plus ) til ferro (Fe2 plus) ion blandt råekstrakterne af de tre algearter (p < 0).{{6}="" }5).="" der="" blev="" dog="" fundet="" en="" anden="" adfærd="" for="" abts.="" altangekstrakter="" viste="" en="" lignende="" evne="" til="" at="" opfange="" radikal="" abts="" (p=""> 0,05), hvilket indikerer, at disse arter sandsynligvis indeholder nogle effektive forbindelser, som er ansvarlige for dets rensende aktivitet.

Generelt er brunalger kendt for at præsentere højereantioxidantpotentiale i forhold til røde og grønne familier [61]. Vores resultater viste også, at vandige ekstrakter fra A. esculenta udviste effektive antioxidantaktiviteter med hensyn til at fjerne frie radikaler og reducere kraft, hvilket tyder på, at A. esculenta potentielt kunne være en ressource for naturlige antioxidanter. Den høje antioxidantaktivitet, der er observeret for A. esculenta-ekstrakter, kan være forbundet med det høje indhold af phenolforbindelser, der er bestemt i brunalgeekstrakterne. I mange undersøgelser erantioxidantaktiviteten af ​​algeekstrakter er blevet tilskrevet phenolforbindelserne, hvilket viser positive korrelationer mellem phenolindhold og opfangningskapacitet for det meste med DPPH [62,63]. Lignende korrelationsresultater blev fundet i den aktuelle undersøgelse for A. esculenta-ekstrakter (se en bedre diskussion i afsnit 2.6. Korrelationer mellem kemiske forbindelser og bioaktive egenskaber).

2.5. Enzymatisk hæmmende aktiviteter af islandsk tangekstrakt

islandsktangs ekstrakter udviste positive hæmmende virkninger over for alle enzymtestede (tabel 4), hvilket åbnede nye veje til udnyttelse af naturlige enzymatiske inhibitorer fra algeressourcer. Så vidt vi ved, er dette første gang, at islandske enzymatiske hæmmende aktivitetertangekstrakter produceret af PEF er blevet testet.

2.5.1. Kollagenasehæmmende aktivitet

A. esculenta-ekstrakter viste positiv kollagenase-hæmning i området fra 68 til 91 procent, mens P. palmaria- og U. lactuca-ekstrakter udviste ubetydelige hæmningsaktiviteter mod kollagenase (tabel 4). A. esculenta varmtvandsekstrakt udviste 71,1 procent kollagenasehæmmende aktivitet, hvilket var højere end epigallocatechin-3-gallate (EGCG) standardopløsning (63,2 procent) og sammenlignelig med positiv standard leveret af det kommercielle enzymsæt (74,9 procent). konstateringen var, at A. esculenta-ekstrakterne produceret af PEF viste acollagenase-hæmning på 91 procent, og udviste endnu højere aktivitet end inhibitoren leveret af det kommercielle kit. Det skal understreges, at denne aktivitet kun blev observeret i vandekstrakter produceret af PEF og ikke ved kombinationen af ​​PEF plus HW. Denne adfærd kan forklares med muligheden for, at varmtvandsprocessen kan have en negativ effekt på de forbindelser, der er ansvarlige for at hæmme kollagenaseaktivitet. Imidlertid er yderligere undersøgelser nødvendige for at forklare disse resultater på grund af kompleksiteten af ​​rå algeekstrakter. Ovennævnte forskergruppe arbejder i øjeblikket på identifikation af hæmningsmolekylerne i A. esculenta-ekstrakter for bedre at forstå disse positive effekter produceret af PEF.

Resultater vedrørende inhibering af kollagenase med A. esculenta-ekstrakter er i overensstemmelse med tidligere data, hvor A. esculenta bliver brugt i kommercielle ekstrakter på grund af dens antiældningseffekt. Nedbrydningen af ​​kollagen sker med aldring på grund af kollagenaseaktivitet, hvilket resulterer i rynker på huden. Hæmningen af ​​kollagenase af naturligt forekommende forbindelser er en interessant mulighed for anti-aldringsprodukter. For eksempel tilbyder SEPPIC, en leverandør af ingredienser til kosmetikindustrien, et lipofilt ekstrakt af A. esculenta (Kalpariane® AD) [64].

2.5.2. Elastasehæmmende aktivitet

Kun de rå ekstrakter af A. esculenta inhiberede elastase og udviste aktiviteter højere end 7 0 procent af inhibering (tabel 4). Anti-elastase-aktiviteterne af A. esculenta-ekstrakter var imidlertid ikke statistisk forskellige mellem ekstraktionsmetoderne (p > 0.05). Sammenlignet med quercetinsolutions, en velkendt elastaseinhibitor, der viste 100 procent hæmning ved 1 mM og 58,7 procent ved 0,5 mM, var ydeevnen af ​​ekstrakter fra A. esculenta høj.

Elastase er et proteinaseenzym, der kan reducere elastin ved at bryde specifikke peptidbindinger. Som følge heraf kan hæmningen af ​​elastaseaktivitet i dermislaget bruges til at opretholde hudens elasticitet [65]. Mange planteekstrakter er blevet identificeret som elastaseinhibitorer [17]; der er dog kun udført få undersøgelser af elastasehæmningen fra algeressourcer. Ifølge litteraturdata er polyphenoler ekstraheret fra planter kendt for at være stærke elastase- og hyaluronidase-hæmmere [66]. En nylig undersøgelse rapporterede, at phlorotanninerne, typen af ​​tannin i brunalger, ekstrakter af havtang Eisenia bicyclis og brunalgen Ecklonia cava, gavner huden ved at reducere elastaseaktiviteten betydeligt [67]. A. esculenta-ekstrakterne fremstillet i denne undersøgelse viste, at højeste TPC- og TFC-værdier i sammenligning med de andre undersøgte arter (tabel 4), så dette kunne være årsagen til, at de vandige ekstrakter fra P. palmaria og U. lactuca ikke viste anti-elastase-aktiviteter. For at bekræfte denne hypotese blev Pearson korrelationsanalyse udført, hvilket tyder på, at de anti-enzymatiske aktiviteter positivt korrelerer med indholdet af phenoliske stoffer (se yderligere diskussion i afsnit 2.6. Korrelationer mellem kemiske forbindelser og bioaktive egenskaber).

2.5.3. Tyrosinaseinhiberingsaktivitet

A. esculenta-ekstrakter viste positivetyrosinasehæmning højere end 9 0 procent for alle de anvendte ekstraktionsmetoder, mens P. palmaria- og U. lactuca-ekstrakter ikke udviste tyrosinaseinhiberende virkninger (tabel 4). Anti-tyrosinase-aktiviteterne af A. esculenta-ekstrakter afveg dog ikke (p < 0.05)="" med="" ekstraktionsmetoder.="" ved="" at="" sammenligne="" virkningen="" af="" ​​a.="" esculenta-ekstrakter="" med="" de="" testede="" quercetin-opløsninger="" viste="" råekstrakterne="" af="" brunalger="" bedre="" hæmmende="" aktiviteter="" end="" disse="" opløsninger="" (henholdsvis="" 88="" og="" 75="" procent="" for="" 0,5="" og="" 1="" mm="" quercetin-opløsningerne).="" baseret="" på="" litteraturen="" er="" anti-tyrosinase-aktiviteter="" af="" planter,="" bakterier="" og="" svampe="" blevet="" rapporteret="" af="" adskillige="" forskere="" [68].="" men="" selvom="" forskellige="" undersøgelser="" tyder="" på,="" at="" bioaktive="" forbindelser="" afledt="" af="" marine="" alger="" har="" et="" godt="" potentiale="" til="" at="" blive="" brugt="" som="" hudblegningsmidler="" [13],="" er="" dette="" stadig="" et="" uudforsket="" domæne,="" og="" kun="" få="" undersøgelser="" er="" blevet="" udført.="" de="" fleste="" af="" undersøgelserne="" udført="" på="" dette="" område="" har="" været="" fokuseret="" på="" brunalger,="" hvilket="" stemmer="" overens="" med="" resultaterne="" af="" denne="" undersøgelse,="" hvor="" a.="" esculentaextracts="" udviste="" de="" bedste="" anti-tyrosinase-aktiviteter.="" for="" eksempel="" har="" phloroglucinolderivater="" og="" phlorotanniner,="" almindelige="" sekundære="" metabolitter="" fundet="" i="" brunalger,="" vist="" hæmmende="" aktivitet="" mod="" tyrosinase="" på="" grund="" af="" deres="" evne="" til="" at="" chelatere="" kobber="" [69].="" i="" en="" nylig="" undersøgelse="" hæmmede="" ekstraktet="" af="" brunalgen="" lessonia="" trabeculate="" produceret="" ved="" mikrobølgeassisteret="" ekstraktion="" en="" tyrosinaseaktivitet="" på="" 33,73="" procent="" [60].="" i="" en="" anden="" undersøgelse="" viste="" ekstraktet="" af="" brunalgen="" turbinaria="" conoides="" aktivitet="" som="">antioxidantogtyrosinaseinhibitor, men i dette tilfælde blev ethanol brugt som opløsningsmiddel [70]. En signifikant sammenhæng mellem den hæmmende styrke af polyfenoler ekstraheret fra planter på svampetyrosinaseer blevet rapporteret i tidligere undersøgelser [68]. Ligeledes tyder resultaterne af denne undersøgelse på, at den hæmmende aktivitet over for tyrosinase var positivt korreleret med flavonoid- og phenolindhold (se afsnit 2.6. Korrelationer mellem kemiske forbindelser og bioaktive egenskaber).

Tyrosinase spiller en vigtig rolle i biosyntesen af ​​melaninpigment i huden. Melanin er ansvarlig for beskyttelsen mod skadelig ultraviolet bestråling, som kan forårsage flere patologiske tilstande [71]. Derudover kan det skabe æstetiske problemer, når melanin ophobes som hyperpigmenterede pletter [72]. Således kan inkorporering af tyrosinaseinhibitorer i kosmetiske produkter være attraktivt på grund af blegnings- og/eller lysende effekter.

cistanche kan hæmme tyrosinase

2.5.4. Hyaluronidasehæmmende aktivitet

Alletangekstrakter udviste signifikant høj anti-hyaluronidase-aktivitet (tabel 4), hvilket viste resultater sammenlignet med garvesyreopløsningerne (en velkendt inhibitor af hyaluronidase). Specifikt viste A. esculenta-ekstrakter 100 procent af hæmningen for alle de testede metoder. Desuden udviste U. lactuca ekstrakter aktiviteter, der var højere end 90 procent af hæmningen, hvor hæmningen af ​​ekstrakterne produceret af PEF (96,8 procent) og kombinationen af ​​PEF plus HW (97,3 procent) var højere end hæmningen produceret af den traditionelle varmtvandsmetode 93,4 procent) (p < 0,05).="" alle="" p.="" palmaria-ekstrakter="" udviste="" lignende="" aktiviteter="" (p="">< 0,05),="" hæmningen="" af="" ​​ekstrakterne="" produceret="" af="" pef="" var="" (91,9="" procent)="" og="" kombinationen="" af="" ​​pef="" plus="" hw="" (89,5="" procent)="" og="" den="" traditionelle="" varmtvandsmetode="" (91,8="">

Andre forfattere beskrev også anti-hyaluronidase aktiviteten af ​​forskelligetangs ekstrakter, især til ekstrakter rige på phlorotanniner fra brunalger [73,74]. Men så vidt vi ved, er dette første gang, at hyaluronidaseinhiberende aktiviteter af P. palmat- og U. lactuca-ekstrakter produceret af PEF er blevet rapporteret.

Hyaluronsyre er en vigtig bestanddel af dermis, hvor den er involveret i vævsreparation, den nedbrydes med aldring, hvilket forårsager rynker og tab af hudens fasthed. I denne forstand øger hyaluronidasehæmmere hyaluronsyreniveauet i den dermale ekstracellulære matrix for at forbedre udseendet af aldrende ansigtshud [13]. Derfor kan resultaterne af denne undersøgelse åbne nye veje for udnyttelse af naturlige hyaluronidaseinhibitorer fra algeressourcer med potentiel brug i kosmetiske produkter.

Sammenfattende tillod de indsamlede data os at konkludere, at A. esculenta-ekstrakter udviste generelt bedre hæmmende aktiviteter end P. palmaria og U. lactuca over for de enzymtestede. Derfor er den den mest lovende tangart med fremragende anti-enzymatiske aktiviteter, og derfor blev den udvalgt til yderligere undersøgelser i vores laboratorium. Selvom råekstrakter fra A. esculenta ser ud til at være gode kandidater til in vitro-eksperimenter, skal der udføres yderligere undersøgelser for at belyse identiteten af ​​de metabolitter, der er ansvarlige for disse biologiske effekter.

cistancheekstrakt: antioxidation

2.6. Korrelationer mellem kemiske forbindelser og bioaktive egenskaber

Resultaterne fra principal komponentanalyse (PCA) viste, at hovedadskillelsen af ​​grupperne var defineret af PC1 og PC2, som tegnede sig for henholdsvis 71,9 procent af og 14,5 procent af variansen i dataene (figur 2). A. esculenta-ekstrakterne var karakteriseret ved højere indhold af flavonoider og phenolforbindelser, hæmmende virkninger på enzymer (collagenase, tyrosinase og elastase) og DPPH- og FRAP-værdier end for de andre arter, P. palmata og U. lactuca. På den anden side havde A. esculenta lavere kulhydratindhold, især sammenlignet med P. palmata (som var placeret på den modsatte side af PC1). Variationen i data langs PC2 var hovedsageligt relateret til ABTS og hyaluronidasehæmning. Som det fremgår af placeringen på plottet, havde P. palmata en stærkere korrelation til ABTS, hvorimod U. lactuca var mere relateret til hyaluronidasehæmningseffekter i sammenligning med disse to arter.

En høj og signifikant positiv korrelation mellem TPC, TFC, DPPH, FRAP og hæmmende effekter på kollagenase, elastase ogtyrosinaseblev demonstreret ved Pearson-korrelationsanalyse (tabel 5).

Dette var i overensstemmelse med tidligere undersøgelser, der rapporterede, at phenoliske forbindelser (inklusive flavonoider) er de vigtigste bidragydere til antioxidantaktiviteten af ​​forskelligetang[75-77]. Den høje antioxidantaktivitet af ekstrakter fra brune makroalger har været relateret til en specifik gruppe af polyphenoler, phlorotanniner og deres unikke molekylære struktur. Phlorotannis fra brunalger er rapporteret at have op til otte indbyrdes forbundne phenolringe, der fungerer som elektronfælder [78,79]. Det var forventet, at ABT'er ville korrelere med TPC, andetantioxidantparametre. Mulige årsager kan være, at metoderne er baseret på forskellige reaktionsbetingelser, og at reaktiviteten er forskellig både med hensyn til tid og rækkevidde af komponenter. For eksempel reagerer ABTS-reagenset med en bredere række afantioxidantend DPPH-radikalet [80]. På den anden side er en af ​​de nævnte begrænsninger for ABTS en lang reaktion, og den generelle reaktionstid tillader muligvis ikke at nå et endepunkt.

Resultaterne indikerer, at der er en høj positiv korrelation af TPC og TFC til den hæmmende aktivitet af kollagenase, elastase og tyrosinase ({{0}}.93–0.99), hvorimod forholdet til inhibering af hyaluronidase var ikke så stærk (hhv. r=0.42 og 0.54). Dette indikerer, at andre komponenter kan have bidraget til den hæmmende effekt af ekstrakterne. Andre undersøgelser har rapporteret, at polysaccharider har hyaluronidase-hæmmende aktivitet, for eksempel alginsyre i brunalger [81,82]. Yderligere undersøgelser af den kemiske sammensætning af makroalgearterne for virkningerne af isolerede forbindelser på enzymet er nødvendige for at evaluere bidraget fra hver kemisk komponent, da fokus i denne undersøgelse var på råekstrakter.

Resultaterne var i overensstemmelse med tidligere undersøgelser, der angiver, at den kemiske sammensætning og niveauet af bioaktivitet af ekstrakterne varierer betydeligt mellem de tre slægter (røde, grønne og brune alger) og mellem forskellige arter, der tilhører samme phylumand, er påvirket af alder og væv type. Desuden afhænger sammensætningen og egenskaberne af mange miljøfaktorer, der påvirker fordelingen og væksten af ​​makroalger. For eksempel lys (UV-stråling), temperatur, tilgængelighed af næringsstoffer, eksponering for luft, vandbevægelser, bølgeeksponering og saltholdighed. Temperaturen er blevet beskrevet som den faktor, der har de stærkeste effekter på pigmentdannelse og næringsstofkoncentration, saltholdighed og UV-stråling som de faktorer, der påvirker koncentrationen af ​​TPC [83].

Fordelingen af ​​forskellige makroalgearter varierer med vanddybden. Positioner højere op ad kysten i tidevands- eller kystzonen er mere stressende, da de arter, der vokser der, skal modstå flere ændringer i abiotiske faktorer på grund af tidevandsændringer. For eksempel luftens udtørrende effekt, høj solindstråling (ved lavvande), ændringer i saltholdighed og temperatur og, under forhold med lave lufttemperaturer, herunder frysning. Under lavvandsmærket resulterer stigende dybde i et meget hurtigt fald i lysintensiteten og mindre udsættelse for bestråling.

Alger, der vokser i tidevandsområdet, har lavere følsomhed over for UV-stråling og kommer sig hurtigere fra solstress. Hvorimod alger, der vokser i den sublitorale zone, er mere følsomme over for UV-stråling og har lavere genopretning fra solstress [84]. Samtidig giver vandsøjlen beskyttelse. I denne undersøgelse var eksponeringen for sollys formodentlig stærkere for P. palmata sammenlignet med de andre arter. Andre undersøgelser har vist, at dannelsen af ​​MAA er direkte relateret til sollys [85], hvilket beskytter organismerne mod UV-A og UV-B stråling. Desuden blev det vist, at den specifikke mængde MAA faldt med stigende opsamlingsdybde. Kelps, såsom A. esculenta, kendes sammen i den øvre sublitorale zone, men strækker sig også ind i det laveste tidevand lige over lavvandsmærket. Det betød, at vandsøjlen gav stærkere beskyttelse end for P. palmata. Derudover er de morfologiske egenskaber anderledes, bladene på A. esculenta er tykkere sammenlignet med de to andre arter. U. lactuca, der hovedsageligt vokser i intertidaland sublitoral, er i stand til at fotosyntetisere og vokse under meget lave irradianser. Eksponering for UVB-lys er blevet angivet at accelerere gendannelsen af ​​fotosyntetiske parametre for U. lactuca fra de negative virkninger af UVA-lys. Den er mindre, enklere i strukturen og kortere levetid (3 måneder) end både A. esculenta (5-7 år) og P. palmata, som har en nyvækst hvert år.

Sammenfattende kan der drages antagelser om, at de væsentligste forskelle i ekstrakternes egenskaber er variationen i algearternes levetid, morfologiske egenskaber og vækstbetingelser.

3. Materialer og metoder

3.1. Materialer

islandsktangs U. lactuca (grønalger), A. esculenta (brunalger) og P. palmata (rødalger) blev leveret af Islandsk blåmusling ogTang, som høstede tang i Breidafjordur (Vest-Island). Efter høst blev tangen tørret (til ca. 90 procent tørt materiale), formalet og leveret vakuumpakket. Prøver blev opbevaret på et tørt og mørkt sted ved stuetemperatur, indtil de blev brugt.

Tyrosinasefra svampe, L-3,4-dihydroxyphenylalanin (L-DOPA), elastase fra svinebugspytkirtel, ascorbinsyre, N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilid (AAAPVN),hyaluronidase fra kvægtestes , quercetin, -tocopherol, garvesyre, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,4,6-Tripyridyl-s-Triazin (TPTZ), Trolox, Folin-Ciocalteu reagens, gallussyre og et collagenaseaktivitet kolorimetrisk assaykit (MAK293) blev købt fra Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). Hyaluronsyrenatriumsalt blev købt fra MakingCosmetics (Redmond, WA, USA). Alle andre anvendte kemikalier og reagenser var af analytisk kvalitet og er opnået fra VWR International, LLC. Deioniseret vand (Elix® Essential,Merck, Darmstadt, Tyskland) blev brugt til ekstraktion og fremstilling af vandbaserede opløsninger.

3.2. Eksperimentelt design

Faktorielt design blev brugt til at evaluere effekter af islandske tangarter (U. lactuca, A. esculenta, P. palmata) og ekstraktionsbehandling (varmtvandsekstraktion (HW, 95 ◦C)), PEFassisteret ekstraktion (PEF) og kombinationen af ​​begge teknikker (PEF plus HW), om ekstraktsammensætning og bioaktivitet (tabel 6). Ekstraktionen blev udført i tre eksemplarer for hver gruppe, og hvert ekstrakt replikat blev analyseret i tre eksemplarer.

3.3. Udvindingen af ​​bioaktive stoffer fra de islandske tang

Udnyttelsen af ​​makroalgebiomasse på forskellige niveauer har motiveret forskere til at udforske mere miljøvenlige, effektive og omkostningseffektive udvindingsteknikker baseret på grønne udvindingstilgange. I dette arbejde blev PEF-assisteret ekstraktion evalueret som en ny grøn metode til at producere funktionelle ekstrakter, mens traditionel varmtvandsudvinding blev brugt til sammenligning. Desuden blev effekten af ​​kombinationen af ​​begge teknikker, PEF-behandling af makroalger efterfulgt af den traditionelle varmtvandsudvinding, på den bioaktive genvinding undersøgt. På grund af den forventede elektroporation produceret i cellemembranerne efter den fysiske behandling, kunne følgende ekstraktion med varmt vand yderligere lette frigivelsen af ​​det intracellulære materiale [86], hvilket øger ekstraktionsudbyttet. Der er behov for en tid efter behandling for materialerne at diffundere ud af cellerne [87,88], og i dette eksperiment ventede suspensionerne natten over indtil adskillelse af væsken (ekstrakten) fra pulpen.

Med hensyn til ekstraktionsmedium blev destilleret vand brugt til at fremstilletangekstrakter for at overvinde begrænsninger vedrørende brugen af ​​giftige stoffer og organiske opløsningsmidler. Vand har vist sig at være et godt opløsningsmiddel til udvinding af flere bioaktive forbindelser fratangs [46,89-91] og er miljøvenlig. Derudover bruges vand almindeligvis til PEF-assisteret udvinding, da det er en god leder for elektricitet.

3.3.1. Udvindingsprocedurer

For hver replikat i hver gruppe,tangs (15 g) blev gennemblødt natten over ved stuetemperatur (22 ◦C) i deioniseret vand (300 ml). Derefter blev suspensionen behandlet med PEF (PEF), opvarmet (HW) eller både PEF-behandlet og opvarmet (PEF plus HW). Suspensionerne blev opbevaret natten over i et køleskab efterfulgt af filtrering med et groft (20 µm) filterpapir. Derefter blev filtraterne (ekstrakterne) opbevaret ved 4 ◦C indtil deres analyser.

Den pulserende elektriske felt-assisteret ekstraktion blev udført ved hjælp af en pulsgenerator, der er indbygget i huset. Den havde en FuGHCK-200-2000-kondensator (FuG Elektronik GmbH, Rosenheim, Tyskland) og gnistgab (18,5 kV OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Wiese Baden, Tyskland). PEF-udstyret genererede eksponentielle henfaldsimpulser med en widthof 0.96 µs og amplitude på 18 kV. Et plexiglasbehandlingskammer med dimensionerne (L × H × B) 20 × 8 × 2,5 cm, hvor den korteste afstand var mellem pladeelektroderne, blev brugt til at behandle suspensionerne med et 8 kV/cm elektrisk felt ved 1,2 Hz i 10 min.

HW-ekstrakterne blev fremstillet ved at opvarme suspensionen i et bægerglas i et termostatisk vandbad og holdes ved 95 ◦C i 45 min. Til det kombinerede pulserende elektriske felt og varmebehandling blev suspensionerne PEF-behandlet og derefter anbragt i et bægerglas, opvarmet i et vandbad og holdt ved 95 ◦C i 45 min.

3.3.2. Målinger af ledningsevne, pH og temperatur

Den elektriske ledningsevne og pH af tangsuspensioner blev målt efter iblødsætning og efter ekstraktionsbehandlingerne ved stuetemperatur ved hjælp af et pH-meter (OrionStar™ A215 pH/Conductivity Benchtop Meter, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) udstyret med en ledningsevnesensor og pH/ARC triode kombinationselektrode. Endvidere blev temperaturændringer på grund af behandlinger registreret.

3.4. Spektralprofiler af tangekstrakter

UV-VIS absorptionsspektrene for de forskellige tangekstrakter blev målt i området fra 200 til 450 nm ved hjælp af et dobbeltstråle Thermo Scientific Evolution 350 UV Vis spektrofotometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) med 1 cm kvartskuvetter. Tre scanninger blev udført for hvert tangekstrakt.

3.5. Bestemmelse af totalt polyphenolindhold

Det samlede phenolindhold (TPC) itangekstrakter blev bestemt ved at bruge Folin-Ciocalteu-reagens efter en let modificeret metode beskrevet af Zhang [92] ved hjælp af aMultiskan Sky Microplate Spectrophotometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Et volumen på 20 µL aftangekstrakt eller seriel standardopløsning blev blandet med 100 µL Folin-Ciocalteu-reagens (10 procent i destilleret vand). Efter 5 minutter blev 80 µL 7,5% (v/w) natriumcarbonatopløsning tilsat. Reaktionsblandingen blev inkuberet ved stuetemperatur og mørke i 30 min. Absorbansen blev målt ved bølgelængden på 760 nm. Destilleret vand blev brugt som blindprøve. En standardkurve for gallussyre blev brugt til at bestemme det totale phenolindhold og udtrykt som µg gallussyreækvivalenter (GAE) pr. gram tørt materiale (µg GAE/g dw).

3.6. Bestemmelse af totalt flavonoidindhold

Det samlede flavonoidindhold (TFC) itangekstrakter blev bestemt ved metoden beskrevet af Kamtekar [93] og tilpasset til 96-brønds mikroplader. Kort fortalt blev et volumen på 25 µL tangekstrakt eller seriel standardopløsning blandet med 1 00 µL natriumnitrit (0,375 % vægt/volumen). Efter 5 minutter blev 25 µL aluminiumchlorid (3 procent vægt/volumen) tilsat til blandingen og inkuberet i 6 minutter ved stuetemperatur. Derefter blev 100 µL natriumhydroxid (2 procent vægt/volumen) tilsat til blandingen og blandet. Umiddelbart blev absorbansen målt ved bølgelængden på 510 nm. Destilleret vand og ethanol blev anvendt som blindprøver. En standardkurve for quercetin (opløst i ethanol) blev brugt til at bestemme det totale phenolindhold og udtrykt som µg quercetin-ækvivalenter (QE) pr. gram tørt materiale (µg QE/g dw).

3.7. Bestemmelse af kulhydratindhold

Indholdet af frie sukkerarter blev målt i overensstemmelse med metoden beskrevet af [94], med små modifikationer. En 50 µL phenolopløsning (4 procent) og 250 µL svovlsyre (96 procent) blev tilsat til 100 µL prøve eller standardopløsning. Efter 10 minutters inkubation ved stuetemperatur blev absorbansen af ​​blandingen aflæst ved 490 nm. En standardkurve for glucose blev brugt til at bestemme det totale kulhydratindhold og udtrykt som mg glucoseækvivalenter (GluE) pr. gram tørt materiale (mg GluE/g dw).

3.8. Antioxidantegenskaber af tangekstrakter

3.8.1. 2,2 Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) Free Radical Scavenging Assay

Detantioxidantaktivitet (DPPH) aftangekstrakter blev bestemt efter den tidligere beskrevne metode [94] med nogle modifikationer. Kort fortalt blev 200 µL 10,825 × 10-5 M DPPH-opløsning tilsat til 100 µL af prøven (1:1 i methanol) i en 96-brøndsplade. Det samme volumen DPPH blev blandet med 50 µL standard plus 50 µL methanol. Derefter blev prøverne og standarden inkuberet på et mørkt sted ved stuetemperatur i 30 minutter. Absorbansen blev målt ved bølgelængden på 517 nm. Destilleret vand blev brugt som blank. Evnen til at opfange DPPH-radikalet blev beregnet ved hjælp af følgende ligning:

Opfangningseffekt ( procent )=(1 − (En prøve − En prøveblindprøve)/(A kontrol − Amethanolblindprøve)) × 100 (1)

hvor Akontrol er absorbansen af ​​kontrollen (DPPH-opløsning uden prøve), A-prøven er absorbansen af ​​testprøven (DPPH-opløsning plus testprøve), A-prøveblindprøven er kun absorbansen af ​​prøven (prøve uden DPPH-opløsning) og Amethanol-blindprøve er kun absorbansen af ​​methanol. Kommercielantioxidants (ascorbinsyre, gallussyre og -tocopherol) blev brugt som positive kontroller.

cistanche er antioxidanter

3.8.2. Ferric Ion Reducing Antioxidant Power (FRAP) analyse

FRAP-aktivitet blev målt ifølge metoden ifølge Benzie og Strain [95]. Kort fortalt blev acetatbuffer (300 mM, pH 3,6), 2,4,6-tripyridyl-s-triazin (TPTZ) 10 mM i 40 mM HCI og FeCl3·6H2O (20 mM) blandet i forholdet mellem 10:1:1 for at få det fungerende FRAPreagent. Reaktionsblandingen blev inkuberet ved 37 ◦C i 10 min. En 50 µL prøve fra hver ekstrakt blev blandet med 150 µL FRAP-arbejdsopløsning i 8 minutter ved stuetemperatur. Absorbansen af ​​det farvede produkt, Ferro-TPTZ, blev målt ved bølgelængden på 593 nm. FRAP-værdier påtangs-ekstrakter blev udtrykt som µM trolox-ækvivalenter (TE) pr. gram tørt materiale.

3.8.3. 2,2 Azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonsyre) (ABTS) analyse

Analysen blev udført ved hjælp af ABTS-affarvningsprotokollen [76] med nogle modifikationer. En ABTS radikalkation (ABTS. plus) blev fremstillet ved at reagere ABTS (66 mg) med 10 ml kaliumpersulfatopløsning (2,45 mM). Blandingen blev efterladt i mørke ved stuetemperatur i 12-16 timer før brug. ABTS. plus opløsning blev fortyndet med vand til en absorbans på 0,700 ved 734 nm. Reaktionsblandingen (200 µl) blev overført til amikroplade, 50 µl af prøven blev tilsat og derefter 150 µl af reagensopløsningen. Pladen blev rystet i 10 s ved middel hastighed, og absorbansen blev målt ved 734 nm efter 5 minutters inkubation ved stuetemperatur. En standardkurve blev fremstillet ved at plotte inhiberingen af ​​A734nm af Trolox-standarder som en funktion af deres koncentrationer. Troloxækvivalentenantioxidantkapacitet (TEAC) værdi af prøverne blev beregnet ved hjælp af ligningen opnået fra den lineære regression af standardkurven erstattet af A734nm-værdier for hver prøve:

TEAC (µM)=(prøvehæmning A734nm − intercept)/hældning (2)

Detantioxidantaktivitet blev udtrykt som TEAC-koncentration, µmol/g tørvægtsalger.

3.9. Anti-enzymatiske aktiviteter af tangekstrakter

3.9.1. Kollagenaseinhiberingsassay

Et collagenaseaktivitet kolorimetrisk assaykit (MAK293), købt fra Sigma Aldrich, blev brugt til at bestemme kollagenasehæmningen aftangekstrakter. Kittet målte kollagenaseaktivitet ved hjælp af et syntetisk peptid (FALGPA), der efterligner kollagens struktur. Proceduren blev udført i overensstemmelse med vejledningen til kittet.

3.9.2. Elastaseinhiberingsassay

Elastasehæmningen aftangs ekstrakter blev undersøgt i TRIS bufferopløsning med den modificerede metode som beskrevet tidligere [96]. Kort fortalt blev 100 µL 0,1 M TRIS-bufferopløsning (pH 8,0), 25 µL elastase (1 U/mL i TRIS-buffer) og 25 µL prøveekstrakter blandet og inkuberet i 15 min. 30 C før tilsætning af substratet for at begynde reaktionen. Efter inkubationstid blev 50 µL 2 mM AAAPVN-opløsning tilsat. Derefter blev absorbansen ved 420 nm overvåget i 20 minutter ved hjælp af en mikropladelæser under en konstant temperatur på 30 C. Til sidst blev elastaseinhibering beregnet i procent ved hjælp af ligningen:

procent hæmning=[(∆Abs/min kontrol − ∆Abs/min prøve)/∆Abs/minkontrol] × 100 (3)

hvor Abscontrol er absorbansen af ​​analysen ved hjælp af bufferen i stedet for inhibitor (prøve), og Abs-prøven er absorbansen af ​​prøveekstrakterne. Quercetin blev brugt som en positiv kontrol. TRIS-buffer blev brugt som blank.

virkninger afcistanche ekstrakt:anti aldring

3.9.3. Tyrosinaseinhiberingsassay

Tyrosinaseinhiberende assay blev udført i overensstemmelse med metoden tidligere beskrevet af [66] under anvendelse af L-DOPA som substrat. 20 µL af prøven, 10 µL svamptyrosinaseopløsning (50 U/mL i phosphatbuffer) og 80 µL phosphatbuffer (pH=6.8) blev blandet i en mikroplade og præ-inkuberet ved 37 ◦C i 5 min. Derefter blev 90 µL L-DOPA (2 mg/ml) tilsat. Dannelsen af ​​dopakrom blev straks overvåget i 20 minutter ved 475 nm i en mikropladelæser under konstant temperatur på 37 ◦C. Den procentvise hæmning aftyrosinaseenzym blev beregnet ved hjælp af ligningen:

procent hæmning=[(∆Abs/minkontrol − ∆Abs/min prøve)/∆Abs/minkontrol] × 100 (4)

hvor Abs-kontrol er absorbansen af ​​analysen ved hjælp af bufferen i stedet for inhibitor (prøve), og Abs-prøve er absorbansen af ​​prøveekstrakterne. Quercetin blev brugt som positiv kontrol. Phosphatbuffer blev anvendt som blindprøve.

3.9.4. Hyaluronidase-hæmningsanalyse

Hyaluronidaseinhiberende aktivitet blev målt som tidligere beskrevet af [66] med få modifikationer. Et volumen på 100 µl type-1-S bovin testes hyaluronidase (2100 U/mL)opløst i 0. 1 M acetatbuffer (pH 3,5) blev blandet med 100 µL ekstrakt og inkuberet ved 37 ◦C i 20 min. Et volumen på 200 µL 6 mM calciumchlorid blev tilsat til reaktionsblandingen, og derefter blev blandingen inkuberet ved 37 ◦C i 20 min. Denne Ca2 plus aktiverede hyaluronidase blev behandlet med 250 µL natriumhyaluronat (1,2 mg/ml) opløst i 0,1 M acetatbuffer (pH 3,5) og derefter inkuberet i et vandbad ved 37 ◦C i 40 min. 50 µL 0,9 M natriumhydroxid og 100 µL 0,2 M natriumborat blev tilsat til reaktionsblandingen og derefter inkuberet i et kogende vandbad i 5 min. Efter afkøling til stuetemperatur blev 250 µl p-dimethylaminobenzaldehyd (DAMB) opløsning tilsat til reaktionsblandingen. DAMB-opløsningen blev fremstillet ved at opløse 0,25 g DAMB i 21,88 ml 100% eddikesyre og 3,12 ml 10N saltsyre. Kontrolgruppen blev behandlet med 100 µL 5 procent vand i stedet for ekstrakt. Absorbansen blev målt ved bølgelængden på 585 nm efter 45 min. Den procentvise enzyminhibering blev beregnet ved hjælp af følgende ligning:

procent hæmning=[(Abscontrol − Abssample)/ Abscontrol] × 100 (5)

hvor Abs-kontrol er absorbansen af ​​analysen ved hjælp af bufferen i stedet for inhibitor (prøve), og Abs-prøve er absorbansen af ​​prøveekstrakterne. Garvesyre bruges som referencestandard.

3.10. Statistisk analyse

Gennemsnittet af den tredobbelte analyse af hvert ekstrakt blev beregnet og brugt til at finde middelværdier og standardafvigelser for hver gruppe (n {{0}}). Generelle lineære modeller (GLM) for faste faktorer blev anvendt til at evaluere hovedeffekter og tovejs-interaktioner af de eksperimentelle faktorer (arter og ekstraktionsmetoder) på målte variable. Endvidere blev ANOVA og Tukey-Kramer-testen brugt til at identificere signifikante (p < 0,05)="" forskelle="" mellem="" grupperne.="" pearson-korrelation="" blev="" brugt="" til="" at="" evaluere="" lineær="" sammenhæng="" mellem="" variablerne.="" principal="" component="" analysis="" (pca)="" blev="" brugt="" til="" at="" påvise="" struktur="" i="" forholdet="" mellem="" målte="" variable="" og="" eksperimentelle="" faktorer.="" pca="" reducerer="" omfangsrige="" data="" til="" et="" lille="" sæt="" lineære="" kombinationer="" af="" relaterede="" variabler="" (dvs.="" faktorer)="" baseret="" på="" korrelationsmønstre="" mellem="" de="" oprindelige="" variable.="" de="" resulterende="" lineære="" attributkombinationer="" kan="" bruges="" til="" at="" profilere="" specifikke="" produktegenskaber="" baseret="" på="" de="" undersøgte="" variable.="" alle="" statistiske="" analyser="" blev="" udført="" ved="" hjælp="" af="" ncss="" 2020="" statisticalsoftware="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" kaysville,="" ut,="">

anti-aging cistanche ekstrakt

4 konklusioner

Resultaterne af dette første screeningseksperiment viste potentialet i tre islandsketangarter ved at give effektive gavnlige effekter via flere veje. Den grønne tilgang, der er udviklet ved hjælp af vandige pulserede elektriske felter, udviste lignende resultater som den traditionelle varmtvandsudvinding og viste adskillige fordele, såsom dens ikke-termiske natur og kortere ekstraktionstid (10 min vs. 45 min). Blandt de tre algearter udviste den brune makroalge A. esculenta det højeste indhold af TPC og TFC, der også udviste det størsteantioxidantkapaciteter Desuden udviste A. esculenta-vandekstrakter bedre hæmmende aktiviteter end P. palmaria og U. lactuca over for kollagenase, elastase, tyrosinase og hyaluronidase er de mest lovendetangarter med fremragende anti-enzymatiske aktiviteter til deres brug i hudblegning,anti aldringog hudens sundhed. Interessant nok er A. esculenta-ekstrakter fremstillet ved PEF-metoden viste en kollagenasehæmning på 91 procent, højere end hæmningsaktiviteten vist ved den traditionelle varmtvandsekstraktion og endnu højere end hæmmeren leveret af det kommercielle kit. Som konklusion antyder vores forundersøgelse, at islandsktang-baserede ekstrakter, især ekstrakterne fra den brune makroalge A. esculenta, fremstillet ved hjælp af vandig pulserende elektriske felter-assisteret ekstraktion er potentielle funktionelle ingredienser, der kan bruges som aktive forbindelser til kosmetiske og kosmetiske formuleringer i den nærmeste fremtid.

Referencer

1. Ariede, MB; Candido, TM; Jacome, ALM; Velasco, MVR; de Carvalho, JCM; Baby, AR Kosmetiske egenskaber ved alger—Areview. Algal Res. 2017, 25, 483-487. [CrossRef]

2. Makkar, HPS; Tran, G.; Heuzé, V.; Giger-Reverdin, S.; Lessire, M.; Lebas, F.; Ankers, P. Tang til husdyrfoder: En anmeldelse.Anim. Foder Sci. Teknol. 2016, 212, 1-17. [CrossRef]

3. O'Connor, J.; Meaney, S.; Williams, GA; Hayes, M. Ekstraktion af protein fra fire forskellige tang ved hjælp af tre forskellige fysiske forbehandlingsstrategier. Molecules 2020, 25, 2005. [CrossRef]

4. Máximo, P.; Ferreira, LM; Branco, P.; Lima, P.; Lourenço, A. Sekundære metabolitter og biologisk aktivitet af invasive makroalger i Sydeuropa. Mar. Drugs 2018, 16, 265. [CrossRef]

5. Barkia, I.; Saari, N.; Manning, SR Mikroalger til højværdiprodukter til menneskers sundhed og ernæring. Mar. Drugs 2019,17, 304. [CrossRef]

6. Gomez-Zavaglia, A.; Prieto Lage, MA; Jimenez-Lopez, C.; Mejuto, JC; Simal-Gandara, J. Potentialet af tang som en kilde til funktionelle ingredienser af præbiotisk og antioxidantværdi. Antioxidanter 2019, 8, 406. [CrossRef] [PubMed]

7. Salehi, B.; Sharifi-Rad, J.; Seca, AML; Pinto, DCGA; Michalak, I.; Trincone, A.; Mishra, AP; Nigam, M.; Zam, W.; Martins, N. Current Trends on Seaweeds: Looking at Chemical Composition, Phytopharmacology, and Cosmetic Applications. Molecules2019, 24, 4182. [CrossRef]

8. Ghazali, E.; Snart, PC; Mutum, DS; Nguyen, B. Sundhed og kosmetik: Undersøgelse af forbrugernes værdier for at købe økologiske produkter til personlig pleje. J. Detailhandel. Forbrug. Serv. 2017, 39, 154-163. [CrossRef]

9. Amberg, N.; Fogarassy, ​​C. Grøn forbrugeradfærd på kosmetikmarkedet. Ressourcer 2019, 8, 137. [CrossRef]

10. Pereira, L. Tang som kilde til bioaktive stoffer og hudplejeterapi - kosmetik, algoterapi og thalassoterapi. Kosmetik 2018, 5, 68. [CrossRef]

11. Martins, A.; Vieira, H.; Gaspar, H.; Santos, S. Markedsførte marine naturlige produkter i den farmaceutiske og kosmetiske industri: Tips til succes. Mar. Drugs 2014, 12, 1066-1101. [CrossRef] [PubMed]

12. Agatonovic-Kustrin, S.; Morton, D. Cosmeceuticals afledt af bioaktive stoffer fundet i marine alger. Oceanografi 2013,1, 106.

13. Wang, H.-MD; Chen, C.-C.; Huynh, P.; Chang, J.-S. Udforskning af potentialet ved at bruge alger i kosmetik. Bioressource. Teknol. 2015,184, 355-362. [CrossRef]

14. Jahan, A.; Ahmad, IZ; Fatima, N.; Ansari, VA; Akhtar, J. Algal bioaktive forbindelser i den kosmetiske industri: En gennemgang.Phycologia 2017, 56, 410-422. [CrossRef]

15. Morone, J.; Alfeus, A.; Vasconcelos, V.; Martins, R. Afsløring af cyanobakteriers potentiale i kosmetik og kosmetik - En ny bioaktiv tilgang. Algal Res. 2019, 41, 101541. [CrossRef]

16. Cikoš, A.-M.; Jerkovi´c, I.; Molnar, M.; Šubari´c, D.; Joki´c, S. Nye trends for makroalger naturlige produkter applikationer. Nat. Prod.Res. 2019, 37, 1-12. [CrossRef]

17. Thring, TS; Hili, P.; Naughton, DP Anti-collagenase, anti-elastase og antioxidant aktiviteter af ekstrakter fra 21 planter. BMCComplement. Altern. Med. 2009, 9, 27. [CrossRef]

18. Jacobsen, C.; Sørensen, AM; Holdt, SL; Akoh, CC; Hermund, DB Kilde, udvinding, karakterisering og anvendelser af nye antioxidanter fra tang. Annu. Rev. Food Sci. Teknol. 2019, 10, 541-568. [CrossRef]

19. Castejón, N.; Señoráns, FJ Samtidig ekstraktion og fraktionering af omega-3 acylglyceroler og glycolipider fra vådmikroalgebiomasse af Nannochloropsis gaditana ved hjælp af væsker under tryk. Algal Res. 2019, 37, 74-82. [CrossRef]

20. Mohamed, MEA; Eissa, AHA Pulserede elektriske felter til fødevareforarbejdningsteknologi. Struktur. Funktion. Food Eng. 2012, 11, 275-306.

21. Geada, P.; Rodrigues, R.; Loureiro, L.; Pereira, R.; Fernandes, B.; Teixeira, JA; Vasconcelos, V.; Vicente, AA Elektroteknologier, der anvendes til mikroalgebioteknologi – applikationer, teknikker og fremtidige tendenser. Forny. Oprethold. Energy Rev. 2018, 94, 656–668.[CrossRef]

22. Poojary, MM; Barba, FJ; Aliakbarian, B.; Donsì, F.; Pataro, G.; Dias, DA; Juliano, P. Innovative alternative teknologier til at udvinde carotenoider fra mikroalger og tang. Mar. Drugs 2016, 14, 214. [CrossRef] [PubMed]

23. Vorobiev, E.; Lebovka, N. 2 - Udvinding fra fødevarer og biomaterialer forbedret af pulserende elektrisk energi. I innovative fødevareforarbejdningsteknologier; Knoerzer, K., Juliano, P., Smithers, G., Eds.; Woodhead Publishing: Sawston, Storbritannien, 2016; s. 31–56.

24. Käferböck, A.; Smetana, S.; de Vos, R.; Schwarz, C.; Toepfl, S.; Parniakov, O. Bæredygtig udvinding af værdifulde komponenter fra Spirulina assisteret af pulserende elektrisk feltteknologi. Algal Res. 2020, 48, 101914. [CrossRef]

25. Parniakov, O.; Barba, FJ; Grimi, N.; Marchal, L.; Jubeau, S.; Lebovka, N.; Vorobiev, E. Pulserende elektrisk feltassisteret udvinding af ernæringsmæssigt værdifulde forbindelser fra mikroalger Nannochloropsis spp. ved hjælp af den binære blanding af organiske opløsningsmidler og vand.Innov. Food Sci. Emerg. Teknol. 2015, 27, 79-85. [CrossRef]

26. Scherer, D.; Krust, D.; Frey, W.; Mueller, G.; Nick, P.; Gusbeth, C. Pulserende elektrisk felt (PEF)-assisteret proteingenvinding fra ChlorellaVulgaris medieres af en enzymatisk proces efter celledød. Algal Res. 2019, 41, 101536. [CrossRef]

27. Naseri, A.; Marinho, GS; Holdt, SL; Bartela, JM; Jacobsen, C. Enzym-assisteret ekstraktion og karakterisering af et protein fra rød tang Palmaria palmitate. Algal Res. 2020, 47, 101849. [CrossRef]

kryds

28. Robin, A.; Kazir, M.; Sack, M.; Israel, A.; Frey, W.; Mueller, G.; Livney, YD; Golberg, A. Functional Protein Concentrates Extracted from the Green Marine Macroalga Ulva sp., af High Voltage Pulsed Electric Fields and Mechanical Press. ACS Sustain. Chem. Eng.2018, 6, 13696-13705. [CrossRef]

29. Einarsdóttir, R.; Þórarinsdóttir, KA; Aðalbjörnsson, BV; Guðmundsson, M.; Marteinsdóttir, G.; Kristbergsson, K. Effekten af ​​pulserede elektriske felt-assisterede behandlingsparametre på rå vandig ekstraktion af Laminaria digitata. J. Appl. Phycol. 2021, 33,3287-3296. [CrossRef]

30. Postma, PR; Cerezo-Chinarro, O.; Akkerman, RJ; Olivieri, G.; Wijffels, RH; Brandenburg, WA; Eppink, MHM Bioraffinaderi af makroalgerne Ulva Lactuca: Ekstraktion af proteiner og kulhydrater ved mild desintegration. J. Appl. Phycol. 2018, 30, 1281-1293.[CrossRef]

31. Zbinden, MDA; Sturm, BSM; Nord, RD; Carey, WJ; Moore, D.; Shinogle, H.; Stagg-Williams, SM Pulserende elektrisk felt (PEF) som en intensiveringsforbehandling til grønnere opløsningsmiddellipidekstraktion fra mikroalger. Biotechnol. Bioeng. 2013, 110, 1605-1615.[CrossRef]

32. Silve, A.; Papachristou, I.; Wüstner, R.; Sträßner, R.; Schirmer, M.; Leber, K.; Guo, B.; Interrante, L.; Posten, C.; Frey, W. Ekstraktion af lipider fra våde mikroalger Auxenochlorella protothecoides ved hjælp af pulserende elektrisk feltbehandling og ethanol-hexanblandinger. AlgalRes. 2018, 29, 212-222. [CrossRef]

33. Chittapun, S.; Jonjaroen, V.; Khumrangsee, K.; Charoenrat, T. C-phycocyanin-ekstraktion fra to ferskvandscyanobakterier ved fryse-optøning og pulserende elektriske feltteknikker for at forbedre ekstraktionseffektiviteten og renheden. Algal Res. 2020, 46, 101789. [CrossRef]

34. Aryee, ANA; Agyei, D.; Akanbi, TO Genvinding og udnyttelse af tangpigmenter i fødevareforarbejdning. Curr. Opin. Food Sci.2018, 19, 113-119. [CrossRef]

35. Nowacka, M.; Tappi, S.; Wiktor, A.; Rybak, K.; Miszczykowska, A.; Czyzewski, J.; Drozdzal, K.; Witrowa-Rajchert, D.; Tylewicz, U. Indvirkningen af ​​pulserende elektrisk felt på udvindingen af ​​bioaktive forbindelser fra rødbeder. Foods 2019, 8, 244. [CrossRef]

36. Martínez, JM; Delso, C.; Álvarez, I.; Raso, J. Pulserende elektrisk felt-assisteret udvinding af værdifulde forbindelser fra mikroorganismer. Forstå. Rev. Food Sci. Food Saf. 2020, 19, 530-552. [CrossRef]

37. Pataro, G.; Goettel, M.; Straessner, R.; Gusbeth, C.; Ferrari, G.; Frey, W. Effekt af PEF-behandling på udvinding af værdifulde forbindelser fra mikroalger C. vulgaris. Chem. Eng. Trans. 2017, 57, 67-72.

38. Brunton, NP; Luengo, E. Pulserede elektriske felter til udvinding af sekundære metabolitter fra planter. I pulserende elektriske felter til udvinding af sekundære metabolitter fra planter; Miklavcic, D., red.; Springer International Publishing: Cham, Schweiz, 2017;pp. 1-15.

39. Schiener, P.; Sort, KD; Stanley, MS; Grøn, DH Årstidsvariationen i den kemiske sammensætning af tangarterneLaminaria digitata, Laminaria hyperborea, Saccharina latissima og Alaria esculenta. J. Appl. Phycol. 2015, 27, 363-373. [CrossRef]

40. Salgado, LT; Tomazetto, R.; Cinelli, LP; Farina, M.; Filho, GMA Brunalgealginaters indflydelse på phenolforbindelsers evne til ultraviolet strålingsabsorption in vitro. Braz. J. Oceanogr. 2007, 55, 145-154. [CrossRef]

41. Orfanoudaki, M.; Hartmann, A.; Karsten, U.; Ganzera, M. Kemisk profilering af mycosporin-lignende aminosyrer i treogtyve algearter. J. Phycol. 2019, 55, 393-403. [CrossRef]

42. Pangestuti, R.; Siahaan, EA; Kim, S.-K. Fotobeskyttende stoffer afledt af marine alger. Mar. Drugs 2018, 16, 399.[CrossRef] [PubMed]

43. Schneider, G.; Figueroa, FL; Vega, J.; Chaves, P.; Álvarez-Gómez, F.; Korbee, N.; Bonomi-Barufi, J. Fotobeskyttelsesegenskaber af marine fotosyntetiske organismer dyrket i områder med høj ultraviolet eksponering: Kosmeceutiske anvendelser. Algal Res. 2020,49, 101956. [CrossRef]

44. Nishida, Y.; Kumagai, Y.; Michiba, S.; Yasui, H.; Kishimura, H. Effektiv udvinding og antioxidantkapacitet af mycosporinlignende aminosyrer fra rødalge Dulse Palmaria palmitat i Japan. Mar. Drugs 2020, 18, 502. [CrossRef] [PubMed]

45. Rehm, E.; Dalgleish, F.; Huot, M.; Matteoli, S.; Archambault, P.; Lambert Girard, S.; Piché, M.; Lagunas-Morales, J. Sammenligning af fluorescerende og differentiel absorption LiDAR-teknikker til påvisning af algebiomasse med applikationer til arktiske substrater. InOcean Sensing and Monitoring X; International Society for Optics and Photonics: Bellingham, WA, USA, 2018; Bind 10631, s. 106310Z.

46. ​​Wang, T.; Jonsdottir, R.; Ólafsdóttir, G. Totale phenolforbindelser, radikalopfangning og metalchelering af ekstrakter fra islandsk tang. Food Chem. 2009, 116, 240-248. [CrossRef]

47. Bedoux, G.; Hardouin, K.; Burlot, AS; Bourgougnon, N. Kapitel 12—Bioaktive komponenter fra tang: Kosmetiske applikationer og fremtidig udvikling. Fremskridt inden for botanisk forskning; Bourgougnon, N., red.; Academic Press: Cambridge, MA, USA, 2014; Bind 71, s. 345–378.

48. Roleda, MY; Marfaing, H.; Desnica, N.; Jónsdóttir, R.; Skjermo, J.; Rebours, C.; Nitschke, U. Variationer i polyphenol- og tungmetalindhold i vildhøstet og dyrket tang-bulkbiomasse: sundhedsrisikovurdering og implikation for fødevareanvendelser. Fødevarekontrol 2019, 95, 121–134. [CrossRef]

49. Ummat, V.; Tiwari, BK; Jaiswal, AK; Condon, K.; Garcia-Vaquero, M.; O'Doherty, J.; O'Donnell, C.; Rajauria, G. Optimering af ultralydsfrekvens, ekstraktionstid og opløsningsmiddel til genvinding af polyphenoler, phlorotanniner og associeret antioxidantaktivitet fra brun tang. Mar. Drugs 2020, 18, 250. [CrossRef]

50. Afonso, C.; Matos, J.; Guarda, I.; Gomes-Bispo, A.; Gomes, R.; Cardoso, C.; Gueifão, S.; Delgado, I.; Coelho, I.; Castanheira, I.; et al. Bioaktivt og ernæringspotentiale af Alaria esculenta og Saccharina latissima. J. Appl. Phycol. 2021, 33, 501-513. [CrossRef]

51. Cotas, J.; Leandro, A.; Monteiro, P.; Pacheco, D.; Figueirinha, A.; Gonçalves, AMM; da Silva, GJ; Pereira, L. Tangphenoler: Fra udvinding til applikationer. Mar. Drugs 2020, 18, 384. [CrossRef]

52. Farasat, M.; Khavari-Nejad, RA; Nabavi, SM; Namjooyan, F. Antioxidantaktivitet, totalt phenoler og flavonoidindhold af nogle spiselige grønne tang fra den nordlige kyst af Den Persiske Golf. IJPR 2014, 13, 163-170. [PubMed]

53. Manivannan, K.; Thirumaran, G.; Devi, GK; Anantharaman, P.; Balasubramanian, T. Nærliggende sammensætning af forskellige grupper af tang fra Vedalai kystvande (Mannarbugten): Indiens sydøstkyst. Mellemøsten J. Sci. Res. 2009, 4, 72-77.

54. Mišurcová, L.; Škrovánková, S.; Samek, D.; Ambrožová, J.; Mach ˚u, L. Kapitel 3 – Sundhedsmæssige fordele ved algepolysaccharider i menneskelig ernæring. Fremskridt inden for fødevare- og ernæringsforskning; Henry, J., red.; Academic Press: Cambridge, MA, USA, 2012; Bind 66, s. 75–145.

55. Lafarga, T.; Acién-Fernández, FG; Garcia-Vaquero, M. Bioaktive peptider og kulhydrater fra tang til fødevareanvendelser: Naturlig forekomst, isolering, oprensning og identifikation. Algal Res. 2020, 48, 101909. [CrossRef]

56. Mutripah, S.; Meinita, MDN; Kang, J.-Y.; Jeong, G.-T.; Susanto, AB; Prabowo, RE; Hong, Y.-K. Bioethanolproduktion fra hydrolysatet af Palmaria palmata ved hjælp af svovlsyre og gæring med ølgær. J. Appl. Phycol. 2014, 26, 687-693.[CrossRef]

57. Dominguez, H.; Loret, EP Ulva lactuca, A Source of Troubles and Potential Riches. Mar. Drugs 2019, 17, 357. [CrossRef]

58. Kidgell, JT; Magnusson, M.; de Nys, R.; Glasson, CRK Ulvan: En systematisk gennemgang af ekstraktion, sammensætning og funktion.Algal Res. 2019, 39, 101422. [CrossRef]

59. Habeebullah, SFK; Alagarsamy, S.; Arnous, A.; Jacobsen, C. Enzymatisk udvinding af antioxidante ingredienser fra danske tang og karakterisering af aktive stoffer. Algal Res. 2021, 56, 102292. [CrossRef]

60. Yuan, Y.; Zhang, J.; Fan, J.; Clark, J.; Shen, P.; Li, Y.; Zhang, C. Mikrobølgeassisteret udvinding af phenolforbindelser fra fire økonomiske brune makroalgearter og evaluering af deres antioxidantaktiviteter og hæmmende virkninger på -amylase, -glucosidase, pancreaslipase og tyrosinase. Int. Food Res. J. 2018, 113, 288-297. [CrossRef]

61. Balboa, EM; Conde, E.; Moure, A.; Falqué, E.; Domínguez, H. In vitro antioxidantegenskaber af råekstrakter og forbindelser fra brunalger. Food Chem. 2013, 138, 1764-1785. [CrossRef]

62. Kainama, H.; Fatmawati, S.; Santoso, M.; Papilaya, PM; Ersam, T. Forholdet mellem frie radikaler og totalt phenol- og flavonoidindhold i Garcinia lasoar PAM. Pharm. Chem. J. 2020, 53, 1151-1157. [CrossRef]

63. Dang, TT; Van Vuong, Q.; Schreider, MJ; Bowyer, MC; Van Altena, IA; Scarlett, CJ Optimering af ultralydsassisteret ekstraktionsbetingelser for phenolindhold og antioxidantaktiviteter af algen Hormosira banksii ved hjælp af responsoverflademetodologi. J. Appl. Phycol. 2017, 29, 3161-3173. [CrossRef]

64. Couteau, C.; Coiffard, L. Kapitel 14 - Anvendelse af tang i kosmetik. I tang i sundhed og sygdomsforebyggelse; Fleurence, J., Levine, I., Eds.; Academic Press: San Diego, CA, USA, 2016; s. 423–441.

65. Tsukahara, K.; Takema, Y.; Moriwaki, S.; Tsuji, N.; Suzuki, Y.; Fujimura, T.; Imokawa, G. Selektiv hæmning af hudfibroblastElastase fremkalder en koncentrationsafhængig forebyggelse af ultraviolet B-induceret rynkedannelse. J. Investig. Dermatol. 2001,117, 671-677. [CrossRef]

66. Liyanaarachchi, GD; Samarasekera, JKRR; Mahanama, KRR; Hemalal, KDP Tyrosinase, elastase, hyaluronidase, den hæmmende og antioxidante aktivitet af srilankanske lægeplanter til nye kosmetiske midler. Ind. Afgrøder Prod. 2018, 111, 597-605. [CrossRef]

67. Gupta, PL; Rajput, M.; Oza, T.; Trivedi, U.; Sanghvi, G. Eminence af mikrobielle produkter i kosmetisk industri. Nat. Prod.Bioprospect. 2019, 9, 267-278. [CrossRef] [PubMed]

68. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Hassan Khan, MT; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AA En omfattende gennemgang af tyrosinasehæmmere. J. Enzyme Inhib. Med. 2019, 34, 279-309. [CrossRef]

69. Couteau, C.; Coiffard, L. Phycocosmetics and Other Marine Cosmetics, Specifikke kosmetik formuleret ved hjælp af marine ressourcer.Mar. Narkotika 2020, 18, 322. [CrossRef]

70. Sari, DM; Anwar, E.; Arifianti, AE Antioxidant og tyrosinasehæmmere aktiviteter af ethanolekstrakter af brun tang (Turbinaria conoides) som lysende ingrediens. Pharm. J. 2019, 11, 379-382. [CrossRef]

71. Brenner, M.; Høre, VJ Melanins beskyttende rolle mod UV-skader i menneskelig hud. Photochem. Fotobiol. 2008, 84.539-549. [CrossRef] [PubMed]

72. Lee, SY; Baek, N.; Nam, T.-G. Naturlige, semisyntetiske og syntetiske tyrosinasehæmmere. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2016, 31,1-13. [CrossRef] [PubMed]

73. Ferreres, F.; Lopes, G.; Gil-Izquierdo, A.; Andrade, PB; Sousa, C.; Mouga, T.; Valentão, P. Phlorotannin-ekstrakter fra Fucales Karakteriseret af HPLC-DAD-ESI-MSn: tilgange til hyaluronidaseinhiberende kapacitet og antioxidantegenskaber. Mar.Drugs 2012, 10, 2766-2781. [CrossRef] [PubMed]

74. Fayad, S.; Nehmé, R.; Tannoury, M.; Lesellier, E.; Pichon, C.; Morin, P. Macroalga Padina pavonica-vandekstrakter opnået ved tryksat væskeekstraktion og mikrobølgeassisteret ekstraktion inhiberer hyaluronidaseaktivitet som vist ved kapillærelektroforese.J. Chromatogr. A 2017, 1497, 19-27. [CrossRef] [PubMed]

75. Athukorala, Y.; Kim, K.-N.; Jeon, Y.-J. Antiproliferative og antioxidante egenskaber af et enzymatisk hydrolysat fra brunalge, Ecklonia cava. Food Chem. Toxicol. 2006, 44, 1065-1074. [CrossRef]

76. Jiménez-Escrig, A.; Gómez-Ordóñez, E.; Rupérez, P. Brun og rød tang som potentielle kilder til antioxidante nutraceuticals.J. Appl. Phycol. 2012, 24, 1123-1132. [CrossRef]

77. Karawita, R.; Siriwardhana, N.; Lee, K.-W.; Heo, M.-S.; Yeo, I.-K.; Lee, Y.-D.; Jeon, Y.-J. Reaktive oxygenarter fjerner, metalchelering, reducerende kraft og lipidperoxidationshæmmende egenskaber af forskellige opløsningsmiddelfraktioner fra Hizikia fusiformis.Eur. Food Res. Teknol. 2005, 220, 363-371. [CrossRef]

78. Jormalainen, V.; Honkanen, T. Variation i naturlig selektion til vækst og phlorotanniner i brunalgen Fucus vesiculosus.J. Evolut. Biol. 2004, 17, 807-820. [CrossRef] [PubMed]

79. Koivikko, R.; Loponen, J.; Pihlaja, K.; Jormalainen, V. Højtydende væskekromatografisk analyse af phlorotanniner fra brunalgen Fucus vesiculosus. Phytochem. Anal. 2007, 18, 326-332. [CrossRef] [PubMed]

80. Mareˇcek, V.; Mikyška, A.; Hampel, D.; Cejka, P.; Neuwirthov ˇ á, J.; Malachová, A.; Cerkal, R. ABTS og DPPH metoder som et værktøj til at studere vårbygs og malts antioxidantkapacitet. J. Cereal Sci. 2017, 73, 40-45. [CrossRef]

81. Asada, M.; Sugie, M.; Inoue, M.; Nakagomi, K.; Hongo, S.; Murata, K.; Irie, S.; Takeuchi, T.; Tomizuka, N.; Oka, S. Inhiberende virkning af alginsyrer på hyaluronidase og på histaminfrigivelse fra mastceller. Biosci. Biotechnol. Biochem. 1997, 61, 1030-1032.[CrossRef] [PubMed]

82. Mase, T.; Yamauchi, M.; Kato, Y.; Esaki, H.; Isshiki, S. Hyaluronidase-hæmmende surt polysaccharid isoleret fra PorphyridiumPurpureum. Samlingen af ​​forskningsessays på Suishan Women's Gakuen University. Nat. Sci. 2013, 44, 105-113,83. Tolpeznikaite, E.; Bartkevics, V.; Ruzauskas, M.; Pilkaityte, R.; Viskelis, P.; Urbonaviciene, D.; Zavistanaviciute, P.; Zokaityte, E.; Ruibys, R.; Bartkiene, E. Karakterisering af makro- og mikroalgeekstrakter Bioaktive forbindelser og mikro- og makroelementer Overgang fra alger til ekstrakt. Foods 2021, 10, 2226. [CrossRef]

84. Gómez, I.; Huovinen, P. Morfo-funktionelle mønstre og zonering af sydchilenske tang: Betydningen af ​​fotosyntetiske og bio-optiske træk. Mar. Ecol. Prog. Ser. 2011, 422, 77-91. [CrossRef]

85. Karsten, U.; Wiencke, C. Faktorer, der kontrollerer dannelsen af ​​UV-absorberende mycosporin-lignende aminosyrer i den marine rødalge Palmaria palmitat fra Spitsbergen (Norge). J. Plant. Physiol. 1999, 155, 407-415. [CrossRef]

86. Ummat, V.; Sivagnanam, SP; Rajauria, G.; O'Donnell, C.; Tiwari, BK Fremskridt inden for forbehandlingsteknikker og grønne ekstraktionsteknologier til bioaktivt fra tang. Trends Food Sci. Technol 2021, 110, 90-106. [CrossRef]

87. Bousetta, N.; Lanoisellé, J.-L.; Bedel-Cloutour, C.; Vorobiev, E. Ekstraktion af opløseligt stof fra druepresser ved højspændingselektriske udladninger til polyphenolgenvinding: Effekt af svovldioxid og termiske behandlinger. J. Food Eng. 2009, 95, 192-198.[CrossRef]

88. Goettel, M.; Eing, C.; Gusbeth, C.; Straessner, R.; Frey, W. Pulserende elektrisk felt assisteret udvinding af intracellulære værdigenstande fra mikroalger. Algal Res. 2013, 2, 401-408. [CrossRef]

89. Hwang, P.-A.; Wu, C.-H.; Gau, S.-Y.; Chien, S.-Y.; Hwang, D.-F. Antioxidant- og immunstimulerende aktiviteter af varmtvandsekstrakt fra tang Sargassum epiphyllum. J. Mar. Sci. Teknol. 2010, 18, 41-46. [CrossRef]

90. Sabeena Farvin, KH; Jacobsen, C. Fenolforbindelser og antioxidantaktiviteter af udvalgte arter af tang fra den danske kyst. Food Chem. 2013, 138, 1670-1681. [CrossRef] [PubMed]

91. Godlewska, K.; Michalak, I.; Tuhy, L.; Chojnacka, K. Plantevækst biostimulanter baseret på forskellige metoder til tangekstraktion med vand. BioMed Res. Int. 2016, 2016, 1-11. [CrossRef] [PubMed]

92. Zhang, Q.; Zhang, J.; Shen, J.; Silva, A.; Dennis, DA; Barrow, CJ A Simple 96-Well Microplate Method for Estimation of Total Polyphenol Content in Seaweeds. J. Appl. Phycol. 2006, 18, 445-450. [CrossRef]

93. Kamtekar, S.; Keer, V.; Patil, V. Estimering af phenolindhold, flavonoidindhold, antioxidant- og alfa-amylasehæmmende aktivitet af markedsført polyurteformulering. J. Appl. Pharm. Sci. 2014, 4, 61.

94. Neto, R.; Marçal, C.; Queiros, A.; Abreu, M.; Silva, A.; Cardoso, S. Screening af Ulva rigida, Gracilaria sp., Fucus vesiculosus og Saccharina latissima som funktionelle ingredienser. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 2987. [CrossRef]

95. Benzie, IF; Stamme, JJ Den ferri-reducerende evne af plasma (FRAP) som et mål for "antioxidantkraft": FRAP-assayet. Anal.Biochem. 1996, 239, 70-76. [CrossRef]

96. Eun Lee, K.; Bharadwaj, S.; Yadava, U.; Gu Kang, S. Evaluering af koffein som en hæmmer mod kollagenase, elastase og tyrosinase ved hjælp af silico og in vitro tilgang. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 927-936. [CrossRef] [PubMed]