Sammenligning af indhold af phenylethanolglycosider i to forskellige værtscistancher Herba efter forskellige tørrebehandlinger

De sammenlignede indholdet afphenylethanolglycosideri to forskellige værterCistanchesHerbaefter forskelligetørre behandlingerGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11(Agronomy College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Kina)2(State Key Laboratory of Aridland Crop Science, Lanzhou 730070, Kina)

AbstraktAt sammenligne indholdet af 10 phenylethanoidglycosider i forskellige behandlede Cistanches Herba fra forskellige værter ved hjælp af ultrahøjtydende væskekromatografi-tripel quadrupol massespektrometri (UPLC-QQQ-MS). Den tørrede Cistanches Herba blev knust, sigtet gennem en 60-maskesigte og ekstraheret ved ultralyd med 50 % methanol. Separation blev udført på en Agilent Eclipse Plus C18-søjle (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm) ved anvendelse af gradienteluering med mobil fase A (0,1 % vandig myresyreopløsning) og B (acetonitril). Detektion blev udført i dynamisk multipel reaktionsovervågningstilstand under anvendelse af en elektrospray-ioniseringskilde i UPLC-QQQ-MS.

Resultaterne viste, at der blev observeret betydelige variationer i sammensætningen af10 phenylethanoid glycosiderblandtCistanches Herba dyrket på forskellige værterog udsat for forskellige tørrebehandlinger. Frysetørrede Cistanches Herba viste det højeste indhold af disse forbindelser for begge værtsplanter, efterfulgt af tørring ved 80 grader. Selvom frysetørring bevarede det maksimale indhold af 10 phenylethanoidglycosider i Cistanches Herba, var tørring ved 80 grader mere omkostningseffektivt til produktion i stor skala.

Nøgleord:ultrahøj ydeevne væskekromatografi-tredobbelt kvadrupol massespektrometri; Cistanches Herba;Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) Nutt; phenylethanoidglycosider; tørremetode

Cistanche Raw material

KLIK HER FOR AT FÅ NATURLIG ORGANISK CISTANCHE TUBULOSA EKSTRAKT MED 30% ECHINACOSIDE OG 12% ACTEOSIDE

Cistanches Herbaer den tørre kødfulde stængel med skællende blade afCistanche deserticola YCMaellerCistanche tubulosa(Schenk) Wight. Den blev første gang set i "Shen Nong's Materia Medica" og er blandt topkarakteren. Det er en dyrebar kinesisk urtemedicin, der kan bruges både som medicin og mad. Fordi den for det meste vokser i tørre områder som Indre Mongoliet, Xinjiang, Gansu og Ningxia, er den også kendt som "ørken ginseng." Cistanche deserticola er sød, salt og varm og vender tilbage til nyrernes og tyktarmens meridianer; den har virkningerne afnærende nyre yang, genopfyldning af essens og blod, fugtning af tarmene og afføringsmiddel osv., og bruges ofte til behandling af sygdomme som f.eks.utilstrækkelig nyre yang, mangel på essens og blod, impotens og infertilitet, ogsvaghed i muskler og knogler [1 -4].Phenylethanolglycosiderer de vigtigste aktive ingredienser iCistanche deserticola, og de er også de mest rapporterede stoffer i forskningen om Cistanche deserticola [5]

Den traditionelle værtsplante afCistanche deserticolaer Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge i familien Chenopodiaceae. Haloxylon ammodendron vokser dog langsomt og har lav økonomisk værdi. Haloxylon ammodendron planter mindre end 3 år gamle er vanskelige at bruge til at dyrke Cistanche deserticola. For at afhjælpe modsætningen mellem udbud og efterspørgsel på Cistanche deserticola lægemiddelmarkedet, øge produktionen af Cistanche deserticola og opnå storstilet og standardiseret dyrkning af Cistanche deserticola. Videnskabelige forskere har med succes introduceret Atriplex canescens (Pursh) Nutt i Gansu, men hvorvidt denne træart kan bruges som en ny værtsplante for Cistanche deserticola, og om dens vækstevne er bedre end Haloxylon ammodendron, er blevet et varmt spørgsmål af udbredt bekymring [6] . Hvorvidt Atriplex truncatula helt kan erstatte Haloxylon ammodendron ved dyrkning af Cistanche deserticola, skal stadig understøttes af bredere, mere omfattende og dybdegående grundforskningsresultater. I mit land er der meget få rapporter om podning af Atriplex truncatula med Cistanche deserticola, selvom der er udført omfattende forskning på Atriplex truncatula fra aspekter af introduktion, kimplantedyrkning og komponentanalyse [7-10]. Tidligere fokuserede forskningen hovedsageligt på udviklingen og anvendelsesegenskaberne for Cistanche deserticola [11-14]. Imidlertid er forskningen i de aktive ingredienser i to værts-Cistanche deserticola ikke blevet rapporteret, især de to værts-Cistanche deserticola efter brug af forskellige tørreprocesser. Der er få undersøgelser af forskelle i tilbageholdelse af aktive ingredienser.

Ultrahøjtydende væskekromatografi-tripel quadrupol massespektrometri (UPLC-QQQ-MS) bruger UPLC som det kromatografiske separationssystem og triple quadrupole (QQQ) som analysator i serie. Det er en væskemassespektrometriteknologi, der har god separationseffekt på multi -komponent komplekse systemer og kan hurtigt og præcist kvantitativt analysere de komplekse komponenter i traditionel kinesisk medicin [15-16]. I dette eksperiment blev UPLC-QQQ-MS-teknologi brugt til kvantitativt at analysere 10 phenylethanolglycosider, inklusive echinaceaside, verbascoside, isorbascoside og anthocyanosid A, i de tørrede produkter fra to værtsarter af Cistanche deserticola efter forskellige tørrebehandlinger. Sammenligning af indholdet af disse komponenter i Cistanche deserticola under forskellige tørremetoder og forskellige værter giver et teoretisk grundlag for udvikling og præcis udnyttelse af phenylethanolglycosider i Cistanche deserticola.

Cistanche extract can reduce Inflammatory hyperplasia (2)

1 Materialer og instrumenter

Haloxylon ammodendron Cistanches og Cistanches tetrapteraner blev indsamlet fra Cistanche deserticola plantningsbasen i Jingtai County, Gansu-provinsen. Høsttidspunktet var marts 2023. Professor Guo Yehong fra Gansu Agricultural University identificerede de kødfulde stængler af Cistanche deserticola med skællende blade. Referencestoffer echinacea side (C35H46O20, CAS-nr.: 82854-37-3, renhed 98,30%), verbascosid (C29H36O15, CAS-nr.: 61276-17-3, renhed 99,35%), tuberose A (C37H48O21, CAS-nr.: 112516-05-9, renhed 99,74%), Isomurascosid (C29H36O15, CAS-nr.: 61303-13-7, renhed 97,77%), gardeniposid (C17H24O10, CAS-nr.: 24512-63-8, renhed 99,11 %), 2 '-acetyl verbascosid (C31H38O16, CAS-nummer: 94492-24-7, renhed 97,12%), salidrosid

(C14H20O7, CAS-nr.: 10338-51-9, renhed 98,43%), moderurt (C15H24O9, CAS-nr.: 52949-83-4, renhed 97,64%), Cistancheside A (C36H48O20, CAS-nr.: {{15} }, renhed 93,24%), angiosid B (C31H38O16, CAS-nummer: 112516-04-8, renhed 98,57%), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; methanol og acetonitril er kromatografisk rene, Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; myresyre, Tianjin Comeo Chemical Reagent Co, Ltd; vand var ultrarent vand.

DESKTOP-T2G6S78\6460 ultrahøj ydeevne væskekromatografi-tredobbelt kvadrupol tandem massespektrometer, Agilent Company i USA; AL104 elektronisk analytisk vægt, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., Schweiz; LyoQuest-85 frysetørrer, Telstar, Spanien.

2 Eksperimentelle metoder

2.1 Forberedelse af Cistanche deserticola prøver med forskellige tørreprocesser

Skær friske Cistanche deserticola-produkter fra forskellige værter i 3 mm tykke skiver og bearbejd dem som følger.

(1) Soltørring: Damp skiverne i 5 minutter og læg dem derefter fladt et solrigt sted til tørre. Kontroller ændringerne i fugtindholdet. Når fugtindholdet er mindre end 10%, læg dem væk til senere brug.

(2) Tørring: Damp skiverne i 5 minutter og sæt dem derefter i en ovn ved 40, 60 eller 80 grader for at tørre, indtil fugtindholdet er mindre end 10 %, og sæt dem væk til senere brug.

(3) Vakuumfrysetørring: Placer skiverne i et -80 graders køleskab i 2 timer før forafkøling, og anbring dem derefter i en vakuumfrysetørrer (vakuumgrad 650Pa, frysetemperatur -55 grad ) , tørre i 48 timer og lægges væk til senere brug.

Cistanche tubulosa (5)

2.2 Kromatografiske forhold

Agilent Eclipse Plus C18-søjle (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm); flowhastighed: 0,3 ml/min; injektionsvolumen 1 μL; mobil fase: fase A er 0,1 % vandig myresyreopløsning, og fase B er kromatografisk acetonitril. Elueringshastigheden for mobil fase A og B er 0~1,5 min, 10%~15% B; 1,5-2 tommer, 15%-20% B; 2-3 min, 20%-25% B; 3~4 min, 25%~30% B; 4~5 min, 30%~32% B; 5-6 min, 32%-34% B; 6-7 min, 34%-36% B; 7-8 min, 36 %-38 % B; 8-9 min, 38%-40% B; 9-9,5 min., 0%-45% B; 9,5-9,6 min., 45%-10% B; 9,6~10 min., 10 % B .

2.3 Optimerede massespektrometriske forhold

Ionkildetype: elektronisk sprayionkilde; scanningsmetode: negativ ion-scanning; ionkildetemperatur: 350 grader; forstøver: 35 psi; multipel reaktionsovervågningstilstand og dynamisk multipel reaktionstilstand til at overvåge og analysere hver forbindelse. De optimerede betingelser for massespektrometri af 10 stoffer er vist i tabel 1.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE

2.4 Fremstilling af referenceopløsning og standardkurveopløsning

Præcis veje standard pulvere afechinacoside,verbascoside, anorthosit A, isolebascosid, gardeniposid, 2'-acetylverbascosid, salidrosid, leonin, afstande A og anorthosite B., tilsæt 50% methanol for at lave en blandet referenceopløsning indeholdende 0,2 mg pr. 1 ml; fortyndes med 50 % methanol i en standardserie af blandede opløsninger på 40,96, 102,4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/L, tryk på "Betingelserne under 2.2" og 2.3" injiceres sekventielt fra lav koncentration til høj koncentration, og derefter bruges den kvantitative software (agilent massejæger) til at behandle detektionsresultaterne ved hjælp af standardkurven, der passerer oprindelsen. Udfør lineær regression med stofkoncentrationen X (ng/mL) som abscisse og ion responsværdi Y som ordinat, og beregn regressionsligningen og korrelationskoefficienten, som vist i tabel 2. Der er en god lineær sammenhæng med ionresponsværdien inden for området.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE