Effekt af Echinacoside på cerebral iskæmi-rotter

Abstrakt: Formål At undersøge effekten afPighuder(ECH) på monoamin-neurotransmittere i den ekstracellulære væske i striatum hos rotter med fokal cerebral iskæmi, og for at udforske den mulige mekanisme for ECH's neurobeskyttende effekt på hjernen. Metoder SD-rotter blev tilfældigt opdelt i en kontrolgruppe, modelgruppe, ECH høj- og lavdosisgrupper og ligustrazin (CXQ) gruppe. Rotter i hver gruppe fik tilsvarende lægemidler eller fysiologisk saltvand intraperitonealt én gang dagligt i 7 dage. På den tredje dag af indgivelsen blev probehylsteret indlejret i hjernestriatum. En time efter den sidste administration blev rottemodellen for fokal cerebral iskæmi (MCAO) lavet. Efter at modellen var lavet, blev der straks foretaget mikrodialyse. Dialysatet blev sprøjtet ind i den højtydende væskekromatografi-elektrokemiske detektor (HPLC-ECD) for at bestemme indholdet af noradrenalin (NE), dopamin (DA), 5-hydroxytryptamin (5-HT), 3 ,4-dihydroxyphenyleddikesyre (DOPAC), homovanillinsyre (HVA), 5-hydroxyindoleddikesyre (HIAA) i den ekstracellulære væske i striatum af hver gruppe. Resultater Sammenlignet med kontrolgruppen steg niveauerne af NE, DA og 5-HT i modelgruppen, og de sure metabolitter DOPAC, HVA og HIAA steg også. Sammenlignet med modelgruppen faldt indholdet af seks stoffer i høj- og lavdosisgrupperne ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) og CXQ-grupperne. Konklusion Den neurobeskyttende effekt af ECH kan være relateret til stigningen af ​​monoamin-neurotransmittere efter cerebral iskæmi.

Cistanche pulver

Nøgleord: Pighuder; Cerebral iskæmi; Striatum; HPLC-ECD; Monoamin neurotransmittere og metabolitter

Echinaceosid(ECH) er en effektiv komponent af phenylethanoid glycosider isoleret og oprenset fraCistanche deserticola, en speciel fabrik i Xinjiang. Undersøgelser har vist, at ECH har neurobeskyttende virkninger såsom antioxidation [1-2], nervebeskyttelse [3-4], anti-aging [5] og forbedring af indlæring og hukommelse [6-8]. Resultaterne af Chen Hong et al. bekræftet, at ECH har en beskyttende effekt på DA-neuroner ved Parkinsons sygdom [9]. Monoamin neurotransmittere er en slags vigtige stoffer, der regulerer kroppens fysiologiske aktiviteter.Indholdet i vævet kan afspejle processerne med neurotransmitterbiosyntese, frigivelse, optagelse og inaktivering [10-11]. På nuværende tidspunkt er der ingen relevant rapport om effekten af ​​ECH på monoamintransmittere i hjernen hos rotter med cerebral iskæmi. I denne undersøgelse blev effekten af ​​ECH på indholdet af monoamin-neurotransmittere i den ekstracellulære væske i striatum hos rotter med cerebral iskæmi undersøgt ved brug af hjernemikrodialyseteknologi, og den mulige mekanisme af ECH på hjernens neurobeskyttelse blev foreløbigt undersøgt.

Cistanche tubulosa ekstrakt pulver

1.Materiale

1.1 Forsøgsdyr

SD-rotter, ♂, kropsmasse 250~300 g (købt fra Xinjiang Experimental Animal Center, licensnummer: 2009-0053).

1.2 Lægemidler og reagenser

ECH er doneret af professor Tu Pengfei, School of Pharmacy, Peking University (renhed over 95%); Noradrenalin (NE), dopamin (DA), 5-hydroxytryptamin (5-HT), 3,4-dihydroxyphenyleddikesyre (DOPAC), homovanillinsyre (HVA)

5-hydroxyindoleddikesyre (HIAA) er Sigma; Tetramethylpyrazinhydrochlorid til injektion (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Zinkphosphatcement (produkt fra Shanghai Medical Instruments Co., Ltd., sammensat af væske og pulver, blandet med tiden); Natrium 1-alkylsulfat (DIKMA); Citronsyrehydrat (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); Trinatriumcitrat (Acros); Dinatriumethylendiamintetraeddikesyre (JTTakerChemicalco); methanol (DIKMA); acetonitril (DIKMA); Cerebral mikrodialyse perfusionsvæske er sammensat natriumchloridinjektion (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Alt brugt vand er gendampvand.

1.3 Instrument

Amerikansk BAS4100 rottehjerne stereotaktisk apparat; CMA/12-sonde og sondehylster; CMA/120 bevidst dyr enhed; CMA/402 mikropumpe; CMA/150 lavtemperatur prøveautomatisk samler. Esa 5600A infusionspumpe; Esa 5600A infusionspumpe; Esa 542 automatisk prøveinjektionsanordning; Esa's CoulArray elektrokemiske detektor; Glasagtig kulstofarbejdselektrode og Ag/AgCl-referenceelektrode; C18-søjle (DIKMA, ODS5 μm, 150 mm × 4,6 mm); CoulArraywin kromatografi arbejdsstation (Esa selskab); Vortex mixer (QL-861 type); Desktop surhedstester (HANNA-211); Desktop højhastighedscentrifuge (XYJ-2 type).

2.Metode

Knytnæveanche supplement nær mig - Imbevise hukommelsen

Klik her for at se produkter fra Cistanche Improve Memory

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 Dyregruppering og administration

Tredive rotter blev tilfældigt opdelt i fem grupper: ① Kontrolgruppe: 1 ml · kg-1 · d-1 normalt saltvand; ② Modelgruppe: normal saltvand 1ml · kg-1 · d-1; ③ Model+ligustrazin (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Model+ECH høj- og lavdosisgrupper (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Alle dyr i hver gruppe blev injiceret intraperitonealt i 7 dage.

2.2 Modelleringsmetode og mikrodialyse

Hver rotte blev begravet med en kanyle på den tredje dag efter administration: rotterne blev bedøvet med 10% chloralhydrat (3,5 ml · kg-1), fikseret på det stereotaktiske hjerneapparat BAS4100, og sondekateter blev implanteret i venstre striatum (koordinater AP:+0.2mm; ML: - 3.0mm; DV: - 3.5mm) vedrørende GeorgePaxinos' "Stereotactic Map of Rat Brain". Efter den sidste administration blev rotterne bedøvet 1 time senere, og rotterne blev lavet til en fokal cerebral iskæmi-model (MCAO-model) under anvendelse af Yang Zanzhang [12]'s forbedrede Longa suturmetode. Fiskesnøret i kontrolgruppen blev kun indsat 10 mm, og de øvrige trin var de samme som i operationsgruppen. Efter modellering, indsæt mikrodialysesonden i tilstanden af ​​bevidst og fri bevægelse, og brug Ringer opløsning til μ Det cerebrale mikrodialysat blev opsamlet ved 4 grader og et rør med dialysat blev opsamlet efter 20 minutter. Efter hvert rør med dialysat er opsamlet, skal det straks opbevares i et - 20 graders køleskab og overføres til et - 70 graders køleskab efter dialyse. Genvindingshastigheden af ​​proben blev målt før brug, som blev brugt til at omdanne koncentrationen af ​​monoamin-neurotransmittere i dialysatet.

hvad gør cistanche tubulosa - Forbedre hukommelsen

2.3 HPLC-ECD-analyse

Mobilfasekonfiguration: den mobile fase indeholder 829 ml 0.15mol · L-1 citronsyre-natriumcitratbuffer pr. liter; 0,1 mol · L-1 dinatrium EDTA 1 ml; Methanol 150ml; Natrium {{10}}alkylsulfat 0,283g. Indstil strømningshastigheden for den mobile fase til 0.7ml · min-1, og kolonneovnens temperatur til 28 grader. Arbejdsspændingen for den elektrokemiske detektor er 200mV, 400mV og 600mV med henholdsvis 2, 3 og 4 kanaler; Forstærkningen er 2nA. Injektionsvolumen er 25 μl. Standardkurven er tegnet med 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1 gradientblandet standardopløsning.

2.4 Statistisk behandling

De eksperimentelle data er udtrykt i x felt ± s, og de gentagne måledata analyseres ved hjælp af SPSS13.0 statistisk software.

Fig. 1-6 viser ændringerne i NE-, DA-, DOPAC-, HIAA-, HVA- og 5-HT-niveauer i den ekstracellulære væske i rottestriatum. Det kan ses af figuren, at efter cerebral iskæmi har monoamin-neurotransmittere i den ekstracellulære væske i striatum en metabolisk lidelse, og indholdet af hver neurotransmitter er steget. Inden for et vist område er stigningen mere tydelig med forlængelsen af ​​iskæmitiden. Ved 90 minutters iskæmi var koncentrationen af ​​DA og NE i den ekstracellulære væske i striatum mere end tre gange niveauet for kontrolgruppen. Niveauerne af NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA og 5-HT i kontrolgruppen faldt fra høj til lav, hvilket kan være relateret til den midlertidige iskæmi i venstre hjerne efter ligering af venstre fælles halspulsåre og skaden forårsaget af indsættelse af sonden. Fra ændringskurven kan ECH og CXQ reducere topkoncentrationen af ​​DA, DOPAC, HIAA, HVA og 5-HT efter cerebral iskæmi, og CXQ og højdosis ECH er mere tydelige. Det nedadgående skift af tidsforløbskurven for hver neurotransmitter indikerer, at ECH kan hæmme stigningen af ​​neurotransmittere og deres metabolitter i hjernen hos rotter med cerebral iskæmi.

                                                                           Fig. 2 Effekt af Echinoside på ekstracellulært niveau af DA i striatum hos rotter

Fig 3 Effekt af Echinoside på ekstracellulært niveau af DOPAC i striatum hos rotter Fig4 Effekt af Echinoside på ekstracellulært niveau af HIVV i striatum hos rotter

Fig5 Effekt af Echinoside på ekstracellulært niveau af HVA i striatum hos rotter Fig6 Effekt af Echinoside på ekstracellulært niveau af 5-HT instriatum hos rotter

4.Diskussion

Superman cistancheurt- Improhar hukommelsen

【Spørg om mere】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Mekanismen for hjerneskade forårsaget af cerebral iskæmi er kompleks. I tilfælde af cerebral iskæmi er monoamin-neurotransmittere i hjernen forstyrrede, og indholdet af NE, DA og 5-HT reduceres betydeligt. Jo mere alvorlig den cerebrale iskæmi er, jo lavere er indholdet af NE, DA og 5-HT i hjernevævet [13]. Den intracerebrale mikrodialysemetode viste, at indholdet af monoamin-neurotransmittere steg i den ekstracellulære væske under cerebral iskæmi, varede i hele den iskæmiske periode og steg yderligere med forlængelsen af ​​iskæmisk tid. De eksperimentelle resultater var i overensstemmelse med rapporten [14].Pighuderer en effektiv komponent af phenylethanoid glycosider isoleret og oprenset fra Cistanche deserticola, en speciel plante i Xinjiang. Det har mange neurobeskyttende virkninger såsom anti-aging, forbedring af indlæring og hukommelse og anti-neuronal apoptose. I denne undersøgelse blev avanceret hjernemikrodialyse kombineret med HPLC-ECD-detektionsteknologi brugt til foreløbigt at udforske effekten afPighuderpå monoamin-neurotransmittere og deres metabolitter i den ekstracellulære væske i striatum hos forsøgsrotter med cerebral iskæmi. Resultaterne viste, at ECH kan reducere stigningen af ​​monoamin-neurotransmittere i den ekstracellulære væske i striatum forårsaget af cerebral iskæmi, og har en bedre effekt på at forbedre skaden af ​​cerebralt iskæmisk væv.