Lægemidler mod nyresygdom: Doxorubicin

for flere oplysninger: Ali.ma@wecistanche.com

Patologisk undersøgelse af nyre hos hanrotter behandlet med doxorubicin i Diyala-provinsen

Mohammed Abed Mahmood AL-Karawi et al 2019

Abstrakt.

Doxorubiciner et anti-neoplastisk lægemiddel, der bruges til behandling af enhver form for tumorlignende bryst- og ovariekarcinom. I denne undersøgelse var målet at identificere de histopatologiske ændringer afdoxorubicinpå dennyreaf hanrotter, der vejer 200-225g, ogdoxorubicininjiceres intraperitonealt. Rotterne blev klassificeret i to hovedgrupper. Den første primære gruppe (n{{0}}) blev underopdelt i seks grupper (hver gruppe=5 rotter). Den første undergruppe gav 0,3 ml fysiologisk normalt saltvand hver 84. time i tre uger. Andre undergrupper blev injiceret i peritoneum i en dosis (1,2,3,4,5) mg/kgdoxorubicinto gange om ugen (hver dosis=5 rotter), hver 84. time i tre uger. Den anden primære gruppe (n=20) blev også underopdelt i fire grupper (hver gruppe= 5rotter). Den første undergruppe gav 0,3 ml fysiologisk normalt saltvand hver 84. time i seks uger. Andre undergrupper blev injiceret intraperitonealt i en dosis (1,2,3)mg/kgdoxorubicinto gange om ugen i seks uger. Anatomi blev udført på hanrotter efter 48 timer efter den sidste injektion. De histopatologiske læsioner var degeneration, trombe, rørformede afstøbninger, overbelastning, cellevakuole af glomerulær tuft og blødning af blodkar. Skadescoren viste en signifikant stigning i glomeruli-skadegraden hos hanrotterne, som injicerede meddoxorubicini bughinden ved en dosis på 5 mg/kg legemsvægt i tre uger, og der er en signifikant stigning i graden af ​​glomerulusskade ved en dosis på 3 mg/kg legemsvægt ved injektion afdoxorubicini seks uger. I denne undersøgelse nævnte vi den histopatologiske effekt afdoxorubicinpå hanrottennyre.

Nøgleord: Doxorubicin, Histopatologi, hanrotter, dosis,nyrevakuole.

Gendan nyrefunktionen: cistanche og Doxorubicin

Klik for at få adgang til nyre

1. Introduktion

Skaden af ​​nyresystemet isærnyrekan føre til høj sygelighed og dødelighed hos dyr, fordinyrebetragter som en vigtig organduo til deres funktioner omfatter afgiftning og udskillelse af lægemidler og toksisk materiale, reguleringsfunktion, eliminering af urin og kreatinin (1). Detnyreblev udsat for lægemidlets toksiske virkning, førte til nyreskade og en anden læsion som nefrose af nefron, interstitiel nefritis og glomerulær nefritis (2).Doxorubicin(også kaldet Adriamycin)Anticancerterapi bruges til behandling af tumorer i forskellige organer og væv, herunder osteosarkom, Hodgkins lymfom, brystkræft, skjoldbruskkirteltumor og neuroblastom(3). Dette stof påvirkede nogle biokemiske aktiviteter afnyre, i tidligere undersøgelser, viste et fald i natrium og en stigning af kalium, urinstof i serum, når det blev injiceret i rotter med forskellige doser afdoxorubicin(4,5). Også en stigning i uorganiske fosfor(5) og repræsenterede proteinurinstof, hypoalbuminæmi og hyperlipidæmi (6,7). En anden undersøgelse, hvor injiceret af rotter meddoxorubicini enkeltdosis viste 5mg/kg legemsvægt øget sekretion af lysosomalt enzym, som overvejer tegn på nyretubuliskade(7.8). En stigning af fibronectin, glycosaminoglycan og kolesterol i plasma blev observeret (6). En anden undersøgelse blev udført på atlantisk hagfish maxima glutinosa til afklaring af initiale patomekanismer, som er ansvarlige for ændring i metabolismen af ​​protein i glomeruli injiceret med Adriamycin (varenavn fordoxorubicin) viste øget proteinopbygning i glomerulære celler og nedsat proteolytisk enzym. Der var også en mangel på RNA-opbygning på grund af manglen på proteinnedbrydning, hvilket fører til en stigning i det totale protein i glomerulus, hvilket forklarer den patologiske mekanisme, der er ansvarlig for stigningen i protein glomerulær og forekomsten af ​​glomerulær hærdning af injicerede dyr med ADR (9). Flere forskere pegede på komplementets rolle i den renale degeneration forårsaget af lægemidlet, da aktiveringen af ​​komplementet spiller en rolle i at reducere skaderne af den glomerulære glomerulosklerose i kroppen og manglen på CD59, som regulerer angrebskomplekset i kroppen. membranen fører til tubulointerstitiel skade(10). Årsagen til glomerulis hårdførhed var stigningen i genekspression af det avancerede glycation slutprodukt i produktet af glomeruli, RAGE kan bidrage til produktskade, når glomerulær stivhed, såsom partiel glomerulær sklerose ved ADR-injektionen (9). På grund af de biokemiske og genetiske virkninger afdoxorubicinpå dennyrer, besluttede vi derfor at studere de histopatologiske læsioner afdoxorubicinpånyrerhos hanrotter.

2. Materiale og metoder

2.1. Kemisk lægemiddel.

I den aktuelle undersøgelse,doxorubicinhydroxy daunorubicin hydrochlorid blev brugt til at behandle visse kræftformer. Det anvendte lægemiddel var i form af injektioner indeholdende 50 mg i 25 ml 0,9 procent saltsyre fremstillet af Ebewe apotek. bhUnterach Østrig Ejendommen blev givet to gange om ugen(10). Doserne blev brugt i forskellige koncentrationer, med doser på 1 mg/kg (11), 2 mg/kg (12), og dosis blev også brugt ved 3 mg/kg (15).

2.2. Forsøgsdyr

Denne undersøgelse blev udført på den irakiske republik, Diyala universitetet, college of veterinary medicine. Alle eksperimentelle, kirurgiske og patologiske procedurer blev udført på Diyala universitet, veterinærskole. Alle hanrotter i en temperatur på {{0}} C, fodret med standard og vand og lyscyklus (12 timer lys og mørke). halvtreds hanrotter, der vejede 200-225g og var 2.5-3.5 måneder gamle, blev opdelt i 2 hovedgrupper. Den første hovedgruppe brugte 30 hanrotter og blev injiceret med 6 doser to gange ugentligt i tre uger og blev opdelt i seks undergrupper af hver gruppe indeholdende 5 rotter; Den første hovedgruppe blev injiceret med 0,3 ml fysiologisk saltvandsopløsning, den anden gruppe blev injiceret meddoxorubicinved 1 mg/kg koncentration blev den tredje gruppe injiceret meddoxorubicinmed en koncentration på 2 mg/kg injicerede den fjerde gruppe det samme lægemiddel med en koncentration på 3 mg/kg. Lægemidlet blev koncentreret til 4 mg/kg og injiceret med 5 mg/kgdoxorubicinDen anden hovedgruppe: 20 hanrotter blev injiceret med 12 doser inden for 6 uger med en hastighed på to gange om ugen. De blev opdelt i fire undergrupper af hver gruppe indeholdende 5 rotter; Den første gruppe blev injiceret med 0,3 ml fysiologisk saltvandsopløsning, den anden gruppe blev injiceret meddoxorubicinved 1 mg/kg to gange ugentligt i 6 uger, blev den tredje gruppe injiceret meddoxorubicinved 2 mg/kg to gange ugentligt i 6 uger blev injiceret med 3 mg/kg to gange ugentligt i 6 uger. Efter 48 timer efter den sidste injektion (15) blev dyret bedøvet med diethylether, og derefter blev thoraxhulen åbnet. Detnyreblev ekstraheret og vasket med normalt fysiologisk saltvand for at fjerne blodet. Prøverne blev tørret med filterpapiret og derefter anbragt i den neutrale formelle opløsning 10 %.

2.3. Histopatologisk undersøgelse

Detnyrerblev konserveret naturlig formalinopløsning (10 procent) i 24 timer, vasket med postevand i 15 minutter og derefter passeret af en serie på 70 procent, 95 procent og 100 procent ethylalkoholer, indlejret i paraffinvoks ved 59 grader i 3 timer og i to faser blev mikrotomen (Leica RM2235) delt prøven med en tykkelse på 4-5 mikrometer, og derefter blev objektglassene farvet med hæmatoxylin og eosinfarvning. Et nyt mikroskop blev brugt til at undersøge objektglassene (17).

2.4.Skade

Antallet af glomerulære skader blev beregnet ud fra en {{0}} glomerulær undersøgelse. I hvert tværsnit blev 40 glomeruli taget fra begyndelsen af ​​cortex til dybden. Tyve prøver blev taget i injicerede dyr med 5 mg/kg i 3 uger i modsætning til kontrolgruppen og dyr injiceret med 3 mg/kg i 6 uger. Sværhedsgraden af ​​læsionen blev beregnet fra O til 4 plus afhængigt af procentdelen af ​​glomeruli-skade, 1 plus (læsion) inkluderer 25 procent beskadigelse af glomeruli, mens 4 plus indikerer 100 procent glomerulær skade. En skadesscore opnås ved at gange sværhedsgraden af ​​skaden (0 til 4 plus ) med procentdelen af ​​glomeruli påvirket af samme grad af skade. Derfor opnås forlængelsen af ​​skaden på hver vævsprøve ved at tilføje dette tal. For eksempel, hvis 5 ud af 40 glomeruli har 1 plus læsion og 10 ud af 40 har 3 plus læsioner, vil skadescore være (1*5/40) plus (3*10/40)* 100=87.5 procent Er procentdelen af ​​glomerulær skade for hver prøve ifølge metoden (19).

3. Resultater

Resultaterne af den histopatologiske undersøgelse afnyrefra kontrolgruppe rotter viste udseendet af den normale struktur afnyrecortex (figur 1). Vævssektionerne afnyrerbehandlet med lægemiddelkoncentrationen på 1 mg/kg blev observeret fremkomsten af ​​overbelastning i blodkarrene, sammentrækning af den glomerulære tuft, udspilning af Buman kapsel, mesangiale celler nekrose, pyknose af glomerulær tuft, degeneration, nekrose af renal tubulær epitel, infiltration af interstitielle inflammatoriske celler, hævelse af tubulær epitel og cyste (figur 2). Ved 2 mg/kg koncentration i 3 uger blev der observeret en ekspansion i Bowmans kapsel og nyretubuli, overbelastning, blødning, mesangial celle nekrose, lobulering af glomeruli tuft, fibrose med eosinofiler og fokal infiltration af inflammatoriske celler (figur 3). Ved behandling med en dosis på 3 mg/kg i 3 uger blev der observeret overbelastning med fortykkelse af karvæggen, nekrose af glomerulus, degeneration af epitelceller i nyretubuli, lobulering og cyste (figur 4). Infiltration af inflammatoriske celler omkring renal glomeruli, blødning, basalmembrannedbrydning af renal glomeruli, forsnævring af nyretubuli og udvidelse af andre, tilstedeværelse af vakuole og blødning (figur 5). Ved behandling med en dosis på 4 mg/kg i 3 uger blev der observeret overbelastning i blodkarrene, interstitiel vævsbetændelse, epitelcellehævelse af nyretubuli og udvidelse af andre tubuli, blødning og tilstedeværelse af tubulære hyalinafstøbninger (figur 6) ). Cyster, vakuole af glomeruli og udspilning af Buman-kapsel (figur 7). Mens injiceret af rotterne med 5 mg/kg afdoxorubicini tre uger viste fedtforandringer i epitelet af nyretubuli (figur 8). Overbelastning, infiltration af inflammatoriske celler, lobuleret (figur 9). Injektionen af ​​hanrotter med Img/kg i 6 uger, virkningerne var mindre alvorlige sammenlignet med den tidligere koncentration, blev observeret overbelastning af blodkar og indsnævring af nogle af nyretubuli (figur 10), og behandlet af dyr med en dosis 2 mg/kg af det samme lægemiddel i 6 uger, noterede alvorlig nekrose og injiceret med en dosis på 3 mg/kg i 6 uger viste segmental glomerulosklerose (figur 11). Blødning mellem nyretubuli og (figur 12), glomerulære hyalinafstøbninger (figur 13) og vakuole af den glomerulære tuft (figur 14).

Skades score:

Resultaterne af nærværende undersøgelse viste en signifikant forskel i sandsynligheden for p<0.05 in="" the="" percentage="" of="" glomerular="" lesions="" in="" animals="" treated="" with="">doxorubicinved en koncentration på 5 mg/kg i tre uger sammenlignet med kontrolgruppen (168,12±5,735), mens i kontrolgruppen var (168,12±11,076) procent. Der var også en signifikant forskel i procentdelen af ​​den glomerulære læsion i behandling af dyr ved en koncentration på 3 mg/kg i seks uger og nåede (133±8.623) sammenlignet med kontrolgruppen, som er (93±14,75) procent (tabel 1).

Tabel 1:repræsentere procentdelen af ​​skadesscore ±af renal glomeruli i en dosis på 5mg/kgdoxorubicini 3 uger og 3 mg/kg i seks uger sammenlignet med kontrolgruppen.

Tallene efterfulgt af forskellige bogstaver viste en signifikant forskel på sandsynlighedsniveauet (s<0.05), according="" to="" the="" duncan="">

Figur 1:Histopatologiske afsnit afnyreviste en normal struktur af epitelceller, der beklædte nyretubuli med en normal struktur af glomeruli (H&E stain.100X).	Figur 2:Histopatologisk snit viste infiltration af inflammatoriske celler, især fagocytter og lymfocytter i det interstitielle væv (INF), cystisk (cyste), degeneration (DE), nekrose (N) og nyretubuliblødning (H), (H&E-farvning.400X).	Figur 3:Histopatologiske afsnit afnyreviste alvorlig nekrose af renalt tubuli epitel (N), mesangiale celler nekrose og atrofi af Boman kapsel (AT), lobulation (LOB) og inflammatorisk celleinfiltration (INF), (H&E farve.400X).

Figur 4:Histopatologiske afsnit afnyreviste trombe i blodkaret (THR), overbelastning (CON), inflammatorisk celleinfiltration (INF) og deletion af blodkarret (DEL), (H&E stain.400X).	Figur 5:Histopatologiske afsnit afnyreviste vakuole(V), blødning(H). lumen indsnævring af nyretubuli(L) og udvidelse(DIL),(H&E-farvning.400X).	Figur 6:Histopatologiske afsnit afnyreviste inflammatorisk celleinfiltration (INF), afstøbninger af hyalin(CAST), blødning(H) og vakuole(V),(H&E-farvning.400X).

Figur 7:Histopatologiske afsnit afnyreviste sklerose(SCL), cyster mellem lobuli (cys), infiltration mellem tubuli(INF) og vakuole(V),(H&E-farvning. 100X).	Figur 8:Histopatologiske afsnit afnyreviste fedtforandringer af endotel nyretubuli, (H&E-farve.400X).	Figur 9:Histopatologiske afsnit afnyreviste blødning(H), hypertrofi af endotel(HYP), lobulerede glomeruli (LOB), øget rum af human kapsel (INC) og infiltration af inflammatoriske celler (H&E-farvning.400X).

Figur 10:Histopatologiske afsnit afnyreviste infiltration af inflammatoriske celler (INF) og blødning (H),(H&E-farvning.400X).	Figur 11:Histopatologiske afsnit afnyreviste sklerose af glomeruli (SCL), (H&E stain.100X).	Figur 12:Histopatologiske afsnit afNyreviste ekspansion af nyretubuli (EXP), vakuoldannelse (V), (H&E-farvning.400X).

Figur 13:Histopatologiske afsnit afnyreviste en afstøbning af hyalin (CAST) og vakuole (V), (H&E-farve.400X).	Figur 14:Histopatologiske afsnit afnyreviste Vacuole i glomeruli, (H&E stain.400X).

4. Diskussion

Resultatet viste, at der forekom vakuoler i den glomerulære tubuli og nyretubuli. Resultaterne var identiske med resultaterne af (20), som indikerede dannelsen af ​​vakuoler i nyretubuli, som indikeret af en undersøgelse at være vakuol i glomerulære(18) . En anden undersøgelse, der injicerede rotter med en enkelt dosis, viste, at de dannede små vakuoler, der steg i størrelse i senere stadier(6). Resultaterne viste, at der var tilstopning, blødning og trombose, og resultaterne var identiske med resultaterne af (21), hvilket indikerer alvorlig overbelastning og blødning blandt nyretubuli, når de blev injiceret med en dosis på 1 mg/kg en gang om ugen i fire uger. Vores resultater viste også forekomsten af ​​fibrose i det tubulære interstitielle væv. Fibrinet er et fibrøst protein, der er til stede i deferent inflammation og tager en eosin-farvning (22). Vores resultater var identiske med resultaterne fra andre undersøgelser, andre undersøgelser observerede et fald i endothelial nitrogenoxidsyntetase, hvilket resulterer i forekomsten af ​​proteinuri, glomerulær sklerose og interstitiel vævsfibrose, når de blev injiceret af rotter meddoxorubicin(23) og nyrefibrose (24). Vores resultater viste degenerative ændringer i glomerulus, glomerulær tuft-krympning, udspilning af Buman-kapslen. indsnævring af nyretubuli og Det er identisk med det, han fandt ved (18). Mens en anden undersøgelse rapporterede, at når injiceret i rotterne meddoxorubicini en dosis på 3 mg/kg er glomerulær tott til stede på et lille sted i Buman-kapslen, hvilket giver glomerulus udseendet af den sæk, der indeholder totteresten. Det bemærkes også, at den proksimale nyretubuli lider af atrofi, som fører til udvidelse af dens lumen (28). En tidligere undersøgelse indikerede let glomerulos sklerose og hyalinafstøbninger og infiltration af inflammatoriske celler i det interstitielle væv,(24) nævnte, at glomerulosklerose var sjælden. Andre rapporterede, at glomerulosklerose blev observeret ni måneder efter injektion med en enkelt dosis og også indikerede alvorlige ændringer i det tubulære interstitielle væv(20), Andre har vist, at epitelcelleskaden på nyretubuli og proteinuri, som i starten består af tubulære afstøbninger, fører til skader på det interstitielle væv, hvor tubuli vil blokere og nedbryde basalmembranen, som fører til tubulær inflammatorisk reaktion (26). Anvendelse af enkeltdosis 10,5 mg/kg af lægemidlet førte til ændringer i væv, herunder interstitiel skade og stivhed af glomerulus og dannelse af hyaline afstøbninger(25). Den rørformede afstøbning blokerer hulrummet af samlende tubuli, og disse afstøbninger forårsager atrofi og afskalning af epitelceller og er omgivet af fagocytter og multinukleære kæmpeceller(27). Vores resultater har vist, at opsamling af lipid i tubulære epitelceller i nyretubuli, at forekomsten af ​​naturligt fedt og lipid i epitelceller, som kan følge af absorption af tubulære celler, kan føre til lipoid nefrose forbundet med diabetes eller hypoxi pga. giftig skade.

5. Referencer

[1] Vaidya, V. Ferguson, M. Bonventre, J. (2008). Biomarkører afspidsnyreskade, Annu, Rev, Pharmacol, Toxicol.48, 463-393.

[2]Pfaller, W. Gstraunthaler, G. (1998). Nefrotoksicitetstest in vitro - hvad vi ved, og hvad vi skal vide, Environ. Sundhedsperspektiv. 106, (2),559.

[3] Brunton LL, chabner BA, Knollmann, BC. "Goodman & Gilman's"(2011). The Pharmacological Basis of Therapeutics"12th.EDT. New York Chicago San Francisco Lissabon London Madrid Mexico City Milano. New Delhi San Juan Seoul Singapore Sydney Toronto, pp:1823,1821.

[4]Aly N. (2012). Reno-beskyttende effektivitet af coenzym Q10 på adriamycin-induceret nefrotoksicitet hos rotter. J App Sci Res, 8(1),589-597.

[5]Abou Seif, HS.(2012). Beskyttende virkning af rutin og hesperidin moddoxorubicin-induceret nefrotoksicitet.Beni-Suef Univ.J App Sci.,1 (2):1-18.

[6] Okuda S, Oh Y, Tsuruda H, Onoyama K, Fujima M. (1986). Adriamycininduceret nefropati som en model for kronisk progressiv glomerulær sygdom.Nyre.Internat.29:502-510.

[7]Venkatesan N, Punithavathi D, Arumugam V.(2000). Curcumin forhindrer Adriamycin nefrotoksicitet hos rotter. Br J Pharmacol., 129 (2):231- 234.

Bemærk: Ovenstående er ikke en fuldstændig referenceliste