Genetiske donorvarianter i interleukin-6- og interleukin-6-receptorer associeres med biopsi-bevist afvisning efter nyretransplantation

edmund.chen@wecistanche.com

Siden den første succesfuldenyretransplantationi 1954,nyretransplantationer blevet den foretrukne behandling for patienter med slutstadietnyre sygdom(ESKD) 1 . Ud over de kirurgiske fremskridt i udførelsennyretransplantation, var det tilsætning af immunsuppressive lægemidler efter transplantation, der forbedrede overlevelsen afnyreallografterfra måneder til år. Transplantationsmodtagere bliver dog uvægerligt følsomme over for deres transplantation, hvilket fører til dårlig langtidsoverlevelse afnyreallografter2,3. Mens konventionelle immunsuppressiva er effektive til at ophæve akutte immunresponser, adresserer de kun delvist allosensibilisering - og tillader således humoral immunitet at danne og fremkalde langvarig allograftsvigt. For at forhindre afvisning afnyretransplantationerdet er derfor nødvendigt at udvikle nye terapier, der kan hæmme dannelsen af ​​allosensibilisering 4 . Gennem de sidste 50 års videnskabelige indsats er det blevet fastslået, at akut og kronisk allotransplantatafstødning udløses af et komplekst og dynamisk sæt af alloimmune reaktioner. Immunmodulerende proteiner kendt som cytokiner er særligt vigtige til at regulere både de pro- og antiinflammatoriske arme af immunitet. Blandt alle cytokin-superfamilier viser interleukin 6 (IL-6) og dets familiemedlemmer uden tvivl den største grad af cytokinfunktionel pleiotropi (multiple biologiske handlinger) og cytokinredundans (delte biologiske handlinger), med fysiologiske og patologiske roller, der spænder fra B og T-celledifferentiering og akut-fase immunitet, til hæmatopoiese og onkogenese, vævs- og knogleomdannelse og regenerering og endda tidlig udvikling af neuronale og kardiovaskulære systemer 5-8. Som sådan er afvigende IL-6-aktivitet impliceret i sygdomme, herunder systemisk inflammatorisk respons-syndrom, kroniske immunforstyrrelser såsom crescentic glomerulonephritis, transplantatafstødning og graft-versus-host-sygdom, reumatiske sygdomme, herunder rheumatoid arthritis og juvenil idiopatisk arthritis, og lymfoproliferative tilstande som Castlemans sygdom 4,

CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE/NYREFUKTION

Nye data har identificeret en nøglerolle for IL-6 ved afvisning efternyretransplantation4 . For at værdsætte den rolle, som IL-6 signalerer indrenal allograftafvisning, er det værdifuldt først at kontekstualisere signaleringskaskaden, da IL-6 kan signalere gennem tre separate veje og beordre forskellige effekter afhængigt af konteksten og den vej, der er i spil (fig. 1) 5,6,10. Den første signaleringsmåde er kendt som klassisk signalering (fig. 1A), hvor IL-6 binder til membranbundet IL-6-receptor (mIL-6R) efterfulgt af kompleksdannelse med membranbundet glycoprotein 130 (gp130) for at udløse nedstrøms signaltransduktion og genekspression. Trans-signalering (fig. 1B) sker i stedet, når IL-6R spaltes fra cellemembranen 10, og det frigivne opløselige IL-6R (sIL-6R) fanger IL{{ 18}}, danner et kompleks med membranbundet gp130 og phosphorylerer intracellulære signaltransducere. Da membranbundet gp130 udtrykkes allestedsnærværende, men mIL-6R ikke er det, kan trans-signalering lette IL-6-responsiviteten i celler, der normalt ikke ville reagere på IL-6 gennem IL{{26} }/sIL-6R-komplekser, der udvider de fysiologiske og patologiske funktioner af IL-6 7 . Det er vigtigt, at en opløselig form af gp130 naturligt eksisterer i cirkulation med en lignende affinitet for IL-6/sIL-6R-komplekset som membranbundet gp130 og kan fungere som en specifik inhibitor af trans-signalvejen ( Fig. IB) 11. Fig. Den tredje og sidste form for IL-6-signalering er transpræsentation, hvor mIL-6R på én celle fanger IL-6 og binder til membranbundet gp130 på en anden celle (fig. 1C). I alle disse signaleringsmåder er phosphorylering af sekundære budbringere af især Janus kinase (JAK) og signaltransducer og activator of transcription (STAT) familier afgørende for at udløse IL-6-afhængige effekter 9,1

Her brugte vi human genetik til at undersøge, om blokade af IL-6/IL-6R-interaktion kan give terapeutisk fordel inyretransplantation. De IL-6-relaterede enkeltnukleotidpolymorfismer (SNP'er), vi har undersøgt her, er A > C polymorfi i IL6R (rs2228145; Fig. 1D) og G > C polymorfi i IL6 (rs1800795; Fig. 1E). IL6R SNP forårsager en missense polymorfi, der fører til øgede koncentrationer af sIL-6R i kredsløbet (hæmmer trans-signalvejen), mens IL6 SNP forårsager forhøjede niveauer af IL-6-ekspression på grund af dets placering i en promotorregion (fremme IL-6-signalering via alle tre veje) 12 . Andre undersøgelser har tidligere vurderet rollen af ​​denne IL6-varianter inyretransplantation,finde sammenhænge mellem IL6-varianter og transplantationsresultat 13,14. Disse undersøgelser er dog for det meste retrospektive, begrænsede i deres statistiske metoder, underbelastede og derfor inkonklusive på grund af det begrænsede antal patientprøver inkluderet i analyserne. I denne undersøgelse giver vi et afgørende svar på virkningen af ​​disse SNP'er i nyretransplantation.

Nøgleord:nyretransplantation; nyre sygdom; nyre-allotransplantater; nyre; nyresygdom

Resultater

Determinanter for biopsi-bevist afstødning efter nyretransplantation.I alt 1271nyretransplantationdonor-recipient-par blev inkluderet i denne undersøgelse med donor- og recipientkarakteristikaene anført i tabel. Den gennemsnitlige opfølgning efter transplantation var 5,2 år ± 5.0 med en maksimal opfølgningsperiode på 16,7 år. Under opfølgningen udviklede 33,8 procent af modtagerne biopsi-bevist afvisning. I det første år udviklede 390 modtagere akut biopsi-bevist afvisning, hvorimod 40 modtagere fik biopsi-bevist afvisning derefter. Af alle de vurderede karakteristika var følgende signifikant forbundet med biopsi-bevist afvisning (tabel 1); modtagerens alder, modtagerens køn, varm iskæmitid, det samlede antal HLA-mismatches og forekomsten af ​​forsinket graftfunktion (DGF).

En almindelig genetisk variant i interleukin-6-receptoren beskytter mod renal allotransplantatafstødning.For at identificere relevante genetiske biomarkører i forbindelse med afvisning, undersøgte vi, om Asp358Ala-varianten i IL6R (rs2228145 A > C, tidligere rs8192284) var forbundet med biopsi-bevist afvisning. De observerede genotypefrekvenser hos modtagere (n=1270; AA, 34,3 procent; AC, 51,4 procent; CC, 14,2 procent) og donorer (n=1269; AA, 35,6 procent; AC, 5{{23 }},6 procent; CC, 13,6 procent) var sammenlignelige (P=0.75). Alligevel var frekvenserne af IL6R polymorfi hos både modtagere og donorer signifikant højere end rapporteret af 1000 genomprojektet (P < 0,0001),="" men="" ikke="" sammenlignet="" med="" deres="" europæisk="" kohorte="" (p="0.09)" 15="" .="" kaplan-meier="" overlevelsesanalyser="" viste,="" at="" il6r="" polymorfi="" hos="" donoren="" var="" signifikant="" forbundet="" med="" en="" reduceret="" risiko="" for="" akut="" afstødning="" under="" opfølgning="" (fig.="" 2a;="" log-rang="" p="0.003)." efter="" den="" fuldstændige="" opfølgning="" var="" forekomsten="" af="" ​​biopsi-bevist="" afvisning="" henholdsvis="" 38,9="" procent="" i="" reference-aa-genotypegruppen,="" 32,8="" procent="" i="" den="" heterozygote="" ac-genotypegruppe="" og="" 24,9="" procent="" i="" den="" homozygote="" cc-genotypegruppe.="" i="" univariat="" analyse="" var="" il6r="" snp="" i="" donoren="" forbundet="" med="" et="" hazard="" ratio="" på="" 0,78="" pr.="" c-allel="" (95="" procent="" -ci="" 0,67-0,90;="" p="0.001)" for="" biopsi-bevist="" afvisning.="" kaplan-meier-overlevelsesanalyser="" for="" il6r-polymorfi="" hos="" donoren="" blev="" re-estimeret="" for="" patienter="" transplanteret="" i="" 1990'erne="" og="" 2000'erne,="" da="" immunsuppression="" har="" udviklet="" sig="" gennem="" tiden,="" og="" dette="" kan="" påvirke="" risikoen="" for="" afstødning.="" i="" disse="" undergrupper="" blev="" betydningen="" opretholdt="" hos="" patienter="" transplanteret="" i="" 1990'erne="" (figur="" s1;="" p="0.016)," mens="">

Figur 1. Illustration af IL-6-signalvejene og undersøgte IL-6--relaterede SNP'er. IL-6-signalering kan forekomme på tre forskellige måder. (Til skematiske formål er kun én af hver IL-6-receptor og gp130-molekyle vist. (A) Klassisk IL-6-signalering finder sted, når IL-6 interagerer direkte med membranbundet IL -6R (mIL-6R) og membranbundet gp130 (mgp130) for at phosphorylere intracytoplasmatiske, gp130-specifikke sekundære budbringere. (B) IL-6 trans-signalering forekommer i stedet, når solubiliseret IL-6R (sIL-6R) fanger IL-6 og danner et kompleks med mgp130 for at udfælde intracytoplasmatiske sekundære signaler. Navnlig kan denne signaleringsmåde hæmmes af solubiliseret gp130 (sgp130), som kun har affinitet for IL-6/sIL-6R-komplekset og neutraliserer det ved at forhindre dets binding til mgp130. (C) Endelig finder IL-6 transpræsentation sted, når en sekundær celle, der bærer mIL-6R, fanger IL-6 og præsenterer den for mgp130 på en målcelle for at anspore intracytoplasmatiske sekundære signaler i målcelle. At værdsætte den potentielle rolle, IL-6-relaterede SNP'er spiller inyretransplantationmodtagere og donortransplantationnyrer,vi vurderede sammenhængen mellem transplantationsoverlevelsesresultater og (D) henholdsvis IL6R SNP rs2228145 A > C og (E) IL6 SNP rs1800795 G > C. IL6R SNP forårsager en missense mutation i IL-6R, mens IL6 SNP er i promotorregionen og forårsager en intronisk variant.

tendens blev set hos patienter transplanteret i 2000'erne (figur S1; P=0.067). Ikke desto mindre, i overensstemmelse med vores tidligere resultater, forblev C-allelen af ​​IL6R SNP i donoren beskyttende mod biopsi-bevist afvisning. Hos modtagerne afslørede Kaplan-Meier overlevelsesanalyser ingen sammenhænge mellem IL6R SNP og afvisning under opfølgning (fig. 2B; log-rang P=0.15). Undergruppeanalyse for modtagerens køn eller donortype ændrede ikke disse resultater. For at vurdere om donor-recipient mismatch for IL6R SNP øger risikoen for biopsi-bevist afvisning,nyretransplantationpar blev opdelt i fire grupper i henhold til tilstedeværelsen eller fraværet af C-allelen i donoren og modtageren. Selvom Kaplan-Meier overlevelsesanalyser afslørede en signifikant forskel i transplantatoverlevelse blandt de fire grupper, forblev C-allelen af ​​IL6R SNP i donoren forbundet med en lavere risiko for BPAR (figur S2, P=0.004) . Effekten af ​​C-allelen i donoren var dog større hos modtagere, som ikke selv besad denne allel.

En multivariabel analyse blev udført for at justere for potentielle konfoundere (tabel 2), herunder donorkarakteristika (model 2), recipientkarakteristika (model 3) og transplantationsvariabler (model 4). I Cox-regressionsanalyse forblev IL6R SNP i donoren signifikant forbundet med biopsi-bevist afvisning uafhængigt af potentielle konfoundere. Endelig udførte vi en multivariabel analyse med en trinvis fremadgående udvælgelsesprocedure ved hjælp af alle variabler forbundet med afvisning i univariabel analyse (tabel 3). I den endelige model blev IL6R SNP i donoren, modtagerens alder og køn, det samlede antal HLA mismatches og DGF inkluderet. Efter justering var IL6R SNP i donoren forbundet med afvisning med et hazard ratio på 0.73 pr. C-allel (95 procent -CI 0.62–0.{{ 17}}, P < 0.001).="" alt="" i="" alt="" viser="" disse="" resultater,="" at="" en="" almindelig="" funktionel="" variant="" i="" il6r-genet="" hos="" donoren="" associerer="" med="" en="" lavere="" forekomst="" af="" biopsi-påvist="" akut="" afstødning="">nyretransplantation.

En almindelig genetisk variant i interleukin-6 er en risikofaktor for renal allotransplantatafstødning.Dernæst undersøgte vi, om IL6 SNP i position-174 i promotoren (rs1800795 G > C) påvirker forekomsten af ​​biopsi-

Figur 3. Kaplan–Meier kurver for afstødningsfri overlevelse afnyreallografteri henhold til tilstedeværelsen af ​​den genetiske interleukin-6 variant i donoren eller modtageren. Kumulativ afvisningsfri overlevelse afnyreallografteri henhold til tilstedeværelsen af ​​interleukin-6 polymorfi (IL6) i position-174 i promotoren (rs1800795 G > C) i (A) donoren og (B) modtageren. En undergruppeanalyse blev udført for donorsex, og kumulativ afstødningsfri overlevelse blev vist i henhold til tilstedeværelsen af ​​IL6 SNP i (C) mandlige donorer og (D) kvindelige donorer. Log-rank test blev brugt til at sammenligne forekomsten af ​​biopsi-bevist afvisning mellem grupperne.

Figur 4. Venn-diagram af IL6- og IL6R-genetiske status for donoren, modtageren og parrene. 1271 donor- modtagernyretransplantationpar blev analyseret for tilstedeværelsen af ​​en polymorfi i interleukin-6 (IL6) kl.position-174 i promotoren (rs1800795 G > C) og Asp358Ala-variant i IL-6-receptor (IL6R, rs2228145 A > C, tidligere rs8192284). Venn-diagrammet viser antallet afnyretransplantationpar baseret på deres (A) IL6R-genotype eller (B) IL6-genotype. Derudover er den kombinerede genotype af IL6 og IL6R afbildet i (C) donoren og (D) modtageren.bevist afvisning. De observerede genotypefrekvenser hos modtagerne (n {{0}}: GG, 37,8 procent; GC, 47,0 procent; CC, 14,9 procent) og donorer (n=1260: GG, 33,1 procent; AC , 49,3 procent; CC, 16,8 procent) afveg signifikant (P=0.049). Mere specifikt syntes C-allelen af ​​IL6 SNP at være mere udbredt inyredonorer. Hyppighederne af IL6 SNP hos både modtagere og donorer afveg ikke signifikant fra dem, der blev rapporteret af den europæiske kohorte af 1000 genom-projektet (henholdsvis P=0.09 og P=0.19) 15 . Kaplan-Meier-analyse viste, at hverken IL6 SNP i donoren påvirkede risikoen for afstødning (fig. 3A, P=0.58) eller IL6 SNP i modtageren (fig. 3B, P=0 .70). I yderligere analyse var IL6 SNP i modtageren heller ikke bundet til risikoen for biopsi-bevist afvisning inden for det første år (P=0.19). Desuden vurderede vi, om donor-recipient-mismatch for IL6-polymorfismen påvirkede risikoen for BPAR.Nyretransplantationpar blev opdelt i fire grupper i henhold til tilstedeværelsen eller fraværet af C-allelen af ​​IL6 SNP i donoren og modtageren. Kaplan-Meier overlevelsesanalyser viste ingen signifikant forskel i afstødningsfri overlevelse afnyreallografterblandt de fire grupper (figur S2; P=0.24). Vi udførte derefter en undergruppeanalyse for sex, da sex er kendt for at påvirke immunitet,nyresygdomsamt transplantationsresultat 16,17. Kaplan-Meier-kurver afslørede en signifikant sammenhæng mellem IL6 SNP og afvisning hos mandlige donorer (fig. 3C, P=0.015). Efter den fuldstændige opfølgning var forekomsten af ​​biopsi-bevist afvisning henholdsvis 27,1 procent i reference-GG-genotypegruppen, 37,3 procent i den heterozygote GC-genotypegruppe og 40,7 procent i den homozygote CC-genotypegruppe. Der blev ikke set nogen sammenhæng mellem IL6 SNP og afvisning hos kvindelige donorer (fig. 3D, P=0.33).Univariat analyse afslørede, at IL6 SNP hos mandlige donorer var forbundet med et hazard ratio på 1,31 pr. C-allel (95 procent -CI 1,08-1,58; P=0.006) for biopsi-bevist afvisning. Multivariabel analyse blev udført for at justere for potentielle konfoundere (tabel 2), herunder donorkarakteristika (model 2), modtagerkarakteristika

Figur 5. Fareforhold for IL-6/IL-6R genetisk risikoscore blandt undergrupper. Skovplot af delanalyser af den genetiske risikoscore IL-6/IL-6R, der viser, at fareforholdene for biopsi-bevist afvisning varkonsekvent i forskellige undergrupper. Den eneste undtagelse var donorens oprindelsenyreallografter.Forbindelsen mellem den genetiske risikoscore for IL-6/IL-6R og afvisning blev ikke set inyretransplantationerfra levende donorer. Der blev ikke set nogen signifikant interaktion mellem den genetiske risikoscore for IL-6/IL-6R og de forskellige kliniske variabler i undergrupperne. (model 3) og transplantationsvariable (model 4). I Cox-regressionsanalyse forblev IL6 SNP hos mandlige donorer signifikant forbundet med biopsi-bevist afvisning uafhængigt af potentielle konfoundere. Det ser således ud til, at en funktionel variant i IL6 hos mandlige donorer er forbundet med en højere forekomst af biopsi-påvist afstødning efternyretransplantation.

Forudsigelse af biopsi-bevist afvisning.Den kombinerede tilstedeværelse af IL6 og IL6R SNP var almindelig (fig. 4A,B), såvel som tilstedeværelsen af ​​den samme SNP i donoren og modtageren af ​​et transplantatpar (fig. 4C,D). Vi spekulerede derfor i, at vurdering af den kombinerede tilstedeværelse af flere polymorfismer i en genetisk risikoscore i donor-modtager-parrene kunne give mere information end at undersøge polymorfismerne individuelt. For at udforske kombinationen af ​​IL6 og IL6R SNP'er som prædiktorer for biopsi-bevist afvisning, skabte vi en genetisk risikoscore af de to varianter hos både donorer og modtagere. Vægt blev tilføjet til hver SNP i henhold til deres hazard ratio, hvilket skabte en negativ score for beskyttende polymorfismer og en positiv score for farlige. Samlet set indikerer en genetisk risikoscore over nul tilstedeværelsen af ​​mere farlige SNP'er i en donor-recipient

par og genetiske risikoscore under nul indikerer tilstedeværelsen af ​​mere beskyttende SNP'er i et donor-modtager-par. For at vurdere de kliniske anvendelser af den genetiske risikoscore for IL-6/IL-6R undersøgte vi den prædiktive værdi af denne genetiske profilering mere detaljeret. Den genetiske risikoscore var signifikant forbundet med biopsi-bevist afvisning i både den rå model (HR, 1,24; 95 procent -CI 1,12-1,36; P < 0.001="" pr.="" sd-stigning)="" og="" efter="" justering="" for="" donorkarakteristika,="" modtagerkarakteristika="" og="" transplantationsvariabler="" (tabel="">

Desuden var hazard ratio for IL{0}}/IL-6R genetisk risikoscore konsistent i undergruppeanalyser og forblev signifikant (fig. 5), undtagen hos levende donorer efter stratificering for donor type (P=0.22). Konfidensintervallerne for alle undergrupper viste væsentligt overlap med det overordnede hazard ratio øverst, hvilket viser konsistensen af ​​resultaterne på tværs af undergrupper. Dernæst testede vi, om IL-6/IL-6R genetisk risikoscore var en bedre forudsigelse for afvisning end IL6R SNP i donoren ved multivariabel regression med en trinvis fremadrettet selektion blev udført (tabel 5). I den endelige model blev IL{{10}}/IL-6R genetisk risikoscore inkluderet, mens IL6R SNP i donoren ikke var det. Efter justering var den genetiske risikoscore hos donoren forbundet med biopsi-bevist afvisning med et hazard ratio på 1,27 pr. SD-stigning (fig. 6, 95 procent -CI 1,14-1,42; P < 0.{{34="" }}01).="" ydeevnen="" af="" ​​den="" genetiske="" risikoscore="" for="" il-6/il-6r="" for="" forudsigelse="" af="" afvisning="" blev="" også="" vurderet="" (tabel="" 6).="" alene="" den="" genetiske="" risikoscore="" havde="" en="" harrells="" c="" på="" 0.57="" (95="" procent="" -ci="" 0.54–0.60).="" ydermere,="" når="" tilføjet="" til="" en="" model="" af="" il6r="" snp="" i="" donoren="" (c-statistik,="" 0.51;="" 95="" procent="" -ci="" 0.488–0.539),="" il-6/il-6="" r="" genetisk="" risikoscore="" øgede="" harrells="" c-værdier="" signifikant="" (c-statistisk="" stigning,="" 0,054;="" 95="" procent="" -ci="" 0,023-0,086;="" p="0.001)." dernæst="" blev="" yderligere="" variable="" inkluderet,="" og="" den="" diskriminerende="" nøjagtighed="" til="" at="" forudsige="" grafttab="" af="" modellen="" blev="" forbedret.="" harrell's="" c="" for="" modellerne="" med="" donoregenskaberne="" og="" transplantationsvariablerne="" forbedredes="" signifikant="" med="" tilføjelsen="" af="" ​​den="" genetiske="" risikoscore,="" mens="" der="" kun="" blev="" set="" en="" tendens="" i="" modellen="" med="" modtagerkarakteristika.="" derudover="" forbedrede="" den="" genetiske="" risikoscore="" for="" il-6/il-6r="" signifikant="" den="" forudsigelige="" værdi="" af="" modellerne="" ifølge="" det="" integrerede="" diskriminationsforbedringsindeks="" (idi).="" selv="" i="" de="" fuldt="" justerede="" modeller="" var="" idi-værdien=""> 1 procent, hvilket indikerer, at IL-6/IL-6R væsentligt forbedrede risikoforudsigelsen for afstødning markant ud over de nuværende kliniske markører.

Diskussion

Afvisning efternyretransplantationforbliver en vigtig årsag til allograftsvigt, der i høj grad påvirker morbiditet 18-20. Brug af nye terapier til at reducere allosensibilisering er afgørende, men udvikling af nye lægemidler tilnyretransplantation er begrænset 21 , hvilket nødvendiggør genanvendelse af eksisterende antiinflammatoriske lægemidler, der er godkendt til andre indikationer. Blandt disse er IL-6-blokerende terapier, som allerede er godkendt til behandling af autoimmune sygdomme 22 . Human genetik giver mulighed for målvalidering. Desuden er lægemiddelmål, der er informeret af human genetisk bevis, mere end dobbelt så sandsynligt, at de fører til godkendte terapier 23,24. Hovedresultatet af vores undersøgelse er en signifikant sammenhæng mellem en almindelig funktionel IL6 og IL6R polymorfismer hos donoren og risikoen for biopsi-bevist afstødning efternyretransplantation.I forlængelse af disse fund blev en genetisk risikoscore baseret på både SNP'er i donoren og modtageren vist at være en væsentlig determinant for biopsi-bevist afvisning. Desuden forbedrede denne IL-6/IL-6R genetiske risikoscore betydeligt risikoforudsigelsen for afvisning ud over de nuværende kliniske risikofaktorer. Som konklusion giver vores undersøgelse genetisk bevis for den potentielle effektivitet af at målrette IL-6-vejen inyretransplantationog tilskynder til undersøgelse af IL-6-receptorhæmmere inyredonorer i randomiserede kontrollerede forsøg.

Så vidt vi ved, er vores undersøgelse den første, der viser, at IL6R-polymorfismer hos donoren påvirker risikoen for afstødning efternyretransplantation. For at opsummere fandt vi, at for hver kopi af C-allelen i donoren faldt den relative risiko for biopsi-påvist akut afstødning med 27 procent (90 procent -CI 14-38 procent). I overensstemmelse med vores resultater er den samme allel (rs2228145-C) blevet forbundet med nedsatte risici for reumatoid arthritis og koronar hjertesygdom 25,26. En nylig undersøgelse foretaget af Bovijn og kolleger viste, at denne IL6R-variant også var forbundet med en lavere risiko for SARS-CoV-2-infektion samt en lavere risiko for hospitalsindlæggelse for COVID-19 27. Undersøgelser af de funktionelle konsekvenser af denne variant har hjulpet med at forstå de molekylære mekanismer, hvorigennem denne IL6R-genotype beskytter mod et bredt spektrum af sygdomme 28-30. Denne ikke-synonyme polymorfi tegner sig for over 50 procent af den totale varians i sIL-6R-niveauer, og hver kopi af C-allelen øger plasmaniveauerne af sIL- 6R. Selvom disse effekter af denne IL6R-variant på sIL-6R-niveauer kan virke modstridende, viste yderligere undersøgelser, at C-allelen samtidig reducerer membranbundet IL-6R på monocytter og CD4 plus T-celler (op til 28 procent reduktion pr. C-allel) 30 . Det er vigtigt, at reduceret overfladeekspression af IL-6R på leukocytter resulterede i nedsat IL-6-modtagelighed, som observeret ved en reduktion i phosphorylering af nøgletranskriptionsfaktorerne STAT1 og STAT3 efter stimulering med IL-6 30 . Yderligere in vivo-evidens for de antiinflammatoriske virkninger af denne IL6R-variant er blevet påvist af sammenhængen med lavere niveauer af C-reaktivt protein, fibrinogen, IL-8 og TNF- i forskellige undersøgelser 26-28,31. Vores analyse viser overbevisende, at IL6R-varianten er forbundet med en lavere risiko forrenal allograftafvisning. Vi postulerer, at dette fald i afstødningshastighed skyldes amplifikationen af ​​sIL-6R kombineret med cirkulerende, endogent, opløseligt gp130, der fungerer som en buffer til at neutralisere IL-6 (fig. 1B) og derved undertrykke inflammation samt aftagende allosensibilisering, hvilket uvægerligt mindsker risikoen for allotransplantatafstødning.

CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE/NYRESVIGT

Indvirkningen af ​​IL6 ~ 174G/C polymorfi (rs1800795) på risikoen for afstødning blandt transplantationspatienter er tidligere blevet undersøgt af flere undersøgelser 13,32-36. En nylig metanalyse af syv undersøgelser, inklusive 369 tilfælde og 679 kontroller, konkluderede, at modtagerens IL6-genotype ikke var signifikant forbundet med afvisning, hvorimod en tendens blev set for donor-IL6-genotyper 14 . I vores transplantationskohorte på 1271 patienter fandt vi heller ikke en sådan sammenhæng med modtagerens IL6-genotype. Men da vi udførte en undergruppeanalyse for donorens køn, observerede vi en signifikant sammenhæng mellem IL6 SNP og afvisning hos mandlige donorer. Denne kønsrelaterede forskel kan også forklare de modstridende resultater fra tidligere undersøgelser. I lighed med vores observationer har andre rapporteret en klar kønsdimorfi i forbindelse med denne IL6-polymorfi med sårbarheden over for sygdomme 37-39. Samlet set var associationerne med denne IL6-variant stærkere og overvejende fundet hos mænd. Vores undersøgelse fremhæver derfor, at køn bør tages i betragtning ved transplantation såvel som for cytokin-målrettede terapier. Desuden er C-allelen af ​​denne IL6 SNP i overensstemmelse med vores resultater også blevet forbundet med øgede risici for leddegigt og kardiovaskulær sygdom i de seneste metaanalyser 40-42. For rs1800795 blev G-allelen oprindeligt sagt at øge IL-6-niveauer, men nyligt arbejde afslørede, at C-allelen af ​​denne SNP fører til højere IL-6-ekspression i fibroblaster, men ikke i leukocytter 43 . Brullet al. fandt forskellige kinetiske profiler for IL-6-stigning efter operation baseret på IL6-genotyper, hvilket kunne forklare tidligere modstridende resultater 44 . Ikke desto mindre var den samlede stigning i IL-6 mere dybtgående hos CC-homozygote. Yderligere in vivo-evidens for de pro-inflammatoriske virkninger af C-allelen er påvist af sammenhængen med højere serumniveauer af IL-6, C-reaktivt protein og fibrinogen i flere undersøgelser 45-47. Alt i alt føjer vores undersøgelse til en voksende mængde af beviser, der forbinder lokal produktion af IL-6 med allosensibilisering af modtagere tilnyreallografter48,49 

Tocilizumab, et humaniseret monoklonalt antistof rettet mod IL-6R, er blevet vurderet til behandling af akut afstødning, kronisk ABMR og transplantationsglomerulopati efternyretransplantation50-52. Indledningsvis blev der udført et fase I/II forsøg med 10 patienter førnyretransplantationsom ikke reagerede på desensibilisering med intravenøs Ig og rituximab 50 . Tocilizumab, kombineret med intravenøs Ig, førte til en signifikant reduktion i DSA-niveauer og virkede sikkert. Fem patienter blev transplanteret, og seks måneders protokolbiopsier viste ingen akut afstødning eller transplantationsglomerulopati. Dernæst blev der udført et åbent enkeltcenterforsøg med 36 patienter med kronisk ABMR, som ikke reagerede på intravenøs Ig og rituximab 51 . Patient ogrenal allograftoverlevelse var henholdsvis 91 procent og 80 procent efter 6 år, og dette viste sig at være overlegent i forhold til historiske kontroller. Endvidere stabilisering afnyrefunktionblev set efter 2 år. Endelig blev tocilizumab undersøgt til behandling af akut afstødning i et observationsstudie af 7nyretransplantationmodtagere 52 .Nyrefunktionstabiliseret eller forbedret hos alle patienter, men én patient havde en potentiel overfølsomhedsreaktion, og en anden patient udviklede cytomegalovirus-øsofagitis. Et multicenter randomiseret kontrolforsøg er i øjeblikket i gang 53 . I betragtning af at IL-6-hæmmere allerede bliver testet i kliniske forsøg, hvad er så rollen for genetiske undersøgelser her? Resultaterne fra vores undersøgelse giver vigtige overvejelser til udformningen af ​​disse kliniske forsøg ved at identificere følgende nøgleproblemer for målretning mod IL-6 inyretransplantation: (1) Virkningssted; (2) Kønsforskelle; og (3) Patientvalg. Vi fandt, at genetiske polymorfier af IL-6-signalvejen hos donorer, men ikke modtagere, var forbundet med risikoen for biopsi-bevist afstødning efternyretransplantation. Disse resultater indikerer, at ikke cirkulerende IL-6 i modtageren, men lokalt IL-6R-udtryk og IL-6-produktion af donornyreer nøgledrivere for alloimmunitet til nyretransplantationen. Dette tyder potentielt på, at terapier, der sigter mod at blokere IL-6/IL-6R-interaktioner, bør fokusere på donorennyresom handlingssted. Endelig konstruerede vi i denne undersøgelse en IL-6/IL-6R genetisk risikoscore baseret på to SNP'er hos donoren og modtageren. Fra et prognostisk perspektiv kunne en genetisk risikoscore være af interesse for at identificere patienter med risiko for allotransplantatafstødning. Desuden kunne en genetisk risikoscore være interessant at identificerenyretransplantationpar, der ville have gavn af anti-IL-6 behandling. Men i betragtning af den diskriminerende ydeevne af vores forudsigelsesmodel, bør yderligere faktorer (såsom IL6 og IL6R haplotyper) tilføjes for at øge den prædiktive ydeevne, før den kan bruges i klinisk praksis.

CISTANCHE VIL FORBEDRE NYRE-/NYRESYGDOMME

Flere begrænsninger af vores undersøgelse berettiger til overvejelse. For det første forventes de sammenhænge, ​​der er fundet i denne undersøgelse, at være årsagssammenhænge. Men da vores undersøgelse er prospektiv, men observationel karakter, kan den ikke bevises af vores resultater. For det andet udførte vi kun en analyse af individuelle funktionelle SNP'er og ikke for IL6- og IL6R-haplotyper. For det tredje blev målinger af IL-6 og sIL-6R ikke udført i vores kohorte på grund af manglen på serumprøver, og genotyper kunne derfor ikke korreleres med systemiske niveauer. For det fjerde kunne vi ikke undersøge, om sammenhængen mellem IL6- og IL6R-varianterne afveg for TCR eller ABMR på grund af manglen på et standardiseret assay gennem årene til bestemmelse af DSA. Endelig blev Banff 2007-klassifikationen brugt til de histopatologiske diagnoser, som er en ældre version. Banff-klassifikationen har gennemgået adskillige revisioner siden 2007, overvejende relateret til kriterierne for ABMR. Introduktionen af ​​C4d-negativ ABMR i Banff 2013-klassifikationen har væsentligt påvirket antallet af ABMR-diagnoser generelt 54 . Derfor mangler vores kohorte C4d-negative tilfælde af ABMR. På den anden side er de største styrker ved vores undersøgelse den store stikprøvestørrelse, robust statistisk analyse (inkl. undergruppeanalyse) og det hårde og klinisk relevante endepunkt, nemlig biopsi-bevist afvisning. Som konklusion fandt vi, at IL6- og IL6R-varianter hos donoren associerer med risikoen for at udvikle biopsi-påvist afstødning efternyretransplantation.Disse resultater antyder potentiel effektivitet af at målrette IL-6-signalering indnyretransplantation. Igangværende, randomiserede kontrollerede forsøg med IL-6- eller IL-6R-hæmmere er nødvendige for at identificere de bedste indstillinger, herunder tidspunktet for intervention og patientvalg, hvor disse midler kan være effektive.