Effektiviteten af ​​den kombinerede behandling af Laminaria Japonica og Cistanche Tubulosa ekstrakter i hårvækst

Kyungha Shin1#, Tae-Su Kim2#, Jangbeen Kyung1, Dajeong Kim1, Dongsun Park1, Ehn-Kyoung Choi1, Sung-Pyo Lee2, Woong-Suk Yang2, Myung-Hwa Kang3, Yun-Bae Kim1*

1College of Veterinary Medicine, Chungbuk National University, Cheongju, Korea

2Misuba RTech Co., Ltd., Asan, Korea

3 Department of Food Science and Nutrition, Hoseo University, Asan, Korea

Siden hårtab i hovedbunden er steget på det seneste, selv hos unge mennesker, hvilket alvorligt påvirker individers livskvalitet, har de hårvækststimulerende virkninger af Laminaria japonica-ekstrakt (LJE) ogCistanche tubulosaekstrakt (CTE) blev undersøgt. Efter bekræftelse af den anagene fase af follikler under barbering blev C57BL/6-hanmus påført dermalt med 3 procent Minoxidil eller oralt administreret med kombinationerne af LJE og CTE i 21 dage. Minoxidil fremmede hårgenvækst og øgede -glutamyl transpeptidase (-GTP) og alkalisk fosfatase (ALP) aktiviteter. Derudover opregulerede Minoxidil niveauer af epidermal vækstfaktor (EGF) og vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF). Samtidig administration af LJE og CTE ved 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE udøvede synergistiske fremmende effekter på hårgenvæksten, sammenlignelig med 3 procent Minoxidil. LJE øgede fortrinsvis ALP-aktivitet, mens CTE øgede både -GTP- og ALP-aktiviteter såvel som EGF- og VEGF-ekspressioner. In vivo luftpose-inflammationsmodel, carrageenan-induceret vaskulær ekssudation og øgede nitrogenoxid- og prostaglandin E2-koncentrationer i ekssudaterne blev synergistisk undertrykt ved samtidig administration af LJE og CTE. Derudover blev inflammatorisk celleinfiltration væsentligt hæmmet af kombinationsbehandlingen. Resultaterne tyder på, at kombinationsbehandling med LJE og CTE i passende doser og forhold forhindrer hårtab og forbedrer alopeci, som til dels kan være medieret af deres antiinflammatoriske aktiviteter.

Nøgleord:Hårvækst, betændelse, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa,kombinationsbehandling

For mere information kontakt venligst:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanchedeserticola har mange effekter, klik her for at vide mere

På det seneste har hårtab i hovedbunden været stigende selv hos unge mennesker, hvilket alvorligt påvirker en persons livskvalitet. Selvom skaldethed ikke er et af sundhedsproblemerne, kan det forårsage dyb psykologisk ubehagelig social stress. Derfor er det af stor interesse at udvikle nye forebyggende og/eller terapeutiske materialer til hårtab og genvækst. På trods af milliardmarkedet er der nogle få aktuelt effektive produkter tilgængelige [1]. Hårsækkene omdannes i løbet af cykliske perioder med vækst (anagen), regression (catagen), hvile (telogen) og udskillelse (exogen) [2]. Under catagen,

mange af de follikulære celler gennemgår programmeret celledød (apoptose) [3], hvilket reducerer follikelstørrelsen, når folliklerne trænger ind i telogen. Aktivering af sjældent cyklende epitelstamceller placeret i folliklernes bule-region bevirker follikulær regenerering ved begyndelsen af ​​den næste anagene fase [4]. Stamcelleafkom danner en ny follikulær matrix under tidlig anagen, og hårstrået og den indre rodskede er afledt af disse relativt udifferentierede matrixceller [5]. Det er velkendt, at størrelsen af ​​hårsækken og varigheden af ​​den anagene fase styrer henholdsvis størrelsen (diameteren) og længden af ​​hårstrået. Denne cykliske vækst af hår reguleres af forskellige vækstfaktorer.

Minoxidil, finasterid og propecia er kommercielt tilgængelige for at bremse hårtab og lette hårgenvækst. Minoxidil som en vasodilator udøvede en bivirkning for at lette hårvækst [6], hvilket kan skyldes dets næringsstoftilførende og kaliumkanalåbningsaktiviteter [7,8]. Minoxidil er effektivt til androgen alopeci, blandt andre skaldethed behandlinger, selvom dets effektivitet forsvinder inden for måneder efter seponering af behandlingen. Til sammenligning er finasterid og propecia, terapeutiske midler mod benign prostatahyperplasi og prostatacancer, blevet registreret i mange lande for androgenetisk alopeci (mandlig skaldethed). Finasterid og propecia er syntetiske anti-androgener, der hæmmer type II 5- reduktase, et enzym, der omdanner testosteron til dihydrotestosteron (DHT) i papillacellerne i bunden af ​​hårsækkene [9]. Laminaria japonica, Undaria pinnatifida og Cladosiphon okamuranus, der er vidt udbredt i mange lande, er blevet brugt som terapeutiske midler i orientalsk medicin i en lang periode. I tidligere undersøgelser var fucoidan, et sulfatpolysaccharidkompleks, blevet ekstraheret og identificeret fra tang og bekræftet at have antioxidative, anti-koagulative, anti-cancer og anti-inflammatoriske aktiviteter [10,11]. Derefter er gavnlige virkninger af fucoidan på inflammatoriske sygdomme, iskæmi, immundysfunktion og tumorer blevet påvist [12,13]. På den anden side,Cistanche tubulosa ekstrakt(CTE) er også blevet meget brugt til traditionel medicin i Kina. CTE forbedrer blodgennemstrømningen ved at sænke kolesterolniveauet i blodet [14]. For nylig blev det rapporteret, at CTE reducerede produktionen af ​​tumor-nekrosefaktor- (TNF-) og interleukin-4 (IL-4), som er vigtige faktorer for produktionen af ​​nitrogenoxid (NO) i den inflammatoriske vej [15]. Vi viste også, at fucoidan fra Laminaria japonica-ekstrakt (LJE) og CTE synergistisk svækkede inflammation in vitro og in vivo [16]. Det er især blevet påvist, at der var en tæt sammenhæng mellem hud (især tårekirtel) betændelse og alopeci [17]. Således dukker antiinflammatoriske aspekter af behandling af alopeci op [18]. Baseret på forbedringsaktiviteterne på blodgennemstrømning og inflammation, undersøger vi den kombinationsmæssige effekt af LJE og CTE på hårvækst og underliggende mekanisme(r), sammenlignet med 3 procent Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seoul, Korea), et velkendt hår vækstfremmer.

CistancheEkstrakt mod hårtab

Materialer og Metoder

Materialer

LJE og CTE blev opnået fra Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Korea). Tørret pulver af Laminaria japonica blev ekstraheret i renset vand ved 6 0oC i 24 timer, filtreret gennem en 0,45 µm membran, desinficeret og spraytørret. Cistanche tubulosa blev ekstraheret i 80 procent ethanol, desinficeret, koncentreret og tørret. LJE og CTE blev holdt ved 4oC, blandet (1:3) og opløst i renset vand før brug og indgivet oralt i et volumen på 5 ml/kg.

Dyr

C57BL/6-hanmus til undersøgelse af hårvækst og ICR-hanmus til undersøgelse af inflammation blev købt fra Daehan Biolink (Eumseong, Korea) og anbragt i et rum med konstante miljøforhold (23±2ºC; 45-65 procent relativ fugtighed ; 12-timers lys-mørke cyklus; 150-300 lux lysstyrke). Pelletfoder og renset vand var tilgængeligt ad libitum. Alle dyreforsøg blev godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) fra Chungbuk National University (CBNU), Korea, og udført i henhold til Standard Operation Procedures (SOP) fra Laboratory Animal Research Center, CBNU.

Behandling for hårvækst

Efter bekræftelse af den anagene fase ved at observere homogent lyserød hudfarve i ryghuden på C57BL/6 mus (6 uger gamle, n=8/gruppe) efter klipning i den telogene fase, blev håret barberet [1 ,19,20]. Fra den næste dag blev mus uden synlige ridser udvalgt og oralt behandlet med LJE (18 eller 54 mg/kg), CTE (54 eller 162 mg/kg) eller deres blanding (18 plus 54 eller 54 plus 162 mg/kg) en gang om dagen i 21 dage. Lave doser af LJE (18 mg/kg) og CTE (54 mg/kg) var fra estimerede humane doser på 100 mg/krop (70 kg) og 300 mg/krop efter overfladeoversættelse af kropsvægt (Km{{23} } for henholdsvis menneske/Km=3 for mus). Høje doser af LJE og CTE blev sat til 3 gange, alene eller i kombination, for at vurdere maksimale synergistiske effekter [16]. Minoxidil (3 procent, 0,2 ml) blev påført topisk en gang om dagen på den barberede hud i samme skema med LJE/CTE-behandling.

Grov observation af hårvækst

På dage med 3-dages intervaller efter barbering og under behandling blev musene let bedøvet med diethylether, og der blev taget billeder på deres bagside. Forholdet mellem hårgenvækst (genvokset område/barberet område) på fotografierne blev analyseret ved hjælp af et computeriseret billedanalysesystem (Imageinside, Daejeon, Korea).

Mikroskopisk undersøgelse af hårsækkene

På dag 14 og 21 blev musene aflivet ved dyb anæstesi med diethylether, og deres rygskind blev fjernet [1]. Ryghuden blev skåret i to dele. Formalinfikserede, paraffinindlejrede vævssnit (5 µm i diameter) af en del blev farvet med hæmatoxylin-eosin for at undersøge antallet af hårsække og de histologiske fund. Den anden del af vævet blev frosset i flydende nitrogen til enzymassay og immunoassay.

Analyse af enzymaktivitet

Hudvæv blev homogeniseret i 4 volumener phosphatbuffer (pH 7,4). Homogenatet blev centrifugeret ved 3,000 rpm i 20 minutter, og supernatanten blev anvendt til assay af -glutamyl transpeptidase (-GTP) og alkalisk phosphatase (ALP) aktiviteter under anvendelse af p-nitrophenol phosphat (PNPP)-DEAV som substrat [1,21].

Kvantificering af vækstfaktorer

Epidermal vækstfaktor (EGF) og vaskulær endothelial vækstfaktor (VEGF) blev kvantificeret ved hjælp af enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kits (R&D Systems, Minneapolis, USA) i henhold til producentens instruktioner [1,22].

Behandling for betændelse

ICR-mus (7 uger gamle, n=8/gruppe) blev oralt behandlet med LJE (18 eller 54 mg/kg), CTE (54 eller 162 mg/kg) eller deres blanding (18 plus 54 eller 54 plus 162 mg/kg) én gang dagligt i 7 dage [16]. På den 1. dag af LJE- og CTE-behandling blev musene subkutant injiceret med 10 ml steril luft i bagsiden for at danne en pose [16,23,24]. Efter 2 og 5 dage blev posen geninjiceret med 5 ml luft. En time efter den sidste LJE- og CTE-behandling blev 1 ml carrageenan (1 procent i saltvand; Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) eller dets vehikel (saltvand) sprøjtet ind i posen.

Analyse af ekssudaterne

Luftposen blev vasket med 1 ml kold saltvand 6 timer efter carrageenaninjektion, og nettovolumenet

af skyllevæske blev registreret [16]. Det samlede antal af inflammatoriske celler inklusive neutrofiler, monocytter og lymfocytter blev bestemt ved anvendelse af en kolter-tæller. Koncentrationerne af NO og prostaglandin E2 (PGE2) blev bestemt med Griess-reagens (Sigma-Aldrich) og

enzymimmunoassay (EIA) under anvendelse af henholdsvis et Correlate-EIA kit (Assay Designs, Ann Arbor, USA) [16].

Cistancheekstrakt anti-aging og anti-hårtab

Statistisk analyse

Data præsenteres som middel±standardfejl. Den statistiske signifikans blev bestemt ved envejsvariansanalyse efterfulgt af posthoc Tukeys multiple-sammenligningstest. P-værdier<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Resultater

Anvendelse af Minoxidil (3 procent), et referencemateriale, lettede markant hårvæksten hos C57BL/6-mus og udviste en næsten fuld dækning (92,4 procent) af det barberede område (figur 1, 2B) sammenlignet med de 29,2 procent i normal vækst (figur 1, 2A) på dag 21. Skønt mindre effektiv end Minoxidil-påføring, lettede oral behandling af LJE også hårvæksten, hvilket førte til 33,5 og 69,1 procent dækning ved henholdsvis 18 og 54 mg/kg (figur 1, 2C, 2D). CTE var også effektiv til at øge hårvæksten og nåede 73,6 og 80,4 procent

dækning ved henholdsvis 54 og 162 mg/kg (figur 1, 2E, 2F). Navnlig forbedrede kombinationsbehandling med høje doser af LJE (54 mg/kg) og CTE (162 mg/kg) hårvæksten markant fra dag 12, sammenlignelig med effekten af ​​Minoxidil (figur 1, 2H), selvom lave doser af LJE (18 mg/kg) og CTE (54 mg/kg) udøver kun en synergistisk virkning i den tidlige fase (figur 1, 2G).

Sammenlignet med normale hårsække (Figur 3A) forbedrede Minoxidil-påføring integriteten af ​​hårsækkene, hvilket viste større follikler og tykkere hårstrå (Figur 3B). Sådanne virkninger blev også fundet i huden på mus behandlet med LJE og/eller CTE (figur 3C-3H). Især den hårfollikelforstærkende effekt af kombinationsbehandling af LJE og CTE var sammenlignelig med den af ​​Minoxidil.

Minoxidil-påføring øgede aktiviteten af ​​-GTP, der inducerer hårsækkene til anagen fase med 90-120 procent

på dag 14 og 21 sammenlignet med niveauet af normal hud (figur 4). LJE (54 mg/kg) øgede også enzymaktiviteten, selvom der var store variationer. CTE udøvede lignende virkninger, hvilket signifikant øgede - GTP-aktiviteten på dag 14. Interessant nok øgede kombinationsbehandling af LJE og CTE enzymaktiviteten yderligere, end når ekstrakterne blev brugt alene.

ALP-aktivitet, en markør for knoglevækst og angiogenese, steg signifikant i huden på dag 14 og 21 efter topisk påføring af Minoxidil (figur 5). LJE og CTE øgede også ALP-aktiviteten efter oral administration på en dosisafhængig måde. Især blev enzymaktiviteten synergistisk forbedret ved kombineret behandling med LJE og CTE.

I analysen af ​​EGF, en velkendt hårvækstfaktor, øgede Minoxidil-applikation niveauet af EGF

3,5 gange normal kontrol på begge dag 14 og 21 (figur 6). LJE (18 mg/kg) øgede EGF kun på dag 21, mens CTE (162 mg/kg) i høj grad opregulerede sin produktion på dag 14 og 21. Det er interessant at bemærke, at kombinationsbehandlingen af ​​LJE og CTE selv kl. lave doser udviste markante synergistiske virkninger.

Minoxidil-behandling øgede også niveauet af VEGF med 50-80 procent over kontrolværdien (figur 7). Selvom LJE var ineffektivt, udøvede CTE bemærkelsesværdige forstærkende effekter. Derudover udviste kombinationsterapi af LJE og CTE en synergistisk aktivitet i den tidlige fase på dag 14.

Injektion af carrageenan i ICR-museluftposen øgede ekssudatvolumenet i posen 6 gange kontrolniveauet (tabel 1). En sådan øget ekssudation blev signifikant svækket ved behandling med LJE (18 og 54 mg/kg) eller CTE (54 og 162 mg/kg). Især faldt den kombinerede behandling med LJE og CTE yderligere

ekssudatvolumenet, sammenlignet med de enkelte effekter. Antallet af inflammatoriske celler blev drastisk forøget ved carrageenaninjektion: 34,6, 4,2 og 24,9 gange kontrolniveauer for henholdsvis neutrofiler, monocytter og lymfocytter (tabel 1). Imidlertid reducerede LJE og CTE signifikant de inflammatoriske celler på dosisafhængige måder, hvor LJE var noget overlegen i forhold til CTE. Forventet blev synergistiske effekter i den inflammatoriske celleinfiltration opnået ved samtidig administration af LJE og CTE.

Parallelt med den inflammatoriske celleinfiltration i posen steg NO- og PGE2-indholdet i posen også drastisk efter carrageenaninjektion (tabel 1). Sammenlignet med den milde effekt af LJE,

CTE sænkede NO-koncentrationen markant. Kombinationsbehandling af LJE og CTE reducerede NO-niveauet yderligere på en dosisafhængig måde. På en lignende måde var det øgede PGE2-niveau synergistisk

undertrykt af kombinationsterapi af LJE og CTE (tabel 1).

Cistancheekstrakt forstærkerimmunitetog forhindrer hårtab

Diskussion

Det menneskelige hoved har i gennemsnit 100,000 hårsække.

I løbet af et helt liv vokser og falder hver follikel omkring 20 gange, hvilket viser dagligt hårtab på 100 hårstrå [25]. Hårtab inklusive alopeci og skaldethed er en foruroligende tilstand for mænd og kvinder, især i det moderne samfund. Derfor er det af stor betydning at udvikle nye terapier, der forebygger hårtab og forbedrer hårbehandlingen; dvs. vaskulær ekssudation og inflammatorisk celleinfiltration blev synergistisk undertrykt. I kvantitativ analyse blev de store inflammatoriske mediatorer NO og PGE2 i det væsentlige kontrolleret efter oral samtidig administration af LJE og CTE. Interessant nok, da LJE udviste antiinflammatorisk aktivitet, der var højere end den for semi-oprenset fucoidan [16], antages det, at der kan være en eller flere aktive ingredienser, udover fucoidan, i LJE.

Tilsammen indikerer resultaterne, at kombinationsbehandling med LJE og CTE forbedrer hårtab ved at opregulere vækstfaktorer og relaterede enzymaktiviteter og til dels via antiinflammatorisk potentiale. Derfor foreslås det, at en kombination, der inkluderer LJE og CTE i passende kliniske doser og forhold, kunne være en kandidatopskrift for patienter med hårtab.

Anerkendelser

Denne forskning blev økonomisk støttet af Leading Industry Development for Economic Region i Chungcheong Leading Industry Office, Korea Institute for Advancement of Technology (KIAT) og Ministry of Knowledge Economy (MKE), og delvist af High Value-Added Food Technology Development Program , Ministeriet for Landbrug, Fødevarer og Landdistrikter (MAFRA; bevillingsnummer 113034-3).

Interessekonflikt Forfatterne erklærer, at der ikke er nogen økonomisk interessekonflikt for at offentliggøre disse resultater.

Referencer

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Fremme effekt af urteekstraktblandinger på hårgenvækst hos C3H/HeJ mus. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.

2. Paus R, Cotsarelis G. Hårsækkenes biologi. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.

3. Cotsarelis G. Hårsækken: døende efter opmærksomhed. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.

4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Etikettilbageholdende celler findes i buleområdet af pilosebaceous enhed: implikationer for follikulære stamceller, hårcyklus og hudkræft. Cell 1990; 61(7): 1329-1337.

5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfogenese og fornyelse af hårsække fra voksne multipotente stamceller. Cell 2001; 104(2): 233-245.

6. Burton JL, Marshall A. Hypertrichosis på grund af minoxidil. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.

7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Virkningsmekanisme af minoxidilsulfat-induceret vasodilatation: en rolle for øget K plus permeabilitet. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.

8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoxidilsulfat er den aktive metabolit, der stimulerer hårsækkene. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.

9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasteride, en type 2 5alfa-reduktasehæmmer, til behandling af mænd med androgenetisk alopeci. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.

10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Antivirale egenskaber af fucoidanfraktioner fra Leathesia difformis. Phytomedicine 1999; 6(5): 335-340.

11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potentiel antioxidant- og antikoagulantkapacitet af fucoidanfraktioner med lav molekylvægt ekstraheret fra Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.

12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan forbedrer den renale blodgennemstrømning i det tidlige stadie af nyreiskæmi/reperfusionsskade hos rotter. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.

13. Li N, Zhang Q, Song J. Toksikologisk evaluering af fucoidan ekstraheret fra Laminaria japonica i Wistar-rotter. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.

14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. De hypokolesterolæmiske virkninger af Cistanche tubulosa-ekstrakt, en kinesisk traditionel råmedicin, hos mus. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.

15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Inhiberende virkning af acteosid isoleret fra Cistanche tubulosa på kemisk mediatorfrigivelse og inflammatorisk cytokinproduktion af RBL-2H3- og KU812-celler. Planta Med 2010; 76(14): 1512- 1518.

16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Synergistiske anti-inflammatoriske virkninger af Laminaria japonica fucoidan og Cistanche tubulosa ekstrakt. Lab Animal Res 2012; 28(2): 91-97.

17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Sammenslutningen af ​​lacrimal kirtel inflammation med alopecia areata. Orbit 2015; 34(1): 45-50.

18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, Lis- Swiety A. Nye aspekter af behandlingen af ​​alopecia areata. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.

19. Hattori M, Ogawa H. Biokemisk analyse af hårvækst fra aspekter af aldring og enzymaktiviteter. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.

20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Effekt af DREAMMO® hovedbundslotion på fremme af hårvækst i en alopeci-model af C57BL/6 mus. Lab Animal Res 2006; 22(1): 91-96.

21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus

R. Alkalisk fosfataseaktivitet og lokalisering under den murine hårcyklus. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.

22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF-receptorsignaltransduktion. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.

23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Antiinflammatoriske virkninger af et ethanolekstrakt af Angelica gigas i en carrageenan-luftpose-inflammationsmodel. Exp Animal 2009; 58(4): 431-436.

24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Antiinflammatoriske virkninger af Houttuynia cordata superkritisk ekstrakt i carrageenan-luftpose-inflammationsmodel. Lab Animal Res 2012; 28(2): 137-140.

25. Rebora A. Patogenese af androgenetisk alopeci. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.

26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, en ny forbindelse til fremme af hårvækst in vitro og in vivo musemodeller. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.

27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Anvendelse af gamma-glutamyl transpeptidase aktivitet som en markør for hårcyklus og anagen induktion i musehårsække. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.

28. Hamada K, Suzuki K. Evaluering af biokemiske indekser som hårcyklusmarkør i C3H-mus. Exp Animal 1996; 45(3): 251-256.

29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Det sulfaterede polysaccharid fucoidan stimulerer osteogen differentiering af humane fedtafledte stamceller. Stamceller Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Vækstfaktorer og cytokiner i hårsækkens udvikling og cykling: nyere indsigt fra dyremodeller og potentialerne for klinisk terapi. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.

31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo fremmede væksten af ​​musehårfollikler ved kontrolleret frigivelse af vækstfaktorer. Biomaterialer 2003; 24(13): 2387-2394.

32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Den kemotaktiske virkning af en dermal papillacelle-afledt faktor på ydre rodkappeceller. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.

33. Stenn KS, Paus R. Kontrol af hårfollikelcykling. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.

34. Chapman RE, Hardy MH Effekter af intradermalt injiceret og topisk påført museepidermal vækstfaktor på uldvækst, hud og uldfollikler hos merinofår. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.

35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Vaskulær permeabilitetsfaktor/vaskulær endotelvækstfaktor, mikrovaskulær hyperpermeabilitet og angiogenese. Am J Pathol 1995; 146(5):

1029-1039.

36. Ellis RA, Moretti G. Vaskulære mønstre forbundet med categen hårsække i den menneskelige hovedbund. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448- 457.

37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. De angiogene egenskaber af rottevibrissa-hårsækken er forbundet med pæren. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.

38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Kontrol af hårvækst og follikelstørrelse ved VEGF-medieret angiogenese. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.

39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Fordeling af VEGF mRNA-ligegyldige hårfollikelstadier ved fluorescens in situ hybridisering kombineret med konfokal lasermikroskopi. I: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, red), Elsevier, Amsterdam, 1996; s. 407-412.

40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Succesfuld behandling af alopecia areata-lignende hårtab med kontaktsensibilisatoren squaric acid dibutylester (SADBE) i C3H/HeJ mus. J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.